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Profesorado de Educacin Secundaria en Biologa Optativa Tcnicas de laboratorio Prof.

Priscilla De Gregorio

Trabajo Prctico N 2 MICROSCOPA La mayora de las clulas eucaritas miden entre 10 y 30 micrmetros de dimetro, entre 3 y 10 veces menos que el poder de resolucin (medida de la capacidad para distinguir un objeto de otro; es la distancia mnima que debe haber entre dos objetos para que sean percibidos como objetos separados) del ojo humano; de aproximadamente 1/10 milmetros o 100 micrmetros. Las clulas procariotas son aun ms pequeas. Para distinguir clulas individuales, y con mayor razn las estructuras que las componen, debemos usar instrumentos que suministren una mejor resolucin. La mayor parte del conocimiento actual acerca de la estructura celular se obtuvo con varios tipos de microscopios. En este laboratorio se usar el microscopio para apreciar detalles de organismos pequeos y microscpicos (invisibles a simple vista), se conocern los diferentes tipos de microscopios y sus usos, y se estudiarn varias clases de clulas, sus estructuras y funciones.

Objetivo General Valorar la importancia del microscopio como instrumento bsico para el estudio e investigacin en las Ciencias Biolgicas. Objetivos Especficos - Identificar las diferentes partes que constituyen el microscopio y reconocer las funciones de cada una de ellas. -Adquirir habilidad en el uso y manejo correcto del microscopio, siguiendo las indicaciones de las guas de laboratorio. -Conocer las diferencias entre el microscopio compuesto y el estereoscopio. -Utilizar ambos microscopios correctamente. -Conocer las similitudes y las diferencias bsicas entre un microscopio compuesto y un microscopio de electrones. -Hacer preparados simples para el microscopio y aprender a enfocarlas a magnificaciones. diferentes

TIPOS DE MICROSCOPIOS

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Hay dos tipos principales de microscopio: el microscopio de luz y el microscopio de electrones. El microscopio de luz usa un rayo de luz para iluminar los objetos, que son entonces magnificados y enfocados por lentes de cristal. Los microscopios de luz ms comunes son el estereoscopio (microscopio de diseccin) y el microscopio compuesto o microscopio ptico. El estereoscopio se utiliza para observar objetos relativamente grandes, de aproximadamente 0,05 a 20 milmetros. El microscopio compuesto se utiliza mayormente para estudiar objetos o secciones finas, entre aproximadamente 0,2 a 100 micrmetros. Con el microscopio ptico podemos distinguir las estructuras ms grandes dentro de las clulas eucariotas y tambin clulas procariotas individuales. Sin embargo, no podemos observar la estructura interna de las clulas procariotas ni distinguir entre las estructuras ms finas de las clulas eucariotas. Para ver ms detalles se usan tinciones que resaltan partes de lo que deseamos estudiar o se emplean microscopios especializados. Las clulas vivas y sus partes componentes son, casi completamente transparentes a la luz porque el 70% del peso de las clulas, aproximadamente, corresponde al agua, a travs de la cual la luz pasa fcilmente. Para crear suficiente contraste cuando se usa el microscopio ptico, las clulas deben ser tratadas con colorantes u otras sustancias que se adhieran diferencialmente a componentes sub-celulares especficos, o reaccionen con ellos, produciendo regiones de opacidad diferente. Entre algunos de los microscopios especializados que usan una fuente de luz estn el microscopio de campo oscuro y el microscopio de fluorescencia. Los microscopios de campo oscuro se usan para observar especmenes de tamao pequeo no coloreados, tales como microorganismos acuticos, ovocitos, clulas en cultivo. Tambin se utiliza para la observacin de clulas mviles, como el Treponema pallidum, una espiroqueta causante de la sfilis, la cual con la microscopa ptica ordinaria es muy difcil de visualizar. Estudio de procesos fisiolgicos como mitosis y migracin celular. En el microscopio de campo oscuro, la luz no pasa directamente a travs del organismo, sino que un cono hueco de luz (cuyo centro es oscuro) incide lateralmente sobre la muestra y slo los rayos que son difractados o reflejados por las estructuras penetran en la lente objetivo y la clula aparece como un objeto luminoso sobre un fondo oscuro, lo cual es similar a un cielo nocturno en el cual brillan las estrellas o al iluminar con una linterna un cuarto oscuro en donde las partculas de polvo flotantes en el aire se tornan visibles porque reflejan o difractan la luz. El microscopio de fluorescencia usa luz ultravioleta en vez de luz visible; los

