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ESCUELA POLITCNICA DEL EJRCITO LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR Nombre: Yendrek Velasquez NRC: 4942 1.

Ttulo: Identificacin de levaduras presentes en una muestra de solucin con azcar.

2. Objetivo: Observar e identificar las levaduras presentes en la solucin con azcar.

3. Hiptesis: Las levaduras necesitan estar permanentemente en un medio que les brinde los azcares necesarios para su nutricin, caso contrario mueren instantneamente.

4. Introduccin: Las levaduras, segn el autor Michael J. Pelczar (1979) son miembros del Reino Fungi y dentro de mismo pertenecen a la divisin Eumicota que agrupa a los Hongos verdaderos; adicionalmente se manifiesta que son organismos eucariotas, unicelulares y hetertrofos. La forma de la levadura, puede ser esfrica, ovoide o elipsoidal. Miden de 1 a 10 micrmetros de longitud. Las levaduras se encuentran generalmente en la superficie de las plantas, en el suelo y gracias a agentes como el viento, insectos y animales son transportados hasta el fruto. Adems se menciona que son sumamente sensibles a la temperatura, y necesitan una alimentacin apropiada rica en azcares, elementos minerales y sustancias nitrogenadas. En cuanto a la clasificacin de las levaduras, el autor Michael J. Pelczar (1979) manifiesta que dentro del grupo de los Eumicetos, se incluyen en dos subdivisiones, siendo una de ellas, la Ascomycotina, representada por las levaduras capaces de producir ascosporas, llamadas por aquella razn esporgenas. Y la segunda, la Deuteromycotina, representadas por las levaduras incapaces de formar esporas, denominadas no esporgenas, englobados todos ellos en la familia Sacchromycetaceae. Los gneros de las levaduras no esporgenas constituyen la familia Cryptococcaceae. El licenciado Xavier Ferrer menciona en cuanto a su estructura, que las levaduras estn constituidas por una membrana exterior denominada pared celular, la cual regula los

cambios de la clula con el medio exterior permitiendo la entrada de nutrientes a la clula; y por donde el CO2 y el alcohol son evacuados. Adems, las levaduras constan de una membrana celular y el citoplasma que contiene el ncleo, algunas vacuolas y otros orgnulos como ribosomas y mitocondrias. Se aade que las enzimas que se producen a nivel del citoplasma son la maltasa, la invertesa y la zimasa, las mismas que estn encargadas del proceso de fermentacin. El licenciado Xavier Ferrer, acerca de la reproduccin de las levaduras, expresa que se reproducen asexualmente como clulas individualizadas, por gemacin o por fisin directa que es el mecanismo mediante el cual una porcin de protoplasma sobresale de la pared de la clula y forma una protuberancia, la cual aumenta de tamao y se desprende como una nueva clula de levadura. La reproduccin sexual de las levaduras verdaderas, tiene lugar gracias a la formacin de ascosporas, desempeando la funcin de asca la propia clula de levadura. Aade, que en la mayora de las levaduras verdaderas la formacin de ascosporas tiene lugar luego de la conjugacin previa, dndose seguidamente la conjugacin de ascosporas. Las levaduras segn el licenciado Xavier Ferrer cumplen la funcin de la fermentacin, que son cambios bioqumicos en los productos orgnicos; que consiste en transformar los azcares en alcohol y CO2. Segn el autor Gavio G.(1994), existen mtodos de tincin para observar estos microrganismos, con el fin de incrementar el contraste entre la levadura y su medio; de tal manera que se distingan dichas estructuras micticas; siendo fcilmente identificables con los lentes objetivos de 10x y 40x. 5. Metodologa - Para observar la reproduccin de las levaduras, se coloc una gota de solucin con azcar en el portaobjetos. - Se procedi a colocar dicho portaobjetos en el microscopio y a observar con los lentes objetivos de 10x y 40x. - Seguidamente para observar la morfologa de las levaduras, se tom una gota de muestra y se coloc en el portaobjetos. -Se fij la muestra en la flama del mechero aproximadamente 20 veces, mediante movimientos rpidos en la llama del mechero. - Despus de ello, se coloc una gota de azul de metileno en dicha muestra, durante 4 minutos. - Una vez transcurrido dicho tiempo, se enjuago la muestra con agua.

- Finalmente se procedi a colocar el cubreobjetos en la placa y a observar con los lentes objetivos de 10x, 40x y 100x. 6. Discusin: -Muestras Las cuales fueron tomadas de un matraz de Erlenmeyer, el cual contena una solucin con azcar en la misma que yacan las levaduras. -Portaobjetos: Son finas placas de vidrio, en donde se colocaron las muestras, y el colorante para proceder con la prctica. -Cubreobjetos: Es una delgada placa de vidrio, que sirve para cubrir la muestra que se encuentra en el portaobjetos. - Azul de metileno Segn el autor Gavio G.(1994), el colorante azul de metileno es una solucin que se emplea para teir, en este caso, estructuras micticas como lo son las levaduras, de manera que aumenta el contraste entre el medio y la clula; de tal forma que resulte ms sencilla la observacin de la morfologa de dicha clula mictica. -Mechero: Fue til para la fijacin de las muestras previamente colocadas en el portaobjetos, mediante la exposicin de un frotis a la llama realizando movimientos en cortos lapsos, durante un tiempo. De esta manera, se retira el exceso de agua presente en las muestras. Segn Prieto (2006), esto se realiza para que sus protenas se coagulen, pues previo a la tincin se requiere que los microrganismos estn adheridos a la placa. - Observaciones Se logr constatar la presencia de levaduras en la muestra, tales como de la especie Saccharomyces cerevisiae, que pertenece al grupo Ascomycotina, esta especie se reproduce por gemacin, y en la muestra se present de un color crema, y con una forma esfrica. Adicionalmente, se observ que las levaduras se movan rpidamente generalmente en un espacio pequeo. Adems, al estar inmersas en la solucin con azcar estaban provistas de azcares necesarios para su nutricin.

7. Resultados

Levadura Saccharomyces cerevisiae Muestra tomada de la solucin con azcar 10x

Levadura Saccharomyces cerevisiae Muestra tomada de la solucin con azcar y teida con colorante azul de metileno, donde se observ la reproduccin 40x

Levadura Saccharomyces cerevisiae Muestra tomada de la solucin con azcar y teida con el colorante azul de metileno 40x

Levadura Saccharomyces cerevisiae Muestra tomada de la solucin con azcar y teida con el colorante azul de metileno 100x

8. Conclusin: Tras haber procedido con los pasos anteriormente descritos y tiempos establecidos, los resultados fueron sumamente satisfactorios, pues se logr identificar y observar levaduras, y la reproduccin de las mismas en las muestras tomadas de la solucin con azcar. 9. Bibliografa: AUDERSIK, Teresa, AUDERSIK Gerald. Biologa: La Vida en la Tierra1996. Cuarta edicin. Editorial Prentice- Hall Hispanoamericana. Mxico. GAVIO Gonzalo, Tcnicas Biolgicas: Selectas de Laboratorio y de Campo. 1994. Primera edicin. Editorial Limusa. Mxico. Michael J Pelczar, Jr. Roger D. Reid. Microbiologa. 1979. Editorial McGraw Hill. FERRER Xavier. Licenciado en Ciencias Biolgicas por la UAR PRIETO Rosa. Microbiologa en ciencias de la salud2006. Segunda edicin www.wikipedia.org/wiki/Saccharomyces www.laslevaduras.mex