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UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS DEPARTAMENTO DE ZOOTECNIA PROGRAMA DE DOUTORADO INTEGRADO PDIZ (UFC/UFRPE/UFPB)

Jos Everton Alves

TOXICIDADE DO NIM (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) PARA Apis mellifera E SUA IMPORTNCIA APCOLA NA CAATINGA E MATA LITORNEA CEARENSE.

FORTALEZA 2010

JOS EVERTON ALVES

TOXICIDADE DO NIM (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) PARA Apis mellifera E SUA IMPORTNCIA APCOLA NA CAATINGA E MATA LITORNEA CEARENSE.

Tese submetida Coordenao do Curso de PsGraduao em Zootecnia da Universidade Federal do Cear, a qual faz parte do Programa de Doutorado Integrado em Zootecnia (PDIZ) juntamente com a Universidade Federal Rural de Pernambuco e Universidade Federal da Paraba, como requisito parcial para obteno do grau de Doutor em Zootecnia.

Orientador: Prof. Dr. Breno Magalhes Freitas.

FORTALEZA 2010

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao Universidade Federal do Cear Biblioteca de Cincias e Tecnologia

A477t

Alves, Jos Everton. Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense. / Jos Everton Alves. 2010. 140f.: il. enc.; 30cm. Tese (doutorado) Universidade Federal do Cear, Centro de Cincias Agrrias, Departamento de Zootecnia, Programa de Doutorado Integrado em Zootecnia, Fortaleza, 2010. rea de concentrao: Produo e melhoramento animal. Orientao: Prof. Dr. Breno Magalhes Freitas. 1. Nim indiano. 2. Abelhas melferas. 3. Apicultura. I. Ttulo. CDD 636.08

JOS EVERTON ALVES

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Tese submetida Coordenao do Curso de PsGraduao em Zootecnia da Universidade Federal do Cear, a qual faz parte do Programa de Doutorado Integrado em Zootecnia (PDIZ) juntamente com a Universidade Federal Rural de Pernambuco e

Universidade Federal da Paraba, como requisito parcial para obteno do grau de Doutor em Zootecnia.

A citao de qualquer trecho desta tese permitida, desde que seja feita em conformidade com as normas da tica cientfica.

Tese aprovada em Fortaleza em 12 de maro de 2010.

DEUS, que nos deu a sabedoria e curiosidade para estudarmos a natureza to rica de belezas e mistrios que certamente nunca ser conquistada.

CONSAGRO

minha esposa Thalita Kelly Martins Marques e minha filha Mirela Martins Marques Alves pela felicidade que semeiam todos os dias em minha vida.

DEDICO

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Aos meus pais Jos Edson Alves e Teodora Pereira Alves e ao meu sogro Benedito Gerson Marques e minha sogra Maria de Ftima Martins Marques por acreditarem, torcerem e por me proporcionarem condies ideais para a realizao deste trabalho.

OFEREO

Aos colegas professores do Curso de Zootecnia da Universidade Estadual Vale do Acara que tanto me ajudaram na realizao deste curso de psgraduao.

AGRADEO

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AGRADECIMENTOS

Deus ... Ao departamento de Zootecnia do Centro de Cincias Agrrias da Universidade Federal do Cear pela oportunidade de realizao do Curso de Doutorado em Zootecnia. Universidade Estadual Vale do Acara pelas instalaes e colnias de abelhas usadas no experimento. EMATERCE, pelas licenas concedidas para a concluso do curso. Ao professor Breno Magalhes Freitas, pela orientao, formao acadmica, dedicao, compreenso, pacincia, conselhos, preciosas ajudas e grande amizade. Ao Prof. Dr. Ednardo Rodrigues Freitas pelas anlises estatsticas e conselhos formulados que tanto contriburam na elaborao e finalizao deste trabalho. Ao Dr. Deoclcio Guerra Paulino, pela amizade e companheirismo e pelo apoio incondicional para a realizao dos experimentos no setor de Apicultura da UFC. Aos alunos do curso de graduao em Zootecnia da Universidade Estadual Vale do Acara (UVA), Celso Braga Magalhes, Emanuelle Bruna Rodrigues Carneiro, Fbio Carreiro Chaves de Melo e Jos Ribeiro do Nascimento pela ajuda nas coletas de dados. Ao Sr. Guido Jos Alves Dias pela permisso de uso de sua propriedade e de suas colnias nos experimentos. Ao Sr. Auriclio Paulo da Costa pela hospitalidade, amizade, cordialidade e ajuda durante o manejo das colnias nos dias de coletas de dados. Aos meus irmos Jos Edson Alves Jnior e Maria Loyde Alves Freire e suas respectivas famlias pela amizade e convvio.

Aos amigos do Grupo de Pesquisas com Abelhas da Universidade Federal do Cear (GPA-UFC), Adrielle Albuquerque dos Santos, Afonso Odrio Nogueira Lima, Epifnia Emanuela de Macdo Rocha, Eva Mnica Sarmento, Francisca Ligia Aurlio Mesquita, Iana Larissa B. da Cunha, Igor Torres Reis, Isac Gabriel Abrao Bomfim, Luiz Wilson Lima-Verde, Marcelo Casimiro Cavalcante, Marcelo de Oliveira Milfont, Mrcia de Ftima Ribeiro, Mikail Olinda de Oliveira e Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, que proporcionaram na UFC, um ambiente de grande amizade e companheirismo que deixaro fortes lembranas. Aos amigos e funcionrios do Setor de Abelhas da UFC, Sr. Francisco Jos Carneiro da Silva e Sr. Hlio Rocha Lima. Aos conselheiros, Darcet Costa Souza, Joo Paulo de Holanda Neto, Jlio Otvio Portela Pereira, Raimundo Maciel Sousa pelas sugestes e colocaes que muito colaboraram para a finalizao desta obra. A todos que contriburam direta ou indiretamente para a realizao deste trabalho.

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EPGRAFE

A humanidade intervem na natureza para suprir suas necessidades ou satisfazer suas vontades. Esquecem os humanos que as leis da natureza existem para atender s necessidades de

manuteno do equilbrio e da vida no planeta. Jos Everton Alves

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SUMRIO

Lista de tabelas ...............................................................................................................

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Lista de figuras ............................................................................................................... xiii Resumo geral .................................................................................................................. xvi Abstract ........................................................................................................................... xix INTRODUO GERAL ............................................................................................... 1

CAPTULO 1 - Utilidades do nim (Azadirachta indica: Meliaceae) como inseticida orgnico e seu potencial para a apicultura: Reviso bibliogrfica. Utilidades e propriedades de Azadirachta indica: Reviso ....................................... Resumo.................................................................................................................. Abstract ................................................................................................................. 1.1. Reviso bibliogrfica ..................................................................................... 2 3 4 5

1.2. Concluses ..................................................................................................... 16 1.3. Referncias bibliogrficas .............................................................................. 17

CAPTULO 2 - Biologia floral e requerimentos de polinizao do nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) em reas de caatinga e de mata litornea do Estado do Cear. ..................................................................................... 27 Resumo.................................................................................................................. 28 Abstract ................................................................................................................. 29 2.1. Introduo ...................................................................................................... 30 2.2. Materiais e mtodos ....................................................................................... 33

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2.3. Resultados e discusso ................................................................................... 37 2.4. Concluses ..................................................................................................... 50 2.5. Referncias bibliogrficas .............................................................................. 50

CAPTULO 3 - Influncia do florescimento do nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) sobre a rea de crias das colnias de Apis mellifera nos biomas caatinga e mata litorrnea cearense .............................................................. 56 Resumo.................................................................................................................. 57 Abstract ................................................................................................................. 59 3.1. Introduo ...................................................................................................... 61 3.2. Materiais e mtodos ....................................................................................... 63 3.3. Resultados e discusso ................................................................................... 66 3.4. Concluses ..................................................................................................... 76 3.5. Referncias bibliogrficas .............................................................................. 77

CAPTULO 4 - Toxicidade do plen, nctar e do odor das flores de nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) para operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas. ........................................................................................ 83 Resumo.................................................................................................................. 84 Abstract ................................................................................................................. 86 4.1. Introduo ...................................................................................................... 87 4.2. Materiais e mtodos ....................................................................................... 88 4.3. Resultados e discusso ................................................................................... 90 4.4. Concluses ..................................................................................................... 94 4.5. Referncias bibliogrficas .............................................................................. 95

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CAPTULO 5 - Toxicidade do plen de nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaeceae) para larvas de operrias de Apis mellifera criadas in vitro ................. 98 Resumo.................................................................................................................. 99 Abstract ................................................................................................................. 100 5.1. Introduo ...................................................................................................... 101 5.2. Materiais e mtodos ....................................................................................... 103 5.3. Resultados e discusso ................................................................................... 107 5.4. Concluses ..................................................................................................... 111 5.5. Referncias bibliogrficas .............................................................................. 112

CONCLUSES GERAIS .............................................................................................. 116 SUGESTES PARA NOVAS PESQUISAS ................................................................. 119

LISTA DE TABELAS

- Captulo 2 Tabela 2.1.: Freqncia mdia diria de Apis mellifera coletando nctar e plen em flores de nim (Azadirachta indica) na caatinga e na mata litornea cearense, em 2008. 67

- Captulo 3 Tabela 3.2.: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma caatinga (Sobral-CE) em rea contendo nim (Azadirachta indica A. Juss.) em florescimento, e suas respectivas freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. 86

Tabela 3.2.: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma caatinga (Sobral-CE), sem a presena de nim (Azadirachta indica A. Juss.) e suas respectivas freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. 86

Tabela 3.3.: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma mata litornea (Horizonte-CE), contendo nim (Azadirachta indica A. Juss.), e suas respectivas freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. 87

Tabela 3.4.: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma mata litornea (Horizonte-CE), sem conter nim (Azadirachta indica A. Juss.), e suas respectivas freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. Tabela 3.5.: reas mdias (cm2) de crias de colnias de Apis mellifera dispostas nos biomas caatinga (Sobral CE) e mata litornea (Horizonte-CE), prximas e distantes de reas com Azadirachta indica em florescimento. 89 88

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Tabela 3.6.: Percentual de sobrevivncia de larvas de as crias em colnias de abelhas melferas (Apis mellifera) em ambientes na presena e na ausncia de nim (Azadirachta indica) nos biomas caatinga (Sobral-CE) e mata litornea (HorizonteCE), em 2008. 92

- Captulo 4 Tabela 4.1.: Perodo, em dias, para mortalidade total nas abelhas na gaiola (PMTG), ndice de mortalidade (IM) e tempo mdio de mortalidade (TMM) de operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas sob condies de laboratrio sujeitas s dietas: gua, mel e plen (T0); gua, flores de nim e polen apcola (T1); gua, flores de nim e mel (T2); gua e flores de nim (T3); gua, mel, plen e cheiro das flores de nim (T4) e gua, flor de nim, mel e plen apcola (T5). 110

- Captulo 5 Tabela 5.1.: Mortalidade percentual* de crias de operrias de Apis mellifera produzidas em condies de laboratrio sob diferentes dietas compostas de alimento larval artificial, plen de nim (Azadirachta indica) e de outras fontes (legenda). 128

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LISTA DE FIGURAS

- Captulo 1 Figura 1.1.: Nmero de estudos realizados com Azadirachta indica ao longo dos anos de 1926 a 2008. 26

Figura 1.2.: Mapa dos pases onde a espcie Azadirachta indica est presente de forma nativa ou introduzida pelo homem. 27

- Captulo 2 Figura 2.1.: Quantidade e percentual de abertura das flores de nim (Azadiractha indica) na caatinga e na mata litornea no Estado do Cear em funo dos horrios do dia (n = 200). 58

Figura 2.2.: Seqncia do desenvolvimento de flores de Azadirachta indica no horrio da antese. Imagem com aumento de 2X. 59

Figura 2.3.: a) Flor no momento da antese mostrando o andrforo intumescido e no seu interior o estigma levemente abaixo das anteras. b) Flor 18 horas aps a antese com o andrforo menos intumescido fazendo com que o estigma se posicione acima das anteras. Figura com aumento de 6X. 60

Figura 2.4.: Gros de plen de Azadirachta indica. a) Na forma ovalada (desidratado) e b) Na forma esfrica (intumescidos). Aumento aproximado de 400X. 61

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Figura 2.5.: Ilustrao mostrando a probscide de uma operria de Apis mellifera introduzida em uma flor de Azadirachta indica em corte longitudinal, simulando uma visita para a coleta de nctar. 62

Figura 2.6.: Horrios de liberao do plen pelas anteras e de receptividade do estigma de Azadirachta indica, avaliados em funo da reao ao perxido de hidrognio. 64

Figura 2.7.: Percentual de germinao in vitro dos gros de plen de nim (Azadirachta indica) em meios de cultura com diferentes concentraes de sacarose. 65

Figura 2.8.: Germinao in vitro dos gros de plen de nim (Azadirachta indica) em diferentes idades das flores, em substrato com 40% de concentrao de sacarose. 66

Figura 2.9.: Frutificao de flores de Azadirachta indica que receberam polinizao natural, polinizao melitfila com uma nica visita de Apis mellifera e polinizao restrita, em condies de caatinga e de mata litornea, no Estado do Cear, em 2008. 69

- Captulo 3 Figura 3.1.: Quadro de colmia Langstroth inserido no suporte para medio da rea de crias seguindo metodologia de AL-TIKRITY et al., 1972. 84

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Figura 3.2.: Desenvolvimento da rea mdia (cm2) de crias de colnias de Apis mellifera dispostas em apirios prximos e distantes de cultivos de Azadirachta indica em florescimento nos biomas caatinga (Sobral-CE) e mata litornea (Horizonte-CE) durante o perodo sem chuvas de 2008. 91

- Captulo 4 Figura 4.1.: Sobrevivncia mdia de operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas sob condies de laboratrio sujeitas s dietas: gua, mel e plen (T0); gua, flores de nim e polen apcola (T1); gua, flores de nim e mel (T2); gua e flores de nim (T3); gua, mel, plen e cheiro das flores de nim (T4) e gua, flor de nim, mel e plen apcola (T5). 111

- Captulo 5 Figura 5.1.: a) Recipientes de isopor contendo as cpulas de polietileno usadas para a criao de larvas de Apis mellifera em condies controladas de laboratrio; b) Cpulas devidamente marcadas para a identificao das crias. 125

Figura 5.2.: Sobrevivncia ao longo do perodo experimental das crias de operrias de Apis mellifera produzidas em laboratrio sob as dietas: T0: alimento larval (AL); T1: alimento larval (AL) com plen de A. indica (PAI); T2: alimento larval (AL) e plen de outras plantas (PAOP); e T3: alimento larval (AL) com plen de A. indica (PAI) e plen de outras plantas (PAOP). 129

Figura 5.3.: Recipiente de isopor contendo os quatro tratamentos. Note as diferenas de tamanho das larvas de mesma idade e de quantidade de alimento depositado entre os tratamentos. As cpulas vazias esto desocupadas por motivos de mortalidade das crias. 130
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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.
Jos Everton Alves

RESUMO GERAL O nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) uma planta de origem indiana introduzida no territrio brasileiro principalmente devido s suas propriedades inseticidas. No entanto, no se sabe ainda como essas propriedades afetam os visitantes florais e seus possveis efeitos sobre polinizadores silvestres e para a apicultura. O presente estudo objetivou, portanto, avaliar a toxicidade dessa espcie vegetal para Apis mellifera e sua importncia como planta apcola. Para tanto, experimentos sobre a biologia floral da espcie, visitantes florais, desenvolvimento de colnias de A. mellifera em reas com e sem nim nos bioma caatinga e mata litornea e sobrevivncia de larvas e adultos alimentados com plen e/ou nctar de nim em ambiente controlado foram conduzidos no Laboratrio de Abelhas da Universidade Federal do Cear - UFC, no Laboratrio de Apicultura da Universidade Estadual Vale do Acara - UVA e em propriedades particulares no Estado do Cear. Os resultados mostraram que todos os indivduos estudados de nim apresentaram flores bissexuadas, com antese por volta das 16 horas e que a maioria dos botes florais encontra-se com seus estigmas receptivos e suas anteras liberando plen, ainda invivel, 24 horas antes da antese. A maior viabilidade do plen ocorre no momento da antese. Foi encontrado nctar nas flores de A. indica, porm em quantidades diminutas que no permitiu a captura pelos tubos capilares. As abelhas Apis mellifera foram os nicos visitantes florais, apresentando maior freqncia logo nas primeiras horas do amanhecer, onde procuraram coletar nctar e plen, sendo as responsvis pela polinizao do nim. O vento no apresentou influncia na polinizao. Os resultados mostraram que as colnias distribudas na rea com nim
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apresentaram uma populao de crias significativamente maior (p<0,05) do que as dispostas na rea sem nim, tanto na caatinga como na mata litornea. Essa diferena foi siginificativamente maior (p<0,05) na caatinga, onde havia menos recursos naturais no perodo seco do ano, do que na mata litornea. Quanto mortalidade de larvas das colnias, a da caatinga com nim foi mais elevada (p<0,05) do que a da mata litornea com nim, e quando comparadas dentro do mesmo bioma, a mortalidade das larvas das colnias nas reas com nim foi significativamente superior (p<0,05) s das colnias colocadas nas reas sem nim. Apesar da mortalidade das crias ter sido mais elevada em reas com nim, este percentual de mortalidade geralmente foi inferior a 10%, valor limite considerado aceitvel. Em ambinete controlado, adultos de A. mellifera que se alimentaram exclusivamente dos recursos florais de A. indica foram os que apresentaram menor tempo mdio de vida. Verificou-se que na medida em que os recursos florais de A. indica eram substitudos por outras fontes alimentares na dieta, o tempo mdio de vida aumentava. O simples odor das flores no apresentou efeito de repelncia e no afetou a longevidade das operrias. As larvas de operrias de A. mellifera criadas em cpulas artificiais, sob condies de laboratrio, que receberam alimento larval juntamente com plen exclusivo de A. indica tiveram mortalidade de 100%, sendo significativamente superior (p<0,05) mortalidade das demais dietas (alimento larval, alimento larval + 100 % plen diverso, alimento larval + 50% plen diverso + 50% plen de nim). Conclui-se ento que o uso do nim associado outras fontes de plen e nctar parece estimular o desenvolvimento das colnias pelo acrscimo da oferta de alimento, compensando, em termos populacionais, o aumento da mortalidade larval. Esse efeito parece ser inversamente proporcional escassez de outros recursos florais, sendo to maior quanto menor for a disponibilidade de outras fontes de plen e nctar. No entanto, tanto o nctar quanto o plen do nim so txicos para adultos e larvas de A. mellifera, no sendo aconselhvel o seu uso como fonte exclusiva de alimento para essas abelhas. No que se refere

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a outros visitantes florais da fauna da caatinga e mata litornea cearense, aparententemente o nim no constitui ameaa ou recurso alimentar, haja vista que no foi verificada visitao por parte de qualquer espcie nativa. H a necessidade de maiores estudos para determinar nveis seguros de utilizao do nim na apicultura, conhecer outros possveis efeitos sobre os indivduos e colnia de A. mellifera e aprofundar o conhecimento da relao dessa planta com os visitantes florais nativos.

Palavras chave: Azadirachta indica, nim indiano, Apis mellifera, toxicidade, flora apcola.

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Toxicity of neem (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) for Apis mellifera and its beekeeping importance in caatinga and coastal vegatations of Cear.
Jos Everton Alves

ABSTRACT Neem (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) is a plant species originating in India introduced to Brazil mainly due to its insecticidal properties. However, the effect of such insecticidal properties on floral visitors, wild or reared, is not known. This study aimed to evaluate the toxicity of this plant species to Apis mellifera and its importance as a source of pollen and nectar for beekeeping. Experiments on the neem floral biology, floral visitors, A. mellifera colony development in areas with and without neem in the caatnga a coastal vegetations and larval and adult survivalship when fed with pollen or nectar of neem in controlled environment were carried out in the bee labs of the Universidade Federal do Cear - UFC, Universidade Estadual Vale do Acara - UVA and private properties in the state of Cear, Brazil. Results showed that all neem individuals studied bore bissexual flowers, with anthesis occurring around 16:00h and most flower buds presenting receptive stigmas and releasing pollen, though still unviable, 24h before anthesis. The highest pollen viability was observed at anthesis. Flowers of A. indica produced nectar in diminute amounts that did not allow sampling with capilars. Apis mellifera workers were the only floral visitors registered showing higher frequency early in the morning, when searching for pollen and nectar, and pollinating neem flowers. The wind played no role in neem pollination. Results also showed that honeybee colonies placed in the area with neem produced significantly (p<0.05) larger brood area than those palcedwhere neem was absent, both in caatinga and coastal vegetations. This difference was significanlty (p<0.05) greater in caatinga, where there were less natural resources during the dry season than in the coastal vegetation. Regarding brood mortality, that
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in caatinga with neem was higher (p<0.05) than thaof coastal vegetation with neem, and when compared within the same biome, brood mortality in colonies placed in areas with neem was significantly (p<0.05) higher than that in colonies of areas without neem. Despite brood mortality be higher in areas with neem, such mortality percentual was less than 10%, and within normal mortality parameters for honeybee brood. Under controlled environment, adult A. mellifera fed exclusively on neem were the ones with the shortest lifespan, but as neem was progressively replaced in the diet for other food sources, the worker lifespan increased. Flower odor per si did not produce repelence nor affect bee lifespan. Honeybee brood reared in artificial cups in the lab receiving larval food + neem pollen presented 100% mortality, significantly (p<0.05) higher than the other treatments (larval food, larval food + 100% pollen from other sources, larval food + 50% pollen from other sources + 50% neem pollen). It was concluded that the use of neem in association with other sources of pollen and nectar seems to estimulate colony growth due to the augment in food availability compensating, in populational terms, the increase in brood mortality. This effect seems to be inversally proportional to the scarcity of other floral resources, being as higher as shorter becomes the availability of other sources of pollen and nectar. However, both neem pollen and neem nectar are toxic for adults and larvas of A. mellifera, and it is not advisable its use as exclusive food source to these bees. Regarding other floral vistors of caatinga and coastal vegetation fauna, apparently neem does not constitute any threat or food resource, because no native species was observed exploiting this plant species. There is a need for further studies to determine safety levels for use of neem in beekeeping, to learn about other possible effects on A. mellifera individuals and colony and to investigate better the relationship of this plant species with native floral visitors. Key words: Azadirachta indica, neem, Apis mellifera, Ttxicity, flowers for beekeeping.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

1 INTRODUO GERAL

O nim (Azadirachta indica), uma das 550 espcies pertencentes famlia Meliaceae, tem origem na sia e seu cultivo vem se expandindo no Brasil nos ltimos anos. A sua disseminao no territrio brasileiro se d principalmente em funo das propriedades inseticidas que lhes so peculiares. Porm, estas propriedades inseticidas podem estar contribuindo para o declnio de polinizadores nos ecossistemas, especialmente as abelhas, e/ou interferindo com a atividade apcola do pas. Entretanto, existem poucos estudos com essa planta no Brasil, sendo a maioria concentrada no efeito do extrato ou leo do nim sobre larvas ou adultos de Apis mellifera, mas no h investigaes do seu potencial como planta apcola ou seu impacto na populao de polinizadores nativos. O presente estudo objetivou, portanto, avaliar a toxicidade dessa espcie vegetal para Apis mellifera e sua importncia como fonte de plen e nctar para abelhas. O presente trabalho encontra-se dividido em captulos e iniciado com uma reviso a cerca do uso desta espcie como inseticida e seu potencial para a apicultura, seguido dos captulos referentes aos experimentos que procuraram observar a biologia floral e os requerimentos de polinizao da espcie, a influncia do nim para a rea de crias de colnias de Apis mellifera na caatinga e na mata litornea do Estado do Cear e finalizando com os ensaios que procuraram determinar a toxicidade dos recursos florais para operrias adultas e larvas das abelhas africanizadas. Os trabalhos foram desenvolvidos no Laboratrio de Abelhas da Universidade Federal do Cear e no Setor de Apicultura da Universidade Estadual Vale do Acara, bem como em propriedades particulares distribudas nos municpios de Sobral (caatinga) e Horizonte (mata litornea).

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

CAPTULO 1 Utilidades do nim (Azadirachta indica: Meliaceae) como inseticida orgnico e seu potencial para a apicultura: Reviso bibliogrfica.

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

- CAPTULO 1 Importncia e uso do nim (Azadirachta indica, Meliaceae) como inseticida orgnico e seu potencial para a apicultura: Reviso bibliogrfica.

