Enzimas

Msc.Odilon Calian

ENZIMAS
Aminocidos: H

Definio:

C*
NH2

COOH

Catalisadores biolgicos, sem alterao delas prprias; Longas cadeias de pequenas molculas de aminocidos.

ENZIMAS
Funo:

Viabilizar a atividade das clulas, quebrando molculas ou juntando-as para formar novos compostos. Com exceo de um pequeno grupo de molculas de RNA com propriedades catalticas, chamadas de RIBOZIMAS, todas as enzimas so PROTENAS. OBS!!! Ribozimas catalisam certas reaes qumicas, como a formao das ligaes peptdicas na sntese das protenas.

CARACTERSTICAS GERAIS
Molculas polipeptdicas grandes, enroladas sobre si mesmas, formando um glbulo com um encaixe. Protenas biolgicas. especializadas na catlise de reaes

ENZIMAS

Esto entre as biomolculas mais notveis devido a sua especificidade e poder cataltico, que so muito superiores aos dos catalisadores produzidos pelo homem. Praticamente todas as reaes que caracterizam o metabolismo celular so catalisadas por enzimas.

CARACTERSTICAS GERAIS
Apresentam alto grau de especificidade;
So produtos naturais biolgicos; So altamente eficientes, acelerando a velocidade das reaes (103 a 108 + rpida);10.000 a 1.000.000.000. So econmicas, reduzindo a energia de ativao No so txicas; Condies favorveis de pH, temperatura, polaridade do solvente e fora inica.

ENZIMAS

ENZIMAS
Propriedades: So catalisadores proticos que aumentam a velocidade de uma reao qumica e no so consumidos durante a reao. Eficincia cataltica: grande, capaz de tranformar 100 a 1000 molculas substrato em produto/segundo.

ENZIMAS

Localizao: Organelas especficas.

Esta compartimentalizao serve para isolar o substrato ou produtos de outras reaes competitivas.

Reao Catalisada por uma Enzima:

Substrato (S)
Enzima (E)

Produto (P)

Substrato molcula sobre a qual a enzima atua, que se transforma em um produto da reao Regulao: Enzimas podem ser ativadas ou inibidas de modo que a velocidade de formao do produto adequado para o momento.

ENZIMAS
Existem 3 mtodos para nomenclatura enzimtica:

- Nome Recomendado: Mais curto e utilizado no dia a dia de quem trabalha com enzimas;
nome do substrato da reao ase Ex.: glicosidase, urease e sacarase. - Nome Usual: consagrado pelo uso; Nome comum original, sem associao com enzimtica. Ex.: tripsina e pepsina. reao

ENZIMAS
Nome Sistemtico: Desenvolvido pela UIBMB (unio internacional de biologia molecular e bioqumica). Mais complexo, nos d informaes precisas sobre a funo metablica da enzima. descrio da ao realizada ase Ex.: lactato-desidrogenase e adenilato-ciclase
Dividido em 6 classes principais:

ENZIMAS - Classificao
1. Oxidorredutases - So enzimas que catalisam
reaes de transferncia de eltrons, ou seja: reaes de oxi-reduo. So as Desidrogenases e as Oxidases.

[R] + NAD+ [O] + NADH + H

Lactato desidrogenase

ENZIMAS - Classificao
2.Transferases - Enzimas que catalisam reaes de transferncia de grupamentos funcionais como grupos contendo C, N e P.

H2O
CH2 CH COO+

THF (tetraidrofolato)
Serina hidroximetil transferase

CH2 COO-

THF CH2

OH
Serina

NH3+

NH3+
Glicina

ENZIMAS - Classificao
3. Hidrolases - Catalisam quebra de ligaes pela adio da gua. Ex: urease.

NH2 C NH2 + H2O

CO2 + 2NH3 Urease

Ureia

ENZIMAS - Classificao
4. Liases - Catalisam a quebra de ligaes C-C, C-S e certas ligaes C-N. As Dehidratases e as Decarboxilases so bons exemplos.

CH3 C COOO Piruvato

Piruvato decarboxilase

CH3 C + CO2 O Acetaldedo

ENZIMAS - Classificao
5.Isomerases (transferncia de grupos dentro da mesma molcula para formar ismeros). As Epimerases so exemplos.

CH3 - OOC CH C CoA O Metilmaionil CoA

Metilmaionil CoA mutase

- OOC CH - CH C CoA 2 2 O Succinil CoA

ENZIMAS - Classificao
6.Ligases - Catalisam a formao de ligaoes entre carbono e O, S, N, acoplados a hidrlise de fosfatos de alta energia.

