BIOLOGIA

EaD UFMS

Introduo Bioqumica

BIOQUMICA

Joaquim Corsino

Campo Grande, MS - 2009

LICENCIATURA

PRESIDENTE DA REPBLICA Luiz Incio Lula da Silva MINISTRO DA EDUCAO Fernando Haddad SECRETRIO DE EDUCAO A DISTNCIA Carlos Eduardo Bielschowsky

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL REITORA Clia Maria da Silva Oliveira VICE-REITOR Joo Ricardo Filgueiras Tognini COORDENADORA DE EDUCAO ABERTA E A DISTNCIA - UFMS COORDENADORA DA UNIVERSIDADE ABERTA DO BRASIL - UFMS Angela Maria Zanon COORDENADOR ADJUNTO DA UNIVERSIDADE ABERTA DO BRASIL - UFMS Cristiano Costa Argemon Vieira COORDENADORA DO CURSO DE BIOLOGIA (MODALIDADE A DISTNCIA) Yvelise Maria Possiede

Obra aprovada pelo Conselho Editorial da UFMS - Resoluo n 46/09 CONSELHO EDITORIAL UFMS Dercir Pedro de Oliveira (Presidente) Antnio Lino Rodrigues de S Ccero Antonio de Oliveira Tredezini lcia Esnarriaga de Arruda Giancarlo Lastoria Jackeline Maria Zani Pinto da Silva Oliveira Jferson Meneguin Ortega Jorge Eremites de Oliveira Jos Francisco Ferrari Jos Luiz Fornasieri Jussara Peixoto Ennes Lucia Regina Vianna Oliveira Maria Adlia Menegazzo Marize Terezinha L. P. Peres Mnica Carvalho Magalhes Kassar Silvana de Abreu Tito Carlos Machado de Oliveira CMARA EDITORIAL SRIE

Angela Maria Zanon Dario de Oliveira Lima Filho Damaris Pereira Santana Lima Jacira Helena do Valle Pereira Magda Cristina Junqueira Godinho Mongelli

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP) (Coordenadoria de Biblioteca Central UFMS, Campo Grande, MS, Brasil) Corsino, Joaquim Bioqumica / Joaquim Corsino. - Campo Grande, MS : Ed. UFMS, 2009. 213 p. : il. ; 30 cm.

C826b

ISBN: Material de apoio s atividades didticas do curso de bacharelado em Biologia/CEAD/UFMS.

1. Bioqumica. I. Ttulo.

CDD (22) 572

SUMRIO

Apresentao

Mdulo 1

UNIDADE 1

Introduo Bioqumica 1.1 A Lgica Molecular da Vida 1.2 Propriedades da gua 1.3 Compostos Orgnicos
UNIDADE 2

13 14 17

Qumica de Aminocido 2.1 Introduo 2.2 Denominao dos Principais Aminocios

UNIDADE 3

23 25

Protenas 3.1 3.2 3.3 3.4 Principais Funes Estruturas das Protenas Processos de Separao de Protenas A Seqncia de Aminocidos serve como Informao da Cadeia Polipeptidica 29 30 29 32

UNIDADE 4

Qumica de Carboidratos 4.1 Carboidratos, o "Sustento da Vida" para os Seres Vivos 4.2 Os Monossacardeos como Agentes Redutores 4.3 Formao dos Dissacardeos 4.4 Polissacardeos como Reserva de Combustvel Celular 4.5 Classificao 35 36 36 39 41

UNIDADE 5

Qumica de Lipdeos 5.1 Introduo 5.2 Principais Funes dos Lipideos 5.3 Os Lipdeos podem ser Utilizados Como 5.4 Lipdeos so Classificados de Acordo com sua Solubilidade 5.5 Classificao dos cidos Graxos 5.6 Principais Classes de Lipdeos 49 50 51 51 52 54

Mdulo 2

UNIDADE 6

Vitaminas 6.1 Introduo 6.2 Classificao das Vitaminas 6.3 Denominao das Vitaminas
UNIDADE 7

65 65 66

Introduo ao Metabolismo e Bioenergtica 7.1 Introduo ao Metabolismo 7.1.1 Vias Metablicas 7.1.2 Estruturas Biolgicas 7.2 Introduo a Bioenergtica 7.2.1 Fontes de Energia 7.2.3 Aspectos Biofsicos da Bioenergtica 7.2.4 Aplicaes da Bioenergtica
UNIDADE 8

77 78 81 82 82 83 84

Metabolismo de Carboidratos: Ciclo do cido Ctrico, Cadeia Transportadora de Eltrons e Fosforilao Oxidativa 8.1 Introduo ao Metabolismo de Carboidratos 8.2 Ciclo do cido Ctrico 8.3 Cadeia Transportadora de Eltrons e Fosforilao Oxidativa 89 93 97

UNIDADE 9

Metabolismo de Lipdeos 9.1 Digesto e Absoro 9.2 Mobilizao de Lipdeos 9.3 cidos Graxos Ativados e Transportados para o Interior das Mitocondrias 9.4 Gorduras da Dieta so Absorvidas no Intestino Delgado 9.5 Local da - oxidao (nos Peroxissomos) 9.6 Oxidao dos cidos Graxos Insaturados 9.7 Regulao dos cidos Graxos 9.8 Biossntese de Lipdios 9.9 Regulao da Biossntese dos cidos Graxos 9.10 Biossntese dos Esterides, a Partir dos Isoprenides
UNIDADE 10

107 109 110 110 112 114 115 115 117 118

Metabolismo dos Compostos Nitrogenados: Sntese e Degradao de Aminocidos 10.1 Sntese e Degradao de Aminocidos 125

Mdulo 3

UNIDADE 11

Sntese e Degradao de Protenas 11.1 Introduo 11.2 Degradao de Protenas

UNIDADE 12

141 160

Biossinalizao 12.1 Biossinalizao ou Sinalizao Celular 12.2 Transduo de Sinal

UNIDADE 13

163 163

Membranas Celulares e Transporte Atravs de Membranas 13.1 Introduo 173

13.2 Importncia 13.3 A Manuteno do Meio Intra e Extracelular Primordial 13.4 Estruturas das Membranas 13.5 Os Lipdeos das Membranas 13.6 As Protenas das Membranas 13.7 Transporte Atravs das Membranas
UNIDADE 14

173 174 174 175 176 177

Integrao e Regulao Metablica 14.1 Introduo 14.2 Regulao das Vias Metablicas 14 3 Perfis Metablicos dos rgos mais Importantes 14.5 Controle Hormonal
UNIDADE 15

193 193 196 197

Tpicos em Bioqumica Aplicados a Biologia Referncias Bibliogrficas 213

APRESENTAO

Caro(a) Acadmico(a),
Este material de estudo corresponde ao Curso de Licenciatura em Biologia, oferecido pela Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, na modalidade distncia. Os mdulos que o compem discutem os fundamentos de Bioqumica. O primeiro mdulo envolve as unidades de um a cinco; faz uma introduo sobre a Bioqumica e traz conceitos da qumica de aminocidos, protenas, carboidratos e lipdeos. As unidades de seis a dez do segundo mdulo, faz explanao sobre vitaminas, metabolismo e bioenergtica, metabolismo de carboidratos, de lipdeos e de compostos nitrogenados. No terceiro mdulo, as unidades de onze a quinze abordam: sntese e degradao de protenas; biossinalizao; membranas celulares e transportes atravs destas; integrao e regulao metablica; tpicos em bioqumica aplicados a Biologia. Espera-se que esse material venha facilitar a compreenso dos processos Bioqumicos e contribuir para a formao geral dos alunos do curso de Biologia.

Sobre o autor
JOAQUIM CORSINO Nasceu em 28 de fevereiro de 1963 na cidade de Santa Mercedes no Estado de So Paulo. Licenciou-se em Qumica na Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS) e doutorou-se em Qumica Orgnica na Universidade Estadual Julio de Mesquita Filho (UNESP-Araraquara). Atua como professor e pesquisador.

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Mdulo 1

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Unidade 1

INTRODUO BIOQUMICA

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Unidade 1 INTRODUO BIOQUMICA

1.1 A Lgica Molecular da Vida
A bioqumica o estudo da base molecular da vida. Os mecanismos qumicos de muitos processos centrais da vida so agora conhecidos. A descoberta da estrutura em dupla hlice do cido desoxirribonuclico (DNA), a elucidao do fluxo de informao do gene para protena, a determinao da estrutura tridimensional e dos mecanismos de ao de muitas molculas proticas, o esclarecimento das vias metablicas centrais so alguns dos mais destacados feitos da bioqumica. Muito tambm se aprendeu acerca dos mecanismos moleculares que colhem energia, detectam sinais e processam informaes. O rpido desenvolvimento de poderosos conceitos e tcnicas nos ltimos anos tornou possvel aos pesquisadores enfrentar alguns dos mais desafiantes e fundamentais problemas em biologia e medicina. Como um vulo fertilizado d origem clula to diferente quanto as de msculo, crebro e fgado? Como as clulas se encontram umas com as outras para formar um rgo complexo? Como controlado o crescimento das clulas? Quais so as bases do cncer? Qual o mecanismo molecular da memria? Qual a base molecular de distrbios tais como a doena de Alzheimer e a esquizofrenia? Em meados do sculo XIX, com o emprego de mtodos qumicos para estudar os seres vivos, constatou-se que eles so constitudos por vrios elementos presentes tambm no mundo mineral. Modernamente, a composio qumica da clula bastante conhecida e estudada em um ramo da Biologia Celular denominado de Bioqumica Celular ou Citoqumica. A composio qumica da clula a composio qumica da vida. Apesar da grande diversidade de formas de vida, todas apresentam em comum uma composio qumica bsica com certos elementos, como carbono (C), hidrognio (H), oxignio (O), nitrognio (N), fsforo (P) e enxofre (S), variando somente em quantidade, de um grupo celular para outro ou de um grupo de ser vivo para outro. Os compostos que constituem os seres vivos esto divididos em dois grupos: inorgnicos (gua, sais minerais) que tambm so encontrados livremente no mundo mineral e orgnicos (protenas, carboidratos, lipdeos e cidos nuclicos), que resultam da atividade metablica das clulas.

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1.2 Propriedades da gua

A polaridade da gua A gua tem uma estrutura molecular simples. Ela composta de um tomo de oxignio e dois tomos de hidrognio. Cada tomo de hidrognio liga-se covalentemente ao tomo de oxignio, compartilhando com ele um par de eltrons. O oxignio tambm tem um par de eltrons no compartilhados. Assim, h 4 pares de eltrons em torno do tomo de oxignio, dois deles envolvidos nas ligaes covalentes com o hidrognio e dois pares no-compartilhados no outro lado do tomo de oxignio.

Ambiente aquoso terrestre conduziu os seres vivos a utilizaremse das propriedades da gua. Essas propriedades so: Interaes fracas em sistemas aquosos, por meio de pontes hidrognio com solutos polares. Compostos no polares produzem mudanas desfavorveis na estrutura da gua, por exemplo, os lipdeos. Interaes fracas so importantes para funo e estrutura das macromolculas. Solutos afetam as propriedades coligativas de solues aquosas (osmose). A dissociao da gua pode ocorrer por meio de cidos ou bases fracas (pH). Estrutura organizada das molculas de gua no estado de gelo, cada molcula de gua forma 4 pontes de hidrognio com outra molcula de gua. A gua uma molcula polar, o que quer dizer que ela tem uma distribuio desigual da densidade de eltrons. A gua tem uma carga negativa parcial ( -) junto ao tomo de oxignio por causa dos pares de eltrons nocompartilhados, e tem cargas positivas parciais ( +) junto aos tomos de hidrognio. A atrao eletrosttica entre as cargas positivas parciais dos tomos de hidrognio e a carga negativa parcial do tomo de oxignio resulta na formao de uma ligao denominada ponte de hidrognio. A ponte de hidrognio ocorre entre os tomos de hidrognio quando ligado a elementos qumicos eletronegativos.

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Tais ligaes permitem a unio entre as molculas de gua. Sem as pontes de hidrognio, a temperatura de ebulio da gua poderia chegar a -80 C, existindo na superfcie terrestre somente na forma gasosa. Compostos similares ocorrem na natureza sob a forma de gases, com temperaturas de fuso e ebulio bem abaixo de 0C. A gua nica porque ocorre nos trs estados da matria slido, lquido e gasoso sob condies atmosfricas bastante restritas. Vrias propriedades peculiares da gua so devidas s ligaes de hidrognio. A flutuao do gelo pode ser citada como exemplo, uma vez que tais ligaes mantm as molculas de gua mais afastadas no slido do que no lquido, onde h uma ligao hidrognio a menos por molcula. Tambm devido s ligaes de hidrognio o elevado calor de vaporizao, a forte tenso superficial, o alto calor especfico e as propriedades solventes quase universais. Em funo da natureza qumica de sua molcula, as propriedades fsicas e qumicas da gua diferem muito das de qualquer outra substncia, o que a caracteriza como constituinte fundamental da matria viva e do meio que a condiciona.

Dissoluo Uma das propriedades mais importantes da gua lquida a sua capacidade de dissolver substncias polares ou inicas para formar solues aquosas. A interao entre as molculas do solvente (gua) e as do soluto so responsveis pelo processo de solubilizao: cada on negativo, situado no interior de uma soluo aquosa, atrai as extremida-

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des positivas das molculas de gua vizinhas, o mesmo acontecendo com os ons positivos relativamente s extremidades negativas. Isso faz com que os ons fiquem como que recobertos por uma camada de molculas de gua solidamente ligadas a eles, o que confere grande estabilidade soluo. Nisso consiste o importante fenmeno da hidratao dos ons. A hidratao dos ons que promove a quebra do retculo cristalino da substncia inica, ou seja, a dissoluo: as foras existentes entre os ctions e nions no slido (ligao inica) so substitudas por foras entre a gua e os ons. Muitos compostos no inicos tambm so solveis em gua, como por exemplo, o etanol. Esta molcula contm uma ligao polar O-H tal como a gua, que permite molcula fazer ligaes intermoleculares. guas doces So assim chamadas as guas terrestres que tm uma salinidade muito baixa. Sua principal fonte a chuva, que gua quase pura, pois contm apenas uma pequena quantidade de oxignio e de dixido de carbono (CO2) em soluo. gua salgada Em comparao com a gua doce, a gua dos mares e oceanos contm grandes quantidades de sais, embora tal salinidade no seja igual em todos eles. A maior salinidade registrada encontra-se no Mar Vermelho, com 39 gramas por litro, e a menor, a do Mar Bltico, com 30 gramas por litro. Dentre os elementos dissolvidos na gua do mar, h seis que perfazem mais de 99% da massa dos sais: cloro, sdio, enxofre (sob a forma de on sulfato), magnsio, clcio e potssio. O cloreto de sdio (NaCl) corresponde a 77% dos sais contidos na gua do mar, dando-lhe sabor salgado. Propriedades fsicas e qumicas A gua, em seu estado natural mais comum, um lquido transparente, assumindo a cor azul esverdeada em lugares profundos. Possui uma densidade mxima de 1 g/cm3 a 4C e seu calor especfico de 1 cal/C. No estado slido, sua densidade diminui at 0,92 g/cm3, mas so conhecidos gelos formados sob presso que so mais pesados que a gua lquida. Suas temperaturas de fuso e ebulio presso de uma atmosfera so de 0 e 100C, respectivamente, muito superiores s temperaturas de fuso e ebulio de outros compostos parecidos com a gua. Ela um composto estvel que no se decompe em seus elementos at 1.300. Reage com os metais alcalinos (Li, Na, K, Rb e Cs) formando uma base e desprendendo hidrognio: Na + H2O NaOH + H2.

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Reage com alguns xidos metlicos para formar hidrxidos, como por exemplo: CaO + H2O Ca(OH)2, e com os no-metlicos para formar cidos, SO 2 + H 2O H 2SO 3

Significados Biolgicos e propriedades da gua usadas pelos seres vivos Considerar: Ponto de fuso e ebulio elevados: so consequncia da formao de pontes de Hidrognio, necessitando portanto maior energia para romp-las. Calor especfico da gua (caloria): a quantidade de calor necessria para aumentar a temperatura de 1 g de gua de 15, para 16oC. Calor de vaporizao: Se 1 kg de gua absorver 1Kcal de calor, sua temperatura aumenta 1oC. Porm, a vaporizao de apenas 2g de gua, diminuem a temperatura de 998g de gua restantes, em 1 oC. Esse efeito de resfriamento minimiza a perda de gua por grandes variaes de temperatura (funciona como termostato): ex: SUOR. Calor de fuso: O calor depreendido pela gua no congelamento minimiza mudanas de temperatura no inverno. O calor absorvido quando o gelo derrete, diminui as mudanas de temperatura na primavera. Tenso superficial: capilaridade: uma camada na superfcie do lquido que faz com que sua superfcie se comporte como uma membrana elstica que no deixa o objeto afundar. Isso ocorre devido s molculas da gua, que interagem entre si, por ligaes de hidrognio. Densidade: O congelamento da gua ocorre com aumento de volume e diminuio da densidade. Logo, quando ocorre formao de gelo, sempre ser de cima para baixo.

1.3 Compostos Orgnicos

Estes incluem molculas orgnicas complexas como lipdeos, protenas, carboidratos, hormnios, vitaminas e muitas outras. Estas substncias ocorrem normalmente em baixas concentraes, sendo, alguns destes compostos, como os complexos de vitamina, vi-

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tais para promover o crescimento de bactria, plantas e animais. A maioria dos organismos marinhos desenvolveu mecanismos fisiolgicos de osmoregulao a fim de controlar os valores de presso osmtica dos fluidos corporais (concentraes de sais e gua). Um problema relacionado ao balano osmtico concerne aos organismos que habitam reas com mudanas abruptas na salinidade, ou ainda a peixes que migram entre guas doce e salgada. Tais organismos geralmente exibem muitas formas de regulao osmtica, que podem variar desde impermeabilidade complexos mecanismos de transporte ativo. Os organismos vivos so capazes de se reproduzir com incrvel preciso ao longo de milhares de geraes, atravs de um sistema de replicao auto-reparvel. Toda a informao necessria para a construo de um novo ser vivo est armazenada e codificada no DNA de todas as clulas que o compe. Esta informao cabe em 0,000000000006 g de DNA, para a clula do ser humano. Podem estes princpios simplistas e um tanto mecnicos se aplicar complexidade de homens e mulheres enquanto seres humanos, com sua extraordinria e nica capacidade para o pensamento, a linguagem, a criatividade, as emoes? Responder a estas e outras intrigantes perguntas esto entre os grandes desafios que a Bioqumica se prope e j comea a desvendar.

VOC SABIA!
Sais Minerais A gua e os alimentos que voc ingere trazem em sua composio certa porcentagem de elementos minerais que atuam principalmente como reguladores da atividade celular. Os sais minerais representam cerca de 1% do total da composio celular. Podem ser encontrados sob a forma insolvel, entrando na composio de estruturas esquelticas e de sustentao, como os ossos, nos vertebrados, ou os plipos de corais ou carapaas de algas diatomceas, entre outras. Quando os sais minerais se encontram dissolvidos em gua, formam os ons. sob essa forma que eles desempenham a sua atividade reguladora fundamental. A seguir, relacionaremos alguns dos principais ons com o seu respectivo papel biolgicos.

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(PO4-) on Fosfato encontrado nos lquidos intercelulares e no plasma sangneo. No esqueleto, o on fosfato, sob a forma de fosfato de clcio, confere rigidez aos ossos. So fundamentais nos processos de transferncia de energia na clula.

(Mg ++) on Magnsio o tomo central das molculas de clorofila. Essa substncia fundamental na captao da energia solar, indispensvel para a realizao do processo de fotossntese. (Cl-) on Cloreto - um dos componentes do suco gstrico de animais sob a forma de cido clordrico HCl. Participa dos processos de equilbrio hdrico celular.

(Na+) on Sdio o nico on que deve ser adicionado artificialmente alimentao sob a forma de cloreto de sdio (NaCl - sal de cozinha), pois no se encontra nos alimentos em concentraes compatveis com as necessidades celulares humanas. Est ligado conduo de estmulos nervosos nos neurnios.

(K+) on Potssio Tambm est relacionado conduo de estmulos nervosos e ao equilbrio hdrico das clulas. Ao contrrio do sdio, encontrase em maior concentrao no meio intracelular e em menor concentrao no meio extracelular.

(Fe++) on Ferro um dos constituintes das molculas da hemoglobina presente nas hemcias, responsvel pelo transporte de gases da respirao pelo sangue. Tambm atua na fotossntese.

(Ca++) on Clcio A maior parte do clcio encontrado no organismo encontra-se sob a forma insolvel (sais de clcio) como componente do esqueleto. Est presente sob a forma inica nos msculos, participando da contrao muscular, nos lquidos intercelulares, linfa e no plasma sangneo, em que auxilia no processo de coagulao. Os compostos orgnicos so constitudos por molculas menores denominadas de monmeros, os quais se ligam quimicamente, constituindo molculas bem maiores e mais complexas, denominadas de polmeros.

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Unidade 2

QUMICA DE AMINOCIDO

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Qumica de Aminocido

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Unidade 2 QUMICA DE AMINOCIDO

2.1 Introduo
Os 20 aas (aminocidos) comumente encontrados como produtos da hidrlise de protenas, contm grupos -carboxila, um grupo -amino e um grupo R distinto, substituinte no tomo de carbono a. O carbono dos aa (exceto da glicina) assimtrico e assim pode existir em pelo menos duas formas esterioisomricas. Apenas os L-estereoismeros, os quais esto relacionados com o Lgliceraldedo, so encontrados em protenas.

Os aas so classificados com base na polaridade de seus grupos R. Aminocidos monoamino-monocarboxlicos so cidos diprticos (+NH3CHRCOOH) em pH baixo, menor de 5. A medida que o pH aumenta at perto de 6, o ponto isoeltrico, o prton da carboxila perdido para formar a espcie polar ou Zwitterion (+NH3CHRCOO-), a qual eletricamente neutra. Aumentando o pH provoca a perda do segundo prton e libera a espcie NH2CHRCOO-. Aminocidos com grupos R ionizveis podem existir em espcies inicas adicionais, dependendo do pH.

Reao para caracterizao de aminocidos, estes formam derivados coloridos com reativo de ninidrina.

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Misturas complexas de aas podem ser separadas por eletroforese ou cromatografia de troca inica e identificadas e caracterizadas por tcnicas espectromtricas ou cristalografia de raio-x. Os aas podem ser unidos covalentemente para formar peptdeos, atravs de ligaes peptdicas; os peptdeos podem formar-se tambm pela hidrlise incompleta de protenas. O comportamento cido-base de um peptdeo funo do seu grupo amino-terminal, seu grupo carboxila-terminal e dos grupos R que ioniza. Peptdeos podem ser hidrolisados, por enzimas como a tripsina e quimotripsina, para produzir aas.

Resduo de peptdeo.

O resduo amino-terminal de um peptdeo pode reagir com 1fluoro 2,4-dinitrobenzeno produzindo um derivado caracterstico de cor amarelo. Alguns peptdeos ocorrem livres em clulas e tecidos e tm funes biolgicas especficas, incluem neste processo os hormnios, antibiticos e outros agentes com intensa atividade biolgica.

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Qumica de Aminocido

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2.2 Denominao dos Principais Aminocidos

GRUPOS R APOLARES GRUPO no quadro verde (caracterstica dos aminocidos).

GRUPOS R APOLARES

GRUPOS R CARREGADOS NEGATIVAMENTE

GRUPOS R CARREGADOS NEGATIVAMENTE

Classificao dos aminocidos, quanto ao grupo R, em polar, apolar, carregado negativamente e carregado positivamente.

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Qumica de Aminocido

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Unidade 3

PROTENAS

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Protenas

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Unidade 3 PROTENAS
3.1 Principais Funes
As protenas exercem funes cruciais em todos os processos biolgicos, algumas das principais funes so: 1 - catlise enzimtica. As protenas catalisam tanto as reaes complicadas, como as simples. Ex: replicao de todo um cromossomo ou hidratao do dixido de carbono, respectivamente. As enzimas aumentam a velocidade das reaes em at um milho de vezes. Todas as enzimas conhecidas so protenas. 2 - transporte e armazenamento. Molculas e iontes so transportados por protenas especficas. Ex: hemoglobina transporta o oxignio nas hemcias, a mioglobina transporta oxignio nos msculos e a transferrina transporta o ferro no plasma sangneo. 3 - movimento coordenado. As protenas so o principal componente do msculo. A contrao muscular normal, quando dois tipos de filamentos proticos, esto presentes. 4 - sustentao mecnica. a alta fora de tenso da pele e do osso devida presena de colgeno, uma protena fibrosa. 5 - proteo imunitria. Anticorpos so protenas altamente especificas que reconhecem e se combinam com substncias estranhas tais como vrus, bactrias e clulas de outro organismo. 6 - Gerao e transmisso de impulsos nervosos. A resposta das clulas nervosas a estmulos especficos afeta atravs de protenas receptoras. Ex: a rodopsina a protena sensvel luz nos bastonetes da retina; a acetil-colina, responsvel pela transmisso de impulsos nervosos nas sinapses, (nas junes entre as clulas nervosas). 7 - controle do crescimento e da diferenciao. A expresso seqencial controlada da informao gentica essencial para o crescimento e a diferenciao ordenada das clulas. Ex: o fator de crescimento de nervos guia a formao de redes neurais. As atividades celulares so coordenadas por hormnios; como a insulina e o hormnio estimulante da tireide, so protenas. Protenas servem em todas as clulas como sensores que controlam o fluxo de energia e de matria.

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As protenas so constitudas a partir de um repertrio de 20 aas, que podem ou no serem ligados por ligaes peptdicas para formar cadeias polipeptdicas, sendo estas cadeias ramificadas ou no. As seqncias particulares de aas so especificadas por genes, que podem vir a forma algumas das mais importantes estrutura molecular DNA. Se uma protena for submetida a modificao ou clivagem molecular, isto lhe conferira uma nova capacidade molecular de interao com o meio. Sendo que as cadeias peptdicas podem se dobrar em estruturas regulares, tais como a-hlice. Essas conformaes s so possveis devido algumas caractersticas das protenas em fazer determinados tipos de ligao como, por exemplo, ligao de pontes de hidrognio, ligao inica e ligao de VanderWaals. Outra caracterstica das protenas a solubilidade. Estas, quando so hidrossolveis, tm a capacidade de se envolvem em estruturas compactas com o interior apolar, tornando-se solvel em meio polar. E quando, as protenas, projetam para o interior de sua estrutura molecular, a parte polar, estas tm agora uma capacidade de interagir com o meio apolar. Desta forma as protenas podem ter vrias conformaes estruturais, a qual pode lhe conferir diferentes tipos de atividades, estas conformaes ou nveis bsicos de estruturas, so descritos em quatro nveis de estruturas:

3.2 Estruturas das Protenas

Estrutura primria Sendo formada por meio das ligaes lineares entre os aas. Estrutura secundria refere-se ao arranjo espacial de radicais de aas que estejam perto um do outro na seqncia linear (estrutura primria). Algumas dessas relaes estricas so de um tipo regular, dando origem a uma estrutura peridica. Ex: a -hlice e a fita so elementos de estrutura secundria; Estrutura terciria - refere-se a ligao entre os arranjos espacial de radicais de aas que esto prximos na seqncia linear. A protena que contm mais de uma cadeia polipeptdica em tal protena, esta cadeia extra denominada de subunidade. Estrutura quaternria refere-se ao arranjo espacial de subunidades e natureza de sues contatos. Ex: a hemoglobina constituda de duas cadeias a e duas b; as interfaces das subunidades nesse tetrmero participam na transmisso de informaes entre centros de ligao distantes para O2, CO2 e H+. A seqncia de aas de uma protena que determina sua estrutura tridimensional, sendo as ligaes especficas e as alteraes estruturais a essncia das aes das protenas.

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Protenas

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3.3 Processos de Separao de Protenas

A purificao de uma protena uma etapa essencial na elucidao de sua estrutura molecular e consequentemente na determinao de sua funo biolgica. As protenas podem ser separadas umas das outras ou de outras molculas com base em caractersticas tais como: tamanho; solubilidade; carga eltrica e afinidade das ligaes. A eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil sulfato de sdio (SDS) separa as cadeias polipeptdicas de protenas em condies desnaturantes, principalmente de acordo com a massa molecular. Eletroforese as protenas so separadas por focalizao isoeltrica em um gradiente de pH. Cromatografia de troca inica separa principalmente baseado na carga global. A alta afinidade de muitas protenas por grupamentos qumicos especficos explorada na cromatografia de afinidade, na qual as protenas se ligam a suporte de coluna que contem gros portadores de substratos, inibidores, ou outros grupamentos reconhecidos especificamente, ligados por covalncia. Ultra centrifugao - separao por densidade e tamanho das partculas; Dilise separao por tamanho de partculas. A hidrlise determina a composio de uma protena em aas (HCl 6 N a 110 oC). Cromatografia de troca inica processo em que consiste da troca de carga (+ ou ) entre o suporte, da coluna, e a soluo protica. Cristalografia de raio-x determina a estrutura molecular da protena atravs da obteno de um cristal da mesma, e est sendo complementada pela espectroscpica de RMN - (Ressonncia Magntica Nuclear). Espectroscpica de RMN especial por ser capaz de revelar a estrutura atmica de macromolculas e junto com a espectroscopia de massa pode-se determinar a estrutura molecular das protenas. A tecnologia de DNA recombinante revolucionou o seqenciamento de protenas. A determinao de seqncia de protenas um processo que consome muito tempo e trabalho. A elucidao da seqncia de grandes protenas, como as com mais de 1000 aas, geralmente requer esforos hericos. Felizmente, tornou-se disponvel uma abordagem experimental complementar baseada na tecnologia de DNA recombinante. Longos trechos de DNA podem ser clonados e

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seqenciados. A seqncia dos quatros tipos de bases no DNA adenina (a), timina (t), guanina (g) e citosina(c) revela diretamente a seqncia de aas da protena codificada pelo gene ou pela correspondente molcula de RNA mensageiro.

3.4 A Sequncia de Aminocidos serve como Informao da Cadeia Polipeptidica

1 - A seqncia de uma protena de interesse pode ser comparada com todas as outras seqncias conhecidas para verificar se existem semelhanas significativas. Ex. - a mioglobina e a hemoglobina pertencem famlia das globinas. A quimotripsina e a tripsina so membros da famlia das serina-protease. 2 - A comparao de seqncias da mesma protena em diferentes espcies gera uma riqueza de informaes acerca das vias evolutivas. Ex. - uma comparao das albuminas do soro de primatas indica que os seres humanos e os macacos africanos divergiram h apenas cinco milhes de anos, e no h 30 milhes de anos como antes se pensava. 3 - As seqncias de aas podem ser investigadas quanto presena de repeties internas. Ex. - a calmodulina, um sensor de clcio onipresente em eucariontes, contm quatro mdulos ligantes de clcio semelhantes que surgiram da duplicao de genes. 4 - As seqncias de aas contm sinais que determinam o destino das protenas e controlam seu processamento. 5 - os dados de seqncia fornecem uma base para o preparo de anticorpos especficos para uma protena de interesse. 6 - As seqncias de aas so tambm valiosas para as feituras de sondas de dna que sejam especficas para os genes que codificam as protenas correspondentes.

