IFCE - Campus Maracana Curso Engenharia Ambiental Disciplina Microbiologia Bsica Profa.

Cynara Reis Aguiar

Unid V Fundamentos de qumica microbiolgica e Metabolismo microbiano

Compostos biologicamente importantes

As clulas de todos os organismos vivos so constitudas por compostos qumicos: Inorgnicos; Orgnicos maior significado biolgico: Carboidratos; Lipdeos; Protenas; cidos nuclicos.

Carboidratos
Acares e amido fonte primria de energia nas clulas;

Funes importantes nos seres vivos: Ajudam a formar a parede celular bacteriana; Desoxirribose - Bloco construtivo do DNA; Usados na sntese de aminocidos e gorduras construo de estruturas e fornecimento de energia; Atuam como reserva de alimento; Fornecer combustvel para as atividades celulares, sendo uma fonte de energia de uso imediato.
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Carboidratos
Compostos de tomos de C, H e O: Relao H:O sempre 2:1 nos carboidratos simples; Frmula geral (CH2O)n n o n de unidades; Ex: glicose C6H12O6.

Classificao de acordo com tamanho: Monossacardeos; Dissacardeos; Polissacardeos.

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Monossacardeos
Chamados acares simples 3 a 7 tomos de C:

Trioses molcula de acar com 3 tomos de C; Tetroses acares com 4 tomos de C; Pentoses acares com 5 tomos de C; Hexoses - acares com 6 tomos de C; Heptoses - acares com 7 tomos de C.

Monossacardeos
Pentoses e hexoses extremamente importantes para os seres vivos;

Desoxirribose (pentose) molcula de DNA; Glicose hexose principal fornecedora de energia das clulas vivas. Molculas lineares ou em forma de anel (em gua).

Dissacardeos
Ligao de 2 monossacardeos por reao de sntese por desidratao: GLICOSE + FRUTOSE SACAROSE + H2O GLICOSE + GALACTOSE LACTOSE + H2O

Podem ser quebrados em molculas menores Hidrlise: SACAROSE + H2O GLICOSE + FRUTOSE

Parede celular bacteriana dissacardeos + protenas = peptideoglicano.

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Polissacardeos
Dezenas a centenas de monossacardeos unidos por sntese por desidratao; Macromolculas cadeias longas e ramificadas; Geralmente insolveis em gua; No apresentam doura.

Polissacardeos
Glicognio polmero de glicose: Material de armazenamento em animais e bactrias. Celulose - polmero de glicose: Parede celulares de plantas e maioria das algas. Amido produzidos pelas plantas: Alimento para humanos.

Humanos necessidade de enzimas para assimilao dos acares.

Lipdeos
2 maior grupo encontrado na matria viva; Molculas apolares insolveis em gua; Solveis em clorofrmio, acetona, ter ou benzeno. Atuam no armazenamento de energia; Parte da estrutura das membranas e paredes celulares.

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Lipdeos simples
Lipdeos simples triglicerdeos ou gorduras Glicerol + cidos graxos; Triglicerdeo 3 molculas de cidos graxos ligados por ligao ster ao glicerol.

cido palmtico cido olico

+ 3H2O

cido alfa-linolico

Glicerol

Ligao ster
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Lipdeos complexos
Contm tambm fsforo, nitrognio e enxofre;

Fosfolipdeos componente da membrana celular: 2 molculas de cidos graxos e 1 grupo fosfato ligado ao glicerol; Grupo fosfato hidroflico; cidos graxos hidrofbicos; Formam a bicamada fosfolipdica da membrana celular.

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Lipdeos complexos
Esterides ou esteris Molcula altamente apolar; Vrios anis de C ligados entre si; Ex: colesterol So encontrados nas membranas plasmticas de clulas de animais, de um grupo de bactrias (micoplasmas), de fungos e plantas; Impedem o endurecimento da membrana em T baixas; Tm funo reguladora (hormnios), so vitaminas ou pigmentos fotossintticos (carotenides).
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Protenas
Contm C, H, O e N ou ainda S; 50% ou mais do peso seco da clula; Partes integrais das estruturas das clulas: Membranas, parede celular e componentes do citoplasma.

Protenas simples somente aminocidos; Conjugadas aa + compostos orgnicos/inorgnicos.

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Protenas
Essenciais para funes celulares: Enzimas aceleram reaes bioqumicas; Protenas transportadoras; Bacteriocinas produzidas por muitas bactrias; Exotoxinas produzidas por patgenos; Movimento flagelo.

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Aminocidos
Blocos construtivos das protenas; Estrutura do aminocido: Grupo amino (-NH2), pode aceitar H grupo bsico; Grupo carboxila (-COOH), pode liberar H grupo cido; Um tomo de H; Grupo R diferencia os 20 aminocidos.
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H H3N+ C R COO-

Aminocidos
C do aminocido assimtrico estereoismeros (D e L); Aminocido tridimensional direito D e esquerdo L; Aminocidos das protenas ismeros L; D-aminocidos mais raros, encontrados em paredes celulares de algumas bactrias. Alguns aminocidos:

Glicina Alanina

Arginina

Fenilalanina
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Ligaes peptdicas
Ligaes entre aminocidos para formar protenas; Ocorre por sntese por desidratao liberao de H2O; 2 aminocidos dipeptdeo; 4 a 9 aminocidos peptdeo; 10 a + de 2000 aminocidos polipeptdeo.