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organismos o clulas con compuestos fluorescentes emiten luz visible al iluminarlos con luz ultravioleta, por lo cual brillan sobre un campo oscuro. Los microscopios electrnicos usan un haz de electrones, en vez de luz, y sus lentes son imanes en vez de lentes de cristal. Estos microscopios proveen un aumento de hasta 200000 veces el tamao del organismo y por lo tanto se utilizan para observar organismos o partculas sumamente pequeas, como los virus, o detalles celulares que de otra manera no podramos ver. Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de transmisin (Transmission Electron Microscope-TEM) y el microscopio electrnico de barrido (Scanning Electron Microscope-SEM). Con el microscopio electrnico de transmisin se observan imgenes planas de organelas y de otros detalles intracelulares, mientras que con el microscopio electrnico de barrido se observan imgenes tridimensionales de las superficies de estructuras.

PARTE PRCTICA 1. MICROSCOPIO COMPUESTO

PARTES DEL MICROSCOPIO El microscopio est formado por los siguientes sistemas: 1. un sistema estructural estativo o mecnico. 2. sistema ptico.

1. Sistema estructural estativo o mecnico. Es el armazn metlico que sostiene el sistema ptico, dndole la posicin adecuada y permitiendo los movimientos necesarios para una correcta coordinacin entre ambos sistemas, lo que permitir la mejor observacin del preparado. En este sistema se distinguen: Base o pie: que da la base de sustentacin al microscopio. Generalmente metlico, macizo, para conferirle estabilidad, generalmente es el asiento de la lmpara de iluminacin. Columna o Brazo: es el pilar que sostiene el tubo, platina, condensador, lentes oculares y los lentes objetivos y sobre el cual estn montados los tornillos focalizadores macro y micromtricos. Tubo o can: es un cilindro metlico hueco con su superficie interna completamente negra para evitar reflexin de la luz. En su extremo superior va el ocular (cerca del ojo del observador) y en su extremo inferior el revlver que porta el juego de objetivos (prximo al objeto).

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Revolver o tambor: mecanismo situado en el extremo inferior del tubo, que lleva los diferentes objetivos, que posee el microscopio. Al guiar el revlver se coloca en posicin el objetivo deseado. En el revlver los objetivos estn construidos de tal manera que, estando en foco uno de ellos, todos los dems quedan en foco al rotar el revlver. Esto se conoce con el nombre de sistema parafocal. Platina: es una plataforma horizontal con un orificio central que permite el paso de los rayos luminosos sobre el cual se coloca el objeto a observar, montado sobre un portaobjeto. Posee dos pinzas destinadas a sujetar la preparacin. Carro: es un dispositivo ubicado sobre la platina, cuya funcin es sujetar y mover la placa que se va a estudiar. Posee dos tornillos que permiten movimientos horizontales (hacia adelante, hacia atrs, hacia la derecha y hacia la izquierda) del portaobjeto. Tornillos para focalizacin: la platina se desliza verticalmente por medio de dos tornillos adaptados sobre una cremallera: uno para movimientos rpidos o de enfoque aproximado (Tornillo macromtrico) y el otro para movimientos lentos destinados al enfoque de precisin (Tornillo micromtrico). Ajuste de distancia interpupilar: Aumenta o disminuye la distancia entre los lentes oculares para compensar por diferencias en la distancia entre los dos ojos. 2. Sistema ptico. Est integrado por el aparato de iluminacin (lmpara, diafragma, condensador y filtros) y el sistema de lentes (objetivos, oculares). Estos elementos son los que permiten la iluminacin, ampliacin y la visin aumentada del objeto. Sistema de lentes: Esta montado en el tubo y est formado por el sistema de lentes1 que forman la imagen. Objetivo: Est formado por asociaciones de lentes convergentes2 que van montadas al revolver y pueden ser cambiados de posicin con slo rotarlos. Es la pieza ms importante del microscopio. Reciben el nombre de objetivos porque son los lentes que estn ms cerca del objeto. Generalmente el revlver lleva tres o cuatro objetivos. Estos lentes son parafocales porque permiten que la imagen quede casi enfocada al cambiar de objetivo. Usualmente hay cuatro lentes objetivos: a. Rastreo magnifica cuatro veces (4x) b. Baja potencia 10x