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Protenas

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Unidade 4

QUMICA DE CARBOIDRATOS

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Qumica de Carboidratos

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Unidade 4 QUMICA DE CARBOIDRATOS

4.1 Carboidratos, o Sustento da Vida para os Seres Vivos
Na forma de acar ou amido, representa a maior parte de ingesto calrica dos seres vivos. Os carboidratos podem estar junto com as protenas (glicoprotenas e proteoglicanas) importantes na superfcie das clulas e dos sistemas de suporte extracelulares nos animais. Tambm so chamados de Hidratos de Carbono ou Glicdios. So compostos de funo mista polilcool-aldedo ou polilcoolcetona, assim como todos os compostos que, por hidrlise, produzem os referidos compostos de funo mista. Suas molculas so constitudas, geralmente, por tomos de carbono, hidrognio e oxignio. As plantas verdes produzem acares na fotossntese, a partir de CO2 e gua. Os acares sofrem combusto, reagindo com o oxignio e formando CO2 e gua, na respirao celular. A combusto dos acares libera energia. Um importante exemplo de acar a glicose, encontrada no interior das nossas clulas e no nosso sangue. Sua funo bsica fornecer energia para as atividades vitais. Uma molcula de glicose tem 6 tomos de carbono, 12 tomos de hidrognio e 6 tomos de oxignio, o que pode ser expresso pela frmula C6H12O6. Os monossacardeos so acares simples, cuja hidrlise no resulta em molculas de acares menores. A glicose um exemplo de monossacardeo. Eles tm, geralmente, frmula geral CnH2nOn, onde o valor de n varia entre 3 e 7. O nome dos monossacardeos dado pelo valor de n. n = 3 (C3H6O3) trioses n = 4 (C4H8O4) tetroses n = 5 (C5H10O5) pentoses n = 6 (C6H12O6) hexoses n = 7 (C7H14O7) heptoses Os mais abundantes so as hexoses, como a glicose, cujo principal papel energtico. Degradadas na respirao celular, liberam energia para uso imediato. Tambm so as unidades de formao

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dos acares mais complexos. Outras hexoses importantes so frutose e galactose. Ambas tm frmula molecular C6H12O6.

4.2 Os Monossacardeos como Agentes Redutores

Monossacardeos reduzem agentes oxidantes, como o ferricianeto, o perxido de hidrognio e o on cprico (Cu+2). Lembrando-se que os agentes redutores so doadores de eltrons e os oxidantes so receptores de eltrons. A glicose e outros acares so capazes de reduzir agentes oxidantes e so chamados de acares redutores. No diagnstico dos diabetes mellitus, pode-se medir a concentrao de glicose no sangue e na urina. As pentoses so componentes das molculas dos cidos nuclicos (DNA e RNA). As trioses e as heptoses so intermedirias nos processos da respirao e da fotossntese.

4.3 Formao dos Dissacardeos

Os oligossacardeos so formados pela unio de 2 at 10 unidades de monossacardeos. Os mais abundantes, na natureza, so os dissacardeos, formados pela unio de dois monossacardeos. Por exemplo: C6H12O6 (glicose) + C6H12O6 (frutose) ===> C12H22O11 (sacarose) + H2O (gua). A sacarose, o acar de cana ou de beterraba, constituda por uma molcula de glicose ligada a uma frutose. A maltose um dissacardeo, pois formada por duas molculas de glicose. A lactose encontrada somente no leite. Resulta da unio de uma glicose com uma galactose. Dissacardeos so dois monossacardeos unidos entre si covalentemente essa ligao que une os dois monossacardeos chamada de ligao glicossdica, a qual formada pela reao entre um grupo hidroxila de um dos acares e o carbono anomrico

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do outro acar. As ligaes glicosdicas podem ser hidrolisadas por cidos e por fervura com cido diludo. Os dissacardeos mais comuns so: maltose, lactose e sacarose: Maltose constituda de 2 unidades de glicose sendo que a ligao glicosdica (1 4). Origina-se dos polissacardeos degradados por meio da enzima amilase. A maltose hidrolisada no intestino pela enzima maltase. Lactose presente apenas no leite, quando hidrolisado libera Dgalactose e Dglicose. tambm um dissacardeo redutor. A lactose hidrolisada pela lactase secretada pelas clulas da mucosa intestinal. Alguns grupos humanos (orientais, rabes, judeus, a maioria dos africanos, indianos e mediterrneos), tm pouqussima lactase intestinal, e muitos mostram intolerncia lactose. uma diferena de natureza gentica. Como a lactose no pode ser absorvida pelo intestino para a corrente sangunea sem ser hidrolisada, permanece no trato intestinal das pessoas que tem intolerncia lactose. Assim pode causar diarria aquosa, fluxo intestinal anormal e clica abdominal.

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SACAROSE Acar da cana, quando hidrolisada, forma glicose e frutose. Sintetizada por muitas plantas, no contm tomo de carbono anomrico livre, pois esto ligados entre si e desta forma um dissacardeo no redutor. Os animais no podem absorver a sacarose assim ela hidrolisada pela enzima sacarase ou invertase, existente nas clulas que recobrem o intestino delgado. Entre os trs dissacardeos, a sacarose apresenta o sabor mais doce. Porem, hoje existe os adoantes artificiais sem nenhum valor calrico alimentar, e muito usado por pacientes diabticos ou obesos. Exemplo - a sacarina 400 vezes mais doce que a sacarose.
FORMULA MOLECULAR DE ADOANTES ARTIFICIAIS

POLISSACARDEO CONTM MUITAS UNIDADES DE MONOSSACARDEOS A maior parte dos carboidratos encontrados na natureza ocorre na forma de polissacardeo de alto peso molecular. Alguns polissacardeos so formas biolgicas de reserva de monossacardeos, outros so elementos estruturais de paredes celulares. Pela hidrlise, por cido ou enzimas, so liberados na forma de monossacardeos. Os polissacardeos se dividem em: Homopolissacardeos contm apenas um tipo de unidade monomrica. Ex: amido formado unicamente por molculas de glicose. Heteropolissacardeos contm dois ou mais tipos de unidades monomricas. Ex: cido hianurnico encontrado no tecido conjuntivo formado por resduos alternados de dois acares diferentes.

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4.4 Polissacardeos como Reserva de Combustvel Celular

Os polissacardeos mais importantes de reserva so: o amido, encontrado nas clulas vegetais, e o glicognio, encontrado nas clulas animais. As molculas de amido e de glicognio so altamente hidratadas, por possurem vrios grupos hidroxilas. Amido encontrado em razes, como batatas, e em algumas sementes, como o milho. Este contm dois tipos de polmeros da glicose: A amilose e amilopectina.

- amilose Tm cadeias linear longas no ramificadas, ligadas por unidades de molculas de D-glicose, sendo este tipo de ligaes (1 4). - amilopectina - As unidades de glicose esto ligadas pelo tipo de ligao (1 4), mas existem as ramificaes onde temos ligaes, entre molculas de glicose, do tipo (1 6). O glicognio o principal polissacardeo de reserva nas clulas animais, e semelhante amilopectina. um polissacardeo ramificado constitudo de resduo de D-glicose unidos por ligaes (1 4), e nas ramificaes as ligaes so do tipo (1 6). Sendo encontrado principalmente no fgado, mas tambm nos msculos esquelticos e junto ao glicognio encontramse as enzimas responsveis pela sntese e degradao do glicognio. As ligaes (1 4) so hidrolisadas pelas enzimas da saliva e do suco pancretico a-amilase. As ligaes (1 6) das ramificaes so hidrolisadas pelas enzimas de desramificao, a (1 6) glicosidase. A ao em conjunto destas duas enzimas [a-amilase e (1 6) glicosidase], faz a degradao completa do glicognio e da amilopectina glicose. O glicognio nos animais pode ser degradado pela enzima fosforilase do glicognio, fornecendo glicose 1-fosfato. Celulose substncia fibrosa resistente e insolvel na gua, encontrada na parede celular das plantas, principalmente de hastes, caules, troncos e em todas as partes lenhosas dos tecidos vegetais. O algodo quase celulose pura, sendo a celulose formada por unidades monomricas de glicose, e o tipo de ligao entre esses monmeros (molculas de glicose) para formar a celulose (1 4). A maioria dos vertebrados no tem a enzima (celulase) que hidrolisa a molcula de celulose. Os fungos e bactrias que se alimentam de madeiras, produzem a enzima celulase, assim so capaz de hidrolisar a celulose e usa-la na forma de glicose como alimento. Os nicos vertebrados capazes de utilizar a celulose como alimento, so os bois e outros ruminantes (ovelhas, cabras, camelos e cavalos), todos utilizam a

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celulase para hidrolisar essa molcula. O boi tem quatro estmagos - sendo que os dois primeiros constituem o rumem e abrigam microorganismos que secretam celulase, enzimas que degradam a celulose em D-glicose; estas so ento fermentadas pelos microorganismos em cidos graxos, dixido de carbono e gs metano, sendo que os cidos graxos so absorvidos na corrente sangnea. Nos outros dois estmagos os microorganismos so digeridos por enzimas secretadas pelas clulas que recobrem a parede interna do estmago. Este processo libera aminocidos, acares e outros produtos de hidrlise, que so absorvidos e utilizados na nutrio do boi. Este um relacionamento simbitico, entre o boi e o microorganismo. Os seres vivos podem formar cadeias com dezenas de molculas de glicose. Esses grandes acares so os polissacardeos (amido ), acares mais abundantes na natureza. Ao contrrio dos monossacardeos e dos dissacardeos, os polissacardeos so, geralmente, insolveis em gua.

Parte de uma molcula de Amido

De acordo com suas funes biolgicas, so classificadas em: a) Polissacardeos energticos de reserva: so formas de armazenamento de glicose. Nos vegetais superiores, o amido a principal forma de armazenamento de acar: nas sementes, como no arroz; nas razes, como na mandioca; ou no caule, na batata. Nos animais superiores, o acar armazenado como glicognio, nas clulas do fgado e nas clulas musculares. b) Polissacardeos estruturais: alguns polissacardeos participam da manuteno da estrutura dos seres vivos, como um esqueleto. Os mais importantes so a celulose e a quitina. A quitina um polissacardeo rgido e resistente, que contm tomos de nitrognio na molcula. Constitui o esqueleto externo dos insetos, dos crustceos e das aranhas. A celulose forma a parede celular das clulas vegetais. Constitui 50% de toda a matria orgnica da biosfera. Em muitas partes das plantas, com o passar do tempo, a parede celular ganha outros polissacardeos mais rgidos, como a lignina, que podem torn-la impermevel.

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4.5 Classificao
Os carboidratos mais simples so denominados monossacardeos, possuindo pelo menos um tomo de carbono assimtrico (tem quatro ligantes diferentes) que caracteriza a regio denominada centro quiral, pois fornece ismeros pticos. Possuem de 3 a 8 carbonos, sendo denominado, respectivamente, trioses, tetroses, pentoses, hexoses, heptoses e octoses.

Os monossacardeos de ocorrncia natural mais comum, como a ribose (5C), glicose (6C), frutose (6C) e manose (6C), existem como hemiacetais de cadeia cclica (e no na forma linear), quer na formas de furanose (um anel de 5 elementos, menos estvel) ou de piranose (um anel de 6 elementos, mais estvel).

Esta forma cclica (hemiacetal) resulta da reao intramolecular entre o grupamento funcional (C1 nas aldoses e C2 nas cetoses) e um dos carbonos hidroxilados do restante da molcula (C4 na

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furanose e C5 na piranose), ocorrendo nas formas isomricas alfa e beta, conforme a posio da hidroxila do C1.

Os carboidratos formam compostos pela unio de duas ou mais molculas de monossacardeos, sendo classificados como DISSACARDEOS, OLIGOSSACARDEOS e POLISSACARDEOS. Nesses compostos, quando o carbono C1 apresenta a hidroxila livre (ou seja, no est formando ligao entre os monossacardeos) o carboidrato apresenta poder redutor quando aquecido. Esta caracterstica utilizada, freqentemente, em reaes de identificao.

Saiba Mais
Os Carboidratos engordam? Muitos, temendo engordar, limitam o consumo de carboidratos como feijo, arroz, batata, lentilhas, po, doces e outros. Em primeiro lugar preciso distingui-los. H maus e os bons. O nosso corpo converte todos os carboidratos em glicose. A glicose o combustvel das nossas clulas para produzir o calor e a energia com que nos movemos! indispensvel classific-los em funo do acar que contm e a forma como este acar assimilado e convertido em glicose.

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A concentrao de glicose na corrente sangunea mantida a nveis sensivelmente constantes de cerca de 4-5 mM. A glicose entra nas clulas por difuso facilitada. Este processo no permite a acumulao na clula de concentraes de glicose superiores s existentes no sangue, pelo qual a clula deve ter um processo para acumular glicose no seu interior. Isto feito por modificao qumica da glicose pela enzima hexoquinase:

A membrana celular impermevel glicose-6-fosfato, que pode por isso se acumulada na clula. A glicose-6-fosfato ser utilizada na sntese do glicognio (uma forma de armazenamento de glicose), para produzir outros compostos de carbono na via das pentoses fosfato, ou degradada para produzir energia (gliclise). Os carboidratos simples so encontrados em: farinha branca, arroz branco e os alimentos feitos com estes, como o po branco, massas etc. Esse grupo tem ndice glicmico alto, por isso h liberao muito rpida da glicose para o sangue. Os carboidratos complexos so os que contm fibras, como os cereais integrais, feijes, milho, arroz integral, po integral, lentilhas, verduras, frutas. Esse grupo tem ndice glicmico baixo, portanto de liberao lenta da glicose. Formam o grupo dos alimentos saudveis. Os carboidratos simples so digeridos facilmente e a sua glicose segue rpido para o sangue. Isso rompe o delicado equilbrio do acar x oxignio no sangue, exige abundante produo de insulina para restabelecer o equilbrio. E a freqente produo de insulina (insulinismo), gera gordura no corpo, sem contar as avarias nas glndulas com esse desequilbrio cclico. Com os carboidratos complexos acontece o contrrio. As fibras contidas nestes alimentos retardam a liberao da glicose. Por isso, ao ingeri-los, reduzimos a elevao dos nveis de glicose no sangue e isso significa estabilizar os nveis de acar no sangue, prevenir obesidade, diabetes tipo 2, cncer no clon, diverticulite, priso de ventre e hemorridas. Reduz tambm o colesterol mau e, ao

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mesmo tempo, faz baixar a presso arterial daqueles que sofrem de presso elevada! So estas mesmas fibras que removem metais txicos do corpo. E essas toxinas so resultado da m digesto das protenas animais, carboidratos e gorduras ingeridos juntos! So toxinas geradas por alimentos consumidos s pressas, sem serem triturados por mastigao adequada, convertendo-os em gordura! Os adoantes artificiais emagrecem? Somos bombardeados com anncios dirios induzindo-nos a substituir o acar por adoantes artificiais, no cafezinho, no ch, no caf da manh. A promessa que, desse modo, evitamos engordar por estarmos ingerindo menos calorias. Optamos ento pelos refrigerantes adoados com edulcorantes qumicos, os ditos light, antes chamados de diet... Acreditamos, inclusive, que estes sejam mais saudveis. Mas voc j parou para pensar at onde isso pode ser verdadeiro e se, de fato, est beneficiando o seu corpo? Os adoantes artificiais visam atender s pessoas diabticas, que no podem ingerir acar devido a dificuldade de process-lo. Para elas, criaram-se os alimentos e bebidas diet. Primeiro veio a Sacarina, depois os Ciclamatos, os dois derivados do petrleo. Ambos foram acusados de aumentar a incidncia de cncer na bexiga. Ciclamatos so proibidos em alguns pases, entre eles o Canad.

Depois surgiu o Aspartame, um produto sinttico com as mesmas calorias do acar, em peso, porm 200 vezes mais doce que a sacarose do acar. o resultado da combinao qumica do cido asprtico e a fenilalanina, juntamente com o metanol, o lcool metlico, lcool da madeira, altamente txico.

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Estes so os adoantes artificiais de maior uso, mas h mais. A ao de todos eles parte do princpio de que o organismo no os reconhece como nutrientes, por isso no os metaboliza. So, no entanto, substncias que precisam ser expelidas pelo corpo e, em conseqncia, aumentam a tarefa do fgado e dos rins. Mesmo sendo prprio somente para diabticos, milhares de pessoas sadias usam o adoante artificial no seu dia-a-dia, bebem refrigerantes diet ou light com o propsito de se livrar de calorias, pensando em no engordar. Este foi o grande argumento mercadolgico usado. Mas a verdade que h maneiras mais fceis de livrar o corpo de calorias, sem ter de recorrer a adoantes artificiais e sem precisar sujeitar-se aos riscos que eles oferecem. Ainda que se admita no terem efeitos txicos, perturbam o metabolismo. Isso acontece porque o corpo sempre detecta estes adoantes e se prepara para digerir carboidratos, mas falha. A resposta do organismo a isso um maior coeficiente de absoro da glicose dos carboidratos ingeridos durante o dia, portanto, exige mais insulina a ser liberada para o sangue. E veja que muita insulina no corpo, o hiperinsulinismo, faz parte do processo de acumular gordura! O fato que os adoantes artificiais no so em absoluto saudveis. Pelo contrrio, oferecem risco sade, so produtos qumicos que o corpo detecta como toxinas, os rejeita. Tidos como inofensivos aos adultos, no entanto, gestante jamais pode tomar aspartame, porque os seus efeitos sobre o feto so incertos! Light x Diet

Freqentemente, h uma confuso nesses dois termos quando nos referimos a alimentos com modificaes feitas pelo homem. O produto denominado Light, geralmente industrializado, aquele em que os constituintes como por exemplo: gorduras e acares, ricos em calorias; so reduzidos a nveis mais baixos que o usual. J o produto Diet isento de uma determinada substncia, geralmente utilizado por pessoas com patologias especficas, como por exemplo, diabticos.

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Unidade 5

QUMICA DE LIPDEOS

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Qumica de Lipdeos

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Unidade 5 QUMICA DE LIPDEOS

5.1 Introduo
Os lipdeos so definidos por um conjunto de substncias qumicas que, ao contrrio das outras classes de compostos orgnicos, no so caracterizadas por algum grupo funcional comum, e sim pela sua alta solubilidade em solventes orgnicos e baixa solubilidade em gua. Fazem parte de um grupo conhecido como biomolculas. Os lipdeos se encontram distribudos em todos os tecidos, principalmente nas membranas celulares e nas clulas de gordura. Algumas substncias classificadas entre os lipdeos possuem intensa atividade biolgica, entre elas incluem algumas como as vitaminas e hormnios. Embora os lipdeos sejam uma classe distinta de biomolculas, veremos que eles geralmente ocorrem combinados, seja covalentemente ou atravs de ligaes fracas, como membros de outras classes de biomolculas, para produzir molculas hdricas tais como glicolipdeos, que contm tanto carboidratos quanto grupos lipdicos, e lipoprotenas, que contm tanto lipdeos como protenas. Em tais biomolculas, as distintas propriedades qumicas e fsicas de seus componentes esto combinadas para preencher funes biolgicas especializadas. Existem diversos tipos de molculas diferentes que pertencem classe dos lipdeos. Embora no apresentem nenhuma caracterstica estrutural comum todas elas possuem muito mais ligaes carbono-hidrognio do que as outras biomolculas, e a grande maioria possui poucos heterotomos. Isto faz com que estas molculas sejam pobres em dipolos localizados (carbono e hidrognio possuem eletronegatividade semelhante). Uma das leis clssicas da qumica diz que o semelhante dissolve o semelhante: da a razo para estas molculas serem fracamente solveis em gua ou etanol (solventes polares) e altamente solveis em solventes orgnicos (geralmente apolares - hexano). Ao contrrio das demais biomolculas, os lipdeos no so polmeros, isto , no so repeties de uma unidade bsica. Embora possam apresentar uma estrutura qumica relativamente simples, as funes dos lipdeos so complexas e diversas, atuando em muitas etapas cruciais do metabolismo e na definio das estruturas celulares.

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Os qumicos podem separar os lipdeos de uma amostra biolgica atravs de uma tcnica conhecida como extrao; um solvente orgnico adicionado a uma soluo aquosa da amostra e, com um auxlio de um funil de separao, obtm-se a fase orgnica rica em lipdeos. Com a evaporao do solvente orgnico obtm-se o lipdeo. E desta maneira que pode se obter o leo vegetal. Alguns lipdeos tm a habilidade de formar filmes sobre a superfcie da gua, ou mesmo de formar agregados organizados na soluo; estes possuem uma regio, na molcula, polar ou inica, que facilmente hidratada. Este comportamento caracterstico dos lipdeos que compe a membrana celular. Os lipossomos so microenvelopes capazes de envolverem molculas orgnicas e entregarem-nas ao endereo biolgico correto.

5.2 Principais Funes dos Lipdeos

Desempenham vrias funes biolgicas importantes no organismo, entre elas: - Reserva de energia (1 g de gordura = 9 kcal) em animais e sementes oleaginosas, sendo a principal forma de armazenamento os triacilgliceris (triglicerdeos); - Armazenamento e transporte de combustvel metablico; - Componente estrutural das membranas biolgicas; - So molculas que podem funcionar como combustvel alternativo glicose, pois so os compostos bioqumicos mais calricos em gerao de energia metablica atravs da oxidao de cidos graxos; - Oferecem isolamento trmico, eltrico e mecnico para proteo de clulas e rgos e para todo o organismo, o qual ajuda a dar a forma esttica caracterstica; - Do origem a molculas mensageiras, como hormnios, prostaglandinas, etc. - As gorduras (triacilgliceris), devido sua funo de substncias de reserva, so acumuladas principalmente no tecido adiposo, para ocasies em que h alimentao insuficiente. A reserva sob a forma de gordura muito favorvel clula por dois motivos: em primeiro lugar, as gorduras so insolveis na gua e, portanto no contribuem para a presso osmtica dentro da clula, e em segundo lugar, as gorduras so ricas em energia; na sua oxidao total so liberados 38,13 kJ/g de gordura.

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Qumica de Lipdeos

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5.3 Os Lipdeos podem ser Utilizados como:

- Na alimentao, como leos de cozinha, margarina, manteiga, maionese; - Produtos manufaturados: sabes, resinas, cosmticos, lubrificantes. - Combustveis alternativos, como o caso do leo vegetal transesterificado que corresponde a uma mistura de cidos graxos vegetais tratados com etanol e cido sulfrico que substitui o leo diesel, no sendo preciso nenhuma modificao do motor, alm de ser muito menos poluente e isento de enxofre.

5.4 Lipdeos so Classificados de Acordo com sua Solubilidade

CIDOS GRAXOS

A hidrlise cida dos triacilglicerdios leva aos correspondentes cidos carboxlicos - conhecidos como cidos graxos. Este o grupo mais abundante de lipdeos nos seres vivos, e so compostos derivados dos cidos carboxlicos. Este grupo geralmente chamado de lipdeos saponificveis, porque a reao destes com uma soluo quente de hidrxido de sdio produzem o correspondente sal do cido carboxlico, isto , o denominado sabo sdico. Os cidos graxos possuem um pKa da ordem de 4,8. Isto significa que, em uma soluo onde o pH 4,8, metade da concentrao o cido est ionizada; a um pH maior (7, por exemplo) praticamente todo o cido encontra-se ionizado, formando um sal com o seu contra-on; num pH menor (3, por exemplo) todo o cido encontra-se protonado. A natureza do ction determina as propriedades do sal carboxlico formado. Em geral, sais com ctions divalentes (Ca2+ ou Mg2+) no so bem solveis em gua, ao contrrio do formado com metais

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alcalinos (Na+ e K+), que so bastante solveis em gua e em leo so conhecidos como sabo. por este motivo que, em regies onde a gua rica em metais alcalinos terrosos, necessrio se utilizar formulaes especiais de sabo na hora de lavar a roupa. Na gua, em altas concentraes destes sais, ocorre a formao de micelas - glbulos microscpicos formados pela agregao destas molculas. Nas micelas, as regies polares das molculas de sabo encontram-se em contato com as molculas de gua, enquanto que as regies hidrofbicas ficam no interior do glbulo, em uma pseudofase orgnica, sem contato com a gua.

5.5 Classificao dos cidos Graxos

Os cidos graxos podem ser classificados como saturados ou insaturados , dependendo da ausncia ou presena de ligaes duplas entre carbono-carbono. Os insaturados (que contm tais ligaes) so facilmente convertidos em saturados atravs da hidrogenao cataltica (este processo chamado de reduo). A presena de insaturao nas cadeias de cido carboxlico dificulta a interao intermolecular, fazendo com que, em geral, estes se apre-

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sentem, temperatura ambiente, no estado lquido; j os saturados, com uma maior facilidade de empacotamento intermolecular, so slidos. A margarina, por exemplo, obtida atravs da hidrogenao de um lquido - o leo de soja ou de milho, que rico em cidos graxos insaturados. Conceitos Gerais: cidos orgnicos, a maioria de cadeia alquil longa, com mais de 12 carbonos Esta cadeia alquil pode ser saturada ou insaturada; cidos graxos saturados: -No possuem duplas ligaes -So geralmente slidos temperatura ambiente -Gorduras de origem animal so geralmente ricas em cidos graxos saturados cidos graxos insaturados: Possuem uma ou mais duplas ligaes so mono ou poliinsaturados. So geralmente lquidos temperatura ambiente. A dupla ligao, quando ocorre em um AG natural, sempre do tipo cis. Os leos de origem vegetal so ricos em AG insaturados. Quando existem mais de uma dupla ligao, estas so sempre separadas por pelo menos 3 carbonos, nunca so adjacentes nem conjugadas. Nomenclatura de cidos Graxos: O nome sistemtico do cido graxo vem do hidrocarboneto correspondente; Existe um nome descritivo para a maioria dos cidos graxos; Os cidos graxos tem seus carbonos numerados de 2 formas: A partir da carboxila Numerao Delta - D . A partir do grupamento metil terminal Numerao mega - j Os carbonos 2, 3 e 4,contados a partir da carboxila, so denominados, respectivamente, a , b e g . As duplas ligaes, quando presentes, podem ser descritas em nmero e posio em ambos os sistemas; por exemplo: O cido linoleico possui 18 tomos de carbono e 2 duplas ligaes, entre os carbonos 9 e 10, e entre os carbonos 12 e 13; sua estrutura pode ser descrita como:

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18;2 Delta 9,12 ou 18:2 (9,12). Pertencente famlia mega-6. Outros exemplos de cidos graxos:

cidos Graxos Essenciais: O homem capaz de sintetizar muitos tipos de cidos graxos, incluindo os saturados e os monoinsaturados. Os cidos graxos poliinsaturados, no entanto, principalmente os das classes j-6 - famlia do cido linoleico - e j-3 - famlia do cido linolnico - devem ser obtidos da dieta, pois so sintetizados apenas por vegetais. Estes cidos graxos participam como precursores de biomolculas importantes como as PROSTAGLANDINAS, derivadas do cido linoleico e com inmeras funes sobre contratibilidade de msculo liso e modulao de recepo de sinal hormonal.

5.6 Principais Classes de Lipdeos

TRIGLICERDEOS

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Conhecidos como gorduras neutras, esta grande classe de lipdeos no contm grupos carregados. So steres do glicerol - 1,2,3propanotriol. Estes steres possuem longas cadeias carbnicas atachadas ao glicerol, e a hidrlise cida promove a formao dos cidos graxos correspondentes e o lcool (glicerol). Nos animais, os TAGs so lipdeos que servem, principalmente, para a estocagem de energia; as clulas lipidinosas so ricas em TAGs. uma das mais eficientes formas de estocagem de energia, principalmente com TAGs saturados; cada ligao C-H um stio potencial para a reao de oxidao, um processo que libera muita energia. Os TAGs provindo de animais terrestres contm uma maior quantidade de cadeias saturadas se comparados aos TAGs de animais aquticos. Embora menos eficientes no armazenamento de energia, as TAGs insaturadas oferecem uma vantagem para os animais aquticos, principalmente para os que vivem em gua fria: elas tm uma menor temperatura de fuso, permanecendo no estado lquido mesmo em baixas temperaturas. Se fossem saturadas, ficariam no estado slido e teriam maior dificuldade de mobilidade no organismo do animal. Os TAGs podem ser chamados de gorduras ou leos, dependendo do estado fsico na temperatura ambiente: se forem slidos, so gorduras, e lquidos so leos. No organismo, tanto os leos como as gorduras podem ser hidrolisados pelo auxlio de enzimas especficas, as lipases (tal como a fosfolipase A ou a lipase pancretica), que permitem a digesto destas substncias.

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Os triacilgliceris so lipdeos formados pela ligao de 3 molculas de cidos graxos com o glicerol, um trilcool de 3 carbonos, atravs de ligaes do tipo ster. So tambm chamados de Gorduras Neutras, ou triglicerdeos. Os cidos graxos que participam da estrutura de um triacilglicerol so geralmente diferentes entre si. A principal funo dos triacilgliceris a de reserva de energia, e so armazenados nas clulas do tecido adiposo, principalmente. So armazenados em uma forma desidratada quase pura, e fornecem por grama aproximadamente o dobro da energia fornecida por carboidratos. Existem ainda os mono e diacilgliceris, derivados do glicerol com 1 ou 2 AG esterificados, respectivamente. FOSFOLIPDEOS

Os fosfolpideos so steres do glicerofosfato - um derivado fosfrico do glicerol. O fosfato um dister fosfrico, e o grupo polar do fosfolipdio. A um dos oxignios do fostato podem estar ligados grupos neutros ou carregados, como a colina, a etanoamina, o inositol, glicerol ou outros. As fostatidilcolinas, por exemplo, so chamadas de lecitinas.

Os fosfolipdios ocorrem em praticamente todos os seres vivos. Como so anfiflicos, tambm so capazes de formar pseudomicrofases em soluo aquosa; a organizao, entretanto, difere das

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micelas. Os fosfolipdios se ordenam em bicamadas, formando vesculas. Estas estruturas so importantes para conter substncias hidrossolveis em um sistema aquoso - como no caso das membranas celulares ou vesculas sinpticas. Mais de 40% das membranas das clulas do fgado, por exemplo, composto por fosfolipdios. Envolvidos nestas bicamadas encontram-se outros compostos, como protenas, acares e colesterol. Ou Lipdeos Polares, so lipdeos que contm fosfato na sua estrutura. Os mais importantes so tambm derivados do glicerol fosfoglicerdeos - o qual est ligado por uma ponte tipo fosfodister geralmente a uma base nitrogenada, como por exemplo: Colina Fosfatidilcolina, ou Lecitina; Serina Fosfatidilserina; Etanolamina Fosfatidiletanolamina. As outras hidroxilas do glicerol esto esterificadas a cidos graxos. Os fosfoglicerdeos desempenham importante funo na estrutura e funo das membranas biolgicas, pois so claramente anfipticos.