RESUMO

O nim (Azadirachta indica) uma planta de origem asitica, cujo cultivo vem se intensificando no Brasil para usos diversos, mas principalmente na agricultura. A presente reviso teve por objetivo investigar o uso do nim no Brasil, o conhecimento existente sobre a toxidez para Apis mellifera de produtos base do nim, bem como do nctar e plen dessa espcie vegetal. Pde-se concluir que o uso agrcola do nim se deve planta possuir substncias que apresentam uma diversidade de aes sobre pestes de cultivos, sendo o efeito inseticida o mais marcante. Em comparao aos defensivos agrcolas qumicos, os produtos a base de nim apresentam uma srie de vantagens, especialmente a baixa toxicidade para os produtores, eficincia e baixos custos, o que os tem tornado muito populares. Os princpios ativos do nim atuam sobre as pragas de diversas formas, podendo causar a morte em algumas espcies. Apis mellifera suceptvel a produtos base de nim, apresentando irregularidades no desenvolvimento e grande mortalidade das larvas, reduo na rea de cria, toxicidade em pupas, reduzida emergncia, malformaes dos adultos e grande mortalidade de rainhas nas colnias. No h trabalhos publicados testando o efeito do nctar ou do plen do nim sobre Apis mellifera, fazendo com que os riscos do uso dessa espcie na apicultura permaneam desconhecidos.

Palavras chave: Apis mellifera, inseticida a base de nim, nim na agricultura, toxidez do nim.
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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

- CHAPTER 1 Importance and use of neem (Azadirachta indica, Meliaceae) as organic insecticide and its potential for beekeeping: Literature review.

ABSTRACT

Neem (Azadirachta indica) is a species originating in Asia but its cultivation is being intensified in Brazil for many different purposes, especially aiming agriculture. This review aimed to investigate the use of neem in Brazil, the present knowledge on toxicity to Apis mellifera of neem-derived products, as well as its pollen and nectar. It was concluded that the use of neem in agriculture is due to the presence of substances which have a diversity of actions on crop pests, being the insecticide effect the most remarkable. Comparing to chemical pesticides, neem-derived products show a series of advantages, especially for their low toxicity to growers, efficiency and low costs, making them very popular. Active ingredients of neem act on crop pests of many ways, causing death in some species. Apis mellifera is suceptible to neem-derived products, showing irregular development and great brood mortality, brood area reduction, toxicity in pupae, reduction in emergency, malformation in adult bees and great queen mortality in the colonies. There are no published papers testing the effect of neem pollen or nectar on Apis mellifera, letting unknown any possible risk of this plant species for beekeeping.

Key words: Apis mellifera, neem-derived inseticide, neem in agriculture, neem toxicity.

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

1.1.

Reviso bibliogrfica

Importncia econmica de Azadirachta indica

O mercado mundial de produtos orgnicos movimentou at o final de 2008 US$ 24,6 bilhes (IBD, 2009). Este mercado apresenta um potencial para um crescimento de aproximadamente de 30% ao ano em alguns pases europeus, integrando uma mdia anual de crescimento mundial de 10% (PLANETA ORGNICO, 2008). O Brasil ocupa o segundo lugar na produo de produtos orgnicos no mundo, apresentando uma rea plantada de 6,5 milhes de hectares destes cultivos orgnicos, movimentando US$ 250 milhes (APEX-BRASIL, 2006). As principais culturas so de extrativismo sustentvel (castanha, aa, pupunha, ltex, frutas e outras espcies das matas tropicais, principalmente da Amaznia) (ARAGO, 2006). Uma das estratgias comumente usadas na agricultura orgnica para auxiliar no controle de populao de insetos sem causar prejuzos ao meio ambiente e muito menos ao homem o uso de inseticidas orgnicos. Neste contexto, o nim poder tornar-se um dos principais insumos no cultivo destes produtos orgnicos, possuindo ainda enorme potencial para pequenos e mdios produtores obterem uma fonte de renda alternativa na Amrica latina, especialmente no Brasil. O potencial dessa planta demonstrado no crescente nmero de estudos realizados com a espcie a partir do sculo passado, principalmente nas reas de medicina e defensivos agrcolas (Figura 1.1).

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Figura 1.1: Nmero de estudos realizados com Azadirachta indica ao longo dos anos de 1926 a 2008. Fonte: AUSTRALIAN NEW CROPS, 2009.

A cultura do nim facilmente explorvel, e gera renda e oportunidades de trabalho tanto no cultivo quanto no processamento dos produtos oriundos do cultivo. Outro ponto interessante a se considerar que o processamento de alguns desses produtos exige investimentos relativamente baixos (NEEM FOUNDATION, SD). No Brasil, assim como em muitos pases, o nim foi disseminado rapidamente ocupando todo o territrio nacional (Figura 1.2) por se tratar de uma espcie de crescimento rpido, tolerante a vrias condies ambientais e por fornecer sombra, sementes e folhas para a produo de inseticidas e fungicidas, bem como para uso medicinal, veterinrio, madeireiro, agroflorestal (MARTINEZ, 2002; NEVES et al., 2003). ou na indstria cosmetolgica

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Figura 1.2: Mapa dos pases onde a espcie Azadirachta indica est presente de forma nativa ou introduzida pelo homem. (Fonte: ORWA et al., 2009).

Apesar do crescente nmero de plantios de nim no territrio brasileiro e da grande quantidade de produtos fabricados base de nim, no foram encontradas informaes oficiais da produo de derivados de nim no Brasil. J a ndia, destaca-se como o principal produtor e exportador de leo de nim e seus derivados com uma produo estimada de 3,5 milhes de toneladas de sementes ao ano e apresentando ainda um potencial de produo de 700 mil toneladas de leo de nim (KOUL et al., 1990). Os Estados Unidos, por sua vez, ocupa a posio de maior importador de sementes de nim, comercializando aproximadamente 7.200 toneladas ao ano, compradas somente da ndia. Este nmero representa apenas o necessrio para a produo de dois grandes produtos inseticidas base de nim patenteados nos EUA que so o Margosan-O, com 0,25% de azadiractina, e o Bioneem com 0,09% do mesmo princpio ativo. Quanto aos preos praticados no mercado externo, verificou-se um considervel aumento nominal

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na tonelada da semente que passou de US$ 30 em 1965 para cerca de US$ 300 em 1992 (HALL e MENN, 1999). A produo mundial de pesticidas a base de nim ainda desconhecida, mas o que se verifica que existe um potencial para o mercado j que somente uma empresa nos Estados Unidos movimenta anualmente cerca de US$ 125 milhes com a comercializao destes produtos, seguida por outras empresas de menor porte, as quais movimentam outros US$ 25 milhes (XIN e WEGENER, 2004). Na China, projetos de explorao de nim foram implantados em algumas provncias, principalmente no sul do pas, passando de uma rea de 2000 hectares no ano de 2000 para 68.800 hectares no ano de 2005 (XIN e WEGENER, 2004).

O nim como defensivo agrcola O nim possui substncias usadas na agricultura como inseticidas (SCHMUTTERER e SINGH, 1995), nematicidas (DEVAKUMAR et al., 1985), moluscocidas (SINGH et al., 1996; EBENSO, 2004), acaricida (ABDEL e ZAYED, 2002; GONALVES et al., 2001), fungicidas (HIROSE et al., 2001), fertilizantes (GAJALAKSHMI e ABBASI, 2004) e promotores de melhorias da qualidade do solo (UYOVBISERE e ELEMO, 2002). Os princpios ativos do nim que se destacam so a azadiractina, meliacina, gedunina, salanina, nimbina e valassina. Meliacina forma os princpios amargos de leo de sementes de nim (NSO). A semente tambm contm o cido 5-metil-2-butanoico responsvel pelo odor distinguvel do leo (SCHMUTTERER, 1990). Estas combinaes pertencem a produtos naturais chamados triterpenoides (Limonides). Os princpios ativos so ligeiramente hidrfilos e altamente solveis em solventes orgnicos, hidrocarbonetos, alcois, cetonas e steres (SCHMUTTERER, 1995).
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Um dos principais problemas do uso do nim a durabilidade do composto azadiractina. Em condies de campo, a atividade da azadiractina reduzida rapidamente permanecendo no mximo 8 dias. Esta degradao causada pela ao da luz ultravioleta, queda no pH e por chuvas, havendo a necessidade de muitas aplicaes em cada estao (SCHMUTTERER, 1990; CABONI et al., 2002). Os produtos a base de nim so conhecidos pela sua eficincia e baixa toxicidade ao homem e ao meio ambiente. Vrias formulaes como Margosan-O, Neemix, Azatin, NIM-20 e NIM-76, foram testadas e no apresentaram efeitos txicos em mamferos (SCHMUTTERER, 1990; GOVINDACHARI et al., 2000). Em comparao aos extratos de fumo (Nicotiana tabacum) e outras plantas, os produtos a base de nim possuem rpida degradao, no apresentando risco de poluio para a gua e para o solo, alm de possibilitar o controle de nematides atravs da incorporao da torta do nim ao solo (MARTINEZ, 2002). Os produtos a base de nim comumente usados so o extrato das folhas de nim, extrato da casca da rvore, leo da semente e p da semente (LALE e ABDULRAHMAN, 1999). Os extratos de nim podem ser preparados com a simples triturao das sementes ou frutos frescos, em gua, deixando-se a mistura descansar por 12 horas, filtrando-se o lquido e pulverizando-o sobre as reas infestadas. O mesmo procedimento pode ser utilizado para folhas frescas ou secas, embora a azadiractina no caso das folhas secas ocorra em menor concentrao. As quantidades a serem utilizadas variam para cada espcie de inseto. De modo geral, recomenda-se por litro de gua, de 30 a 40 g de sementes ou de 40 a 50 g de folhas secas (SOARES et al., SD).

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O uso de produtos a base de Azadirachta indica em plantas relacionadas apicultura

Os efeitos indesejados dos inseticidas sintticos tm levado os produtos derivados do nim a se tornarem muito populares, j que estes so bastante eficientes e econmicos, atuando tanto por contato direto como de forma sistmica (GAHUKAR, 2000). Na maioria dos testes, os produtos base de nim agiram igualmente ou s vezes melhor que os de origem sinttica (OGUNWOLU e ODDUNLAMI, 1996; LALE e MUSTAPHA, 2000). H registros de ao sobre 413 espcies de insetos susceptveis aos extratos de A. indica (SCHMUTTERER e SINGH, 1995). As formas com que os princpios ativos de A. indica atuam sobre as pragas so vrias, dentre elas pode-se citar: ao repelente (NAUMANN et al., 1994; DUA et al., 1995), fagodeterrente (anti-alimentar) (SAXENA e KHAN, 1985; ISMAN, 1993; GUPTA e BIRAH, 2001; MARTINEZ, 2002; ABUDULAI et al., 2004), propriedades redutoras de fecundidade em insetos (MARTINEZ, 2002; WEBB e DAVID, 2002), anti-ovopositora (LALE e MUSTAPHA, 2000; PATIL e GOUD, 2003), anti-hormonal e regulador de crescimento de insetos (IGR) (SCHMUTTERER, 1990; MANCEBO et al., 2002; MARTINEZ, 2002) alm de causar a morte em algumas espcies (MARTINEZ e van EMDEN, 2001; MANCEBO et al., 2002; MIRANDA et al., 2003). Publicaes mostram ainda que produtos originados a partir do nim como matria-prima podem ainda perturbar a ecdise dos insetos ou at mesmo impedi-la. Por essa razo, as formas jovens so mais afetadas pelos produtos base de nim (UNAL e UKKUZU, 2009). Por ter maior ao por ingesto, os insetos mastigadores so muito facilmente afetados. Estes princpios ativos podem ainda causar distrbios no metabolismo dos insetos de forma a promoverem esterilidade em fmeas e mudanas degenerativas em testculos (KRAUSS et al., 1987 citado por KABEH e JALINGO, 2007).
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Dentre as espcies de plantas cujas pragas so controladas atravs de inseticidas base de nim, encontram-se as que apresentam flores que so visitadas por abelhas Apis mellifera. Estas culturas, livres de agrotxicos por substituio aos bioinseticias, tornam o nim uma espcie que tem muito a contribuir com a apicultura. Alguns dos exemplos de uso de produtos a base de nim no controle a pragas de plantas visitadas por A. mellifera so citados a seguir. No Brasil, o leo de nim vem sendo utilizado na cultura da soja (Glycine max) propiciando um bom controle de vrias pragas como ferrugem asitica, mosca branca, odio, lagarta da soja, caros e percevejo verde alm de afetar a ecloso dos ovos de tamandu-da-soja (Sternechus subsignatus) depositados nas plantas (AIBA, 2004). Extratos do leo da semente e das folhas apresentaram efeito sobre fmeas do caro vermelho-do-cafeeiro (Oligonychus ilicis) (MOURO et al., 2004). O cafeeiro outra espcie bastante visitada por Apis mellifera e que dependente da polinizao melitfila (MALERBO-SOUZA et al., 2003). Resultados semelhantes de mortalidade foram encontrados usando um extrato metanlico de sementes de nim em lagartas da traado-tomateiro (Tuta absoluta), onde no sexto dia, todas as concentraes usadas causaram 100% de mortalidade na fase larval (TRINDADE et al., 2000). No algodoeiro (Gossipium sp.), produtos base de nim tem demonstrado efetividade no controle de pragas alm de ser econmico e ambientalmente seguro, sendo considerado com potencial para ser empregado em larga escala (GAHUKAR, 2000). Resultados de pesquisas j comprovaram os efeitos de produtos a base de nim sobre as larvas e pupas da lagarta-do-cartucho do milho, curuquer do algodoeiro, caros, bicho mineiro e cochonilhas (SOARES et al., SD).

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O leo de nim eficiente ainda no controle do pulgo do pinus (Cinara atlantica), que uma espcie cuja madeira usada para construo de colmias (FIGUEIREDO et al., 2002).

Efeito de Azadirachta indica em abelhas Apis mellifera

O uso do nim tem mostrado grande eficincia no controle de vrios insetos, entretanto a ausncia de uma viso holstica nos trabalhos no considera possveis prejuzos causados por estes inseticidas naturais em abelhas solitrias, abelhas sem ferro ou mesmo as abelhas africanizadas, que foram responsveis por uma produo no ano de 2008 de 37.791,9 ton de mel no territrio brasileiro (IBGE, 2008) e que so ainda grandes responsveis pela polinizao das matas nativas e de plantas cultivadas (DELAPLANE e MAYER, 2000; FREITAS et al., 2009). REMBOLD et al. (1980, 1982) mostraram que larvas de Apis mellifera em terceiro instar larval, quando tratadas topicamente com extrato de sementes de nim, foram susceptveis a irregularidades no desenvolvimento com malformaes e grande mortalidade das crias. Duas pequenas colnias de A. mellifera pulverizadas com extrato de sementes de nim apresentaram algum tipo de toxidade em pupas que estavam prontas para o nascimento. Entretanto as abelhas campeiras no foram repelidas de flores tratadas com estes extratos e no mostraram nenhum sintoma ou comportamento atpico em suas visitas florais (SCHMUTTERER e HOLST, 1987).

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Alguns dos produtos a base de nim podem agir simplesmente pelo contato como sugerido por MANCEBO et al. (2002) quando afirma que o produto Azatin age como inseticida de contato para larvas de Hypsipyla grandella (Lepidoptera: Piralidae). O poder de matar insetos atravs do contato foi encontrado tambm por LADURNER et al. (2005) que, em estudo dos efeitos do leo de nim sobre Apis mellifera, mostrou que o contato das abelhas com este produto afetou a sobrevivncia das operrias. Neste mesmo experimento a aplicao por via oral assemelhou-se ao tratamento controle, no causando expressivo efeito de mortalidade. Com isso o autor recomenda que o leo de nim no deva ser aplicado enquanto as abelhas estejam visitando efetivamente a rea tratada. Outro inseticida a base de nim denominado de Margosan-O, tambm afetou as operrias das abelhas intoxicando-as aps a aplicao do produto por contato direto (SCHMUTTERER, 1990). Estudo aplicando o leo concentrado emulsificante Neem EC, com propriedades inseticidas, em larvas de Apis mellifera que se encontravam no primeiro e quarto instar larval, mostraram que o leo testado afetou a sobrevivncia das larvas. Desta forma, os autores afirmam que as larvas das abelhas melferas so susceptveis aos efeitos inseticidas do Neem EC (NAUMANN e ISMAN, 1996). A forma de apresentao do inseticida pode dar a ele diferentes efeitos nos insetos (PINHEIRO e FREITAS, 2010). Duas formulaes do inseticida NeemAzalTM, com 1% de azadiractina, aplicados em plantas de canola (Brassica napus), verificaram que a formulao granulada de NeemAzal no causou mortalidade de abelhas adultas e nem prejudicou a atividade de forrageamento ou o desenvolvimento das crias de Apis mellifera. Porm, foi verificado que a formulao em emulso concentrada de NeemAzal T/S causou alguma reduo na atividade de forrageamento e no desenvolvimento das crias. Desta

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forma, o concentrado emulsificante de NeemAzal T/S pode ser aplicado somente durante perodos de baixa ou nenhuma atividade das abelhas (SHAWKI et al., 2005). Quando aplicados diretamente nas clulas com larvas de abelhas Apis mellifera os inseticidas produzidos a partir de A. indica, mostram resultados de elevada DL50, sendo maior inclusive do que os observados para outros insetos. Entretanto, colnias distribudas em culturas que foram pulverizadas com o inseticida a base de nim, no foram contaminadas por este inseticida via plen ou nctar (NAUMANN e ISMAN, 1996). A azadiractina tambm agiu repelindo as operrias de A. mellifera que receberam como alimento um xarope de glicose contendo menos do que 0,01 mg/ mL deste limonide na soluo (MELATHOPOULOS et al., 2000b). Apesar de vrios trabalhos demonstrarem a toxicidade de inseticidas a base de nim para as abelhas Apis mellifera, h ainda autores que afirmam que a azadiractina um inseticida botnico que no apresenta efeito de toxicidade aguda para abelhas (AKCA et al., 2009). Trabalhos mostram ainda que o nim pode ser usado em benefcio da apicultura. Vrios estudos buscam alternativas para o combate a pragas das abelhas como a traa de cera, caros e doenas das crias. Estudos do efeito dos extratos aquosos de sementes de nim para o controle da traa da cera (Galleria mellonella) mostrou que todas as concentraes testadas afetaram a populao deste lepidptero. Porm o extrato deve apresentar uma concentrao entre 3 e 4%, j que em concentraes acima destas as abelhas passam a no mais aceitarem os favos tratados (IZHAR-UL-HAQ et al., 2008). Os caros de traquia (Acarapis woodii) que parasitam Apis mellifera tambm foram controlados no Canad usando-se extrato de nim. O mesmo autor tambm

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mostrou um efeito positivo do Margosan-O no combate nosemose em nveis baixos, cria ptrida (Ascosphaera apis) e possivelmente aos caros varroas (LIU, 1995a, 1995b). No combate ao caro Varroa destructor o extrato de sementes de nim no apresentou efeito txico agudo nesses caros ou nas abelhas Apis mellifera, mas foi observado um efeito repelente que interferiu na capacidade das fmeas de V. destructor de localizarem as pupas de abelhas para se alimentarem (GMEZ et al., 2006). O nim tambm foi estudado com o objetivo de combate ao caro V. jacobsoni, tendo sido observado que a fecundidade das fmeas dos caros assim como a taxa de ecloso dos ovos foram afetadas pelo extrato de sementes de nim. Entretanto, os caros no foram os nicos a serem afetados (PENG et al., 2000). Os autores afirmam que houve uma grande sensibilidade das larvas de operrias azadiractina sendo elas mais sensveis do que os indivduos adultos. Diante dos trabalhos at agora publicados que propuseram uma relao entre Azadirachta indica e Apis mellifera, verifica-se que nenhum deles mostra possveis efeitos letais. No entanto, Freitas e Pinheiro (2010) relatam uma srie de efeitos sub-letais em A. mellifera como conseqncia da utilizao da azadiractina como inseticida em cultivos agrcolas e advertem para o uso crescente da substncia em funo dos agricultores acreditarem que por se tratar de um produto natural apresente uma grande margem de seguraa para aplicaes no campo. Naumann et al. (1994) tambm detectaram efeito repelente da azadiractina em A. mellifera e vrios autores relataram problemas como reduzida emergncia de adultos, mortalidade larval e malformaes nas asas de abelhas recm emergidas poucos dias aps a aplicao para alguns nveis de doses de azadiractina (REMBOLD et al., 1980; MORDUE e BLACKWELL, 1993; NAUMANN e ISMAN, 1996 citados por SCHENK et al., 2001).

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Trabalhos de Melathoupolos et al. (2000a,b) mostraram que a azadiractina quando aplicada, no campo, a intervalos de seis dias leva a uma considervel reduo na rea de cria e causa grande mortalidade de rainhas nas colnias, mas o mesmo no ocorre em condies de laboratrio. Segundo Freitas e Pineiro (2010), esses resultados sugerem que a ao do produto d-se mais pela ao sistmica no plen e nctar contaminados, quando so transferidos para a colmia. No h pesquisas publicadas que provem o valor apcola do nim para a produo de mel, plen apcola ou at mesmo prpolis, com A. mellifera.

1.2.

CONCLUSES

O nim (Azadirachta indica) uma espcie cujo cultivo vem se intensificando no Brasil para uso medicinal, veterinrio, madeireiro, agroflorestal, sombreamento ou na indstria cosmetolgica, mas principalmente como defensivo agrcola natural. O nim possui substncias usadas na agricultura como inseticidas, nematicidas, moluscocidas, acaricida, fungicidas, fertilizantes e promotores de melhorias da qualidade do solo Em comparao aos defensivos agrcolas qumicos, os produtos a base de nim apresentam baixa toxicidade ao homem e ao meio ambiente, possuem rpida degradao, no apresentando risco de poluio para a gua e para o solo,. Os efeitos indesejados dos inseticidas sintticos tm levado os produtos derivados do nim a se tornarem muito populares, j que estes so de largo espectro, eficientes e econmicos, atuando tanto por contato direto como de forma sistmica.

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Os princpios ativos do nim que se destacam so a azadiractina, meliacina, gedunina, salanina, nimbina e valassina e atuam sobre as pragas de diversas formas, como repelentes, fagodeterrente (anti-alimentar), reduzindo a fecundidade, prevenindo a ovoposio, anti-hormonal e reguladoras de crescimento de insetos, alm de causar a morte em algumas espcies. Apis mellifera suceptvel a produtos base de nim, apresentando irregularidades no desenvolvimento e grande mortalidade das larvas, reduo na rea de cria, toxicidade em pupas, reduzida emergncia e malformaes dos adultos e grande mortalidade de rainhas nas colnias. No h trabalhos publicados testando o efeito do nctar ou do plen do nim sobre Apis mellifera. Com isso, os riscos que as plantas de Azadirachta indica em florescimento possam oferecer s abelhas melferas que visitam suas flores, coletam as recompensas florais e as transportam para as colmias para a manuteno das colnias permanecem desconhecidos.