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Nveis estruturais das protenas

Variao na estrutura est relacionada com a funo; A funo de uma protena depende de sua capacidade de reconhecer e se ligar a alguma outra molcula; Enzima substrato Anticorpo antgeno Forma exclusiva une-se a molcula especfica para realizar funo especfica. Cadeia de polipeptdeo dobra-se espontaneamente para assumir uma certa forma.
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Nveis estruturais das protenas

Estrutura primria Sequncia exclusiva de aminocidos para formar cadeia peptdica;

Geneticamente determinada; alteraes tem efeitos metablicos adversos.

No existem como cadeias longas e lineares estrutura compacta e tridimensional.

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Nveis estruturais das protenas

Estrutura secundria Dobramento localizado, repetitivo da cadeia polipeptdica;

Resultado das pontes de H que unem os tomos das ligaes peptdicas em diferentes localizaes ao longo da cadeia de polipeptdeo. Formas em hlice ou dobras pregueadas; Estrutura estvel.
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Nveis estruturais das protenas

Estrutura terciria Vrias dobras da molcula em uma forma especfica fita emaranhada; Envolve vrias interaes entre vrias cadeias laterais de aminocidos na cadeia polipeptdica; Pontes dissulfeto ligaes entre ons de enxofre de molculas de cistena; Pontes de H; Interao hidrofbica; Ligao inica.
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Ligao inica

Interao hidrofbica

Nveis estruturais das protenas

Estrutura quaternria Agregao de uma ou mais cadeias polipeptdicas individuais (subunidades) que operam como uma nica unidade funcional;

Forma geral das protenas: Globular compacta e praticamente esfrica; Fibrosa fio.
Estrutura quaternria da hemoglobina. H dois tipos de polipeptdeos, cadeias e . e referem-se aos nomes das cadeias e no s estruturas polipeptdicas.

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Desnaturao de protenas
Quando submetidas elevao de T, alteraes de pH ou a uria; Sofrem alteraes na configurao espacial perda da atividade biolgica, mas as ligaes peptdicas no so afetadas estrutura primria inalterada; Dependendo da severidade das condies desnaturantes, poder ocorrer o redobramento aps a remoo do agente desnaturante.

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cidos nuclicos
Existem em todos os seres vivos. Responsveis e coordenadores da informao gentica e hereditria dos organismos:

cido desoxirribonuclico (DNA) - encontra-se no ncleo das clulas, onde forma os cromossomos, e nos cloroplastos e mitocndrias;

cido ribonucleico (RNA) - encontra-se essencialmente no citoplasma e dele existem trs tipos: ribossmico, transportador e mensageiro.
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cidos nuclicos
Unidades estruturais: Nucleotdeos Uma pentose desoxirribose ou ribose; Grupo fosfato cido fosfrico; Uma base contendo nitrognio: Compostos cclicos de C, H, O e N; Adenina e Guanina purinas (anel duplo); Timina, Citosina e Uracila pirimidinas (anel simples). Nucleosdeo purina ou pirimidina + pentose (sem grupo fosfato).

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DNA
Watson e Crick consiste de 2 cadeias longas enoveladas uma em torno da outra dupla hlice; As bases so mantidas juntas por pontes de H: A e T 2 pontes de H; C e G 3 pontes de H. As bases nitrogenadas so complementares; A sequncia extremamente especfica e carrega as instrues genticas do organismo.
Esqueleto de acar-fosfato

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RNA
Composto de uma nica fita; Pentose ribose (1 tomo de O a mais que desoxirribose); A base nitrogenada Uracila substitui a Timina; muito menor que o DNA.

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RNA
RNA ribossmico (RNAr) - encontrado, em associao com vrias protenas diferentes, na estrutura dos ribossomos (sntese protica). Corresponde a at 80% da clula; RNA transportador (RNAt) - Est ligado de forma especfica a cada um dos 20 aminocidos encontrados nas protenas. Durante sntese protica o RNAt faz extenso pareamento de bases intracadeia e atua no posicionamento dos aminocidos na sequncia prevista pelo cdigo gentico. RNA mensageiro (RNAm) - Atua transportando a informao gentica do ncleo da clula eucaritica ao citosol, onde ocorrer biossntese protica. O RNAm tambm utilizado como molde nesta biossntese.
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Nucleotdeos funcionais
Acar (ribose ou desoxirribose) + base nitrogenada + grupos fosfatos ADENINA + RIBOSE + 3 FOSFATOS = ATP ADENINA +RIBOSE + 2 FOSFATO = ADP

ATP o principal transportador de energia na clula: A separao dos grupos fosfato libera muita energia; Armazena a energia qumica liberada por algumas reaes qumicas e fornece energia para as que necessitam.
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ATP
Molcula de alta energia; Libera grande quantidade de energia utilizvel quando perde seu 3 grupo fosfato terminal ADP;
Adenosina

