UNIVERSIDAD NACIONAL DE ASUNCION FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

CTEDRA DE QUMICA ANALTICA III

PRCTICA N1:

Cromatografa de Alta Resolucin (HPLC)

INTEGRANTES: CABALLERO TORALES, MARA FERNANDA GAMARRA CATTEBEKE, LAURA LEONOR

FARMACIA SAN LORENZO, PARAGUAY

2013

OBJETIVOS

Determinar las condiciones ptimas para el anlisis de Acetamida y Acetanilida

Determinar los parmetros del tiempo de retencin (tr) y longitud de onda de cada compuesto analizado.

Realizar una curva de calibracin de los compuestos en estudio.

RESULTADOS
Condiciones del HPLC Columna Fase mvil Detector UV C18 Metanol:Agua (20:80)* Acetamida (210 nm), Acetanilida (230 nm) 40 C 1 mL/min 20 L

Temperatura de columna Flujo de fase mvil Volumen de inyeccin

Concentracin: Acetamida m: 2,5050g V: 50 mL Pureza: 99% Acetanilida m: 0,5335g V: 100mL Pureza: 99% Tiempos de retencin: 1) Metanol:agua (20:80) 1 tiempo de retencin (tr1): 2 min. 2 tiempo de retencin (tr2): 5,2 min. 2) Metanol:agua (30:70) 1 tiempo de retencin (tr1): 1,9 min. 2 tiempo de retencin (tr2): 3,2 min. reas obtenidas: 1) Acetamida: 5.051.415 Acetanilida: 12.574.320 C= 5,28165 mg/mL C= 49,599 mg/mL

2) Acetamida: 6.881.593 Acetanilida: 19.367.324 3) Acetamida: 14.080.318 Acetanilida: 38.918.771 4) Acetamida: 29.825.630 Acetanilida: 100.508.883

Acetamida
Niveles 1 2 3 4 rea
35,000,000 30,000,000 25,000,000 20,000,000 15,000,000 10,000,000 5,000,000 0 0 1 2 3 4 5 6 y = 6E+06x + 2E+06 R = 0.9961

Concentraciones rea

0,4496 0,992 1,984 4,9599

5.051.415 6.881.593 14.080.318 29.825.630

Concentracin

Acetanilida
Niveles 1 2 3 4 rea
120,000,000 100,000,000 80,000,000 60,000,000 40,000,000 20,000,000 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

Concentraciones Areas

0,0528 0,1056 0,2113 0,5282

12.574.320 19.367.324 38.918.771 100.508.883

y = 2E+08x + 673327 R = 0.9984

Concentracin

ANLISIS DE RESULTADOS
Mediante la preparacin de las muestras se obtuvo una concentracin de 49,599 mg/mL de Acetamida y 5,28165 mg/mL de Acetanilida; ambos con una pureza del 99%. Al realizar la Cromatografa de Alta Resolucin (HPLC) en la proporcin metanol 20% y agua 80% (20:80), se obtuvieron los tiempos de retencin de 2 minutos para la Acetamida y de 5,2 minutos para la acetanilida. Sin embargo, al utilizar la proporcin de 30% metanol y 70% agua (30:70), los tiempos de retencin fueron de 1,9 y 3,2 minutos, para la acetamida y acetanilida respectivamente. Las reas obtenidas mediante el cromatograma para la acetamida en los cuatro niveles diferentes fueron de 5.051.415; 6.881.593; 14.080.318 y 29.825.630. No obstante, las reas de la acetanilida fueron de 12.574.320; 19.367.324; 38.918.771 y 100.508.883.

CONCLUSIN

Las condiciones ptimas para el anlisis de acetamida y acetanilida es en la proporcin (20:80) 20% metanol y 80% agua, ya que los picos salieron mejor definidos con tiempos de retencin ms lejanos, que en la corrida de (30:70), 30% metanol y 70% agua cuyos picos se encontraban muy poco separados con tiempos de retencin ms prximos. En la corrida (10:90), 10 % metanol y 90% agua no es bueno utilizar ya que utilizara un tiempo muy largo y saldra un slo pico ya que es una disolucin muy diluda. Los picos resueltos en el cromatograma se obtuvieron a las longitudes de onda para la acetamida y acetanilida a 210nm y de 230nm respectivamente. En los grficos podemos observar una lnea recta como lnea de tendencia, ya que a mayor concentracin de la solucin obtenemos mayor rea en la cromatografa de alta resolucin.