1.3.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

ABDEL, S. S.; ZAYED, A. A. In vitro acaricidal effect of plant extract of neem seed oil (Azadirachta indica) on egg, immature, and adult stages of Hyalomma anatolicum excavatum (Ixodoidea: Ixodidae) Veterinary Parasitology, Netherlands, v. 106, p. 89-96, maio. 2002. ABUDULAI, M.; SHEPARD, B. M.; MITCHELL, P. L. Effects of Neem (Azadirachta indica A. Juss) on Presators of Nezara viridula (L.) (Hemiptera: Pentatomidae). Journal Agriculture and Urban Entolmology. South Carolina, v. 21, n. 1, p. 9-13, jan. 2004.
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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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AIBA. Associao dos Produtores Irrigantes da Bahia. Informaiba, Barreiras, Bahia, Ano XI, n. 111, p. 8, mai. 2004. AKCA, I.; TUNCER, C.; GLER, A.; SARUHAN, I. Residual toxicity of 8 different insectides on honey bee (Apis mellifera Hymenoptera: Apidae). Journal of Animal and Veterinary Advances, Medwell Journals. v. 8. n. 3. p. 436 440, 2009. Disponvel em: <http://medwelljournals.com/fulltext/java/2009/436-440.pdf> Acesso em 04 jan. 2010. APEX BRASIL. Produtos orgnicos. 04/07/2006. Disponvel em

<http://www.apexbrasil.com.br/>. Acesso em: 25 ago. 2009. ARAGO, G. Exportaes do agronegcio baiano e produtos orgnicos. Bahia Agrcola, v. 7, 02/04/2006. Disponvel em: <http://www.seagri.ba.gov.br/pdf/

socioeconomia4_v7n2.pdf> Acesso em: 25 ago. 2009. AUSTRALIAN NEW CROPS WEB SITE. Disponvel em: <http://www.newcrops.uq. edu.au/listing/species_pages_A/Azadirachta_indica_2008.htm> Acesso em: 26 ago. 2009. CABONI, P., CABRAS, M.; ANGIONI, A.; RUSSO, M.; CABRAS, P. Persistence of azadirachtin residues on olives after field treatment. Journal of Agricultural and Food Chemistry, Davis, California, USA, v. 50, n.12, p. 3491-3494, maio. 2002. DELAPLANE, K. S.; MAYER, D. F. Crop pollination by bees. UK: CABI publishing, 2000. 344p. DEVAKUMAR, C.; GOSWAMI, B. K.; MUKERIJEE, S. K. Nematicidal Principles from neem. I. Screening of neem kerne fractions against Meloidogyne incognita (Kofoid & White ) Cristwood. Indian Journal of Nematology, New Delhi, India, v. 15, n. 1, p. 121 124, 1985. DUA, V. K.; NAGPAL, B. N.; SHARMA, V. P. Repellent action of neem cream against mosquitoes. The Southeast Asian Journal of Tropical Medicine and Public Health, Bangkok, Tailand, v. 26, p. 180-182, jun. 1995.
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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

EBENSO, I. E. Molluscicidal effects of neem (Azadirachta indica) extracts on edible tropical land snails. Pest Management Science, ______, v. 60, n. 2, p.178-182, fev. 2004. FREITAS, B. M.; PINHEIRO, J. N. Efeitos sub-letais dos pesticidas agrcolas e seus impactos no manejo de polinizadores dos agroecossistemas brasileiros. Oecologia brasiliensis (Online), v. 14, p. 282 - 298, 2010. FIGUEIREDO, T. L.; PENTEADO, S. R. C.; OLIVEIRA, S.; QUEIROZ, E. C. Avaliao da eficincia do leo de neem e extrato de fumo no controle do pulgo do pinus, Cinara atlantica, em laboratrio. In: I EVENTO DE INICIAO CIENTFICA DA EMBRAPA FLORESTAS, 2002, Colombo. Anais... Colombo: ______, 2002. p. 10-16. FREITAS, B. M.; IMPERATRIZ-FONSECA, V. L.; MEDINA, L. M.; KLEINERT, A. de M. P.; GALLETO, L.; NATES-PARRA, G.; QUEZADA-EUN, J. J. G. Diversity, threats and conservation of native bees in the Neotropics. Apidologie, Paris, France, p. 1-15, jan. 2009. GAHUKAR, R. T. Use of neem products/pesticides in cotton pest management. International Journal of Pest Management, London, v. 46, n.2, p. 149-160, abr. 2000. GAJALAKSHMI, S.; ABBASI, S. A. Neem leaves as a source of fertilizer-cum-pesticide vermicompost. Bioresource Technology, ______, v. 92, p. 291-296, may. 2004. GMEZ, R. G.; COLINA, G. O.; JIMNEZ, J. A. V.; AMARO, J. A. P.; HENNDEZ, R. M. S. Toxicidad y repelencia de Azadirachta indica contra Varroa destructor (Acari:Verroidae). Agrocincia, Texcoco, Mxico, v. 40, n. 6, p. 741-751, ______. 2006. GONALVES, M. E. de C.; OLIVEIRA, J. V.; BARROS, R.; LIMA, M. P. L. Extratos aquosos de plantas e o comportamento do caro verde da mandioca. Scientia Agrcola, Piracicaba, SP, Brasil, v. 58, n.3, p. 475-479, set. 2001.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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GOVINDACHARI, T. R.; SURESH, G.; GEETHA-GOPALAKRISHNAN; WESLEY, S. D. Insect antifeedant and growth regulating activities of neem seed oil. Journal of Applied Entomology, Goettingen, Germany, v. 124, p. 287-291, 2000. GUPTA, G. P.; BIRAH, A. Growth inhibitory and antifeedant effect of azadirachtin-rich formulations on cotton bollworm (Helicoverpa armigera). Indian Journal of Agricultural Sciences, New Delhi, India, v. 71, n. 5, p. 325-228, 2001. HALL, F. R.; MENN, J. J. (Ed.) Biopesticides: Use and Delivery. Totowa, New Jersey: Humana Press Inc., 1999, 626p. (Methods in Biotechnology, v. 5). HIROSE, E.; NEVES, P. M. O. J.; ZEQUI, J. A. C; MARTINS, L. H.; PERALTA, C. H.; MOINO, J. A. Effect of biofertilizers and neem oil on the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. and Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. Brazilian Archives of Biology and Technology, Curitiba, PR, Brasil, v. 44, n. 4, p. 419-423, 2001. INSTITUTO BIODINMICO IBD. A agricultura orgnica no Brasil. 2009. Disponvel em: < http://www.ibd.com.br/News_Detalhe.aspx?idnews=187> Acesso em: 02 ago. 2009. INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATSTIVA - IBGE. Disponvel em: http://www.sidra.ibge.gov.br/bda/tabela/protabl.asp?c=74&z=t&o=1&i=P. Acesso em: 30 dez. 2008. ISMAN, M. B. Growth inhibitory and antifeedant effects of azadirachtin on six noctuids of regional economic importance. Pest Management Science, ______, v. 38, n. 1, p. 5763. 1993. IZHAR-UL-HAQ, M.; SALEEM, M.; AHMED, S. Effect of neem (Azadirachta indica A.Juss) seed extracts against greater wax moth (Galleria mellonella L.) larvae. Pakistan Entomologist Journal, Faisalabad, Pakistan, v. 30, n. 2, p. 137-140. 2008.

20

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

KABEH, J. D.; JALINGO, M. G. D. S. S. Exploiting Neem (Azadirachta indica) Resources for Improving the Quality of Life in Taraba State, Nigeria. International Journal of Agriculture & Biology, ______, v. 9, n. 3, p. 530-532, 2007. KOUL, O.; ISMAN, M. B.; KETKAR, C. M. Properties and uses of Neem, Azadirachta indica. Canadian Journal of Botany, Ontario, Canada, v. 68, p. 1-11, 1990. KRAUSS, W.; BAUMANN, S.; BOKEL, M.; KELLER, U.; KLENK, A.; KLINGELE, M.; POHNL, H.; SCHWINGER, M. In: SCHMUTTERER, H.; ASCHER, K.R.S. (Eds.), Control of Insect Feeding and Development by Constituent Melia azadirach and Azadirachta indica, GIZ, Eschborn: Germany. p. 11125. 1987. LADURNER, E.; BOSCH, J.; KEMP, W. P.; MAINI, S. Assessing delayed and acute toxicity of five formulated fungicides to Osmia lignaria Say and Apis mellifera. Apidologie, Paris, France, v. 36, p. 449 460, sep. 2005. LALE, N. E. S.; ABDULRAHMAN, H. T. Evaluation of neem (Azadirachta indica A. Juss) seed oil obtained by different methods and neem powder for the management of Callosobruchus maculatus (F.) (Coleoptera: Bruchidae) in stored cowpea. Journal of Stored Products Research, ______, v. 35, p. 135-143, apr. 1999. LALE, N. E. S.; MUSTAPHA, A. Potential of combining neem (Azadirachta indica A. Juss) seed oil with varietal resistance for the management of the cowpea bruchid, Callosobruchus maculatus (F.). Journal of Stored Products Research, ______, v. 36, p. 215-222, jul. 2000. LIU, T. P. A possible control of chalkbrood and nosema diseases of the honeybee with neem. Canadian Beekeeping, Beaverlogde, Alberta, Canad, v. 18, n. 5, p. 107-109, 1995a.

21

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

LIU, T. P. Controlling tracheal mites in colonies of honeybee with neem (Margosan-O) and flumethrin (Bayvarol). American Bee Journal, Hamilton, Il, USA, v. 135, p. 562-566, aug. 1995b. MALERBO-SOUZA, D. T.; NOGUEIRA-COUTO, R. H.; COUTO, L. A.; SOUZA, J. C. de. Atrativo para abelhas e polinizao em cafeeiro (Coffea arabica L.). Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, So Paulo, SP, Brasil, v. 40, n. 4, p. 272278, 2003. MANCEBO, F.; HILJE, L.; MORA, G. A.; SALAZAR, R. Biological activity of two neem (Azadirachta indica A. Juss., Meliaceae) products on Hypsipyla grandella (Lepidoptera: Pyralidae) larvae. Crop Protection, ______, v. 21, n. 2, p. 107-112, mar. 2002. MARTINEZ, S. S. O nim Azadirachta indica: natureza, usos mltiplos, produo. Londrina: IAPAR, 2002. 142 p. MARTINEZ, S. S.; van EMDEN, H. F. Growth Disruption, Abnormalities and Mortality of Spodoptera littoralis (Boisduval) (Lepidoptera: Noctuidae) Caused by Azadirachtin. Neotropical Entomology, Piracicaba, SP, Brasil, v. 30, n. 1, p. 113-125, mar. 2001. MELATHOPOULOS, A. P.; WINSTON, M. L.; WHITTINGTON, R.; HIGO, H.; LeDOUX, M. Field evaluation of neem and canola oil for the selective control of the honey bee mite parasites Varroa jacobsoni and Acarapsis woodi. Journal of Economic Entomology, v. 93, n. 3, p. 559-567, jun. 2000a. MELATHOPOULOS, A. P.; WINSTON, M. L.; WHITTINGTON, R.; SMITH, T.; LINDBERG, C.; MUKAI, A.; MOORE, M. Comparative laboratory toxicity of neem pesticides to honey bees (Hymenoptera: Apidae), their mite parasites Varroa jacobsoni (Acari: Varroidae) and Acarapis woodi (Acari: tarsonemidae), and brood pathogens Paenibacillus larvae and Ascophaera apis. Journal of Economic Entomology, Baltimore, USA, v. 93, n. 2, p. 199-209, apr. 2000b.
22

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

MORDUE, L. A. J.; BLACKWELL, A. Azadirachtin: An update. Journal of Insect Physiology. v. 39, n. 11, p. 903-924, nov. 1993. MIRANDA, J. E.; NAVICKIENE, H. M. D.; NOGUEIRA-COUTO, R. H.; DE BORTOLI, S. A.; KATO, M. J.; BOLZANI, V. da S.; FURLAN, M. Susceptibility of Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) to pellitorine, an amide isolated from Piper tuberculatum (Piperaceae). Apidologie, Paris, France, v. 34, p. 409415, jul. 2003. MOURO, S. A; ZANUNCIO, J. C.; FILHO, A. P.; GUEDES, R. N. C; CAMARGOS, A. B. Toxicidade de extratos de nim (Azadirachta indica) ao caro-vermelho-do-cafeeiro (Oligonychos ilicis). Pesquisa Agropecuria Brasileira. Braslia, DF, Brasil, v. 39, n. 8, p. 827-830, ago. 2004. NAUMANN, K.; CURRIE, R. W.; ISMAN, M. B. Evaluation of the repellent effects of a neem insecticide on foraging honeybees and other pollinators. The Canadian Entomologist, Ottawa, Canada, v. 126, n. 2. p. 225-230, mar. 1994. NAUMANN, K.; ISMAN, M. B. Toxicity of a neem (Azadirachta indica A. Juss) insecticide to larval honeybees. American Bee Journal, Hamilton, Il, USA, v. 136, n. 7, p. 518-520, jan. 1996. NEEM FOUNDATION. Economic Potential of Neem in the Future. Disponvel em: <http://www.neemfoundation.org/neem-articles/economic-potential/future-economicpotential.html> Acesso em: 25 ago. 2009. NEVES, B. P. das; OLIVEIRA, I. P de; NOGUEIRA, J. C. M. Cultivo e utilizao do nim indiano. Santo Antonio de Gois: Embrapa-CNPAF, 2003. 12p. (Embrapa-CNPAF. Circular tcnica, 62). OGUNWOLU, E. O.; ODDUNLAMI, A. T. Suppression of Callosobruchus maculatus (F.) on cowpea with Zanthroxylum zanthoxyloides (Lam.) Watern. (Rutaceae) compared to

23

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

neem seed powder and Pirimiphos-methyl. Crop Protection, ______, v. 15, p. 603-607, 1996. ORWA, C.; MUTUA, A.; KINDT, R.; JAMNADASS, R.; ANTHONY, S. 2009 Agroforestree Database: a tree reference and selection guide version 4.0. Disponvel em: (http://www.worldagroforestry.org/sites/treedbs/treedatabases.asp) Acesso em: 28 dez. 2009. PATIL, R. S.; GOUD, K. B. Efficacy of methanolic plant extracts as ovipositional repellents against diamondback moth, Plutella xylostella (L.). Journal of Entomological Research, New Delhi, India, v. 27, n. 1, p. 13-18, mar. 2003. PENG, C. Y. S.; TRINH, S.; LOPEZ, J. E.; MUSSEN, E. C.; HUNG, A.; CHUANG, R. The effects of azadirachtin on the parasitic mite, Varroa jacobsoni and its host honey bee (Apis mellifera), Journal Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 39, n. 3-4, p.159-168, dec. 2000. PINHEIRO, J. N.; FREITAS, B. M. Efeitos letais dos pesticidas agrcolas sobre polinizadores e perspectivas de manejo para os agroecossitemas brasileiros. Oecologia brasiliensis (Online), v. 14, p. 266 - 281, 2010. PLANETA ORGNICO. Panorama mercado orgnico em 2008 na Alemanha, Frana, Gr Bretanha e Estados Unidos. Disponvel em: <http://www.planetaorganico.com.br/ cenario08.htm> Acesso em: 26 ago. 2009. REMBOLD, H.; SHARMA, G. K.; CZOPPELT, C. Growth-regulating activity of azadirachtin in two holometabolous insects. In: SCHMUTTERER, H.; ASCHER, K. R. S.; REMBOLD, H. (Eds.). Natural Pesticides from the Neem Tree (Azadirachta indica A. Juss). Proc. Ist. Internat. Neem Conf. Rottach-Egern. 1980. Germany Agency for Techn. Coop. Eschborn, Germany. 1980. p. 121-128.

24

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

REMBOLD, H.; SHARMA, G. K.; CZOPPELT, C.; SCHMUTTERER, H. Azadirachtin: a potent insect growth regulator of plant origin. Zeitschrift-fur-Angewandte-Entomologie, Berlin, Germany, v. 93, p. 12-17, 1982. SAXENA, R. C.; KHAN, Z. R. Electronically recorded disturbances in feeding behavior of Nephotettix virescens (Homoptera: Cicadellidae) on neem oil-treated rice plants, Journal of Economic Entomology, Baltimore, USA, v. 78, n. 1, p. 222-226, feb. 1985. SCHMUTTERER, H. Properties and potential of natural pesticides from the neem tree, Azadirachta indica. In: Mittler, T. E. (Ed.). Annual Review of Entomology. Palo Alto, California, USA, v. 35, p. 271-298, jan. 1990. SCHMUTTERER, H. The Neem Tree Source of Unique Natural Products for IPM, Medicine, Industry and Other Purposes. Cambridge: VCH, 1995. 696p. SCHMUTTERER, H.; HOLST, H. On the effects of the enriched and formulated neem seed kernel extract AZT-VR-K on Apis mellifera L. Journal of Applied Entomology. v. 103: 1987, p. 208-213. SCHMUTTERER, H.; SINGH, R. P. List of Insects Susceptible to Neem Products. In: SCHMUTTERER, H. (Ed.).The neem tree: source of unique natural products for integrated pest management, medicine, industry and other purposes. Weinheim, New York, Basel, Cambridge, Tokyo: VCH Verlagsgessellschaft. 1995. p. 326-365. SHAWKI, A-A.; TBORSK, V.; KAMLER F.; KAZDA, J. Effect of Two

NeemAzalTM Formulations on Honeybees under Semi-Field Conditions. Plant Protection Science, Praha, Czech Repubic, v. 41, n. 2, p. 63-72, jun. 2005. SCHENK, P.; IMDORF, A.; FLURI, P. Effects of neem oil on Varroa mites and bees. Swiss Bee Research Center, 2001. Disponvel em < http://www.culturaapicola.com.ar/ apuntes/sanidad/varroa/efectos%20de%20aceite%20azadirachta%20indica%20control.pdf > Acesso em set. 2009.
25

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

SINGH, K.; SINGH, A.; SINGH, D. K. J. Molluscicidal activity of neem (Azadirachta indica A. Juss). Journal of Ethnopharmacology, ______, v. 52, p. 35-40, may. 1996. SOARES, F. P.; PAIVA, R.; NOGEIRA, R. C.; OLIVEIRA, L. M. de; PAIVA, P. D. de O.; SILVA, D. R. G. Cultivo de usos do nim (Azadirachta indica A. Juss). Boletim Agropecurio, Lavras, MG, Brasil, n. 68, p.1-14, ______. Disponvel em: <http://www. editora.ufla.br/BolTecnico/pdf/bol_68.pdf> Acesso em 22 dez. 2009. TRINDADE, R. C. P.; MARQUES, I. M. R.; XAVIER, H. S.; OLIVEIRA, J. V. Extrato metanlico da amndoa da semente de nim e a mortalidade de ovos e lagartas da traa-dotomateiro. Scientia Agrcola, Piracicaba, SP, Brasil, v. 57, n. 3, p. 407-413, jul/set. 2000. UNAL, S.; UKKUZU, E. Larvaecidal effects of azadirachtin on the pine processionary moth. African Journal of Biotechnology, v. 8, n. 19, p. 5128-5131, oct. 2009. Disponvel em <http://www.academicjournals.org/AJB>. Acesso em 20 de janeiro de 2010. UYOVBISERE, E. O.; ELEMO, K. A.. Effect of tree foliage of locust bean (Parkia biglobosa) and neem (Azadirachta indica) on soil fertility and productivity of maize in a savanna alfisol. Nutrient Cycling in Agroecosystems, Netherlands, v. 62, n. 2, p. 115122, feb. 2002. WEBB, E. C.; DAVID, M. The efficacy of neem seed extract (Azadirachta indica) to control tick infestation in Tswana, Simmentaler and Brahman cattle. South African Journal of Animal Science, South African, v. 32, n. 1, p. 1-6, 2002. XIN, T.; WEGENER, M. Developing a Sustainable Neem Industry in China. Proceedings of the 16th Annual Conference of the Association for Chinese Economics Studies. Brisbaine, Australia: ACESA, 2004, 30p.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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CAPTULO 2 Biologia floral e requerimentos de polinizao do nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) em reas de caatinga e de mata litornea do Estado do Cear.

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- CAPTULO 2 Biologia floral e requerimentos de polinizao do nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) em reas de caatinga e de mata litornea do Estado do Cear.

RESUMO

O nim (Azadirachta indica A. Juss.) uma espcie da ordem Rutales pertencente famlia Meliaceae, que abrange cerca de 51 gneros e pelo menos 550 espcies. Apesar de ser cultivada em vrios pases, h poucas e contraditrias informaes a respeito da polinizao desta espcie. Desta forma, o presente estudo objetivou esclarecer alguns aspectos da biologia floral e requerimentos de polinizao do nim. O estudo foi realizado nos anos de 2007 e 2008 em reas cultivadas com nim nos municpios de Sobral, Fortaleza e Horizonte, e no Laboratrio de abelhas da Universidade Federal do Cear em Fortaleza, estado do Cear. Os resultados mostraram que todos os indivduos estudados de nim apresentaram flores bissexuadas, com antese por volta das 16 horas e que a maioria dos botes florais encontra-se com seus estigmas receptivos e suas anteras liberando plen, ainda invivel, 24 horas antes da antese. A maior viabilidade do plen ocorre no momento da antese. Foi encontrado nctar nas flores de A. indica, porm em quantidades diminutas que no permitiu a captura pelos tubos capilares. As abelhas Apis mellifera foram os nicos visitantes florais, apresentando maior freqncia logo nas primeiras horas do amanhecer, onde procuraram coletar nctar e plen. Essa abelha mostrou ser o polinizador do nim nas reas estudadas, pois uma nica visita produziu resultados prximos aos ndices obtidos com polinizao natural. O vento no influenciou na polinizao. Palavras chave: antese, Apis mellifera, apresentao de plen, polinizao, recursos florais.
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- CHAPTER 2 Floral biology and pollination requirements of neem (Azadirachta indica A. Juss, Meliaceae) in areas of caatinga and coastal vegatations in the state of Cear.

ABSTRACTS

Neem (Azadirachta indica A. Juss.) is a species of the order Rutales belonging to the family Meliaceae, which includes about 51 genera and at least 550 species. Despite its cultivation in many countries, there are little and contradictory information on the pollination of this species. Therefore, the present study aimed to enlight some aspects of the floral biology and pollination requirements of neem. The study was carried out in 2007 and 2008 in cultivated areas in the counties of Sobral, Fortaleza and Horizonte, and in the bee lab of Universidade Federal do Cear, state of Cear, Brazil. Results showed that all neem individuals studied bore bissexual flowers, with anthesis occurring around 16:00h and most flower buds presenting receptive stigmas and releasing pollen, though still unviable, 24h before anthesis. The highest pollen viability was observed at anthesis. Flowers of A. indica produced nectar in diminute amounts that did not allow sampling with capilars. Apis mellifera workers were the only floral visitors registered showing higher frequency early in the morning, when searching for pollen and nectar. This bee species showed to be neems pollinating agent in the studied areas because a single visit produced similar results to natural pollination indices observed. Wind played no role in neem pollination. Key words: anthesis, Apis mellifera, floral resources, pollination, pollen presentation.
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2.1. INTRODUO

O nim (Azadirachta indica A. Juss), uma planta da ordem Rutales, subordem Rutineae e pertencente famlia Meliaceae, que abrange cerca de 51 gneros e pelo menos 550 espcies. uma espcie natural de Burma e das regies ridas da ndia (SAXENA, 1983). Esta planta tambm pode ser encontrada com vrios nomes, dentre eles esto margosa, nime, lila ndio, ou ainda por Melia azadirachta L., Melia indica (A. Juss.) Brandis e Antelaea azadirachta (L.) Adelb. (KOUL et al., 1990). O nim foi introduzido no Brasil em 1986 pelo Instituto Agronmico do Paran - IAPAR usando sementes provenientes das Filipinas e posteriormente em 1989 e 1990 com sementes da ndia, Nicargua e Repblica Dominicana com a finalidade de pesquisar o inseticida desta espcie (MARTINEZ, 2002). Entretanto, esta espcie pode ser usada para uma intensa lista de finalidades tais como uso medicinal, indstria de cosmticos, matria prima para fertilizantes, produo e utilizao de biomassa, reflorestamento, produo de inseticida, de sementes e de madeira de excelente qualidade alm de sombreamento (NEVES et al., 2003; MARTINEZ, 2002; ARAJO et al., 2000). No foi encontrada a estimativa de rea plantada ou do nmero de rvores de A. indica no territrio brasileiro. Porm, visvel a introduo macia desta espcie em reas urbanas, inclusive incentivadas por vrios administradores pblicos municipais, alm de serem observadas algumas iniciativas particulares de uso e explorao em grande escala nas zonas rurais. Diante do exposto, no se sabe ao certo o quanto essa espcie j ocupou o territrio brasileiro devido forma descontrolada de disseminao (ARAJO, 2006). A famlia Meliaceae caracterizada por apresentar dimorfismo sexual (monoicia, dioicia ou poligamia) como um fenmeno amplo, apesar de haver uma carncia
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nas informaes de campo referentes ao sistema sexual de vrias espcies desta famlia (PENNINGTON et al., 1981). Na subfamlia Melioideae, a qual pertence o gnero Azadirachta, parece haver uma variao quanto ao sistema sexual adotado pelas espcies. Este dimorfismo sexual somente pode ser confirmado aps estudo de populaes vivas, analisando-se detalhes da flor, especialmente o nectrio e o ovrio (FUZETO et al., 2001). Com relao ao sistema sexual, alguns trabalhos (MOSSINI e KEMMELMEIER, 2005 e NEVES et al., 2003) afirmam que A. indica apresenta flores bissexuadas enquanto outros (SINGH et al., 1996; PURI, 1999; CHAMBERLAIN et al., 2000; SCHMIDT e JOKER, 2000) citam haver andromonoicia no nim. FALESI et al. (2000) afirmaram que plantas de A. indica iniciam o florescimento entre dois e trs anos, porm PURI (1999) cita que as flores comeam a se desenvolver em rvores de 3 a 5 anos de idade mas que o seu amadurecimento reprodutivo ocorre somente aps dez anos de idade. Estudos na malsia e na ndia mostram que o florescimento ocorre de janeiro a abril e de julho a outubro (LOKE et al., 1992; PURI, 1999; RAJU, 1998 citados por PESANTE, SD). NEVES et al. (2003) descreveram as flores de A. indica como brancas, aromticas e reunidas em cimas agrupadas em panculas axilares ou terminais, ricas em flores actinomrficas, pentmeras, com estames crescentes formando um tubo (por unio dos filamentos) e estigma pegajoso, capitado, tri-lobulado, se encontrando sobre 3 a 5 carpelos bi-ovulados e ao mesmo nvel das 10 anteras. Cada flor produz em mdia 6.220 gros de plen. (ERICKSON e ATMOWIDJOJO, 2001) gerando uma s semente (NEVES, 2004). Vrias espcies tropicais de vegetais possuem mecanismos que favorecem, parcial ou completamente, a polinizao cruzada (MURAWSKI et al.,. 1990; O'MALLEY e BAWA, 1987). Um elevado ndice de polinizao cruzada em A. indica foi descoberto
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por KUNDU (1999). Este estudo mostra ainda que este elevado ndice de alogamia devido a ocorrer protandria nas flores (plen liberado antes de o estigma estar receptivo), a espcie ser andromonica e policrpica e porque as flores so polinizadas por insetos (polinizao entomfila). A polinizao entomfila das melicieas tambm defendida por WILLEMSTEIN (1987), mas h autores que afirmam que as abelhas so consideradas necessrias para ocorrer uma polinizao cruzada efetiva (RAJU, 1998 citado por PESANTE, SD). Entretanto, o tipo de polinizao mais comum e o agente polinizador mais efetivo ainda no so um consenso entre os estudos. A polinizao pelo vento em A. indica foi considerada facilitada pela anatomia floral e pela ausncia de autoincompatibilidade entre os indivduos (PURI, 1999). Azadirachta indica parece ter alguma importncia apcola j que suas flores so visitadas por abelhas (PESANTE, SD). Sua importncia como fonte de nctar parece ser ainda maior, j que as flores de A. indica so consideradas uma boa fonte de nctar, mas com menor importncia como fonte de plen para Apis mellifera (CHAUBAL e KOTMIRE, 1980 e TREWARI, 1992 citado por PESANTE, SD). Ratificando o potencial produtivo de nctar, CRANE et al., (1984) recomenda plantar nim prximo a apirios com a finalidade de melhorar as colheitas de mel. Entretanto, a presena do princpio txico azadiractina em partes desta planta tem despertado uma grande curiosidade nos apicultores com relao ao real valor do nim para a produo e qualidade do mel e do plen na apicultura bem como o efeito do bio-inseticida sob as abelhas. Apesar de a azadiractina ser altamente prejudicial a centenas de espcies de lepidpteros, colepteros, hompteros, dpteros e heterpteros, ela no foi detectada nas flores do nim ou em frutos verdes 40 dias antes da colheita (PESANTE, SD). O efeito dos

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princpios ativos de ao inseticida desta espcie nas colnias de abelhas ainda no foi elucidado. Este estudo tem a proposta de colaborar na elucidao dos fatos acima mencionados atravs dos objetivos de descrever a biologia floral de A. indica e seus requerimentos de polinizao.