+ H2O

Adenosina

+ Pi

+ Energia

Suprimento celular de ATP sempre limitado; Necessidade de reposio reao inversa adio de fosfato + energia = ATP; Energia fornecida por reaes de oxidao da clula (oxidao da glicose); ATP pode ser armazenado em todas as clulas.
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Bioenergtica

Bioenergtica
Energia capacidade de realizar trabalho Medida em kJ Reaes qumicas variao de energia A+BC+D Parte liberada na forma de calor; Parte como energia livre (G) disponvel para realizar trabalho til. Variao de energia G0 (padro pH 7, 25C) G0 (-) liberao de energia livre (exergnica) ATP; G0 (+) requer energia (endergnica)
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Bioenergtica
Clculo da energia livre (G0) Conhecer a energia livre de formao dos reagentes e produtos; Energia gerada ou requerida para formao de uma molcula a partir dos seus elementos constituintes. A+BC+D G0 = Gf0[C+D] Gf0[A+B] Gf0 negativo compostos se formam espontaneamente; H2O = - 237,2 kJ/mol Gf0 positivo no se forma espontaneamente. N2O = +104,2 kJ/mol
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Enzimas e reaes qumicas

Enzimas Catalisador biolgico; Aceleram as reaes qumicas; Possui stio ativo que se liga ao substrato colises eficientes e reduo da energia de ativao. Especficas para cada substrato cada uma catalisa somente uma reao; Funo crucial acelerar as reaes bioqumicas a uma T compatvel com o funcionamento normal da clula.
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Energia de ativao
Energia de ativao Quantidade de energia necessria para levar todas as molculas de uma reao qumica a um estado reativo. H2 + 1/2O2 H2O G0 = -237 kJ

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Ciclo cataltico

Ciclo cataltico da enzima frutose bifosfato aldolase que catalisa a reao: frutose 1,6-bifosfato gliceraldedo 3-fosfato + diidroxiacetona fosfato.

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Enzimas
Protenas globulares; Especificidade estrutura tridimensional do stio ativo; So extremamente eficientes N de turnover n mximo de substrato convertido em produto por uma enzima / segundo; 1 a 10.000 ou at 500 mil; DNA polimerase I = sintetiza 15 molculas DNA/s; Catalase = decompe 40 milhes de H2O2/s.

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Classificao das Enzimas

Classe Oxidorredutase Reao que catalisa Oxidao-reduo em que O e H so ganhos ou perdidos Transferncia de grupos funcionais (grupo amino, acetil, fosfato) Hidrlise (adio de gua) Exemplo Citocromo oxidase Lactato desidrogenase Acetato quinase Alanina deaminase Lipase Sacarase Oxalato descarboxilase Isocitrato liase Glicose-fosfato isomerase

Transferase

Hidrolase

Liase

Remoo de grupos de tomos sem hidrlise Rearranjo de tomos dentro de uma molcula Unio de 2 molculas (usando energia geralmente derivada da quebra do ATP)

Isomerase

Ligase

Acetil-CoA sintetase DNA ligase

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Enzimas
Componentes Componente protico apoenzima; Componente no-protico Cofator (ons) ou, Coenzima (algumas derivadas de vitaminas). Apoenzima + Cofator = holoenzima (ativa).

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Coenzimas
Auxiliam as enzimas - admisso de tomos removidos de substratos ou doao de tomos requeridos pelo substrato; So carreadores de eltrons removem eltrons do substrato e doam a outras molculas em reaes subsequentes; A maioria derivada de vitaminas; Ligao no permanente. Coenzimas importantes no metabolismo celular: Nicotinamida adenina dinucleotdeo NAD+ Reaes catablicas liberam energia Nicotinamida adenina dinucleotdeo fosfato NADP+ Reaes anablicas requerem energia
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Coenzimas
Outras coenzimas importantes Flavina mononucleotdeo FMN; Flavina adenina nucleotdeo FAD; Compostas por vitamina B e riboflavina.

Coenzima A CoA Derivado do cido pantotnico (vit B5) e vitamina B; Participa da sntese e degradao de gorduras e reaes de oxidao no ciclo de Krebs.

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Fatores que influenciam a atividade enzimtica

Temperatura Elevao da T acima da T tima Reduo da velocidade de reao; Desnaturao da enzima perda da estrutura tridimensional; Troca o arranjo dos aminocidos no stio ativo; Altera a forma do stio ativo; Perda da propriedade cataltica. Em alguns casos a desnaturao parcial ou completamente reversvel.
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Fatores que influenciam a atividade enzimtica

pH Enzimas tm pH timo mxima velocidade de reao; Alteraes no pH reduo da atividade enzimtica e da velocidade de reao; Alterao da estrutura tridimensional da enzima. Pode haver desnaturao. H+ e OH- competem com o H e com as ligaes inicas em uma enzima.
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Fatores que influenciam a atividade enzimtica

Concentrao de substrato Aumento da concentrao de substrato; Todos os stios ativos esto preenchidos; Alcanada velocidade mxima de reao.