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c. Alta potencia 40x d. Inmersin de aceite 100x. Objetivo que slo puede ser utilizado con aceite de inmersin. Estos objetivos se identifican por tener grabada la palabra oil (aceite, en ingls) en un lado, cerca del nmero que indica el aumento del objetivo. Los otros objetivos no deben ser usados con aceite de inmersin ya que se pueden daar si son inmersos en este. El uso de lentes de inmersin es esencial cuando se observan estructuras menores de 10 m de tamao. Por ejemplo, este aumento se utiliza cuando se requiere determinar la forma de una clula bacteriana. El aceite de inmersin no incrementa el aumento de los lentes, pero mejora la resolucin y la nitidez de la imagen producida por dicho objetivo. Cuando la luz pasa a travs de un material a otro, por ejemplo del vidrio al aire, la luz se refracta o distorsiona. Al colocar una gota de aceite de inmersin, el cual tiene el mismo ndice de refraccin que el vidrio, entre el objetivo de 100X y el portaobjetos se reduce significativamente la dispersin de la luz que ocurrira si no se utiliza el aceite de inmersin. Por ello, se incrementa la resolucin de la imagen. Ocular: Colocado en el extremo superior del tubo al cual el observador aplica el ojo. El microscopio es monocular si tiene un ocular y binocular si tiene dos oculares. Hay oculares de 3.5x; 5x; 6,3x; 10x; 12.5x; 15x; 20x y 25x. Estn formados por dos lentes planas convexas: I.- Lente ocular. II.- Lente colectora o de campo. La lente inferior colectora de campo recibe la imagen real3 dada por el objetivo, la refracta y origina en el plano focal de la lente ocular la imagen libre de aberraciones. La lente ocular acta como una lupa y forma una imagen virtual4 y definitiva del objeto que en relacin a la anterior es mayor y derecha. Por lo tanto, la imagen del microscopio compuesto es mayor que el objeto, virtual e invertida.

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Figura 1. Sistema de Lentes del microscopio compuesto

Lentes: Son medios transparentes limitados por dos superficies, siendo curvas al menos una de

ellas
2

Lentes convergentes: Son ms gruesa por el centro que por el borde, y concentran (hacen

converger) en un punto los rayos de luz que las atraviesan.

Figura 2. Tipos de lentes convergentes


3,4

Formacin de imagen: Si tomas una lente convergente (lupa) y la mueves, acercndola y

alejndola, comprobars que para una cierta distancia se forma una imagen invertida y de menor tamao de los objetos que se encuentran alejados de la lente. Cuando es posible proyectar la imagen formada, decimos que se trata de una imagen real, y si no la podemos proyectar la denominamos imagen virtual.

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Figura 3. Las lentes convergentes, para objetos alejados, forman imgenes alejadas y de menor tamao.

Figura 4. Para objetos prximos forman imgenes virtuales derechas y de mayor tamao.

Anillo de enfoque del lente ocular izquierdo: Se usa para enfocar bien la imagen con el ojo izquierdo luego de haber enfocado con el ojo derecho; este ajuste compensa por la diferencia entre la agudeza visual de ambos ojos.

Aparato de iluminacin: Lmpara: Provee una intensidad variable de iluminacin Condensador: Es un elemento cnico que posee un sistema de dos lentes convergentes que recogen o concretan los rayos luminosos para enviarlos al objetivo por el agujero de la platina. Existe un tornillo manual que permite guardar la altura del condensador. Esta graduacin es importante cuando se trabaja con objetivos de gran aumento (40x, 100x), ya que en la medida que se trabaja con stos objetivos el condensador debe subirse. Diafragma: Est ubicado entre la fuente de luz y el condensador, inmediatamente debajo de la platina, su funcin es regular la intensidad de luz que atraviesa el objeto. El diafragma tiene una palanquita que al moverla hacia delante o hacia atrs agranda o achica el orificio central, dejando pasar mayor o menor cantidad de luz respectivamente.