2.2. MATERIAIS E MTODOS

As observaes de campo foram conduzidas nos anos de 2007 e 2008 em reas com nim (Azadirachta indica) nos municpios cearenses de Sobral (34656S e 402114O), Fortaleza (34434S e 383447O) e Horizonte (40411S e 382729O). Os estudos de laboratrio foram desenvolvidos no Laboratrio de abelhas da Universidade Federal do Cear. O trabalho foi divido em duas fases, onde a primeira analisou biologia floral envolvendo as caractersticas morfolgicas e fisiolgicas da flor e na segunda parte foram analisados os aspectos reprodutivos.

Biologia floral: Antese das flores Duzentos botes florais, com tamanho que indicava estarem prximos da antese, foram marcados em cinco inflorescncias dispostas em 20 plantas previamente marcadas, nos municpios de Sobral e de Fortaleza que esto nos biomas caatinga e mata litornea respectivamente. Os botes florais estudados foram escolhidos aleatoriamente de forma a ter representantes da base, da parte mediana e do pice das inflorescncias.
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Visando conhecer o processo de antese do nim, os botes florais foram acompanhados durante 4 dias no consecutivos, a cada intervalo de uma hora anotando-se o nmero de flores abertas a cada observao.

Anatomia floral Utilizando-se um microscpio estereoscpico com aumento de 100X, foram dissecadas 200 flores de A. indica de diferentes estdios de desenvolvimento, da base, da parte mediana e do pice das inflorescncias, de 20 plantas diferentes. Buscou-se com isso analisar as partes florais, investigar a presena de nectrios e quantificar o volume de nctar, bem como para acompanhar as mudanas que ocorrem ao longo do ciclo de vida da flor.

Caracterizao polnica Gros de plen das anteras de botes florais recm-abertos foram coletados e montados em lminas para microscopia ptica seguindo a metodologia de BARTH (1970a, b e c). A caracterizao do plen do nim foi realizada por meio do estudo de vrios parmetros, como: forma, tamanho e ornamentao da exina.

Produo de nctar A produo de nctar foi aferida seguindo a metodologia descrita por DAFNI et al. (2005). Desta forma, fez-se a introduo cuidadosa de tubos capilares em seis grupos de trinta flores, devidamente protegidas antes da antese, onde cada grupo representou intervalos de tempo aps a antese. O volume de nctar foi medido no momento da antese, 6, 12, 18, 24 e 48 horas aps a antese. Para averiguao da concentrao de acar no nctar, se disps um refratmetro de mo da marca Leica.
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Receptividade do estigma Para conhecer o perodo em que o estigma da flor do nim est receptivo foi usada a tcnica de imerso do estigma em perxido de hidrognio. Foram mergulhados os gineceus de botes florais, cujos tamanhos indicavam que os mesmos estavam a 48 horas antes de sua antese, 24 horas antes da antese, 12 horas antes da antese, de flores no momento da antese assim como de flores que se encontraram a 6, 12, 24 e 48 horas aps a antese. Para cada idade dos botes florais e flores foram usados cinco estigmas. Nesta tcnica, a presena de bolhas de ar se formando a partir do estigma indica a sua receptividade (DAFNI et al., 2005).

Horrio de liberao e de viabilidade dos gros de plen O horrio de liberao dos gros de plen foi determinado visualizando-se grupos de 30 flores ou botes florais de cada idade. Observou-se botes florais 48, 24 e 12 horas antes da antese e flores no momento da antese, continuando at que ocorresse a liberao de plen em todas as flores. A viabilidade dos gros de plen de A. indica foi analisada usando a metodologia das gotas suspensas (hanging droplets) (DAFNI et al., 2005). Nesta tcnica, foi preparada uma soluo constituda de 2mg de cido brico (2x10-3M H3BO3), 6 mg de nitrato de clcio (6x10-3M Ca(NO3)2, gotas de azul de metileno a 1% em gua destilada e soluo de sacarose em diferentes concentraes (0, 5, 10, 20, 30, 40, 50 e 60% de sacarose). Foi preparada uma soluo com cada concentrao de sacarose citada, e essas foram devidamente acondicionadas em tubos tipo Falcon em geladeira. Em uma placa de Petri de 10 cm de dimetro, a tampa foi dividida em oito reas com pincel, onde cada separao receberia 4 gotas de 10l das solues de diferentes concentraes onde eram
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depositados os gros de plen provenientes de flores de diferentes idades (48, 24 e 12 horas antes da antese, no momento da antese e 6, 12, 24 e 48 horas aps a antese). No fundo da placa de Petri, foi acondicionada gua destilada num volume aproximado de 10 ml. Em seguida a tampa da placa de Petri foi cuidadosamente invertida e posta em cima da tampa com gua deixando-a hermeticamente fechada atravs do uso de uma fita adesiva transparente. As placas de Petri foram armazenadas a sombra em temperatura ambiente aproximada de 34C. Aps 48 horas, as placas de Petri foram abertas e em cada gota pingado uma gota de azul de metileno a 1% em gua destilada. Em seguida foram levadas para microscpio estereoscpico para a contagem dos gros de plen que lanaram e os que no lanaram seus tubos polnicos sob cada tratamento.

Requerimentos de polinizao: Visitantes florais do nim Em trs dias diferentes e alternados foram coletadas com rede entomolgica todas as espcies de visitantes florais do nim, durante 24 horas, em Sobral e em Fortaleza, para posterior identificao. As coletas foram realizadas nos horrios de 23h00min 00h00min; 05h00min s 06h00min; 11h00min s 12h00min; 17h00min s 18h00min com caminhadas em transetos nicos repetidamente onde foram coletadas todas as espcies de visitantes florais para identificao. Objetivando determinar a freqncia dos visitantes florais do nim ao longo do dia, foram ainda realizadas, em trs dias no consecutivos na caatinga e na mata litornea, caminhadas de 10 minutos no horrio de 05:00h s 05:10h, 08:00h s 08:10h, 11:00h s 11:10h, 14:00h s 14:10h, 17:00h s 17:10h, 20:00h s 20:10h, 23:00h s 23:10h, 02:00h s 02:10h. Nestas caminhadas foram contados os visitantes florais presentes nas flores, separando os que coletavam plen dos que coletavam nctar.
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Tipos de polinizao Para se conhecer os tipos de polinizao que ocorrem no nim, foi utilizada uma adaptao da metodologia descrita por FREITAS (1995) e ALVES (2000) na qual foram marcadas trezentas flores que foram acompanhadas at a condio de fruto para se determinar o resultado da polinizao natural. Outras trezentas flores foram ensacadas ainda como botes florais, permanecendo encasacadas at a senescncia da flor ou colheita dos frutos, para determinar o efeito da polinizao restrita. No foi realizada autopolinizao manualmente devido fragilidade das flores alm de seu tamanho pequeno e disposio dos estames e do estigma, que ficam alojados internamente em um tubo denominado andrforo de dimetro que impossibilita o manuseio. Foram ainda protegidas trezentas flores para que recebessem somente uma visita de Apis mellifera para em seguida serem re-protegidas e permanecerem at o momento da colheita dos frutos.

2.3. RESULTADOS E DISCUSSO

O florescimento do nim na caatinga foi de agosto a outubro e de abril a maio, enquanto que no litoral o florescimento ocorreu entre setembro e novembro e de maio a junho. Essas observaes esto de acordo com ARAJO et al. (2008).

Biologia floral: Horrio de antese das flores A antese ocorreu de forma semelhante na caatinga e no litoral, locais nos quais os grupos de flores observadas tiveram a antese entre 14h00min e 19h00min,
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coincidindo tambm com as observaes de ERICKSON e ATMOWIDJOJO (2001). A quantidade e percentual de abertura das flores em funo dos horrios estudados so apresentados na figura 2.1.

Figura 2.1. Quantidade e percentual de abertura das flores de nim (Azadiractha indica) na caatinga e na mata litornea no Estado do Cear em funo dos horrios do dia (n = 200).

Anatomia floral Flores de A. indica mostraram-se dispostas em inflorescncias de panculas cimosas axilares. So actinomrficas, pentmeras, brancas, cheirosas no momento da antese, possuem estiletes monadelfos (unidos em um tubo nico) formando um andrforo (tubo formado pela unio dos estames atravs dos estiletes). As flores possuem androceu diplostmone (nmero de anteras o dobro do nmero de ptalas) com anteras apresentando deiscncia rimosa (longitudinal ao longo do eixo) e com tecas voltadas para o
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centro da flor (introrsas), onde fica o gineceu. Essas observaes esto de acordo com o descrito por ARAJO et al. (2000). Desde o surgimento dos botes florais at a queda das ptalas transcorreram no mnimo doze dias, conforme a seqncia apresentada na figura 2.2. No momento da antese o andrforo acolhe totalmente as anteras e o gineceu. Aps 24 horas de ocorrida a antese, o andrforo tem as suas margens escurecidas e tambm perde sua intumescncia, encolhendo-se sensivelmente, colaborando assim para o estigma se posicionar de forma proeminente por entre as anteras. O estilete tambm se alonga medida que a idade da flor avana. Desta forma, no momento da antese, o estigma pouco visvel, mas 12 horas aps a antese, foi verificado que o estigma fica localizado exatamente por entre as anteras e 24 horas aps a abertura da flor o estigma posiciona-se ligeiramente acima do nvel mdio de altura das anteras (Figura 2.3).

Figura 2.2: Seqncia do desenvolvimento de flores de Azadirachta indica no horrio da antese. Imagem com aumento de 2X.

Das 200 flores observadas, verificou-se que todas as flores eram hermafroditas, possuindo plen em todas as suas anteras e seus estigmas apresentaram atividade com o perxido de hidrognio. Portanto, os resultados encontrados neste trabalho, concordam com MOSSINI e KEMMELMEIER (2005) que afirmam ser o nim uma espcie diica, e no confirmam a presena de indivduos androdiicos como citado por PURI (1999), SCHMIDT e JOKER (2000), SINGH et al., (1996) e CHAMBERLAIN et al. (2000). Deve-se considerar, no entanto, que os dados deste trabalho no podem ser
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conclusivos, j que Azadirachta indica uma espcie introduzida no Brasil e h a possibilidade de apenas indivduos diicos terem sido importados. conveniente afirmar ainda que nenhuma das publicaes citadas usou uma metodologia que tivesse o objetivo de descobrir o tipo de sexo das flores de Azadirachta indica e, portanto, os dados no so conclusivos quanto expresso sexual da espcie em estudo.

Figura 2.3: a) Flor no momento da antese mostrando o andrforo intumescido e no seu interior o estigma levemente abaixo das anteras. b) Flor 18 horas aps a antese com o andrforo menos intumescido fazendo com que o estigma se posicione acima das anteras. Figura com aumento de 6X.

Caracterizao polnica O plen de Azadirachta indica caracterizado por apresentar dimetro polar de 50 m de dimetro, e, portanto, est prximo do dimetro dos gros de plen de plantas que so polinizadas por abelhas que de 55 a 65 microns (NAIR, 1965) citado por ERICKSON e ATMOWIDJOJO (2001). So colporados, com exina estriada, e quando inseridos em soluo de sacarose ficam intumescidos assumindo a forma circular, mas

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quando esto fixados nas anteras da flor rapidamente perdem a turgidez e assumem uma forma oval alongado (Figura 2.4).

Figura 2.4: Gros de plen de Azadirachta indica . a) Na forma ovalada (desidratado) e b) Na forma esfrica (intumescidos). Aumento aproximado de 400X.

Produo de nctar As 180 flores observadas em todos os horrios no mostraram volume de nctar suficiente para ser amostrado pelos tubos capilares. Entretanto, em 100 flores dissecadas, foi verificado que na grande totalidade, a parte interna do andrforo estava umedecida, o que sugere que h presena de nctar, provavelmente, em uma quantidade insuficiente para ser sugada pelos tubos capilares. Como no foi possvel coletar nctar das flores de nim, no foram tomadas tambm medidas de avaliao da concentrao de acares do nctar. Os dados obtidos esto em desacordo com ERICKSON e ATMOWIDJOJO (2001), que afirmaram que flores de A. indica produzem amplas quantidades de nctar, embora no tenham citado o volume encontrado. Em corte longitudinal, observou-se a presena de nectrios na base do gineceu. Tambm foi possvel verificar que a lngua de Apis mellifera consegue alcanar o
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nectrio das flores de A. indica (Figura 2.5). Para alcanar o nctar, as abelhas introduzem praticamente todo o seu aparelho bucal no andrforo. Este comportamento de abordagem da flor para coletar nctar se assemelha ao comportamento apresentado por operrias que tambm coletam plen. No entanto, os recursos coletados podem ser facilmente distinguveis devido a presena de plen nas corbculas das operrias, ausente nas abelhas que forrageiam exclusivamente em busca de nctar.

Figura 2.5: Ilustrao mostrando a probscide de uma operria de Apis mellifera introduzida em uma flor de Azadirachta indica em corte longitudinal, simulando uma visita para a coleta de nctar.

Diante do citado por DAYANANDAN et al. (1994), PURI (1999) e ERICKSON e ATMOWIDJOJO (2001), que afirmaram haver nectrios extra-florais em Azadirachta indica e que o papel destes nectrios na ecologia de polinizao de A. indica ainda desconhecido. Os galhos das plantas de nim foram observados periodicamente para
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tentar visualizar abelhas visitando os citados nectrios. Entretanto, nenhum espcime de Apis mellifera foi vista explorando fontes de nctar nos galhos de Azadirachta indica.

Receptividade do estigma Os estigmas de botes florais com idade de 48 horas antes da antese no apresentaram reao com o perxido de hidrognio (Tabela 2.3). Entretanto, quase dois teros dos estigmas dos botes florais em estdios de 24 horas antes da antese reagiram diante do perxido de hidrognio, embora de forma ainda pouco intensa. Essa reao demonstrando que a receptividade do estigma do nim inicia-se no perodo entre 48 e 24 horas antes da antese (Figura 2.6). Doze horas antes da antese quase todos os estigmas j estavam receptivos e reagiam intensamente ao perxido de hidrognio, mas o pico de receptividade, quando todos os estigmas reagiam intensamente ao perxido de hidrognio foi observado do momento da antese at 12 horas aps, quando ento essa receptividade comeou a declinar, e acentuou-se bruscamente nas flores cuja antese havia ocorrido h 24 horas. Quarenta e oito horas aps a antese, apenas dois, dentre os 30 estigmas examinados, ainda se mostravam receptivos. Desta forma, observou-se que o estigma de A. indica permanece bastante receptivo por um prazo de aproximadamente 36 horas, desde antes da antese at 24 horas aps (Figura 2.6).

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Figura 2.6: Horrios de liberao do plen pelas anteras e de receptividade do estigma de Azadirachta indica, avaliados em funo da reao ao perxido de hidrognio.

Horrio de liberao e de viabilidade dos gros de plen As anteras das flores de A. indica ainda no liberavam plen 48 horas antes das flores abrirem, mas j o liberavam 24 horas antes da antese (Figura 2.6). Os gros de plen eram liberados pela abertura longitudinal de todas as anteras simultaneamente e, aps a sua liberao, permaneceram dentro do andrforo, presos s anteras, e ao estigma, que ficava bem prximo, quando a flor no recebia visitas, portanto no sendo transportado pelo vento (Figura 2.3a). As flores protegidas por sacos de fil mantiveram os seus gros de plen no interior do andrforo por mais de 48 horas aps a antese. Em condies naturais, 24 horas aps a antese, as flores de A. indica praticamente no possuem mais gros de plen, provavelmente por serem removidos pelos visitantes florais. A germinao in vitro do plen do nim alcanou valores acima de 80% em concentraes de sacarose variando de 15% a 60%. Entretanto, os meios de cultura com 30
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a 40% de sacarose foram as que melhor apresentaram emisso dos tubos polnicos dos gros de plen de A. indica (Figura 2.6). Os gros de plen de Azadirachta indica j se tornam viveis mesmo antes da antese. Mais da metade dos gros de plen (55,7%) estavam viveis 12 horas antes da antese e permaneceram viveis at 48 horas aps a antese. O perodo de maior vigor dos gros de plen foi no momento da antese at 24 horas aps a flor estar aberta (Figura 2.7).

Figura 2.7: Percentual de germinao in vitro dos gros de plen de nim (Azadirachta indica) em meios de cultura com diferentes concentraes de sacarose.

Esses resultados discordam de GUPTA et al. (1996) citado por CHAMBERLAIN et al. (2000) e KUNDU (1999) que afirmam haver protandria (amadurecimento do plen antes de ocorrer a receptividade do estigma) em Azadirachta

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indica. Neste trabalho, tanto a receptividade do estigma, quanto a liberao dos gros de plen viveis j ocorreram com as flores ainda fechadas.

Figura 2.8: Germinao in vitro dos gros de plen de nim (Azadirachta indica) em diferentes idades das flores, em substrato com 40% de concentrao de sacarose.

Requerimentos de polinizao: Visitantes florais do nim e tipo de polinizao Algumas visitas espordicas por parte de lepidpteros foram observadas, mas eram to pouco frequentes e sem apresentarem qualquer fidelidade s flores de A. indica, que foram descartados como potenciais polinizadores, e, portanto, no identificados nesse estudo. Neste estudo, tanto na caatinga quanto na mata litornea, o nico visitante floral do nim com freqncia, padro de visitas florais (tabela 2.1) e comportamento de pastejo que denotam ser um agente polinizador foi A. mellifera. Os conhecimentos
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existentes sugerem que as meliceas sejam polinizadas por insetos (WILLEMSTEIN, 1987). Confirmando esta sugesto, as espcies Apis indica, A. florea, A. cerana, Trigona spp. e Ceratina spp., foram consideradas os agentes responsveis pela autopolinizao e polinizao cruzada do nim, na ndia (RAJU, 1998). Obviamente, a composio faunstica varia com os ecossistemas estudados, apresentando efeito direto na diversidade dos visitantes florais observados, como o caso do estudo de RAJU (1998), onde as espcies de abelhas estudadas no ocorrem nos ecossistemas brasileiros.

Tabela 2.1: Freqncia mdia diria de Apis mellifera coletando nctar e plen em flores de nim (Azadirachta indica) na caatinga e na mata litornea cearense, em 2008.
Horrios N Nctar (Mdia) 05:00 08:00 11:00 14:00 17:00 38,0 33,7 24,3 19,7 25,7 29,0 25,7 20,0 15,7 21,3 Caatinga Nctar (%) 76,3 76,2 82,2 79,7 83,1 Plen (Mdia) 9,0 8,0 4,3 4,0 4,3 Plen (%) 23,7 23,8 17,8 20,3 16,9 31,7 25,3 19,0 17,3 19,7 n Nctar (Mdia) 24,3 20,0 15,3 15,7 17,0 Mata litornea Nctar (%) 76,8 78,9 80,7 90,4 86,4 Plen (Mdia) 7,3 5,3 3,7 1,7 2,7 Plen (%) 23,2 21,1 19,3 9,6 13,6

Tipos de polinizao O percentual de polinizao do nim foi muito baixo em todos os tratamentos testados, apresentando um elevado grau de absciso das flores. Provavelmente a elevada queda das flores seja devido a um insucesso na polinizao j que a absciso das flores ocorre trs dias aps a sua antese. A frutificao obtida atravs da polinizao restrita (2,7% na caatinga e 3,3% na mata litornea) mostrou que a ausncia dos agentes biticos nas flores
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proporciona baixos ndices de polinizao. Estes dados esto de acordo com KUNDU e LUUKKANEN (SD) que afirmaram ocorrer um alto ndice de alogamia (flor polinizada pelo plen de outra flor, sendo esta do mesmo indivduo ou de indivduos diferentes) em Azadirachta indica. Entretanto, estes dados mostram ainda que o vento pode no ter desempenhado papel algum na polinizao das flores analisadas, caso a frutificao tenha ocorrido por autogamia. Porm, embora que o sucesso da baixa polinizao obtida na polinizao restrita tenha sido resultado de alogamia, a anemofilia atuou de forma insignificante, j que a frutificao mxima no passou de 3,3%. Entretanto, se for considerado que em praticamente todas as flores protegidas foi encontrado que seus estigmas estavam repletos de gros de plen da prpria flor e considerando ainda que todos os frutos observados tinham somente uma semente, este percentual de frutificao deveria ser bem mais elevado. Diante destes resultados, sugere-se haver algum tipo de auto-incompatibilidade parcial entre os indivduos, pois bastaria o sucesso de um nico gro de plen para ocorrer o desenvolvimento dos frutos. Relacionado ao tema auto-incompatibilidade, na literatura foi encontrado somente um nico estudo que afirma no haver auto-incompatibilidade nesta espcie (PURI, 1999). Porm KUNDU (1999), analisando o sistema de cruzamento do nim atravs de anlises genticas de sementes em Bangladesh, afirmou que h predominncia de alogamia em Azadirachta indica e que ocorre um alto grau de variao gentica entre suas populaes. Porm, neste trabalho no h explicaes para a predominncia da alogamia. A frutificao obtida no tratamento polinizao restrita deve ser devido a auto-polinizao, pois as anteras liberam o plen a uma distncia mxima de aproximadamente um milmetro do estigma. Como as anteras circulam o estigma de forma muito prxima, provavelmente, choques mecnicos acabam por levar o plen das anteras
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ao estigma como tambm podem retir-lo. Neste trabalho no foi encontrado aborto de frutos (Figura 2.8). Os resultados obtidos com a polinizao entomfila esto de acordo com todos os trabalhos que abordam este assunto (MATHEW e DAS, 1987; PURI, 1999; KUNDU, 1999; KUNDU e LUUKKANEN, SD). Os resultados mostram que a polinizao melitfila com uma visita apresenta frutificao um pouco abaixo da polinizao natural, sugerindo que uma visita alcana bons ndices de polinizao, mas que mais visitas possivelmente podem melhorar o percentual de frutificao desta espcie.

Figura 2.9: Frutificao de flores de Azadirachta indica que receberam polinizao natural, polinizao melitfila com uma nica visita de Apis mellifera e polinizao restrita, em condies de caatinga e de mata litornea, no Estado do Cear, em 2008.

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2.4. CONCLUSES

Azadirachta indica apresenta duas pocas de florescimento durante o ano com flores hermafroditas que apresentam antese ao final da tarde. Os gros de plen das flores apresentam-se viveis no mesmo horrio em que ocorre a viabilidade do estigma. Os nicos visitantes das flores de Azadirachta indica com caractersticas de agentes polinizadores foram as abelhas Apis mellifera, que apresentaram o comportamento de coleta de plen e nctar durante a permanncia nas flores. O vento no apresentou papel importante na polinizao das flores que aparentemente possuem uma auto-incompatibilidade parcial.

2.5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

ALVES, J. E. Eficincia de polinizao de cinco espcies de abelhas na polinizao da goiabeira (Psidium guajava L.). 2000. 140f. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Universidade Federal do Cear, Fortaleza, 2000. ARAJO, L. L. dos S.; SILVA, R. A. da.; ARNAUD, A. F. SANTOS JNIOR, R. J. dos S. OLIVEIRA JUNIOR, D. A. de O. Estudo fenolgico das plantas apcolas arbreas da microregio de Catol do Rocha-PB-Brasil. Revista Verde, Mossor. v. 3, n. 4, p. 63-72, Out/Dez, 2008.

