ALANA CRISTINA CUNHA DOS SANTOS

SALMONELOSE AVIRIA

BRASLIA, 2010

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ALANA CRISTINA CUNHA DOS SANTOS

SALMONELOSE AVIRIA

Trabalho apresentado para o cumprimento de atividades referentes ao Mdulo 03 do curso de Especializao Lato sensu em Higine e Inspeo em Produtos de Origem Animal - HIPOA - UCB

BRASLIA, 2010

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SUMRIO

LISTA DE FIGURAS....................................................................................................................... LISTA DE TABELAS...................................................................................................................... 1. INTRODUO............................................................................................................................ 2. REVISO DE LITERATURA...................................................................................................... 3. SALMONELOSE AVIRIA......................................................................................................... 3.1. PULOROSE............................................................................................................................. 3.1.1. Histrico................................................................................................................................ 3.1.2. Etiologia............................................................................................................................... 3.1.3. Epidemiologia...................................................................................................................... 3.1.4. Patogenia............................................................................................................................. 3.1.5. Sinais Clnicos e Leses..................................................................................................... 3.1.6. Imunidade.............................................................................................................................. 3.1.7. Diagnstico.......................................................................................................................... 3.1.8. Tratamento........................................................................................................................... 3.1.9. Controle e Profilaxia........................................................................................................... 3.2. TIFO AVIRIO.......................................................................................................................... 3.2.1. Histrico............................................................................................................................... 3.2.2. Etiologia............................................................................................................................... 3.2.3. Epidemiologia...................................................................................................................... 3.2.4. Patogenia............................................................................................................................. 3.2.5. Sinais Clnicos e Leses...................................................................................................... 3.2.6. Imunidade............................................................................................................................. 3.2.7. Diagnstico.......................................................................................................................... 3.2.8. Tratamento........................................................................................................................... 3.2.9. Controle e Profilaxia........................................................................................................... 3.3. PARATIFO AVIRIO ............................................................................................................... 3.3.1. Histrico............................................................................................................................... 3.3.2. Etiologia............................................................................................................................... 3.3.3. Epidemiologia...................................................................................................................... 3.3.4. Patogenia.............................................................................................................................

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3.3.5. Sinais Clnicos e Leses..................................................................................................... 3.3.6. Imunidade............................................................................................................................. 3.3.7. Diagnstico.......................................................................................................................... 3.3.8. Tratamento........................................................................................................................... 3.3.9. Controle e Profilaxia............................................................................................................ 4. CONCLUSO.............................................................................................................................

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LISTA DE FIGURAS

Figura 1 - Salmonella typhimurium visto em microscpio........................................................ Figura 2 - Ndulos branco-amarelados no corao causado por Salmonella........................ Figura 3 Salmonella em meio de cultura................................................................................. Figura 4 - Folculos ovarianos degenerados, congestos e disformes..................................... Figura 5 - Fgado com congesto focal, edemaciado e com pontos necrticos....................

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LISTA DE TABELAS

Tabela 1 - Diferenas bioqumicas entre Salmonella gallinarum e Salmonella pullorum......

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1. INTRODUO As Doenas Transmissveis por Alimento DTAs so sndromes de natureza infecciosa ou txica causada pela ingesto de alimentos e ou de gua que contenham agentes etiolgicos de origem biolgica, fsica ou qumica em quantidades suficientes que afete a sade do consumidor. As DTAs so comuns em nosso pas e tem afetado sobremaneira a sade pblica. Muito embora a maioria dos casos seja considerada como leves e moderados, algumas infeces mais graves podem causar sequelas e at mesmo bito, alm dos gastos hospitalares, do afastamento de atividades profissionais e escolares. Os sintomas mais comuns das DTAs de origem microbiana, com manifestaes gastrointestinais, a diarria. No se limitando apenas ao trato gastrointestinal, podendo afetar outros rgos, causando distrbios no Sistema Nervoso Central, na corrente circulatria, nos pulmes, nos rins, no fgado, nos olhos, no feto. Essas complicaes esto diretamente relacionadas patogenicidade do microrganismo envolvido, a quantidade de bactrias ou toxinas ingerida e as condies de sade e aspectos peculiares do indivduo afetado. Os alimentos de origem animal so responsveis por muitas intoxicaes e infeces alimentares. Atentar para os riscos sade do consumidor responsabilidade que deve ser preservada. necessrio a conscientizao dos manipuladores de alimentos, no sentido de preservar a sade e bem estar do consumidor, modificando alguns hbitos e o cumprimento de forma negligente um conjunto de atividades indispensveis, tais como: refrigerao, conservao, manipulao, acondicionamento, coco, armazenamento adequado dos alimentos. Manipuladores isentos de leses e doenas passveis de contaminao, assim como sua higiene pessoal. Matria prima de boa procedncia. Higienizao de utenslios e equipamentos utilizados no preparo dos alimentos. Uso de salas climatizadas para sua manipulao e gua potvel para o seu preparo. A escolha do tema na rea de microbiologia na avicultura deu-se em virtude da forma de criao intensiva ser um grande problema, pois facilita o aparecimento de vrias doenas, predispostas, principalmente, pelo estresse que esses animais sofrem. Alm da Salmonella ser uma das principais bactrias envolvidas em surto de doenas de origem alimentar, ocasionando perdas econmicas em todo o mundo. O que demanda diagnstico e manejo adequado para contornar as situaes adversas. Alm de ter o intuito de fornecer subsdios para futuras pesquisas. 2. REVISO DE LITERATURA Considerando que a principal via de transmisso de Salmonella est na cadeia alimentar, sua presena em animais, especialmente aqueles criados com objetivo comercial, mostra que este microrganismo considerado o mais incidente e relevante agente causal de enfermidade entrica (SONCINI e BACK, 2001).

O Codex Alimentarius recomenda a ausncia de qualquer sorovar de Salmonella em 25 gramas da amostra analisada, incluindo carne de aves e ovos. Os alimentos de origem animal continuam a ser os principais responsveis pela infeco humana, entre eles, a carne de aves, ovos e derivados. Num esforo para conter o aumento de contaminao de produtos avcolas, o governo dos EUA estabeleceu regras para implementao em quatro anos a partir de janeiro de 1998, onde se aceita a presena de at 20% das carcaas de frangos contaminadas, acima deste ndice o abatedouro pode ser at fechado (SILVA e DUARTE, 2002). Um efetivo programa de controle de salmonelas em carcaa envolve, obrigatoriamente, o controle de contaminao na ave viva e ambiente criatrio, antes do abate das aves (pr-abate). Nestes casos, o objetivo das aes reduzir o nmero de frangos portadores de salmonela entrando no abatedouro. Frangos livres de Salmonella significam carcaas livres no final (RODRIGUES 2005b). Essa frase adotada por Rodrigues s verdadeira quando no ocorre contaminao cruzada durante o processamento das carcaas. Uma srie de novas estratgias tem sido adotada pela indstria avcola brasileira no controle de salmonelas em frangos, nestes ltimos anos. Basicamente, elas envolvem aes no pr-abate e no abatedouro. Este programa tem como princpios a aplicao de Boas Prticas de Fabricao (BPF), Procedimento Padro de Higiene Operacional (PPHO) e da Anlise de Perigos e Pontos Crticos de Controle (APPCC) (RODRIGUES 2005b). Uma medida adicional utilizada na reduo da contaminao identificar os lotes e frangos positivos para Salmonella e desvi-los para abate no final do turno ou para um nico dia. A finalidade reduzir as contaminaes cruzadas durante o abate. H uma correlao positiva entre contaminao dos lotes durante a criao e presena de salmonelas nas carcaas. A verificao feita por meio do teste bacteriolgico para salmonelas de amostras de swabs de arrasto da cama e/ou swabs cloacais ou prps. As amostras so coletadas e examinadas em torno de duas semanas antes do abate, permitindo a obteno dos resultados e aplicaes das estratgias (RODRIGUES 2005b). Em 2002, o governo brasileiro instituiu o Programa de Monitoramento de Salmonella spp., em abatedouros de aves, com incio efetivo a partir de abril de 2004, atravs da Portaria SDA N 72, de 4 de dezembro de 2002.O programa prev a verificao da prevalncia da Salmonella spp. em carcaas, (Santos et al., (2000) afirmam que a Salmonella enteritidis o sorotipo com maior predominncia em carcaas de frango congeladas) a formao de um banco de dados para anlise dos ndices de contaminao, o estabelecimento de padres quantitativos de aceitabilidade da contaminao, o monitoramento constante do nvel de contaminao por este patgeno em estabelecimentos de abates de aves, e o aumento das garantias de inocuidade dos produtos avcolas no mercado interno e externo (BRASIL, 1995). O objetivo desse programa proteger o consumidor de produtos contaminados. Salmonella spp. foi escolhida em funo da sua importncia nas toxinfeces alimentares e da sua principal veiculao ser feita por produtos avcolas contaminados. A execuo e superviso do programa so do DIPOA/MAPA/DAS (BRASIL, 1995).

O programa oficial brasileiro para o controle de salmonelas das granjas avcolas, que faz parte do Programa Nacional de Sanidade Avcola PNSA (IN N. 3/2002 DOU de 16/01/2002) aprova as Normas Tcnicas para Controle e Certificao de Ncleos e Estabelecimentos Avcolas como livres de S. gallinarum e de S. pullorum; e livres ou controlados para S. enteritidis e para S. typhimurium. O programa aplicado a aves reprodutoras com o intuito da produo de pintos de corte livre ou com baixo ndice de contaminao para os sorovares especificados. O PNSA aprovou o uso de bacterinas de S. enteritidis como ferramenta auxiliar no controle de SE em matrizes (BRASIL, 2002). Segundo Soncini e Back (2001), a vacinao de aves com bacterinas contra S. enteritidis desencadeia a produo de anticorpos circulantes que reagem com os antgenos 9-12, resultando em aves falsas reagentes ao teste de pulorose. Esta situao tem sido levantada como uma dificuldade para o uso deste tipo de imungeno no controle da S. enteritidis. Com isso, perde-se o controle sorolgico da Salmonella especfica das aves e invalidam-se os programas sorolgicos de monitoria e erradicao da pulorose. De acordo com o MAPA da Instruo normativa n 78, de 3 de novembro de 2003, caso os resultados das colheitas oficiais tenham positividade para Salmonella gallinarum, Salmonella pullorum, Salmonella enteritidis e Salmonella typhimurium em aves ou ovos frteis de reprodutoras importadas e aves de linhas puras, bisavs e avs nascidas no Brasil, deve-se fazer o sacrifcio/abate do ncleo e eliminao de todos os ovos, incubados ou no, provenientes dos ncleos afetados. Constatando-se, nas colheitas oficiais, positividade em matrizes para Salmonella gallinarum e Salmonella pullorum deve-se fazer o sacrifcio/abate do ncleo e eliminao de todos os ovos, incubados ou no, dela provenientes. Constatando-se positividade nas colheitas oficiais em matrizes para Salmonella enteritidis e Salmonella typhimurium, haver cancelamento da certificao de livre e o ncleo ou estabelecimento avcola passar a ser considerado controlado, desde que atenda aos critrios a seguir: Suspenso da incubao dos ovos at a obteno de resultados negativos; Medicao do ncleo com antibioticoterapia especfica para enterobactrias;