As membranas celulares so elsticas e resistentes graas s fortes interaes hidrofbicas entre os grupos apolares dos fosfolipdios. Estas membranas formam vesculas que separam os componentes celulares do meio intercelular - dois sistemas aquosos! ESFINGOLIPDEOS

A principal diferena entre os esfingolipdios e os fosfolipdios o lcool no qual estes se baseiam: em vez do glicerol, eles so deriva-

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dos de um amino lcool. Estes lipdeos contm 3 componentes fundamentais: um grupo polar, um cido graxo, e uma estrutra chamada base esfingide - uma longa cadeia hidrocarbnica derivada do d-eritro-2-amino-1,3-diol. chamado de base devido a presena do grupo amino que, em soluo aquosa, pode ser convertido para o respectivo on amnio. A esfingosina foi o primeiro membro desta classe a ser descoberto e, juntamente com a di-hidroesfingosina, so os grupos mais abundantes desta classe nos mamferos. No di-hidro, a ligao dupla reduzida. O grupo esfingide conectado ao cido graxo graas a uma ligao amdica. A esfingomielina, encontrada em muitos animais, um exemplo de esfingolipdio. Os vrios tipos de esfingolipdios so classificados de acordo com o grupo que est conectado base esfingide. Se o grupo hidroxila estiver conectado a um acar, o composto chamado de glicosfincolipdio. O grupo pode ser, tambm, um ster fosffico, como a fosfocolina, na esfingomielina. Gangliosdios so glicosfingolipdios que contm o cido N-acetilneurmico (cido silico) ligado cadeia oligossacardica. Estas espcies so muito comuns no tecido cerebral. So lipdeos importantes tambm na estrutura das membranas biolgicas. Formados por uma molcula de cido graxo de cadeia longa, a esfingosina - um aminolcool de cadeia longa - ou um de seus derivados, e uma cabea polar alcolica. Existem 3 subclasses de esfingolipdeos: - As Esfingomielinas = Possuem a fosfocolina ou a fosfoetanolamina como cabea polar alcolica; - Os Cerebrosdeos = No possuem fosfato, e sim, um acar simples como lcool polar - so glicoesfingolipdios, ou glicolipdios; - Os Gngliosdeos = Possuem estrutura complexa, com cabeas polares muito grandes formadas por vrias unidades de acar como por exemplo, o cido silico. ESTERIDES

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Os esterides so lipdeos derivados do colesterol. Eles atuam, nos organismos, como hormnios e, nos humanos, so secretados pelas gnadas, crtex adrenal e pela placenta. A testosterona o hormnio sexual masculino, enquanto que o estradiol o hormnio responsvel por muitas das caractersticas femininas. O colesterol, alm da atividade hormonal, tambm desempenha um papel estrutural - habita a pseudofase orgnica nas membranas celulares. Muitas vezes chamado de vilo pela mdia, o colesterol um composto vital para a maioria dos seres vivos. So lipdeos que no possuem cidos graxos em sua estrutura. Derivam do anel orgnico Ciclopentanoperidrofenantreno. Os esteris - esterides com funo alcolica - so a principal subclasse dos esterides. Destes, o principal exemplo o colesterol que um esteride importante na estrutura das membranas biolgicas, e atua como precursor na biossntese dos esterides biologicamente ativos, como os hormnios esterides e os cidos e sais biliares o Colesterol. O excesso de colesterol no sangue um dos principais fatores de risco para o desenvolvimento de doenas arteriais coronarianas, principalmente o infarto agudo do miocrdio.

LIPOPROTENAS: So associaes entre protenas e lipdeos encontradas na corrente sangunea, e que tem como funo transportar e regular o metabolismo dos lipdeos no plasma. A frao protica das lipoprotenas denomina-se Apoprotena, e se divide em 5 classes principais - Apo A, B, C, D e E - e vria subclasses. A frao lipdica das lipoprotenas muito varivel, e permite a classificao das mesmas em 5 grupos, de acordo com suas densidades e mobilidade eletrofortica:

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- Quilomcron - a lipoprotena menos densa, transportadora de triacilglicerol exgeno na corrente sangunea; - VLDL - Lipoprotena de Densidade Muito Baixa, transporta triacilglicerol endgeno; - IDL - Lipoprotena de Densidade Intermediria, formada na transformao de -VLDL em LDL; - LDL - Lipoprotena de Densidade Baixa, a principal transportadora de colesterol; seus nveis aumentados no sangue aumentam o risco de infarto agudo do miocrdio; - HDL - Lipoprotena de Densidade Alta; atua retirando o colesterol da circulao. Seus nveis aumentados no sangue esto associados a uma diminuio do risco de infarto agudo do miocrdio.

PROSTAGLANDINAS Estes lipdeos no desempenham funes estruturais, mas so importantes componentes em vrios processos metablicos e de comunicao intercelular. Um dos processos mais importantes controlados pelas prostaglandinas a inflamao. Todos estas substncias tm estrutura qumica semelhante a do cido prostanico, um anel de 5 membros com duas longas cadeias ligadas em trans nos carbonos 1 e 2. As prostaglandinas diferem do cido prostanico pela presena de insaturao ou substituio no anel ou da alterao das cadeias ligadas a ele. A substncia chave na biossntese das prostaglandinas o cido araquidnico, que formado atravs da remoo enzimtica de hidrognios do cido linolico. O cido araquidnico livre convertido a prostaglandinas pela ao da enzima ciclooxigenase, que adiciona oxignios ao cido araquidnico e promove a sua ciclizao. No organismo, o cido araquidnico estocado sob a forma de fosfolipdios, tal como o fosfoinositol, em membranas. Sob certos estmulos, o cido araquidnico liberado do lipdeo de estocagem (atravs da ao da enzima fosfolipase A2) e rapidamente convertido a prostaglandinas, que iniciam o processo inflamatrio. A cortisona tem ao anti-inflamatria por bloquear a ao da fosfolipase A2. Este o mecanismo de ao da maior parte dos anti-inflamatrios esterides. Existem outras rotas nas quais o cido araquidnico transformado em prostaglandinas; algumas envolvem a converso do cido em um intermedirio, o cido 5-hidroperox-6,8,1-eicosatetranico (conhecido como 5-HPETE), que formado pela ao da 5lipoxigenase. Os anti-inflamatrios no esterides, como a aspirina, agem bloqueiando as enzimas responsveis pela formao do 5-HPETE. Desta forma, impedem o ciclo de formao das prostaglandinas e evitam a sinalizao inflamatria.

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Protenas

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Mdulo 2

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Unidade 6

VITAMINAS

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Unidade 6 VITAMINAS
6.1 Introduo
A palavra Vitamina foi criada no princpio do sculo por Kazimierz Funk, um Bioqumico polons, que achava que este nutriente era uma amina da vida. As aminas so compostos formados pela substituio de um ou mais tomos de hidrognio na molcula da amnia (NH3) por radicais orgnicos. A palavra inglesa original Vitamine foi posteriormente modificada para Vitamin, quando se reconheceu que nem todas as vitaminas eram aminas. Em portugus no houve modificao semelhante. As vitaminas so nutrientes importantes para o funcionamento do organismo, e protegem-no contra diversas doenas. A maior parte das vitaminas no sintetizada pelo organismo humano, embora o seu metabolismo normal dependa da presena de 13 vitaminas diferentes. A deficincia de vitaminas contribui para o mau funcionamento do organismo e facilita o aparecimento de doenas avitaminoses.

6.2 Classificao das Vitaminas

Vitaminas Hidrossolveis Como a designao sugere, so vitaminas solveis em gua. So absorvidas pelo intestino e transportadas pelo sistema circulatrio para os tecidos onde so utilizadas. O grau de solubilidade varivel e tem influncia no seu trajeto atravs do organismo. Podem ser armazenadas no organismo em quantidade limitada, e a sua excreo efetua-se atravs da urina. As vitaminas hidrossolveis mais importantes para o homem so: B1, B2, B5, B6, B12, C, H, M e PP. Vitaminas Lipossolveis As vitaminas lipossolveis so solveis em gorduras. So absorvidas pelo intestino humano atravs da ao dos sais biliares segregados pelo fgado, e so transportadas pelo sistema linftico para diferentes partes do corpo. O organismo humano tem capacidade

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para armazenar maior quantidade de vitaminas lipossolveis, do que hidrossolveis. As vitaminas lipossolveis mais importantes para o homem so: A, D, E, K. As vitaminas A e D so armazenadas, sobretudo no fgado, e a vitamina E nos tecidos gordos e rgos reprodutores. A capacidade de armazenamento de vitamina K reduzida.

6.3 Denominao das Vitaminas

Vitamina A (Retinol) Grupo: vitaminas lipossolveis. Fonte: acerola, vegetais verdes e amarelos (alface, couve, espinafre, salsa, batata-doce, cenoura), gordura, leite, manteiga, queijo, ovo, fgado e outras vsceras, sardinha. Funo: importante para o crescimento e formao dos ossos, indispensvel para a qualidade da viso, da pele e do cabelo. Avitaminose: xeroftalmia (secura dos olhos). Sinais e Sintomas: cegueira noturna, fotofobia (hipersensibilidade luz), hemorragia ocular, cegueira (casos mais graves), alterao do paladar, desidratao da pele (com hiperqueratose e atrofia das glndulas sebceas), desidratao das mucosas (com infeces freqentes). Vitamina B1 (Tiamina Vitamina F) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: arroz integral, brcolos, ervilha, espargo, feijo, noz, po integral, fgado, rim, carne de porco, peixe, ovo (gema). Necessidades dirias: entre 1 mg (crianas e mulheres) e 1,4 mg (homens). Funo: importante para o metabolismo celular, sistema nervoso e msculos. Avitaminose: beribri e encefalopatia de Wernicke-Korsakoff. Sinais e Sintomas: Carncia: alterao do tato, anorexia, depresso, dispnia, dor abdominal e torcica, fadiga, irritao fcil e nervosismo, palidez, palpitaes, perda de peso, parestesias (sensao de picadas no corpo), sensao de calor nos ps (sensao de queimadura), vmitos;

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Beribri: atrofia muscular, cianose, taquicardia, hipertenso sistlica, hipotenso diastlica, distenso das veias cervicais;

Vitamina B2 (Riboflavina Vitamina G) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: cereais em gro, levedura de cerveja, vegetais de folhas verdes (couve-flor, espinafre, repolho), vegetais amarelos, leite, queijo, carnes de boi, porco e aves, fgado e rim (vaca), ovo. Necessidades dirias: entre 1,5 mg (mulheres) e 1,7 mg (homens). Funo: importante para o metabolismo dos protdeos, lipdeos e glucdios. Avitaminose: neuropatia. Sinais e Sintomas: ardor e prurido ocular, fotofobia (hipersensibilidade luz), aumento da vascularizao da crnea, desidratao da pele, estomatite, depresso. Vitamina B3 (cido nicotnico Niacina Nicotinamida Vitamina PP) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: amendoim, cereais em gro, noz, ervilha, fava, feijo, legumes, leite, queijo, carne de aves, fgado. Necessidades dirias: cerca de 18 mg. Funo: importante para as funes dos sistemas nervoso e digestivo, fgado e pele, ao reguladora da colestrolemia. Avitaminose: pelagra. Sinais e Sintomas: cefaleias, fadiga, insnia, irritabilidade fcil, dermatite (sobretudo na regio cervical anterior) com descamao, edema e hiperpigmentao cutneas, diarria, gengivite, estomatite, demncia e outras alteraes cerebrais (alucinao, ansiedade, depresso, psicose, estupor). Vitamina B5 (cido pantatnico) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: cereais em gro, cogumelos, legumes, milho, abacate, leite, carne de aves, fgado, ovo. Necessidades dirias: cerca de 6 mg. Funo: importante para a produo de anticorpos e hormnios supra-renais (esterides e cortisona), importante para o metabo-

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lismo dos protdeos, lipdeos e glucdios (converso em energia), ao facilitadora no controlo do stress. Elemento essencial da coenzima A. Sinais e Sintomas: cibras, dores e clicas abdominais, fadiga, insnia, mal-estar geral, reduo na produo de anticorpos. Vitamina B6 (Piridoxina) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: arroz integral, aveia, batata, cereais em gro, trigo, leguminosas, banana, atum, carne de porco, vsceras. Necessidades dirias: cerca de 2 mg. Funo: importante para o metabolismo celular (respirao celular) e das protenas. Sinais de carncia: anemia, dermatite, gengivite, nuseas, nervosismo. Vitamina B9 (cido flico Vitamina Bc Vitamina M) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: vegetais de folhas verdes (couve-flor, espinafre, repolho), levedura de cerveja, fgado. Necessidades dirias: cerca de 200 g. Funo: ajuda a formar o cido tetrahidroflico, que atua como uma coenzima no metabolismo dos aminocidos, na formao dos cidos nuclicos, das hemcias e do tecido nervoso. Avitaminose: anemia (megaloblstica). Sinais e Sintomas: fadiga, palpitaes, cefalias, dispnia, irritabilidade, perda de peso, diarria, estomatite, anemia, taquicardia, palidez (quadro clnico inespecfico). Vitamina B12 (Cianocobalamina Cobalamina) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: leite, carnes vermelhas, ovo. Necessidades dirias: cerca de 1 g. Funo: necessria eritropoiese, e importante para o metabolismo dos aminocidos e cidos nuclicos. Avitaminose: disfunes neurolgicas e hematolgicas (anemia). Sinais e Sintomas: anemia (megaloblstica), palidez, fraqueza muscular, perda de peso, dispnia, cefalias, palpitaes, neuropatia

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perifrica com Sinal de Romberg positivo e diminuio ou exacerbao dos reflexos, depresso, parania, amnsia, demncia. Vitamina C (cido ascrbico) A vitamina C necessria para manter normais as paredes dos vasos sangneos. As frutas ctricas, as verduras, o tomate e a cebola so ricos em vitamina C. Existem diversas substncias que apresentam atividade em vitamina C, das quais a mais importante o cido L-ascrbico. O cido ascrbico sintetizado por um grande nmero de plantas e por todos os mamferos conhecidos, exceto os primatas e o porquinho-da-ndia. Patologia Devido a no sintetizar o cido ascrbico por problemas genticos, o homem necessita de ingesto constante de vitamina C. A deficincia de vitamina C causa o escorbuto. Os sintomas patolgicos do escorbuto limitam-se quase que exclusivamente ao tecidos de suporte de origem mesenquimal (ossos, dentina, cartilagens e tecido conjuntivo). O escorbuto nos adultos caracteriza-se por: ulceraes, gengivas inchadas, afrouxamento dos dentes, modificao naintegridade dos capilares, anorexia, anemia. As crianas alimentadas com leite materno sem suplementao adequada com fontes vegetais de vitamina C tornam-se suceptveis ao escorbuto infantil. Este estado carencial caracteriza-se por fraqueza, juntas inchadas, dificuldade de movimentao, manchas hemorrgicas, feridas difceis de curar e anemia. Exceto a anemia, todos os outros sintomas so devidos a problemas na formao dos colgenos e de condriona sulfato. A anemia deve-se a uma dificuldade do indivduo em usar o ferro armazenado. aventado tambm que a vitamina C tem um papel importante na preveno de gripes e resfriados, por participar da sntese da condroitina sulfato. Embora tendo este papel na proteo das mucosas, a vitamina C menos eficiente que a vitamina A no controle de gripes e resfriados. Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: acerola, anans, laranja, limo, mamo, manga, melo, morango, batata, vegetais de folhas verdes (couve-flor, couve galega, espinafre, repolho), pimento. A acerola o fruto mais rico em vitaminas A e C (a quantidade de vitamina C cerca de trinta vezes superior da laranja). Necessidades dirias: cerca de 60 mg.

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Funo: importante para vrias reaes bioqumicas celulares. A principal funo a hidroxilao do colgeno, uma protena que aumenta a resistncia de ossos, dentes, tendes e paredes dos vasos sanguneos. Tem efeito antioxidante, usada na sntese de hormnios e neurotransmissores, e contribui para o fortalecimento das defesas imunolgicas do organismo. Avitaminose: escorbuto. Sinais e Sintomas: cicatrizao difcil de ferimentos, secura da boca e dos olhos, dentes fracos, dores articulares, gengivite, hemorragias, perda de peso, fraqueza geral, leses escorbticas. Vitamina D (Calciferol Colecalciferol e Ergocalciferol) A Vitamina D1 a mais importante e a que regula o metabolismo do Clcio, ou seja, a calcificao ssea. A Vitamina D2 chamada de Ergocalciferol, tem como precursor o ergosterol presente nos vegetais, centeio e leveduras. A vitamina D3 ou Colecalciferol a sintetizada na pele sob ao dos raios U.V. do sol em contato com o 7-dehidrocolesterol secretado pelas glndulas sebceas presentes na nossa pele. A Vitamina D aumenta a absoro do Clcio e do Fsforo no lmen intestinal por um mecanismo no esclarecido; junto ao hormnio Calcitonina tem funo osteoblstica de depositar Clcio nos sseos; tem funo osteoclstica junto ao Paratormnio que retira Clcio dos ossos quando a concentrao deste mineral est baixa no sangue (hipocalcemia); aumenta a reabsoro do fosfato inorgnico pelos rins; estimula a sntese do colgeno. Grupo: vitaminas lipossolveis. Fonte: fgado, ovo, peixes de gua salgada, sol (favorece a produo de calciferol pelo organismo). Necessidades dirias: cerca de 10 mg ou 400 UI. Funo: importante para o crescimento, facilita a fixao de clcio nos ossos e dentes. Avitaminose: raquitismo. Sinais e Sintomas: atraso no crescimento, amolecimento do crnio, deformaes sseas, curvatura acentuada dos membros inferiores, malformao e envelhecimento precoce dos dentes, raquitismo.

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Vitamina E (Tocoferol) Ela previne o dano celular ao inibir a peroxidao lipdica, a formao de radicais livres e doenas cardiovasculares. Melhora a circulao sangunea, regenera tecidos e til no tratamento de seios fibrocsticos, tenso pr-menstrual e claudicao intermitente. possvel obter dos alimentos as doses de vitamina E que combatem doenas cardacas e o cncer, alm de aumentar a resistncia imunolgica, segundo consta uma pesquisa feita pelo em 2000 pelo Instituto de Medicina do EUA(IOM) . O IOM relatou que a maioria dos americanos consegue o suprimento necessrio da vitamina E pela alimentao diria. Alm de alertar sobre dietas que restrinjam o consumo de gorduras, tendo essas pessoas que complementarem com suplementos(lembrando que o Tocoferol uma vitamina lipossolvel, portanto cumulativo no organismo. Podendo gerar a hipervitaminose). Grupo: vitaminas lipossolveis. Fonte: abacate, avel, aveia, batata doce, brcolos, cereais integrais, noz, trigo. Necessidades dirias: cerca de 10 mg. Funo: importante para a atividade muscular, formao de clulas sexuais e sanguneas, ao antioxidante (estabilizadora das estruturas celulares). Avitaminose: esterilidade. Sinais e Sintomas: distrofia muscular e fraqueza, descamao cutnea, anemia, catarata, derrames, disfuno neurolgica (sistema nervoso, olhos e msculos); os sinais e sintomas so inespecficos. Pensa-se que esta avitaminose favorece o aparecimento de certo tipo de neoplasias malignas (cancros). Vitamina H (Biotina Vitamina B8) Grupo: vitaminas hidrossolveis. Fonte: fgado, ovo, vegetais. Funo: importante para o metabolismo dos lipdeos. Sinais e Sintomas: problemas cutneos. Vitamina K (Filoquinona Naftoquinona) Grupo: vitaminas lipossolveis.

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Fonte: arroz integral, ervilha, tomate, vegetais de folhas verdes (couve-flor, espinafre, repolho), leos vegetais, carne, fgado, leite, microflora intestinal (fornece cerca de 50% das necessidades dirias). Necessidades dirias: 2 mg por quilo de peso. Funo: importante na coagulao do sangue. Avitaminose: hemorragias. Sinais e Sintomas: aparecimento fcil de hematomas e outros problemas hemorrgicos (sem causa aparente)

Voc Sabia!
Todos os fatores receberam nomes e nmeros, mas apenas alguns deles subsistiram, pois as pesquisas comprovaram que nosso corpo pode produzir alguns dos componentes necessrios por si prprio. Isto explica porque faltam letras na srie de vitaminas, ou seja, C, D, E mas no G ou I. Essa utilizao de letras para as vitaminas surgiu antes do nome vitamina e foi criada pelo cientista americano Elmer McCollum, que a princpio designou em A, a solvel em gordura e B a solvel em gua. Naquele tempo (- McCollum relatou a extrao da vitamina A da manteiga em 1914) ele s conhecia estas duas vitaminas, mas hoje se sabe que as chamadas vitaminas D, E e K tambm so solveis em gorduras (Lipossolveis) e que existem muitas outras solveis em gua (Hidrossolveis). Uma histria de deficincia vitamnica Antes que se compreendesse o papel das vitaminas e dos sais minerais, o povo sofria de muitas deficincias desses elementos. Durante as grandes navegaes dos sculos XV e XVI, um dos maiores flagelos dos marinheiros era uma estranha doena que atingia a tripulao, provocando queda de dentes e cabelo, hemorragias generalizadas (gengivas, nariz, etc.), anemia e intensa fraqueza. No eram poucos os que acabavam morrendo, em absoluta prostrao. Essa doena, hoje conhecida como Escorbuto , surge no organismo em conseqncia da alimentao deficitria em vitamina C.

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Em um dos trechos de Os Lusadas, Cames descreve os marinheiros atacados pelo escorbuto: (...) ali lhes incharam As gengivas na boca, que crescia A carne, e juntamente apodrecia! Apodrecia cum ftido e bruto Cheiro, que o ar vizinho inficionava.

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Unidade 7

INTRODUO AO METABOLISMO E BIOENERGTICA

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Introduo ao Metabolismo e Bioenergtica

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Unidade 7 INTRODUO AO METABOLISMO E BIOENERGTICA

7.1 Introduo ao Metabolismo
O conhecimento da composio qumica e da estrutura das molculas biolgicas no suficiente para entender o modo como elas se associam formando sistemas complexos, nem como elas funcionam para manter a vida. necessrio analisar as reaes pelas quais as molculas biolgicas so formadas e degradadas. Assim torna imprecindivel o conhecimento sobre o metabolismo.

Metabolismo: Processo geral por meio do qual os sistemas vivos adquirem e usam energia livre para realizarem suas funes. Este processo se dividiu em duas partes: 1. Catabolismo ou degradao o processo no qual os nutrientes e os constituintes celulares so degradados para aproveitamento de seus componentes e/ou para gerao de energia realizando oxidao processo exergnico. 2. Anabolismo ou biossntese: processo no qual as biomolculas so sintetizadas a partir de componentes mais simples - processo endergnico (utiliza a energia liberada durante o catabolismo). As necessidades nutricionais de um organismo refletem as fontes de energia livre metablica de que ele dispe. Organismos Autotrficos podem sintetizar todos os seus constituintes celulares a partir de H2O, CO2, NH3 e H2S. H duas fontes de energia possveis para esse processo: 1. Quimiolitotrficos obtm sua energia livre por meio da oxidao de compostos inorgnicos como NH3, H2S ou Fe2+. . 2 HNO3 + 2 H2O 2 NH3 + 4 O2 . H 2SO4 H2S + 2 O 2 4 FeCO3 + O2 + 6 H2O . 4 Fe(OH)3 + 4 CO2 Exemplo: Acidithiobacillus ferrooxidans (Habitat natural gua cida de mina) bactria acidoflica (pH 1.0 a 4.0), fixa CO2 atravs do Ciclo de Calvin.

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2. Fotoautotrficos obtm sua energia livre por meio da fotossntese a energia luminosa promove a transferncia de eltrons de doadores inorgnicos para CO2, produzindo carboidratos que sero oxidados para liberarem energia livre.

Exemplos: Algas e plantas Organismos Heterotrficos obtm energia livre por meio da oxidao de compostos orgnicos (caboidratos, lipdeos e protenas) e dependem de organismos autotrficos para obterem tais compostos.

Exemplo: animais. Os organismos podem ser classificados segundo o agente oxidante utilizado para a degradao dos nutrientes. Aerbicos obrigatrios: usam O2 Anaerbicos: usam agentes oxidantes como sulfato e nitrato Aerbicos facultativos: crescem na presena e na ausncia de O2 Anaerbicos obrigatrios: so intoxicados na presena de O2 A grande parte do metabolismo celular est focada em processos aerbicos.

7.1.1 Vias Metablicas

Consistem em uma srie de reaes enzimticas relacionadas que resultam em produtos especficos. Os reagentes, os intermedirios e os produtos so chamados metablitos H mais de 2 mil reaes metablicas conhecidas, cada uma catalisada por uma enzima diferente.

Viso geral do catabolismo Os catablitos complexos so inicialmente degradados at suas unidades monomricas, e depois ao comum a todos, a acetilCoA. O grupo acetil oxidado a CO 2 por meio do ciclo do cido ctrico com a concomitante reduo de NAD+ e FAD. A reoxidao pelo O2 durante a fosforilao oxidativa produz H2O e ATP.

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Introduo ao Metabolismo e Bioenergtica

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As vias catablicas e anablicas esto relacionadas

O ATP e o NADPH produzidos pela degradao de metablitos complexos so fonte de energia para reaes biossintticas e outras reaes. As vias metablicas ocorrem em locais especficos das clulas Procariotos podem estar localizados em reas especficas do citosol. Eucariotos a sntese de metablitos em compartimentos especficos envolvidos por membranas requer mecanismos para transportar essas substncias entre os compartimentos.

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Clula eucaritica animal

Clula eucaritica vegetal

Mitocndria: ciclo do cido ctrico, fosforilao oxidativa, oxidao de cidos graxos, degradao de aminocidos. Citosol: gliclise, via das pentoses-fosfato, biossntese de cidos graxos, gliconeognese.

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Introduo ao Metabolismo e Bioenergtica

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Lisossomo: digesto enzimtica. Ncleo: replicao e transcrio de DNA, processamento do RNA. Aparelho de Golgi: processamento ps-traducional de protenas de membranas e protenas secretoras, formao da membrana plasmtica e vesculas. Reticulo Endoplasmtico Rugoso: sntese de protenas ligadas a membranas e protenas secretoras. Reticulo Endoplasmtico Liso: biossntese de lipdeos de esterides. Peroxissomos (glioxissomos): reaes de oxidao, catalisadas por aminocido-oxidases e catalase, reaes do ciclo do glioxilato nas plantas.

7.1.2 Estruturas Biolgicas

Existem diferentes nveis organizacionais que formam uma clula, alguns esto representados abaixo.

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7.2 Introduo a Bioenergtica

A bioenergtica retrata a bioenergia e suas transformaes ligadas aos fenmenos biolgicos, utilizando-se de leis e princpios fsicos da termodinmica aplicados aos seres vivos. Ela preside a todas as manifestaes vitais, tudo que exprime trabalho s pode ser realizado mediante as transformaes energticas. Nos seres vivos estas transformaes so provenientes da degradao metablica de principalmente carboidratos e gorduras. Os carboidratos so metabolizados pela glicolise e pelo ciclo de Krebs e as gorduras apenas pelo ciclo de Krebs.

7.2.1 Fontes de Energia

Por leis fsicas a energia no pode ser criada, apenas transformada, sem ela no a realizao de trabalho, ou seja, supondo que uma clula no tenha energia, esta perde suas funes vitais ocasionando a sua morte. Vrias so as fontes de energia, dentre elas se destacam:

Essas molculas fornecedoras de energia trabalham associadas a enzimas, realizando as interaes moleculares na obteno das mais diferentes e profundas funes biolgicas, encontradas nos diferentes ciclos metablicos como por exemplo o da uria, o de Krebs e at nos mais especializados como da rodopsina. O ATP sem dvida a mais importante molcula fornecedora de energia, formando com o ADP um sistema importantssimo no transporte e armazenamento de energia, este produzido por trs processos comuns produtores de energia para a elaborao da mesma:

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1 - O sistema ATP-PC ou sistema de FOSFOGNIO; 2 - Gliclise anaerbica; 3 - O sistema aerbico. No ciclo de Krebs os trs processos aparecem de uma maneira geral. A energia liberada pela desintegrao das substncias alimentares, e a energia liberada quando a PC desfeita so utilizadas para refazer a molcula de ATP.

7.2.3 Aspectos Biofsicos da Bioenergtica

Os seres vivos em condies normais apresentam-se sob o ponto de vista termodinmico como sistema aberto, quando permite troca de energia como o meio envolvente, e que operam com transformaes cclicas, onde o estado inicial e final so os mesmos, irreversvel, j que os estgios iniciais e finais so iguais e os estgios termodinmicos num sentido e no outro da evoluo no foram os mesmos. O que significa dizer que ao final de cada ciclo ou operao vital, o organismo encontra-se nas mesmas condies termodinmicas para repeti-lo. As trocas e transformaes energticas so regidas pelos trs princpios da termodinmica, os quais presidem os fenmenos da vida. 1 Princpio o de Meyer (ENTALPIA), estabelece as condies de indestrutibilidade e impossibilidade de criao de energia, e que qualquer tipo de energia pode apenas ser transformada. A maioria das reaes biolgicas ocorre com presso constante, e a quantidade de energia designada por variao de entalpia, H. Quando o volume constante diz-se que a transformao exergnia , exotrmica e por isso espontnea, ento por conveno a variao de entalpia representada pelo sinal negativo (-). De acordo com o tipo de reao, o calor liberado dito de combusto, de reao, de hidrlise, como por exemplo na combusto da glicose. C6H12 O6 + 6O2 6CO2 + H= - 637 Kcal/mol

Ao contrrio a transformao endergnica ou a reao endotermica, portanto no espontnea, e sua representao feita com o sinal positivo (+). Em todos os seres vivos organizados podem ser identificadas as transformaes energticas; a energia qumica (alimentos) transformando-se em energia de calor (elevao trmica); a energia mecnica (contrao muscular) em calor (elevao de temperatura) e eletricidade (bioeletrognese); energia luminosa (aparelho visual) em eltrica (estmulo nervoso atravs do

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nervo ptico); energia eltrica (estmulo nervoso) em energia mecnica (contrao muscular), energia sonora (audio) em energia eltrica; energia mental (clculos e pensamentos) em energia eltrica (ondas encefalogrficas). Ainda podendo ser distinguida como forma de energia a energia de concentrao (difuso por osmose). Todo organismo vivo se empenha em manter sua energia interna e, melhor ainda, sua entalpia constante. Os gastos efetuados pelo organismo para o funcionamento de seus rgos so reparados atravs da ingesto de alimentos, tendo sempre um equilbrio entre a energia obtida dos alimentos e o trabalho realizado pelo organismo. 2 Princpio ou Princpio de Carnot (ENTROPIA), este princpio estabelece as condies necessrias para que uma transformao possa se realizar e as conseqncias que venham a ocorrer. Fundamentalmente toda evoluo termodinmica exige que haja um transporte ou transformao de energia. Qualquer um desses dois aspectos implica na existncia de uma fonte rica e outra pobre de energia, de modo que no haver transporte de material para a dentro ou para fora da clula se no houver uma diferena de concentrao entre os meios, ento chamamos a diferena de energia disponvel para o trabalho (transporte) de energia livre. Todas as transformaes energticas que ocorrem no ser vivo simbolizam a prpria vida, exigindo necessariamente uma fonte rica e outra pobre em energia. A entropia se manifesta com diferentes tendncias ao longo de ciclo vital. No anabolismo h o armazenamento de energia tendo uma entropia negativa, no estgio h um equilbrio no gasto de energia e entropia nula; j no catabolismo, onde o gasto de energia maior que a receita, a entropia positiva. 3 Principio, o de Wernst (ORDEM E DESORDEM), ressalta principalmente o valor das estruturas na utilizao da energia para que ocorram extensas e intensas transformaes bioenergticas, com o mnimo de perda energtica e com o mximo de rendimento. A natureza utiliza molculas tradutoras, transportadoras e transformadoras de energia.