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ARAJO, L. V. C. de; RODRIGUEZ, L. C. E.; PAES, J. B. Caractersticas fsicoqumicas e energticas da madeira de nim indiano. Scientia forestalis, Piracicaba, SP, Brasil, n. 57, p. 153-159, jun. 2000. ARAJO, S. M. S. de. Meio Ambiente, Ecologia e Controle de Espcies Exticas. 2006. Disponvel em: <http://www.komedi.com.br/escrita/leitura.asp?Texto_ID=9098> Acesso em 22 de junho de 2009. BARTH M. O. Anlise microscpica de algumas amostras de mel. 1. Polen dominante. Anais da Academia Brasileira de Cincias, Rio de Janeiro, RJ, Brasil, v. 42, n. 3, p. 35166, 1970a. BARTH M. O. Anlise microscpica de algumas amostras de mel. 2. Polen acessrio. Anais da Academia Brasileira de Cincias, Rio de Janeiro, RJ, Brasil, v. 42, n. 3, p. 57190. 1970b. BARTH M. O. Anlise microscpica de algumas amostras de mel. 3. Polen isolado. An. Anais da Academia Brasileira de Cincias, Rio de Janeiro, RJ, Brasil, v. 42, n. 4, p. 747772, 1970c. CHAMBERLAIN, J. R.; CHILDS, F. J.; HARRIS, P. J. C. Improvement of neem and its potential benefits to poor farmers in developing countries - Literature Review. Department for International Development, U. K., 2000. 52 p. Disponvel em: <http://www.gardenorganic.org.uk/pdfs/international_programme/NeemImprovementOf.p df> Acesso em 27 dez. 2009. CHAUBAL, P. D.; KOTMIRE, S. Y. Floral calendar of bee forage plants at Sagarmal (India). Indian Bee Journal, Nainintal, India, v. 42, n.3, p. 6568, 1980. CRANE, E.; WALKER, P.; DAY, R. Directory of Impotant World Honey Sources. London: International Bee Research Association, 1984. 384p.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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DAFNI, A.; PACINI, E.; NEPI, M. Pollen and stigma biology. In: DAFNI, A.; KEVAN, P. G.; HUSBAND, B. C. Practical Pollination Biology. Ontario, Canad: Cambridge, 2005. p. 83-146. DAYANANDAN, P.; STEPHEN, A.; MURUGANDAM, B. Identification of cells that store triterpenoids of neem (Azadirachta indica). American Journal Botany, Stanford, California, USA, v. 81, n. 6, p. 21, 1994. ERICKSON, E. H.; ATMOWIDJOJO, A. H. Neem (also Margosa) Azadirachta indica L. (syn. Antelaea azadirachta, Melia azadirachta, Melia indica), family Meliaceae. 2001. Disponvel em: <http://gears.tucson.ars.ag.gov/book/chap5/neem.html> Acesso em: 25 jan. 2008. FALESI, C. I.; FERREIRA, C. A. P.; CARVALHO, R. A. Analise econmica da produo do nim indiano no Estado do Par. Belm: Embrapa Amaznia Tropical, 2000. 4p. (Embrapa Amaznia Oriental. Comunicado Tcnico, 43). FREITAS, B. M. The pollination efficiency of foraging bees on apple (Malus domestica Borkh) and cashew (Anacardium occidentale). 1995. 197f. Tese (Doutorado em Biologia) - University of Wales, Cardiff, 1995. FUZETO, A. P.; BARBOSA, A. A. A.; LOMNACO, C. Cabralea canjerana Subsp. Plytricha (Adri. Juss.) Penn (Meliaceae), uma espcie diica. Acta Botanica Brasilica, So Paulo, SP, Brasil, v. 15, n. 2, p. 167-175, mai/ago, 2001. GUPTA, V. K.; SOLANKI, K. R.; GUPTA, R.; KUMAR, R.V.; DATTA, A. Reproductive biology of neem (Azadirachta indica A. Juss). Range Management and Agroforestry, Cottesloe, Australia, v. 17, n. 2, p. 187-192, 1996. KOUL, O.; ISMAN, M. B.; KETKAR, C. M. Properties and uses of Neem, Azadirachta indica. Canadian Journal of Botany, Ontario, Canada, v. 68, p. 1-11, 1990.

52

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

KUNDU, S. K.; LUUKKANEN, O. Genetic diversity and breeding strategies of the neem (Azadirachta indica). Disponvel em: <http://www.aseanbiodiversity.info/Abstract/ 52001729.pdf> Acesso em: 9 dez. 2009. KUNDU, S. K. The mating system and genetic significance of polycarpy in neem tree (Azadirachta indica). Theoretical and Applied Genetics. v. 99, n. 7/8: 1999, p. 12161220. Disponvel em: <http://www.springerlink.com/content/u064mhhe13eryqv6

/fulltext.pdf> Acesso em: 10 jan. 2010. LOKE, J. H.; HENG,C. K.; REJAB, A.; BASIRUN, N.; MARDI, H. C. A.; OOI, P. A. C. (Eds.), LIM, G. S.( Eds.); TENG, P. S. Studies on neem (Azadirachta indica A. Juss) in Malaysia. In: Proceedings of the 3rd International Conference on Plant Protection in the Tropics. Malaysian Plant Protection Society Kuala Lumpur, Malaysia. v. 2, 1992, p. 103-107. MARTINEZ, S. S. O nim Azadirachta indica: natureza, usos mltiplos, produo. Londrina: IAPAR, 2002. 142 p. MATHEW, P. K.; DAS, M. Preliminary studies on insect visitors to teak (Tectona grandis) inflorescence in Kerala, India. Indian Forest, Dhera Dun, India, v. 113, p. 61-64, 1987. MOSSINI, S. A. G.; KEMMELMEIER, C. A rvore Nim (Azadirachta indica A. Juss): Mltiplos usos. Acta Farmacutica Bonaerense. v. 24, n. 1, p. 139-148, 2005. Disponvel em: <http://www.latamjpharm.org/trabajos/24/1/LAJOP_24_1_7_1_3E9IR6431G.pdf>

Acesso em 12 jan. 2010. MURAWSKI, D. A.; HAMRICK, J. L.; HUBBELL, S. P.; FOSTER, R. B. Mating systems of two bombacaceous trees of a neotropical moist forests. Oecologia, Germany, v. 82: 1990, p. 501-506. Disponvel em: <http://www.springerlink.com/content/g2968t46n 583754h/ fulltext.pdf> Acesso em 12 dez. 2009.

53

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

NAIR, P. K. K. Pollen Grains of Western Himalayan Plants. London, U.K.: Asia Publishing House. 1965. 120 p. NEVES, E. J. M. Importncia dos fatores edafo-climticos para o uso do nim

(Azadirachta indica A. Juss) em programas florestais e agroflorestais nas diferentes regies do Brasil. Colombo: Embrapa Florestas, jul./dez. 2004., p. 99-107. (Boletim de Pesquisa Florestal, n. 49). NEVES, B. P. das; OLIVEIRA, I. P de; NOGUEIRA, J. C. M. Cultivo e utilizao do nim indiano. Santo Antonio de Gois: Embrapa-CNPAF, 2003. 12p. (Embrapa-CNPAF. Circular tcnica, 62). O'MALLEY, D. M.; BAWA, K. S. Mating system of a tropical rain forest tree species. American Journal of Botany, New York, USA, v. 74, n. 8, p. 1143-1149, 1987. PENNINGTON, T. D.; STYLES, B. D.; TAYLOR, D. A. H. Meliaceae. Flora Neotropica Monograph, New York, USA, v. 28, 1981, p. 235-244. PESANTE, D. G. Informacin sobre polinizacin de algunos arbustos y rboles de importncia agrcola y apcola. Universidad de Puerto Rico. _______, 80 pp. Disponvel em:< http://academic.uprm.edu/dpesante/5355/polinizacion-parte-2.PDF> Acesso em 02 set. 2009. PURI, H. S. Neem the devine tree, Azadirachta indica. Amsterdam, The Netherlands: Harwood Academic Publishers, 1999. 182p. RAJU, A. J. S. Bee pollination in Azadirachta indica (Meliaceae). Indian Bee Journal. Nainintal, India, v. 60, n. 2, p. 86, 1998. SAXENA, R.C. Naturally ocurrig pesticides and their potential. In: SHEMILT, L. W. (Ed.). Chemistry and World Food Supplies: The New Frontiers. Pergamon Press, Oxford, 664p, 1983.

54

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

SCHMIDT, L.; JOKER, D. Azadirachta indica A. Juss. Seed Leaflet. Danida Forest Seed Centre, Humlebaek, Denmark, 2p. 2000. Disponvel em: <http://www.food-

security.info/pdf%20%28English%29/Danish%20Seed%20Leaflets/azadirachta_indica_int .pdf> Acesso em 12 ago. 2009. SINGH, V. P.; DHILLON, R. S.; JHORAR, B. S. Floral biology, breeding behaviour and breeding strategy in neem (Azadirachta indica A. Juss.). In: Proceedings of the International Neem Conference, University of Queensland, Australia. 1996. TREWARI, D. N. Monograph on Neem (Azadirachta indica A. Juss.). Dehra Dun, ndia: International Book Distributors, 1992. 279p. WILLEMSTEIN, S. C. An Evolutionary Basis for Pollination Ecology. Leiden, The Netherlands: E. J. Brill, Leiden University Press, 1987. 425p. (Leiden Botanical Series, v. 10).

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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CAPTULO 3 Influncia do florescimento do nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) sobre a rea de crias das colnias de Apis mellifera nos biomas caatinga e mata litornea cearense.

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- CAPTULO 3 Influncia do florescimento do nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) sobre a rea de crias das colnias de Apis mellifera nos biomas caatinga e mata litornea cearense.

RESUMO

O nim (Azadirachta indica A. Juss.) possui comprovadamente princpios ativos com ao inseticida, mas apesar desta caracterstica suas flores so bastante apreciadas por abelhas, sendo inclusive apresentada por vrios autores como uma espcie com bom potencial para a produo apcola. Diante disso buscou-se conhecer a importncia apcola de Azadirachta indica atravs do acompanhamento da populao de crias de colnias de Apis mellifera, durante a poca de florescimento dessa espcie. As observaes foram realizadas de junho a dezembro de 2007, nos municpios de Sobral e Horizonte, Estado do Cear, em ambiente de caatinga e de mata litornea, respectivamente. Em cada bioma, foram distribudas 6 colnias de abelhas africanizadas em uma rea desprovida de nim e outra onde havia nim em florescimento. Os resultados mostraram que as colnias distribudas onde havia nim apresentaram rea de crias significativamente maior (p<0.05) do que nas dispostas nos locais sem nim, tanto na caatinga como na mata litornea. A mortalidade de larvas das colnias da caatinga com nim foi mais elevada do que a da mata litornea com nim e, quando comparada dentro do mesmo bioma, a mortalidade das larvas das colnias nos locais com nim foi significativamente superior (p<0.05) s distribudas onde no havia nim. Entretanto, o percentual de mortalidade das crias, que atingiu o mximo de 13,6% dentre as quatro situaes examinadas, esteve dentro
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do aceitvel. Conclui-se com este trabalho que a mortalidade de crias em colnias de A. mellifera se eleva com o aumento da participao do plen de A. indica na dieta das abelhas, sugerindo uma ao txica deste plen. No entanto, o aumento da postura compensa a mortalidade, o que leva a aumento na emergncia de adultos fortalecendo as colnias. Azadirachta indica pode contribuir para o fortalecimento de colnias de Apis mellifera durante o perodo de escassez de floradas, sendo sua relevncia maior na caatinga do que na mata litornea cearense.

Palavras chave: abelha melfera, caatinga, flora apcola, mortalidade de cria, plen txico.

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- CHAPTER 3 Influence of flowering of neem (Azadirachta indica A. Juss, Meliaceae) in the area of brood of colonies of Apis mellifera in the caatinga and coastal vegetations biomes in the Cear.

ABSTRACT

Neem (Azadirachta indica A. Juss.) is proven to bear active ingredients with insecticide effect but, despite this, its flowers are appreciated by bees and the species is presented by some authors as a useful plant for beekeeping. The present study aimed to investigate the role Azadirachta indica may play in beekeeping observing its impact on brood population of Apis mellifera colonies during neems blooming season. Observations were carried from June to December 2007 in the counties of Sobral and Horizonte, state of Cear, Brazil, in caatinga and coastal vegetation biomes, respectively. In each biome, 6 colonies of Africanized honeybees were distributed in an area devoid of neem and other where neem was blooming. Results showed that colonies placed where neem was blooming produced brood area significanlty greater (p<0.05) than those placed where there were no neem, both in caatinga and coastal vegetation. Brood mortality in the colonies of caatinga with neem was higher than that of coastal vegetation with neem and, when compared within the same biome, brood mortality of colonies placed in areas with neem was significantly higher (p<0.05) than that of colonies where neem was not present. However, brood mortality in the four treatments investigated reached a maximum of 13.6%, within acceptable values. It was concluded that brood mortality in colonies of A. mellifera rises with increment in the amount of A. indica pollen present in the bees diet, suggesting a toxic effect of this pollen.
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However, increment in Queen laying compensates mortality and produces more adult bees strenghening the colonies. Azadirachta indica may contribute to strengh Apis mellifera colonies during dearth periods and it is more relevant in the caatinga than in the coastal vegetation of Cear.

Key words: bee flora, brood mortality, caatinga, honeybee, toxic pollen.

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3.1. INTRODUO

O nim (Azadirachta indica A. Juss.) uma planta extica, introduzida da ndia, que tem sido cultivada no Brasil com vrios propsitos, entre eles o sombreamento, a produo de madeira e o uso como inseticida natural (ARAJO, 2008). Por possuir flores atrativas para a abelha melfera (Apis mellifera L.), o nim tem sido apontado tambm como uma espcie com bom potencial para a produo apcola (ERICKSON e ATMOWIDJOJO, 2001; MOSSINI e KEMMELMEIER, 2005). Alguns autores sugerem que seja uma importante fonte de nctar para a apicultura, mas com menor importncia como fonte de plen (CHAUBAL e KOTMIRE, 1980 e TREWARI, 1992). Crane et al. (1984) recomendam o plantio de nim com a finalidade de melhorar as colheitas de mel. No entanto, espcies da famlia Meliaceae, como o nim, apresentam triterpenos oxigenados conhecidos como meliacinas. Uma destas meliacinas a azadiractina, presente em A. indica, com largo espectro de ao sobre caros, nematides, vrus de plantas, fungos, crustceos e vrios insetos das ordens Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Diptera e Heteroptera (MOSSINI e KEMMELMEIER, 2005). Nos insetos a azadiractina atua na inibio da alimentao, afeta o desenvolvimento das larvas, reduz a fecundidade e fertilidade dos adultos, altera o comportamento, causa diversas anomalias nas clulas e mortalidade em ovos, larvas e adultos (MACEDO, 2007). No entanto, h poucas informaes disponveis sobre o seu efeito sobre A. mellifera. A ao da azadiractina sobre a abelha melfera pouco estudada, e os trabalhos concentram-se no efeito tpico e oral de inseticidas a base de azadiractina em
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larvas e adultos de A. mellifera, provavelmente porque esse princpio ativo mais abundante no extrato de sementes, no sendo facilmente detectado nas flores do nim ou em frutos verdes 40 dias antes da colheita (PESANTE, SD). Dessa forma, inseticidas a base de nim e leo de nim, aplicados de forma tpica ou oral em alimentos artificiais, produziram efeito repelente para campeiras (NAUMANN et al., 1994), efeitos txicos para abelhas operrias (MELATHOPOULOS et al., 2000; DIAMANTINO et al., 2010) e mortandade de larvas (NAUMANN e ISMAN, 1996; MELATHOPOULOS et al., 2000). Em se tratando de culturas pulverizadas com inseticidas a base de azadiractina, SCHMUTTERER e HOLST (1987) atentam para os cuidados com as abelhas que podem ser prejudicadas com aplicaes destes inseticidas durante o florescimento em culturas agrcolas. Por outro lado, LIU (1995a,b) afirma que a azadiractina um limoinide rapidamente biodegradado por ter grande sensibilidade aos raios ultravioletas e aos meios cidos e bsicos, no acumulando resduos nas colmias, bem como no causando efeito de longo prazo em A. mellifera. Mas no h na literatura informaes sobre possvel toxidez do nim para a abelha melfera a partir do uso do plen e/ou nctar pelas abelhas. Diante da controvrsia sobre o cultivo do nim como planta apcola ou no, em funo da comprovada toxidez da azadirachtina para A. mellifera, e a inexistncia de informaes sobre o efeito da ingesto deste liminide por larvas e abelhas adultas em condies naturais, o presente experimento procurou investigar o desenvolvimento das reas de crias de colnias dispostas prximas a cultivos de nim em florescimento , em ambiente de caatinga e de mata litornea, no Estado do Cear.

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3.2. MATERIAIS E MTODOS

O experimento foi conduzido em dois biomas diferentes, um de caatinga e outro de mata litornea nos municpios de Sobral e Horizonte, respectivamente, ambos no Estado do Cear. Em cada bioma, seis colnias de Apis mellifera foram colocadas em uma rea de nim em florescimento e outras seis instaladas em um local desprovido de A. indica, perfazendo quatro tratamentos:: caatinga com introduo de nim (CCN); caatinga sem a presena de nim (CSN); mata litornea com nim (MLCN) e mata litornea sem nim (MLSN). A rea aproximada com nim na caatinga perfazia 1 hectare e na mata litornea totalizava 3 hectares. No municpio de Sobral, as coordenadas geogrficas da rea CSN era 33655S e 401832O e da rea CCN era 34654S e 402126O (CCN). Em Horizonte, as coordenadas da rea de MLSN era 40236S e 382726O enquanto que a rea de MLCN era 40412S e 382729O. As observaes ocorreram nos segundos semestres de 2007 e 2008, quando havia o florescimento de A. indica. A distncia em linha reta entre os locais das colnias dispostas na CCN e CSN era de 19.000 metros enquanto que a menor distncia entre os locais de MLCN e MLSN era de 3.000 metros. As colnias usadas no experimento apresentavam um tamanho populacional aproximado de 60.000 abelhas, estavam alojadas em colmias padro Langstroth com todos os favos do ninho devidamente construdos e sem uso de tela excluidora. As abelhas eram bem adaptadas regio, formando colnias com bom aspecto sanitrio e possuindo rainhas com menos de um ano de idade. As colnias foram escolhidas ao acaso dentre as 42 colmeias do apirio da Universidade Vale do Acara, em Sobral, e 20 de um apirio particular em Horizonte.
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Para identificar as plantas apcolas fornecedoras de plen durante a poca de florescimento do nim, o plen colhido pelas abelhas foi amostrado quinzenalmente por meio de coletores do tipo frontal, instalados na entrada de trs colmias em cada um dos quatro locais de estudo. As amostras foram dividas em sub-amostras que se destinaram a montagem de triplicatas de lminas para anlise palinolgica no Laboratrio de Abelhas da Universidade Federal do Cear, seguindo a metodologia descrita por Barth (1989). Tanto para as anlises palinolgicas quanto as melissopalinolgicas, as espcies vegetais fornecedoras de plen e nctar foram identificadas por comparaes dos tipos polnicos encontrados nas amostras com a palinoteca do Setor de Abelhas da Universidade Federal do Cear. O efeito do nim no desenvolvimento das colnias nos dois biomas foi avaliado tomando-se por base a rea de crias das colnias, desde um ms antes do perodo de florescimento de A. indica at cerca de um ms ps-florescimento. A rea de crias presentes nas colmias foi obtida atravs do mtodo de AL-TIKRITY et al. (1972) onde os quadros das colmias contendo crias eram introduzidos em um suporte do tamanho do quadro da colmia Langstroth, subdividido por barbantes de cor clara que formavam 210 quadrados de 4 cm2 (2 x 2 cm) (Figura 3.1). As medidas das reas de crias foram tomadas pela manh, quando eram contados o nmero de quadrados que se sobrepunham s crias em viso perpendicular. Os quadrados no preenchidos completamente por crias foram contados o nmero de alvolos ocupados e multiplicados pela rea ocupada por cada alvolo posteriormente. Em seguida as reas de cria foram registradas com fotografias digitais com mquina fotogrfica da marca Sony, modelo F828 de 8 megapixels. Os dados foram obtidos em sete observaes mensais que iniciaram a aproximadamente um ms antes do perodo de florescimento e finalizaram um ms aps o perodo de florescimento de Azadirachta indica nos dois biomas.
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O delineamento experimental usado foi um esquema fatorial 2x2x7 (2 biomas x 2 situaes de vegetao com e sem nim x 7 observaes) com 6 repeties (colnias). Os dados foram analisados atravs do programa SAS (1996) onde foi calculada uma ANOVA, e as mdias comparadas atravs do teste F (P<0,05). Para averiguao de um possvel efeito txico de Azadirachta indica para as crias, demarcaram-se e acompanharam-se semanalmente duas reas de 100 alvolos por colnia, em quatro colmias de cada apirio (CCN, CSN, MLCN e MLSN) por duas geraes de operrias, totalizando 64 repeties. Ao todo foi avaliado o desenvolvimento de 1.600 larvas em cada apirio, quando foi quantificado o nmero de crias viveis. O delineamento do experimento que procurou determinar a mortalidade das larvas nos favos no interior das colmias foi tambm um esquema fatorial 2x2 (2 biomas x 2 situaes de vegetao com e sem nim) com 16 repeties (reas de 100 alvolos). Os dados foram analisados atravs do programa SAS (1996) onde foi calculada uma ANOVA, e as mdias comparadas atravs do teste F (P<0,05) e teste LSD de comparaes mltiplas.

Figura 3.1: Quadro de colmia Langstroth inserido no suporte para medio da rea de crias seguindo metodologia de AL-TIKRITY et al. (1972).
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3.3. RESULTADOS E DISCUSSO

Na anlise palinolgica efetuada com o material coletado durante a poca de florescimento de A. indica foi encontrado plen de 8 espcies vegetais, tanto em CSN quanto em CCN (Tabelas 3.1 e 3.2). J para MLCN e MLSN, na mesma poca de florescimento de A. indica, foi encontrada uma riqueza bem maior de plantas fornecedoras de gros de plen, totalizando respectivamente 18 e 19 espcies, sendo a maioria delas coincidentes com as das reas de caatinga (Tabelas 3.3 e 3.4). Esses resultados confirmam a tendncia das abelhas A. mellifera de explorarem, simultaneamente, diferentes fontes de alimento para compor a sua dieta de plen, mas que, na ausncia de floradas diversificadas, restringem a coleta deste a uma ou poucas espcies vegetais (HEPBURN e RADLOFF, 1998).

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Tabela 3.1: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma caatinga (Sobral-CE) em rea contendo nim (Azadirachta indica A. Juss.) em florescimento, e suas respectivas freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. Espcie Famlia Fabaceae Mim. Meliaceae Capparaceae Arecaceae Chrysobalanaceae Fabaceae Mim. Turneraceae Rhamnaceae Nome popular Frequncia mdia (%) Anadenanthera colubrina Azadirachta indica Cleome spinosa Copernicia sp. Licania rgida Mimosa tenuiflora Turnera subulata Ziziphus joazeiro Angico Nim Mussamb Carnaubeira Oiticica Jurema preta Chanana Juazeiro 8,4 12,3 15,0 7,0 5,7 21,8 17,3 12,5

Tabela 3.2: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma caatinga (Sobral-CE), sem a presena de nim (Azadirachta indica A. Juss.), e suas respectivas freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. Espcie Famlia Nome popular Frequncia mdia (%) Alternanthera brasiliana Amburana cearensis Anadenanthera colubrina Copernicia sp. Licania rigida. Mimosa tenuiflora Turnera subulata Ziziphus joazeiro Amaranthaceae Papilionoideae Fabaceae Mim. Arecaceae Chrysobalanaceae Fabaceae Mim. Turneraceae Rhamnaceae Quebra-panela Imburana de cheiro Angico Carnaubeira Oiticica Jurema preta Chanana Juazeiro 19,9 11,3 4,1 6,5 7,3 20,9 16,5 13,5
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Tabela 3.3: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma mata litornea (Horizonte-CE), contendo nim (Azadirachta indica A. Juss.), e suas respectivas freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. Espcie Famlia Nome popular Frequncia mdia (%) Alternanthera brasiliana Anacardium occidentale Azadirachta indica Cocus nucifera Curatella americana Davilla cearensis Himatanthus drasticus Manikara triflora Myrcia sp. Ouratea sp. Protium heptaphyllum Psidium guajava Simarouba versicolor Spermacoce verticilata Stryphnodendron coriaceum Talisia esculenta Trema micrantha Turnera sp. Amaranthaceae Anacardiaceae Meliaceae Arecaceae Dilleniaceae Dilleniaceae Apocynaceae Sapotaceae Myrtaceae Ochnaceae Burseraceae Myrtaceae Simaroubaceae Rubiaceae Fabaceae Mim Sapindaceae Ulmaceae Turneraceae Quebra-panela Cajueiro Nim Coqueiro Cajueiro bravo Cip-de-fogo Caraba Maaranduba Purpuna Batiput Imbiriba Goiabeira Paraba ou praba Vassourinha-de-boto Barbatimo Pitombeira Grandiva Chanana 2,6 13,9 4,6 9,1 0,9 4,4 5,7 2,5 13,1 3,4 4,1 4,1 2,1 2,7 10,4 11,4 4,2 0,6

Tabela 3.4: Espcies vegetais fornecedoras de plen para Apis mellifera, no bioma mata litornea (Horizonte-CE), sem conter nim (Azadirachta indica A. Juss.), e suas respectivas
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freqncias mdias nas amostras obtidas em coletor de plen tipo frontal, durante os meses de agosto a outubro de 2008. Espcie Famlia Nome popular Frequncia mdia (%) Alternanthera brasiliana Anacardium occidentale Cocus nucifera Curatella americana Davilla cearensis Himatanthus drasticus Mangifera indica Maytenus sp. Mimosa sp. Myrcia sp. Ouratea sp. Protium heptaphyllum Psidium guajava Simarouba versicolor Spermacoce verticilata Stryphnodendron coriaceum Talisia esculenta Trema micrantha Turnera sp. Amaranthaceae Anacardiaceae Arecaceae Dilleniaceae Dilleniaceae Apocynaceae Anacardiaceae Celastraceae Mimosaceae Myrtaceae Ochnaceae Burseraceae Myrtaceae Simaroubaceae Rubiaceae Fabaceae Mim Sapindaceae Ulmaceae Turneraceae Purpuna Batiput Imbiriba Goiabeira Paraba ou praba Vassourinha-de-boto Barbatimo Pitombeira Grandiva Chanana Ervano Cajueiro Coqueiro Cajueiro bravo Cip-de-fogo Caraba Mangueira Casca-grossa 3,2 13,4 9,5 0,8 2,7 5,2 1,1 2,9 3,0 13,7 3,5 2,8 6,4 2,4 3,9 10,0 12,3 1,7 2,0

Nas anlises do potencial de A. indica como fonte de plen para A. mellifera observou-se que nas amostras de plen coletadas em CCN, o plen de nim foi classificado como plen acessrio com freqncia mxima de 16,8% no pico de florescimento. J na mata litornea, a representao de A. indica na dieta das abelhas no passou de 7,3%, sendo considerado apenas como plen isolado importante, confirmando as afirmativas de Chaubal e Kotmire (1980) e Trewari (1992) sobre a menor importncia do nim como fonte
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de plen para a abelha melfera (Tabelas 3.1, 3.2, 3.3 e 3.4). Esses resultados mostram que A. indica apresenta uma contribuio mais significativa na dieta das abelhas no ambiente de caatinga, provavelmente porque floresce na poca em que a maior parte da vegetao xerfila da caatinga se apresenta sem folhas e as flores so escassas, enquanto que nessa estao ocorre o florescimento na regio litornea (FREITAS, 1991; LIMA, 1995; NORONHA, 1997; REIS, 2009). Ao serem comparados os biomas, foi observado que as colnias da mata litornea apresentaram reas mdias de crias significativamente (P<0,05) maiores que as reas mdias de crias das colnias localizadas na caatinga, tanto na presena quanto na ausncia do nim (Tabela 3.5). Porm, em ambos os biomas a presena de Azadirachta indica colaborou significativamente (P<0,05) no incremento da produo de crias nas colnias, demonstrando potencial para a apicultura (Tabela 3.5).

