Prctica N 4 Difusibilidad de los carbohidratos y dilisis de las protenas.

Introduccin.

Las protenas se pueden separar de las molculas pequeas mediante un proceso llamado dilisis, a travs de una membrana semipermeable; como lo puede ser una membrana porosa de celulosa. Las molculas de dimensiones significativamente mayores que el dimetro del poro se retienen dentro de la bolsa de dilisis, mientras que las molculas mas pequeas y los iones atraviesan los poros de esta membrana y aparecen en el dializado dentro de la bolsa. Esta tcnica es til para retirar las sales u otras molculas pequeas pero no discriminara de forma efectiva entre las protenas. El movimiento de agua a travs de una membrana selectivamente permeable se llama smosis (difusin de agua) y sucede siempre del rea de mayor concentracin de agua (con menor concentracin de soluto) al rea de menor concentracin de agua (con mayor concentracin de soluto).

Procedimiento.

Se tom un pedazo de tubo de celofn, se introdujo en agua para suavizarlo y evitar que se rompiera al tratar de manipularlo, se hizo un nudo en un extremo y por el otro extremo se le aadi 5 mL de almidn soluble y 5 mL de glucosa, despus se realiz otro nudo para sellar la bolsa extrayendo el aire de la misma. Dicha bolsa se introdujo en un vaso de precipitado que contena agua destilada con un agitador magntico, el cual se coloc sobre una plancha de calentamiento solo para llevar a cabo la agitacin ms no calentar. Cada 30 minutos se extraa una pequea muestra del agua destilada del vaso y se realizaban las pruebas de Lugol y Benedict para detectar la presencia de glucosa o almidn y as saber qu molculas atravesaron la membrana semipermeable; para llevar a cabo la comparacin se realizaron controles y as detectar ms fcilmente la presencia de dichas molculas. Resultados.

Para iniciar la prctica, se sumergi el celofn en agua, y se aadieron 5 mL glucosa y 5 mL almidn; se anudaron los extremos de este. Colocamos el vaso de precipitados (agua limpia) en una plancha, nicamente con agitacin; este contena tanto el celofn como un agitador magntico. Cada 30 minutos extraamos una muestra del lquido del vaso, y le hacamos las pruebas de Benedict y Lugol. Se registraron tres muestras, adems de los blancos.

MUESTRA. PRUEBA LUGOL. PRUEBA BENEDECIT. Blanco positivo (glucosa). + Blanco positivo (almidn). + Blanco negativo. N 1. + N 2. + N3. + * Conforme ms pasaba el tiempo, ms aumentaba la intensidad de color rojizo en las pruebas de Benedict.

MUESTRA 1 ( Lugol y Benedict).

MUESTRA 2 (Lugol y Benedict).

MUESTRA 3 (Lugol y Benedict).

Discusin de resultados.

Mark Berg seala que: "Las molculas de dimensiones significativamente mayores que el dimetro del poro, se retienen dentro de la bolsa de dilisis, mientras que las molculas ms pequeas y los iones atraviesan los poros de esta membrana, y aparecen en el dializado, fuera de la bolsa". Al realizar la dilisis con almidn y glucosa, el resultado esperado era que las pruebas de Lugol diesen negativas y las de Benedict positivas, ya que conforme los registros, en la literatura, sabemos que Benedict da positivo a carbohidratos, que fueron las molculas que atravesaron nuestra membrana.

Cuestionario.

1.- Defina el concepto de permeabilidad y permeabilidad selectiva. Permeabilidad: capacidad de un material para que un fluido lo atraviese sin alterar su estructura interna. Se afirma que un material es permeable si deja pasar a travs de l una cantidad apreciable de fluido en un tiempo dado, e impermeable si la cantidad de fluido es despreciable. Permeabilidad selectiva: propiedad de la membrana plasmtica que permite el paso de slo ciertas partculas a travs de ella. Es decir, Algunos solutos cruzan la membrana libremente, algunos cruzan con asistencia y otros no pueden cruzar.

2.- Establezca la diferencia entre transporte activo y pasivo. El transporte pasivo es el paso simple de molculas a travs de la membrana plasmtica, durante en la cual la clula no requiere de energa, debido a que va a favor del gradiente de concentracin o del gradiente de carga elctrica; y el transporte activo es un mecanismo que permite a la clula transportar sustancias disueltas a travs de su membrana desde regiones de menor concentracin a otras de mayor concentracin. Es un proceso que requiere energa, llamado tambin producto activo debido al movimiento absorbente de partculas que es un proceso de energa para requerir que mueva el material a travs de una membrana de la clula y sube el gradiente de la concentracin. Su diferencia es que solo uno necesita energa.

3.- Identifique que molcula en la clula sirve como carrier o transportador. Carriers o permeasas:

Al igual que los canales inicos, las permeasas estn formadas por protenas transmembrana multipaso. Suelen transportar una gran variedad de iones como el HCO3- y otras molculas polares sin carga como la glucosa. Este tipo de transporte es siempre sin gasto de energa y a favor del gradiente electroqumico. Existen tres tipos de permeasas: -Monotransportadora o uniporte: Transfieren un solo tipo de soluto de un lado al otro de la membrana. -Cotransportadora o simporte: Transfieren dos tipos de solutos, ambos en el mismo sentido. -Contratransportadora o antiporte: Transfiere dos tipos distintos de solutos en sentidos contrarios. Es decir, uno ingresa al citoplasma si, y solo si, simultneamente el otro sale.

4.- Mencione los mecanismos por los cuales molculas pequeas, pueden atravesar una membrana biolgica. Difusin facilitada. Difusin simple. Transporte activo.

5.- Mencione los mecanismos por los cuales una molcula de alto peso molecular puede atravesar una membrana biolgica. La endocitosis es un proceso celular, por el que la clula introduce molculas grandes o partculas, y lo hace englobndolas en una invaginacin (formacin del repliegue de una membrana) de la membrana citoplasmtica, formando una vescula que termina por desprenderse de la membrana para incorporarse al citoplasma. Cuando la endocitosis da lugar a la captura de partculas se denomina fagocitosis. La endocitosis mediada por receptores slo incluye al receptor y a aquellas molculas que se unen a dicho receptor, es decir, es un tipo de endocitosis muy selectivo.

Conclusiones.

Se realizaron las pruebas de Benedict y Lugol, para determinar la presencia del almidn y la glucosa en el agua del alrededor del celofn que haca la funcin de membrana celular. En est prctica observamos un ejemplo del funcionamiento de la difusin (dilisis) a travs de una membrana celular (celofn).

Bibliografas.

Lubert S: Bioqumica; Espaa: Editorial Revert; 2008. Berk Jeremy M: Biochemestry ; New York : W.H. Freeman an company ; 2007. Thibodeau Gary: Estructura y funcin del cuerpo humano; Espaa: Editorial Elsevier; 1998. Slideshare [www.slideshare.net/guest660fdb/la-celula-1799310] La membrana y el transporte celular [academic.uprm.edu/~jvelezg/lab7.pdf] Wikipedia [es.wikipedia.org/wiki/Endocitosis] Transporte desde y hacia la clula [www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/transp.htm] Transporte de membrana [www.biologia.edu.ar/animaciones/membrana/ppal.htm] Membrana plasmtica [www.genomasur.com/lecturas/Guia04.htm]