7.2.4 Aplicaes da Bioenergtica

Nota-se s aplicaes da bioenergtica no estudo de ciclos biolgicos, onde sempre h utilizao de energia, alguns ciclos so: Transporte atravs de membranas - Por processo de difuso ou osmose, onde o grau de concentrao influi no sentido do ciclo.

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Respirao - Na liberao de energia contida nos alimentos; atravs das mitocndrias, ocorre no hialoplasma a fase anaerbica (gliclise) formando 2 molculas de ATP, e na fase aerbica (Ciclo de Krebs + cadeia respiratria), ocorre no interior das mitocndrias a formao de 36 molculas de ATP. Fermentao a liberao de energia dos alimentos na ausncia de oxignio. Podendo ser alcolica, actica (vinagre) ou lctica. Quimiossntese# - Processo atravs do qual o ser auttrofo obtm energia por oxidao de vrias substncias: H2S, NH3, HNO2, H2O, Fe++ dentre outras. # A quimiossntese a produo de matria norgnica atravs da oxidao de substncias minerais. A quimiossintese divide-se em duas etapas: A formao do NADPH e de ATP, usando a energia fornecida por determinadas reaes qumicas de oxirreduo que ocorrem no meio; A segunda fase igual fase quimica da fotossntese: reduo de dixido de carbono, o que conduz sntese de substncias organicas. A quimiossntese realizada principalmente por bactrias.As ferrobactrias, as sulfobactrrias e as nitrobactrias. Cada uma dessas bactrias utiliza a energia de um mineral que oxida, sendo eles o Ferro, o Enxofre e o Nitrogenio.

SUBSTNCIAS + O2 PRODUTOS + ENERGIA QUMICA Fotossntese - Processo pelo qual, o ser auttrofo, utilizandose da luz para sintetizar acares, lipdios e protenas, graas presena do pigmento verde, clorofila, contido nos plastos*.

* Plastos: Encontrados no citoplasma de plantas e algas, sua forma e quantidade variam de organismo para organismo. Podem ser separados em categorias: - Cromoplastos: Apresentam pigmentos em seu interior. Nas plantas geralmente representados pelos cloroplastos, cujo principal pigmento a clorofila, de cor verde. - Leucoplastos: No contm pigmentos.

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- Cloroplastos: Tm formato discide, e se assemelham a uma lente biconvexa. Apresentam duas membranas envolventes e inmeras membranas internas, formando pequenas bolsas achatadas chamadas de tilacides. Estes se organizam uns sobre os outros, formando estruturas que lembram pilhas de moedas, chamadas granum (no plural grana). O espao interno preenchido por um liquido viscoso, denominado estroma, e as molculas de clorofila ficam dispostas nas membranas dos tilacides. Produzem molculas orgnicas (principalmente glicose), que servem como combustvel celular

6CO2 +12H2O + ENERGIA C6H12O6 +6O2 + 6H2O Torna-se evidente que a bioenergia tem fundamental importncia para a estabilidade e funcionalidade dos sistemas vivos. Assim o estudo aprofundado da mesma atravs da bioenergtica, demonstra quanto se pode ganhar com o maior conhecimento das propriedades fsicas que fazem com que a energia movimente a vida.

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Unidade 8

METABOLISMO DE CARBOIDRATOS: CICLO DO CIDO CTRICO, CADEIA TRANSPORTADORA DE ELTRONS E FOSFORILAO OXIDATIVA

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Metabolismo de Carboidratos

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Unidade 8 METABOLISMO DE CARBOIDRATOS: CICLO DO CIDO CTRICO, CADEIA TRANSPORTADORA DE ELTRONS E FOSFORILAO OXIDATIVA.
8.1 Introduo ao Metabolismo de Carboidratos
Aps a absoro dos carboidratos nos intestinos, a veia porta heptica fornece ao fgado uma quantidade enorme de glicose que vai ser liberada para o sangue e suprir as necessidades energticas de todas as clulas do organismo. As concentraes normais de glicose plasmtica (glicemia) situam-se em torno de 70 - 110 mg/dL, sendo que situaes de hipergicemia tornam o sangue concentrado alterando os mecanismos de troca da gua do lquido intra celular com o lquido extra celular, alm de ter efeitos degenerativos no sistema nervoso central (SNC). Sendo assim, um sistema hormonal apurado entra em ao para evitar que o aporte sangneo de glicose exceda os limites de normalidade. Os hormnios pancreticos insulina e glucagon possuem ao regulatria sobre a glicemia plasmtica. No so os nicos envolvidos no metabolismo dos carboidratos (os hormnios sexuais, epinefrina, glicocorticides, tireoidianos e outros tambm influenciam a glicemia), porm, sem dvida, esses so os mais importantes. A insulina produzida nas clulas das ilhotas de Langerhans e armazenada em vesculas do Aparelho e Golgi em uma forma inativa (pr-insulina). Nessas clulas existem receptores celulares que detectam nveis de glicose plasmticos (hiperglicemia) aps uma alimentao rica em carboidratos. H a ativao da insulina com a retirada do peptdeo C de ligao, com a liberao da insuli-

Figura 1 - Representao esquemtica da captao de glicose. A) a insulina liberada pelo estmulo hiperglicmico e forma um complexo insulina/receptor. B) a clula endocita complexa e possibilita a entrada de glicose para ser metabolizada. C) O receptor regenerado, a insulina degradada intracelularmente e o processo reinicia levando a queda da glicemia plasmtica.

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na na circulao sangnea. Como efeito imediato, a insulina possui trs efeitos principais: 1. Estimula a captao de glicose pelas clulas (com exceo dos neurnios e hepatcitos); 2. Estimula o armazenamento de glicognio heptico e muscular (glicognese); 3. Estimula o armazenamento de aminocidos (fgado e msculos) e cidos graxos (adipcitos).

GLICOGNESE Corresponde a sntese de glicognio que ocorre no fgado e msculos (os msculos apresentam cerca de 4 vezes mais glicognio do que o fgado em razo de sua grande massa). O glicognio uma fonte imediata de glicose para os msculos quando h a diminuio da glicose sangnea (hipoglicemia). A primeira reao do processo glicoltico a formao de glicose-6-fosfato (G6P) a partir da fosforilao da glicose. A insulina induz a formao de glicose-1-fosfato pela ao da enzima fosfoglicomutase que isomerisa a G6P. A partir da, h a incorporao da uridina-tri-fosfato (UTP) que proporciona a ligao entre o C1 de uma molcula com o C4 de outra ligao (catalisada pela enzima glicognio sintase), formando uma maltose inicial que logo ser acrescida de outras, formando um polmero a (1- 4). A ramificao da cadeia ocorre pela ao da enzima ramificadora (amido-1-4,1-6-transglucosidase) que transfere cadeias inteiras para um C6, formando ligaes a(1- 6). O glicognio fica disponvel no fgado e msculos, sendo consumido totalmente cerca de 24 horas aps a ltima refeio. Na Tabela abaixo, pode-se observar a quantidade de glicose disponvel para o ser humano, levando em consideraes as reservas hepticas e musculares de glicognio.

Armazenamento de carboidratos em homens adultos normais (70 kg). (1) Peso do fgado: 1.800g; (2) Massa muscular: 35kg: (3) Volume total: 10 litros.

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Como resultado dessas aes, h a queda gradual da glicemia (hipoglicemia) que estimula as clulas a-pancreticas a liberar o glucagon. Este hormnio possui ao antagnica insulina, com trs efeitos bsicos: 1. Estimula a mobilizao dos depsitos de aminocidos e cidos graxos; 2. Estimula a glicogenlise GLICOGENLISE Quando h a necessidade de glicose, o glicognio mobilizado a partir de uma seqncia de reaes que no so o inverso da glicognese, mas uma via metablica complexa que se inicia a partir de estmulos hormonais reflexos da hipoglicemia (p.ex.: glucagon, adrenalina, glicocorticides). Esses estmulos possuem como segundo mensageiro o AMP cclico (AMPc), que formado a partir do ATP sob ao da enzima adenilato-ciclase (inativa at que haja o estmulo hormonal). O AMPc ativa a enzima fosforilase-quinase-b em fosforilasequinase-a, que por sua vez retira uma molcula de glicose do glicognio, na forma de glicose-1-fosfato, liberando-a para a gliclise em uma reao que utiliza a mesma enzima que inicia a glicognese (fosfoglicomutase). O aumento do metabolismo energtico, faz com que cesse os estmulos hormonais, inibindo a glicogenlise. O AMPc degradado pela enzima fosfodiesterase, sendo que hormnios, como a insulina, aumentam a atividade desta enzima, induzindo o bloqueio da glicogenlise. 3. Estimula a neoglicognse. Esses efeitos hiperglicemiantes possibilitam nova ao insulnica, o que deixa a glicemia de um indivduo normal em torno dos nveis normais de 70 - 110 mg/dL . A captao de glicose pela clula se d pelo encaixe da insulina com o receptor celular para insulina. Esse complexo sofre endocitose, permitindo a entrada de glicose, eletrlitos e gua para a clula; a glicose metabolizada [atravs da gliclise e Ciclo de Krebs], a insulina degradada por enzimas intracelulares e o receptor regenerado, reiniciando o processo (Figura 1). Quanto mais complexo insulina/receptor endocitado, mais glicose entra na clula, at que o plasma fique hipoglicmico. Esta hipoglicemia, entretanto, no imediata, pois a regenerao do receptor limitante da entrada de glicose na clula, de forma a possibilitar somente a quantidade de glicose necessria evitando, assim, o excesso glicose intracelular.

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Nos msculos, a glicose em excesso convertida em glicognio, assim como a glicose que retorna ao fgado. A grande maioria das clulas do organismo dependente da insulina para captar glicose (o neurnio e os hepatcitos so excees, pois no tem receptores para insulina, sendo a glicose absorvidos por difuso). A deficincia na produo ou ausncia total de insulina ou dos receptores caracteriza uma das doenas metablicas mais comuns: o diabetes mellitus.

Voc Sabia!
DIABETES MELLITUS uma doena metablica hereditria, caracterizada pela insuficincia da ao hormonal da insulina, seja por diminuio ou ausncia da secreo pelas clulas b-pancreticas, seja por ineficcia no sistema receptor celular para a insulina. influenciada por mltiplos e complexos fatores genticos e ambientais, que interagem potencializando sua expresso patolgica. O conhecimento do diabetes muito antigo, sendo uma das doenas metablicas com um histrico bem definido na histria da medicina. Para se classificar o diabetes mellitus, deve-se levar em considerao fatores clnicos importantes, sendo que a classificao mais comumente utilizada (no por isso a mais correta) divide os pacientes em dois grupos: diabetes do tipo I (juvenil) e diabetes do tipo II (diabetes tardia). De cada 100 pessoa pelo menos 6 ou 7 tem a doena. No Brasil estima-se que 5,6% da populao seja diabtica, sendo que, quase a metade no o sabe. Das pessoas prximas aos 65 anos 17% so diabticas e essa percentagem se eleva a 26% aquelas em torno de 85 anos, constituindo-se um dos grandes desafios de sade pblica nos pases em pleno desenvolvimento scioeconmico.

A gliclise tem origem na via catablica central, so usadas as molculas de glicose como uma fonte de energia. Essa molcula nica fonte em algumas clulas, tambm atua como precursores para sntese de algumas substncias, esta via possui 2 fases e 10 reaes, que so de glicose a piruvato, sendo que os acares utilizados so ismeros D (Figura 2).

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Figura 2 - Degradao da glicose a piruvato, com fornecimento de energia na forma de 2 molculas de ATP.

8.2 Ciclo do cido Ctrico

O ciclo do cido ctrico, ciclo de Krebs ou do tricarboxlico, corresponde uma srie de reaes qumicas que ocorrem na vida da clula e seu metabolismo. Descoberto por Sir Hans Adolf Krebs (1900-1981). O ciclo do cido ctrico executado na mitocndria dos eucariotes e no citoplasma dos procariote. Trata-se de uma parte do metabolismo dos organismos aerbicos (utilizando oxignio da respirao celular); organismos anaerbicos utilizam outro mecanismo, como a gliclise - outro processo de fermentao independente do oxignio. O ciclo do cido ctrico uma rota anfiblica, catablica e anablica , com a finalidade de oxidar a acetil-CoA (acetil coenzima A), que se obtm da degradao de carboidratos, cidos graxos e aminocidos a duas molculas de CO2. Funes anfiblicas do ciclo do cido ctrico e vrias vias biossintticas que utilizam os intermedirios do ciclo como reagentes para reaes anablicas, mas o ciclo est envolvido na degradao e o principal sistema de conservao de energia livre na maioria dos organismos e intermedirios que so necessrios para a manuteno da funo de degradao (Figura 3).

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Figura 3 - Ciclo de Krebs, degradao de piruvato at formao de ATP.

Este ciclo inicia-se quando o piruvato que sintetizado durante a gliclise transformado em acetil-CoA (coenzima A) por ao da enzima piruvato desidrogenase. Este composto vai reagir com o oxaloacetato que um produto do ciclo anterior formando-se citrato. O citrato vai dar origem a um composto de cinco carbonos, o alfa-cetoglutarato com libertao de NADH, e de CO2. O alfa-cetoglutarato vai dar origem a outros compostos de quatro carbonos com formao de GTP, FADH2 e NADH e oxaloacetato. Aps o ciclo de krebs ocorre outro processo denominado de fosforilao oxidativa. Nos sistemas vivos, o processo de transferncia de eltrons que conecta essas reaes parciais, ocorre atravs de um caminho complexo que culmina com a liberao de energia livre na forma de ATP (Adenosina Trifosfato). Os 12 pares de eltrons envolvidos na oxidao da glicose no so transferidos diretamente ao O2. Antes, eles so transferidos para as coenzimas NAD+ (Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo) e FAD (Flavina adenina Dinucleotdeo) para formar 10 NADH + 2 FADH2 nas reaes catalisadas pelas enzimas glicolticas e enzimas do ciclo do cido ctrico (Figura 4). Os eltrons passam, ento, para uma cadeia transportadora de eltrons onde, atravs da reoxidao do NADH e FADH2, participam de reduo-oxidao de cerca de 10 centros redox at reduzir O2 em H2O.

Via metablica do ciclo do cido ctrico Dois carbonos so oxidados, tornando-se CO2, e a energia dessas reaes armazenada em GTP, NADH e FADH2. NADH e FADH 2 so coenzimas (molculas que ativam ou intensificam

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Figura 4 - At a quinta reao, o equivalente a um acetil foi completamente oxidado em duas molculas de CO2, dois NADH e um GTP foram gerados para completar o ciclo, o succinato dever ser reconvertido a oxaloacetato e essa converso alcanada pelas trs reaes restantes.

enzimas) que armazenam energia e so utilizadas na fosforilao oxidativa, tabela 1 e figura 4.

Tabela 1 - Reaes que armazeno enegia na forma de GTP, NADH e FADH2. NADH e FADH2.

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As principais etapas do ciclo do cido ctrico 1: Oxalacetato (4 carbonos) Citrato (6 carbonos) O cido actico proveniente das vias de oxidaao de glicdios, lipdios e protenas, combinam-se com a coenzima a formando o Acetil - CoA. A entrada deste composto no ciclo de Krebs ocorre pela combinao do cido actico com o oxalacetato presente na matriz mitocondrial. Esta etapa resulta na formao do primeiro produto do ciclo de Krebs, o citrato. O coenzima A, sai da reao como CoASH. 2: Citrato (6 carbonos) Isocitrato (6 carbonos) O citrato sofre uma desidratao originando o isocitrato. Esta etapa acontece, para que a molcula de citrato seja preparada para as reaes de oxidao seguintes 3: Isocitrato cetoglutarato (5 carbonos) Nesta reao h participaao de NAD, o isocitrato sofre uma descaborxilao e uma desidrogenao transformando o NAD em NADH, liberando um CO 2 e origina como produto o alfacetoglutarato 4: cetoglutarato Succinato (4 carbonos) O -cetoglutarato sofre uma descarboxilao, liberando um CO 2. Tambm ocorre uma desidrogenao com um NAD originando um NADH, e o produto da reao acaba sendo o Succinato 5: Succinato Succinil - CoA O succinato combina-se imediatamente com a coenzima A, originando um composto de potencial energtico mais alto, o succionil-Coa. 6: Succinil-Coa Succinato Nesta reao houve entrada de GDP+Pi, e liberao de CoA-SH O succinil-CoA libera grande quantidade de energia quando perde a CoA, originando succinato. A energia liberada aproveitada para fazer a ligao do GDP com o Pi (fosfato inorgnico), formando o GTP, como o GTP no utilizado para realizar trabalho deve ser convertido em ATP, assim esta a nica etapa do ciclo de Krebs (CK) que forma ATP. 7: Succinato Fumarato Nesta estapa entra FAD O succinato sofre oxidaao atravs de uma desidrogenao originando fumarato e FADH2. O FADH2 formado apartir da reduo do FAD.

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8: Fumarato Malato O fumarato hidratado formando malato. 9: Malato Oxalacetato Nesta etapa entra NAD O malato sofre uma desidrogenaco originando NADH, a partir do NAD, e regenerando o oxalacetato.

Funo anablica do ciclo do cido ctrico Os compostos intermedirios do ciclo de Krebs podem ser utilizados como precursores em vias biossintticas: oxaloacetato e a-cetoglutarato vo formar respectivamente aspartato e glutamato. A eventual retirada desses intermedirios pode ser compensada por reaes que permitem restabelecer o seu nvel. Entre essas reaes, que so chamadas de anaplerticas por serem reaes de preenchimento, a mais importante a que leva formao de oxaloacetato a partir do piruvato e que catalisada pela piruvato carboxilase. O oxaloacetato alm de ser um intermedirio do ciclo de Krebs, participa tambm da neoglicognese. A degradao de vrios aminocidos tambm produz intermedirios do ciclo de Krebs, funcionando como reaes anaplerticas adicionais.

8.3 Cadeia Transportadora de Eltrons e Fosforilao Oxidativa

Lavoisier foi o primeiro a demonstrar que animais vivos consomem oxignio, gerando dixido de carbono. Mas, foi somente no comeo do sculo XX que demonstrou que as oxidaes biolgicas so catalisadas por enzimas intracelulares. Sabemos que a glicose completamente oxidada a CO2 por processos conhecidos como Gliclise e Ciclo do cido Ctrico (Figura 3). Examinaremos agora, como os eltrons so removidos e transportados, a partir da glicose, por processo de oxidao. A completa oxidao da glicose por oxignio molecular descrita pela seguinte equao redox:

Para ver mais claramente a transferncia dos eltrons, dividiremos a equao em duas. Na primeira reao os carbonos da glicose so oxidados:

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Na segunda, o oxignio molecular reduzido:

Nos sistemas vivos, o processo de transferncia de eltrons que conecta essas reaes parciais, ocorre atravs de um caminho complexo que culmina com a liberao de energia livre na forma de ATP (Adenosina Trifosfato). Os 12 pares de eltrons envolvidos na oxidao da glicose no so transferidos diretamente ao O2. Antes, eles so transferidos para as coenzimas NAD+ (Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo) e FAD (Flavina adenina Dinucleotdeo) para formar 10 NADH + 2 FADH2 (Tabela 1) nas reaes catalisadas pelas enzimas glicolticas e enzimas do ciclo do cido ctrico. Os eltrons passam, ento, para uma cadeia transportadora de eltrons onde, atravs da reoxidao do NADH e FADH2, participam de reduo-oxidao de cerca de 10 centros redox at reduzir O2 em H2O. Nesse processo, prtons so liberados da mitocndria. A energia livre estocada no gradiente de pH resultante leva sntese de ATP a partir de ADP e Pi atravs da Fosforilao Oxidativa. A reoxidao de cada NADH resulta na sntese de 3 ATPs, e a reoxidao de FADH2 produz 2ATPs, resultando em um total de 38 ATPs para cada glicose completamente oxidada a CO2 e H2O (incluindo ATPs produzidos na gliclise e 2 ATPs produzidos no ciclo do cido ctrico). Os NADH e FADH2 produzidos na oxidao da glicose e de outros substratos so reoxidados na mitocndria por um processo que compreende a remoo de seus prtons e eltrons: os prtons so liberados no meio e os eltrons so conduzidos por uma srie de transportadores de eltrons at o oxignio. Recebendo eltrons, o oxignio liga-se a prtons do meio formando gua. Cada um dos transportadores capaz de receber eltrons do transportador imediatamente anterior e transferi-los ao seguinte, constituindo assim uma cadeia chamada cadeia transportadora de eltrons. O doador de eltrons , invariavelmente, uma coenzima reduzida, e o aceptor final de eltrons, o oxignio. A maioria dos transportadores de eltrons tem natureza protica, contendo grupos prostticos associados cadeia polipeptdica; a xido-reduo do composto se processa no grupo prosttico. Numa terceira fase, designada por fosforilao oxidativa, a membrana interna da mitocndria desempenha o papel principal. Como se viu, a mitocndria possui duas membranas limitantes: a membrana externa e a membrana interna. Esta ltima forte-

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mente pregueada, pelo que a sua superfcie total muito superior da membrana externa. As referidas pregas so comumente designadas por cristas mitocondriais. Entre as duas subsiste um espao, designado por espao intermembranar. O interior da mitocndria encerra a matriz mitocondrial. precisamente na matriz mitocondrial que se situa o genona da mitocndria, herana da sua condio procaritica, ribossonas e, para alm de muitas outras substncias, os enzimas e os coenzimas que intervm nas reaces acima descritas, nomeadamente o Ciclo de Krebs. A membrana interna da mitocndria possui, como todas as membranas, protenas intrnsecas e extrnsecas. Aquelas que intervm na fosforilao oxidativa possuem a particularidade de serem susceptveis de captar e de ceder electres. Dada a mobilidade que lhes assiste, em virtude da fluidez da membrana, elas podem contactar umas com as outras e operar as transferncias de electres segundo uma escala crescente de potenciais redox: a cadeia respiratria. Ao longo desta cadeia, os electres deslocam-se desde o NADH2 ou um FADH2, com potencial redox negativo at ao oxignio (aceitador final) que possui um potencial redox positivo, de tal forma que a transferncia de electres do NADH2 ao oxignio se efectua com uma grande variao de energia livre: ?G = - 52 Kcal.M-1. Essa energia utilizada para a sntese de ATP. Os diferentes componentes da cadeia agrupam-se em 3 complexos, que operam sequencialmente:

Complexo I O Complexo I constitudo por : a) a NADH-desidrogenase que actua conjugadamente com um coenzima, a Flavina Mononucletido (FMN) b) duas (ou trs) protenas Fe/S, isto , protenas que tm como grupo prosttico, associaes de ferro e enxofre, com potenciais redox diferentes. c) a Ubiquinona ou Coenzima Q, molcula lipfila, relativamente pequena, solvel na bicamada de fosfolpidos. A ubiquinona goza de grande mobilidade, podendo deslocar-se de uma das faces da membrana, outra. Num primeiro tempo, a NADH-desidrogenase catalisa a oxidao dos NADH2 em NAD. Os 2 electres e os 2 protes da resultantes so captados pela FMN, que deste modo se v reduzida em FMNH2. A seguir, as protenas de Fe/S, detentoras de potenciais redox superiores ao da FMNH2, captam os electres. Cada protena de Fe/S s fixa 1 electro de cada vez.

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A FMN, ao perder os seus dois electres a favor das protenas de Fe/S, perde igualmente os dois protes, do lado oposto da membrana, isto , no espao intermembranar. Diz-se que os protes foram translocados da matriz para o espao intermembranar. A ubiquinona susceptvel de sofrer dois graus de reduo, passando pelos estados de quinona, semi-quinona e hidroquinona, transportando assim dois electres que lhes so cedidos pelas protenas Fe/S, e dois protes capturados no meio matricial

Complexo II O complexo II, ou complexo b-c1, constitudo pelos citocrmios b , c1e c.Os citocrmios so protenas que possuem como grupo prosttico, um heme, isto , uma estrutura molecular tetraporfrica (como se encontra na hemoglobina) que encerra um io ferro, o qual se pode encontrar alternativamente no estado ferroso Fe2+ ou no estado frrico Fe3+, consoante se encontre reduzido ou oxidado. Fe++ Fe+++ + eO citocrmio b uma protena intrnseca com um potencial redox superior ao da hidroquinona. Consequentemente, o citocrmio b capaz de roubar um eltron hidroquinona. Neste ato, o prton correspondente translocado para o espao intermembranar. O citocrmio c1, por sua vez, sendo detentor de um potencial redox superior ao do citocrmio b, est em condies de oxidar este ltimo. Finalmente o citocrmio c, que uma protena extrnseca, oxida o citocrmio c1.

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Protenas

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Note-se que, como os citocrmios s transportam um eltron de cada vez, ser necessrio que cada um sofra duas oxido-redues para que a ubiquinona seja descarregada dos seus 2 eltrons e 2 prtons.

Complexo III O complexo III, ou complexo citocrmio-oxidase, constituido pelos citocrmios a e a3. O citocrmio a3, em lugar de ferro, tem cobre e , de todos, o que possui maior poder redox. Os eltrons transitam do citocrmio c, para o citocrmio a e, finalmente, para o citocrmio a3. Desconhece-se o mecanismo pelo qual o complexo III, pela passagem de e eltrons, transloca 2 prtons para o espao intermembranar. Tal fato poder estar relacionado com alteraes alostricas ao nvel das protenas dos citocrmios. Por ltimo, o citocrmio a3 cede os eltrons ao oxignio, havendo ento lugar formao de gua.

Como se viu, uma parte desta energia foi empregue na translocao de prtons, da matriz para o espao intermembranar (prtons extrados dos NADH2 e FADH2 e prtons provenientes da fase aquosa da matriz). A oxidao de um NADH2 traduz-se na translocao de 6 prtons; da oxidao de um FADH2 resulta a translocao de 4 prtons.

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Sendo a membrana mitocondrial interna, impermevel aos ons, a contnua translocao de prtons para o espao intermembranar, gera uma desigualdade de concentrao e, consequentemente, um gradiente de cargas eltricas ao qual corresponde um potencial de membrana de 150 mV. A energia libertada pelo transporte de eltrons , assim, convertida num gradiente electroqumico ou fora protomotriz (designao obtida por analogia com a fora hidromotriz das barragens hidroeltricas). Os protes regressam matriz atravs de estruturas proteicas integradas na membrana, os ATPsomas, em cuja constituio se encontram ATPases, isto , enzimas que catalisam a fosforilao de ADP em ATP. Atravs dos ATPsomas, a energia inerente ao gradiente inico convertida em ligaes fosfato. Os ATPsomas funcionam assim (em analogia com as barragens hidroelctricas) como turbinas produtoras de ATP. ADP + Pi ATP G = - 8 Kcal M-1

Verifica-se ser suficiente a fora protomotriz associada a 2 protes translocados para se sintetizar 1 ATP. Portanto, por cada NADH2 oxidado, formam-se 3 ATP. Diferentemente, a oxidao dos FADH2, apenas transloca 4 protes, da resultando, consequentemente, 2 ATP. Tendo em conta que a sntese de 1 ATP a partir de ADP e de fosfato inorgnico consome 8 Kcal Mol-1, a produo de 3 ATP dever consumir 24 Kcal Mol-1 . Podemos agora calcular o rendimento inerente oxidao de 1 NADH2: 24.000 / 52.000 x 100 = 46% O transporte de eltrons inibido especificamente por certas substncias que atuam em pontos precisos da cadeia respiratria.

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Os mais conhecidos so a rotenona (inseticida) e o amital (barbitrico), que bloqueiam o transporte entre o NAD e a ubiquinona (CoQ), a antimicina (antibitico) que bloqueia o transporte entre os citocrmios b e c1, e o cianeto e o nonxido de carbono (CO) que bloqueiam o transporte entre o Complexo III e o oxignio.

O ciclo do cido ctrico e a respirao A influncia do ciclo do cido ctrico no processo da respirao celular comea com a gliclise, processo ocorrido no citoplasma de uma clula, onde a glicose, obtida atravs dos alimentos ingeridos, passa por uma srie de dez reaes qumicas que culminam na formao de duas molculas de cidos pirvico. a partir desse ponto que comea a participao do ciclo de Krebs na respirao propriamente dita. O ciclo de Krebs ocorre dentro da mitocndria, logo as molculas de cido pirvico tm que entrar nela. Esse processo s ocorre quando h molculas de oxignio suficientes para cada molcula de glicose, se h, na entrada do cido pirvico na mitocndria faz com que o oxignio reaja com o cido formando gs carbnico e libera os eltrons dos tomos de hidrognio presentes na frmula da glicose. Esses eltrons so transportados pelo NADH e o FADH, duas molculas transportadoras. Os eltrons ento se responsabilizam pela unio de mais um tomo de fsforo, com uma molcula de adenosina difosfato (ADP) formando a adenosina trifosfato o famoso ATP. Esta molcula de ATP ento que fornecer a energia para a vida da clula e o transporte ativo de substncias pelo corpo.

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Unidade 9

METABOLISMO DE LIPDEOS

LICENCIATURA

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Unidade 9 METABOLISMO DE LIPDEOS

9.1 Digesto e Absoro
As clulas podem obter cidos graxos por meio de trs fontes. 1 - gorduras presentes na alimentao. 2 - gorduras armazenadas nas clulas na forma de gotculas. 3 - (nos animais) gorduras recm-sintetizadas em um rgo e exportadas para outro. Obtm gorduras pela ingesto, armazenando-as no tecido adiposo, na forma de triacilgliceris. O fgado pode converte os excessos de carboidratos a gorduras. Em mdia 40% ou mais da energia diria necessria a um ser humano, suprida pelos triacilgliceris. O fgado, corao e o msculo esqueltico obtm mais da metade de suas energias necessrias dos triacilgliceris. Apesar da identificao de uma lipase lingual secretada pelas clulas da base da lngua, no h digesto salivar dos lipdeos devido a no haver um refluxo para a boca. Dessa forma, a identificao de uma lipase gstrica provavelmente corresponde quela secretada pela lngua. Porm, o pH extremamente cido do estmago no possibilita a ao integral desta lipase gstrica, diminuindo a velocidade de sua ao enzimtica, havendo apenas a quebra de algumas ligaes de steres de cidos graxos de cadeia curta. Em crianas lactentes, entretanto, o pH gstrico aproxima-se bastante da neutralidade o que indica que a lipase gstrica pode ter ao na digesto das gorduras do leite. Mesmo assim, esta digesto no eficiente devido as gorduras no estarem emulsificadas o que dificulta a ao desta enzima hidroltica. A ao gstrica na digesto dos Lipdeos, portanto, est relacionada com os movimentos peristlticos do estmago, produzindo uma emulsificao dos lipdeos, dispersando-os de maneira equivalente pelo bolo alimentar. A chegada do bolo alimentar acidificado no duodeno induz a liberao de hormnio digestivo colecistocinina (um peptdeo de 33 aminocidos, tambm denominado pancreozimina) que, por sua vez, promove a contrao da vescula biliar, liberando a bile para o duodeno.