Enzimas podem ficar inativas pela falta de substrato.

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Inibio enzimtica
Inibio competitiva molculas estruturalmente semelhantes competem pelo stio ativo da enzima; S cido para-aminobenzico (PABA) + enzima = c. flico I sulfanilamida. Produo de c. flico no ocorre mata bactrias; Humanos no usam PABA c. flico.

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Inibio enzimtica
Inibio no-competitiva o inibidor no compete com o substrato pelo stio ativo da enzima. Ele interage com outra parte da enzima Inibio alostrica; Muda a forma do stio ativo; Provoca reduo da atividade enzimtica (efeito pode ser reversvel); Pode ocorrer em enzimas que necessitam de ons metlicos para ativao; Substncias (cianeto e fluoreto) combinam ons e inativam enzimas.
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Inibio enzimtica
Inibio por retroalimentao ou do produto final Atividade enzimtica reduzida ou interrompida quando h produto final suficiente (inibio alostrica); Atua na primeira enzima da via metablica; Quando o produto consumido pela clula a atividade enzimtica retomada; Atua como controle bioqumico produo de aminocidos na clula, vitaminas, purinas e pirimidinas.

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Metabolismo microbiano

O que METABOLISMO???

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Metabolismo
Todas as reaes qumicas que acontecem dentro de um organismo vivo; Reaes liberam ou requerem energia;

Balanceamento de energia.

Fonte de energia molculas qumicas (nutrientes) absorvidos pela clula ou luz. Quebra das molculas libera energia armazenada e utilizada para executar atividades celulares.

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Porque as clulas precisam de energia???

Biossntese das partes estruturais da clula: paredes celulares ou membrana; Sntese de enzimas, cidos nuclicos, polissacardeos, fosfolipdios e outros componentes qumicos da clula; Reparo de danos e manuteno da clula; Crescimento e multiplicao; Armazenamento de nutrientes e excreo de produtos de escria; Mobilidade.
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Produo de energia
A transferncia de energia em sistemas biolgicos envolve reaes de Oxi-reduo

Oxidao perda de eltrons (ou tomos de H) Produz energia; Reaes de desidrogenao.

Reduo ganho de eltrons (ou tomos de H) Requer energia.

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Reaes de Oxi-reduo
Maioria das reaes bioqumicas envolvem transferncia de um tomo de H2 (ou seja 1 eltron e 1 prton); Eltrons no podem ficar soltos toda reao de oxidao requer acoplada uma reduo.

O composto que foi oxidado doador de eltrons, O composto que foi reduzido aceptor de eltrons.

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Reaes de Oxi-reduo
Composto oxidado

Composto reduzido

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Reaes de Oxi-reduo
Potencial de reduo (E0) - tendncia de doar ou receber eltrons: E0 negativo - maior tendncia de doar eltrons; E0 positivo - maior tendncia de receber eltrons. Par redox: FORMA OXIDADA + e- FORMA REDUZIDA

Forma oxidada (esquerda) / Forma reduzida (direita) CO2/glicose E0 = -0,43 V O2/H20 E0 = +0,82 V
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Reaes de Oxi-reduo
Potencial de reduo (E0) (E0) entre doador e aceptor de eltrons energia livre liberada usada para sntese de ATP;

No catabolismo o doador de eltrons designado como fonte de energia.

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succinato2- + NO3- fumarato2- + NO2- + H2O succinato2- + O 2 fumarato2- + H2O

Torre eletrnica Os pares redox esto dispostos com os doadores mais fortes no topo e os aceptores mais fortes na base.
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Produo de energia
Reaes de Oxidao-reduo A clula utiliza a energia de uma srie integrada de reaes de oxidao sequenciais para sntese do ATP Sistema de transporte de eltrons; Liberao gradativa de energia em vrias etapas; Maior eficincia na obteno de energia.

Doador de ee(O/R)1 eltrons

Composto reduzido que doa eltrons: nutriente ou composto resultante da quebra de nutrientes

(O/R)2

e-

e- Aceptor final (O/R)3 de eltrons

Composto oxidado obtido do ambiente. Aerbios O2 H2O Anaerbios nitrato, sulfato
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Energia liberada para sntese de ATP

Sistema de transporte de eltrons

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Reaes de Oxi-reduo carreadores de eMolculas carreadoras de eltrons Transportam e- de doador primrio at aceptor final; NAD e NADP carreadores de H2.

