UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS E INGENIERA PROGRAMA DE BIOLOGIA 1. CURSO: 2. CODIGO: 3. SEMESTRE: 4.

AREA: Compuestos Orgnicos 640202 II Bsica

GUIA DE PRACTICAS DE LABORATORIO DE COMPUESTOS ORGANICOS

JUSTIFICACION
El profesional de las ciencias biolgicas, en su desempeo, constantemente hace contacto con organismos y seres vivos. Todos ellos poseen compuestos orgnicos que contienen grupos funcionales caractersticos que le confieren propiedades fsicas y qumicas propias, que les permiten cumplir sus funciones especficas. Por lo anterior es fundamental que el profesional de Biologa no solo deba tener claridad acerca de la estructura y propiedades sino que debe apropiar los mecanismos, tcnicas y herramientas que le permitan reconocer los fundamentos de la conducta qumica e identificar los compuestos orgnicos en muestras de objetos de inters. Este conocimiento le permitir ms adelante profundizar en la comprensin de procesos y reacciones que se dan en organismos y seres de mayor complejidad. Por esta razn la realizacin de las prcticas del curso de Compuestos orgnicos del programa acadmico de Biologa de la Facultad de Ciencias Bsicas e Ingeniera de la Universidad de los Llanos, se orienta a la identificacin cualitativa de sustancias orgnicas extradas de materiales vegetales, en atencin que situaciones de este orden pueden presentarse en la vida real del profesional en Biologa, dado el elevado nmero de compuesto orgnicos de importancia e inters para esta rea del conocimiento. 2. PROPSITOS. Apreciar la importancia de las propiedades fsicas y qumicas para la seleccin de mtodos de anlisis de compuestos orgnicos Reconocer y aplicar tcnicas comunes para de extraccin y anlisis de compuestos orgnicos. Interrelacionar el contenido elemental y molecular de materiales de inters biolgico con su posible aprovechamiento posterior Adelantar actividades de trabajo en equipo que fomenten el desarrollo de actitudes crticas y de investigacin frente a un objeto de estudio relacionado con la qumica de los compuestos orgnicos presentes en materiales de inters biolgico. 3. COMPETENCIAS.

Identificacin de fuentes naturales de compuestos orgnicos de importancia biolgica actual y potencial. Diferenciacin bsica de la conducta qumica de los compuestos orgnicos que permita su identificacin y anlisis posterior. Apropiacin de mtodos comunes de extraccin, separacin, identificacin y anlisis de compuestos orgnicos presentes en productos naturales Valoracin bsica de las propiedades y de los cambios fsicos y qumicos caractersticos que presentan y que ocurren entre compuestos orgnicos. Disposicin para el trabajo en grupo que requieran el uso de herramientas de la investigacin cientfica.

4.

NIVELES DE COMPETENCIAS COGNITIVAS PRAXIOLOGICAS Apropiacin de mtodos comunes de extraccin, separacin, identificacin y anlisis de compuestos orgnicos presentes en productos naturales ACTITUDINALES

Identificacin de fuentes naturales de compuestos orgnicos de importancia biolgica actual y potencial. Diferenciacin bsica de la conducta qumica de los compuestos orgnicos que permita su identificacin y anlisis posterior.

Disposicin para el trabajo en grupo que requieran el uso de herramientas de la investigacin Valoracin bsica de las propiedades cientfica. y de los cambios fsicos y qumicos caractersticos que presentan y que ocurren entre compuestos orgnicos

5.

ESTRATEGIAS PEDAGOGICAS

Las estrategias de formacin utilizadas sern: a) La exposicin magistral por parte del profesor sobre los fundamentos, elementos tericos, procedimientos, mtodos y prcticas necesarias para el desarrollo del trabajo, independiente o con acompaamiento, del estudiante. b) Revisin de literatura (biblio- y cibergrfica) sobre temas generales y especficos relacionados con los temas de inters dl curso. c) Consulta a expertos en temas especficos del curso. d) Trabajo experimental de identificacin y anlisis de compuestos orgnicos presentes en muestras de material vegetal. e) Elaboracin de trabajos escritos parciales y del curso en general y presentacin

en plenaria sobre el trabajo realizado. 6. 6.1 ACTIVIDADES Y PROCEDIMIENTOS SELECCIN DE LA MUESTRA DE MATERIAL VEGETAL