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Os cidos biliares so derivados do colesterol e sintetizados no fgado. So denominados primrios (cido clico, tauroclico, glicoclico, quenodesoxiclico e seus derivados) quando excretados no duodeno, sendo convertidos em secundrios (desoxiclico e litoclico) por ao das bactrias intestinais. A bile, ainda, excreta o colesterol sanguneo em excesso, juntamente com a bilirrubina (produto final da degradao da hemoglobina). A colecistocinina possui, ainda, funo de estmulo do pncreas para a liberao do suco pancretico, juntamente com outro hormnio liberado pelo duodeno, a secretina. O suco pancretico possui vrias enzimas digestivas (principalmente proteases e carboidratases) sendo a lipase pancretica a responsvel pela hidrlise das ligaes steres dos lipdeos liberando grandes quantidades de colesterol, cidos graxos, glicerol e algumas molculas de mono-acil-gliceris (Figura 1). Os lipdeos livres so, ento, emulsificados pelos sais biliares em micelas e absorvidos pela mucosa intestinal que promove a liberao da poro polar hidrfila (sais biliares) para a circulao porta heptica e um processo de ressntese dos lipdeos absorvidos com a formao de novas molculas de tri-acil-gliceris e steres de colesterol, que so adicionados de uma protena (apo-protena 48, ou aop-48) formando a lipoprotena quilimocron, que absorvida pelo duto linftico abdominal, seguindo para o duto linftico torcico e liberado na circulao sangnea ao nvel da veia jugular.

Figura 1 - Da digesto a absoro dos cidos graxos.

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9.2 Mobilizao de Lipdeos

Quando h necessidade de energia a partir dos cidos graxos, a mobilizao da gordura inicia-se pela hidrlise de triacilglicerol dos adipcitos, formando cidos graxos e glicerol. Primeiro a lipase sensvel a hormnio promove a remoo do cido graxo da posio 1 ou 3, ento as lipases adicionais removem cidos graxos do mono ou diacilglicerol, formando glicerol e cidos graxos livres. Os cidos graxos livres movem-se atravs da membrana celular do adipcito e ligam-se albumina no plasma, que os transportam aos tecidos, onde os cidos graxos se difundem para as clulas e so oxidados para obteno de energia. O crebro e outros tecidos nervosos, eritrcitos e medula adrenal no utilizam cidos graxos plasmticos para obter energia. O glicerol transportado at o fgado, onde fosforilado e utilizado novamente. Os hormnios, epinefrina e glucagon secretados quando se tm o nvel baixo de glicose no sangue, ativam a enzima adenilato ciclase na membrana plasmtica do adipcito, aumentando a concentrao intracelular de triacilgliceris. Desta maneira os cidos graxos so liberados do adipcito para o sangue, onde se liga a protena soroalbumina para ser transportada na corrente sangunea. Quando chega a um tecido especfico, os cidos graxos so liberados das protenas e difundem-se para o citosol das clulas nas quais serviro de combustvel (Figura 2).

Figura 2 - Transporte de cidos graxos pela protena soroalbumina

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9.3 cidos Graxos Ativados e Transportados para o Interior das Miticondrias

Os cidos graxos so ativados nas membranas mitocndriais externa por esterificao com a Coenzima A, formando tiosteres acil Coenzima A graxos. cidos graxos + CoA + ATP acil-CoA graxo + AMP + 2Pi

Uma vez que a b-oxidao ocorre na matriz mitocondrial, o cido graxo deve ser transportado atravs da membrana mitocondrial interna (MMI) por um transportador especfico denominado carnitina. O processo de transporte denominado lanadeira da carnitina, um grupo acil transferido da coenzima A citoslica carnitina pela carnitina aciltransferase I, formando acilcarnitina, tal enzima est localizada na superfcie externa da MMI. O grupo acilcarnitina transportado atravs da membrana matriz, onde transferido a outra molcula de coenzima A pela carnitina aciltransferase II, na superfcie interna da MMI. O cido graxo (acil CoA graxa) deve ser transportado atravs da MMI por um transportador especfico denominado carnitina e o processo de transporte denominado lanadeira da carnitina (Figura 3).

Figura 3 - Transporte de cidos graxos, pela acil-carnitina transferase.

9.4 Gorduras da Dieta so Absorvidas no Intestino Delgado

As apolipoprotenas so protenas que se ligam aos lipdeos e so responsveis pelo transporte destes. H vrias combinaes entre lipdeos-protenas, e produzem partculas de densidades diferentes que so denominadas de quilomicrons, os mais importantes so: VLDL, IDL, LDL e HDL. As lipoprotenas de baixa densidade (LDL) (Figura 3) so capturadas e degradadas pelas clulas por meio de endocitose sendo mediada por receptores de LDL, em clulas de mamferos a apolipoprotena do LDL liga-se a um receptor de membrana, promovendo a captao do LDL, o endossomo entrega o LDL ao

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lisossomo, reciclando o receptor. A degradao lisossomal do LDL libera colesterol, que incorporado s membranas ou reesterificados e armazenados nas lipoprotenas (Figura 4).

Figura 4 - Lipoprotenas de baixa densidade (LDL) low density lipoprotein.

O LDL rico em colesterol, steres de colesteril e apoB-100 e so reconhecida por receptores especficos (Figura 5) .

Figura 5 - Degradao de apolipoproteina LDL por meio de endocitose.

Lipoprotenas de alta densidade (HDL) high density lipoprotein. O HDL uma apolipoprotena rica em protena com pouco colesterol. Sua funo primordial no metabolismo de transportar as apolipoprotenas (LDL) de volta ao fgado, para ser

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metabolizadas, atuando assim desta forma na preveno de formao de placas de gorduras nas artrias (Figura 6).

Figura 6 - Lipoprotenas de alta densidade (HDL) high density lipoprotein.

Essas lipoprotenas (LDL e HDL) podem ser separadas por centrifugao, pois apresentam densidades diferentes.

9.5 Local da B-Oxidao (nos Peroxissomos)

Os peroxissomos so compartimentos celulares enxlausurados por membranas existentes em animais e plantas; neles o perxido de hidrognio produzido por oxidao dos cidos graxos e, imediatamente a seguir so destrudos enzimaticamente pela catalase, este processo consiste de quatro passsos: 1 - desidrogenao; 2 - adio de gua dupla ligao formada; 3 - oxidao do b-hidroxiacil-coA, a uma cetona; 4 - clivagem tioltica atravs da coenzima a. A diferena entre as vias existentes na mitocndria e no peroxissomo est no primeiro passo (Figura 7).

- OXIDAO Ocorre em trs estgios: 1 - os cidos graxos sofrem a remoo oxidativa, de sucessivas unidades de dois tomos de carbonos na forma de acetil-coA, iniciando pela extremidade carboxila da cadeia do cido graxo. 2 - oxidao do cidos graxo os resduos acetila do acetil-coA so oxidados at CO2, atravs do ciclo do cidos ctrico.

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Figura 7 - Oxidao dos cidos graxos nos peroxisomas.

3 - os dois primeiros estgios produzem os transportadores de eltrons reduzidos (NADH e FADH2) e assim transferem os eltrons para a cadeia respiratria mitocndrial, sendo estes eltrons transportados at o oxignio (Figura 8).

Figura 8 - Degradao dos cidos graxos at produo de ATP.

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A -oxidao dos cidos graxos saturados tm quatro passos: 1 - desidrogenao produz uma dupla ligao entre os tomos de carbonos e - liberando um trans 2-enoil-coa. enzima responsvel acil-coA desidrogenase. 2 - uma molcula de gua adicionada dupla ligao do trans2 -enoil-coa, formando o esteroismero l do -hidroxiacil-coa (ou 3-hidroxiacil-coa). enzima responsvel enoil CoA hidratase. 2 - o l- -hidroxiacil-coa desidrogenado para formar -hidroxiacil-coa desidrogenase. 4 - oxidao dos cidos graxos catalisada pela acil-coA acetiltransferase (comumente chamado tiolase). Esses quatro passos so repetidos para produzir acetil-coA e ATP. Palmitoil-coA + 7 coA + 7 O2 + 35 Pi + 35 ADP 35 ATP + 42 H2O 8Acetil-coA +

Oxidao do palmitoil-coA at 8 molcula de acetil-coA, incluindo a transferncia de eltrons e a oxidao.

9.6 Oxidao dos cidos Graxos Insaturados

Requer duas reaes adicionais: Ligao dupla, na conformao cis, no sofre ao da enoil-coA hidratase precisa de duas enzimas: A primeira uma isomerase, e a segunda uma redutase (Figura 9).

Figura 9 - Oxidao de cidos graxos insaturados.

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9.7 Regulao dos cidos Graxos

No fgado, o acil-coA graxo formado no citosol tem duas grandes vias abertas: 1 - a -oxidao pelas enzimas da mitocndria. 2 - a converso em triacilgliceris e fosfolipdios pelas enzimas do citosol. - uma vez que os grupos acil-graxos entram na mitocndria, certa a oxidao deste at acetil-coA. - um animal bem suprido com carboidratos, qualquer excesso de glicose que no pode ser armazenado como glicognio, convertido em cidos graxos citoslicos para serem armazenados na forma de triacilgliceris. - duas das enzimas da b-oxidao tambm so reguladas: - quando a relao [NADH]/[NAD+] est alta, a b-hidroxiacilcoA desidrogenase inibida. - alta concentrao de acetil-coA inibem a tiolase.

CORPOS CETONICOS So formados no fgado; durante a oxidao dos cidos graxos nos animais, o acetil-CoA formado pode ir para o ciclo do cido ctrico, ou pode ser convertido nos chamados corpos cetnicos (acetoacetato, D-b-hidroxibutirato e acetona), e so exportados para outros tecidos atravs da circulao sangnea. O crebro que normalmente utiliza a glicose, como fonte de combustvel, em condies de fome, pode adaptar-se para usar o acetoacetato ou o D-b-hidroxibutirato na obteno de energia.

Anomalias - a superproduo de corpos cetnicos no diabetes, no tratado ou durante um jejum prolongado, pode levar cetose e acidose.

9.8 Biossntese de Lipdios

Passamos agora da gerao de energia metablica, para a biossntese de precursores de macromolculas. Discutiremos a biossntese de trs componentes das membramas biolgicas fosfoglicerdeos, esfingolipdios e colesterol.

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A via da biossntese dos cidos graxos no simplesmente a inverso da oxidao dos cidos graxos. A biossntese dos cidos graxos e a sua oxidao ocorrem por vias diferentes, so catalizadas por diferentes enzimas e ocorrem em compartimentos distintos das clulas. Na biossntese dos cidos graxos tm a participao do malonil-CoA.

Sendo este formado a partir do acetil-CoA e HCO3-

A BIOSSNTESE DOS CIDOS GRAXOS 1 - condensao dos grupos ativados acetila e malonil para formar um grupo acetoacetil-ACP, liberando CO2 - reao catalizada pela enzima -cetoacil-ACP sintase. 2 - reduo do grupo carbonila a acetoacetil-acp sofre reduo do grupo carbonila em C-3 para formar D- -hidroxibutiril-ACP. - reao catalizada pela enzima -cetoacil-ACP redutase, NADPH (doador de e-). 3 - desidratao eliminao de H2O, saindo OH do C-3 e H do C-2, e assim formando a dupla ligao no trans- 2-butenoilACP. - enzima responsvel -hidroacil-ACP desidratase. 4 - reduo da dupla ligao a dupla ligao reduzida (saturada) para formar butirilACP, pela ao da enzima enoil-ACP redutase, sendo NADPH doador de eltrons (Figura 11). Assim as reaes do cido graxo sintase so repetidas para formar o palmitato, atravs de reao de condensao do grupo butiril, com a malonil-CoA, liberando CO2. Sete ciclos produzem o grupo palmitoil

Figura 11 - Biossntese dos cidos graxos.

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saturado com 16 tomos de carbono. Tambm formar o estearato com 18 tomos de carbono. Reao global: 8 acetil-CoA + 7 ATP + 14 NADPH + 14 H+ CoA + 6 H2O + 7 ADP + 7 Pi + 14 NADP+ palmitato + 8

A biossntese dos cidos graxos requer acetil-CoA e o fornecimento de energia qumica em duas formas: ATP e NADPH. ATP liga CO2 ao acetil-CoA na sntese do malonil-CoA. NADPH reduz a dupla ligao. Local de stese dos cidos graxos: Nos animais ocorre no citosol. Nos vegetais ocorre no cloroplastos.

9.9 Regulao da Biossntese dos cidos Graxos

A reao catalizada pela enzima acetil-CoA carboxilase, sendo est responsvel pela velocidade na biossntese dos cidos graxos e tambm um stio importante de regulao. Alta concentrao do cido graxo (palmitoil-CoA) e os hormnios glucagon e adrenalina agem como inibidores da enzima acetil-CoA carboxilase inativando e desacelerando a sntese de cidos graxos (palmitoil-CoA), j o citrato e a insulina so ativadores das enzimas acetil-CoA carboxilase e do complexo piruvato desidrogenase, respectivamente. Enquanto que, alta concentrao de acetil-CoA e de ATP na mitocondria pode levar o citrato a ser transportado para fora da mitocndria, sendo um precursor do acetil-CoA citoslico, agindo assim como um sinal para ativao da enzima acetilCoA carboxilase. A sntese dos cidos graxos muito importante, pois fornece precursores para os lipdeos das membranas, este processo est envolvido no crescimento celular com a formao das membranas (Figura 12). Transporte do acetil-coA, proveniente da degradao de glicose e aminocidos para do interior da

Figura 12 - Regulao da Biossntese dos cidos graxos.

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mitocndria para o citosol, na matriz mitocondrial, dos grupos acetila para sntese de cido graxos (Figura 13).

Figura 13 - Transporte dos grupos acetila para sntese de cido graxos.

A insulina promove a converso de carboidratos em triacilglicerois, pessoas com diabetes, no utiliza a glicose adequadamente e tm falhas em sintetizar cidos graxos a partir de carboidratos ou aminocidos.

9.10 Biossntese dos Esterides, a partir dos Isoprenides

O colesterol essencial em muitos animais, inclusive no homem, no se obtm atravs da dieta, mas o fgado pode sintetiza-lo, a partir de precursores mais simples, seu precursor o acetato, mas tem como intermedirio chave o isopreno.

Experimentos com acetato marcado com 14C fornece o esquema dos passos enzimticos que ocorre na biossnte do colesterol, este processo ocorre em 4 estgios (Figura 14).

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Figura 14 - Biossntese dos esterides.

1 - trs unidades de acetato se condesam para formar mevalonato. 2 - converso do mevalonato em unidades de isopreno ativado. 3 - formao do esqualeno (seis unidades com cinco tomos de c.) 4 - a ciclizao do esqualeno formando o colesterol. Alm do colesterol pode-se obter outros esterides, a partir do esqualeno.

DESTINO DO COLESTEROL A sntese ocorre no fgado parte sintetizada incorporada nas membranas dos hepatcitos.

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A maior parte do colesterol sintetizado, exportado em forma de cidos biliares e steres do colesterol, ambos so formados no fgado, os steres do colesterol formado no fgado atravs da ao da enzima acil-coA-colesterol acil transferase (acat) (Figura 15 e 16).

Figura 15 - Produo de colesterol, atravs da inibio de HMG-CoA

Figura 16 - Inibio da produo de colesterol, atravs da ativao de HMG-CoA

Os steres do colesterol so armazenados no fgado ou transportados para outros tecidos. O colesterol utilizado para sntese de membrana, tambm precursor da vitamina D.

A biossntese do colesterol regulada por vrios fatores: A biossntese do colesterol consome energia, e regulada pela concentrao de colesterol intracelular e pelos hormnios glucagon e insulina, sendo o passo limitante na via para o colesterol a converso em mevalonato do -hidroxi- -metilglutaril-coA, enzima reguladora da via HMG-coA redutase.

HMG-coA tambm regulada pelos hormnios. glucagon estimula a fosforilao (forma inativa). insulina promove a desfosforilao, (forma ativa), ativando a enzima e favorecendo a sntese do colesterol. O aumento de colesterol em quantidades excessivas, das necessidades do organismo, pode desenvolver acmulos patolgicos na paredes dos vasos sangneos (placas aterosclerticas) obstru-

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indo esses vasos (aterosclerose), levando ao ataque cardaco pela obstruo das artrias coronarianas, uma das causas principais de morte. A doena hereditria hipercolesterolemia familiar - os nveis de colesterol sangneo so extremamente elevados j na infncia desenvolve a aterosclerose severa. O receptor da LDL defeituoso nesses indivduos no ocorre a captao realizada pela HDL, mediada pelo receptor do colesterol. Tratamento lovastatina pode diminuir em at 30% o colesterol do soro nos pacientes.

Voc Sabia
O tratamento combinado de lovastatina e resinas que se podem associar ao colesterol resulta num decrscimo dramtico de 50 a 60 % dos nveis de soro colestrico. Outros inibidores recentemente desenvolvidos da HMG-CoA redutase, como a pravastatina e a simvastatina, drogas conhecidas colectivamente por estatinas, produzem resultados ainda mais eficientes.

Curiosidade
Cientistas acreditam que quando ingerido, o Reveratral (substncia existente nas cascas das uvas), tal como o DES (Dietilestilbestral), contribui para o BOM COLESTEROL (elevar a concentrao de HDL).

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Unidade 10

METABOLISMO DOS COMPOSTOS NITROGENADOS: SNTESE E DEGRADAO DE AMINOCIDOS

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Unidade 10 METABOLISMO DOS COMPOSTOS NITROGENADOS: SNTESE E DEGRADAO DE AMINOCIDOS

10.1 Sntese e Degradao de Aminocidos
Alm de serem constituintes das protenas os aminocidos podem ser usados como precursores de molculas biolgicas azotadas: hemos, nucletidos, glutationa e animas fisiologicamente ativas. O excesso de aminocidos da dieta no armazenado nem excretado: convertido em piruvato, oxaloacetato, -cetoglutarato. Conseqentemente, os aminocidos so tambm precursores de glucose, cidos graxos e corpos cetnicos. Podem por isso ser usados tambm para produo de energia. O processo envolve a eliminao do grupo amina (desaminao), incorporao do amnio assim transformando em uria para posterior excreo e converso do esqueleto carbonado em intermedirios metablicos. A desaminao da maior parte dos aminocidos envolve uma transaminao prvia, que consiste na transferncia do seu grupo amino para um -cetocido, produzindo o aminocido correspondente ao -cetocido e o -cetocido correspondente ao aminocido original. Geralmente o aceitador do grupo amina o cetoglutarato, que convertido em glutamato:

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As aminotransferases usam piridoxal-5'-fosfato, um derivado da vitamina B6. O piridoxal est tambm envolvido em reaes de descarboxilao de aminocidos, e de eliminao das suas cadeias laterais. tambm o cofator envolvido na reao da glicognio fosforilase, embora neste caso o mecanismo de atuao seja diferente. As aminotransferases so especficas para cada tipo de aminocido, produzindo os -cetocidos correspondentes. No entanto, a maioria s aceita -cetoglutarato ou (em menor extenso) oxaloacetato, como aceitador de grupo amina, produzindo glutamato ou aspartato. Por conseguinte, os grupos amina da maior parte dos aminocidos so utilizados para produzir glutamato ou aspartato, que por sua vez podem ser inter-convertidos pela glutamato-aspartato aminotransferase.

Existe um grupo de aminotransferases musculares que usa piruvato (que tambm um -cetocido) como aceitador de amina. O aminocido produzido por estas (a alanina), lanado para a corrente sangunea e absorvido pelo fgado, onde transaminado a piruvato, que ser usado na gluconeognese. A glucose assim produzida depois oxidada a piruvato pelo msculo, completando o ciclo da alanina. O grupo amina depois utilizado para a sntese da uria. O resultado do ciclo da alanina o transporte de azoto do msculo para o fgado.

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A transaminao conserva os grupos amina. A desaminao levada a cabo principalmente pela glutamato desidrogenase, uma enzima mitocondrial que usa quer NAD+ quer NADP+.

O azoto libertado sob a forma de amonaco nesta reao deve ser excretado. Muitos animais aquticos excretam-no simplesmente sob a forma de amnio. Outros animais, que no tm tanta gua sua disposio, convertam o amnio em produtos menos txicos, e que por isso no precisam de tanta gua para serem excretados. Um desses produtos a uria. As causas da toxicidade do amnio no esto bem elucidadas, mas sabe-se que quando a concentrao de amnio muito alta, este reage com o glutamato para formar glutamina, numa reao catalisada pela glutamina sintase.

Para repor os nveis de glutamato, outros aminocidos reagem com o -cetoglutarato por transaminao. O resultado o progressivo esgotamento das reservas de -cetoglutarato e glutamato, com conseqncias particularmente lesivas a nvel cerebral. A uria sintetizada no fgado, que depois a secreta para a corrente sangunea, de onde ser excretada pelo rim. A reao global do ciclo da uria :

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O primeiro passo a formao de carbamoil-fosfato, uma forma ativada de azoto:

O grupo carbamoil ento transferido para a ornitina para produzir citrulina. Esta duas molculas so aminocidos especiais, i.e., no fazem parte da estrutura de protenas.

Estas duas primeiras reaes ocorrem na mitocndria. A citrulina transferida para o citoplasma, onde ocorre a parte restante do ciclo. O segundo tomo de azoto presente na uria proveniente do aspartato:

Nesta reao o ATP hidrolizada a AMP, em vez de ADP (como acontece normalmente). Como o AMP pode receber um fosfato do ATP, dando origem a 2 ADP, hidrolizar ATP a AMP equivalente a hidrolizar 2 ATP a 2 ADP. O argininosuccinato depois clivado em arginina e fumarato:

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O fumarato pode entrar no ciclo de Krebs para produzir NADH e oxaloacetato, que por sua vez pode ser reconvertido em aspartato por transaminao. A hidrlise da arginina produz uria e ornitina, que depois de reentrar na mitocndria pode recomear o ciclo.

O ciclo da uria tem um elevado custo energtico, equivalente hidrlise de 4 ATP a 4 ADP. No entanto, este custo pode ser recuperado na cadeia transportadora de eltrons, uma vez que um NADH produzido na desaminaso do glutamato e outro NADH na posterior oxidao do fumarato a oxaloacetato, o que equivalente a cerca de 6 ATP.

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Sntese e degradao de derivados de aminocidos com interesse biolgico Alguns aminocidos sofrem, numa pequena percentagem, transformaes qumicas originando substncias que tm uma enorme importncia em biologia humana e medicina. Alguns destes derivados, como a creatina e a carnitina intervm no metabolismo energtico. Outros derivados de aminocidos como o cido aminobutrico (GABA), a histamina, a dopamina , a noradrenalina, a adrenalina, a serotonina (ou 5-hidroxi-triptamina) e a melatonina so segregados em determinadas clulas exercendo os seus efeitos quando se ligam a receptores da membrana celular de outras clulas. Alguns deles so neurotransmissores: so sintetizados em neurnios e so vertidos na fenda sinptica provocando efeitos quando se ligam em receptores especficos da membrana de outros neurnios, do prprio neurnio que os segregou ou de outras clulas. No caso do monxido de azoto (NO) no existem receptores membranares: o seu efeito exerce-se quando se liga a uma enzima do citoplasma das clulas musculares lisas (a cclase do guanilato) ativando-a. O papel biolgico mais conhecido do glutatio a sua ao antioxidante. Na sntese de muitos destes derivados intervm enzimas que catalisam reaes muito semelhantes entre si. Uma destas reaes catalisada por descarboxlases que catalisam a libertao (na forma de CO2) do grupo carboxlico (carbono 1) de aminocidos originando aminas. So exemplos a descarboxilao do glutamato (originando GABA), da histidina (histamina), da L-dopa (dopamina) e do 5-hidroxitriptofano (serotonina). Outra das reaes comuns na sntese (e degradao) de muitos destes derivados de aminocidos catalisada por transferases de metila em que o doador de metila a metionina ativada ( Sadenosil-metionina ). A S-adenosil-metionina forma-se por ao cataltica da adenosiltransfrase da metionina (ATP + metionina S-adenosil-metionina + Pi + PPi). Transferases de metila dependentes da S-adenosil-metionina (que, ao ceder o metila, origina S-adenosilhomocistena) esto envolvidas na sntese de creatina (guanidoacetato creatina), da carnitina (lisina trimetil-lisina), da adrenalina (noradrenalina adrenalina) e da melatonina (acetilserotonina melatonina). O mesmo tipo de enzimas tambm pode estar implicado na degradao de derivados aminoacdicos; tal acontece nos casos da histamina (Nmetiltransfrases) e das catecolaminas (catecol-O-metil-transfrase). Reaes de hidroxilao catalisadas por mono-oxignases existem nas vias metablicas que levam formao das catecolaminas (tirosina L-dopa e dopamina noradrenalina), da serotonina e

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melatonina (triptofano 5-hidroxi-triptofano), do monxido de azoto (arginina citrulina + NO) e da carnitina. A creatina um aminocido que contm um grupo guanidina e na sua sntese intervm trs aminocidos (glicina, arginina e metionina) e duas transferases. No primeiro passo ocorre a transferncia do grupo amidina da arginina para a glicina (arginina + glicina guanidoacetato + ornitina) formando-se guanidoacetato; no segundo o guanidoacetato aceita um grupo metila da S-adenosilmetionina (guanidoacetato + S-adenosil-metionina creatina + S-adenosilhomocistena). A creatina e o seu derivado fosforilado (a fosfocreatina) tm, nomeadamente no tecido muscular, um papel importante no metabolismo energtico. A ligao entre o fosfato e a creatina na fosfocretina designa-se de fosfamida e , tal como a ligao fosfoanidrido, uma ligao rica em energia. A fosforilao da creatina ocorre por ao cataltica da cinase da creatina (ATP + creatina fosfocreatina + ADP) e a reao fisiologicamente reversvel. Quando a velocidade de hidrlise do ATP aumenta durante os primeiros segundos de um exerccio muscular violento as concentraes dos compostos envolvidos fazem com que a reao evolua no sentido em que se forma ATP consumindo-se fosfocreatina; o contrrio acontece quando se recupera do esforo. A creatina e a fosfocreatina so substncias com grupos qumicos com carga negativa; no caso da creatina a sua passagem atravs das membranas celulares est dependente da ao de transportadores. Por processos no enzmicos, em cada dia, uma pequena percentagem da creatina e da fosfocreatina d origem a uma substncia sem carga que difunde atravs das membranas: a creatinina. A velocidade de formao de creatinina num mamfero proporcional quantidade total de creatina e fosfocreatina e proporcional massa muscular. O doseamento da concentrao de creatinina plasmtica e a avaliao da sua excreo na urina so usados na clnica para avaliar a funo renal. A carnitina um aminocido hidroxilado que contm o grupo amina trimetilado. Forma-se no fgado e rim numa via metablica complexa (em que intervm uma desidrognase e monooxignases de funo mista) a partir da trimetil-lisina. Por sua vez, a trimetillisina origina-se quando da hidrlise de protenas em que resduos lisina sofreram metilao no grupo 6-amina por ao de transferases de metila: 3 S-adenosil-metionina + resduo de lisina 3 Sadenosilhomocistena + resduo de trimetil-lisina. No transporte da carnitina do fgado e rim para os outros tecidos intervm transportadores especficos. A carnitina desempenha um papel chave na oxidao dos cidos gordos e na sntese de corpos cetnicos. O

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transporte dos cidos gordos atravs da membrana mitocondrial interna implica a transferncia de resduos acila do acil-CoA para a carnitina (carnitina acil-transferase I), o transporte de acil-carnitina em troca com carnitina e a regerao do acil-CoA no interior da mitocndria (carnitina aciltransferase II). O cido -aminobutrico (GABA) um neurotransmissor2 que sintetizado em determinados neurnios do SNC a partir do glutamato por ao de uma descarboxlase (glutamato GABA + CO2). No catabolismo do GABA intervm uma transamnase especfica (-ceto-glutarato + GABA glutamato + semialdedo do succinato) e uma desidrognase (semialdedo do succinato + NAD+ succinato + NADH) que levam formao de succinato, um intermedirio do ciclo de Krebs. A histamina um derivado da histidina formando-se a partir deste aminocido por ao de uma descarboxlase (histidina histamina + CO2). sintetizada e segregada pelos mastcitos durante processos alrgicos, em certos neurnios do SNC e em clulas cromafins da mucosa gstrica que so estimuladas pela gastrina3. No catabolismo da histamina intervm enzimas que catalisam a metilao dependente da S-adenosil-metionina de um dos azotos do anel imidazol 1. Porque a creatinina no segregada nem reabsorvida nos tbulos renais, um dos testes mais usados na avaliao da funo de filtrao renal o clearance da creatinina. O clearance da creatinina pode ser definido como a quantidade de plasma sanguneo que limpo de creatinina por unidade de tempo (volume/tempo). Calcula-se usando a seguinte frmula: (volume de urina / tempo) x (concentrao de creatinina na urina / concentrao de creatinina no plasma). Quando libertado na fenda sinptica, o GABA liga-se a receptores especficos provocando diminuio da excitabilidade dos neurnios que contm estes receptores. As benzodiazepinas so medicamentos que so usados como tranqilizantes e o seu mecanismo de ao est relacionado com os receptores do GABA. As benzodiazepinas ligam-se num outro local de ligao situado nos mesmos receptores provocando aumento da sua sensibilidade ao GABA. A ligao da histamina a receptores especficos das clulas parietais do estmago (receptores H2) induz a libertao de HCl no lume gstrico. Alguns medicamentos usados na clnica no tratamento de lceras gstricas e duodenais so inibidores dos receptores H2. (N-metil-transfrase) e a desaminao oxidativa dependente do oxignio molecular do grupo amina terminal (RCH2NH2 + H2O + O2 RCHO + NH3 + H2O2).