Tabela 3.5: reas mdias (cm2) de crias de colnias de Apis mellifera dispostas nos biomas caatinga (Sobral CE) e mata litornea (Horizonte-CE), prximas e distantes de reas com Azadirachta indica em florescimento. Bioma N Azadirachta indica Ausente Caatinga Mata litornea Mdia1 42 42 821,47 + 228,59bB 1098,00 + 190,13bA 959,02b Presente 1373,61 + 751,07aB 1608,71 + 555,08aA 1491,17 1097,55B 1353,54A Mdia2

Mdias seguidas da mesma letra minscula na linha ou maiscula na coluna apresentam diferenas significativas (P< 0,05).

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No bioma caatinga, todas as colnias antecederam o perodo correspondente ao florescimento de Azadirachta indica com uma quantidade significativamente (P<0,05) maior de crias do que as colnias da regio litornea. Isso provavelmente foi devido a diferenas existentes na oferta de alimento dos dois biomas. Pelos testes estatsticos adotados, no foram encontradas interaes entre os biomas e/ou a presena ou ausncia de nim nas reas. O padro de desenvolvimento da rea de crias das colnias de A. mellifera dispostas em MLCN foi semelhante ao das colnias em MLSN, ocorrendo mudanas apenas na intensidade das curvas de desenvolvimento. As colnias iniciaram o segundo semestre do ano com a rea de cria de aproximadamente 1.000 cm2. No decorrer do segundo semestre todas as colnias apresentaram um incremento em suas reas de crias at o ms de outubro, quando a quantidade de crias caiu sensivelmente at o final do ano (Figura 3.2). O aumento da rea de crias das colnias em MLCN foi maior que na MLSN, possivelmente incentivadas pela florada de Azadirachta indica. As colnias que estavam na CCN apresentaram um significativo incremento na rea de crias nos meses de julho e agosto, provavelmente devido ao florescimento do nim, j que as colnias que se encontravam em CSN demonstraram uma queda na postura da rainha. Durante o pico de florescimento de A. indica as colnias em CCN apresentaram uma rea de crias 92% maior do que as colnias em CSN. Ao final do florescimento de A. indica, entre setembro e outubro, as colnias apresentaram outro incremento na rea de postura possivelmente devido ao florescimento de Licania rigida e Ziziphus joazeiro. Neste mesmo perodo, as colnias da CSN apresentaram somente a metade da quantidade de crias do grupo beneficiado com a florada de A. indica, porm, tambm mostraram um acrscimo na quantidade de postura, provavelmente tambm estimuladas pelo florescimento de L. rigida e Z. joazeiro (Figura 3.2). Esta diminuio na quantidade de
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crias no perodo seco do ano foi tambm encontrada por SOUSA (1998) em estudos com colnias silvestres na caatinga, inclusive sendo uma possvel causa para o abandono de ninhos por mais de 30% delas (SOUSA et al., 2000; FREITAS et al., 2007). Verificou-se ainda que no segundo semestre do ano, so poucas as espcies em florescimento na caatinga conforme relatado tambm por FREITAS (1991), LIMA (1995), NORONHA (1997) e REIS (2009).

Figura 3.2: Desenvolvimento da rea mdia (cm2) de crias de colnias de Apis mellifera dispostas em apirios prximos e distantes de cultivos de Azadirachta indica em florescimento nos biomas caatinga (Sobral-CE) e mata litornea (Horizonte-CE) durante o perodo sem chuvas de 2008.

Os resultados sugerem que na mata litornea Azadirachta indica apenas mais uma espcie a fornecer alimento para as abelhas dentre um conjunto de vrias outras que florescem na poca de escassez de chuvas, enquanto que na caatinga A. indica uma das poucas opes alimentares na poca seca do ano. Ou seja, na regio litornea A. indica
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fornece alimento de forma complementar para as colnias de A. mellifera enquanto que na regio semi-rida, quando presente, o nim passa a constiuir uma fonte essencial de alimentos para a manuteno das colnias de A. mellifera. O experimento de acompanhamento do desenvolvimento de crias nas reas demarcadas em cada colmeia mostrou que colnias prximas a reas com A. indica nos dois biomas apresentaram maior mortalidade de crias quando comparadas com as colnias distribudas nas reas sem A. indica nos mesmos biomas. A mortalidade de larvas em colnias na CCN (13,6%) foi significativamente superior (P<0,05) que na CSN (5,81%). Houve tambm diferena significativa (P<0,05) na mortalidade de larvas das colnias da mata litornea onde as que estavam distribudas na MLCN apresentaram uma mortalidade de 9,4%, sendo estatisticamente superior (P<0,05) mortalidade de 5,91% encontrada em MLSN (Tabela 3.6). Pelos testes adotados, foi verificada uma interao entre os biomas de tal forma que a mdia das reas de sobrevivncia das crias entre MLSN e CSN foram superiores estatisticamente (P<0,05) mdia de sobrevivncia das colmias dispostas em MLCN e CCN.

Tabela 3.6: Percentual de sobrevivncia de larvas de as crias em colnias de abelhas melferas (Apis mellifera) em ambientes na presena e na ausncia de nim (Azadirachta indica) nos biomas caatinga (Sobral-CE) e mata litornea (Horizonte-CE), em 2008. Biomas n Sobrevivncia percentual das crias de A. mellifera Presena de A. indica Caatinga Mata litornea 4 4 86,40 + 3,00bB 90,60 + 0,83bA Ausncia de A. indica 94,19 + 1,87aA 94,09 + 1,31aA

Mdias seguidas da mesma letra minscula na linha ou maiscula na coluna apresentam diferenas significativas (P< 0,05).

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Em ambos os locais estudados na regio litornea foi observada a presena de uma espcie de barbatimo, Stryphnodendron coriaceum. O Gnero Stryphnodendron conhecido por possuir vrias espcies cujo plen txico para as larvas de Apis mellifera (CARVALHO, 1998). Durante o acompanhamento das colnias, verificou-se que S. coriaceum colaborou com 10,6 e 15% do plen das amostras coletadas em MLCN e MLSN respectivamente. Entretanto, o pico de florescimento do barbatimo coincide com o final do perodo de florescimento e incio da frutificao de A. indica, no podendo, portanto, ser responsabilizado pela mortalidade de cria observada no presente experimento. Apesar de haver uma provvel toxicidade de A. indica para crias de A. mellifera, a intensidade desta toxicidade considerada aceitvel diante dos dados de SAKAGAMI e FUKUDA (1968), que afirmam ser tolervel uma sobrevivncia de 86% de crias at a fase larval e 85% at a fase adulta em colnias de Apis mellifera (Tabela 3.6). No entanto, WINSTON, DROPKIN e TAYLOR (1981) preconizam que o percentual de mortalidade normal at a fase adulta varia de 3 a 10%, o que colocaria as colnias de ambos os biomas em reas livres de nim dentro desses nveis de normalidade, diferentemente daquelas dispostas em reas com a presena do nim, em ambos os biomas, que estariam no limite superior (MLCN 9,40%) ou acima deste (CCN 13,60%) (Tabela 3.6). No presente estudo, a baixa mortandade pode ser explicada pelo fato de que o plen no usado fresco na alimentao larval, sendo geralmente armazenado nos favos, onde sofre um processo de maturao, sendo ento denominado de po da abelha. Este tempo de armazenamento associado temperatura no interior da colmia so fatores que podem colaborar para a degradao de compostos como a azadiractina e com isso reduzir o efeito nocivo do plen de A. indica para as crias de A. mellifera em condies naturais
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(LIU, 1995a,b) Alm disso, como foi observado em condies de campo, o plen de nim esteve presente na dieta das abelhas Apis mellifera em baixos percentuais (3,5% na mata litornea e 16,8% na caatinga) e certamente deve ser fornecido s larvas em propores semelhantes, e no de forma exclusiva. No foi observada alterao no desenvolvimento na fase de ovo das abelhas africanizadas das colnias distribudas em reas com nim. Possivelmente porque o efeito de seu princpio txico seja somente alimentar. Estes dados so apoiados por SOUZA (2004) quando afirmam que a fase de ovo a fase mais difcil de ser atingida pelo extrato de sementes de Azadirachta indica. A maior mortalidade ocorreu aps o terceiro dia de vida larval. Aps o dcimo segundo dia, a mortalidade das crias (pupas) foi bem menor, no chegando a 1% at o nascimento. Segundo HELD et al., (2001), ISMAN (2002) e KAMARAJ et al. (2008), a azadiractina age como deterrente alimentar para vrias espcies e NAUMANN e ISMAN (1996) e PENG et al. (2000) observaram que inseticidas a base de A. indica foram mais txicos para larvas de Apis mellifera do que para qualquer outra espcie de inseto. Desta forma, possvel supor que a significativa (P<0,05) maior mortalidade de larvas observadas em reas de nim em relao a aquelas sem nim, seja devido alimentao das larvas com plen e/ou nctar coletados pelas operrias nessa espcie vegetal, sendo seu efeito sobre as larvas to maior quanto maior foi a particpao na dieta das abelhas. Essa suposio apoiada pela mortalidade maior observada em CCN, onde a participao do plen do nim na dieta das abelhas foi bem maior do que em MLCN. Porm, importante ressaltar que no h investigaes sobre a presena de azadiractina no nctar ou no plen de A. indica. Portanto, apesar da demonstrada toxicidade de A. indica para A. mellifera quando manipulada para ser usada como inseticida, deve-se considerar na avaliao da
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viabiliade do uso desta espcie como flora apcola, os benefcios trazidos para o estmulo postura das rainhas nas colnias em cada bioma. Na caatinga a espcie parece ter colaborado com a elevao de 92% da populao de crias em contraste com a mortalidade abaixo de 5% acima do normal, enquanto que na mata litornea o incremento de crias foi de 46% e a mortalidade apresentada no alcanou 4% at o nascimento, favorecendo o desenvolvimento das colnias em ambos os casos. Por outro lado, essa espcie extica tem se mostrado uma invasora eficiente j tendo se tornado sub-espontnea em vrias localidades. Considerando o seu potencial para ser usado como inseticida, causador de infertilidade em aves e mamferos e de poder ser abortivo para mamferos (MOURO, 2008; MUKHERJEE et al., 1996; DESHPANDE, MENDULKAR e SADRE, 1980; TALWAR et al., 1997), alm de outras aes talvez ainda desconhecidas, fundamental que se investigue exaustivamente e esclarea o real efeito do nim sobre as abelhas A. mellifera e outros animais dos biomas estudados para que se possa recomendar ou no o seu cultivo como planta apcola ou para outros fins.

3.4. CONCLUSES

Azadirachta indica pode contribuir significativamente para o aumento da rea de crias em colnias de Apis mellifera durante o perodo de escassez de floradas nos biomas caatinga e mata litornea cearense. A importncia dos recursos florais da espcie A. indica no desenvolvimento da rea de crias de colnias de A. mellifera maior na caatinga do que na mata litornea cearense.
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A mortalidade de crias em colnias de A. mellifera se eleva com o aumento da participao do plen de A. indica na dieta das abelhas, sugerindo uma ao txica deste plen. O incremento na produo de larvas nos ambientes com A. indica levam a um crescimento da rea de crias e um conseqente aumento na emergncia de adultos, fortalecendo as colnias.

3.5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

AL-TIKRITY, W. S.; BENTON, A. W.; HILLMAN, E. C. The relationship between the amount of unsealet brood in honey bee colonies and their pollen collection. Journal of Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 11, p. 9-12, 1972. ARAJO, S. M. S. de. Meio Ambiente, Ecologia e Controle de Espcies Exticas. 2008. Disponvel em: <http://www.komedi.com.br/escrita/leitura.asp?Texto_ID=9098> Acesso em 22 de junho de 2009. BARTH, O. M. O plen no mel brasileiro. Rio de Janeiro: Luxor, 1989, 150p. CARVALHO, A. C. P. Plen de Stryphnodendron polyphillum como agente causador da cria ensacada brasileira em Apis mellifera L. 1998. 60 f. Dissertao (Mestrado em Entomologia), Universidade Federal de Viosa, Viosa, 1998. CHAUBAL, P. D.; KOTMIRE, S. Y. Floral calendar of bee forage plants at Sagarmal (India). Indian Bee Journal, Nainintal, India, v. 42, n.3, p. 6568, 1980. CRANE, E.; WALKER, P.; DAY, R. Directory of Impotant World Honey Sources. London: International Bee Research Association, 1984. 384p.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

DESHPANDE, V. Y.; MENDULKAR, K. N.; SADRE, N. L. Male antifertility activity of Azadirachta indica in mice. Journal of Postgraduate Medicine. v. 26, p. 167-170, 1980. Disponvel em: <http://www.jpgmonline.com/article.asp?issn=0022-3859;year=1980;

volume=26;issue=3;spage=167;epage=70;aulast=Deshpande;aid=jpgm_1980_26_3_167_9 66> Acesso em 21 abr. 2009. DIAMANTINO, I. M.; SOUZA, T. F.; MALASPINA, O. Toxicidade do leo e da torta de nim (Azadirachta indica) para operrias de abelhas Apis mellifera. Mensagem doce. n. 108, set. 2010. Disponvel em: < http://www.apacame.org.br/mensagemdoce/108/artigo3. htm> Acesso em out. 2010. ERICKSON, E. H.; ATMOWIDJOJO, A. H. Neem (also Margosa) Azadirachta indica L. (syn. Antelaea azadirachta, Melia azadirachta, Melia indica), family Meliaceae. 2001. Disponvel em: <http://gears.tucson.ars.ag.gov/book/chap5/neem.html> Acesso em: 25 jan. 2008. FREITAS, B. M. Potencial da caatinga para produo de plen e nctar para explorao apcola. 1991. 92f. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Curso de Psgraduao em Zootecnia, Universidade Federal do Cear, Fortaleza, 1991. FREITAS, B. M.; SOUSA, R. M.; BOMFIM, I. G. A. Absconding and migratory behaviors of feral Africanized honey bee (Apis mellifera L.) colonies in NE Brazil. Acta Scientiarum Biological Sciences, Maring, PR, Brasil, v. 29, n. 4, p. 381-385, 2007. HELD, D. W.; EATON, T.; POTTER, D. A. Potential for habituation to a neem-based feeding deterrent in Japanese beetles, Popillia japonica. Entomologia experimentalis et applicata, Oxford, U. K., v. 101, n. 1, p. 2532, oct. 2001. HEPBURN, H. R.; RADLOFF, S. E. Honeybees of Africa. Berlim: Germany, SpringerVerlag, 1998. 370p.

78

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

ISMAN, M. Insect antifeedants. Pesticide Outlook, v. 13, n. 4, p. 152-157, aug, 2002. Disponvel em: <http://www.rsc.org/delivery/_ArticleLinking/DisplayArticleForFree.cfm? doi=b206507j&JournalCode=PO> Acesso em: 03 fev. 2009. KAMARAJ, C.; ABDUL RAHUMAN, A.; BAGAVAN, A. Antifeedant and larvicidal effects of plant extracts against Spodoptera litura (F.), Aedes aegypti L. and Culex quinquefasciatus Say. Parasitology Research, Germany, v. 103, n. 2, p. 325-331, 2008. LIMA, A. O. N. Plen coletado por abelhas africanizadas em apirio comercial na caatinga cearense. 1995. 79 f. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Curso de Psgraduao em Zootecnia, Universidade Federal do Cear. Fortaleza, 1995. LIU, T. P. A possible control of chalkbrood and nosema diseases of the honeybee with neem. Canadian Beekeeping, Beaverlogde, Alberta, Canad, v. 18, n. 5, p. 107-109, 1995a. LIU, T. P. Controlling tracheal mites in colonies of honeybee with neem (Margosan-O) and flumethrin (Bayvarol). American Bee Journal, Hamilton, Il, USA, v. 135, p. 562-566, aug. 1995b. MACEDO, F. da R. Efeitos da administrao de nim (Azadirachta indica A. Juss.) no controle de helmintos em ovinos infectados naturalmente. 2007, 47f. Dissertao (Mestrado em Agronomia e Medicina Veterinria) - Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinria, Universidade de Braslia, Braslia, 2007. MELATHOPOULOS, A. P.; WINSTON, M. L.; WHITTINGTON, R.; SMITH, T.; LINDBERG, C.; MUKAI, A.; MOORE, M. Comparative laboratory toxicity of neem pesticides to honey bees (Hymenoptera: Apidae), their mite parasites Varroa jacobsoni (Acari: Varroidae) and Acarapis woodi (Acari: tarsonemidae), and brood pathogens Paenibacillus larvae and Ascophaera apis. Journal of Economic Entomology, Baltimore, USA, v. 93, n. 2, p. 199-209, apr. 2000.
79

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

MOSSINI, S. A. G.; KEMMELMEIER, C. A rvore Nim (Azadirachta indica A. Juss): Mltiplos usos. Acta Farmacutica Bonaerense. v. 24, n. 1, p. 139-148, 2005. Disponvel em: <http://www.latamjpharm.org/trabajos/24/1/LAJOP_24_1_7_1_3E9IR6431G.pdf>

Acesso em 12 jan. 2010. MOURO, S. A. Toxicidade dos inseticidas metamidofs, imidaclopride + betaciflutina e extrato de neem (Azadirachta indica) ao predador Podisus nigrispinus (Heteroptera: Pentatomidae) em plantas de soja. 2008, 71f. Tese (Doutorado em Fitotecnia) - Universidade Federal do Viosa, Viosa, 2008. MUKHERJEE, S.; LOHIYA, N. K.; PAL, R.; SHARMA, M. G.; TALWAR, G. P. Purified neem (Azadirachta indica) seeds extracts (Preneem) abrogate pregnancy in primates. Contraception, USA, v. 53, n. 6, p. 375-378, jun. 1996. NAUMANN, K., CURRIE R.W., ISMAN M.B. Evaluation of the repellent effects of neem pesticides on foraging honeybees and other pollinators. The Canadian Entomologist, Ottawa, Canada, v. 126, n. 2. p. 225-230, mar. 1994. NAUMANN, K.; ISMAN, M. B. Toxicity of a Neem (Azadirachta indica A. Juss) insecticide to Larval Honey Bees. American Bee Journal, Hamilton, Il, USA, v. 136, n. 7, p. 518- 520, ______. 1996. NORONHA, P.R.G. Caracterizao de mis cearenses produzidos por abelhas africanizadas: parmetros qumicos, composio botnica e colorimetria. 1997. 147f. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Curso de Ps-graduao em Zootecnia, Universidade Federal do Cear, Fortaleza, 1997. PENG, C. Y. S.; TRINH, S.; LOPEZ, J. E.; MUSSEN, E. C.; HUNG, A.; CHUANG, R. The effects of azadirachtin on the parasitic mite, Varroa jacobsoni and its host honey bee (Apis mellifera). Journal Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 39, n. 3-4, p.159-168, dec. 2000.
80

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

PESANTE, D. G. Informacin sobre polinizacin de algunos arbustos y rboles de importncia agrcola y apcola. Universidad de Puerto Rico. _______, 80 p. Disponvel em:< http://academic.uprm.edu/dpesante/5355/polinizacion-parte-2.PDF> Acesso em 02 set. 2009. REIS, I. T. Flora de manuteno para Apis mellifera no municpio de Paramoti, Cear. Brasil. 2009. ____f. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Universidade Federal do Cear, Fortaleza, 2009. SAKAGAMI, S. F.; FUKUDA, H. Life tables for worker honeybees. Research Population Ecology, Tokio, Japan, v. 10, n, 2, p. 127 139, 1968. SAS INSTITUTE INC. SAS/STAT. Users guide, release 6.11.ed. Cary, 1996. SCHMUTTERER, H.; HOLST, H. On the effects of the enriched and formulated neem seed kernel extract AZT-VR-K on Apis mellifera L. Journal of Applied Entomology. v. 103: 1987, p. 208-213. SOUSA, R. M. Ciclo anual das abelhas africanizadas (Apis mellifera L.) silvestres na caatinga cearense. 1998. 72f. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Curso de Psgraduao em Zootecnia, Universidade Federal do Cear, Fortaleza, 1998. SOUSA, R. M.; FREITAS, B. M.; ARAJO, Z. B.; SOARES, A. E. E. Seasonal changes in Africanized honey bee (Apis mellifera L.) population of the caatinga vegetation in NE Brazil. In: 2 nd International Conference on Africanized Honey Bees and Bee Mites. Anais Tucson - Az, 2000, p. 16-24. SOUZA, A. P. Ao inseticida e modo de ao de extratos de meliceas sobre Bemisia tabaci (Genn., 1889) bitipo B. 2004, 101f. Tese (Doutorado em Entomologia Agrcola) Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Piracicaba, 2004. TALWAR, G. P; SHAH, S.; MUKHERJEE, S.; CHABRA, R. Induced termination of pregnancy by purified extracts of Azadirachta indica (neem): mechanisms involved.
81

Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

American Journal of Reproductive Immunology, Chichester, U. K., v. 37, p. 485-491, 1997. TREWARI, D. N. Monograph on Neem (Azadirachta indica A. Juss.). Dehra Dun, ndia: International Book Distributors, 1992. 279p. WINSTON, M. L.; DROPKIN, J. A.; TAYLOR, O. R. Demography and life history characteristics of two honey bee races (Apis mellifera) Oecologia, Germany, v. 48, n. 3, p. 407-413, 1981. Disponvel em: < http://www.springerlink.com/content/jg16j486w23077 m7/fulltext.pdf> Acesso em 02 jan. 2010.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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CAPTULO 4 Toxicidade do plen, nctar e do odor das flores de nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) para operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas.

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- CAPITULO 4 Toxidade do plen, nctar e do odor das flores de nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) para operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas.

RESUMO

O nim (Azadirachta indica A. Juss.) vem sendo apontado como uma boa fonte de plen e nctar para a apicultura, no entanto h evidncias de que suas flores possam ser txicas para abelhas. O presente experimento foi realizado no Laboratrio de abelhas da Universidade Federal do Cear no perodo de outubro a dezembro de 2007, e teve por objetivo avaliar a toxidade do plen, nctar e odor das flores de nim para operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas. Para isso, 20 operrias jovens de abelhas africanizadas foram confinadas em gaiolas, em seis repeties, para receberem durante toda a vida os tratamentos alimentares: gua, mel e plen apcola (T0); gua, flores de nim e polen apcola (T1); gua, flores de nim e mel (T2); gua e flores de nim (T3); gua, mel, plen apcola e cheiro das flores de nim (T4) e gua, flor de nim, mel e plen apcola (T5). Diariamente as abelhas eram contadas e retiradas as que estavam mortas. Os dados foram analisados considerando-se a sobrevivncia, o ndice de mortalidade e o tempo mdio de mortalidade dos indivduos. Os resultados mostraram que os indivduos que se alimentaram exclusivamente dos recursos florais de A. indica apresentaram menor taxa de sobrevivncia e menor tempo mdio de vida, diferindo significativamente (p<0,05) dos que no se alimentaram. Conclui-se que as flores de A. indica so altamente txicas para os adultos de A. mellifera quando fontes exclusivas de plen e nctar, porm no se mostram

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nocivas para essas abelhas quando as mesmas dispe de outras fontes de alimento. O odor das flores no apresenta efeito txico ou mesmo repelente para A. mellifera.