Apesar desse critrio (antibioticoterapia especfica) ser estabelecido pelo MAPA, Navarro (2002), afirma que em nenhuma circunstncia recomenda-se o uso de antimicrobianos no controle de salmonelas durante a criao de frangos. O uso dos probiticos e prebiticos em frangos vem aparecendo como ferramenta adicional no controle de salmonelas. A Organizao Mundial da Sade considera o uso de antibiticos na produo animal um risco crescente para a sade. A principal preocupao de cientistas criao da resistncia bacteriana. As bactrias dos animais tratados com antibiticos recebem constantemente o medicamento, podendo estes se tornar resistentes a droga de eleio (PALERMO, 1995). Existem suposies de que o uso dos antibiticos em animais, destinados ao consumo humano, poderia induzir transferncia de resistncia bacteriana s

pessoas que os ingerem e assim reduzir a eficcia dos medicamentos no tratamento das infeces humanas (SILVA e DUARTE, 2002). Alm desses agravantes preciso verificar se h presena de resduos desses medicamentos de uso veterinrio e suas concentraes nos produtos de origem animal, fixando-se as doses dirias aceitveis e os limites mximos de resduos, tendo por finalidade garantir a segurana do produto, do ponto de vista toxicolgico, ao ser humano que o ingere (PALERMO, 1995). Esquema de provas laboratoriais, sendo que o primeiro teste dever ser realizado iniciando

cinco dias aps o trmino da antibioticoterapia. Em caso de positividade, repete-se a antibioticoterapia e o esquema de teste inicial, repetindo tais procedimentos at a obteno de negatividade. A partir da primeira negativao, permite-se o retorno incubao. O esquema de teste com o intervalo de trs meses at o descarte das aves do ncleo para abate; Por serem patognicos para o homem, seus produtos no podero ser comercializados para consumo humano, salvo quando houver autorizao do DDA e do DIPOA e os produtos em questo forem industrializados em estabelecimento com Servio de inspeo federal (SIF) (MAPA, 2003). O resultado negativo em dois retestes permitir a certificao de ncleo ou

estabelecimento avcola como sendo controlado para Salmonella enteritidis e Salmonella typhimurium, podendo ser comercializadas as aves de um dia ou ovos frteis exclusivamente no territrio nacional. biosseguridade. Mesmo tendo sido obedecidas todas as exigncias anteriores, havendo mortalidade elevada nos primeiros dias do lote subseqente, o estabelecimento avcola dever informar ao servio oficial que definir o encaminhamento do material de cerca de trinta aves mortas ou agonizantes para um laboratrio oficial ou credenciado pelo MAPA, com o objetivo de isolamento de S. pullorum, S. gallinarum, S. enteritidis e S.typhimurium. Havendo confirmao do diagnstico, ser determinado o sacrifcio das aves do ncleo e a investigao epidemiolgica oficial buscando a origem (MAPA, 2003). 3. SALMONELOSE AVIRIA As Salmoneloses avirias so enfermidades provocadas por bactrias do gnero Salmonella, que foi caracterizada em 1885, tendo sua denominao em homenagem ao patologista Daniel Salmon. Essas bactrias infectam as aves e podem causar trs enfermidades distintas: a pulorose, cujo agente a Salmonella pullorum, o tifo avirio, causado pela S. gallinarum e o paratifo avirio, causado por qualquer outra salmonela que no seja S. pullorum ou S. gallinarum (RODRIGUES, 2005a). Dois sorovares possuem impacto direto e severo em galinhas: Salmonella gallinarum e Salmonella Os estabelecimentos considerados controlados devero adotar um reforo nas medidas de

pullorum. Ambos so bem especficos quanto a hospedeiros: Salmonella pullorum causando Pulorose, uma doena sistmica aguda que pode acometer as aves em qualquer idade, mas mais comum em aves jovens, nas trs primeiras semanas de vida e Salmonella gallinarum afetando a ave adulta, causando o Tifo Avirio. Hoje em dia, ambos so razoavelmente controlados atravs de vacinao em reas endmicas, ou mesmo erradicados, atravs da implementao de rgidos esquemas de biossegurana, monitoramento e abate (HIRSH e ZEE, 1999). Com o desenvolvimento industrial, os alimentos passaram a ser produzidos em maior escala. Com isso, a avicultura expandiu-se no mundo inteiro, aumentando o nmero de animais, utilizando principalmente, alta densidade de alojamento. Essa situao favorece a instalao, multiplicao e disseminao de agentes patognicos, principalmente Salmonella. Uma forma importante de contaminao por Salmoella em criao de aves tem sido a rao, que tem como principais veiculadores de agentes as matrias-primas de origem animal, e ocasionalmente os ingredientes de origem vegetal, devido presena de pssaros, moscas e roedores (BERCHIERI e MACARI, 2000). A percepo da infeco por Salmonella como problema para a indstria avcola mudou medida que a prpria indstria se modificou e outros fatores incluem a crescente conscientizao com a sade e qualidade do alimento. A aquisio de mais informaes sobre a microbiologia da Salmonella e a epidemiologia da infeco nas aves e no homem no foi capaz de eliminar a Salmonella das aves e da cadeia alimentar. O controle dos patgenos avirios S. pullorum e S. gallinarum foi conseguido em muitos pases pela tomada de medidas coordenadas de vigilncia sanitria associadas com exames sorolgicos e sacrifcio compulsrio. No entanto, o tifo avirio e a pulorose, continuam entre os principais problemas econmicos em muitos pases e, esforos devem ser contnuos para melhorar os mtodos de controle. Os problemas mais recentes envolvem estabelecer quais os sorotipos de Salmonella tem importncia em sade pblica, tais como S. typhimurium (Figura 1), e S. enteritidis, que so de difcil controle devido epidemiologia mais complexa, que envolve a excreo fecal, contaminao ambiental e a existncia de muitos reservatrios da infeco. No mnimo, a maioria dos pases est aumentando a monitoria destes e de outros sorotipos (BARROY, 1993). Alguns pases que possuem plantis relativamente pequenos e isolados tem sido capazes de reduzir a incidncia da infeco, em aves e no homem, para nveis muito baixos, com medidas rigorosas de monitoria e sacrifcio dos lotes. Alm dessas medidas e programas contnuos de pesquisa, que so essenciais, muito deve ser feito em termos de manejo, higiene, instalaes e produo de alimento (BERCHIERI e BARROW, 1995). A anlise epidemiolgica da doena infecciosa est sedimentada em alguns parmetros constituintes da histria natural dessas ocorrncias. Assim, um dos aspectos fundamentais do problema reside no isolamento e identificao conclusiva do agente etiolgico. Particularizando as salmoneloses avirias, esta condio propicia em primeiro plano o conhecimento da incidncia e/ou prevalncia dos sorovares de Salmonella, possibilitando posteriormente, estabelecer confrontos de suas freqncias em

diversas regies, bem como rastreamento dos sorotipos predominantes, visando implantao de medidas preventivas ou de controle (HOFER et al., 1997). As bactrias do gnero Salmonella pertencentes famlia Enterobacteraceae, so bastonetes Gram negativos, intracelulares facultativos, aerbicos ou anaerbicos facultativos, no esporulados, geralmente mveis por possurem flagelos na sua maioria. A S. pullorum e a S. gallinarum esto entre as poucas que no possuem flagelos, e, portanto, so imveis. Crescem em temperatura de 35 - 43C (extremos de 5 a 45C) e prolifera em pH entre 7.0 e 7.5 (extremos de 3,8 9,5), formam gs a partir da glicose, excetuando-se os sorovares S. gallinarum e S. pullorum. Apresentam ainda, como caractersticas metablicas bem definidas a capacidade de descarboxilao da lisina, produo de gs sulfdrico e utilizao do citrato como nica fonte de carbono. Essas reaes bioqumicas so importantes para a caracterizao do gnero e diferenciao de alguns biotipos. As substncias que so fermentadas com ou sem a produo de gs so a arabinose, glicose, galactose, levulose, manitol, manose, ramnose e xilose. No so fermentados o adonitol, dextrina, dulcitol, eritrol, glicerol, inositol, inulina, lactose, rafinose, sacarose, salicina, sorbitol e amido. A Salmonella cresce em caldo nutriente simples e nos meios seletivos, caldo ou gar, para enterobactrias (BERCHIERI e MACARI, 2000; RODRIGUES, 2005a).

Figura 1- Salmonella. typhimurium visto em microscpio. Sua nomenclatura, baseada na homologia do DNA efetivou a incluso do gnero Arizona e atualmente, com base em caractersticas fenotpicas, o gnero dividido em duas espcies e seis subespcies ou subgnero. Em cada subespcie reconhecido diferente nmero de sorovares tendo por base a caracterizao de seus antgenos somticos (O) e flagelares (H), perfazendo atualmente, mais de 2.500 sorovares. Entre as espcies, a subespcie S. enterica apresenta maior nmero de sorovares, sendo responsvel por 99% dos isolamentos do gnero, usualmente de animais de sangue quente (RODRIGUES, 2005a).

Famlia: Enterobacteriaceae Gnero: Salmonella Espcies: enterica e bogori Principais subespcies de Salmonella enterica: Grupo I: Salmonella enterica subespcie enterica (1478 sorovares) S. enterica subespcie pullorum S. enterica subespcie gallinarum S. enterica subespcie typhimurium S. enterica subespcie enteritidis Grupo II: Salmonella enterica subespcie salamae (498 sorovares) Grupo III A: Salmonella enterica subespcie arizonae (94 sorovares) Grupo III B: Salmonella enterica subespcie diarizonae (327 sorovares) Grupo IV: Salmonella enterica subespcie houtenae (71 sorovares) Grupo V: Salmonella enterica subespcie indica (12 sorovares) A Salmonella pode permanecer vivel no material fecal por longo perodo (anos), particularmente em fezes secas, podendo resistir mais de 28 meses nas fezes de aves, 30 meses em fezes bovinas, 280 dias no solo cultivado e 120 dias na pastagem, sendo ainda encontrada em efluentes de gua, de esgoto, como resultado de contaminao fecal. Pode ser destruda pelo calor, 55C por uma hora e 60C por quinze minutos, raios ultravioleta, estmulos eltricos e desinfetantes. Os desinfetantes mais utilizados nas carcaas so perxido de hidrognio, cido actico/ltico e cloro. Nas incubadoras, so utilizados formoldedo, perxido de hidrognio, polihexametileno, biguamida e nas instalaes, fenis, amnia, glutaraldedo, iodo e formoldedo (BERCHIERI e MACARI, 2000; QUEIROZ, 2002; RODRIGUES, 2005a). Certos processos como a salmoura (9,0 % de sal) e o defumado tm um efeito limitado na sobrevivncia das salmonelas. Tem sido observado que estas bactrias podem sobreviver por vrios meses na salmoura com cerca de 20% de sal, cujos produtos tm elevado teor protico ou de gordura. Na carne seca defumada bem como em pescado, podem sobreviver por vrias semanas a meses. A relativa resistncia que estes microrganismos apresentam dessecao, congelamento, salmoura, defumao, explica porque sobrevivem em muitas classes de alimentos (RODRIGUES, 2005a). 3.1. PULOROSE A pulorose constitui-se em uma doena comum em aves jovens, nos primeiros dias de vida, com diarria branca e alta mortalidade e a transmisso vertical a sua principal via de disseminao. A enfermidade causada por S. pullorum foi chamada de septicemia fatal dos pintinhos e posteriormente, diarria branca bacilar, para distingu-la de outras enfermidades caracterizadas por diarria branca. No

incio dos anos trinta, a mortalidade podia atingir at cem por cento das aves, constatando-se a importncia da transmisso vertical do agente. Observou-se tambm a persistncia da bactria em aves que resistiram doena. O desenvolvimento do teste de aglutinao em tubos para detectar aves portadoras foi um marco na preveno da pulorose. Este teste, quando realizado em cem por cento do plantel no incio da vida reprodutiva, atinge sucesso praticamente total (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.1.1. Histrico Em relao histria da pulorose, ela se confunde com o desenvolvimento da Avicultura Industrial. O incio da incubao artificial foi atrapalhado pela ocorrncia dessa enfermidade, que prejudicava a incubao, provocava alta mortalidade entre os pintinhos e muita refugagem. Atravs do processo de incubao artificial, de ovos de aves diferentes, o agente da pulorose foi sendo transferido para outras aves de interesse econmico como perus. Para viabilizar a incubao artificial, em escala industrial, foi preciso buscar mtodos de controle da pulorose. Entre vrias medidas de preveno baseadas em higiene e limpeza, a mais importante foi o desenvolvimento, na dcada de 20, de uma prova sorolgica de aglutinao que permitia identificar aves portadoras. Aps 1930, verificou-se que o teste poderia ser feito com sangue total, tornando-o factvel em larga escala. Assim, com o teste sendo realizado nos plantis reprodutores, foi possvel controlar a pulorose. At hoje, o mtodo de aglutinao rpida em placa com sangue total, realizado em 100% do lote de aves reprodutoras, um instrumento imprescindvel para se controlar a pulorose em avicultura industrial (BERCHIERI e MACARI, 2000). No Brasil, embora a pulorose aparentemente esteja sob controle, diversos casos foram diagnosticados nas dcadas de 80 e 90, incluindo-se a a presena de uma cepa com comportamento bioqumico atpico. De um modo geral, em criaes de aves em que se utiliza a incubao artificial, como galinhas, perus e codornas, preciso estar atento a esta patologia (RODRIGUES, 2005a). 3.1.2. Etiologia A composio antignica da poro polissacardica dos lipopolissacardeos (LPS), em parte, determina a espcie. O tipo e a quantidade de acares associados a ligaes entre eles caracterizam os determinantes antignicos, compreendendo os antgenos O (HIRSH e ZEE, 1999). Conforme Berchieri e Macari (2000), a Salmonella pullorum pertence ao grupo D, contendo os antgenos somticos (O) 1, 9 e 12, e no contm antgenos flagelares, sendo que o antgeno 12 apresenta variaes (121, 122, 123 ). As cepas padres contm grande quantidade de antgenos 123 e pequena do 122, e so melhores no preparo de antgenos para o teste de pulorose em placa. O crescimento de S. pullorum lento e as colnias so pequenas, apresentando dimetro entre 1 e 4 mm. Plasmdeos de vrios tamanhos foram associados virulncia em salmonela, denominados