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A dopamina, a noradrenalina (ou norepinefrina) e a adrenalina (ou epinefrina) so catecolaminas: compostos orgnicos que contm um grupo amina e um ncleo catecol (1,2 diidroxi-benzeno). So todos derivados da tirosina que por ao da hidroxlase da tirosina origina L-dopa; a hidroxlase da tirosina uma monooxignase que usa como co-substrato a tetrahidro-biopterina (tirosina + O2 + tetrahidro-biopterina L-dopa + diidro-biopterina + H2O). Por sua vez a L-dopa passa a dopamina por ao de uma descarboxilase (L-dopa dopamina + CO2). A dopamina pode gerar noradrenalina por ao doutra hidroxlase que usa como cosubstrato o ascorbato (dopamina + O2 + ascorbato noradrenalina + desidroascorbato + H2O). A noradrenalina origina a adrenalina por aco de uma transfrase de metilo (noradrenalina + S-adenosilmetionina adrenalina + S-adenosil-homocistena). A dopamina, a noradrenalina e a adrenalina so neurotransmissores. Os dois ltimos tambm podem ser considerados hormonas pois tambm so segregados para o plasma sanguneo pelas clulas cromafins da medula supra-renal. O dficit de dopamina em determinados ncleos do sistema nervoso central causa doena de Parkinson que pode ser tratada pela administrao de L-dopa. Entre os efeitos metablicos da adrenalina e da noradrenalina so de destacar a estimulao da glicogenlise heptica e muscular, da gliclise muscular e da liplise no tecido adiposo. No catabolismo das catecolaminas intervm enzimas que catalisam a metilao dependente da S-adenosil-metionina do grupo hidroxilo da posio 2 do anel benznico (catecol-Ometiltransfrase ou COMET) e a desaminao oxidativa dependente do oxignio molecular do grupo amina terminal (mono-amino oxdase ou MAO: RCH2NH2 + H2O + O2 RCHO + NH3 + H2O2). Os diferentes produtos formados no processo catablico so eliminados na urina. A serotonina (ou 5-hidroxi-triptamina) um neurotransmissor 4 derivado do triptofano. Forma-se por ao seqenciada de duas enzimas numa via metablica muito semelhante que d origem dopamina. Nesta via metablica esto envolvidas a hidroxlase do triptofano (triptofano + O2 + tetrahidro-biopterina ! 5-hidroxitriptofano + dihidro-biopterina + H2O) e uma descarboxlase (5hidroxi-triptofano ! 5-hidroxi-triptamina + CO2). No catabolismo da serotonina intervm uma mono-amino oxdase (MAO: RCH2NH2 + H 2O + O2 !RCHO + NH3 + H2O2) que induz a sua desaminao oxidativa. A melatonina uma hormona5 sintetizada na glndula pineal a partir da serotonina que, como j referido, tem origem no triptofano. A formao da melatonina envolve a ao de uma transfrase de acetilo (serotonina + acetil-CoA acetil-serotonina + CoA)

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e a posterior metilao (dependente da S-adenosil-metionina) do grupo 5-hidroxi (acetil-serotonina + Sadenosil-metionina melatonina + S-adenosil-homocistena). O seu catabolismo envolve a hidroxilao no carbono 6 do anel indol e a posterior conjugao com o sulfato formando-se um composto (6-sulfatoximelatonina) que excretado na urina. A 5-hidroxi-triptamina tem mltiplos efeitos biolgicos podendo destacar-se o seu efeito no humor. Um dos frmacos mais usados no tratamento da depresso (fluxetina) um inibidor da recaptao neuronal da serotonina, aumentando deste modo a sua concentrao na fenda sinptica.

Voc Sabia
Tambm conhecida como a hormona do sono, a melatonina regula os ciclos circadianos (dormir-acordar), sendo a sua produo estimulada pela escurido e inibida pela luz. Esta substncia encontra-se em pequenas quantidades em alimentos como a cebola, a cereja, a banana, o milho, a aveia, o arroz, a hortel, a verbena, a salva e o tomilho, e tambm no vinho tinto. O monxido de azoto (NO ou xido ntrico ou fator relaxante derivado do endotlio) um radical livre sintetizado em muitas clulas de mamferos (incluindo as clulas endoteliais) a partir da arginina. A enzima responsvel por esta sntese uma monooxignase habitualmente designada como sntase do NO (arginina + 2 O2 + 1,5 NADPH citrulina + NO + 1,5 NADP+). O NO um composto muito instvel: poucos segundos aps a sua sntese oxida-se (reaes no enzmicas) originando ons nitrito e nitrato. O glutatio na sua forma reduzida (GSH) um tripeptdeo ( -glutamil-cistinil-glicina) que sintetizado na maioria das clulas do organismo. Forma-se numa seqncia de reaes que envolvem a formao de uma ligao amida entre o grupo carboxlico C5 do glutamato e o grupo amina da cistena (sintetase do -glutamil-cistena: glutamato + cistena + ATP -glutamilcistena + ADP + Pi) e uma ligao peptdica entre o grupo carboxlico da cistena e o grupo amina da glicina (sintetase do glutatio: -glutamil-cistena + glicina + ATP glutatio + ADP + Pi). A forma reduzida do glutatio (GSH) contm um grupo tiol que participa em reaes de oxireduo; a forma oxidada do glutatio formado por duas molculas de glutatio em que os grupos tiol

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foram oxidados e ligam as duas metades da nova molcula numa ligao dissulfureto (GSSG). O glutatio oxidado forma-se por aco da peroxdase do glutatio. Esta enzima catalisa a reduo de perxidos potencialmente txicos usando como agente redutor o GSH [2 GSH + H2O 2 (ou R-OOH) GSSG + 2 H 2O (ou H2O + ROH)]. A regenerao do GSH catalisada pela redtase do glutatio (NADPH + GSSG 2 GSH + NADP+). Pelo menos em certas clulas, como nas clulas tubulares renais, o GSH participa no transporte transmembranar de aminocidos. O GSH sai da clula (por aco de um transportador) e por ao cataltica de uma ecto-transferase ( -glutamiltranspeptdase) reage com um aminocido do meio extracelular que vai ser transportado gerando como produtos dois dipeptdeos ( -glutamil-aminocido e cistinil-glicina). No GSH, a ligao entre o glutamato e a cistena no uma ligao peptdica vulgar e no hidrolisada por aco de peptdases mas pode ser rompida por ao da -glutamil-transpeptdase. Por aco de um transportador da membrana, o dipeptdeo -glutamil-aminocido pode depois ser transportado para o interior da clula. Aps hidrlise extracelular da cistinil-glicina, tambm a cistena e a glicina so transportadas para o interior da clula. Entre os efeitos biolgicos do NO pode destacar-se o seu papel como relaxante do msculo liso das arterolas. Quando as clulas endoteliais so estimuladas por estmulos nervosos mediados pela acetil-colina aumenta a concentrao do io Ca2+ no seu citoplasma o que estimula a atividade da sntase do NO. O NO um gs que difunde passivamente para as clulas musculares lisas da vizinhana. Aqui liga-se a uma cclase de guanilato (GTP GMP cclico + PPi) estimulando a sua atividade. o aumento da concentrao intracelular do GMP cclico que causa o relaxamento do msculo liso das arterolas e a vasodilatao.

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Mdulo 3

LICENCIATURA

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Unidade 11

SNTESE E DEGRADAO DE PROTENAS

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Unidade 11 SNTESE E DEGRADAO DE PROTENAS

11.1 Introduo
Falar de traduo e sntese de protenas uma matria que vocs conhecem do secundrio, pelo menos alguma coisa. Este o nico dogma da biologia celular. DNA transcrio RNA traduo protenas.

A traduo envolve a interao dos 3 tipos de RNA celulares. O mRNA, que a molcula que contm a informao a ser traduzida; o tRNA que a molcula que faz a transio entre cidos nuclicos e aminocidos; e por fim o rRNA que o componente essencial da

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maquinaria que o ribossoma, a estrutura que permite controlar todo o processo.

O mRNA nos eucariotas. Esta especificamente a estrutura do mRNA nos eucariotas: contm aqui a azul aquilo a que se chama Open Reading Frame ORF ou seja, o quadro de leitura, que a sequncia do mRNA que contm a informao essencial para produzir a protena. No entanto, isto apenas parte do mRNA, porque este nos eucariotas muito maior do que simplesmente a ORF. Geralmente, volta do 2000 pares de bases, enquanto geralmente a ORF dum mRNA ronda volta duns 1000, o que metade. (isto em valores mdios) H um outro tanto de informao que e importante para controlar a estabilidade e todo o processo de traduo. Portanto isto est orientado 5-3 e na parte 3 dita a parte 3UTR: untranslated region, ou seja, a regio no traduzida. Faz sentido E do outro lado a parte 5-UTR. Geralmente esta distncia entre o incio da ORF e a zona onde vocs tm o CAP de cerca dos 100 nucletidos (tm aqui o codo de iniciao- AUG, aqui a abertura inicial). Ento normalmente a regio 3UTR muito grande. Do outro lado, este mRNA termina com uma cauda poli-A, que ronda as 150 a 200 Adeninas. Isto tipicamente na estrutura do mRNA. Relativamente ao tRNA, este a estrutura que faz a ligao entre os aminocidos e os cidos nuclicos. Vou referir a informao que vocs tm que conhecer, obviamente vou perder mais tempo em tentar que vocs consigam perceber os mecanismos de controlo que geralmente no se encontram nos livros, apenas nos artigos de reviso, artigos cientficos. Portanto, estrutura do tRNa vocs j conhecem: tm aqui um anticodo - a parte que reconhece a parte codo do mRNA - e do outro lado vem carregado um aminocido especfico para cada tipo de

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tRNA. A ligao do aminocido ao tRNA conseguida atravs de uma enzima que se chama tRNA sintetase, est aqui o processo todo.

A enzima contm um local onde se liga o ATP (processo que requer energia), um local especfico para um determinado tipo de aminocido, onde ele se liga (vrias aminoacil tRNA sintetases) e um local onde encaixa o tRNA e onde se faz a ligao do aminocido com o tRNA especfico. Fica-se ento com o tRNA carregado com um tipo de aminocido.

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O cdigo gentico a informao que vocs conhecem do secundrio: tem redundncias mas no tem ambiguidades. Falta s referir que a Metionina tem apenas um codo, o Triptofano tambm e h 3 codes STOP, que no so reconhecidos por nenhum anticodo. Relativamente aos ribossomas, esta a estrutura tpica deles. Os ribossomas dos eucariotas e dos procariotas so muito semelhantes, varia o tamanho das subunidades. Portanto, o ribossoma dos eucariotas tem 2 subunidades, uma grande e uma pequena: a subunidade grande, dita de 60s, e a subunidade pequena, dita de 40s.

Os ribossomas so ribozimas, isto rRNA tem ao cataltica

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Esta estrutura de 60s constituda por 49 protenas, tem um peso total de 2800g/mol constitudo tambm por 3 RNAs: o rRNA de 5s, 28s e 5.8s. A subunidade pequena s tem um tipo de rRNA, o de 18s. Nos procariotas, muito semelhantes, varia apenas o tamanho. Informao importante: o ribossoma uma ribosima tem atividade enzimtica, ou seja, consegue catalizar reaes enzimticas. Isto muito importante porque a subunidade grande do ribossoma vai permitir, ou catalizar, a ligao peptdica entre os vrios aminocidos quando do alongamento, na formao da protena, portanto quando se vo ligar os aminocidos 1 com o 2, esta ligao peptdica que se forma no ribossoma catalizada pelo rRNA da subunidade grande do ribossoma. Por isso que os ribossomas se chamam de ribosimas, tm atividade. O investigador que descobriu isso foi Prmio Nobel. Este o constituinte do RNA dos ribossomas. Em cinzento vocs esto a ver aquilo que corresponde ao rRNA, a cores vocs tm aquilo que corresponde s protenas, Portanto no se esqueam que os ribossomas so ribonucleoproteinas, ou seja, tm uma componente proteica e uma componente em rRNA, Mas vem que a maior parte do constituinte (cerca de 60% nos eucariotas, 66% nos procariotas) tem a ver com rRNA.

Pormenorizando o ribossoma tem 3 locais, aqui a vermelho (isto muito importante) tm o mRNA, a subunidade pequena e depois que encaixa a grande, Depois disto estar formado, vocs tm de novo 3 locais: o dito local A, local P e o local E. O local A o local da Amino-Acil-tRNA, ou seja, o local onde vai entrar o tRNA carregado com o aminocido. O local P o local da Peptidil-transfer tRNA local onde vai ocorrer a ligao peptdica, ou melhor, onde a cadeia polipeptdica se vai originar.

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O local E o local empty mas tambm chamado de local de exit, ou seja, local de sada do tRNA no carregado aps este ter depositado o seu aminocido na cadeia peptdica nascente. Resumindo, 3 locais: local A, local P e local E. Geralmente todos os tRNAs que vm carregados com aminocidos s conseguem entrar no local A do ribossoma, nunca no local P. Porqu? Neste local., onde a cadeia nascente polipeptdica est a ocorrer. Ele tem que entrar aqui [local A], transferir para ali [local P] e depois sair [local E], Portanto, tem aqui a cadeia que est a nascer, tem aqui o tRNA, tem aqui outro (tRNA) que est a entrar. A ligao peptdica ocorre, este sai e este (tRNA) passa do local P para o local E. Ento, se entrasse no local P, o P j estava cheio, j tinha l qualquer coisa, portanto no pode entrar. Assim, ele s tem a possibilidade de ir sempre para o local A. Isto acontece tirando uma excepo: o primeiro! O primeiro tRNA no pode entrar no local A porque se o fizesse no poderia passar para o P. Portanto tem que entrar logo no local P, seno isto no funcionava, E qual o primeiro tRNA? Aquele que vem carregado com a metionina iniciadora. Trata-se do nico tRNA que consegue entrar no local P. Como? O tRNA iniciador, e no se esqueam que o tRNA iniciador vem carregado com a metionina, mas no meio duma cadeia duma protena h muitas metioninas, que possuem o mesmo codo. Para reconhecer qual o iniciador, h uma diferena entre o tRNA carregado com uma metionina que entra no local P e um tRNA tambm carregado com uma metionina mas que desta vez entra pelo local A. Veremos isso adiante. A traduo tem 3 etapas: iniciao, alongamento e a finalizao. A mais importante de todas obviamente a iniciao. E aqui ocorre um controle de qualidade.

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A diferena entre um tRNA, iniciador, que contm uma metionina (e entra no local P) e tRNA que tambm transporta uma metionina mas no vai entrar no local P tem a ver com modificao. Os procariotas modificam o tRNA iniciador, ou seja, que vem carregado com a Metionina atravs dum grupo formil (CHO). Portanto, o tRNA iniciador vem tambm carregado com um grupo formil. E esta modificao que permite a entrada no local P. Por

INICIAO

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outro lado, os outros tRNAs que vm carregados com Metionina mas que no so formilados vo entrar no local A e so usados quando algures no meio da cadeia encontram uma metionina. Esto a ver a diferena? Ento h a diferenas entre uma metionina inicial e uma metionina no meio da cadeia polipeptdica. Nos eucariotas, no um grupo formil que promove a modificao, mas antes uma fosforilao, alterando a conformao deste tRNA, permitindo-lhe entrar no local P. Atravs destas diferenas o tRNA modificado. Relativamente ao Quadro de Leitura, quando se tem uma seqncia de nucleotdeos preciso ter esta noo: por exemplo, se vocs comearem a ler daqui, no primeiro 1, tm UAC. Isto vai dar aminocido (tirosina). Mas se comearem no segundo, vo ler ACU, e vai dar uma trionina.

Met codons - iniciador

Podem ainda comear no terceiro, obtendo CUA, que resulta numa leucina, No quarto, voltam ao incio, ou seja, UAC. Portanto, de acordo com o stio onde vocs comeam, tm trs tipos de quadros de leitura. Isto essencial porque se a leitura do mRNA falhar num nucleotdeo, vai dar uma protena completamente diferente. Este processo extremamente controlado. A leitura ou a identificao dum quadro de leitura correto essencial para a clula, Seno vocs vo ter protenas que no conhecem. Por isso, como que a clula sabe qual o primeiro AUG? Qual o codo iniciador? Ela tem uma seqncia do mRNA que tem muitos AUGs. Ela identifica-o pelo contexto volta do AUG, ou seja, no interessa apenas ter aqui um codo iniciador. tambm importante o que se passa volta do AUG.

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Nos procariotas, que o caso aqui em cima, eles tm uma sequncia muito conservada entre todas as protenas, que a seqncia de Shine-Delgarno. E uma seqncia que est aqui a amarelo e que reconhecida especificamente pelo rRNA da subunidade pequena do ribossoma. Portanto neste rRNA h uma sequncia complementar seqncia Shine-Delgarno. No se esqueam que este rRNA faz parte do ribossoma e portanto quando isto [subunidade pequena] encaixa ali [mRNA], por complementaridade de bases, a subunidade ribossomal vai encaixar ali [na sequncia Shine-Delgarno] e vocs sabem que ao lado tm um AUG, portanto quando comea a traduo, esta comea no quadro de leitura correto. Nos eucariotas o sistema ligeiramente diferente. Primeiro porque a subunidade pequena do ribossoma 40s comea a ligar-se ao mRNA sempre na extremidade 5, no CAP (no incio do mRNA). A subunidade pequena vai depois fazer um scanning, ou seja, vai deslocar-se ao longo da cadeia do mRNA at encontrar aquilo que ele acha que um AUG iniciador. Ele encontra-o novamente pelo contexto volta do AUG, ou seja, at encontrar aquilo que se chama de seqncia Kozac, Este o consenso tpico duma seqncia Kozac: ACCAUGG. Quando a subunidade pequena encontra este contexto (que pode variar ligeiramente), a subunidade pra e ento vem a subunidade grande do ribossoma que encaixa e comea a traduo. Concluindo, no qualquer AUG que d incio traduo, necessita duma seqncia Kozac, um contexto sua volta que o define exatamente como o cordo iniciador, Isto muito importante!

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Como que se identificam as seqncias? Simplesmente isto [a vermelho] a sequncia Shine-Delgado, na sequncia Kozac muito semelhante, ou seja, peguem numa dzia de protenas, fazem um alinhamento das seqncias volta do AUG e vem o que que est conservado e reparem: vocs tm aqui o nmero de nucletidos, que sempre igual em todas as protenas e com isso vocs conseguem estabelecer uma seqncia de consenso. assim que se identifica este tipo de seqncias. Relativamente traduo, existem obviamente muitos fatores proticos que assistem em todo o processo. Os fatores de iniciao, nos procariotas chamam-se IF1, IF2 e IF3. Tm os equivalentes nos eucariotas, s que com um e atrs: eukaryotic initiation factors.

Quanto aos de alongamento, a mesma nomenclatura - EF- e para os eucariotas o e atrs, ficando eucaryotic elongating factors 1, 2 e por a fora. O release fator, ou seja, de finalizao, os procariotas tm 3 e os eucariotas s tm um. Como que se processa a traduo nos procariotas? Basicamente vocs tm a ligao das subunidades pequenas no AUG, iniciador, em que vocs sabem ter uma seqncia Shine-Delgado volta: tem um contexto que muito importante. A subunidade pequena liga-se com a ajuda de vrios fatores iniciadores (no importante saberem os nomes e funo de todos, no o objetivo da disciplina, excepto alguns que so muito importantes). O que importante aqui que percebam a mecnica

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do processo. Portanto, tm sempre a subunidade pequena a ligarse ao sitio certo do mRNA, o tRNA, que vem carregado com a Met est modificado, ou seja, nos procariotas tem 1 grupo formil que encaixa no local P e depois vem a subunidade grande que encaixa aqui com a ajuda de fatores, montando todo o ribossoma. Portanto, o ribossoma s montado quando da traduo. No citoplasma, o ribossoma completo no existe. As subunidades, grandes e pequeninas, esto sempre desassociadas. Depois, quando isto se monta, est tudo pronto, o tRNA com a Met. no local P e comea a 2 etapa da traduo que o alongamento.

Nos eucariotas ocorre um processo que passarei mais tempo a explicar porque muito importante. Existe um controlo de qualidade.

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Nas clulas existem muitos controles de qualidade, e este extremamente importante, ou seja, quando o mRNA sai do ncleo, ele vem com uma cauda poli-A e um CAP.

As 2 extremidades do mRNA s coincidem por ao de protenas que se ligam aqui a verde na cauda poli-A e por factores aqui no CAP, neste a amarelo, que outra protena que se chama CAPbinding protein, ou seja, protena que se liga ao CAP e aqui PoliA binding protein protena que se liga cauda Poli-A. E vem aqui um fator, este muito importante, tm que se lembrar que o fator iniciador 4. Existem vrios: 4A, 4B, 4C, 4D, etc. O que importante que s os fatores iniciadores 4 e protenas semelhantes que se ligam aqui cauda poli-A e ao CAP e vo formar um U no mRNA. Ou seja, atravs destes fatores proticos a cauda poli-A vai estar em contacto com o CAP. Isto tem que ocorrer! Se no acontecer, se o mRNA no passar neste controlo de qualidade, isto , se este loop no se formar, o mRNA degradado. Isto significa que se o mRNA no tiver 1 cauda poli-A completa ou se no tiver o CAP, este RNA nunca usado na traduo e, portanto, no passa neste controlo de qualidade. Se ocorrer aqui algum problema, ou seja, se o mRNA no estiver completamente intacto, o mRNA logo degradado e descartado pelas clulas. Se passar este controlo de qualidade, ento o mRNA, mesmo que tenha erros, continua e traduzido, dando origem, se tiver um erro qualquer, a uma protena truncada modificada. Mas tem que passar neste controlo de qualidade. Portanto, este loop essencial. Estes fatores iniciadores 4 tm vrias funes, como por exemplo, remover esta estrutura secundria, que pode ocorrer no mRNA: no passa do controlo de qualidade, portanto o mRNA degrada-

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do. Esto a ver a importncia destes fatores iniciadores 4? So estes que decidem se o RNA vai ser traduzido ou se vai ser degradado.

A seguir, o que acontece que, tal como nos procariotas, o tRNA vem carregado com uma Met. modificada, no caso dos eucariotas uma fosforilao que lhe permite estar no local P. Este complexo vai ligar-se no complexo formado por aquele loop que se formou. Assim, onde este se forma, com mRNA, esta estrutura aqui (subunidade pequena carregada com tRNA) vai ligar-se a estes fatores proticos todos, por isso que se vai ligar s extremidades e no aqui no meio.

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Liga-se a estes fatores iniciadores que assistem a ligao e este complexo inteiro com estes fatores vai fazer um scanning no mRNA at encontrar aquele que ele acha que AUG iniciador. Encontra-o atravs do contexto volta do AUG, at encontrar 1 seqncia Kozac. E a pra, libertando-se de todos os fatores iniciadores que impediam a ligao da subunidade grande. Ao libertar estes fatores, a subunidade grande do ribossoma j consegue encaixar na subunidade pequenina no stio certo, isto , no stio onde encontrou o AUG iniciador e, tal como nos procariotas, comea a 2 etapa da traduo. Nos livros de texto encontram este tipo de esquema muito bem explicado, portanto no se preocupem em com isso. Aqui, h que realar a importncia deste controlo de qualidade, Nalguns casos existe aquilo que se chama de iniciao em locais internos do mRNA IRES.

Isto foi identificado inicialmente em infeces vricas, e estas estruturas formam este tipo de loop muito semelhante ao que acontece aqui (no normal). Basta que o ribossoma possa comear a traduo no meio do mRNA. Acontece em casos muito raros, mas acontece. Por isso que eu vos fao esta ressalva, s para saberem que isto existe nalguns casos especficos, em condies de patologia. H muitas condies: infeces vricas e por a fora, onde este mecanismo pode ocorrer. No fundo, permite que a traduo ocorra em locais muito afastados da ponta do CAP. Deste modo, numa situao normal o iniciador est muito perto (cerca de 100

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nucletidos) da extremidade 5. No entanto, nalguns casos h mRNA que pode ser traduzido em distncias muito afastadas da extremidade. Esta situao pode ser muito importante em situaes de cancro e por a fora.

Passamos agora ao alongamento. Fatores de elongao esto envolvidos na transferncia de aminocidos do tRNA para a cadeia peptdica nascente. A situao comea aqui: o local P tem um local com o tRNA carregado com a Met. e no local A, que est vazio, vai encaixar o segundo tRNA carregado com aminocido. Este processo onde se liga o tRNA carregado no local A assistido por um factor de elongao, chamado EF-Tu (nos procariotas) ou eEF1 (nos eucariotas). Este factor regula todo o processo. A seguir, quando um tRNA encaixa no local A, a ligao peptdica ocorre (no local

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P), sendo catalizada pelo rRNA da subunidade pequena do ribossoma. No caso dos eucariotas (a imagem o caso dos procariotas) um rRNA 18s. O tRNA sai ento, e inicia-se um novo ciclo, o ribossoma desliza ao longo do mRNA. Isto tudo controlado por estes fatores proticos. Este percurso acaba com o codo STOP. Este codo no reconhecido por nenhum tRNA mas fatores proticos denominados release factors (RF) reconhecem-no. So 2 nos procariotas (1 e 2): o RF1 reconhece 2 codes (UAG e UAA) e o RF2 reconhece o UGA e UAA.

Para os eucariotas, o eRF1 reconhece os 3 codes STOP. O truque deste mecanismo o seguinte: estes fatores proticos tm uma estrutura molecular muito semelhante ao tRNA. Assim, apesar de no ser um tRNA, consegue encaixar no local A do ribossoma. Quando o release factor entra aqui no local A do ribossoma destabiliza a maquinaria, fazendo com que as subunidades se dissociem, acabando o processo de traduo. Os fatores IF3 e IF6 quando ligados a uma subunidade, impedem a formao do ribossoma. A traduo um processo que gasta muita energia, tanto na forma de ATP como de GTP (que utilizado em muitos processos celulares deste gnero). Na traduo, a clula at utiliza muito mais GTP do que ATP. Devido a este fato (gasto de grande quantidade de energia), necessrio um controle de qualidade muito eficaz para que no se desperdice energia em mRNA que no est bem, que vai dar origem a uma protena no-funcional.

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Os procariotas conseguem acoplar a transcrio com a traduo. Ou seja, quando o mRNA transcrito, logo traduzido. Nos eucariotas, no acontece isso porque existe um ncleo que isola. Assim, tem-se a transcrio no ncleo mas a traduo no citoplasma, portanto estes acoplamentos no podem ocorrer. Isto faz prever que o processo de sntese protica, seja muito mais eficaz e rpido nos procariotas. Mas os eucariotas tambm conseguem acelerar o processo, atravs da formao daquilo que se chama de polirribossomas ou polissomas. Os polissomas so uma cadeia de mRNA onde encaixam muitos ribossomas, ou seja, tem-se um mRNA com um ribossoma a ligar-se e a comear a traduo enquanto outro j a iniciou. O resultado da existncia destes

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polissomas um nico mRNA a conseguir dar origem a vrias molculas de protenas. Os polissomas tm este aspecto visto no microscpio eletrnico. So pontinhos que se vem no citoplasma, que correspondem a ribossomas. Podem-se ver os ribossomas livres, mas quando aparecem estas cadeias de ribossomas est-se a olhar para os polissomas. Vemos outro exemplo no [PPT 31], com um mRNA a traduzir a mesma protenas mas em stios diferentes. Isto permite aumentar muito a taxa de sntese duma determinada protena.

Passando aos chaperones A cadeia polipeptdica est a ser formada e est a sair do ribossoma. S que j se sabe que as protenas tm aminocidos hidrofbicos e hidroflicos. Ora isto chato porque o citoplasma s gua volta e a protena tem tendncia a enrolar-se de modo a esconder os aminocidos hidrofbicos, enrolamento este que no especfico. Para evitar este tipo de enrolamento incorreto existem umas protenas chaperones que tm muitas funes, sendo uma delas manter a estrutura protica linear quando a cadeia polipeptdica est a sair do ribossoma. Os chaperones so muitas vezes denominados HSP (Heat Shock Protein) e um nmero que tem a ver com o tamanho da protena. O nome vem do fato de terem sido inicialmente identificadas em situao de stress trmico, na qual a clula passava a produzir muitas protenas destas. A justificao para isto esta: com o aquecimento, as protenas comeam a perder a sua estrutura, o que causa a sua desnaturao e ento os chaperones comeam logo a ser sobreexpressos para impedir que estas protenas comeassem a ser

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desnaturadas. Portanto, so as mesmas protenas que assistem aqui, no fim da traduo.

As substncias que permitem inibir a sntese protica so muito teis porque normalmente so antibiticos. Tm um seno: alguns antibiticos tm efeito s nas bactrias e outros nas mitocndrias (p. ex.). Apesar do processo em procariotas e eucariotas ser muito semelhante, h algumas diferenas, mas no fundo a mesma coisa. No entanto, estas diferenas permitem arranjar substncias to especficas para inibir a traduo nos procariotas e no nos eucariotas. Esta tabela contm alguns antibiticos e o local da relao ao longo do mecanismo de traduo. A puromicina muito engraada, um dos exemplos. Tem uma estrutura que muito semelhante ao tRNA, conseguindo ento enganar o ribossoma e encaixar no local A, inativando a traduo. Aqui est outra lista de outros antibiticos [PPT 36], isto muito importante, o modo de atuao.

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11.2 Degradao de Protenas

Voc Sabia!
A protena degradada em dois sistemas: os lisossomas, que j conhecem, e o sistema ubiquitina-proteassoma, um sistema especfico no citoplasma. . Em 2004, 3 investigadores foram Prmio Nobel da Qumica com um trabalho sobre este complexo. Tem um impacto muito grande em termos clnicos e por isso est a ser um alvo teraputico muito apetecvel pelas farmacuticas porque controlar este sistema permitir controlar a degradao de determinadas substncias. Relembrem-se que em situaes de cancro o ciclo celular est alterado e a degradao de certas protenas essencial para controlar todo o processo. Sabendo que este sistema o que as degrada, control-lo controlar o ciclo celular, e controlar o ciclo celular controlar o cancro. E o cancro s um exemplo: doenas neuro-degenerativas - acumulao de determinadas protenas; Alzheimer Controlar este sistema controlar a doena.

Voc Sabia!
Os alimentos como carne, ovos e gros contm grandes molculas de protenas que precisam ser digeridas antes de serem utilizadas para reparar e construir os tecidos orgnicos. No estmago h uma enzima que inicia a degradao das protenas. A digesto finalizada no intestino delgado pelo suco pancretico e intestino propriamente dito. O produto final das protenas absorvido pelo intestino delgado e encaminhado ao organismo pela corrente sangunea. utilizado para a construo das paredes e diversos componentes das clulas.

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Unidade 12

BIOSSINALIZAO

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Biossinalizao

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Unidade 12 BIOSSINALIZAO
12.1 Biossinalizao ou Sinalizao Celular
As clulas, representam a menor poro de matria viva, sendo as unidades estruturais e funcionais dos organismos vivos e recebem constantemente informao do meio extracelular, a qual tem de ser transmitida para o seu interior. As bactrias, por exemplo, recebem informao constante - atravs de receptores membranares - sobre o pH; nutrientes; fora osmtica; oxignio; luz; produtos txicos; entre outros fatores. Estes sinais so reconhecidos pelas clulas que desencadeiam uma resposta adequada ao estmulo que recebem. No caso de organismos multicelulares, a transmisso de informao ocorre igualmente entre as clulas com diferentes funes. Os sinais celulares nos animais podem classificar-se, consoante o local onde so produzidos e onde desempenham a sua funo, em: autcinos (desempenham funes na mesma clula que os produzem), parcrinos (atuam numa clula vizinha) ou endcrinos (produzidos numa clula, transportados pela corrente sangunea e atuando numa clula distante). Em qualquer dos casos, o sinal reconhecido por um receptor que o converte num sinal celular. A natureza do sinal recebido diversa - podendo ser antigno, fatores de crescimento, hormonas, neurotransmissores, entre outros - bem como a variedade de respostas a esses sinais. No entanto, os organismos possuem apenas um pequeno conjunto de mecanismos evolucionariamente conservados para detectar os sinais extracelulares e traduzi-los em mudanas intracelulares.