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Reaes de Oxi-reduo carreadores de eNAD/NADH (E0 = - 0,32V) Catabolismo; NADP/NADPH (E0 = - 0,32V) Anabolismo; Reaes redox celulares geralmente envolvem a presena de carreadores que atuam junto s enzimas COENZIMAS Algumas so livres e difusveis (NAD e NADP); Outras ligadas as enzimas (FAD) na membrana plasmtica; Mais importante o par NAD/NADH. Sem a presena das coenzimas as reaes enzimticas no ocorrem.
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Oxi-reduo envolvendo NAD+/NADH

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Oxi-reduo envolvendo NAD+/NADH

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Armazenamento de energia - ATP

O ATP formado pela adio de um grupo fosfato ao ADP, cuja energia de adio provm de reaes exergnicas (oxi-reduo) FOSFORILAO
Adenosina

P ADP

+ Pi

+ Energia

Adenosina

P ATP

P + H2O

ATP moeda energtica das clulas; Presente em baixas concentraes. Outros compostos de fosfato de alta energia: ADP Fosfoenolpiruvato Acetilfosfato
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Armazenamento de energia
Coenzima A Composto de alta energia produzido pelas clulas; Conserva energia liberada nas reaes exergnicas; Acetil-CoA derivado da Coenzima A; Ligaes sulfoanidrido (tioster) - geram energia livre de hidrlise promove ligao fosfato de alta energia.
Acetil-S-CoA + H2O + ADP + P acetato- + HS-CoA + ATP + H+

Importante na energtica de anaerbios (fermentao); Participa da sntese e degradao de lipdeos e no ciclo de Krebs.
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Ligaes de alta energia

Ligao tioster alta energia

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Armazenamento de energia
Microrganismos produzem polmeros insolveis (grnulos) Polmeros de glicose: Amido e Glicognio; Polmero lipdico: poli--hidroxibutirato, polidroxialcanoatos; Enxofre elementar quimiolitotrficos sulfurados.

Clula oxida os polmeros sntese de novos compostos celulares ou manter-se energeticamente.

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Metabolismo
Reaes qumicas reguladas por enzimas Reaes catablicas ou degradativas

Fornecem as unidades bsicas para a sntese dos constituintes celulares.

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Metabolismo
Reaes qumicas reguladas por enzimas Reaes anablicas ou biossintticas

-Geram materiais para o crescimento celular.

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Principais fontes energticas dos microrganismos

Quimioheterotrficos degradao de compostos orgnicos; Streptococcus lactis + glicose cido ltico + energia

Quimioautotrficos degradao de compostos inorgnicos; Nitrosomonas europaea + amnia nitrito + energia

Fototrficos luz no degradam substrato Anabaena cylindrica + luz absoro de luz (pigmento) energia

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Metabolismo Transferncia de energia

Acoplamento energtico das reaes anablicas e catablicas

Calor liberado

Molculas simples: glicose cidos graxos, glicerol, aminocidos

ATP
Reaes catablicas: Transferem energia da quebra de molculas complexas para o ATP Reaes anablicas: Transferem energia do ATP para sntese de molculas complexas

ADP + P

Molculas complexas: Amido, protenas e lipdeos

Calor liberado
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Obteno de energia nos sistemas biolgicos

Principais vias de obteno de energia em organismos quimioheterotrficos Carboidratos principal fonte de C e energia (glicose); CATABOLISMO DE CARBOIDRATOS 2 vias:

Aerbia O2 como aceptor final de eltrons; RESPIRAO Anaerbia molcula inorgnica (NO3-, SO42-) como aceptor final de e-.

FERMENTAO - molcula orgnica como aceptor final de eSntese de ATP

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Produo de ATP pelos microrganismos

Vias de fosforilao do ADP Sntese do ATP: Respirao sntese ATP fosforilao oxidativa. A energia liberada pela oxidao de compostos qumicos (nutrientes) utilizada para sntese de ATP a partir do ADP fora prton motiva; Fermentao sntese de ATP fosforilao a nvel de substrato. O grupo fosfato de um composto qumico removido e adicionado diretamente ao ADP; Fotofosforilao microrganismos fototrficos. Luz conduz as reaes de oxidao-reduo.
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Gliclise
Via Embden-Meyerhof 1 etapa do catabolismo de carboidratos; Gliclise quebra do acar catalisada por enzimas Oxidao da glicose (6C) 2 cido pirvico (3C) No requer oxignio. ETAPAS: 1 ETAPA Fase preparatria; 2 ETAPA Reaes de oxi-reduo e conservao de energia.
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Gliclise
isomerase

Etapa I Fase preparatria

fosfofrutoquinase

Aldolase

Gliceraldedo-3-P desidrogenase

Fosfogliceroquinase

Enolase

Etapa II Oxi-reduo Conservao de energia

Piruvato quinase 76

Resumo das etapas da Gliclise

1 etapa Fase preparatria 2 molculas de ATP so utilizadas enquanto uma molcula de glicose (6C) fosforilada, reestruturada e quebrada em 2 compostos de 3C: Gliceraldedo 3-fosfato (GP) e , Diidroxiacetona fosfato (DHAP). DHAP convertida imediatamente em GP; 2 molculas de GP so supridas para as reaes qumicas da 2 etapa.

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Resumo das etapas da Gliclise

2 etapa Conservao de energia 2 molculas de gliceraldedo 3-fosfato (3C) so oxidadas produzindo 2 molculas de cido pirvico (piruvato); 2 molculas de NAD+ so reduzidas a NADH; 4 molculas de ATP so formadas pela fosforilao em nvel de substrato.