Los estudiantes, por grupos, seleccionarn un tipo de material vegetal de una lista de materiales que se les presentar al iniciar el curso en el laboratorio. Con el material seleccionado se adelantar todo el trabajo del semestre, de manera que sea posible lograr un amplio reconocimiento de los grupos de compuestos orgnicos y, si es el caso compuestos individuales de inters, presentes en la muestra, al igual que el origen, usos y utilidad del material, en consecuencia se debern aquellas actividades que permitan el logro de este propsito, a las que se hace referencia a continuacin. 6.2 EXPLORACION SOBRE LA PRESENCIA DE GRUPOS DE COMPUESTOS ORGANICOS EN LA MUESTRA SELECCIONADA CON BASE EN INVESTIGACIONES PRECEDENTES. Siempre es posible que el material vegetal seleccionado haya sido estudiado con anterioridad, de manera que es necesario explorar en diferentes fuentes el contenido, alcance y profundidad del conocimiento establecido y acumulado. Por esta razn, los estudiantes debern adelantar las averiguaciones pertinentes. Este trabajo les permitir conocer el tipo de compuestos orgnicos potenciales con el que se va hacer contacto y los mtodos y tcnicas de extraccin mas indicadas. 6.3 TECNICAS DE EXTRACCION.

Esta actividad es fundamental y de responsabilidad, puesto que de la tcnica o tcnicas que se implementen depende el tipo de sustancias orgnicas que se logre extraer del material en estudio. Por tanto, es necesario realizar un amplio reconocimiento bibliogrfico de las tcnicas de extraccin utilizadas en general, as como las especficas para el caso concreto del material seleccionado Para la seleccin de determinada tcnica de extraccin, en trminos generales, se ha de tener en cuenta las caractersticas de las sustancias orgnicas analizadas, dentro de las cuales se resaltan la solubilidad en uno u otro solvente, la separacin o posible aislamiento de compuestos con base en la diferencia de puntos de fusin o ebullicin, al igual que la conducta qumica especifica. Por tanto, la apropiacin del conocimiento establecido sobre estos tpicos (la solubilidad, las constantes fsicas y las propiedades qumicas), es una condicin bsica en el estudio de las sustancias orgnicas presentes en un material vegetal. 6.3.1. LA SOLUBILIDAD.

Cuando una sustancia se disuelve, sus partculas componentes (iones o molculas) se dispersan entre las del solvente, dentro de las cuales deben crearse espacios para las partculas del soluto. La separacin, tanto de las partculas del soluto como de las del solvente, requiere de vencer las fuerzas que las mantienen unidas en cada compuesto. Para esto se necesita energa, que debe ser suministrada por el mismo sistema. Esta energa se libera al producirse un estado de equilibrio estable, formado entre las fuerzas de atraccin y las de repulsin de las partculas del soluto y de las del solvente. Estas fuerzas son fundamentalmente las fuerzas de Van de Waals, las interacciones dipolo - dipolo o puentes de hidrgeno, dependiendo del tipo de partculas que intervengan. En sntesis, para que la disolucin se realice, la energa liberada cuando se establecen las interacciones soluto-solvente debe ser mayor que la energa requerida para vencer las fuerzas de atraccin entre partculas soluto-soluto y solutosolvente. Por ejemplo, los cidos carboxlicos de elevado peso molecular y los aromticos son insolubles en agua. Sin embargo, se disuelve en una solucin de NaOH, por efectuarse la reaccin: R-COOH + Acido Carboxlico NaOH R-COO- Na+ + H2O Carboxilato de Sodio

Tal como est, esta ecuacin no muestra muy claramente el proceso de disolucin. Pero si recordamos que los carboxilatos son compuestos inicos (sales), debemos continuar la reaccin de la siguiente manera: R COO- Na+ Benzoato de Sodio aq C6H5 - COO- + Na+ Carboxilato

Lo que nos indica que, en solucin acuosa, el carboxilato de sodio se ha disuelto completamente por haberse disociado en su totalidad (electrlito fuerte). Los fenoles, dadas sus caractersticas cidas, reacciona de manera similar: C6H5 - OH + NaOH Fenol C6H5-O+ in Fenxido Na+ + H2O

Ahora bien, esta reaccin es posible porque aunque el fenol es un cido dbil, NaOH es una base fuerte. Si la base es dbil como, por ejemplo, NaHCO3, su accin no es lo suficientemente intensa para provocar la liberacin del protn por parte del fenol. En resumen, el fenol es soluble en soluciones acuosas de bases fuertes (NaOH, KOH, etc.), pero no en bases dbiles. El cido benzoico (C6H5COOH) por su parte es lo suficientemente cido para disolverse en soluciones de bases, tanto dbiles como fuertes.