DETERMINACIN DEL AUMENTO El aumento es la capacidad del microscopio de agrandar una imagen. La resolucin es la capacidad del instrumento de dar imgenes bien definidas de puntos situados muy prximos entre s. Como el microscopio tiene dos sistemas pticos, cada uno de ellos es capaz de agrandar la imagen, el aumento total es igual al producto de los aumentos dados por el ocular y el objetivo respectivamente. El aumento est impreso o grabado a un lado de los objetivos y oculares o en la

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parte superior en el caso de los oculares. Este aumento se simboliza con un nmero seguido de una X (ejemplo, 10X). Es importante anotar los diferentes aumentos utilizados para poder comparar el tamao relativo de las imgenes que se observen. En muchos casos se requerir de usar uno o varios aumentos para observar todos los detalles de la muestra.

PREPARACIONES MICROSCPICAS Debemos tener en cuenta que a travs del microscopio solamente se pueden observar objetos que dejan pasar rayos de luz, por esta razn el preparado debe ser lo ms delgado y transparente posible, pues un preparado grueso solo nos permite observar una mancha negra. Los detalles solo se observan si la preparacin es lo suficientemente delgada para que sea transparente con la luz que recibe. Las preparaciones microscpicas pueden ser acuosas o en seco. Las preparaciones acuosas son las ms simples y fciles usadas para examinar cualquier objeto fluido, como agua de estanque o sangre. Se deposita una gotita del lquido que se desea observar en el centro del porta-objeto, se coloca el cubre-objeto sobre el porta, forme con las dos lminas un ngulo de 45 grados y luego deje caer suavemente la laminilla cubre-objeto sobre el preparado, evitando la formacin de burbujas. El lquido no debe rebosar los bordes del cubre-objeto, en caso de que suceda seque cuidadosamente el lquido sobrante usando papel absorbente o papel toalla. La preparacin queda as lista para la observacin. Estas preparaciones son de corta duracin porque se secan rpidamente; para hacerlas ms duraderas debe cerrarse hermticamente los bordes del cubre objeto; la duracin de sta preparacin no es indefinida. Los bordes se pueden cerrar con vaselina o esmalte. Un cierre ms hermtico se consigue cerrando con blsamo de Canad. Las preparaciones en seco como lo ndica su nombre, se hacen para observar objetos secos, tales como alas de insectos. Aqu se utiliza goma arbiga, la cual se extiende sobre el porta, luego se deposita el objeto sobre la superficie y se deja endurecer la goma. Una vez endurecida la goma se pone un poco de blsamo de Canad sobre el objeto y se coloca el cubre-objeto.

COLORANTES Los colorantes son sales compuestas por un cido y una base. Se clasifican en cidos, bsicos y neutros, segn la parte de los mismos que imparta el color. En los colorantes cidos el

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grupo cromforo, el que imparte el color, es el componente cido, el componente bsico es incoloro. Lo contrario sucede con los colorantes bsicos. Los colorantes neutros tienen coloreado el componente cido y el bsico. La mayora de los colorantes son sintticos, aunque se emplean todava algunos naturales. La hematoxilina y el carmn son los colorantes naturales ms importantes para la tincin de tejidos. El carmn es producido por la conchinilla (Coccus cacti). La hematoxilina se extrae de la madera de un rbol de Mxico, el palo Campeche. Existen dos tcnicas de tincin de uso general: la coloracin seca o de tejidos muertos y la coloracin vital o de tejidos vivos.

USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO Antes de comenzar a usar el microscopio deben conocerse ciertas reglas: - El microscopio es un instrumento costoso y de precisin, con muchas partes delicadas, por lo tanto, debemos darle el mejor cuido posible. - Al llevar el microscopio de un lugar a otro, sostngalo siempre con ambas manos, una colocada debajo de la base y la otra sosteniendo la columna o el brazo del instrumento. - Cuando deposite el microscopio sobre la mesa, hgalo con delicadeza. - No arrastre el microscopio sobre la mesa, o dentro del gabinete donde se guarda; esto produce vibraciones que desalinean los lentes. - Cuando guarde el microscopio doble el cordn elctrico alrededor de la base del instrumento. - Use siempre cubre-objetos cuando observe en agua u otros lquidos - Antes de usar el microscopio, verifique que los oculares y los objetivos estn limpios. Nunca toque los lentes con los dedos. Si tiene que limpiar un lente, use papel de lente seco o humedezca el lente con su aliento y frtelo muy suavemente con el papel de lente. Una de las causas principales de una imagen borrosa y poco definida es que las lentes estn sucias, especialmente polvo, huellas digitales y depsitos grasosos dejados por el roce de las pestaas con los lentes oculares. -Antes de apagar la fuente de luz, llevar el dispositivo que regula la intensidad luminosa hasta O (cero). -Dejar el microscopio con el objetivo de menor aumento en la posicin de enfoque y la platina en su mxima posicin superior.

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1. Enchufe el microscopio, prenda el iluminador. 2. Ajuste la distancia intraocular para adaptar la distancia entre los lentes oculares a la distancia entre sus ojos. El propsito principal de tener dos lentes oculares, en vez de uno, es eliminar el cansancio que se produce al mantenerse un ojo cerrado y reducir la interferencia de luz ambiental y de otras imgenes si se mantiene el ojo abierto. La distancia interpupilar vara para cada persona y por lo tanto debe ajustarse cada vez que se use el microscopio (Figura 5).

Figura 5. Simplemente se empuja o hala a los lados, en donde se sostiene los oculares para ajustar el ancho.

3. Rote el revlver para iniciar la observacin con el objetivo de menor aumento, usualmente 4x o 10x, segn sea el caso (Figura 6).

Figura 6. Rotacin del revlver para colocar en posicin al objetivo deseado.

4. Usando la manija de abertura del diafragma, abra el mismo a aproximadamente la mitad de su capacidad de abertura (Figura 7).

Figura 7. Perilla del condensador para ajustar el nivel de luz que pasa a travs de la muestra.

5. Utilizando el botn respectivo, levante el condensador hasta su posicin ms alta (Figura 8).

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Figura 8. Botn para subir y bajar el condensador.

6. Coloque el preparado en la platina con el lente objetivo de 4x (el ms corto) en posicin vertical. Abra el gancho de la platina mecnica, monte el portaobjeto en el centro sin tocar el lente objetivo con el portaobjeto y cierre el gancho suavemente. Use los dos tornillos de la platina para centralizar preparado debajo del lente objetivo. RECUERDE!!! Siempre que monte o remueva portaobjetos de la platina, el lente objetivo colocado en posicin vertical debe ser el de de 4x el de 10x.Los objetivos de 40x o 100x quedan muy cerca del portaobjeto, lo que aumenta grandemente la probabilidad de rayar el objetivo o romper el portaobjeto.

7. Use el tornillo macromtrico para subir la platina hasta la posicin ms alta. Mirando por los lentes oculares, use el tornillo macromtrico para bajar la platina hasta que el objeto quede en foco (Figura 9).

Figura 9. Botn de ajuste del macromtrico utilizado para proporcionar un mayor acceso a la platina y el ajuste inicial de la imagen.

8. Use el tornillo micromtrico para obtener una imagen en perfecto foco. Cierre el ojo derecho y gire el ajuste del lente ocular izquierdo hasta obtener una imagen perfectamente enfocada. Al igual que la distancia interpupilar, este ajuste debe hacerse al comienzo de cada laboratorio (Figura 10).

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Figura 10. Botn del ajuste del micromtrico usado para obtener el enfoque mximo.

9. Para incrementar el aumento se procede como sigue: Asegrese de que su muestra est enfocada correctamente con el objetivo de ms bajo poder. Asegrese de que el movimiento del objetivo no toque la placa y se deslice adecuadamente, mueva el revlver al siguiente objetivo de superior aumento y que est en la posicin correcta sobre la muestra. La mayora de los microscopios tienen posiciones en donde el objetivo, si est colocado adecuadamente, hace un ruido seco o chasquido. 10. Use el tornillo micromtrico para que sea ntida su observacin. No debiera tener que utilizar el tornillo macromtrico, si el enfoque anterior fue el adecuado. El espcimen u objeto debe mantenerse en el centro del campo de visin. Despus de cambiar el lente objetivo, aumente ligeramente la apertura del diafragma y la intensidad del iluminador (los lentes objetivos de mayor aumento requieren mayor apertura del diafragma y mayor intensidad de iluminacin). 11. Si se necesita usar aceite de inmersin, se requiere usar una gota del mismo en la placa, en el sitio que se desea observar. (Aceite mineral u otros aceites no deben ser utilizados). Al mover el revlver hacia la posicin del objetivo de inmersin, detngase a media distancia entre el objetivo anterior y el de inmersin (Figure 9).