Palavras chave: abelha melfera, mortandade de abelha, planta txica, plen txico, taxa de mortalidade.

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- CHAPTER 4 Toxicity of pollen, nctar and smell of the flowers of neem (Azadirachta indica A. Juss, Meliaceae) for adult workers of Apis mellifera caged.

ABSTRACT

Neem (Azadirachta indica A. Juss.) has been suggested as a good source of pollen and nectar for beekeeping, but there are evidences that its flowers are toxic for bees. This experiment was carried out in the bee lab of Universidade Federal do Cear, Brazil, from October to December of 2007, and aimed to evaluate the toxicity of pollen, nctar and odour of neem flowers to adult workers of Apis mellifera reared in cages. Therefore, young, Africanized honeybee workers were caged and submitted throughout their lives to the following treataments: water, honey and bee pollen (T0); water, neem flowers and bee pollen (T1); water, neem flowers and honey (T2); water and neem flowers (T3); water, honey, bee pollen and odour of neem flowers (T4); and water, neem flowers, honey and bee pollen (T5). Bees were counted daily and the dead ones were removed. Each treatment counted with six replicates of 20 workers. Data were analysed for survival rate, mortality ndex and mean time of bee mortality. Results showed that individuals feeding exclusively on floral resources of A. indica presented lower survival rate and shorter lifespan, differing significantly (p<0,05) to those feeding in other sources of food. It is concluded that flowers of A. indica are highly toxics to adult A. mellifera workers when used as an exclusive source of pollen and nectar, but they do not pose risk when bees have access to other sources of food. The odour of neem flowers does not have toxic or repelent effect to A. mellifera. Key words: bee mortality, honeybee, mortality rate, toxic plant, toxic pollen.
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4.1. INTRODUO As operrias de Apis mellifera buscam constantemente na regio prxima de suas colnias, gua, resina e os recursos alimentares nctar e plen que so obtidos de vrias espcies vegetais (WINSTON, 1987). Dentre as centenas de plantas exploradas por Apis mellifera est o nim (Azadirachta indica), que atualmente encontra-se muito disseminada no Brasil (MARTINEZ, 2002). Entretanto a importncia desta espcie para a apicultura alvo de constantes discusses, pois ela apresenta efeitos que so nocivos para um grande nmero de espcies de insetos, inclusive para as abelhas (NAUMANN e ISMAN, 1996; NEVES et al., 2003; MOSSINI e KEMMELMEIER, 2005). A ao de A. indica sob os insetos assume vrias formas como a de repelir algumas espcies (SCHMUTTERER, 1990; HEYDE et al., 1983), ter ao anti-ovipositora (SCHMUTTERER, 1990), possuir ao reguladora da alimentao (SIMMONDS e BLANEY, 1983; ISMAN, 2002), ser um regulador de crescimento (SALLES e RECH, 1999) e apresentar ao reguladora de fecundidade (HEYDE et al., 1983). Acredita-se que esta planta possua propriedades repelentes aos insetos, mas o efeito mais pesquisado e divulgado de promover a morte dos insetos. Este efeito letal sob os insetos devido presena de compostos limonides, sendo o principal deles a azadiractina (BISWAS et al., 2002; BITTENCOURT, 2007). A presena destes compostos txicos no nctar e no plen ainda no foi devidamente registrada na literatura. Vrias pesquisas foram publicadas mostrando o efeito de inseticidas produzidos a partir do nim sob vrias espcies de insetos (MOURO, 2008; CINTRA et al., 2005). Entretanto no foi encontrada nenhuma pesquisa que procurasse identificar a toxicidade dos recursos florais de A. indica em indivduos adultos de A. mellifera. Diante
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do exposto, objetivou-se com este trabalho avaliar os efeitos que os recursos florais de A. indica causam sob a sobrevivncia de operrias de A. mellifera quando confinadas em gaiolas em condies de laboratrio.

4.2. MATERIAL E MTODOS

Este experimento foi conduzido no Laboratrio de Abelhas da Universidade Federal do Cear, entre agosto e novembro de 2008, quando foram criadas operrias adultas, recentemente emergidas, em gaiolas conforme metodologia usada por PEREIRA (2005). T0: gua + mel + plen apcola T1: gua + flores de nim + plen apcola T2: gua + flores de nim + mel T3: gua + flores de nim T4: gua + odor das flores de nim + mel + plen apcola T5: gua + flores de nim + mel + plen apcola

Para essa avaliao, colocou-se em uma estufa do tipo B.O.D. favos contendo pupas prestes a nascerem de colnias de Apis mellifera. A temperatura interna do B.O.D. e a umidade relativa do ar permaneceram em torno de 34C e 67%, respectivamente. Aps a emergncia, as operrias foram confinadas em gaiolas de madeira com dimenso de 8 x 10 x 15 cm. As gaiolas possuam piso telado, as laterais maiores eram de vidro e na parte superior das gaiolas existiam dois orifcios que recebiam frascos
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de vidro emborcados, com as tampas perfuradas, para o fornecimento de mel e gua para as abelhas contidas no interior das gaiolas. O plen apcola foi fornecido em tampas plsticas colocadas na superfcie do piso telado. Foram usadas seis gaiolas simultaneamente, cada uma delas com um dos tratamentos escolhidos aleatoriamente, com seis repeties. Apesar de PEREIRA (2005) e MILFONT (2007) terem usado 50 operrias em cada gaiola, devido dificuldade operacional encontrada para a introduo das flores de A. indica, neste experimento foram mantidas somente 20 operrias de Apis mellifera em cada uma das seis repeties. Desta forma, cada tratamento foi testado com um total de 120 operrias. As gaiolas e suas peas foram lavadas com detergente neutro e enxugadas ao sol dois dias antes do incio do experimento. Durante o experimento as mesmas permaneceram em condies ambientais com temperatura em torno de 29C e umidade relativa do ar de aproximadamente 76%. A cada 6 horas eram adicionadas 60 flores nos tratamentos T1, T2, T3, T4 e T5 e retiradas as antigas. As inflorescncias cujas flores eram destinadas aos tratamentos desta pesquisa foram protegidas de outros visitantes florais enquanto permaneciam nas plantas, usando-se para isso por sacos de fil. A ponta do galho de cada inflorescncia foi isolada com cera de abelhas para evitar o contato das abelhas com um provvel componente txico da seiva. No tratamento T4 as flores foram fornecidas somente do lado de fora da gaiola, a uma distncia do piso telado que permitisse a passagem do seu odor sem, entretanto serem alcanadas pelas abelhas. Aps a introduo das flores nas gaiolas, observaes eram realizadas para se confirmar a visita das abelhas s flores e analisar o comportamento das mesmas aps as visitas florais.

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Todos os dias era contada e devidamente registrada a quantidade de abelhas mortas em cada gaiola, retirando-as cuidadosamente para evitar a fuga das demais. A toxicidade de Azadirachta indica foi medida pelo perodo para mortalidade total nas abelhas na gaiola (PMTG), ndice de mortalidade (IM) e pelo tempo mdio de mortalidade (TMM) das abelhas confinadas e alimentadas conforme os tratamentos citados. As frmulas do IM e do TMM esto a seguir:

IM = Quantidade de abelhas mortas Nmero de dias

TMM = (abelhas mortas x nmero de dias) Total de abelhas mortas

O delineamento experimental foi inteiramente casualisado com 6 tratamentos e 6 repeties. As mdias obtidas do PMTG, IM e TMM foram analisadas usando-se o teste de Ryan-Einot-Gabriel-Welsch a um nvel de significncia de 5%.

4.3. RESULTADOS E DISCUSSO

Na anlise dos dados verificou-se que houve diferenas significativas (P<0,05) entre os tratamentos testados. Analisando-se o perodo para mortalidade total das abelhas nas gaiolas (PMTG) verificou-se que os indivduos que receberam os tratamentos

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T0, T4 e T5 no diferiram entre si (P<0,05), mas foram diferentes (P<0,05) de T1, T2 e T3. Estes por sua vez diferiram entre si (P<0,05) (Tabela 1). Os tratamentos que apresentaram maior PMTG foram os que tinham um fornecimento de mel e plen (T0, T4 e T5). Os indivduos do T2, que receberam flores de A. indica juntamente com mel, apresentaram PMTG significativamente inferior aos indivduos de T0, T4 e T5, mas foi significativamente maior (P<0,05) aos T1 e T3 (Tabela 4.1).

Tabela 4.1: Perodo, em dias, para mortalidade total nas abelhas na gaiola (PMTG), ndice de mortalidade (IM) e tempo mdio de mortalidade (TMM) de operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas sob condies de laboratrio sujeitas s dietas: gua, mel e plen (T0); gua, flores de nim e polen apcola (T1); gua, flores de nim e mel (T2); gua e flores de nim (T3); gua, mel, plen e cheiro das flores de nim (T4) e gua, flor de nim, mel e plen apcola (T5). Tratamentos T0 T1 T2 T3 T4 T5 N 6 6 6 6 6 6 PMTG 14,000 + 1,095a 8,500 + 0,548c 11,500 + 2,510b 4,000 + 0,894d 14,000 + 0,632a 14,333 + 0,816a IM 1,435 + 0,125c 2,360 + 0,153b 1,923 + 0,477bc 5,223 + 1,207a 1,432 + 0,066c 1,490 + 0,118c TMM 9,342 + 0,155a 5,650 + 0,274c 7,392 + 0,887b 2,458 + 0,593d 9,258 + 0,664a 9,442 + 0,520a

Valores seguidos de mesma letra nas colunas no diferiram entre si (P>0,05) pelo teste de Ryan-Einot-Gabriel-Welsch.

tratamento

T3

apresentou

menor

PMTG,

diferenciando-se

significativamente dos demais (P<0,05) (Tabela 4.1) com uma queda brusca no nmero de sobreviventes nos quatro dias iniciais do experimento (Figura 4.1). Essa rpida mortalidade pode ter sido devido a alguma toxicidade presente nos recursos florais do nim ou a uma m

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alimentao das operrias decorrente da baixa quantidade de nctar nas flores conforme encontrado por ALVES e FREITAS (submetido). O menor tempo mdio de mortalidade, que foi de 2,46 dias, foi observado nos indivduos do tratamento T3, que foi estatisticamente inferior a todos os demais tratamentos (Tabela 4.1).

Figura 4.1: Sobrevivncia mdia de operrias adultas de Apis mellifera criadas em gaiolas sob condies de laboratrio sujeitas s dietas: gua, mel e plen (T0); gua, flores de nim e polen apcola (T1); gua, flores de nim e mel (T2); gua e flores de nim (T3); gua, mel, plen e cheiro das flores de nim (T4) e gua, flor de nim, mel e plen apcola (T5).

No tratamento T1 a mortalidade dos indivduos foi tambm bastante elevada. Neste tratamento as operrias receberam uma massa de plen apcola bem diversificada que pudesse suprir melhor as suas necessidades nutricionais. As abelhas so capazes de sobreviver por muito tempo com dietas pobres em carboidratos, mas o plen
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essencial para o desenvolvimento destas abelhas novas e de suas glndulas hipofaringeanas (DIETZ, 1975). Mesmo sabendo que o mel a principal fonte de energia para as abelhas e que este no completamente substitudo pelo plen (WINSTON, 1987), os resultados mostram que as operrias submetidas ao tratamento T1 aparentemente utilizaram a energia proveniente do plen para viverem por um tempo maior que as operrias que se alimentaram exclusivamente dos recursos obtidos nas flores de A. indica (T3). Analisando-se os suplementos alimentares nctar e plen apcola atravs do TMM entre T1 e T2, pode se verificar que as flores de nim parecem ter menor toxicidade quando as abelhas tm outra fonte alternativa de nctar (Tabela 4.1). Assim, supe-se que o nctar floral possivelmente promova um efeito txico em operrias de Apis mellifera. Os indivduos do tratamento T2 que receberam nctar juntamente com os recursos florais de A. indica viveram em mdia mais dias do que as abelhas dos tratamentos T1 e T3. Embora as abelhas do T2 estivessem recebendo gua, mel e recursos florais (nctar e plen) de A. indica, a sobrevivncia em T2 foi menor do que em T0 onde as abelhas tambm receberam os mesmos produtos, mas de fontes diferentes, ou seja, no eram de origem do nim. Estes resultados denotam que h algo nas flores de A. indica fornecidas em T2 que causaram uma mortalidade mais rpida nas operrias em estudo. Ao serem comparados os tratamentos T2 e T3, verifica-se que o nctar fornecido em T2 aparentemente ajudou a aumentar o tempo de vida das abelhas. Neste caso, o mel fornecido pode ter servido de diluidor do nctar das flores de A. indica ou ter propiciado uma melhor alimentao para as abelhas, que acabaram tendo um maior tempo de sobrevivncia em T2. O fato de as abelhas submetidas ao T4 ser significativamente igual (P<0,05) s que receberam a dieta do T0 mostra que o odor das flores de A. indica no apresentou efeito txico algum sob as operrias de A. mellifera.
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Tambm no houve efeito de repelncia para os indivduos, que contrariamente se sentiram bastante atrados para as flores, forando a cabea contra o assoalho, em direo s flores, nos horrios prximos antese floral, que ocorreu aproximadamente a partir das 16:00 horas. Provavelmente essa atratividade se dava porque as flores apresentavam um odor bastante forte. Esta intensa atratividade no foi verificada em outros horrios. No tratamento T5 pode se verificar que a interao entre todos os fatores leva a resultados semelhantes (P<0,05) ao tratamento testemunha T0. Desta forma, a presena de flores de A. indica na presena de mel e de plen de outras fontes no influenciou na sobrevivncia das operrias de A. mellifera. Estes dados ilustram que o nim no apresenta efeito nocivo para as campeiras de Apis mellifera sob as condies ambientais em que haja disponibilidade de uma imensa diversidade de fontes de nctar e plen para as abelhas explorarem.

4.4. CONCLUSES

As flores de Azadirachta indica so altamente txicas para as abelhas adultas da espcie Apis mellifera quando so fonte exclusiva de alimento. O odor das flores de A. indica no apresentou efeito txico ou mesmo repelente para as abelhas Apis mellifera. As flores de Azadirachta indica na presena de outras fontes de nctar e plen no apresentm efeito nocivo para as abelhas Apis mellifera.

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4.5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

ALVES, J. E.; FREITAS, B. M. Biologia floral e requerimentos de polinizao do nim inidano (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) em reas de caatinga e de mata litornea do Estado do Cear. (Submetido) BARANEK, E. J. Estudo da suscetibilidade de Sitophilus zeamais (Mots., 1855) (Coleoptera: Curculionidae) ao leo de nim (Azadirachta indica A. Juss). Universidade Estadual de Ponta Grossa: PR. 2008. 35 p. Disponvel em:

http://www.uepg.br/colegiados/colagro/monografias/EdemarJoseBaranek.pdf Acesso em 15 de fevereiro de 2010. BISWAS, K.; CHATTOPADHYAY, I; BANERJEE, R. K.; BANDYOPADHYAY, U. Biological activities and medicinal properties of neem (Azadirachta indica). Current Science, Bangalore, India, v. 82, n. 11, p. 1336-1345, jun. 2002. Disponvel em: <http://www.ias.ac.in/currsci/jun102002/1336.pdf> Acesso em 23 set. 2009. BITTENCOURT, A. M. O cultivo do nim indiano (Azadirachta indica A. Juss): Uma viso econmica. 2007 126 f. Dissertao (Mestrado em Cincias Florestais) Universidade Federal do Paran, Curitiba, 2007. CINTRA, P.; MALASPINA, O.; BUENO, O. C. Plantas txicas para abelhas. Arquivos do Instituto Biolgico. So Paulo, v. 72, n. 4, p.547 - 551, out./dez., 2005. DIETZ, A. Nutrition of the adult honey bee. IN: GRAHAM, J. M. (Org.). The hive and the honey bee. Hamilton, Illinois, USA: Dadant & Sons. 1975. p.125-156. HEYDE, J. V. D.; SAXENA R. C.; SCHMUTTERER, H. Neem oil and neem extracts as potential insecticides for control of hemipterous rice pests. In: SCHMUTTERER, H.; ASCHER, K. R. S. (Eds). Proceedings of the Second International Neem Conference.
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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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Rauischholzhausen, Germany: Deutsche Gesellschaft fur Technische Zusammenarbeit (GTZ), 703p, 1983. p. 377-390. ISMAN, M. Insect antifeedants. Pesticide Outlook, v. 13, n. 4, p. 152-157, aug, 2002. Disponvel em: <http://www.rsc.org/delivery/_ArticleLinking/DisplayArticleForFree.cfm? doi=b206507j&JournalCode=PO> Acesso em: 03 fev. 2009. MARTINEZ, S. S. O nim Azadirachta indica: natureza, usos mltiplos, produo. Londrina: IAPAR, 2002. 142 p. MILFONT, M. de O. O potencial da mamoneira (Ricinus communis L.) para a explorao apcola: produo, toxidez e qualidade de mel. 2007, 90 f. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Universidade Federal do Cear, Fortaleza, 2007. MOSSINI, S. A. G.; KEMMELMEIER, C. A rvore Nim (Azadirachta indica A. Juss): Mltiplos usos. Acta Farmacutica Bonaerense. v. 24, n. 1, p. 139-148, 2005. Disponvel em: <http://www.latamjpharm.org/trabajos/24/1/LAJOP_24_1_7_1_3E9IR6431G.pdf>

Acesso em 12 jan. 2010. MOURO, S. A. Toxicidade dos inseticidas metamidofs, imidaclopride betaciflutrina e extrato de neem (Azadirachta indica) ao predador Podisus nigrispinus (Heteroptera: Pentatomidae) em plantas de soja. 2008, 71f. Tese (Doutorado em Cincias) - Universidade Federal de Viosa, Viosa, 2008. NAUMANN, K.; ISMAN, M. B. Toxicity of a neem (Azadirachta indica A. Juss) insecticide to larval honeybees. American Bee Journal, Hamilton, Il, USA, v. 136, n. 7, p. 518-520, jan. 1996. NEVES, B. P. das; OLIVEIRA, I. P de; NOGUEIRA, J. C. M. Cultivo e utilizao do nim indiano. Santo Antonio de Gois: Embrapa-CNPAF, 2003. 12p. (Embrapa-CNPAF. Circular tcnica, 62).

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PEREIRA, F. de M. Desenvolvimento de rao proteica para abelhas Apis mellifera utilizando produtos regionais do Nordeste brasileiro. 2005, 180f. Tese (Doutorado em Zootecnia) Universidade Federal do Cear, Fortaleza, 2005. SALLES, L. A.; RECH, N. L. Efeito de extratos de nim (Azadirachta indica) e cinamomo (Melia azedarach) sobre Anastrepha fraterculus (Weid.) (Dptera: Tephritidae). Revista Brasileira de Agrocincia, Pelotas, RS, Brasil, v. 5, n.3, p. 225 - 227, set./dez. 1999. SCHMUTTERER, H. Properties and potential of natural pesticides from the neem tree, Azadirachta indica. In: Mittler, T. E. (Ed.). Annual Review of Entomology. Palo Alto, California, USA, v. 35, p. 271-298, jan. 1990. SIMMONDS, M. S. J.; BLANEY, W. M. Some neurophysiological effects of azadirachtin on lepidopterous larvae and their feeding response. In: SCHMUTTERER, H.; ASCHER, K. R. S. (Eds). Proceedings of the Second International Neem Conference. Rauischholzhausen, Germany: Deutsche Gesellschaft fur Technische Zusammenarbeit (GTZ), 703p., 1983. p 163-180. WINSTON, M. L. The biology of the honey bee. Cambridge, Massachusetts, USA: Harvard University Press, 1987. 281p.

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CAPTULO 5 Toxicidade do plen de nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaeceae) para larvas de operrias de Apis mellifera criadas in vitro.

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- CAPTULO 5 Toxidade do plen de nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) para larvas de operrias de Apis mellifera criadas in vitro.

RESUMO O experimento foi desenvolvido no Laboratrio de Abelhas da Universidade Federal do Cear com o objetivo de determinar a toxicidade do plen de nim (Azadiracha indica) para larvas de Apis mellifera. Para isso larvas de operrias de A. mellifera foram criadas em cpulas artificiais, sob condies de laboratrio, submetidas a quatro diferentes dietas correspondentes aos tratamentos: T0: Alimento larval artificial; T1: Alimento larval artificial + 60 mg de plen de Azadiracha indica; T2: Alimento larval artificial + 60 mg de plen apcola de outras plantas e T3: Alimento larval artificial + 30 mg de plen de Azadiracha indica + 30 mg de plen apcola de outras plantas. Os resultados mostraram que as larvas que receberam AL juntamente com plen de A. indica (T1) tiveram mortalidade de 100%, sendo significativamente superior do que a mortalidade das larvas que receberam AL com plen misturado de A. indica e de outras espcies (T3), que promoveu a morte de 63,9%. A mortalidade das larvas nos tratamentos T0 e T2, onde os gros de plen de nim no estavam presentes, no diferiram entre si, apresentando resultados de 30,5% e 27,7% respectivamente. Conclui-se que o plen de Azadiracha indica prejudicial s crias de operrias de Apis mellifera causando efeito nocivo e at mesmo letal s larvas desenvolvidas em laboratrio medida que se aumenta a sua participao na dieta. Palavras chave: abelha melfera, alimento larval, flora apcola, mortalidade larval, nim.

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- CHAPTER 5 Pollen toxicity of neem (Azadirachta indica A. Juss, Meliaceae) for worker larvae of Apis mellifera created in vitro.

ABSTRACT

The experiment was carried out at the Bee Laboratory of Universidade Federal of Cear in order to determine the toxicity of pollen from neem (Azadiracha indica) to Apis mellifera larva. Worker A. mellifera larvas were reared in artificial cups under laboratory conditions and subjected to four different diets corresponding to treatments: T0: artificial larval food, T1: artificial larval food + 60 mg of Azadiracha indica pollen; T2: artificial larval food + 60 mg of bee pollen from other plant species and T3: artificial larval food + 30 mg of Azadiracha indica pollen + 30 mg of bee pollen from other plant species. Results showed that the larvas fed artificial larval food with pollen from A. indica (T1) presented 100% mortality rate, significantly higher than the mortality of larvas fed artificial larval food with mixed pollen of A. indica and other species (T3), which produced the 63.9% death. Larval mortality in treatments T0 and T2, where neem pollen grains were not present, did not differ to each other producing 30.5% and 27.7% mortality, respectively. It is concluded that the Azadiracha indica pollen is harmful to worker brood of Apis mellifera causing adverse and even lethal effects to the larvas reared in lab conditions as one increase its participation in the larval diet.

Key words: brood food, bee flora, honey bee, larval mortality, neem.