plasmdeos de virulncia de Salmonella (plasmdeo Spv). Alguns desses genes (genes Spv) transportados por tais plasmdeos so necessrios para o crescimento da bactria dentro dos macrfagos e o regulador transcricional, SlyA (de salmolysin salmolisina) responsvel pela sobrevivncia intracelular nessa clula de defesa. Outros genes nesses plasmdeos so responsveis por resistncia srica e podem estar envolvidos com aderncia e invaso da clula-alvo (HIRSH e ZEE, 1999). 3.1.3. Epidemiologia As primeiras ocorrncias de pulorose foram identificadas nos Estados Unidos da Amrica com surtos posteriores em vrios outros pases, inclusive o Brasil. Supe-se que a disseminao da S. pullorum tenha sido favorecida pela exportao de aves dos EUA para outros pases. A doena quase foi eliminada entre os plantis americanos, graas a um programa de teste de acasalamento no avirio, mas a pulorose ainda ocorre com nmeros inexpressivos (HIRSH e ZEE, 1999). As galinhas so os hospedeiros naturais para S. pullorum, no entanto outras aves podem ser acometidas pela pulorose, tais como perus, pardais, codornas e papagaios. As linhagens de matrizes leves so mais resistentes enfermidade do que as matrizes pesadas. Foi diagnosticado infeco, natural e artificialmente, pulorose em chipanzs, coelhos, cobaios, sunos, ces, bovinos e ratos selvagens (BERCHIERI e MACARI, 2000). As aves so mais susceptveis no incio da vida, ocorrendo geralmente nas duas ou trs primeiras semanas de idade, apresentando elevada taxa de mortalidade e perodo de incubao de dois a seis dias. Pode ocorrer em aves adultas, em escala muito menor. Os animais sobreviventes, que resistem a doena, tornam-se portadores assintomticos e crescem dentro dos parmetros zootcnicos esperados, produzindo ovos contaminados. difcil detectar um portador assintomtico, porque esses eliminam apenas periodicamente o agente atravs das fezes (BEER; HIRSH e ZEE, 1999). Nos pintinhos ocorrem elevadas perdas quando as condies higinicas so desfavorveis. Mas tambm tm importncia econmica as perdas que ocorrem nas populaes reprodutoras e galinhas poedeiras com infeco inaparente, resultando em diminuio da postura. O prognstico, porm favorvel, pois as aves recuperam-se e a mortalidade baixa (BEER, 1999). 3.1.4. Patogenia A transmisso pode ocorrer por vrias vias, sendo a mais importante, a transovariana, pois a bactria capaz de infectar o vulo de perus e galinhas, assim o embrio j est infectado quando o ovo incubado. O ambiente de incubao contaminado aps a postura de um ovo infectado, resultando em infeco para outras galinhas e aves (HIRSH e ZEE, 1999). A transmisso no incubatrio pode ser tanto pela penugem dos pintinhos que transportam os microrganismos, quanto por equipamentos no

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desinfectados de uso direto nas aves. A S. pullorum, pode ser disseminada atravs dos ovos, durante meses (MORENG e AVNS, 1990; BEER, 1999). O agente da pulorose tambm pode ser eliminado pelas fezes de aves doentes e a transmisso pode ocorrer via alimento, gua e cama contaminados. Outras vias de transmisso so o canibalismo de aves infectadas, ingesto de ovos contaminados e orifcio na pele. De forma mecnica, as pessoas que visitam ou que trabalham em granjas, aves e outros animais silvestres, animais de estimao e moscas so importantes disseminadores desse agente. O uso de antimicrobianos nos primeiros dias de vida pode mascarar o quadro da doena nesse perodo e favorecer o estado de portador, porm, reduz a mortalidade em avirios infectados (BERCHIERI e MACARI, 2000). Por mais rgido que seja o programa de desinfeco no incubatrio, no se consegue deter a transmisso transovariana (HIRSH e ZEE, 1999). 3.1.5. Sinais Clnicos e Leses Os pintinhos mortos ou moribundos podem ser observados no incubatrio ou logo aps o nascimento, apresentando ou no sinais e sintomas. Alguns apresentam sonolncia, fraqueza, perda de apetite, retardo no crescimento, amontoamento, material branco ao redor da cloaca, conseqncia da diarria branca a branco-amarelada, febre de at 42C e cianose, seguida ou no de morte. J outros, demostram cansao, amontoamento ao redor da fonte de aquecimento, ficam com as penas arrepiadas, asas cadas, aspecto ruim e o comprometimento dos pulmes torna a respirao difcil (DOMINGUES e LANGONI, 2001). Os sacos vitelneos contm gema parcialmente absorvida e material caseoso. Cegueira e claudicao, devido inflamao das articulaes tbio-trsica e mero-radial e sinovite, so sintomas observados com menor freqncia (LANA, 2000). As aves que sobrevivem podem apresentar problemas de empenamento e retardo de crescimento. Os animais que apresentam enfermidade podem ter desenvolvimento abaixo dos padres considerados normais, mas muitas das aves que resistiram doena, de vida longa, conseguem recuperar o desenvolvimento esperado para os padres da linhagem (BERCHIERI e MACARI, 2000). Os sintomas em aves adultas nem sempre so evidentes ou quando so poucas as aves acometidas, torna-se difcil o diagnstico da doena. As aves acometidas podem apresentar postura abaixo da curva normal para a linhagem. Surtos em aves adultas iniciam-se com queda no consumo de rao, penas arrepiadas e crista plida e retrada. A infeco por S. pullorum provoca queda de postura, diminuio na fertilidade e eclodibilidade de 2 a 18 por cento. No entanto, a percepo desses sinais estar na dependncia da quantidade de aves afetadas, podendo passar desapercebido. Os animais tambm podero apresentar depresso e desidratao (LANA, 2000). A doena mais severa em aves recm-nascidas, e produz as mais altas perdas nas primeiras duas semanas de vida, com morbidade sempre maior que mortalidade. Aves infectadas aps cinco a sete dias de idade, apresentam sintomatologia clnica e podem se recuperar posteriormente. Nas aves em

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crescimento e adultas, a morbidade menor, assim como a taxa de mortalidade (HIRSH e ZEE, 1999). Nos casos superagudos, no se consegue notar alteraes anatomopatolgicas nas aves jovens que sucumbem. Nos casos agudos, nota-se aumento de volume e congesto do fgado, bao e rins. O fgado apresenta-se hipertrofiado, bordos arredondados com pontos brancos, hemorragias e necrose focal. O saco da gema nem sempre est alterado, e quando est, observa-se a falta de absoro, estando o seu contedo de consistncia cremosa ou caseosa, em at 60 horas. Aves com dificuldade respiratria podem apresentar ndulos branco-amarelados nos pulmes, pncreas, trato digestivo e msculo cardaco, de modo a alterar a forma do msculo. O pericrdio pode estar espessado e conter exsudato amarelado ou fibrinoso. Ndulos similares podem aparecer na musculatura da moela, e ocasionalmente, na parede do duodeno e cecos, podendo conter material caseoso no seu interior. Aves com problemas articulares contm fludo amarelo viscoso nas articulaes. Outras alteraes so congesto dos rgos internos, presena de lquido viscoso no peritnio (peritonite), espessamento da parede intestinal e exsudao na cmara anterior do olho (QUEIROZ, 2002). Nas aves adultas as leses anatomopatolgicas podem ser mnimas e as alteraes mais comuns so folculos csticos, hemorrgicos, atrofiados, com contorno irregular e material caseoso, ou necrosado em seu interior. Podem ocorrer atrofia de ovrio e presena de massas encapsuladas dentro da cavidade abdominal, em conseqncia de postura intra-abdominal. Peritonite fibrinosa e peri-hepatite podem ocorrer sem o envolvimento do trato reprodutivo. Alteraes no pericrdio, epicrdio e fludo pericrdico podem estar levemente opacos e o fludo pericrdico aumentado e turvo, indicando uma pericardite. O processo dessas alteraes leva ao espessamento do pericrdio e aumento do fludo, contendo material exsudativo. Ndulos branco-amarelados surgem no msculo cardaco, como acontece com as aves jovens (Figura 2). Pontos esbranquiados ou ndulos ocorrem nos testculos. Pequenos cistos contendo material caseoso, de cor parda, podem aparecer na gordura abdominal, moela, intestinos e pncreas. Pulmes e sacos areos apresentam granulomas com contedo caseoso. As aves com alteraes cardacas e ovarianas no precisam necessariamente apresentar sinais de enfermidade, sendo detectadas somente em programas de monitoria sorolgica, seguidos de exame anatomopatolgico (BERCHIERI e MACARI, 2000). Nas alteraes microscpicas, dos casos superagudos, observam-se apenas severas congestes vasculares em vrios rgos, como fgado, bao e rins. Nos casos agudos e subagudos, ocorre necrose multifocal de hepatcitos, com acmulo de fibrina e infiltrado heteroflico. Nota-se infiltrado de linfcitos e plasmcitos no espao periportal. Nos casos crnicos, especialmente quando h ndulos no corao, o fgado tem congesto crnica passiva com fibrose intersticial. Nos casos agudos, o bao apresenta congesto severa ou exsudao fibrinosa dos sinusides e mais tarde, severa hiperplasia do sistema de clulas fagocitrias mononucleares. Nos cecos de aves jovens, h extensiva necrose da mucosa e submucosa, com o lmen contendo debris celulares necrosados, misturados com fibrina (CARTON e MCGAVIN, 1998).

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Figura 2 - Ndulos branco-amarelados no corao causado por Salmonella. As alteraes microscpicas mais caractersticas esto no corao e na moela. No corao, existe necrose das miofibras com infiltrado de heterfilos, linfcitos e plasmcitos. Essas clulas so substitudas por grande quantidade de clulas com aparncia similar do histicito. Esse processo pode surgir na moela e no pncreas, o qual tem destruda a sua arquitetura nos casos severos, ocorrendo degenerao das fibras musculares. Ocorre tambm, serosites no pericrdio, pleuroperitneo e trato intestinal. Nos casos agudos, observam-se, nessas leses, heterfilos e fibrina, mas nos estgios tardios, encontram-se apenas linfcitos, plasmcitos e clulas histicitas (BERCHIERI e MACARI, 2000). As alteraes microscpicas do ovrio variam de inflamao supurada fibrinosa a severa inflamao piogranulomatosa dos vulos, caracterizada pela infiltrao de heterfilos, misturada com fibrina e colnias bacterianas no material coagulado, ou seja, na gema, circundada por sucessivas camadas de clulas gigantes e uma mistura de clulas inflamatrias, incluindo macrfagos, plasmcitos, heterfilos e linfcitos. Nos machos observa-se uma inflamao das clulas epiteliais dos tbulos seminferos, com degenerao, necrose e orquite. Outras alteraes como bronquite catarral, enterite catarral e inflamao intersticial dos rins e pulmes podem acontecer, porm com menor freqncia (QUEIROZ, 2002). 3.1.6. Imunidade A imunidade Salmonella aviria pouco conhecida. Aves infectadas aos quatro dias de idade produzem aglutininas aps vinte a quarenta dias, mas aves adultas produzem aglutininas trs a dez dias aps a infeco. A produo mxima de anticorpos observada cem dias ps-infeco. No se conhece a ao de aglutininas sobre S. pullorum durante o curso da infeco. Provavelmente, a imunidade contra salmoneloses em aves depende da imunidade celular e no do sistema humoral. A relao parasito-

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hospedeiro entre a Salmonella e a ave indicam a dependncia dos microrganismos sobreviverem e se multiplicarem em clulas do sistema reticuloendotelial (BERCHIERI e MACARI, 2000). Conforme Berchieri e Macari (2000), a presena de aglutininas no evita a presena de S. pullorum em rgos com bao, fgado, corao e ovrios, nem mesmo a transmisso transovariana, meses aps a infeco em aves com cinco a sete dias de idade. 3.1.7. Diagnstico O diagnstico baseia-se na associao da anamnese, achados clnicos, anatomopatolgicos e exames laboratoriais. Para confirmar o diagnstico, so feitos testes sorolgicos, como ensaio imunoenzimtico (ELISA) e soroaglutinao em placa com antgeno colorido para pulorose. As aves reagentes positivas devem ser submetidas a exame bacteriolgico. O material para anlise bacteriolgico pode ser colhido do bao, fgado, ovrios, corao, contedo intestinal e saco da gema, no entanto, os exames de bao, fgado e ovrios so os mais importantes (BERCHIERI e MACARI, 2000). A amostra, em swab ou fragmentos, podem ser cultivados em placa contendo agar (Figura 3), ou ser inoculada em caldo Selenito ou Tetrationato. Os meios mais comuns para plaqueamento podem ser o gar Verde Brilhante, o gar Mac Conkey e o gar Enteric Hecktoen. O caldo deve ser plaqueado, resultando geralmente em colnias pequenas e as placas devem ser incubadas a 37 a 42 C por 24 horas. So realizados, tambm, testes bioqumicos de rotina, que geralmente so executados a 37C por 24 horas (CARTER e COLE, 1990; QUINN et al., 1994).