De una manera similar, los compuesto bsicos son solubles en soluciones cidas. La anilina por ejemplo, es escasamente soluble en agua, pero se disuelve fcilmente en una solucin de HCl, en virtud de su conversin al in anilinio: C6H5-NH2
Anilina

HCl

aq

C6H5- NH3+
Fenilamonio in anilinio

Cl-

6.3.1.1 FACTORES QUE INCIDEN EN EL FENOMENO DE LA SOLUBILIDAD. A parte de los factores, arriba expuestos, de naturaleza fsica, en la solubilidad inciden otros factores como la presin y la temperatura (factores externos) y la composicin estructural de los componentes del sistema (factores internos). A. INFLUENCIA DE LOS FACTORES EXTERNOS. Antes de definir la influencia de los factores externos sobre la solubilidad de un compuesto orgnico en determinado solvente, es necesario aclarar que los solutos al igual que los solventes pueden ser slidos(S), lquidos (L) y gaseosos (G), por eso en el proceso de disolucin se pueden formar diferente clase de sistemas, veamos unos ejemplos: Slido-Slido Slido-Lquido Slido-Gas Gas-Lquido Gas -Slido Gas-Gas Lquido-lquido Lquido-Gas Lquido-Slido

Los sistemas ms conocidos y de mayor utilidad prctica, son aquellos en los que el solvente es un lquido y los solutos - gases, lquido y slidos, por ello, los sistemas con los que con mayor frecuencia se har contacto son los siguientes: Lquido- Slido; Lquido-Lquido y Lquido-Gas. En estos sistemas, el solvente siempre es una sustancia lquida. Despus de esta aclaracin se puede analizar la influencia de la Presin y la Temperatura sobre la solubilidad de sustancias slidas, lquidas y gaseosas en solventes lquidos. SOLUBILIDAD DE SUSTANCIAS SOLIDAS EN UN SOLVENTE LIQUIDO EN FUNCION DE LA PRESION Y LA TEMPERATURA. Este fenmeno est ampliamente estudiado. Se conoce que, en la prctica, la presin no incide, de manera sensible, en la solubilidad de un slido en un lquido. Este fenmeno se representa grficamente en la Fig. 1. Por el contrario, la solubilidad de un slido en un solvente lquido aumenta con el incremento de la temperatura del sistema. Situacin que puede explicarse por la ampliacin de espacios entre los componentes (molculas, iones) del solvente que permite que un mayor nmero de molculas (iones) del soluto se empaque dentro del mismo volumen del solvente. Grficamente, este fenmeno se representa en la Fig.2.

Fig. 1. Representacin grfica de la Solubilidad en funcin de la Presin para sistemas de Slidos disueltos en lquidos

Fig. 2. Representacin grfica de la Solubilidad en funcin de la Temperatura para sistemas de Slidos disueltos en lquidos

La solubilidad de lquidos no voltiles (de elevados peso molecular y puntos de ebullicin) es similar a la de los slidos en solucin lquida, es decir que la solubilidad de un lquido no voltil crece con el incremento de la temperatura y no vara con el crecimiento de la presin del sistema, por tanto a representacin grfica de estos fenmenos es similar a lo representado en las Fig. 1y 2 para los slidos en solucin lquida.

Los lquidos voltiles (bajos peso molecular y punto de ebullicin) en solucin lquida, tienen un comportamiento que se fundamenta en que los espacios entre las molculas de estos solutos son mayores, comparados con los mismos de un lquido no voltil o de un slido y, por tanto, la solubilidad crece al incrementar la presin del sistema, porque es mayor el nmero de molculas del soluto que se puede acomodar en el mismo volumen y decrece, con el aumento de la temperatura, en razn que la volatilidad de las molculas hace que un mayor nmero de stas pueda desprenderse de la solucin. La representacin grfica se expone en las Fig. 3 y 4.

Fig.3

Representacin de la Solubilidad en funcin de la Presin para sistemas de gases o lquidos voltiles disueltos en lquidos.

La conducta de los solutos gaseosos en solventes lquidos en funcin de la temperatura y la presin es idntica a la presentada por solutos lquidos voltiles en sistemas lquidos. Esto se debe a la semejanza en la movilidad de las molculas de un gas y un lquido voltil. Por lo tanto, la solubilidad de un gas en un lquido en funcin de la presin y la temperatura pueden ser representadas grficamente por las Fig. 3 y 4 respectivamente.