Figura 11. Adicin de aceite de inmersin previo al cambio al lente de inmersin. Observe que el revlver se encuentra a media distancia entre los objetivos, siendo el lente de inmersin uno de ellos.

12. Aada la gota de aceite de inmersin sobre el centro de la placa en observacin. 13. Mueve el revlver de manera que el objetivo de inmersin est directamente sobre la placa. La gota de aceite de inmersin debe formar un puente entre el objetivo y la placa. 14. Use el tornillo micromtrico para observar una imagen ntida de su muestra.

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15. Ajuste el condensador, incrementando la cantidad de luz que proviene del condensador utilizando la manija del diafragma (los lentes objetivos de mayor aumento requieren mayor apertura del diafragma y mayor intensidad de iluminacin). 16. Nota importante: Asegrese de que los otros objetivos no se impregnen de aceite de inmersin, ya que se pueden daar. 17. Cuando termine la observacin con el lente de inmersin, baje la platina, limpie de inmediato el objetivo del aceite adherido y remueva la porta-objeto con el aceite. Limpie el aceite del portaobjetos si se van a volver a utilizar o si son permanentes de laboratorio. Los objetivos se pueden limpiar con papel de lente u agua destilada. Solamente use papel de lente para limpiar los objetivos ya que otros materiales como, papel toalla, toallitas, otros, pueden daarlos. 18. Cada vez que se requiera remover un porta-objeto, baje la platina, para posteriormente removerlo. De esta manera se evitar que por un descuido se dae el objetivo al rozarlo con el porta.

Ejercicio 1: PARTES DEL MICROSCOPIO COMPUESTO En este ejercicio se estudiarn las partes del microscopio compuesto y sus funciones Materiales - Microscopio compuesto Procedimientos - Localice las siguientes partes del microscopio y rotlelas en la Figura 12. Aprenda las funciones de cada parte.

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Figura 12. El microscopio compuesto. Rotule todas las partes indicadas.

Ejercicio 2: DETERMINACIN DEL AUMENTO Materiales - Microscopio compuesto Procedimiento 1. Observe los distintos aumentos de oculares y objetivos del microscopio y conteste las siguientes preguntas

Cul es el aumento de los oculares del microscopio compuesto? ____________ Cul es el aumento de los objetivos de su microscopio compuesto? ____________, ____________, ____________, ____________ Cul es el mximo aumento que puede obtener con su microscopio compuesto? ________________ Con el uso de aceite de inmersin? ____________ Sin el uso de aceite de inmersin? _____________

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Ejercicio 3: USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO En este ejercicio se aprender a usar correctamente el microscopio compuesto y a obtener la imagen ms clara y detallada que el instrumento puede brindar.

Materiales - Microscopio ptico compuesto - frasco gotero con agua destilada - porta y cubreobjetos - papel impreso o peridico -fibras de lana o algodn - tijera

Procedimiento Prctica con preparado de la letra e 1. Recortar la letra e de cualquier peridico o revista, se montara en un portaobjeto con una gota de agua y se cubrir con un cubre objetos. 2. Coloque el portaobjeto con la letra e en la platina con el lente objetivo de 4x. 3. Enfoque de acuerdo a lo estudiado previamente 4. Ahora se proceder a efectuar las observaciones de su espcimen El efectuar dibujos lo ms preciso posible de sus observaciones es extremadamente importante. Estos dibujos sern de mayor importancia, especialmente cuando se estn haciendo comparaciones de dibujos efectuados en diferentes perodos. Sera adecuado trazar un crculo que representa su rea de observacin al microscopio y luego aada un rayado tenue dentro del crculo que le sirva de gua (lugar y tamao), anote el aumento que se est utilizando al momento de efectuar sus dibujos. Indicacin: Dibuje lo que observa. Observe la parte superior de la letra e vista desde el microscopio.