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5.1. INTRODUO

A regio Nordeste do Brasil vem se destacando como grande produtora de mel no pas. No entanto, 73% da sua rea dominada pelo bioma caatinga, caracterizado por um curto perodo de chuvas e um longo perodo seco (AMORIM et al., 2009). Durante a falta de chuvas, poucas espcies florescem e as colnias de Apis mellifera enfraquecem consideravelmente ou abandonam seus ninhos (FREITAS et al., 2007). O progressivo desmatamento da caatinga apenas piora esse quadro ano aps ano (FREITAS et al., 2009). Por essa razo, pesquisadores e apicultores buscam constantemente alternativas alimentares para as colnias, seja por meio do desenvolvimento de raes para alimentao artificial ou pela introduo de espcies exticas apcolas como a algaroba (Prosopis juliflora) e o nim (Azadirachta indica) (ARAJO et al., 2008; SILVA et al., 2008; PEREIRA et al., 2006). O nim foi introduzida no Brasil em 1986 pelo IAPAR visando o seu uso como inseticida natural, e hoje j domina algumas paisagens urbanas e rurais do pas (MARTINEZ, 2002). No Nordeste brasileiro, abelhas A. mellifera visitam regularmente as flores do nim, especialmente nos perodos crticos do ano, o que tem levado apicultores a questionarem a sua ao inseticida sobre essa espcie e apresentarem interesse no seu cultivo como planta apcola. No entanto, alguns estudos demonstraram que o nim contm componentes qumicos com ao inseticida, sendo txico a dezenas de espcies de insetos, incluindo Apis mellifera (NEVES et al., 2003; MARTINEZ, 2002; SCHMUTTERER e SINGH, 1995). Azadirachta indica potencialmente txica para as abelhas porque contm azadiractina, que um limonide com largo espectro de ao sobre caros, nematides,
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vrus de plantas, fungos, crustceos como tambm a vrios insetos das ordens Lepidoptera, Coleoptera, Diptera e Hemiptera (subordens Homoptera e Heteroptera) (MOSSINI e KEMMELMEIER, 2005). Inseticidas elaborados a base de extratos de folhas e/ou de sementes de nim, quando aplicados diretamente em alvolos com larvas de Apis mellifera, mostraram uma elevada DL50 para as larvas, sendo maior do que para vrias outras espcies de insetos. As larvas que mais sofreram os efeitos estavam entre o terceiro e o quarto instar larval de desenvolvimento (NAUMANN e ISMAN, 1996). PENG et al. (2000) tambm afirmam que o leo de A. indica foi bastante txico para as larvas de A. mellifera. As pesquisas sobre toxidex do nim para A. mellifera vem sendo realizadas usando o extrato de sementes, folhas, ramos e flores aplicados em colnias ou pomares. (SCHMUTTERER e HOIST, 1987; NAUMANN e ISMAN, 1996). Em condies naturais, as abelhas visitam apenas as flores em busca de plen e nctar, no havendo como entrarem em contato com toxinas presentes na seiva e tecidos de folhas, ramos e sementes. Porm, no h estudos investigando o uso feito por A. mellifera do plen do nim na alimentao das larvas, que so os indivduos que recebem a maior parte do plen que as campeiras coletam e levam colmia. Portanto, o presente trabalho teve por objetivo investigar os efeitos do uso do plen de A. indica na alimentao de larvas de operrias de A. mellifera criadas sob condies de laboratrio, uma vez que investigaes sobre componentes txicos na alimentao das larvas s podem ser conduzidos em condies devidamente controladas (MCKEE et al., 2004; AESE et al., 2005; AUPINEL et al., 2005), j que dentro das colnias as operrias detectam e removem larvas doentes e mortas (BRODSGAARD et al., 2000).

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5.2. MATERIAIS E MTODOS

O experimento foi conduzido no Laboratrio de Abelhas da Universidade Federal do Cear, entre setembro e dezembro de 2008, testando-se os seguintes tratamentos, em 36 repeties cada:

T0: Alimento larval artificial (AL); T1: Alimento larval artificial (AL) + 60 mg de plen de Azadiracha indica (PAI); T2: Alimento larval artificial (AL) + 60 mg de plen apcola de outras plantas (PAOP); T3: Alimento larval artificial (AL) + 30 mg de plen de Azadiracha indica (PAI) + 30 mg de plen apcola de outras plantas (PAOP).

Para tanto, cpulas de polietireno usadas tradicionalmente para a produo de rainhas, com 5,5 mm de dimetro na base, 5,8 de dimetro na parte superior e 9,7 mm de altura foram lavadas com detergente neutro, enxaguadas e imersas em lcool por 24 horas. Em seguida, as cpulas foram marcadas com letras e nmeros para identificar o tratamento e a repetio, respectivamente. Ento foram introduzidas em duas colnias de A. mellifera, onde permaneceram por 48 horas. O transporte destas cpulas, de volta ao laboratrio, foi realizado em um recipiente estril fechado e em seguida foram levadas diretamente para dessecadores que estavam armazenados em um B.O.D., de onde foram retiradas apenas para receberem as larvas de A. mellifera e os seus respectivos tratamentos.

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O alimento larval fornecido foi idealizado por REMBOLD e LACKNER (1981), com modificaes sugeridas por SILVA et al. (2005) no qual as propores dos nutrientes seguiu a seguinte composio: gua (36,3%), d-frutose (6,8%), d-glicose (6,8%), extrato de levedo (1,1%) e gelia real (49%). A gelia real utilizada foi adquirida na empresa Apirios Wenzel, em Picos - PI. Sua apresentao era de forma in natura, cujo frasco foi mantido em recipiente com gelo, sendo retirada somente no momento da elaborao do alimento larval. O alimento utilizado em cada tratamento foi preparado e armazenado em tubos tipo Falcon estreis, revestidos por papel alumnio e mantido em geladeira a 4C por no mximo 6 dias aps o preparo (SILVA, 1995). Uma frao diria era retirada somente no momento de fornecer a alimentao para as larvas. Para isso, essa frao era levada ao banho Maria a 34C, em recipiente estril e hermeticamente fechado, onde permanecia por 5 minutos antes de ser usada na alimentao das larvas. As sobras dessa frao, aps a aplicao, eram descartadas. Aps o preparo do alimento, procedeu-se a transferncia das larvas que foram retiradas de duas colnias do apirio da Universidade Federal do Cear, cada qual possuindo uma populao de cerca de 60.000 indivduos adultos. Os favos foram transportados para o laboratrio envolvidos em tecido mido estril a uma temperatura ambiental aproximada de 32C, dentro de uma caixa de isopor. As larvas transferidas para as cpulas apresentavam-se com tamanho equivalente a larvas de at 24 horas de idade aps a ecloso do ovo. A transferncia foi realizada usando-se uma agulha de ao inoxidvel, apropriada para este servio, com a extremidade achatada e dobrada a um ngulo de aproximadamenet 90. Estas larvas foram depositadas nas cpulas j contendo 4 l dos tratamentos testados. Para uma melhor visualizao, o processo de transferncia das larvas dos favos para as cpulas foi realizado sob lupa. Estes cuidados visavam diminuir a
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incidncia de ferimentos que pudessem afetar o desenvolvimento ou at mesmo a sobrevivncia das larvas. Aps a transferncia, as cpulas foram mantidas em uma incubadora com temperatura (34C) e umidade (90%) controladas, conforme a metodologia sugerida por VANDENBERG e SHIMANUKI (1987), com modificaes adotadas por SILVA (1995). Realizadas as transferncias das larvas para as cpulas, foram marcadas duas reas com 100 larvas recm-eclodidas em cada um dos dois favos, para serem devidamente acompanhadas aps a devoluo s colmias de origem. O objetivo deste acompanhamento foi para se conhecer o estado sanitrio das colnias doadoras de larvas assim como verificar se a manipulao aplicada aos favos foi adequada ou gerou algum problema que pudesse prejudicar o desenvolvimento ou sobrevivncia das larvas dos tratamentos (controle). Aps a transferncia, as cpulas com as larvas foram acondicionadas em quatro recipientes de isopor de formato hexagonal onde cabiam 37 cpulas em cada um, permanecendo uma delas vazia e todas as outras ocupadas com os quatro tratamentos distribudos aleatoriamente. Cada recipiente continha 9 cpulas de cada tratamento, somando um sub-total de 36 cpulas. Os quatro recipientes, portanto, acomodaram um total de 144 cpulas ocupadas com crias participantes dos quatro tratamentos do experimento (Figura 5.1). Transcorrida uma hora aps a transferncia, as larvas foram observadas em um estereomicroscpio para verificar com maior clareza se as mesmas apresentavam movimentos nos espirculos laterais. As que no se mexiam seriam descartadas e substitudas.

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Figura 5.1: a) Recipientes de isopor contendo as cpulas de polietileno usadas para a criao de larvas de Apis mellifera em condies controladas de laboratrio; b) Cpulas devidamente marcadas para a identificao das crias.

A administrao do alimento foi sempre sob condies de temperatura ambiente de aproximadamente 34C, com auxlio de micropipetas de repetio com ponteiras estreis. As larvas receberam alimentao somente do primeiro ao quinto dia, nas quantidades 4 l, 15 l, 25 l, 50 l e 70 l, respectivamente. No momento da alimentao, os recipientes de isopor com as crias eram introduzidos em um segundo dessecador, que tambm foi mantido no B.O.D., para que as crias tivessem o mnimo de variao de temperatura e umidade possvel alm de diminuir os riscos de contaminao fora do B.O.D.. Os indivduos foram acompanhados diariamente at o final do experimento, sendo contabilizados e retirados aqueles que morriam. Aps o perodo de alimentao, as larvas foram transferidas para novas cpulas, devidamente higienizadas e foram vistoriadas diariamente (SILVA, 1995). Todo o material utilizado no experimento foi devidamente higienizado para diminuir perdas por contaminaes com microorganismos. A higienizao dos equipamentos foi feita lavando-se detalhadamente todos os equipamentos internamente com detergente neutro e depois com sabo de coco, e em seguida enxaguando as partes
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internas com gua clorada. Em seguida passou-se uma camada de lcool etlico nas partes internas dos equipamentos. Os dessecadores tambm foram lavados da mesma forma. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado com 4 tratamentos e 36 repeties. Como existiu um tratamento T0 que serviu de testemunha, usou-se o teste de Dunnetts para comparaes mltiplas entre as mdias.

5.3. RESULTADOS E DISCUSSO

Apesar dos esforos para reproduzir em laboratrio as condies naturais encontradas nas colmias, o ciclo completo de desenvovimento das crias no foi conseguido plenamente. Elevadas taxas de mortalidade das crias desenvolvidas em laboratrio foram observadas em outras pesquisas at o momento (BRODSGAARD et al., 2000; PENG et al., 1992; VANDENBERG e SHIMANUKI, 1987). Neste trabalho, o desenvolvimento das crias em alguns tratamentos prolongou-se at a fase inicial de pupa. Logo aps a transio entre a fase de pr-pupa para pupa, todos os indivduos do experimento foram contaminados por colnias de fungos que causaram o fim do experimento. Houve diferenas significativas (P<0,05) na mortalidade das larvas de operrias de A. mellifera criadas em condies de laboratrio sob diferentes dietas compostas de alimento larval artificial, plen de nim e de outras fontes. A dieta composta de alimento larval artificial e plen de nim (T1) no propiciou a sobrevivncia de nenhuma larva, tendo apresentado a maior taxa de mortalidade e diferido significativamente (P<0,05) dos demais tratamentos (Tabela 5.1). A dieta T3, constituda dos mesmos ingredientes da T1 alm de plen apcola de outras espcies vegetais, tambm apresentou
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alta taxa de mortalidade das larvas, porm significativamente (P<0,05) inferior a observada para T1, mas significativamente superior (P<0,05) a T0 (somente a dieta larval artificial) e T2 (dietas larval artificial + plen apcola de outras plantas). Os tratamentos T0 e T2 apresentaram as menores taxas de mortalidade e no diferiram (P>0,05) entre si (Tabela 5.1). Por outro lado, as crias acompanhadas nas quatro reas de 100 alvolos das colnias doadoras tiveram uma mortalidade de 6,3% e 5,6% na colnia 1 enquanto que na colnia 2 os percentuais de mortalidade foram de 6,6% e 4,9%. Estas taxas de mortalidade esto dentro do mximo aceitvel de 10% preconizado por WINSTON, DROPKIN e TAYLOR (1981) e de 15% aceito por SAKAGAMI e FUKUDA (1968). No entanto, as menores taxas de mortalidade observada nos tratamentos foram 27,76% (T2) e 30,53%, demonstrando que no se conseguiu reproduzir artificialmente as condies ideiais para o desenvolvimento das larvas. Mesmo assim, a taxa de sobrevivncia significativamente maior e o bom desenvolvimento das crias de T0 e T2 em comparao com os demais tratamentos parecem ter sido devido a no participao do plen de nim na dieta. A semelhana no percentual de mortalidade observado entre os tratamentos T0 e T2 demonstram tambm que a adio de plen apcola de outras espcies vegetais dieta larval artificial usada nesse experimento no afetou positivamente ou negativamente a sobrevivncia das larvas. Isso sugere que a dieta larval usada j supria as necessidades nutricionais bsicas das mesmas. Os percentuais de mortalidade mais elevados foram observados nos tratamentos contendo plen de nim (T1 e T3), sendo significativamente (P<0,05) maior naquele em que o nim constitua fonte exclusiva de plen. Crias que receberam somente o plen de A. indica adicionado ao alimento larval (T1), consumiram pouco alimento e, apesar de algumas terem vivido por mais de 10 dias (Figura 5.2), nenhuma delas sofreu
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metamorfose para pupa. Nenhuma delas tambm conseguiu alcanar o tamanho equivalente ao segundo instar larval das larvas de operrias de Apis mellifera. Provavelmente o no desenvolvimento normal das crias foi devido ao consumo de algum fator antinutricional ou a uma rejeio ao alimento proporcionando uma desnutrio. Esses resultados sugerem que o plen do nim possui alguma substancia inibidora do desenvolvimento larval ou tem propriedades de deterrente alimentar, conforme sugerido por HELD et al. (2001) e ISMAN (2002). Experimentos realizados por NAUMANN e ISMAN (1996) mostraram que inseticidas a base de A. indica foram mais txicos para larvas de A. mellifera do que para qualquer outra espcie de inseto, com a mortalidade ocorrendo seis dias aps a aplicao do inseticida no alimento larval. Esta toxicidade foi confirmada ainda por PENG et al. (2000). Apesar da mortalidade das larvas causadas pela incluso do plen de nim nas dietas testadas, no h relatos de taxas elevadas de mortalidade de crias em colnias de Apis mellifera colocadas prximas a reas de Azadirachta indica em florescimento (ver captulo 4).

Tabela 5.1: Mortalidade percentual* de crias de operrias de Apis mellifera produzidas em condies de laboratrio sob diferentes dietas compostas de alimento larval artificial, plen de nim (Azadirachta indica) e de outras fontes (legenda). Tratamentos T0 AL T1 AL+PAI T2 AL+PAOP T3 AL+PAI+PAOP N 36 36 36 36 Mortalidade (%) 30,53 c 100,00 a 27,76 c 63,89 b

Mdias seguidas de letras diferentes na coluna mostram diferenas significativas (P<0,05) pelo teste de Dunnetts entre os tratamentos. (AL = alimento larval artificial; PAI = plen apcola de Azadirachta indica; PAOP = plen apcola de outras fontes).

* Considerando todas as fases de desenvolvimento do indivduo at a emergencia das pupas.


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Figura 5.2: Sobrevivncia ao longo do perodo experimental das crias de operrias de Apis mellifera produzidas em laboratrio sob as dietas: T0: alimento larval (AL); T1: alimento larval (AL) com plen de A. indica (PAI); T2: alimento larval (AL) e plen de outras plantas (PAOP); e T3: alimento larval (AL) com plen de A. indica (PAI) e plen de outras plantas (PAOP).

Mesmo sendo identificado que o tamanho das larvas que receberam dietas com plen de Azadirachta indica (T1 e T3) eram bem inferior que nos demais tratamentos (T0 e T2), as larvas menores continuaram sendo acompanhadas, sendo retiradas das cpulas somente quando no apresentaram movimentos nos espirculos laterais (Figura 5.3).

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Figura 5.3: Recipiente de isopor contendo os quatro tratamentos. Note as diferenas de tamanho das larvas de mesma idade e de quantidade de alimento depositado entre os tratamentos. As cpulas vazias esto desocupadas por motivos de mortalidade das crias.

5.4. CONCLUSES

O plen de Azadiracha indica prejudicial s crias de operrias de Apis mellifera causando efeito nocivo e at mesmo letal s larvas criadas em laboratrio medida que se aumenta a sua participao na dieta das larvas. A oferta de fontes de plen diferentes de Azadiracha indica pode minimizar e at tornar irrelevante a sua participao na dieta das larvas e, consequentemente, seus efeitos sobre a populao da colnia. Os apicultores devem evitar colocar suas colmias em reas onde Azadiracha indica contribua com 50% ou mais do plen coletado pelas abelhas.

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5.5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

AESE A.; AMDAM, G. V.; HAGEN, A.; OMHOLT, S. T. A new method for rearing genetically manipulated honey bees workers. Apidologie, Paris, France, v. 36, p. 293-299, sep. 2005. ALVES, J. E.; FREITAS, B. M. Influncia do nim (Azadirachta indica A. Juss: Meliaceae) na rea de crias das colnias de Apis mellifera nos biomas caatinga e mata litornea cearense. p. 14. (Submetido). AMORIM, I. L. de; SAMPAIO, E. V. De S. B.; ARAJO, E. de L. Fenologia de espcies lenhosas da caatinga do Serid, RN. Revista rvore, Viosa, MG. Brasil, v. 33, n. 3, p. 491-499, maio/jun. 2009. ARAJO, L. L. dos S.; SILVA, R. A., ARNAUD, A. F.; SANTOS JNIOR, R. J.; OLIVEIRA JNIOR, D. A. Estudo fenolgico das plantas apcolas arbreas da microrregio de Catol do Rocha PB Brasil. Revista Verde, Mossor, RN. Brasil, v. 3, n. 4, p. 63 72, out/dez. 2008. AUPINEL, P.; FORTINI, D.; DUFOUR, H.; TASEI, J. N.; MICHAUD, B.; ODOUS, J. F.; PHAM-DELGUE, M-H. Improvement of artificial feeding in a standard in vitro method of rearing Apis mellifera larvae. Bulletin of insectology, Bologna, Italy, v. 58, n. 2, p. 107111, 2005. BRODSGAARD, C. J.; RITTER, W.; HANSEN, H. Progress of Paenibacillus larvae larvae infection in individually inoculated honey bee larvae reared singly in vitro, in micro colnies, or in full-size colonies. Journal of Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 39, n. 1-2, p. 19-27, jun. 2000.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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FREITAS, B. M.; SOUSA, R. M.; BOMFIM, I. G. A. Absconding and migratory behaviors of feral Africanized honey bee (Apis mellifera L.) colonies in NE Brazil. Acta Scientiarum Biological Sciences, Maring, PR, Brasil, v. 29, n. 4, p. 381-385, 2007. FREITAS, B. M.; IMPERATRIZ-FONSECA, V. L.; MEDINA, L. M.; KLEINERT, A. de M. P.; GALETTO, L.; NATES-PARRA, G.; QUEZADA-EUN, J. J. G. Diversity, threats and conservation of native bees in the Neotropics. Apidologie, Paris, France, p. 1-15, jan/feb. 2009. HELD, D. W.; EATON, T.; POTTER, D. A. Potential for habituation to a neem-based feeding deterrent in Japanese beetles, Popillia japonica. Entomologia experimentalis et applicata, Oxford, U. K., v. 101, n. 1, p. 2532, oct. 2001. ISMAN, M. Insect antifeedants. Pesticide Outlook, v. 13, n. 4, p. 152-157, aug. 2002. Disponvel em: <http://www.rsc.org/delivery/_ArticleLinking/DisplayArticleForFree.cfm? doi=b206507j&JournalCode=PO> Acesso em: 03 fev. 2009. MARTINEZ, S. S. O nim Azadirachta indica: natureza, usos mltiplos, produo. Londrina: IAPAR, 2002. 142 p. MCKEE, B. A.; GOODMAN, R. D.; HORNITZKY, M. A. The transmition of European foulbrood (Melissococcus plutonius) to artificially reared honey bee larvae (Apis mellifera). Journal of Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 43, n. 3, p. 93-100, oct. 2004. MOSSINI, S. A. G.; KEMMELMEIER, C. A rvore Nim (Azadirachta indica A. Juss): Mltiplos usos. Acta Farmacutica Bonaerense. v. 24, n. 1, p. 139-148, 2005. Disponvel em: <http://www.latamjpharm.org/trabajos/24/1/LAJOP_24_1_7_1_3E9IR6431G.pdf>

Acesso em 12 jan. 2010.

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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

Jos Everton Alves

NAUMANN, K.; ISMAN, M. B. Toxicity of a neem (Azadirachta indica A. Juss) insecticide to larval honeybees. American Bee Journal, Hamilton, Il, USA, v. 136, n. 7, p. 518-520, jan. 1996. NEVES, B. P. das; OLIVEIRA, I. P de; NOGUEIRA, J. C. M. Cultivo e utilizao do nim indiano. Santo Antonio de Gois: Embrapa-CNPAF, 2003. 12p. (Embrapa-CNPAF. Circular tcnica, 62). PENG, Y. S. C.; MUSSEN, E.; FONG, A.; MONTAGUE, M. A.; TYLER, T. Effects of chlortetracycline of honey bee worker larvae reared in vitro. Journal of Invertebrate Pathology. v. 60, p. 127-133, sep. 1992. PENG, Y. S. C.; TRINH, S.; LOPEZ, J. E.; MUSSEN, E. C.; HUNG, A.; CHUANG, R. The effects of azadirachtin on the parasitic mite, Varroa jacobsoni and its host honey bee (Apis mellifera). Journal of Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 39, n. 3-4, p.159168, dec. 2000. REMBOLD, H.; LACKNER, B. Rearing of honeybee larvae in vitro: effect of yeast extract on queen differentiation. Journal of Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 20, n. 3, p. 165-171, 1981. SAKAGAMI, S. F.; FUKUDA, H. Life tables for worker honeybees. Research Population Ecology, Tokio, Japan, v. 10, n, 2, p. 127-139, 1968. SCHMUTTERER, H.; HOLST, H. On the effects of the enriched and formulated neem seed kernel extract AZT-VR-K on Apis mellifera L. Journal of Applied Entomology. v. 103, p. 208-213, 1987. SCHMUTTERER, H.; SINGH, R. P. List of Insects Susceptible to Neem Products. In: SCHMUTTERER, H. (Ed.).The neem tree: source of unique natural products for integrated pest management, medicine, industry and other purposes. Weinheim, New York, Basel, Cambridge, Tokyo: VCH Verlagsgessellschaft. 1995. p. 326-365.
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Toxicidade do nim (Azadirachta indica A. Juss.: Meliaceae) para Apis mellifera e sua importncia apcola na caatinga e mata litornea cearense.

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SILVA, R. A. da; EVANGELISTA-RODRIGUES, A.; AQUINO, I. de S.; FELIX, L. P.; MATA, M. F.; PERONICO, A. S. Caracterizao da flora apcola do semi-rido da Paraba. Archivos de Zootecnia. v. 57, n. 220, p. 427 - 438, 2008. SILVA, I. C. da; MESSAGE, D.; CRUZ, C. D.; SILVA, M. V. G. B da. Aplicao de Anlises Multivariadas para Determinao da Casta de Abelhas Apis mellifera L. (Africanizadas), Obtidas em Laboratrio. Revista Brasileira de Zootecnia, Viosa, MG, Brasil, v. 34, n. 2, p. 635-640, abr. 2005. SILVA, I. C. Avaliao de dietas para criao de operrias e zanges de Apis mellifera L. (africanizadas) (Hymenoptera:Apidae) em condies de laboratrio. 1995. 85f. Dissertao (Mestrado em Entomologia) - Universidade Federal de Viosa, Viosa, 1995. VANDENBERG, J. D.; SHIMANUKI, H. Technique for rearing worker honey bees in the laboratory. Journal of Apicultural Research, Cardiff, U. K., v. 26, p. 90-97, 1987. WINSTON, M. L.; DROPKIN, J. A.; TAYLOR, O. R. Demography and life history characteristics of two honey bee races (Apis mellifera) Oecologia, Germany, v. 48, n. 3, p. 407-413, 1981.

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CONCLUSES GERAIS

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CONCLUSES GERAIS

1.

O plen das flores apresentam-se viveis no mesmo horrio em que ocorre a viabilidade do estigma.

2.

Os nicos visitantes das flores de Azadirachta indica com caractersticas de agentes polinizadores foram as abelhas Apis mellifera, que apresentaram o comportamento de coleta de plen e nctar durante a permanncia nas flores.

3.

O vento no apresentou papel importante na polinizao das flores que aparentemente possuem uma auto-incompatibilidade parcial.

4.

Azadirachta indica pode contribuir significativamente para o aumento da rea de cria em colnias de Apis mellifera durante o perodo de escassez de floradas nos biomas caatinga e mata litornea cearense.

5.

A importncia dos recursos florais da espcie A. indica no desenvolvimento da rea de cria de colnias de A. mellifera maior na caatinga do que na mata litornea cearense.

6.

A mortalidade de crias em colnias de A. mellifera se eleva com o aumento da participao do plen de A. indica na dieta das abelhas, sugerindo uma ao txica deste plen.

7.

Os incrementos na produo de larvas nos locais com A. indica levam a crescimentos da rea de cria e aumentos na emergncia de adultos, fortalecendo as colnias.

8.

As flores de Azadirachta indica so altamente txicas para as abelhas Apis mellifera quando so fonte exclusiva de alimento.

9.

O odor das flores de A. indica no apresentou efeito txico ou mesmo repelente para as abelhas Apis mellifera.
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10.

As flores de Azadirachta indica na presena de outras fontes de nctar e plen no apresentm efeito nocivo para as abelhas Apis mellifera.

11.

O plen de Azadiracha indica prejudicial s crias de operrias de Apis mellifera causando efeito nocivo e at mesmo letal s larvas desenvolvidas em laboratrio medida que se aumenta a sua participao na dieta das larvas.

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SUGESTES PARA NOVAS PESQUISAS

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SUGESTES PARA NOVAS PESQUISAS

1.

Investigar a biologia floral e requerimentos de polonizao nas regies onde a espcie teve a sua origem.

2.

Observar com uso de micrmetros e microscpios de alta definio os nectrios das flores de A. indica.

3.

Determinar a composio qumica do plen e do nctar de A. indica, enfocando a presena de azadiractina e outros limonides.

4.

Estudar o comportamento de espcies de abelhas sem ferro que exploram um menor raio de ao em torno de suas colnias e de abelhas solitrias que podem abastecer as clulas de crias com o plen de poucas espcies vegetais.

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