12.2 Transduo de Sinal

As transdues de sinal so extremamente especficas e profundamente sensitivas. A especificidade obtida atravs de uma perfeita complementaridade ao nvel molecular entre o sinal e a molcula receptora. No que concerne ligao qumica, esta complementaridade mediada pelo mesmo tipo de foras que ocorrem na ligao entre a enzima e o seu substraro ou o anticorpo e antignio. A sinalizao intercelular ocorre por uma grande variedade de estmulos como: hormnios, neurotransmissores e fatores de crescimento.

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Habilidade das clulas de receber e reagir a sinais vindos do outro lado da membrana plasmtica: SINAIS + RECEPTORES AMPLIFICAO DO SINAL TRANSMISSO PARA DENTRO DA CLULA

Exemplo de transduo de sinal: A provvel estrutura da rodopsina complexada com a protena G transducina.

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Biossinalizao

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Rodopsina o conjunto (11-cis retinal em azul (vem da vitamina A) e opsina, em vermelho. Verde a protena G transducina (sub-unidades alfa, beta e gama) conectada no lado citoslico com a rodopsina (alas alaranjadas) e as caudas hidrofbicas (em amarelo) indicam a ligao carboxiterminal da rodopsina ao cido palmtico e as ub-unidades alfa e beta ancoradas nos lipdeos.

Efeitos metablicos da insulina; no metabolismo de carboidratos: fgado, msculo e tecido adiposo. Fgado: diminui produo de glicose (inibe a gluconeognese e a glicogenlise); Msculo e fgado: aumenta sntese de glicognio (glicognese); Msculo e tecido adiposo: aumenta captao de glicose pelo aumento no nmero de transportadores na membrana celular; Metabolismo de lipdeos: Tecido adiposo: diminui a degradao de triacilgliceris pela inibio da lipase sensvel ao hormnio promovendo a defosforilao da enzima; Tecido adiposo: aumenta a sntese de triacilgliceris pelo aumentos do transporte e metabolismo da glicose fornecendo o substrato glicerol 3-fosfato para a formao de triacilgliceris. Tambm aumenta a atividade da lipase lipoproteica fornecendo cidos graxos para esterificao.

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Metabolismo de protenas: estimula a entrada de aminocidos nas clulas para sntese de protenas na maioria dos tecidos. Receptor de insulina

Regulao da expresso gnica pela insulina

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Sntese de glicognio. Glicognio sintase

Ativao da glicognio sintase pela insulina

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Transduo do sinal da epinefrina (adrenalina): via Betaadrenrgica

Cascata da adrenalina. Amplificao do sinal

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Biossinalizao

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Recepo da luz nos olhos dos vertebrados

Hiperpolarizao das clulas bastonetes induzidas pela luz

A provvel estrutura da rodopsina complexada com a protena G transducina. odopsina o conjunto(11-cis retinal em azul(vem da vitamina A) e opsina, em vermelho. Verde a protena G transducina (sub-unidades alfa, beta e gama) conectada no lado citoslico com a rodopsina (alas alaranjadas) e as caudas hidrofbicas (em amarelo) indicam a ligao carboxiterminal da rodopsina ao cido palmtico e as ub-unidades alfa e beta ancoradas nos lipdeos.

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Vitamia A

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Unidade 13

MEMBRANAS CELULARES E TRANSPORTE ATRAVS DE MEMBRANAS

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Membranas Celulares

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Unidade 13 MEMBRANAS CELULARES E TRANSPORTE ATRAVS DE MEMBRANAS

13.1 Introduo
Membranas so estruturas altamente viscosas e, no entanto, permevel. Membranas plasmticas formam compartimentos fechados em torno do protoplasma celular para separar uma clula da outra e permitir a individualidade celular. A membrana plasmtica tem permeabilidade seletiva e atua como uma barreira, mantendo assim diferenas de composio entre o interior e exterior da clula. A permeabilidade seletiva devida canais e bombas de ons e receptores especficos de sinais (hormnio). As membranas fazem trocas de materiais com o meio externo por exo e endocitose, e h reas especiais na estrutura da membrana pontos de juno atravs dos quais as clulas adjacentes trocam materiais. Membranas tambm formam compartimentos especializados dentro da clula. As membranas intracelulares as organelas mitocndria, retculo endoplasmtico, retculo sarcoplasmtico, complexo de Golgi, grnulos secretores, lissomos e membranas nucleares. Nas membranas localizam-se enzimas, atuam os elementos de acoplamento excitao-resposta, stios de transduo de energia (fotossntese e fosforilao oxidativa).

13.2 Importncia
Alterao da membrana afeta o balano hdrico e fluxo de ons e todos os processos celulares. Deficincias especficas ou alteraes de certos componentes da membrana levam uma variedade de doenas. A perda de um transportador de iodeto leva ao bcio congnito; a endocitose defeituosa das lipoprotenas de baixa densidade (LDL) resulta numa hipercolesterolemia e doena coronariana. Funo celular normal se inicia com membranas normais. Exemplo de clula vegetal normal.

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13.3 A Manuteno do Meio Intra e Extracelular Primordial

Reaes enzimticas, processos celulares e subcelulares ocorrem em meio aquoso. As membranas internalizam e compartimentalizam a gua do organismo. A gua representa 70 % da massa do organismo: 1 - Fluido intracelular (ICF) contm 2/3 do total da gua e propicia meio para a clula: Produzir, armazenar e utilizar energia; renovar a si prpria; replicar e desempenhar funes especficas e 2 - Fluido extracelular (ECF) contm cerca de 1/3 do total da gua, compreende o plasma e compartimentos intersticiais. Trazem os nutrientes celulares (glicose, cidos graxos, aminocidos), O2, nos, traos de minerais e molculas reguladoras (hormnios). Remove CO 2, produtos da degradao e material txico ou detoxificado do meio celular circundante. Por que existe diferena na composio do meio interno e externo? Porque reaes enzimticas e outros processos biolgicos funcionam melhor no meio aquoso e com as concentraes intracelulares. Assim, as clulas desenvolvem barreiras (membranas), associadas com bombas, para manuteno do meio interno.

Comparao da concentrao mdias de vrias substncias intra e extracelular de mamferos.

13.4 Estruturas das Membranas

Cada membrana possui composio caracterstica funes diferentes. Estruturas assimtricas com uma superfcie interna e outra externa, e esto no covalentemente unidas, so termodinamicamente estveis e metabolicamente ativas.

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As membranas e seus componentes formam uma estrutura dinmica. Os lipdeos e protenas se movimentam. Diferentes lipdeos e protenas tm diferentes velocidades de movimentao, a membrana se movimenta (Figura 1).

Figura 1 - Estrutura de membrana celular.

13.5 Os Lipdeos das Membranas

Os lipdeos so anfipticos, portanto as membranas so anfipticas. - fosfolipdeos - Os fosfoglicerdeos so os fosfolipdeos mais encontrados. - Esfingolipdeos - Esfingomielinas - predominam na bainha de mielina. - Glicoesfingolipdeos Cerebrosdeos e os gangliosdeos. - Esteris Colesterol Mais encontrado no lado externo das membranas plasmticas e em menor quantidade nas mitocndrias, complexo de Golgi e membrana nucl;ear. O colesterol intercala fosfolipdeos, com seus grupos hidroxilicos na fase aquosa e o restante da molcula no interior da membrana. O anel esteride rgido interage com o acil dos fosfolipdeos, mantendo a fluidez da membrana. Os lipdeos organizam-se em bicamadas. Fosfolipdeos, no isolamento eltrico e aumenta a velocidade de propagao do impulso, o fluxo de ons ocorre na membrana sem mielina. composta de esfingomielinas, colesterol e glicoesfingolipdeos. Protenas integrais e perifricas unem as bicamadas hidrofbicas estrutura impermevel gua e ons.

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Lipossomos como transportador de drogas e enzimas Um obstculo no uso de drogas a falta de tecido-especificidade na sua ao. Quando administradas por via oral ou endovenosa atuam em muitos tecidos e no exclusivamente no tecido-alvo, produzindo efeitos txicos - drogas anticncer. Outras so metabolizadas rapidamente e seu perodo de efetividade relativamente curto. Lipossomas tem sido preparados com drogas, enzimas e DNA encapsulado no seu interior e usados como transportadores destas substncia. Lipossomos preparados a partir de fosfolipdeos purificados e colesterol no so toxicox e so biodegradveis. Antibiticos, agentes antineoplsicos, antimalricos, antifngicos e antiinflamatrios so efetivos quando administrados em lipossomos. Anomalias na fluidez da membrana O aumento na concentrao de colesterol na membrana dos eritrcitos, dimiui a fluidez da membrana doenas graves do fgado, como a cirrose heptica dos alcolatras. Efeito da intoxicao pelo etanol sobre o sistema nervoso devido a modificao da fluidez da membrana e alteraes em receptores e canais inicos. Na abetolipoprotena aumenta contedo de esfingomielina e diminui a fosfatilcolina, reduzindo a fluidez.

13.6 As Protenas das Membranas

As protenas da membrana podem ser integrais ou perifricas. Estas protenas tm atividade cataltica, de transporte, estrutural, antignica (histo-compatibilidade) e de receptores para vrias molculas. Protenas integrais interagem com os fosfolipdeos da membrana. So globulares e anfipticas, as regies hidroflicas esto salientes nas faces interna e externa e regies hidrofbicas percorrem a camada bilaminar, com distribuio assimtrica. A poro da protena que atravessa as membranas contm aminocidos hidrofbicos (Ala, Phe, Gly, Ile, Leu, e Val) e de a-hlice ou folha pregueada. Protenas perifricas no interagem diretamente com os fosfolipdeos na bicamada lipdica, esto unidas nas regies hidroflicas das protenas integrais das membranas. A espectrina (integral) est ligada anquirina (perifrica), atua na manuteno da forma bicncava dos eritrcitos. Receptores de hormnios so protenas integrais e os hormnios poloipeptdeos que se liga a estes receptores moleculares so considerados protenas perifricas.

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MARCADORES ENZIMTICOS DE DIFERENTES MEMBRANAS

Algumas destas enzimas esto localizadas semente em certas membranas e servem de marcadores para a purificao destas membranas.

13.7 Transporte Atravs das Membranas

Se as membranas plasmticas so relativamente impermeveis, como fazem a maioria das molculas para entrarem nas Clulas? Como a seletividade deste movimento estabelecida?

ESTRUTURA DA MEMBRANA PLASMTICA As membranas plasmticas de todos os tipos de clulas so muito parecidas. Nelas, encontram-se, principalmente, dois componentes: fosfolipdios e protenas. Assim, a membrana plasmtica pode ser caracterizada como uma membrana lipoprotica.

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TRANSFERNCIA DE MATERIAL E INFORMAO ATRAVS DA MEMBRANA

I - MOVIMENTO DE PEQUENAS MOLCULAS

TRANSPORTE NO MEDIADO - DIFUSO PASSIVA OU SIMPLES. A gua e os gases podem entrar na clula por difuso, sem o auxlio de gradientes eletroqumicos e no requerem energia metablica. O processo depende da agitao trmica das molculas , do gradiente de concentrao atravs de membrana, da solubilidade do soluto na poro hidrofbica da membrana.

TRANSPORTE MEDIADO A solubilidade inversamente proporcional ao nmero de pontes de hidrognio, a ser quebrado por um soluto, para incorporar-se a bicamada hidrofbica. Os eletrlitos no formam pontes de hidrognio, mas possuem uma camada de hidratao interaes eletrostticas. Quanto maior a densidade de carga do eletrlito, maior a cobertura de gua e menor a velocidade de difuso. O Na+, tem maior densidade de carga do que o K+, quando hidratados o Na+ maior do que o K+, ento ele se move mais facilmente atravs da membrana. A passagem transmembrana de compostos polares e ons possvel atravs de protenas de membrana - transportadores

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proticos ou permeases, que formam canais transmembrnicos poros de protenas especficos. Diminuem a energia de ativao do transporte. A difuso facilitada e o transporte ativo so sistemas que utilizam transportadores proticos e transportam ons, aucares e aminocidos. Os dois sistemas assemelham-se a reaes enzimticas: h um stio especfico de ligao para o soluto; o transportador saturvel Vmx de transporte; h uma constante de ligao para o soluto (Km); inibidores podem bloquear o transporte. A classificao dos sistemas de transporte depende do nmero de molculas movimentadas e a direo do movimento. Unitransporte ou uniporte movimenta apenas um substrato permeasse da glicose do eritrcito; Co-transporte ou sitransporte ou simporte movimenta os solutos na mesma direo. Transportadores de prton-aucar (glicose, manose, galactose, xilose e arabinose) e os transportadores Na+-aminocidos os dois solutos movem-se simultaneamente na mesma direo Na+-glicose. Anti-transporte, antiporte ou contra transporte move duas molculas em direo opostas entra Na+, sai Ca++. DIFUSO FACILITADA Muitos sistemas de difuso facilitada so estereoespecficos. Mecanismo de Ping-Pong protena no estado Pong, exposta a altas concentraes do soluto e ele liga-se a stios especficos no transportador. Uma alterao conformacional expe o transportador a concentraes menor de soluto (estado Ping), ocorrendo o transporte. O processo reversvel e o fluxo atravs da membrana depende: 1 - gradiente de concentrao; 2 - quantidade de transportadores disponveis - etapa chave; 3 - rapidez da interao soluto-transportador e 4 - rapidez da alterao conformacional dos transportadores. Hormnios regulam a difuso facilitada alterando o nmero de transportadores. Insulina aumenta o transporte de glicose no tecido adiposo e o transporte de aminocidos do fgado para outros tecidos, recrutando transportadores das reservas intracelulares. Glicocorticides aumentam o transporte de aminocidos para o fgado substratos para a gliconeognese. Hormnio do crescimento aumenta o transporte de aminocidos para todas as clulas e os estrgenos para o tero.

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Existem pelo menos cinco transportadores de aminocidos sistema simporte-Na+. O Cl-- e o HCO3- so contra transportados atravs da membrana dos eritrcitos Trocador cloreto-bicarbonato ou protena trocadora de nion. Vrios transportadores de glicose so conhecidos.

TRANSPORTE ATIVO O transporte ativo leva ao acmulo de soluto em um dos lados da membrana e termodinamicamente desfavoravel;, consome energia (hidrlise de ATP, movimento eletrnico oxidao, absoro da luz solar ou fluxo concomitante de outro soluto a favor do gradiente de concentrao). A manuteno do gradiente eletroqumico nos sistemas biolgicos consome 25% da energia total gasta pela clula. Transporte ativo primrio O acmulo do soluto est acoplado diretamente a uma reao exergnica hidrlise de ATP ATPase Na+ - K+. Existem trs tipo de ATPase transportadoras de ons: Tipo P transportadores so fosforilados reversivelmente (Asp) durante o transporte e so sensveis inibio pelo vanadato ATPase Na+-K+ ; Tipo V responsveis pela acidificao dos compartimentos intracelulares (lisossomos), no sofrem fosforilao e do Tipo F bombas de prtons, desempenham um papel central nas reaes que conservam energia (fatores de acoplamento de energia) ATP sintetase. As baixas concentraes intracelulares de Na+ e altas de K+ , geram um potencial eltrico negativo na clula. Este gradiente mantido por uma bomba (ATPase) - protena integral da membrana e necessita de fosfolipdeo; tem stio catalticos para ATP e Na+ do lado inteno e stio do K+ do lado externo. A oubana e digitalis inibem a ATPase ligando-se no domnio de K+ - antagonizada por K+ extracelular.

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Transporte ativo secundrio um transportador acopla o fluxo de soluto (H+ ou Na+) a favor do gradiente de concentrao ao bombeamento de outro soluto (glicose ou lactose) contra o gradiente. No intestino a glicose e certos aminocidos so captados pelo co-transporte com o Na+ , usando o gradiente de Na estabelecido pela ATPase Na+ K+ . O transportado para fora da clula e 3 ons Na+ entram, mantendo a concentrao intracelular da Ca++ baixa contra-transporte. Fibrose cstica e os canais de Cl- - Doena multi-rgo - ocorre obstruo pulmonar com infeces bacteriana; disfuno pancretica provocando esteatorria. Devido uma permeabilidade reduzida ao Cl-, o que dificulta a secreo de fluidos e eletrlitos levando a desidratao luminal. Cl- diminudo no suor. Varias patologias so devidas a alteraes nos sistemas de transporte. Diminuio na captao de glicose intestinal perda do transportador de glicose-galactose acoplado a Na + . Sindrome de m absoro de frutose alterao na atividade de transporte de frutose. Cistinira, reabsoro renal de cistina, lisina e arginina anormal formao de clculos renais de cistina. Raquitismo hipofosfatmico, resistente a vitamina D absoro renal de fosfato anormal.

EXOCITOSE Macromolculas, sintetizadas no complexo de Golgi, so transportadas para o exterior em vesculas. O sinal para a exocitose um hormnio, que liga ao receptor da superfcie celular, induz uma alterao passageira na concentrao de Ca ++ , que dispara a exocitose. Molculas liberadas pela exocitose podem: prender-se a superfcie das clulas e tornar-se protenas perifricas (antgenos); tornase parte matriz extracelular (colgeno e glicosaminoglicanos) e aquelas que no fluido extracelular servem de sinal para outras clulas (insulina, hormnio paratireoidiano e catecolaminas armazenados e processados nas clulas e liberado por estmulos especficos).

II MOVIMENTO DE MOLCULAS GRANDES ENDOCITOSE o processo pelo qual clulas captam grandes molculas polessacardeos, protenas e polinucleotdeos. A endocitose fornece um mecanismo para a regulao do contedo de componentes da membrana, como os receptores de hormnio. Vesculas endocticas so produzidas pela invaginao de segmentos membrana plasmtica, englobando um pequeno volume

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de fluido extracelular e seus constituintes. A vescula esto fundese na membrana e consegue o transporte do seu contedo para outros compartimentos ou para o exterior da clula. As vesculas endocitticas se fundem com lisossomas, que contm enzimas hidrolticas, formando organelas especializadas. O contedo macromolecular digerido, fornecendo aminocidos, aucares simples e nucleotdeos, que se difundem para fora das vesculas, sendo reutilizados no citoplasma. A endocitose requer: energia, - hidrlise de ATP; Ca++, do fluido extracelular e elementos contrcteis da clula, provavelmente sistemas de microfilamentos.

Existem dois tipos de endocitose: fagocitose e pinocitose. Fagocitose ocorre em clulas especializadas (macrofgos e granulcitos). Ingesto de grande partcula (vrus, bactrias, clulas ou fragmentos). Macrofgos podem ingerir 25% do seu volume/hora ou internalizar 25% de sua membrana plasmtica/minuto, ou a membrana interna em 30 minutos. Pinocitose - ocorre em todas as clulas. 1 - fase fluida da pinocitose - processo no seletivo, permite a captao de soluto do fluido extracelular, pela formao de vesculas. Fibroblastos internalizam sua membrana com 1/3 da velocidade dos macrofgos. As membrans so refeitas por exocitose ou reciclagem, na velocidade que elas so removidas por endocitose. 2 - Pinocitose absortiva - Processo seletivo mediado por receptores especficos: mantm a concentrao de solutos do meio e regulam a velocidade de captao de fluido ou macromolculas. As vesculas formadas so derivadas de invaginao que ocorrem no lodo citoplasmtico da membrana. A claratrina, uma protena perifrica da membrana participa deste processo. LDL (lipoprotena de baixa densidade) e seu receptor so internalizados atravs de vesculas endocitticas que fundem-se lisossomos na clulas. O receptor liberado e reciclado e volta superfcie celular e a apoprotena da LDL degradada, os steres de colesterol so metabolizados. A sntese do receptor regulada por produtos metablicos colesterol liberado durante a degradao da LDL. Alteraes no receptores de LDL e sua internalizao so fatores mdicos importantes. Outras molculas (vrios hormnios), esto sujeitos a pinocitose absortiva e formam receptossomo, vesculas que liberam seu contedo complexo de Golgi.

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Pinocitose de glicoprotenas extracelulares requer que elas apresentem um sinal de reconhecimento carboidratos especficos. As hidroxilases cidas captadas por pinocitose nos fibroblastos resduos de manose 6-fosfato. Existem receptores mediadores da endocitose vrus da hepatite, poliomielite (neurnios motores) e AIDS (clulas T). Intoxicao pelo ferro comea com a captao excessiva pela endocitose.

III COMUNICAO POR CONTATO INTERCELULAR As clulas desenvolvem regies especializadas em suas membranas, para comunicao intercelular. As junes em fendas so capazes de mediar e regular a passagem de ons e pequenas molculas atravs de um ponto hidroflico, conectado o citoplasma de clulas adjacentes.

IV TRANSMISSO DE SINAIS ATRAVS DA MEMBRANA A coordenao do metabolismo nos rgos dos mamferos alcanada pela sinalizao hormonal e neuronal. Clulas um tecido sentem uma alterao no organismo e respondem secretando um mensageiro qumico extracelular. As clulas endcrinas secretam hormnios; os neurnios secretam neurotransmissores. O mensageiro extracelular passa a uma outra clula onde se liga a receptor especfico e desencadeia uma alterao na atividade da segunda clula. Na sinalizao neuronal, o mensageiro qumico (neurotransmissores acetilcolina), viaja atravs da fenda sinptica ao neurnio seguinte. Os hormnios so transportados no sangue entra entre rgos e tecidos distantes e encontram a sua clulas-alvo. Exceto, esta diferena anatmica, a sinalizao qumica nos sistemas neuronal e endcrino semelhante no mecanismo. Alguns mensageiros qumicos so comuns a ambos os sistemas. A epinefrina e a norepinefrina, funcionam como eurotransmissores em sinapses do crebro e msculo liso e como hormnios, regulando o metabolismo energtico do fgado e msculo. Os sistemas hormonal e endcrino na regulao do metabolismo formam um, sistema neuroendcrino nico. A palavra hormnio (verbo grego horman = agitar ou excitar). Eles controlam os diferentes aspectos do metabolismo, motilidade do trato gastrointestinal, secreo de enzimas digestivas e de outros hormnios, lactao e a atividade dos sistemas reprodutores.

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MECANISMOS MOLECULARES DA TRANSDUO DE SINAIS A ao hormonal inicia-se com a ligao no-covalente do hormnio a protena receptora da membrana plasmtica de uma clula sensvel. O stio de ligao estereoespecfico e liga apenas o Hormnio ligante natural ou molculas com estrutura semelhante. Anlogos estruturais que mimetizam os seus efeitos so chamados agonista; antagonistas so anlogos que bloqueiam os efeitos dos agonistas.

Hormnio que utilizam o AMPc como segundo mensageiro Vrios hormnios agem aumentando o nvel intracelular de AMPc (adenosina 3-5-monofosfato) e, portanto, a atividade da protena quinase-AMPc dependente glucagon, epinefrina, corticotrofina (ACTH), hormnios paratireoideano (PH), estimulante da tireide (TSH), folculo estimulante (FSH) e luteinizante (LH). Alguns hormnios agem inibindo a adenilato ciclase, diminuindo os nveis de AMPc e suprimindo a fosforilao de protenas, atravs da ativao de uma protena inibidora G ou Gi, que estruturalmente homloga ao Gs somatostatina, prostaglandina E1 (PGE1) adipcitos) antagonistas do glucagon e adrenalina. PGE1 em outros tecidos aumenta a concentrao de AMPc, porque a epinefrina se liga aos receptores a-adrenrgicos e diminuem a concentrao de AMPc. Resposta celular da epinefrina o mecanismo molecular melhor conhecido e envolve o AMPc como segundo mensageiro. Estes hormnios utilizam os receptores - adrenrgicos (hepatcito, mitico ou adipcito), protenas integrais da membrana. A ligao do hormnio desencadeia uma alterao estrutural no domnio intracelular do receptor e permite sua integrao com a segunda protena na via da transduo do sinal protena de ligao do GTP (protena G). ENZIMAS REGULADAS PELA FOSFORILAO DEPENDENTE DE AMPc

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Hormnios que utilizam o GMPc como segundo mensageiro O GMPc (guanosina 35-monofosfato), um segundo mensageiro em certas clulas, mediado pela protena qauinase dependente de GMPc (fosforila Ser e Thr). A mensagem transprtada pelo GMPc varia com o tecido onde ele age: nos ductos coletores dos rins e clulas de revestimento intestinal, altera o transporte de ons e reteno de gua; no msculo cardaco ele sinaliza relaxamento; no crebro ele est envolvido no desenvolvimento e na funo do crebro adulto.

Voc Sabia!
Tubocuranina, componente ativo do curare (veneno de flecha - Amazonas) e a cobrotoxina e bungarotoxina (serpente) bloqueiam o receptor de acetilcolina ou inibem a abertura do seu canal, o msculo no recebem estmulo paralisia e causa a morte. Tetrodotoxina (peixes sopradores) e saxitoxina (dinoflagelado mars vermelhas), bloqueiam a abertura de canais de Na+. Tumores e cncer o resultado da diviso celular no controlada. A diviso celular regulada pelos fatores crescimento, protenas que induzem clulas em repouso a sofrerem diviso celular e diferenciao. Muitos tipos de cncer so o resultado de protenas transdutoras anormais, que levam produo continuada de sinais para a diviso. Os genes, que codificam estes defeitos nestas protenas so os oncogenes. [Ca++] baixas no fludos extracelular, aumenta a permeabilidade da membrana e a difuso de Na+. Despolariza a membrana e dispara um impulso nervoso torpor, formigamento, cibras musculares, sintomas de baixos nveis de Ca++ no soro.

HORMNIOS ESTERIDES E TIREOIDEANOS ATUAM NO NCLEO O mecanismo pelo qual os hormnios, esterides e tireoideano, vitamina D e retinides exercem seus efeitos diferentes dos outros tipos de hormnios. Os hormnios esterides (estrgenos, andrgenos, progesterona e cortisol) hidrofbicos, so transportados por protenas carreadoras especficas at os tecidos-alvo. Ai, estes hormnios passam atravs da membrana por simples difuso e ligam-se a protenas receptoras especficas no ncleo. Os complexos hormnio-recepetor interagem com fatores de transcrio especficos, alterando a expresso gnica. A ligao do hormnio desencadeia alteraes na conformao de; protenas receptoras, elas ligam-se a sequncia especfica no DNA elementos de res-

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posta de um hormnio (HRE), aumenta ou diminui a expresso de genes, portanto a sntese de protenas. Cada sequncia HRE consiste de duas sequncia de nucleotideos. o complexo hormnio-receptor liga-se ao DNA como um dmero, com cada monmero reconhecendo uma seqncia de seis nucleotdeos. Mutaes no receptor no stio de ligao do hormnio, leva a perda da resposta ao sinal homens incapazes de responder ao cortisol, testosterona, vitamina D ou tiroxina. Alguns hormnios (testosterona, tiroxina e vitamina D) so enzimaticamente convertidos em derivados mais ativos dentro das clulas-alvo; cotisol, convertido a uma forma inativa em algumas clulas, tornando estas resistente ao hormnio. Tamoxifeno em alguns tipos de cncer, como o de mama, a diviso das clulas cancerosas depende da presena de estrgeno. A droga compete com o hormnio na ligao ao receptor, inibindo a expresso gnica. RU486 antagonista da progesterona, bloqueia as aes hormonais essenciais implantao do ovo fertilizado no tero.

HORMNIOS QUE USAM RECEPTORES COM ATIVIDADE CATALTICA O receptor de insulina uma protena quinase Tyr quinase, que transfere um grupo fosfato do ATP para o grupo hidroxila de resduos de tyr. Ele possui duas cadeias a idnticas (ligao da insulina), que se salientam externamente da membrana e duas cadeias b (domnio Tyr quinase) transmembrana, na face citoslica. Insulina liga-se s cadeias a e ativa as cadeias b -Tyr quinase, que se autofosforila, esta enzima, fosforila outras protenas da membrana ou do citosol, indicando uma cascata de fosforilao de protenas. A autofosforilao ativa uma Tyr quinase, que fosforila outra quinase do tipo Ser ou Thr, que alteram funes celulares. Indivduos com diabetes insulina resistente secretam insulina normalmente, mas seus tecidos no respondem insulina modificao do receptor (mutao). Outros hormnios e fatores de crescimento possuem receptores com atividade cataltica: fator de crescimento epidrmico e fator de crescimento derivado das plaquetas.

CANAIS ABERTOS POR LIGANTES E PELO POTENCIAL DE MEMBRANA Canais inicos abertos por ligantes nesta classe de transduo de sinais, os receptores so acoplados direta ou indiretamente a canais

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inicos na membrana receptor nicotnico da acetilcolina, responde ao neurotransmissor acetilcolina. Encontrado nas clulas pssinpticas em certas sinapses nervosas e na juno neuromuscular. Acetilcolinma liberada, liga-se ao receptor na clula ps-sinptica, o receptor do canal inico abre-se e permite a passagem de Na+ e K+ atravs da membrana, despolarizando a membrana e desencadeando a contrao muscular ou potencial de ao do neurnio. Canais abertos por voltagem potencial de ao uma onda de despolarizao que varre o neurnio do local do estmulo inicial at a sinapse seguinte. Este mecanismo necessita de canais inicos abertos por voltagem protenas transmembrana, abrem e fechamse em resposta a alteraes no potencial eltrico transmembrana. Quando a onda de despolarizao alcana estes canais eles se abrem deixando o Ca++ entrar a partir do meio externo e desencadear aa liberao de acetilcolina na fenda sinptica. Ela difunde-se para a clula ps-sinptica, onde se liga aos seus receptores. Esclerose mltipla e sndrome de GuillianBarr - so caracterizadas por desmielinizao e diminuio da conduo do impulso nervoso. Toxinas, oncogenes e promotores de tumores interferem na transduo de sinais. Toxina colrica, secretada Vibrio cholerae, uma enziam que liga ADP-ribose a subunidade G, bloqueando a sua atividade GTPase e tornando-a permanentemente ativada, aumenta a [AMPc] e desencadeia a secreo contnua de Cl- e HCO3- e gua na luz intestinal desidratao e perda de eletrlitos. Toxina de coqueluche, produzida pela Bordetella pertussis, liga ADP-ribose a subunidade Gi bloqueando a inibio da adenilato ciclase hipersensibilidade a histamina e diminuio da glicose sangunea. Ltio doena manca-depressiva ocorre devido a superatividade de clulas do SNC nveis elevados de neurotransmissores ou hormnio estimulam o ciclo do IP. Aps interao receptor de membrana-hormnio/neurotransmissor via do fosfatidilinositol (IP) IP3 + DAG, e envolve o complexo protena G e ativao da fosfolipase C. IP3 e seus derivados so defosforilados gerando inositol livre, que utilizado na sntese de fosfatidilinositolmonofosfato. Li+ inibe esta fosfatase e interfere na funo da protena G. O ciclo IP retardado mesmo com estmulo hormonal/neurotransmissor contnuo, a clula fica menos sensvel.