Figura 3 Salmonella em meio de cultura.

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A confirmao da espcie de Salmonella assegurada por testes complementares com soros polivalentes anti-antgenos somticos (O), que so polissacardeos termoestveis localizados na parede celular, e anti-antgenos flagelares (H), protenas termolbeis localizados nos flagelos peritrquios. A definio dos sorotipos e biotipos obtida com a realizao de provas sorolgicas com soro anti-antgenos O e H individuais e provas bioqumicas complementares. O sorotipo a combinao dos anti-antgenos O e H. Para sorologia em laboratrio, a partir de cultura pura em gar nutriente, faz-se a sorologia em placa ou lmina (CARTER e COLE, 1990; QUINN et al., 1994). O teste mais utilizado soroaglutinao rpida em placa, realizado com antgeno colorido e sangue total. Esse teste bastante prtico e pode ser realizado na prpria granja. Podem ser adotados tambm os testes de soroaglutinao lenta em tubos e microaglutinao. O ELISA detecta portadores de respostas sorolgicas ao agente da pulorose e tifo avirio. Esses testes podem apresentar respostas falso positivos ou positivos a outras Salmonellas, especialmente s do mesmo grupo da S. pullorum e S. gallinarum, alm de ser um teste dispendioso. O diagnstico definitivo deve ser obtido com o isolamento e identificao do agente (CARTER e COLE, 1990; QUINN et al., 1994). As aves, at a terceira semana de idade, esto sujeitas s enfermidades como encefalomielite aviria, aspergilose, colibacilose e outras salmoneloses. A preocupao com as diversas doenas devido ao perodo de ocorrncia. Uma anlise mais detalhada auxilia nas investigaes, e a definio do diagnstico obtida com exames laboratoriais, compreendendo o isolamento e identificao da Salmonella. Em aves adultas, o diagnstico diferencial deve ser feito contra a doena de MareK e outras enfermidades septicemicas, como tifo avirio, paratifo avirio, pasteurelose e colibacilose. A pulorose em lotes de aves adultas pode ser confundida com o tifo avirio (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.1.8. Tratamento O uso de agentes antimicrobianos controverso. Alguns estudos demostram que antimicrobianos no alteram o curso da doena. Adicionalmente, existe evidncia de que antibiticos promovem o estado de portador e selecionam cepas resistentes, por esses motivos, qualquer uso de antimicrobianos deve ser precedido de antibiograma. Defensores do uso de antibiticos recomendam as sulfonamidas, nitrofuranos e cloranfenicol, que so drogas que atuam sobre Salmonella. Os dois ltimos frmacos, passaram a ser proibidos de acordo com a portaria n 448/98. As sulfonamidas podem reduzir a ingesto de gua e alimento, alm de prejudicar o desenvolvimento da ave e a produo de ovos. As sulfas incluem sulfadiazina, sulfamerazina, sulfatiazol e sulfaquinoxalina. O uso desses medicamentos diminui a mortalidade, quando utilizados nas duas primeiras semanas de idade, no entanto ela volta a ocorrer aps a retirada dos mesmos. Os nitrofuranos, assim como as sulfas, reduzem a mortalidade, mas no impedem a morte de aves infectadas (HIRSH e ZEE, 1999). O cloranfenicol, a clortetraciclina e apramicina, tambm so indicados para reduzir a mortalidade.

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A pulverizao de ovos, antes da incubao, com sulfato de neomicina foi sugerida para reduzir os efeitos da pulorose em aves recm-nascidas (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.1.9. Controle e Profilaxia A diferenciao do diagnstico entre salmoneloses, identificando-se o sorotipo, fundamental para a elaborao do programa de controle e combate. Os conceitos sobre medidas gerais de manejo e profilaxia so instrumentos indispensveis para preveno de enfermidades infecciosas na avicultura industrial, inclusive para o controle da pulorose. Alm de cuidados direcionados a todas as etapas das operaes avcolas, tais como: pisos impermeveis, de preferncia de concreto, com declive de 2%, para permitir o fcil escoamento e drenagem da gua de lavagem; utilizao de cortinas, para o controle da ventilao, da temperatura interna e proteo s chuvas fortes e outras intempries; desinfeco dos calados e pneus dos veculos utilizando-se pedilvio e rodolvio respectivamente; deve-se fazer vazio sanitrio com perodo de 10 dias, no permitindo nesse intervalo trnsito de pessoas e de outros animais no interior do galpo; uso de fossas sanitrias ou incineradores para o destino adequado de aves mortas, e a esterqueira para o armazenamento dos dejetos como a cama dos animais (BERCHIERI e MACARI, 2000; DOMINGUES e LANGONI, 2001). Para prevenir a pulorose preciso ateno com as granjas reprodutoras e incubatrios. de fundamental importncia, a limpeza dos pisos, paredes e equipamentos com soluo desinfetante, higiene nas instalaes, desinfeco dos equipamentos com formol a 5%, controle de roedores, moscas e pssaros. Os animais mortos devem ser removidos o mais depressa possvel dos galpes, evitando-se dessa forma a contaminao da cama (DOMINGUES e LANGONI, 2001). Alm de todas essas medidas, o teste de pulorose, no incio de postura, em 100% das aves, tem se mostrado importante instrumento de preveno da transmisso vertical e considerado o principal responsvel pelo sucesso no controle da doena (BERCHIERI e MACARI, 2000). As reprodutoras soro positivas, no teste da pulorose, devem ser eliminadas, pois, no perodo da postura, certamente, o embrio ser infectado. Para os demais avirios infectados, pode-se fazer o tratamento com agentes antimicrobianos, principalmente com sulfonamidas, reduzindo dessa forma a mortalidade (HIRSH e ZEE, 1999). Havendo surtos, o controle poder ser feito utilizando-se quimioterpicos como a furazolidona massal na rao das aves (DOMINGUES e LANGONI, 2001). 3.2. TIFO AVIRIO O tifo avirio, embora seja causado por uma Salmonella muito semelhante ao agente da pulorose, apresenta uma relao parasito-hospedeiro com a ave, bastante diferente. A S. gallinarum altamente patognica para aves em qualquer idade. No entanto a sua ocorrncia mais comum entre aves adultas. A mortalidade provocada pelo tifo avirio pode chegar a 40 - 80% do plantel. Observa-se que algumas aves

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adoecem e acabam morrendo em 7 a 14 dias. Esse processo contnuo, e aos poucos, vai acometendo as aves do plantel, tendo-se no final, mortalidade dentro dos parmetros acima mencionados. Muitas vezes, a morte decorrente da enfermidade e de intoxicao pelos medicamentos usados para combat-la (HIRSH e ZEE,1999). 3.2.1. Histrico O tifo avirio foi reconhecido inicialmente na Inglaterra, no final do sculo passado. uma doena considerada de pases em desenvolvimento. Nos Estados Unidos da Amrica, tem sido considerada sob controle, e esse resultado deve-se a um plano nacional de preveno de enfermidades avcolas, com destaque para o controle de salmoneloses. Parte importante desse plano refere-se eliminao de aves contaminadas, a adoo de provas sorolgicas, pesquisa e identificao do sorotipo de Salmonella atravs de exames bacteriolgicos somados a medidas de limpeza, desinfeco e higiene (BERCHIERI e MACARI, 2000). Na Europa, o tifo avirio foi notificado no incio dos anos 90. No Mxico, onde adota-se tambm programas de vacinao para prevenir o tifo avirio, e na Amrica do Sul, a enfermidade tem sido observada. No Brasil, tem sido diagnosticada em reas de explorao de aves de postura comercial, mas tambm pode ocorrer em aves reprodutoras (para corte e postura) (SONCINI, 2001). O tifo avirio tem sido descrito em pases cuja Avicultura Industrial est em desenvolvimento e naqueles onde so encontradas aves criadas livremente. A primeira descrio do tifo avirio ocorreu em 1888, na Inglaterra, quando a enfermidade acometeu quatrocentas aves, matando duzentas em dois meses e foi confundida com a clera aviria. Em 1889, em um estudo realizado, ao isolar o agente causador da doena, observou-se que se tratava de outro microrganismo. O bao e o fgado estavam aumentados de tamanho. Foram isolados bacilos do sangue de aves doentes, eram Gram negativos, imveis e seu cultivo era fcil. As aves inoculadas por via subcutnea adoeciam em cinco a seis dias em morriam dois a trs dias depois. A denominao de tifo avirio deu-se devido sua similaridade com a febre tifide humana e tambm para diferenci-la da clera aviria. No Brasil, os primeiros registros de tifo avirio foram em 1919, em Minas Gerais e em 1939, em So Paulo (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.2.2. Etiologia A S. gallinarum o agente do tifo avirio. Trata-se de um bacilo Gram negativo, imvel, com caractersticas muito semelhantes S. pullorum. Na sorologia bsica para identificao do sorotipo, ambas so indistinguveis, apresentando diferenas apenas nas provas bioqumicas (Quadro 1).