SALDO DA GLICLISE: 2 ATP consumidas na 1 etapa 4 ATP formadas na 2 etapa Ganho de 2 ATP por molcula de glicose oxidada.
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Destinos do piruvato
1 Glicose (6C)

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Fermentao
Liberao de energia a partir de molculas orgnicas; Reduo de um composto gerado pelo substrato inicial. No requer oxignio; No ocorrem ciclo de Krebs e CTE (ausncia de NAD+ e FAD); Molcula orgnica como receptor final de eltrons; Baixa produo de ATP (2 ATP); Tipos de fermentao: Ltica; Alcolica.
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Fermentao
Recuperao do NAD+ Eltrons e prtons so transferidos do NADH para o piruvato ou seus derivados;

Garante suprimento de NAD+ para continuidade da gliclise.

ATP gerado somente durante a gliclise.

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Fermentao Estgio III

Reao de oxi-reduo com formao de produtos de fermentao

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Fermentao
Rendimento energtico 2 ATP porque???

Os tomos de C glicose so apenas parcialmente oxidados;

A diferena nos potenciais de reduo entre o doador primrio de e- e o aceptor final pequena.

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Fermentao ltica

- Fermentao homoltica - cido ltico como nico produto final; - Streptococcus, e vrias espcies de Lactobacillus; - Processos industriais Laticnios QUEIJOS, IOGURTES, ...

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Fermentao alcolica

- Produo de Etanol e CO2; - Converso de NADH em NAD+; - Saccharomyces cerevisae, Zymomonas; - Processos Industriais (bebidas, pes).

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Respirao celular - Quimioheterotrficos

Oxidao completa da molcula de glicose CO2; Regenerao do NAD a partir do NADH para continuidade da gliclise. ETAPAS: Vias glicolticas ocorrem na grande maioria das clulas vivas;

Ciclo de Krebs ou Ciclo do cido ctrico;

Caracterstica essencial - Cadeia de transporte de eltrons - Fosforilao oxidativa.

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Ciclo de Krebs
Ciclo do cido ctrico ou do cido tricarboxlico; Ocorre em aerobiose - descarboxilao total da glicose; Eucariotos - Sistema enzimtico localizado na matriz mitocondrial; Procariotos Citoplasma. Importncia: Acetil-CoA completamente oxidado a CO2 + H2O; Complementa a oxidao da glicose e guarda a energia dos eltrons (H+) na forma de NADH e FADH2 CTE.

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Ciclo de Krebs
OBSERVE OS RESULTADOS!!! 3 CO2 x 2 = 6 CO2 3 NAD+ + H+ 3 NADH 1 NADP+ + H+ 1 NADPH 1 FAD + 2H+ 1 FADH2 3 NADH x 2 = 6 NADH 1 FADH2 x 2 = 2 FADH2 1 NADPH x 2 = 2 NADPH 2 GTP 2 ATP (fosforilao em nvel de substrato).
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Gliclise + Ciclo de Krebs

RESULTADOS
GLICLISE 2 NADH DESCARBOXILAO PIRUVATO 2 NADH CICLO DE KREBS 6 NADH 2 FADH2 2 CO2 2 ATP 4 CO2 2 ATP TOTAL 10 NADH 2 FADH2 6 CO2 4 ATP

10 NADH + 2 FADH2 = 12 H oxidao completa da glicose 6 CO2 descarboxilao completa da glicose liberado para o meio
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Ciclo de Krebs
IMPORTNCIA BIOENERGTICA E BIOSSINTTICA Alguns de seus intermedirios so utilizados para a sntese de outros compostos (anabolismo) Via Anfiblica: cido oxaloactico pirimidinas cido -cetoglutrico arginina cido succnico citocromos cido mlico lipdio Acetil-CoA sntese de cidos graxos Produtos mais importantes transporte de eltrons: NADH, FADH2.
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Cadeia de transporte de eltrons (CTE)

Sequncia de molculas transportadoras que so capazes de oxidao e reduo; Redues do NADH e do FADH2 transferem energia para formao de ATP; Energia liberada formao gradiente de H+ na membrana fora prton-motiva; Clulas eucariticas cristas mitocondriais; Procariotos membrana plasmtica. Objetivo liberar energia quando e- so transferidos de compostos de alta energia para os de baixa energia.
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CTE
Principais molculas transportadoras Flavoprotenas (FMN flavina mononucleotdeo e FAD) Realizam alternadamente oxidaes e redues. Citocromos protena contendo Fe (heme) Existem na forma oxidada (Fe3+) ou reduzida (Fe2+). CTE - citocromos b, c1, c, a e a3. Ubiquinonas ou coenzima Q (Q) - natureza no protica. Variam de acordo com a bactria; FMN e Q absorvem e liberam prtons e eltrons; Citocromos transferem apenas eltrons.
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1 Transferncia de H+ + 2 e- do NADH para FMN que captura 1H+ FMNH2 e NAD+; 2 FMNH2 doa 2e- Q e transfere 2H+ p/ meio externo; 3 - Coenzima Q reduzida usando 2H+ do citoplasma; 4 Q transfere 2H+ para meio externo; 5 eltrons so transferidos sucessivamente de Q para os citocromos (oxi-red). Cit a3 transfere e- ao O2 que fica negativamente carregado e se combina com H+ para formar H2O. Fluxo e- - gradiente de H+ - fora prton-motiva ATP. 93