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Cmo es la posicin de la parte superior de la letra e, si se le compara con la observacin efectuada cuando no se est utilizando el microscopio? Son diferentes?

Si se necesita observar hacia el lado izquierdo de la muestra, hacia qu direccin se necesita mover la placa? _______________________

Si se necesita observar la parte superior de su muestra, hacia qu direccin necesita mover la placa? ________________________

5. Incremente el aumento de acuerdo a lo estudiado previamente

Nota las diferencias en la observacin de la letra e a medida que va pasa a un aumento superior o diferente? _________________________

Prctica con preparado de fibra de lana o algodn 1. Coloca varias fibras de lana o algodn de diferentes colores sobre un porta-objetos, coloque el cubre-objetos, enfoque con el menor aumento. 2. Esquematice sus observaciones.

3. Cuntos fibras puede distinguir? 4. Cuntos fibras puede distinguir a 100x y a 400x? 5. La resolucin (capacidad para ver detalles) aumenta o disminuye con el aumento?

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PARTE PRCTICA 2. ESTEROSCOPIO El microscopio estereoscpico posee una profundidad de foco (la porcin del objeto perfectamente enfocada) mucho mayor que la del microscopio compuesto; ambas caractersticas le permiten producir imgenes tridimensionales. La profundidad de foco es muy pequea, especialmente con los lentes objetivos de mayor aumento del microscopio compuesto, y por tal razn en el este caso vemos una imagen plana. El poder de resolucin y de aumento del estereoscopio son mucho menores que las del microscopio compuesto y por esta razn el estereoscopio se usa para estudiar objetos y especmenes relativamente grandes, generalmente presentan magnificaciones menores a los 100X (razn por la cual tambin se le llama microscopio de diseccin). Existen varias diferencias entre un microscopio compuesto y un microscopio de diseccin. Generalmente la mayora de los microscopios de diseccin no poseen un botn de ajuste micromtrico. La fuente de luz se ubica en la parte superior o puede ser transmitida a travs de la platina, ajustando el espejo debajo de la muestra. Muchos microscopios de diseccin no tienen objetivos separados para incrementar el aumento, pero tienen un botn de aumento (zoom) que puede aumentar o disminuir dicho aumento. Nota: Algunos microscopios de diseccin tienen adems lentes auxiliares o suplementarios en la parte inferior de la cubierta de los objetivos o del cabezal. Si estos lentes se encuentran presentes deben ser incluidos en la determinacin del aumento. Las muestras son colocadas sobre la platina y se les mueve a mano. Use los pasos que se indican a continuacin, ignorando a aquellos que no aplican para su microscopio. En este ejercicio se aprender el uso correcto del estereoscopio

Materiales -Estereoscopio (Microscopio de diseccin) -Lmpara -Varios especmenes

Procedimiento 1. Escoja un espcimen. Puede ser una hoja, una flor o un insecto. 2. Ponga el espcimen en la platina; si est hmedo colquelo sobre una placa Petri o una laminilla.

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3. Prenda y ajuste la fuente de luz. Algunos microscopios tienen la fuente de luz integrada al microscopio mientras que otros la tienen aparte. Asegrese de que la fuente de luz est iluminando su espcimen. 4. Enfoque el objeto que desea ver y muvalo hacia arriba, hacia abajo y hacia los lados. Hacia dnde se mueve la imagen? Es esta observacin distinta o igual a la observacin registrada con el microscopio compuesto?

5. La orientacin del espcimen observado por el microscopio de diseccin es diferente a su orientacin cuando no es observado con el mismo? Hay diferencias con respecto al microscopio compuesto?

6. Qu diferencias puede enumerar entre este microscopio y el microscopio compuesto?

7. Determine el aumento de su muestra usando la frmula siguiente: Aumento Total = Ocular X Lente Auxiliar X Graduacin en el Botn de Ajuste de Aumento (zoom). ________ = ________ X ________ X __________

7. Cul de los dos microscopios tiene ms resolucin?

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