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Tabela 1 - Diferenas bioqumicas entre Salmonella gallinarum e Salmonella pullorum. S. gallinarum S. pullorum

Dulcitol

Fermenta (+)

No fermenta (-)

Ornitina (ODC)

No descarboxila (-)

Descarboxila rapidamente (+)

Fonte: Berchieri e Macari, 2000. Essas provas so consideradas importantes na diferenciao dos biotipos, contudo cepas com comportamentos fora desses padres foram isoladas. Cepas de S. pullorum ODC foram isoladas de aves de postura comercial. O comportamento bioqumico de S. gallinarum muito semelhante ao de S. pullorum, com exceo dos testes mencionados anteriormente. A configurao antignica de S. gallinarum semelhante de S. pullorum, apresentando os antgenos somticos (O) 1, 9 e 12 (BERCHIERI e BARROW, 1995). A virulncia da S. gallinarum est relacionada com a composio do LPS (antgenos somticos) e com presena de plasmdeos, sendo que cepas com o LPS alterado diminuem a virulncia, mesmo tendo esses plasmdeos. Outros fatores de virulncia, como a produo de toxinas e a presena de fmbrias, parecem no ter importncia na patogenicidade da S. gallinarum para as aves (HIRSH e ZEE, 1999). 3.2.3. Epidemiologia uma enfermidade de distribuio mundial que tem estado sob controle em pases da Europa e Amrica do Norte. Mesmo assim, essa doena tem ocorrido em pases da Europa, tais como Alemanha e Dinamarca. Na Amrica do Sul, ocorrem em vrios pases, entre os quais, Argentina e Brasil. No Brasil, tem ocorrido em alguns perodos com maior intensidade, como aconteceu nos anos 80 e incio dos anos 90. Os relatos so mais comuns em granjas de postura comercial, embora o tifo avirio possa ocorrer entre aves reprodutoras para corte e postura comercial, patos, perus, codornas, gansos e faises adultos (QUEIROZ, 2002). As galinhas so os hospedeiros naturais do agente do tifo avirio, mas outras aves tambm so consideradas susceptveis. As linhagens leves so consideradas mais resistentes, enquanto as pesadas so consideradas susceptveis doena. Embora o tifo avirio seja mais comumente descrito em aves adultas, a enfermidade pode acometer aves em qualquer idade da vida, provocando alta mortalidade. A doena em

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aves jovens pode ser confundida com a pulorose. A S. gallinarum foi isolada de outros animais, como roedores, chimpanzs, raposas, coelhos e cobaias (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.2.4. Patogenia A transmisso pode ser vertical (transovariana) ou horizontal, por diversas vias. A bactria pode se disseminar por todo o corpo do animal durante a fase final da doena, quando a ave est quase morrendo. O contato entre ave doente e ave sadia, canibalismo e presena de aves mortas na granja so fatores importantes na transmisso do tifo avirio. A falta de higiene, presena de moscas, pssaros e roedores podem contribuir para disseminar o agente em propriedades avcolas. Veculos que transportam aves, esterco e ovos tambm participam como meios eficientes de disseminao da bactria, especialmente aqueles que entram em vrias granjas sem lavagem e desinfeco prvia. Pessoas que trabalham em granjas, ou que transitam em propriedades avcolas, tambm podem atuar como elementos de disseminao do agente do tifo avirio (QUEIROZ, 2002). 3.2.5. Sinais Clnicos e Leses Os sinais clnicos geralmente so observados em aves adultas. Elas ficam quietas, prostradas, deitadas, no se alimentam, apresentam diarria amarelo-esverdeada, queda de postura e morrem em poucos dias. O curso da doena geralmente de cinco a sete dias, mas pode ser mais longo. A morbidade e mortalidade podem ser altas, e a mortalidade varia de dez a oitenta por cento, podendo ser ainda mais elevada. Em lotes infectados pelo tifo avirio, a mortalidade no ocorre em todas as aves de uma s vez. Algumas ficam doentes e morrem, enquanto outras esto sendo infectadas e outras ainda esto sadias, at acometer uma grande porcentagem do lote. Quando a enfermidade acomete aves jovens, o quadro poder ser confundido com a pulorose, sendo diferenciado somente aps o isolamento e identificao do agente (BERCHIERI e MACARI, 2000). O tifo avirio possui caractersticas de septicemia e toxemia. Ocorre congesto dos rgos internos e anemia provocada pela destruio de hemcias pelo sistema retculo-endotelial. Nos quadros agudos, as alteraes anatomopatolgicas no so proeminentes. O fgado e bao aumentam de tamanho trs a quatro vezes. O fgado torna-se frivel, esverdeado (bronzeado) a amarelo-esverdeado, com pequenos focos necrticos ou esbranquiados e hemorrgicos. A vescula biliar fica distendida, em funo do aumento de volume da bile. Aparecem pontos necrticos no corao e bao, e podem ser notados tambm pontos hemorrgicos. Quando os casos das enfermidades so mais longos, observa-se no corao, bao, pulmes, rins, moela, pncreas, duodeno e ceco, a presena de processos inflamatrios, formando ndulos esbranquiados semelhantes aos descritos na pulorose. Pode ocorrer peritonite e enterite catarral nas aves. O processo inflamatrio no corao poder atingir o pericrdio, que se tornar opaco, assim como o lquido

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do saco pericrdico (pericardite). Os rins podem estar amarelados e o ovrio atrofiado, ou com os folculos ovarianos hemorrgicos, murchos, congestos, csticos, csticos, disformes, contendo material caseoso ou hemorrgico no seu interior, como ocorre na pulorose (Figura 4). As aves de linhagens leves, que so consideradas resistentes ao tifo avirio, podem apresentar a enfermidade clnica (QUEIROZ, 2002). 3.2.6. Imunidade A imunidade da ave contra o agente do tifo avirio pouco conhecida, de tal maneira que a presena de aglutininas no significa proteo, embora os anticorpos participem do processo de eliminao de S. gallinarum pela ave. O controle tem sido atribudo at ao sistema retculo-endotelial. endotelial. Durante a fase aguda da infeco, ocorre a reao antgeno-anticorpo, antgeno anticorpo, podendo ocorrer um tipo de reao anafiltica de hipersensibilidade, que poderia resultar em sintomatologia e morte, e esse fato explica a anemia das aves (BERCHIERI e MACARI, 2000).

Figura 4 - Folculos ovarianos degenerados, congestos e disformes.

3.2.7. Diagnstico O diagnstico, como para a pulorose, baseado na anamnese, achados clnicos,

anatomopatolgicos e exames laboratoriais. As provas sorolgicas que detectam anticorpos antianti S. gallinarum so os teste de pulorose e soroaglutinao lenta. Os resultados confundem aves infectadas por S. pullorum, ou por outra Salmonella que possuam antgenos em comum, como aquelas do grupo D. O test teste imunoenzimtico (ELISA) pode apresentar resultados mais especficos, mas sem diferenciar a resposta

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entre as aves infectadas por S. gallinarum ou S. pullorum. O procedimento bacteriolgico o mesmo adotado para S. pullorum. O comportamento dos dois agentes muito similar, pois produzem colnias pequenas em meios seletivos. Em gar, S. pullorum produz colnias menores que S. gallinarum, e produzem pouco H2S em gar TSI. Os rgos para realizao do teste so os mesmos utilizados para o agente da pulorose, principalmente bao, fgado, ovrios e corao. O diagnstico bacteriolgico do tifo avirio se confunde com o da pulorose, em virtude da similaridade no comportamento bioqumico e na estrutura antignica dessas salmonelas (CARTER e COLE, 1990; HIRSH e ZEE, 1999). Com a melhoria do teste de aglutinao, adaptado para placa e com sangue total, o teste tornou-se prtico, podendo ser aplicado com bastante sucesso nas granjas de frango de corte e aves reprodutoras, possibilitando estabelecer um plano de controle para a doena (BERCHIERI e MACARI, 2000). Conforme a poca de ocorrncia e leses sistmicas, o diagnstico diferencial feito em relao s outras salmoneloses, colibacilose, pasteurelose, micoplasmose e doena de Marek. Mesmo considerando-se que o quadro seja o tifo avirio, o diagnstico somente poder ser confirmado com isolamento e identificao do agente (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.2.8. Tratamento O tratamento do tifo segue as mesmas recomendaes para o tratamento da pulorose. Em vista da enfermidade ser mais comum em aves adultas, e a mortalidade persistir por perodos prolongados, necessrio prevenir a intoxicao das aves com a administrao prolongada de antimicrobianos, sendo que o antibitico deve ser selecionado de acordo com a sensibilidade do agente e a localizao da infeco. A melhor maneira para complementar a medicao adotar medidas de higiene eficazes, eliminao rpida e correta de aves mortas (TRABULSI, 1996; LANA, 2000). 3.2.9. Controle e Profilaxia A melhor maneira para prevenir as enfermidades, incluir nas atividades, um programa eficaz baseado na limpeza, higiene e desinfeco da granja. Deve-se fazer, duas vezes por semana, uma perfeita limpeza e desinfeco dos ninhos e dos galpes, com pulverizaes de dixido de cloro ou outros desinfetantes inofensivos s aves. Coleta e imediata separao dos ovos sujos, fumigao dos ovos limpos, armazenamento adequado dos ovos frteis e, principalmente, eliminao de aves reagentes, ou seja, aquelas portadoras de Salmonella spp. Deve-se ter cuidado com os dejetos, armazenando-os em esterqueiras. Evitar gua parada, para isso, importante que o piso tenha declividade para melhor drenagem da mesma. Destino correto e rpido dos animais mortos, podendo ser incinerados ou colocados em fossas sanitrias. Os veculos que transportam as aves, rao e suas matrias-primas tambm devem ser desinfetados. Alm de todas essas medidas, deve-se evitar qualquer contato das aves com roedores,

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mosquitos, pssaros, podendo utilizar telas metlicas, com malhas de meia polegada, para evitar a entrada desses animais. Deve-se tambm evitar a criao em um mesmo lote de diferentes faixas etrias (DOMINGUES e LANGONI, 2001). Alm das medidas gerais, que so imprescindveis para o controle do tifo avirio e da pulorose, esto disponveis vacinas inativadas e vivas contra o tifo avirio. As inativadas no conseguem apresentar resultados satisfatrios, embora promovam resposta intensa de anticorpos. As vacinas vivas constituem-se de cepas de S. gallinarum com patogenicidade atenuada. Essa vacina possui uma variante rugosa de S. gallinarum 9R, caracterizando-se pela induo de uma resposta imune, sem causar prejuzos severos economia animal (HIRSH e ZEE, 1999). Essa vacina tambm confere proteo s poedeiras contra Salmonella enteritidis (SILVA e DUARTE, 2002). Calnek et al., (1997), afirmam que a vacina 9R tem causado pouca proteo aos animais. Outras vacinas preparadas com cepas de S. gallinarum, modificadas geneticamente, no tm apresentado a mesma performance da vacina preparada com a cepa de S. gallinarum. O programa de vacinao no substitui as medidas gerais de controle, e em alguns casos, a vacinao pode desencadear o quadro da doena (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.3. PARATIFO AVIRIO O paratifo avirio, como j foi mencionado anteriormente, no tem um agente especfico, afetando uma gama de hospedeiros. Muitos sorotipos de Salmonella j foram isolados de aves com ou sem o quadro da enfermidade; e o mais comum a S. typhimurium, mas outros, entre os quais S. enteritidis, S. agona, S. infantis, S. hadar, S. senftenberg, S. heidelberg, foram identificados como agente etiolgicos do paratifo avirio. As aves jovens so mais susceptveis, e quando a enfermidade se desenvolve, o quadro passvel de confuso com a pulorose. A doena mais rara entre aves adultas, mas tambm pode ocorrer, e ser confundida com outras salmoneloses ou outras enfermidades bacterianas. Essas salmonelas no so especficas de galinhas, como tambm no so especficas de outras aves ou de outros animais, incluindose aqui mamferos e rpteis. So salmonelas que adaptam muito bem ao trato intestinal de galinha e perus, podendo persistir no trato entrico e serem eliminadas nas fezes por vrias semanas. Algumas, ainda do trato entrico, podem invadir a corrente circulatria e disseminar para vrios rgos como ovrio, bao, fgado e corao. Com a contaminao do aparelho reprodutor e da cloaca (fezes), o ovo poder ser contaminado, originando a transmisso vertical. A incubao de ovos infectados pode resultar em decrscimo na curva de nascimento, provocar o paratifo avirio entre os pintinhos recm-nascidos e por intermdio dos animais contaminados, disseminar a bactria em granjas (HIRSH e ZEE, 1999; BERCHIERI e MACARI, 2000). Na granja, outros animais e o homem podero se contaminar. Portanto a relao entre as salmonelas paratficas e as aves bastante complexa e difcil de combater. Mesmo em granjas que adotam o sistema de vazio sanitrio, o novo lote poder ser contaminado por transmisso horizontal atravs do meio