Gerao da Fora Prton motiva

O transporte de e- pelas molculas carreadoras estabelece um gradiente de prtons atravs da membrana;

Quimioosmose - protenas transportadoras separam H em prtons e eltrons. Eltrons so transferidos para a o carreador seguinte; Prtons so bombeados para a face externa da membrana;

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Fora Prton motiva

Ao final do processo, os eltrons so carreados ao aceptor final (O2 na respirao aerbia) reduo O2 H2O;

Acmulo de H+ no lado externo da membrana e dficit no lado interno. Gradiente de H+ e eletroqumico;

Gera-se uma energia potencial ao longo da membrana fora prton motiva;

Prtons retornam ao lado interno atravs da ATP sintase.

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Sntese de ATP
ATPsintase ou ATPase enzima localizada na membrana Responsvel pela sntese de ATP; Funciona como um motor; Canal para transporte de prtons para o meio interno; Promove rotao protenas e liberao de energia sntese ATP (ADP + Pi ATP + H2O).

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Sntese de ATP pela ATPase

a canalizao dos H+ medida que os H+ entram, a dissipao da FPM promove a sntese do ATP.

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Resumo da cadeia respiratria

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Resumo da respirao aerbica

CTE regenera NAD+ e FAD+ para retornarem gliclise e ao ciclo de Krebs. Gerao de ATP NADH bombea aprox. 3H+ 3 ATP FADH bombea aprox. 2H+ 2 ATP

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Resumo da respirao aerbica

Etapa Gliclise Ciclo de Krebs

Hidrognio 2 NADH 6 ATP 6 NADH 18 ATP 2 FADH2 4 ATP

ATP 4 ATP 2 GTP 2 ATP

Antes do C.K.: oxidao 2 piruvatos

2 NADH 6 ATP Total Geral Gasto 2 ATP na gliclise Saldo lquido 40 ATP - 2 ATP 38 ATP

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Resumo da respirao aerbica

Procariotos produzidos 38 ATP;

Clulas eucariticas produzidos 36 ATP perda de energia quando os e- so movidos atravs da membrana mitocondrial.

Resumo para respirao aerbia em procariotos:

C6H12O6 + 6O2 + 38ADP + 38Pi 6CO2 + 6H2O + 38ATP

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Respirao anaerbica
Receptor final de eltrons no o Oxignio; Compostos inorgnicos NO3- NO2- - Ciclo do nitrognio SO42- H2S Ciclo do enxofre S0 H2S Fe3+ Fe2+ CO32- CH4

Ocorre em muitos procariotos: Pseudomonas e Bacillus. Gera menos ATP crescimento lento.

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Respirao X Fermentao
Organismos fermentativos Habitam ambientes com fontes contnuas de nutrientes; Processo ineficiente, mas pode gerar grande quantidade de energia armazenada nas ligaes qumicas dos compostos formados.

Respirao Baixos nveis de nutrientes; Processo mais eficiente de gerao de energia.

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Catabolismo dos lipdios e das protenas

Proteases e polipeptidases Lipase

Desaminao dos aa Produzindo NH4+ que excretado. Descarboxilao e desidrogenao.

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Catabolismo dos quimioautotrficos

Utilizam CO2 como principal fonte de carbono; Fonte de energia: oxidao de compostos qumicos inorgnicos; Variedade de compostos qumicos usados:
Beggiatoa H2S Thiobacillus thiooxidans S Nitrosomonas NH3 Pseudomonas carboxydohydrogena CO Hydrogenomonas H2

CTE Gradiente de prtons sntese de ATP

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Catabolismos dos fototrficos - Fotossntese

Energia luminosa energia qumica (ATP) converso do CO2 em carboidrato (CH2O)n Fixao do CO2; Cianobactrias e algas e plantas verdes - pigmentos para absoro de energia luminosa nos tilacides: Clorofila a encontrada nos tilacides; Bacterioclorofilas bactrias prpuras e verdes sulfurosas; Carotenides, ficobilinas, ficocianinas, ficoeritrinas; Cada pigmento absorve energia luminosa com determinado comprimento de onda.
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Fotoautotrficos

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Fotossntese
Fase Clara Fotofosforilao Clorofila a (plantas, algas e cianobactrias), bacterioclorofila (outras bactrias) Energia luminosa convertida em energia qumica LUZ ADP + Pi ATP Reduo do NADP+ a NADPH.

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Fotofosforilao
Luz utilizada para produzir a fora prton-motiva; Promove a sntese do ATP.

Energia luminosa absorvida pelos pigmentos (clorofila) Excitao dos eltrons, que passam p/ molculas transportadoras, semelhante cadeia de transporte de eltrons; Passagem de prtons pela membrana e converso de ADP em ATP.

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Fotofosforilao
Fotofosforilao acclica - os eltrons liberados no retornam clorofila, sendo incorporados ao NADPH. Eltrons perdidos da clorofila so substitudos por ede molculas de gua (H2O) O2. Resultado da fosforilao acclica: ATP O2 NADPH (e- e H+ derivados da H2O) Na fase escura os eltrons so utilizados, junto com ATP, para reduzir o CO2 a compostos orgnicos.