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Existem duas isozimas da guanilato ciclase:

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1 - Protena integral - domnio do receptor hormonal externo e o domnio formador do GMPc na face citoslica. Ativada pelo fator atrial natiurtico (ANF), liberado pelas clulas cardacas, quando o volume cardaco aumenta e distende o trio. O ANF ativa a guanilato ciclase dos ductos coletores, aumenta a excreo de Na + e de gua e causa relaxamento dos vasos (vasodilatao), reduzindo a presso arterial. Endotoxina bacteriana termoestvel, na clula intestinal liga-se receptores de guanilato ciclase aumenta GMPc, diminui a absoro de gua diarria. 2 - Protena citoslica - com grupo heme, ativada pelo xido nitroso (NO), produzido pela NO sintase a partir da Arginina, e nitrovasodilatadores (nitroglicerina e nitroprussiato NO). GMPc leva a um relaxamento do corao, estimulando a bomba de ons que mantm uma baixa concentrao citoslica de Ca++.

Hormnios que usam dois mensageiros secundrios Outra classe de receptores de sinais acoplada, atravs de uma protena G, a uma fosfolipase C da membrana, especfica para o fosfatidilinositol-4,5-bifosfaato da membrana. Esta enzima hormnio-sensvel catalisa a formao de dois mensageiros secundrios: Diacilglicerol (DC) e o inositol-1,4,5-trifosfato (IP3). Vasopressina (hepatcitos), hormnio de liberao da tireotrofina (hipfise) e serotonina. Hormnio liga-se ao receptor especfico, catalise a troca GTPGDP na protena G Gp, ativando-a, mecanismo idntico ao da epinefrina e protena Gs. Gpativada, ativa a fosfolipase C, que hidrolisa o fosfatidil-4,5-bifosfato DG e IP3. IP3 atua no retculo endoplasmtico, onde se liga a receptores especficos e abre canais de Ca++ , liberando-o para o citosol. DG atua como segundo mensageiro, ativa uma enzima de membrana a protena quinase C Ca++-dependente, que fosforila resduo de Ser e Thr de protenas-alvo especfica, alterando sua atividade cataltica.

Ca++ atua como mensageiro secundrio em muitas transdues de sinais Ca ++ um mensageiro em clulas sensveis hormnios, neurnios, clulas musculares e outras clulas, desencadeando respostas intracelualres. Exocitose no nervo e clulas endcrinas e a contrao no msculo. [Ca++] citoslico mantida baixa, pela ao de bombas de Ca++ - retculo endoplasmtico, mitocndria e membrana plasmtica. Estmulos induzem o influxo de Ca ++ para o

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citosol ou o efluxo do retculo ou mitocndria, aumenta a [Ca++] e desencadeia a resposta celular. Ca++ ativa uma variedade de enzimas Ca++ -dependente protena quinase, cuja subunidade reguladora a calmodulina/Ca++. Quando [Ca++] aumenta, a enzima fosforilada e regula vrias enzimas. Fosforilase b quinase ativada pelo Ca++ e a NO sintase, possuem calmodulina com subunidade. Uma isozima da nucleotdeo cclico fosfodiesterase que degrada o AMPc dependente da calmodulina/ Ca++. [AMPc], um segundo mensageiro, regulado pela ao de outro segundo mensageiro Ca ++ ; h uma conversa cruzada e retroalimentao entre os vrios sistemas de transduo de uma clula.

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Unidade 14

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Unidade 14 INTEGRAO E REGULAO METABLICA

14.1 Introduo
Denomina-se metabolismo ao conjunto de reaes qumicas que ocorrem nas clulas, e que lhe permitem manter-se viva, crescer e dividir-se. Classicamente, divide-se o metabolismo em: Catabolismo - obteno de energia e poder redutor a partir dos nutrientes. Anabolismo - produo de novos componentes celulares, em processos que geralmente utilizam a energia e o poder redutor obtidos pelo catabolismo de nutrientes. Existe uma grande variedade de vias metablicas. Em humanos, as vias metablicas mais importantes so: gliclise - oxidao da glucose a fim de obter ATP ciclo de Krebs - oxidao do acetil-CoA a fim de obter energia fosforilao oxidativa - eliminao dos eltrons libertados na oxidao da glucose e do acetil-CoA. Grande parte da energia libertada neste processo pode ser armazenada na clula sob a forma de ATP. vias das pentoses-fosfato - sntese de pentoses e obteno de poder redutor para reaes anablicas. Ciclo da uria - eliminao de NH4+ sob formas menos txicas -oxidao dos cidos graxos - transformao de cidos gordos em acetil-CoA, para posterior utilizao pelo ciclo de Krebs. gluconeognese - sntese de glucose a partir de molculas mais pequenas, para posterior utilizao pelo crebro.

14.2 Regulao das Vias Metablicas

Regulao da Gliclise O fluxo metablico atravs da gliclise regulado em trs pontos: hexocinase: inibida pelo prprio produto, glucose-6-P fosfofrutocinase: inibida por ATP e por citrato (que sinaliza a abundncia de intermedirios do ciclo de Krebs). tambm inibido por H +, o que importante em situaes de

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Figura 1 - As diversas vias metablicas relacionam-se entre si de forma complexa, de forma a permitir uma regulao adequada. Este relacionamento envolve a regulao enzimtica de cada uma das vias, o perfil metablico caracterstico de cada rgo e controle hormonal.

anaerobiose (o fermentao produz cido lctico, que faz baixar o pH). Provavelmente este mecanismo impede que nestas situaes a clula esgote toda a sua reserva de ATP na reao da fosfofrutocinase, o que impediria a ativao da glucose pela hexocinase. estimulada pelo substrato (frutose-6fosfato), AMP e ADP (que sinalizam falta de energia disponvel), etc. piruvato cinase: inibida por ATP e por acetil-CoA

Regulao da Gluconeognese O fluxo regulado nas reaces caractersticas da gluconeognese. Assim a piruvato carboxilase activada por acetil-CoA, que sinaliza a abundncia de intermedirios do ciclo de Krebs, i.e., diminuio da necessidade de glucose.

Regulao do Ciclo de Krebs O ciclo de Krebs controlado fundamentalmente pela disponibilidade de substratos, inibio pelos produtos e por outros intermedirios do ciclo.

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piruvato desidrogenase: inibida pelos prprios produtos, acetil-CoA e NADH citrato sintase: inibida pelo prprio produto, citrato. Tambm inibida por NADH e sucinil-CoA (sinalizam a abundncia de intermedirios do ciclo de Krebs). isocitrato desidrogenase e a-cetoglutarato desidrogenase: tal como a citrato sintase, so inibidas por NADH e sucinilCoA. A isocitrato desidrogenase tambm inibida por ATP, e estimulada por ADP.Todas as desidrogenases mencionadas so estimuladas pelo io clcio.

Regulao do Ciclo da ureia A atividade da carbamoil-fosfato sintetase estimulada por Nacetilglutamato, que assinala a abundncia de azoto no organismo.

Regulao do metabolismo do glicognio O fgado possui uma hexocinase com pouca afinidade para a glucose e que no inibida por glucose-6-P. Portanto, a glucose s fosforilada no fgado quando existe no sangue em concentraes muito elevadas (i.e. depois das refeies). Assim, quando a concentrao de glucose no sangue baixa o fgado no compete com os outros tecidos, e quando os nveis de glucose so elevados o excesso de glucose convertido pelo fgado em glicognio.

Regulao do Metabolismo dos cidos graxos A entrada dos acil-CoA na mitocndria um factor crucial na regulao. O malonil-CoA, que se encontra presente no citoplasma em grande quantidade em situaes de abundncia de combustveis metablicos, inibe a carnitina aciltransferase impedindo que os acil-CoA entrem na mitocndria para serem degradados. Alm disso, a 3-hidroxiacil-CoA desidrogenase inibida por NADH e a tiolase inibida por acetil-CoA, o que diminui a degradao de cidos gordos quando a clula tem energia em abundncia.

Regulao da Via das pentoses-fosfato O fluxo metablico na via das pentoses-fosfato determinado pela velocidade da reao da glucose-6-fosfato-desidrogenase, que controlada pela disponibilidade de NADP+.

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14.3 Perfis Metablicos dos rgos mais Importantes

Crebro Utiliza normalmente apenas glucose como fonte de energia. Armazena muito pouco glicognio, pelo que necessita de um fornecimento constante de glucose. Em jejuns prolongados, adaptase utilizao de corpos cetnicos. sempre incapaz de utilizar cidos gordos.

Fgado Uma das suas principais funes manter o nvel de glucose no sangue, atravs da gluconeognese e da sntese e degradao do glicognio. Realiza a sntese de corpos cetnicos em situaes de abundncia de acetil-CoA. Responsvel pela sntese da ureia.

Tecido adiposo Sintetiza cidos graxos e armazena-os sob a forma de triacilgliceris. Por ao do glucagon, hidroliza triacilgliceris em glicerol e cidos graxos, que liberta para a corrente sangunea em lipoprotenas.

Msculo Utiliza glucose, cidos gordos, corpos cetnicos e aminocidos como fonte de energia. Possui uma reserva de creatina fosfatada, um composto capaz de fosforilar ADP em ATP e assim produzir energia sem gasto de glucose. A quantidade de creatina presente no msculo suficiente para cerca de 3-4 s de actividade. Aps este perodo, realiza a gliclise, primeiro em condies anaerbicas (por ser bastante mais rpida do que o ciclo de Krebs) e posteriormente (quando o aumento da acidez do meio diminui a actividade da fosfofrutocinase e o ritmo da gliclise) em condies aerbicas.

Rim Pode realizar a gluconeognese e libertar glucose para a corrente sangunea. Responsvel pela excreo de electrlitos, ureia, etc. A sntese de ureia, que ocorre no fgado, usa HCO3-, o que contribui para a descida do pH sanguneo. Situaes de acidose metablica podero, portanto ser agravadas pela ao do ciclo da ureia. Nestas circunstncias, o azoto eliminado pela ao conjunta do fgado e do rim: o excesso de azoto primeiro incorporado em glutamina pela glutamina sintase. A glutaminase renal cliva ento a glutamina em glutamato e NH3, que excreta imediatamente. Este

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processo permite a excreo de azoto sem eliminar o anio bicarbonato.

14.5 Controle Hormonal

efetuado principalmente por duas hormonas sintetizadas pelo pncreas: a insulina e o glucagon. A insulina libertada pelo pncreas quando a concentrao de glucose no sangue elevada, i.e., sinaliza a abundncia de glucose. A insulina estimula a entrada de glucose no msculo, a sntese de glicognio e a sntese de triacilgliceridos pelo tecido adiposo. Inibe a degradao do glicognio e a gluconeognese. O glucagon produzido pelo pncreas quando os nveis de glucose no sangue baixam muito, e tem efeitos contrrios aos da insulina. No fgado, o glucagon vai estimular a degradao do glicognio e a absoro de aminocidos gluconeognicos. Vai tambm inibir a sntese do glicognio e promover a libertao de cidos gordos (em nvel do tecido adiposo).

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Unidade 15

TPICOS EM BIOQUMICA APLICADOS A BIOLOGIA

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Tpicos em Bioqumica Aplicados a Biologia

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Unidade 15 TPICOS EM BIOQUMICA APLICADOS A BIOLOGIA

As mudanas ambientais e a evoluo homindea (o surgimento da espcie Homo sapiens). A origem dos seres vivos est intimamente associada s circunstanciais e transformaes ocorridas desde a formao do planeta Terra, h cerca de 4,5 bilhes de anos, passando por momentos de aquecimento e resfriamento, radiaes UV, descargas eltricas, intenso vulcanismo, precipitaes e evaporaes. Em virtude de tais acontecimentos, com incidncia direta sobre compostos e elementos qumicos da atmosfera primitiva: gs carbnico, gs nitrognio, amnia, gs hidrognio, metano, e vapor dgua, foi possvel uma reorganizao molecular que passou por alteraes gradativas, a ponto de viabilizar o surgimento de uma rudimentar estruturao orgnica (os coaservados), evolutivamente capazes de promover interaes entre si e com o meio. Indcios revelam a existncia de vidas (os fsseis), contidos no arcabouo geolgico transcorrido 1 bilho de anos desde a formao do planeta. O metabolismo o conjunto de reaes qumicas que ocorrem no organismo afim de que esse gaste energia. Tais reaes ocorrem em dois processos: o anabolismo, que cria molculas complexas a partir de molculas simples, e o catabolismo, que decompe as molculas complexas criadas no anabolismo para produzir energia. Dessa forma, quando o anabolismo trabalha superando a atividade do catabolismo o organismo ganha peso e ocorre inversa-

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mente a perda de peso quando o catabolismo supera as atividades do anabolismo. Cada organismo possui seu metabolismo distinto, ou seja, o metabolismo de cada organismo trabalha de forma nica, sendo mais lento ou mais gil dependendo do nvel mnimo de energia que o organismo precisa para funcionar e desempenhar suas funes vitais. Existem vrios tipos de metabolismo, porm existem alguns tipos que so mais importantes como o Metabolismo Basal que trabalha em funo das principais atividades bsicas do organismo, como a regulao da temperatura corporal, a regulao da presso arterial e a regulao dos batimentos cardacos, por exemplo. O Metabolismo da Atividade Fsica o responsvel por gastar energia enquanto o organismo est realizando atividades fsicas especficas para a queima de energia e inespecficas como escovar os dentes e pentear os cabelos, por exemplo. O Metabolismo Alimentar trabalha desde a ingesto do alimento no processo de mastigao at o processamento dos nutrientes pelo organismo. Os carboidratos atuam de forma a acelerar o metabolismo, pois acelera os msculos, o sistema nervoso e as clulas sanguneas, o que o torna indispensvel para ter disposio e estar sempre ativo. As gorduras tambm so fundamentais para o metabolismo, pois retarda a digesto dos carboidratos e faz com que a energia gerada pelo organismo seja gasta de forma homognea. As protenas diminuem a velocidade da digesto dos carboidratos e ainda auxilia na queima de calorias. A descoberta de como a planta se alimenta vem desde muito tempo (no foi uma verdadeira descoberta, mas foi um bom comeo e na poca foi bem aceita, pois essa deduo veio de um grande filosofo), comeou exatamente no sculo IV a.C. com o filsofo Aristteles que tinha dvidas de como a planta se alimentava por que todo ser vivo precisa de alimento para se manter vivo. E depois de pensar, ele tirou a concluso de que a planta tira seu alimento do solo. Essa idia durou muito tempo.

Priestley Vrios sculos depois exatamente no sculo XVIII um Qumico chamado de Priestley queria saber por que o oxignio da terra no se acabava afinal o ar era injuriado pela queima de velas (combusto) e pelos os animais. At que um dia acidentalmente ele descobriu. Ele deixou uma vela acesa em um local fechado e sem querer deixou cair uma folha de hortel junto vela, depois de um tempo depois do oxignio ter acabado por causa da combusto ele percebeu que dava para acender a vela novamente. Ento ele chegou a seguinte descoberta:

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plantas Ar irrespirvel --------> Ar respirvel Essa descoberta teve um impacto muito grande no mundo cientifico da poca.

Ingen - Housz Pouco tempo depois, o cientista Ingen Housz descobriu que para as plantas restaurarem o ar, elas precisavam de luz. Ele chegou a essa concluso atravs desse experimento: ele pegou plantas e dividiu ela em partes (Raiz, caule e folhas) e colocou cada parte em um recipiente, deixando os em ambiente escuro, depois fez o mesmo processo s que em vez de colocar no escuro colocou em ambiente com luz. Depois ele percebeu que nas partes que estavam no escuro, nenhuma tinha recuperado o ar e na partes que estavam em ambiente com luz eles percebeu que apenas o local que estavam s folhas (e partes verdes), que havia recuperado o ar. Atravs dessa descoberta outros qumicos descobriram que no ar esgotado pela respirao dos animais havia mais CO2 e menos O2. Um tempo depois Ingen Housz props a hiptese de que o Carbono seria utilizado para produzir seu alimento e oxignio seria apenas um subproduto desse processo. Aumentado proposta de Prietley, ela ficou assim: o gs carbnico (CO2) na planta com presena de luz tem como produto os compostos orgnicos que a planta necessita para viver e o oxignio (O2).

Saussere Ainda no sculo XVIII o cientista Saussere dizia que a gua (H 2 O) participava da produo dos compostos orgnicos (Fotossntese) e ele provou isso atravs de um experimento onde ele pesava uma planta, pesava o vaso onde a planta ia ser colocada e pesava a areia que ia ser colocada no vaso e plantou a planta, diariamente regava a planta, depois de certo tempo ele voltou a pesar tudo novamente e percebeu que o solo pesava um pouco a mais, ou seja, era o peso da gua ento a partir disso ele verificou que a gua essencial no processo de fotossntese. Ento a frmula novamente foi modificada: CO2 (Gs Carbnico) + H2O (gua) na planta com presena da luz igual a Compostos Orgnicos + O2 (Oxignio). A partir dessa descoberta outros cientistas deduziram que o composto orgnico que era produzido pela planta era a Glicdio, mais especificamente a glicose. A razo a que se deu essa deduo que

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a glicose o glicdio mais utilizado no metabolismo das plantas. A partir disso a frmula comeou a ser escrita assim: CO2 (Gs Carbnico) + H2O (gua) na planta com presena da luz igual a (CH2O)n (Glicdio) + O2 (Oxignio). E a partir disso eles (cientistas) disseram que todos o oxignio liberado vinha da molcula de CO2 e o carbono unia - se a molcula de gua formando o carboidrato.

Van Niel Van Niel era um estudante de uma faculdade de Microbiologia nos Estados Unidos. Um dia ele estava estudando sobre um grupo de bactrias que podiam fazer fotossntese havia uma diferena no processo de fotossntese dessas bactrias para a das plantas, que em vez de elas utilizarem a gua, elas utilizavam o Sulfeto de hidrognio (H2S) e do mesmo modo das plantas elas utilizavam o CO2 (Gs Carbnico), mas no tinha como produto o O2 (Oxignio) diferente das plantas e nas pesquisas de Niel ele verificou que havia no citoplasma dessa bactria Enxofre (S) e gua (H2O) ento Van Niel se perguntava se essas bactrias precisam de CO2 para fazer o processo de fotossntese por que o oxignio no tambm subproduto dessa fotossntese? Ento ele chegou a ao seguinte resultado: o oxignio liberado na fotossntese das plantas no vem da molcula de CO2 (Gs Carbnico) e sim da molcula de H2O (gua). Essa descoberta no chegou com muito impacto no mundo cientifico, mas Niel no parou por ai ele criou a partir dessa descoberta uma frmula geral da fotossntese que servia para qualquer ser fotossintetizante. A frmula a seguinte: CO2 + H2 X (CH2O)n + X + H2O, onde X vai ser uma molcula que faz parte do elemento que vai ser absorvido, fora o CO2. J essa frmula chamou a ateno de muitos cientistas e o resultado disso foi a comprovao dessa descoberta como veremos a seguir.

Calvin e outros Cientistas Calvin e sua equipe foram bastante importantes para a descoberta de Niel atravs da uma experincia onde eles pegaram uma planta (alga verde, chamada de Chlorella) colocaram em um local onde s era fornecida gua com a molcula de oxignio istopo, um oxignio mais pesado o e j no CO2 era o oxignio normal o mais comum na natureza. Essa foi uma forma de distinguir-los. Depois do processo foi verificado que o oxignio que estava no ar era o mesmo que estava na molcula de gua fornecida a planta.

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E no carboidrato (glicose) verificou-se que nas molculas de oxignio era o mesmo. Essa experincia foi feita vrias vezes, invertendo as molculas, ou seja, a gua com a molcula de oxignio mais comum (16O) e no gs carbnico a molcula de oxignio mais pesada (18O ) e o mesmo resultado, a molcula de oxignio que estava na gua era a mesma que estava no ar depois do processo de fotossntese e a molcula que estava no carboidrato (glicose) era a mesma que estava na molcula de CO2 e assim foi confirmada a descoberta de Van Niel.

Esquematizao de uma juno desmossomal.

Os tecidos de um organismo so formados por agrupamentos de clulas semelhantes quanto morfologia e a fisiologia, necessitando em algumas situaes orgnicas de extrema conexo entre clulas adjacentes (vizinhas), assegurando, por exemplo: proteo contra a penetrao de microorganismos patognicos (que causam doenas), e em outros casos, estruturas que proporcionam o intercmbio de substncias. Tais funes ocorrem devido a especializaes presentes nas regies mediadas pela membrana plasmtica e envoltrios celulares, denominadas junes intercelulares, sendo: os desmossomos, as znulas oclusivas (junes oclusivas), as znula de adeso, e os nexos (junes comunicantes). Desmossomo ponte estabelecida entre duas clulas vizinhas, por onde se conectam filamentos intermedirios, formando uma

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estrutura de grande fora tensora, composta de vrias protenas intracelular (placoglobina e desmoplaquina) e extracelular (desmogleina e desmocolina), existentes principalmente no tecido epitelial de revestimento (a pele) e msculo cardaco. Znulas oclusivas unio entre as clulas (do intestino), impedindo a passagem e o armazenamento de substncias e macromolculas nos espaos intercelulares, vedando a comunicao entre dois meios (cavidades). Nexos so pontos comunicantes entre a membrana de uma clula e outra, atravs de protenas transmembranares de ambas as clulas, formando poros (canais), por onde passam ons e pequenas molculas. Esse tipo encontrado em tecidos embrionrios, clulas cardacas e hepticas. Znula de adeso regies que unem clulas vizinhas por meio de substncias intercelulares adesivas, causando aderncia sem que haja contato entre as membranas plasmticas.

O citoplasma e as organelas de uma clula eucarionte.

O citoplasma o espao da clula compreendido entre a membrana plasmtica e a membrana nuclear nos eucariotos, correspondendo nos procariotos toda a totalidade do contedo limitado pela membrana. Esta regio contm um fluido viscoso chamado de hialoplasma, tambm denominado de citosol ou citoplasma fundamental, constitudo basicamente por ons dissolvidos em soluo aquosa e substncias de fundamental necessidade sntese de molculas orgnicas (carboidratos e protenas). Dessa forma, o citoplasma considerado um colide, onde esto imersas as organelas celulares: as mitocndrias, os peroxissomos, os lisossomos, os cloroplastos, os vacolos, os ribossomos, o com-

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plexo de golgi, o citoesqueleto e o retculo endoplasmtico liso e rugoso. Entre as funes realizadas pelo citoplasma esto: o auxlio na morfologia da clula, relacionada consistncia do citosol e o armazenamento de substncias indispensveis vida. Seu contedo est em constante movimentao, caracterizado por ciclose, visivelmente analisado em clulas vegetais observadas ao microscpio.

O complexo de Golgi e o aspecto morfolgico de sacos empilhados

O complexo de golgiense, ou conhecido pelas seguintes denominaes: aparelho de golgi, dictiossomo, golgiossomo ou complexo de golgie, constitui uma organela citoplasmtica tpica de clulas eucariticas, com funo fundamental de eliminao de substncias produzidas pela sntese celular atravs do processo de secreo. formado por vesculas com morfologia de sacos achatados. Alm de promover maturao e armazenamento de protenas ribossomticas, efetua tambm a distribuio das molculas sintetizadas e empacotadas nas vesculas. Aderidas ao citoesqueleto as vesculas so transportadas no interior da clula at a regio basal da mebrana plasmtica. A partir desse instante a membrana da vescula se funde membrana da clula, eliminando o contedo protico para o meio extracelular. Boa parte das vesculas transportadoras do retculo endoplasmtico rugoso (RER) so transportadas em direo ao complexo de Golgi, passando por snteses modificadas e enviadas aos seus destinos finais.

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Essa organela tende a se concentrar em clulas especializadas na secreo de substncias hormonais, principalmente clulas de rgos como: o pncreas (sntese de insulina e glucagom), Hipfise (somatotrofina hormnio do cescimento) e Tireide (T3 e T4).

O aspecto morfolgico de uma clula e sua fisiologia

Uma clula, de acordo com o controle gentico, possui forma relacionada com a funo que desempenha. Nos vegetais a morfologia limitada devido presena da parede celulsica conferindo angulosidades s clulas com aspecto rombodrico, enquanto nos animais a no existncia da parede permite variados formatos. - No epitlio estratificado pavimentoso (da pele, por exemplo), as clulas possuem formas polidricas conferindo um grau de proximidade que desempenha proteo mecnica, bem como evitando a perda de gua por desidratao, revestindo o organismo com muita eficcia. - No tecido muscular a forma alongada e a estrutura das clulas contribuem com a capacidade de contrao e distenso. - No tecido conjuntivo sangneo, os glbulos vermelhos do sangue (as hemcias), com forma achatada e regio central abaulada (bicncava), proporcionam melhor transporte de gs oxignio e distribuio aos diversos tecidos do organismo. - No tecido nervoso, as numerosas ramificaes (dendritos e telodendros) das clulas nervosas realizam a recepo de estmulos e a transmisso de impulsos nervosos, muitas vezes com grande velocidade. - O formato do espermatozide, constitudo por uma cabea, uma pea intermediria e uma cauda, permite sua maior mobilidade. Fatores externos podem influenciar no comportamento anatmico de uma clula. A presso exercida pelo aglomerado celular em um tecido pode remodelar a estruturao de cada unidade, visto a maleabilidade conferida pela membrana plasmtica.

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Formao das vesculas lisossmicas

Os lisossomos so organelas citoplasmticas membranosas presentes em praticamente todas as clulas eucariontes. Em seu interior existem enzimas que realizam normalmente a digesto intracelular, porm extracelular em casos excepcionais. A estrutura de um lisossomo tem sua origem a partir do processo de sntese e transformaes que envolvem a complexidade celular. Partindo inicialmente do controle gentico, so sintetizadas molculas de RNA precursoras das enzimas digestivas. Essas molculas juntamente ao retculo endoplasmtico rugoso realizam o processo de transcrio de uma protena. Finalizada a sntese, essas protenas so transportadas em vesculas (pequenas bolsas) que se dissociam do retculo com destino ao complexo de Golgi. Nesse local as protenas iro passar por transformaes (maturao), havendo acrscimo de grupamentos qumicos (fosforilao) nas extremidades dos filamentos proticos, caracterizando o seu potencial enzimtico. Aps esse estgio as enzimas formadas so empacotadas em vesculas que se desprendem do aparelho golgiense, constituindo o lisossomo. A este estado de pr-formao d-se o nome de lisossomo primrio e quando em ao funcional propriamente dita, formado: o vacolo digestivo, o vacolo autofgico e corpo residual, recebem a denominao de secundrio. Quanto ao aspecto interno da vescula lisossmica, esta possui um pH por volta de 5, um potencial hidrogeninico cido em virtude do contedo, visto que as enzimas so chamadas de hidrolases cidas. Durante o processo digestivo, os lisossomos podem tanto asociarse a fogossomos quanto a pinossomos (denominao que condiz com a consistncia das substncias ou partculas engolfadas), formando o vacolo digestivo.

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medida que a digesto se processa, as molculas necessrias ao metabolismo da clula atravessam a membrana do vacolo dispersando-se pelo hialoplasma. O material no digerido constitui o corpo residual, eliminado por exocitose (clasmocitose ou defecao celular). Essas organelas tambm podem atuar na degenerao de outros orgnulos da prpria clula, mantendo a renovao das estruturas permanentemente reconstruidas, mecanismo chamado de autofagia (auto = prprio, fagia = comer). Dependendo da informao e controle gnico, as enzimas lisossmicas, em resposta ao envelhecimento das clulas ou a qualquer alterao morfofisiolgica (hormonal, leses ou tumores), podem desencadear o mecanismo de morte celular programada (apoptose), ou seja, a clula se alto destri, evitando maiores danos ao organismo.

O Modelo Mosaico Fluido

A membrana plasmtica tambm denominada: plasmalema, membrana celular, membrana citoplasmtica, constitui uma fina pelcula lipoprotica, com espessura variando de 7,5 a 10nm (nanmetros), delimitando o citoplasma de todos os tipos de clulas vivas (eucariontes e procariontes). Entre os modelos j propostos quanto composio e estruturao membranar ao longo da histria da citologia, a melhor representao aceita atualmente foi a sugerida pelos cientistas Singer e Nicolson em 1972, simulada atravs de um mosaico fluido. Por essa representao, a membrana celular seria formada por uma bicamada fosfolipdica incrustada de protenas transmembranares, situao comprovada a partir da visualizao em microscpio. medida que se aperfeioavam os microscpios e tcnicas de anlise, foram sendo esclarecidos os questionamentos relaciona-

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dos ao funcionamento deste limiar, assegurando as caractersticas intracelulares e o meio circundante. A composio anfiptica (polar e apolar) da molcula fosfolipdica, estabelecida pela bicamada juntamente com especificidade das protenas nela contida, funcionam como portas de passagem para as substncias, permitindo a translocao de soluto e solvente conforme a necessidade metablica da clula, ou seja, a membrana possui caracterstica semipermevel (permeabilidade seletiva) de substncias ou partculas. Pelo processo de difuso ou osmose so transportados substratos atravs da membrana, mantendo diferenas de concentrao (hipotonicidade e hipertonicidade).

Fases da diviso mittica

Mitose o processo de diviso celular pelo qual uma clula eucarionte origina, em seqncia ordenada de etapas, duas clulas-filhas cromossomicamente e geneticamente idnticas. A grosso modo costuma-se dividir este processo em dois momentos: o primeiro relacionado formao de dois ncleos filhos e o segundo correspondendo citocinese (diviso do citoplasma). Contudo, didaticamente detalhada em quatro etapas: prfase, metfase, anfase e telfase. Prfase a etapa preparatria da clula para incio da diviso, ocorrendo eventos correlacionados ao perodo de interfase, essenciais para o ciclo celular: - Princpio da condensao (espiralizao / compactao) dos cromossomos duplicados na interfase;

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- Desaparecimento do nuclolo em conseqncia da paralisao do mecanismo de sntese; - Duplicao do centrolo e migrao desses para os plos opostos da clula, formando microtbulos, as fibras do fuso e do haster, ambas constitudas de tubulinas alfa e beta. As do fuso unir-se-o ao cinetcoro, regio do centrmero (ponto de interseco entre os braos cromossmicos), e as do haster dando suporte (fixao) juntamente face interna da membrana plasmtica.

Metfase Fase de mxima condensao dos cromossomos e desfragmentao total da carioteca (membrana nuclear), havendo: - Deslocamento e disposio linear dos cromossomos na placa equatorial (metafsica) da clula. - ligao dos centrmeros s fibras do fuso.

Anfase Fase da diviso onde ocorre a separao dos cromossomos duplicados, migrando cada cromtide irm em direo aos plos opostos, devido ao encurtamento dos microtbulos, conseqente retirada de tubulinas.

Telfase ltima etapa da diviso mittica, caracterizada pelo agrupamento e descompactao dos cromossomos (genoma) em

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extremidades opostas, recomposio da carioteca e nuclolo, finalizando o processo com a citocinese (individualizao do citoplasma em duas clulas-filhas).

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