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ambiente, onde roedores assumem o papel de portador assintomtico, por longos perodos (mais que dez meses), disseminando incontrolavelmente, tais microrganismos entre diferentes reas e nas interespcie da infeco. Alm dos transtornos causados em funo do acometimento das aves, as salmonelas paratficas podero, atravs de alimentos de origem avcola, provocar toxinfeco alimentar em seres humanos (HIRSH e ZEE, 1999). 3.3.1. Histrico A primeira forte evidncia do envolvimento de Salmonella enteritidis (SE) com infeco oriunda do consumo de alimentos preparados com ovos ocorreu em grande surto em 1986, nos EUA, envolvendo massa comercial congelada. Esta massa foi recheada com uma mistura de queijo, condimentos esterilizados e ovos crus. O levantamento epidemiolgico levou ao isolamento de SE de vrias amostras oriundas das granjas que forneceram ovos, alm de outras espcies de Salmonella. A partir da, inmeros estudos vincularam os surtos de salmonelose por SE com o ovo tipo A, consumido mal cozido ou cru (SILVA e DUARTE, 1991). No Brasil, at o incio de 1990, a SE era apenas mais uma Salmonella raramente encontrada em infeces humanas. Entre 1975 e 1992, o fagotipo (FT) FT-8 de SE era o mais prevalente (81% das cepas de SE) nas amostras de fontes humanas e no humanas. A partir de 1993 houve uma exploso da ocorrncia de SE tanto de fontes humanas como no humanas. Nos anos de 1994 e 1995 foram identificadas 467 cepas de SE com uma total predominncia do FT- 4. A SE passou a corresponder a mais de 60% dos sorovares isolados pelo Instituto Adolfo Lutz (IAL). Havia uma perfeita sintonia entre os fagotipos encontrados nas infeces humanas e aqueles isolados de fontes no humanas. Aqui tambm eram os produtos avcolas os mais contaminados por SE (CORKISH et al., 1994). Os mesmos autores, afirmam ainda, que as primeiras deteces de SE em matrizes no Brasil ocorreram entre 1993 e 1994 e foram feitas em aves, normalmente adultas aps o pico de postura, reagentes no teste de pulorose enviadas para exames bacteriolgicos laboratoriais. Esse sorovar foi tambm, o que predominou entre 1994 e 1999 pelo laboratrio de ornitopatologia da FMVZ de Botucatu, SP, correspondendo a 75,6% dos 45 sorovares isolados de aves nesse perodo e o sorovar pullorum foi o segundo mais isolado neste levantamento. No Distrito Federal a ocorrncia de doenas transmitidas por alimentos, representando 5% dos surtos notificados do pas, tambm um problema como em todos os lugares do Brasil e do mundo, principalmente quando observados as causadas por Salmonella. No perodo de 1993 a 2000 foram diagnosticados 40% dos surtos notificados causados por Salmonella spp., maioria deles nas prprias residncias. Entre os alimentos que apresentam altas taxas de contaminao por este agente, foi o frango o principal responsvel pelas infeces (SILVA e DUARTE, 1991).

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3.3.2. Etiologia Existem vrios sorotipos de Salmonella responsveis pelo paratifo avirio, sendo os mais comuns a typhimurium, enteritidis, agona, hadar, heidelberg, montevideo, senftenberg e saintpaul. As cepas crescem bem nos meios de cultura usuais, mais rapidamente que os biotipos S. pullorum e S. gallinarum, com colnias maiores em gar e abundncia de H2S (cido sulfdrico). Os antgenos O associados aos determinantes antignicos na superfcie do flagelo (antgenos H), ajudam a definir sorologicamente um isolado quanto espcie, alm de testes bioqumicos complementares (TRABULSI, 1996; HIRSH e ZEE, 1999). Alguns dos sorotipos mencionados anteriormente, apresentam genes de invasina que codificam protenas que esto envolvidas com a entrada da salmonela nas clulas-alvo. Os produtos destes genes induzem a formao de ondulaes na membrana do entercito, assim as bactrias ficam aprisionadas nessas ondulaes e posteriormente so interiorizadas. Outros sorotipos secretam enterotoxinas, que resultam influxo de ons e lquido para o lmen intestinal provocando a diarria, enquanto outros secretam citotoxinas, que so responsveis por ocasionar a morte da clula-alvo por interrupo da sntese protica. A morte celular resulta em anormalidade de secreo e absoro que se manifesta sob a forma de diarria (HIRSH e ZEE, 1999). 3.3.3. Epidemiologia De ocorrncia mundial, as salmonelas esto presentes praticamente em todos os pases onde h avicultura industrial. A S. typhimurium um dos sorovares mais prevalentes em todo o mundo (ACHA e SZYFRES, 1986). O paratifo avirio foi diagnosticado em aves desde o final de 1800, atingindo primeiramente os pombos e em seguida diversas aves, como pssaros, papagaios, perus e galinhas, sendo os dois ltimos mais susceptveis. uma enfermidade de difcil controle em vrias espcies animais e em seres humanos, favorecendo a toxinfeco alimentar relacionada a produtos de origem avcola. A introduo, instalao, permanncia e disseminao da Salmonella so favorecidos pelo sistema intensivo na avicultura industrial (BERCHIERI e MACARI, 2000). Segundo Shane et al., (1992) vrios plantis de frangos de corte selecionados aleatoriamente no Canad, indicaram que a prevalncia de lotes que deram Salmonella, estavam associadas com a idade e a regio do Canad em que o lote estava localizado. O isolamento de Salmonella da gua de bebida estava associado com o tipo de gua utilizada e mtodos de descarte das aves mortas. Conduziu-se um projeto com a finalidade de determinar o grau de contaminao por Salmonella e as prticas especficas de manejo em granja, relacionadas com esta contaminao. As amostras coletadas da fbrica de rao eram as mais frequentemente contaminadas, seguidas pelas amostras obtidas do galpo de reprodutoras, linha de processamento, galpo de frango de corte e do incubatrio. Apenas a condio de

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pouca umidade da cama e a clorao da gua parece estar relacionada aos graus de contaminao por Salmonella em frangos de corte na granja. Este projeto tambm demonstrou que a contaminao por Salmonella, em frangos prontos para cozinhar, provavelmente, ocorre, durante a apanha, carregamento ou processamento (JONES et al., 1991). Todas as fontes de Salmonella so potencialmente importantes, entretanto, o incubatrio pode ser a fonte mais importante por duas razes. Primeiro, a ave recm-incubada mais susceptvel a colonizao que as aves mais velhas, por terem uma microbiota intestinal madura e so assim, mais resistentes a colonizao pela Salmonella. Segundo, as incubadoras geralmente servem como reservatrio para a Salmonella. Um ovo contaminado com um nico agente pode substancialmente, contaminar outros ovos e aves em uma incubadora (BAILEY, 2000b). A anlise da ultra-estrutura das cascas dos ovos de uma linhagem de poedeiras comerciais indicou que a camada cuticular est raramente presente como uma cobertura uniforme sobre a superfcie da casca e as membranas duplas das cascas contm, invariavelmente, poros maiores que as dimenses bacterianas. As condies descritas permanecem qualquer que seja a idade da ave poedeira. A penetrao de bactrias independe do nmero de poros. Na ausncia de uma cutcula funcional e com a remoo das membranas da casca, as bactrias so barradas em seu movimento por modificaes estruturais na camada mamilar (NASCIMENTO et al., 1992b). Um estudo realizado em um lote de reprodutoras pesadas infectadas naturalmente com S. enteritidis Fagotipo 4, demostrou que a infeco se estabeleceu com 20 a 22 semanas de idade. Durante todo o perodo de observao, foi constatado que pelo menos 12,5% das aves carreavam o agente. medida que o nvel de infeco aparentemente declinava com a idade, foi presenciado em um nvel baixo a presena de bactrias no ovo no incubado e pintos recm-eclodidos que foram cultivados. No entanto, anticorpos maternos estavam presentes em 81% dos ovos e 23% dos pintos e isto pode ter afetado a colonizao do organismo e a habilidade de isolar S. enteritidis (CORKISH et al., 1994). 3.3.4. Patogenia A transmisso pode ocorrer de forma horizontal ou vertical. A contaminao do ovo no trato reprodutivo ocorre quando este passa pela cloaca e tem contato com fezes contaminadas. A transmisso horizontal pode ocorrer pelo contato fsico entre as aves e pela cavidade oral ou cloaca, ainda no incubatrio. Outras formas de infeco podem ser por inalao, via conjuntiva ocular, rao, principalmente com ingredientes de origem animal. A gua, seres humanos, roedores, pssaros ou moscas tambm podem estar envolvidos. As aves recuperadas retornam postura com ovos infectados (BERCHIERI e MACARI, 2000). Um estudo foi feito com o intuito de demonstrar a penetrao de S. typhimurium por meio da casca de ovos frteis recm-postos. Os ovos foram expostos artificialmente bactria por meio de asperso,

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conseguindo atingir 100% dos mesmos e pelo contato com a cama de ninho contaminada, atingindo 59%. Estes resultados demonstram que apesar da umidade aumentar a penetrao de S. typhimurium, sua presena na casca no indispensvel para que ocorra a penetrao (PADRON, 1990). Apesar do controle sanitrio rgido das reprodutoras, ou seja, das avs, possvel que estas sejam infectadas pela SE, explicando alguns casos positivos em matrizes e em frangos de corte (BERCHIERI e BARROW, 1995). Os mesmos autores relatam que, os ingredientes que podem ser considerados potencialmente perigosos so as farinhas de origem animal (farinha de carne, peixe, ossos, sangue e penas). Existem isolamentos de SE em leos vegetais utilizados na formulao dos alimentos, assim como em milho inteiro ou modo e torta de soja. A salmonelose um dos maiores problemas de sade pblica pela sua ampla e variada ocorrncia no homem e animais (mamferos, rpteis e aves), sendo que estes ltimos ocupam o ponto central na epidemiologia das salmoneloses entricas, representando um reservatrio de grande importncia sanitria e de difcil controle. Nestes, o estado de portador o fator epidemiolgico mais destacado e a falta de sintomas e as dificuldades tcnicas para sua deteco antes ou durante a inspeo no abate, os convertem em fontes contnuas de contaminao do meio ambiente e, portanto dos produtos de origem animal (CARLTON e MCGAVIN, 1998). A S. enteritidis encontra-se entre os sorotipos que conseguem alcanar a corrente circulatria, disseminando-se pelo organismo. Produz doena via enterotoxinas, citotoxinas (Vero toxinas) e endotoxinas. Uma vez em contato com os macrfagos da lmina prpria ou das placas de Peyer, as bactrias so fagocitadas, transportadas para os linfonodos regionais e, atravs da circulao portal, para o fgado. A vescula biliar o stio pelo qual a bactria eliminada durante o perodo de portador assintomtico (CARLTON e MCGAVIN, 1998). Esse sorotipo provoca uma enfermidade de carter septicmico, atingindo o trato reprodutor, disseminando-se pelo ovo. Este tem sido implicado em surtos humanos de toxinfeco alimentar por Salmonella enteritidis (GAST e BEARD, 1993b). Dos agentes de doenas veiculadas por alimentos, tanto nos pases em desenvolvimento como nos desenvolvidos, a Salmonella considerada a mais importante por levar morte mais do que outros microrganismos. Esse um aspecto particular da Salmonella, no por causa da infeco intestinal que provoca, mas por ser capaz de ultrapassar o intestino, cair na corrente sangunea e fixar-se em vrios rgos, causando infeces extra-intestinais em humanos, como meningites, osteomielite, artrite, pneumonia, colicistite, peritonite, pielonefrite, cistite, endocardite, pericardite, vasculite e outras. A dose infectante varia de 10 a 10 clulas, tendo sido observado menos que 10 em alguns sorovares envolvidos em surtos de doenas de transmisso alimentar (DTA), em pacientes com AIDS, leucemia, linfoma e neonatos. A manifestao clnica inclui quadros entricos agudos, crnicos e infeces septicmicas (GELLI, 1995). So essas complicaes que acabam por levar a casos fatais. cada vez mais evidente que as complicaes geradas pela salmonelose seguem dois caminhos. Tornam-se casos fatais ou tomam uma via
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mais branda, mas nem por isso menos grave. As duas situaes tornam a Salmonella de grande interesse clnico e higinico, obrigando a um controle bem elaborado (RODRIGUES, 2005a). 3.3.5. Sinais Clnicos e Leses A maior ocorrncia de paratifo em animais jovens, podendo tambm infectar aves adultas, principalmente aps situaes de estresse como a muda forada, alm de causar morte rpida em aves recm-nascidas. Em aves com mais de 14 dias de idade, os sinais no so muito evidentes, mas pode causar mortalidade ou retardo no crescimento. Pode ser confundido com a pulorose ou septicemia aguda, em casos severos. Os sinais mais apresentados em pintinhos so: tristeza, penas arrepiadas, asas cadas, amontoamento e diarria. Em aves adultas ocorre a inapetncia, queda de postura e diarria, podendo ocorrer tambm cegueira e claudicao. A morbidade e a mortalidade variam de acordo com a intensidade e o sorotipo de Salmonella, sendo incomum a mortalidade (BERCHIERI e MACARI, 2000). A patogenicidade depende de uma srie de fatores associados bactria, ave e condies de criao. Assim, alguns sorotipos so invasivos desenvolvendo uma septicemia, tm um efeito citotxico sobre as clulas epiteliais, causam sua descamao e dissociao e induzem uma resposta celular na lmina prpria. Inicialmente, ocorrem granulcitos infiltrando a lmina prpria ou como parte de criptite focal. Mais tarde, formam-se pseudomembranas diftricas na superfcie mucosa. Os macrfagos da mucosa apresentam os microrganismos no seu citoplasma e esto acompanhados de plasmcitos e linfcitos (CARLTON e MCGAVIN, 1998). Pode-se observar enterite severa, com leses necrticas focais na mucosa do intestino delgado. Os cecos apresentam-se com diminuio de volume, espessamento de parede, com lquido caseoso de colorao branca a branco-amarelado, podendo conter partes avermelhadas ou enegrecidas e aumento de volume das placas de Peyer dos folculos linfides, com necrose do epitlio superficial. Bao e fgado podem estar congestos e edemaciados, com hemorragias e pontos necrticos (Figura 5) e/ou com microgranulomas. Esse ltimo consiste de pequenos agrupamentos de macrfagos (os granulomas paratifides) que so uma resposta do parnquima heptico por mbolos bacterianos. Os rins se apresentam congestos e aumentados de volume. Pode-se observar, ainda, hepatite e pericardite fibrino purulenta. Os pintinhos apresentam a gema no reabsorvida, coagulada, necrtica e caseosa. Apesar de ser raro, pode ocorrer panoftalmia, artrite purulenta, aerosaculite e onfalite. As aves adultas podem apresentar ovrio atrofiado, alm de folculos alterados, murchos, hemorrgicos e caseosos. O corao pode conter reas de inflamao e hidropericardite. A morbidade e mortalidade ocorrem dependendo da virulncia da cepa de SE e da linhagem da ave (BERCHIERI e BARROW, 1995; CARLTON e MCGAVIN, 1998).