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Fotofosforilao acclica

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Fotossntese
Fase escura Ciclo de Calvin-Benson Fixao do CO2 gasto de energia; Eltrons e ATP reduzem 6 CO2 em acares; ATP + NADPH + CO2 Acar

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Investimento: 6 CO2 18 ATP 12 NADPH

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Fotoautotrficos - Fotossntese
Fotossntese Oxignica Vegetais, algas e cianobactrias; Fotofosforilao acclica; Utilizam H2O para reduzir CO2 Carboidrato; Produo de O2 liberado para o meio.

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Fotoautotrficos - Fotossntese
Fotossntese Anoxignica Fonte de C compostos orgnicos; Bactrias verdes sulfurosas Chlorobium utilizam S, compostos de S (H2S) ou H2 para reduzir CO2 em compostos orgnicos e oxidam-se em SO42- ou H2O.
Bacterioclorofila clorossomos na memb. citoplasmtica.

Bactrias prpuras sulfurosas Chromatium mesmo acima. Diferenas: tipo de bacterioclorofila, localizao do enxofre armazenado e RNA ribossmico.
Bacterioclorofila membranas intracitoplasmticas.
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Classificao nutricional dos organismos

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Anabolismo

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Vias metablicas de uso de energia

Processo de sntese de macromolculas celulares. Utilizao da energia das ligaes fosfato do ATP obtida no catabolismo; Produo de novos componentes celulares; Movimento flagelar; Transporte de substncias atravs da membrana. Caractersticas principais das vias biossintticas: Sntese ou captao unidades estruturais bsicas (monmeros); Ativao monmeros (ATP); Unio unidades ativadas estrutura macromolecular.
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Biossntese de Polissacardeos
Importncia - constituintes celulares, reserva de energia; Sntese de Glicose a partir de intermedirios produzidos na gliclise, Ciclo de Krebs; Recomposio da glicose em polissacardeos complexos Glicognio; Fosforilao e ligao das molculas de glicose com uso de ATP Glicose 6-fosfato + ATP Adenosina difosfoglicose (ADPG) Ligaes de ADPG Sntese de Glicognio em bactrias Glicose 6-fosfato + UTP Uridina difosfoglicose (UDPG) Ligaes de UDPG Sntese de Glicognio em animais.
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Biossntese de Polissacardeos
Biossntese de peptideoglicano Obtido a partir do UDP-N-acetilglicosaminase (UDPNAc) composto relacionado ao UDPG; UDPNAc formado a partir da frutose 6-fosfato + UTP.

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Biossntese de Polissacardeos - Riboses

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Biossntese de Polissacardeos
Sntese de glicose a partir de outros substratos; Gliconeognese inverso da via glicoltica.

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Biossntese de Aminocidos
Aminocidos: importantes para a sntese de protenas; Grupamento amino - precursor nitrognio inorgnico (NH3) glutamato; Ciclo de Krebs fornecedor dos precursores da sntese de aminocidos; Reaes de Aminao adico de grupo amino ao cido pirvico ou cido orgnico (ciclo Krebs) aminocido; Transaminao grupo amino oriundo de um aminocido prexistente. Unio aa protenas envolve sntese de desidratao e ATP
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Biossntese de Lipdeos
Importncia: Formao de constituintes celulares (membranas fosfolipdeo); Colesterol membrana eucariontes; Carotenides pigmentos. Armazenamento de energia. Biossntese de lipdeos Composio varivel Diversas rotas de sntese; Gorduras unio de cidos graxos e glicerol; Glicerol obtido da diidroxiacetona fosfato (gliclise) cidos graxos - a partir do Acetil-CoA.
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Biossntese de Purinas e Pirimidinas

Nucleotdeos DNA e RNA Nucleotdeos so formados por: Uma pentose via pentose fosfato ou Entner-Doudoroff Um grupo fosfato Uma purina ou pirimidina Purinas e pirimidinas so formadas a partir de: Aminocidos (cido asprtico, glicina e glutamina) obtidos atravs de intermedirios da gliclise e ciclo de Krebs. C e N dos aminocidos formam anis de purinas e pirimidinas.
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Pirimidina

Purina

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Integrao do metabolismo
Catabolismo produo de energia a partir de compostos orgnicos, inorgnicos e luz; Anabolismo utilizao da energia nas reaes de biossntese.

Catabolismo e anabolismo unidos por intermedirios comuns (essenciais): Glicose 6-fosfato carboidratos, nucleotdeos Diidroxiacetona fosfato glicerol cidos fosfoglicrico, fosfoenolpirvico e pirvico aminocidos; Acetil-coA cidos graxos, etc.
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Integrao do metabolismo
Unidos por vias metablicas comuns ciclo de Krebs Participao na oxidao da glicose Intermedirios para sntese de aminocidos
Vias anfiblicas

Regulao das reaes de sntese e quebra Coenzimas diferentes para vias opostas NAD+ - catabolismo NADP+ - anabolismo

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