CH3 C COO- + CO2 O Piruvato

Piruvato carboxilase

HOOC CH2 C COOO Oxaloacetato

ATP

ADP + Pi

ENZIMAS
Especificidade: Interagem com um ou substratos e catalisam poucos tipos de reao; poucos

ENZIMAS
A especificidade reside em uma cavidade ou fenda de ligao ao substrato situada na superfcie da protena enzimtica (stio ativo) Stio ativo: stio de ligao do substrato.
Fenda que contm cadeias laterais de aminocidos que criam superfcie tridimensional complementar ao substrato. Liga-se ao substrato e depois convertido em produto e, ento liberado da enzima.

ENZIMAS
Modelo Chave/Fechadura: prev um encaixe perfeito do substrato no stio de ligao, que seria rgido como uma fechadura.

ENZIMAS
Modelo do Ajuste Induzido: prev um stio de ligao no totalmente pr-formado, mas sim moldvel molcula do substrato;

Ao das Enzimas

Como Funcionam as enzimas

Alteraes de energia que ocorre durante a reao:
1. Energia Livre de ativao barreira energtica que separa reagentes e produtos;

Energia livre de ativao (nocatalizada) Energia livre de ativao (catalizada)

Como Funcionam as enzimas

Cont. Alteraes de energia que ocorre durante a reao:

2. Velocidade da reao necessita de energia suficiente para superar a barreira de energia do estado de transio; 3. Rota Alternativa de reao uma enzima permite uma reao mais rpida em uma rota alternativa com menor energia de ativao

Fatores que influenciam a atividade enzimtica

Concentrao da enzima:

A velocidade inicial da reao em funo da quantidade de enzima disponvel.

Concentrao do substrato: Determina a velocidade mxima da reao; Quanto mais substratos mais ir saturar o stio ativo das enzimas e chega a um ponto que no ocorre o aumento da velocidade da reao.

Cintica enzimtica
o estudo do mecanismo pelo qual as enzimas ligam substratos e os transformam em produtos

Cintica Enzimtica
Velocidade de reao em funo das concentraes dos substratos Determinao do Km e da Vmax Detrminao do timo de pH e de temperatura Inibidores

Cintica de MichaelisMenten

Velocidade x concentrao de substrato Vmax: velocidade mxima Km: concentrao de substrato na qual a reao acontece na metade da velocidade mxima Na Vmax virtualmente todas as molculas de enzima esto com seus sitios ativos ocupados No Km (constante de Michaelis) metade das molculas de enzima presentes no meio de reao esto com seus stios ocupados.

Cintica enzimtica
o estudo de como a velocidade da enzima varia em funo da concentrao de substrato 100mmol/min 100 Velocidade mmol/min. 75 50 25 0 0 1 2 3 4 [S] mmol/L 5 6 0,5mmol/L [S] Velocidade mmol/L mmol/min. 0 0,2 0,5 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 0 25 50 74 85 90 94 97 99

Parmetros cinticos Velocidade mxima (Vmx): a velocidade mxima alcanada pela enzima Km: a concentrao de substrato que faz com que a enzima funcione na metade da Vmx

Fatores que afetam a velocidade da reao

Temperatura
Cada tipo de enzima atua em uma temperatura prpria; quando a velocidade mxima sem desnaturar a enzima; Enzimas humanas: 30 e 40C; Bactrias termfilas: 70C;

Fatores que afetam a velocidade da reao

Temperatura
Aumento da atividade at o pico de velocidade ser atingido e em determinado ponto decrscimo da atividade e desnaturao da enzima

Fatores que afetam a velocidade da reao

pH Efeito sobre ionizao do stio ativo; pH timo: ao redor de 7, prximo ao neutro; Excees: pepsina pH em torno de 2; Tripsina pH em torno de 8;

Fatores que afetam a velocidade da reao

pH
Algumas em pH muito cido ou alcalino so desnaturadas.

INIBIO DA ATIVIDADE ENZIMTICA

Inibidor qualquer substncia que possa diminuir uma reao qumica

COMPETITIVA: inibidor liga reversivelmente enzima e compete com o substrato pelo stio ativo
NO COMPETITIVA: Inibidor e substrato ligam-se em locais diferentes da enzima. O inibidor pode ligar-se a enzima livre ou ao ES, impedindo a reao.

INIBIO DA ATIVIDADE ENZIMTICA

Inibidores catalticos como frmacos:
Importantes medicamentos prescritos agem como frmacos. Exs: antibiticos -lactmicos, como a penicilina e amoxicilina atuam inibindo enzimas envolvidas na sntese da parede bacteriana. Frmacos como Captopril, enalapril, lisinopril, agem inibindo enzimas conversoras de angiotensina (ECA), que diminuem a presso sangunea por bloquear a enzima que cliva a angiotensina I para formar um potente vasoconstrictor a angiotensina II.