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Figura 5 - Fgado com congesto focal, edemaciado e com pontos necrticos. 3.3.6. Imunidade As aves recm-nascidas so muito susceptveis infeco por Salmonella paratfica. O desenvolvimento da imunidade contribui para maior resistncia das aves, atravs da instalao gradual de uma microbiota intestinal (HIRSH e ZEE, 1999). Segundo Berchieri e Macari (2000), no decorrer da infeco de aves jovens por S. typhimurium, a bactria detectada em rgos internos at nove semanas ps-infeco, e por mais tempo nas fezes. O soro sanguneo contm altos ttulos de IgG, IgM e IgA especficos para soluo de lipossacardeos (LPS), flagelo e protena da membrana externa uma semana ps-infeco. A imunoglobulina M (IgM) atinge o pico aps trs semanas ps-infeco, a imunoglobulina G (IgG) quatro semanas e a imunoglobulina A (IgA) cinco semanas. Os ttulos de IgM e IgA caem para nveis baixos em nove semanas, poca em que a bactria no detectada nos tecidos e no contedo cecal da maioria das aves infectadas experimentalmente. Os heterfilos tambm so importantes como barreira inicial para combater a infeco e os macrfagos podem carrear a bactria para dentro do organismo animal. Um estudo feito em ovos produzidos por galinhas experimentalmente infectadas com S. enteritidis foi pesquisada, na gema, a presena de anticorpos especficos do sorogrupo D. Esses foram detectados em 5 a 22% dos ovos, sendo que os mesmos, atingiram seu pico com 3 a 5 semanas ps-inoculao e permaneceram em nveis detectveis por pelo menos 7 semanas (GAST e BEARD, 1991a). 3.3.7. Diagnstico O diagnstico baseado no isolamento e identificao do agente. Os rgos para a realizao dos testes so os mesmos utilizados para pulorose e tifo avirio, sendo que o bao, fgado, corao, ovrio,

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gema e contedo cecal, so os mais importantes. Os dois ltimos e material da cloaca de pintinhos, devero ser examinados separadamente dos outros rgos, pois contm microrganismos que competem com a Salmonella. Essa bactria tambm pode ser pesquisada na medula ssea, pulmes e leses das articulaes e dos sacos areos. A produo de H2S mais intensa e as salmonelas so mveis (BERCHIERI e MACARI, 2000). O isolamento de Salmonella pode ser feito de material que pode estar veiculando a bactria, como as farinhas de origem animal e rao (CARTER e COLE, 1990). A sorologia identifica aves que tem ou tiveram contato com Salmonella paratfica. Provas de aglutinao, microaglutinao e ensaios imunoenzimticos so capazes de detectar anticorpos por vrios meses aps a infeco. Caso essas aves sejam positivas, o teste deve ser comprovado com isolamento e identificao da Salmonella. Essas provas podem apresentar reao cruzada para outros sorotipos, embora utilizem antgenos especficos, como o de S. enteritidis e S. typhimurium (BERCHIERI e MACARI, 2000). A caracterizao bioqumica e sorotipagem so procedimentos demorados e, no caso da caracterizao de gallinarum e pullorum, no permitem a diferenciao precisa do sorotipo. Alguns trabalhos prvios foram realizados desenvolvendo testes baseados em Reao em Cadeia da Polimerase (PCR) e Polimorfismo de Comprimento de Fragmentos de DNA (RFLP), para deteco de Salmonella a nvel genrico e posterior classificao em diferentes grupos conforme similaridade no padro de amplificao/restrio (LUNGE et al., 1997). Para diagnstico diferencial preciso o isolamento e identificao do agente para diferenciar o paratifo das outras salmoneloses, pulorose e tifo avirio, alm de enfermidades bacterianas septicmicas (BERCHIERI e MACARI, 2000). 3.3.8. Tratamento O tratamento realizado com a aplicao de drogas antibacterianas que atuam sobre Salmonella. Atravs dele, pode-se reduzir a mortalidade, porm a ave poder ser portadora, eliminando Salmonella nas fezes por perodo mais prolongado que as aves sem tratamento (BERCHIERI e MACARI, 2000). Entre a variedade de drogas contra a enfermidade paratifo aviria, pode-se administrar a enrofloxacina, danofloxacina, trimetropin, sulfa, furaltadona e a gentamicina (HIRSH e ZEE, 1999). No entanto, no h comprovao sobre o efeito dessas drogas na reduo da invaso de rgos internos, folculos ovarianos e colonizao intestinal, relatam Berchieri e Barrow (1995). Na Amrica Latina, tanto para reprodutoras quanto para frango de corte infectados com SE, utiliza-se quinolonas e sulfas administradas na gua de bebida (BERCHIERI e MACARI, 2000). A infeco humana por SE pelo consumo de alimentos de origem animal contaminados, particularmente ovos e seus derivados, um grave problema de sade pblica. O problema humano agravase quando a cepa de SE apresenta resistncia s drogas de eleio para seu tratamento. H consenso em

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vrios pases que o uso indiscriminado de antibitico na produo animal uma das causas do aumento da resistncia antimicrobiana. Patgenos humanos e genes de resistncia podem passar entre humanos, animais e outros ecossistemas, via contato com animais ou atravs do consumo de alimento ou gua contaminada. Tem sido uma recomendao da Organizao Mundial de Sade (OMS) o controle e a restrio do uso de antimicrobianos na produo animal (SILVA e DUARTE, 2002). O Codex alimentarius da FAO/OMS atravs de um corpo de especialistas recrutados no ambiente cientfico internacional, encarrega-se de analisar a toxicidade dos resduos destes medicamentos de uso veterinrio, fixando para os mesmos as IDAs (doses dirias aceitveis) e LMRs (limites mximos de resduos), dando a estes valores margens de segurana grandes o suficiente para que se garanta a segurana do produto de origem animal, do ponto de vista toxicolgico, ao ser humano que o ingere. Neste contexto, anlises farmacocinticas tornam-se fundamentais, pois ainda necessrio fixar o chamado perodo de carncia, ou seja, o intervalo de tempo necessrio, aps a remoo do medicamento, para que os nveis de seus resduos nos tecidos dos animais tratados com eles sejam menores que os valores de LMR (PALERMO,1995). 3.3.9. Controle e Profilaxia A Salmonella parece ter-se adaptado ao ambiente e tem sobrevivido s melhorias das prticas sanitrias, tratamentos qumicos e drogas antibacterianas. A Salmonella pode ser introduzida no ciclo de produo avcola pelo incubatrio, rao, galpes, roedores e homem. Uma vez colonizado em uma ave, o organismo pode ser compartilhado com outras aves, externa ou internamente. O transporte de aves em veculos ideal para a transferncia do microrganismo presente no excremento de uma ave para, no mnimo, as penas de outras aves. Muito esforo tem sido despendido pelos fabricantes de equipamentos e pesquisadores em pesquisas e desenvolvimento para melhorar a qualidade microbiolgica das carcaas de frangos. Inovaes, tais como escaldamento por spray, processo de automao de trabalho manual, chilling por imerso e resfriamento das carcaas embaladas em sacos plsticos oferecem possibilidade de reduzir contaminao microbiana nas carcaas (SHACKELFORD, 1999). A preveno e o controle so institudos para evitar a transmisso vertical e horizontal. Devem ser direcionados s aves reprodutoras, como o monitoramento sorolgico e bacteriolgico, eliminao das aves portadoras e tratamento dos ovos no galpo e no incubatrio para evitar a transmisso vertical, sendo impossvel a preveno quando a bactria est dentro do ovo. Os pintinhos devero ser livres de Salmonella, pois a disseminao pela granja muito rpida e de difcil controle (BERCHIERI e MACARI, 2000). Medidas de biossegurana devero ser adotadas como controle de roedores, evitar trnsito de pessoas e veculos, lotes de aves da mesma idade, evitar outras espcies de aves, assim como animais silvestres e moscas. Adotar programas de higiene e fazer a desinfeco de forma eficiente. Os roedores,

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veculos que transportam as aves, cama e ovos com fezes, e seus ocupantes so transmissores de salmonela paratfica (BERCHIERI e MACARI, 2000). A alta infestao de ratos em galpes positivos de SE no s pode incrementar a transmisso horizontal com apenas um galpo infectado, como tambm pode favorecer a persistncia de SE no meio ambiente e granjas com idades mltiplas. Esse sorotipo um dos mais freqentemente isolado no co, portanto existe uma grande oportunidade de transmisso desse animal para as aves, j que a maioria das propriedades possuem um co de guarda ou de companhia (NAVARRO, 2002). O controle da Salmonella enteropatognica para humanos uma prioridade do USD (Departamento de Agricultura dos Estados Unidos) e do Servio de Pesquisa Agrcola. Muitas tentativas tm sido efetuadas para eliminar, ou pelo menos, reduzir os nveis de Salmonella em frangos processados. Foram examinados fatores que afetam o grau de colonizao por Salmonella nas aves e algumas alternativas para reduzir a colonizao desse agente. Quando utilizadas em conjunto, estas alternativas formam o conceito de controle integrado de colonizao (BAILEY, 1988a). O mtodo se excluso competitiva (controle de colonizao), consiste na administrao do contedo cecal ou fecal de aves adultas que contm principalmente bactrias anaerbicas e que ao serem administrados em pintos recm nascidos livres de Salmonella oferecem uma forte proteo contra a colonizao da Salmonella. Existem dois tipos de produtos, aqueles que contm bactrias benficas definidas (probiticos) e os que utilizam microflora indefinida. Demonstraes indicam que a flora indefinida muito mais efetiva que a flora definida para reduzir a colonizao intestinal por Salmonella (NAVARRO, 2002). Blankenship et al., (1993) citam que o tratamento de aves em uma escala comercial com culturas de excluso competitiva podem ser mtodos teis para reduzir a contaminao por Salmonella. A interveno nos ingredientes das raes tem sido a forma adotada nas indstrias para que se obtenham raes livres de agentes patognicos atravs da monitoria sobre os alimentos que entram numa formulao e que podem veicular esses patgenos, como as farinhas de origem animal: farinha de carne, farinha de ossos, farinha de peixe, farinha de vsceras, farinha de sangue e resduos de incubatrio. Sendo a rao uma das fontes de contaminao das aves por Salmonella, foi desenvolvido um estudo com o objetivo de eliminar completamente esses patgenos da rao utilizando-se prpolis e o lcool etlico, produtos com ao bactericida. Segundo Mazzuco, H; Berchieri, A.; Silva, R. D. M., (1995) o lcool etlico mostrou ao adequada para o controle de sorotipos de Salmonella com prevalncia em ingredientes de origem animal. De acordo com Nascimento, (1992a) promotores de crescimento e, particularmente, a Virginiamicina tm mostrado capacidade de reduzir a carga microbiolgica no intestino. Foram realizados alguns experimentos para verificar a eficcia do cido propinico utilizado na rao no controle da colonizao de S. typhimurium em pintos de corte. Os resultados indicam que o cido propinico da rao na dieta no foram efetivos em reduzir a infeco por Salmonella no papo e no ceco (HUME et al., 1993). Para se controlar as Salmonellas e outros patgenos microbianos, um programa de higienizao eficaz da incubadora deve ser estabelecido. Previamente, o formaldedo foi amplamente usado como um

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fumigante em incubadoras. Foram observadas mais de quinze formulaes qumicas e identificados o polihexametileno biguanida hidrocloreto (PHMB), perxido de hidrognio (HP), e um composto fenlico como um dos produtos qumicos mais eficazes para combater a Salmonella em ovos frteis incubados. A luz ultravioleta (UV) reduz as cargas bacterianas no ar circulante durante a incubao e mostra ter um potencial como higienizante para o pr-tratamento de ovos incubados (BAILEY, 2000b). Em lotes positivos SE recomendvel aumentar o controle sanitrio no manejo dos ovos incubados dando uma maior nfase em evitar incubar ovo de cama ou contaminado com fezes. No caso da indstria produtiva de ovos, a refrigerao adequada dos mesmos evita a multiplicao das bactrias (NAVARRO, 2002). Santos et al., (2000) afirmam que os produtos de origem animal, principalmente avcolas, so considerados uma importante fonte de protena para o homem, podendo ser encontrada no comrcio brasileiro na forma resfriada e congelada. O resfriamento no inviabiliza a presena de bactrias como as do gnero Salmonella. Contudo, quando se trata do congelamento espera-se a reduo ou ausncia de clulas bacterianas viveis. Foi verificado que Salmonella em carne de frango so destrudas mais rapidamente em temperaturas entre 2 e 5C. O Departamento de Inspeo de Produtos de Origem Animal (DIPOA) instituiu um programa de monitoramento de Salmonella spp. em estabelecimentos de abate de aves, com o intuito de garantir a qualidade dos produtos avcolas, com a reduo da presena desse patgeno nas carcaas (BRASIL, 2002). Em razo das novas exigncias de segurana do alimento, o sistema de inspeo realizado em conjunto com as prticas de garantia da qualidade, baseado nos princpios de Boas Prticas de Fabricao (BPF), no Procedimento Padro Higiene Operacional (PPHO) e na Anlise de Perigos e Pontos Crticos de Controle (APPCC), que conferem um controle minucioso sobre os processos (BRASIL, 2002). Todas as especificaes de localizao, detalhes construtivos e operacionais dos abatedouros avcolas brasileiros so especificados por lei (N 7.889 de 23/11/1989), incluindo todos os procedimentos higinico-sanitrios, e fazem parte do Regulamento Tcnico da Inspeo Tecnolgica e Higinico-Sanitria de Carnes de Aves (RISPOA). Nele, as condies estruturais das superfcies (parede, pisos e teto) so desenvolvidas para evitar contato com as carcaas e vsceras comestveis. Programas de controle de pragas, ventilao, iluminao, qualidade das guas servidas e residuais, sistema de distribuio de gua, esgoto, vestirios, lavatrios, equipamentos e utenslios, operaes sanitrias, higiene pessoal, vesturio e controle da sade ocupacional esto previstos (SONCINI e BACK, 2001). Uma das medidas operacionais de sucesso no controle de salmonelas e aplicadas durante o abate a tolerncia zero para material fecal visvel em carcaa antes do resfriamento, uma vez que as fezes so consideradas veculos de enteropatgenos (RODRIGUES, 2005b). O RISPOA atravs da portaria n 210/98 aceita a liberao da carcaa com presena de fezes localizadas desde que a parte acometida seja retirada e destinada a graxaria.

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A implementao do sistema APPCC requer um profundo treinamento e de custo elevado. No programa de aplicao de reduo de patgenos dos Estados Unidos, de 1996 a 2000, o servio de pesquisas econmicas do Departamento de Agricultura estimou o valor anual de US$ 380 milhes de dlares para implementao do programa e mais de US$ 570 milhes dlares em investimento em longo prazo (BRASIL, 2002b). Mais recentemente est se utilizando o mtodo de Controle de Pontos Crticos e Analise de Riscos (APPCC) nos processos produtivos de granjas e incubatrios, que tem contribudo grandemente para reduzir os nveis de infeco dos plantis de aves. (SONCINI e BACK, 2001): matrizes; verificao. A indstria avcola vem adotando vrios critrios, relacionados a seguir, no controle de salmonelas nos plantis de frangos. Eles se baseiam na teoria do estabelecimento de mltiplas barreiras e incluem: Compra de pintos de cortes livres de salmonelas; Controle de salmonelas nas raes; Programa de biossegurana; Programa de controle de pragas; Programa de manejo e reuso de camas; Programa de vacinao das matrizes e frangos; Aplicao de Boas Prticas de Manejo (BPMs); Adoo de Programas de Garantia da Qualidade; Programas de APPCC (Anlise de Perigos e Pontos Crticos de Controle); Outros programas especficos de cada empresa. Desde que a pulorose e tifo so duas enfermidades erradicadas na maioria da indstria avcola mundial, e o prejuzo ocasionado para a sade pblica pela S. enteritidis, traz conseqncia muito mais relevante do que essas duas enfermidades, o uso de vacinas reconhecido como uma importante medida no controle da zoonose, porm o emprego de vacinas contra infeces por Salmonella contestvel cientificamente quanto sua eficcia no controle da doena ou infeco. A manifestao clnica da doena Aplicao de medidas de biosseguranca da propriedade; e, Monitoramento microbiolgico de instalaes, ambientes e aves, uso de check-list de Aves de reposio livres de Salmonella; Controle de vetores (insetos, pssaros e roedores); Higiene e desinfeco das instalaes; Uso de raes no contaminadas por Salmonella spp. e em protena animal no caso de O APPCC nas granjas enfatiza os seguintes aspectos

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prevenida, mas pode haver a infeco e a eliminao da Salmonella. O desejvel, seria que a vacina impedisse totalmente a infeco ou a eliminao da bactria em casos de vacinao de lotes infectados, mas esse fato no ocorre. Porm, ultimamente tem surgido um grande nmero de vacinas dirigidas a controlar as infeces das aves pela Salmonella de maior risco para a sade pblica, como S. enteritidis e S. typhimurium (SONCINI e BACK, 2001). A vacinao, com cepas homlogas de Salmonella, auxilia na reduo intestinal e excreo fecal. Vrias vacinas inativadas oleosas de SE tem sido licenciadas em todo o mundo. Essas vacinas previnem a transmisso transovariana, a contaminao da casca do ovo, reduzem o isolamento de SE de aves vacinadas, inclusive de rgos internos como os ovrios, mas no o elimina totalmente dos rgos internos e ovos de galinhas desafiadas (SILVA e DUARTE, 1991). As vacinas contra S. enteritidis produzidas com a clula bacteriana ntegra e inativada por agente qumico, quando usadas em aves, em duas aplicaes durante a recria, com intervalo de cinco a seis semanas, provocam uma resposta humoral. Entretanto, estas no induzem imunidade celular (linfcitos T), importante para prevenir a colonizao da Salmonella na mucosa intestinal. A proteo est baseada na imunidade humoral, reduzindo consideravelmente a invaso e colonizao nos rgos internos e aparelho reprodutivo, controlando a transmisso via ovo. O uso de vacinas inativadas contra S. enteritidis tem-se mostrado eficiente para reduzir a eliminao de salmonela pelas fezes e colonizao dos tecidos em pintos de 1 dia. A prognie de matrizes vacinadas se mostra mais resistente infeco por S. enteritidis pela presena de anticorpos maternos (SONCINI e BACK, 2001). Os mesmos autores relatam que os avanos da biotecnologia nas ltimas dcadas tornaram possvel produzir organismos mutantes com caractersticas desejveis que pudessem ser usados como amostras de vacinas vivas. Assim, surgem as vacinas com alteraes em genes que garantem ao mutante manter as suas caractersticas imunognicas desprovida de patogenicidade. Tem-se obtido resultados positivos no controle no s de S. typhimurium como de salmonelas em geral. Galinhas poedeiras vacinadas com duas a quatro semanas tiveram proteo duradoura que preveniu a eliminao de S. enteritidis em ovos. Aves vacinadas com S. typhimurium mutante viva tiveram proteo no s para S. typhimurium, assim como outros sorotipos. Na Alemanha, est sendo utilizada uma vacina viva de S. enteritidis mutante avirulenta, para o controle dessa Salmonella em aves de corte e de postura. De acordo com Navarro, (2002) a vacinao e medicaes contnuas no alimento no so indicados para lotes de avs, pois podem mascarar a infeco. A vacinao indicada para casos de contaminao residente em galpes ou em granjas com idade mltiplas, onde podem existir alguns lotes infectados. No necessrio a vacinao em lotes de mesma idade e alojados em granjas sem antecedentes de SE. Um estudo de campo realizado no Brasil em 1999, por Silva e Duarte (2002), com 280 mil matrizes pesadas em uma integrao, mostrou que a aplicao de duas doses de bacterina inativada de SE (doze e dezessete semanas de idade), reduziu os nveis de positividade do mecnio da prognie de 9 a 10% para

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0% aps o primeiro ano do programa. As mesmas observaes foram feitas em outras integraes de frango de corte em pases da Amrica Latina, com uso de duas doses de bacterina aplicada s matrizes em recria. 4. CONCLUSO A salmonelose no uma doena exclusiva das aves, podendo acometer outras espcies, como sunos, bovinos, equinos, ovinos, alm de ces e gatos. Diante dessa ameaa de zoonose, de grande importncia o papel do mdico veterinrio na conduo e orientao da equipe de trabalho das indstrias e estabelecimentos alimentcios, esclarecendo as medidas de preveno e controle da doena. A ocorrncia de DTAs vem aumentando de modo significativo em nosso pas. Vrios so os fatores que contribuem para emergncia dessas doenas, entre os quais se destacam: o crescente aumento da populao, a existncia de grupos populacionais vulnerveis ou mais expostos, o processo de urbanizao desordenado e a necessidade de produo de alimentos em grande escala. Contribui ainda, o deficiente controle dos rgos pblicos e privados, no tocante a qualidade dos alimentos ofertados s populaes. Dentre outros. Esses fatores resultam significativamente na possibilidade de ocorrncia das DTAs, infeces ou intoxicaes que podem se apresentar de formas crnicas ou agudas, com caractersticas de surto ou casos isolados, com distribuio localizada ou disseminada e com formas clnicas diversas, incidindo, ocasionalmente, at mesmo ao bito. Os ltimos levantamentos continuam a mostrar que a Salmonella Enteritidis (SE) em materiais avcolas o principal sorovar responsvel pelas infeces humanas. Embora as carcaas de frango apresentem altas taxas de contaminao por SE, so os ovos e seus derivados, principalmente a maionese caseira, os principais responsveis pelos surtos em humanos. O uso de vacinas em poedeiras e reprodutoras tem se mostrado uma ferramenta auxiliar no controle, sendo o procedimento mais indicado aquisio e produo de lotes livres do agente. Os roedores parecem ser reservatrios ambientais importantes na perpetuao do problema em granjas contaminadas. Alm da obrigatoriedade da anlise de amostras regulamentares para que se cumpram s normas exigidas pelos rgos Governamentais de Inspeo Sanitria, os diagnsticos laboratoriais para a identificao do agente daro suporte ao mdico veterinrio no controle, tratamento e preveno da doena. Por outro lado, a forma de criao intensiva das aves favorece a instalao, multiplicao e disseminao do agente, alm de contribuir para elevar o nvel de estresse dos animais, fator predisponente baixa da imunidade e consequentemente, o aparecimento de vrias doenas. Portanto a perda de controle poder vir a acontecer, ocasionando prejuzos exorbitantes com a elevada mortalidade e mortandade das aves, ou ento, a baixa no ganho de peso das mesmas, alm do que seus ovos tambm estaro infectados, assim como a cama, rao e gua. Os riscos so grandes, portanto preciso trabalhar de forma responsvel, consciente e preventiva.

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