A. INFLUENCIA DE ESTRUCTURALES.

LOS

FACTORES

EXTERNOS:

LOS

FACTORES

La estructura de un compuesto tiene relacin con la distribucin de cargas (polaridad) en los enlaces, su orientacin, lo que a su vez depende de la presencia de determinados tomos y grupos en la molcula y del tamao mismo de la molcula.

Fig.4

Representacin grfica de la Solubilidad en funcin de la Temperatura para sistemas de gases y lquidos voltiles disueltos en lquidos

Parar definir la incidencia de los factores estructurales en la solubilidad de compuestos orgnicos tradicionalmente y de manera genrica se ha trabajado con el principio emprico que dice Lo semejante disuelve lo semejante o Lo semejante se disuelve en lo semejante . Este principio parte del fundamento que si dos sustancias son semejantes por su estructura, por la polaridad y orientacin de sus enlaces, porque poseen grupos y tomos similares, es lgico esperar que se disuelvan mutuamente, por eso se sabe y se puede comprobar experimentalmente que los alcoholes, aldehdos y cidos menores (bajo peso molecular) se disuelven en agua, puesto que existen ciertas semejanzas entre los solutos, (alcoholes, aldehdos y cidos) y el solvente (agua). Veamos algunas: aLos alcoholes, los aldehdos, los cidos carboxlicos y el agua son compuestos oxigenados. Forman puentes (enlaces) de hidrgeno, haciendo uso de los pares de electrones que el oxgeno posee en el nivel de valencia.

b-

Lo expuesto lleva a justificar a plenitud la solubilidad de alcoholes, aldehdos y cidos en el agua. Sin embargo, esto es vlido slo, para los representantes de estas familias (o grupos) de compuestos orgnicos que poseen bajo peso molecular, para los representantes de mediano o elevado peso molecular existen factores estricos (disposicin de tomos y molculas en el espacio) que imposibilitan la formacin de puentes de hidrgeno y, por tanto, no presentan solubilidad en agua. Es por esta causa que los alcoholes mayores (butanol, pentanol, hexanol etc.), los aldehdos mayores

(butanal, pentanal., etc.), los cidos carboxlicos mayores, (cidos propanoico, butanoico etc.,) presente baja o nula solubilidad en agua. Algo similar sucede con el fenol que tampoco se disuelve en agua a pesar de ser una sustancia oxigenada. Lo que muestra que la semejanza no slo debe llegar al nivel de composicin elemental, sino que debe estar en los niveles de distribucin y disposicin de tomos y grupos en el espacio. Por el contrario, la apolaridad de los enlaces de los hidrocarburos (compuestos orgnicos, formados por carbono e hidrgeno) hace que prcticamente todos ellos, independientemente del peso molecular se disuelvan, en ter, sustancia oxigenada de enlaces qumicos de baja polaridad. Por lo expuesto, se puede llegar a la conclusin, que es posible determinar ciertas caractersticas del soluto (polaridad de enlaces, tomos presentes, posible tamao de la molcula, etc.) por las caractersticas del solvente utilizado en el proceso de disolucin. A todo lo expuesto es necesario agregar que a los sistemas de soluciones analizados: slido-lquido, lquido-lquido y gas-lquido, le son aplicables las propiedades coligativas (descenso crioscpico, presin osmtica, ley de Raoult) que por ser uno de los temas de estudio de la qumica general, no son tema de anlisis del presente trabajo, pero que el estudiante debe manejar con propiedad. 6.3.1.2 CLASIFICACION DE COMPUESTOS ORGANICOS POR SOLUBILIDAD De lo expuesto se deduce que para efectos de seleccionar el solvente ms adecuado para la elaboracin del extracto a partir del material vegetal seleccionado, es necesario conocer como es la solubilidad de los compuestos orgnicos en uno u otro solvente. En otras palabras, es importante conocer como se clasifican los compuestos orgnicos por solubilidad. Para este fin se cuenta con un nmero suficientemente amplio de sistemas de clasificacin de sustancias orgnicas por su solubilidad. Casi todos estos sistemas se fundamentan en la conducta que tenga un soluto dado en solventes polares y solventes no polares. Como patrn de solvente polar, comnmente se utiliza el agua y como patrn de solvente no polar -ter. A. SOLUBILIDAD EN AGUA. La solubilidad de un compuesto orgnico en agua, permite, en una primera aproximacin, definir su naturaleza inica o molecular. Los compuestos inicos son, por lo general, fcilmente solubles en agua., debido a que la alta polaridad del agua permite que se establezcan fuertes interacciones de tipo in-dipolo con los componentes inicos del soluto. Dentro de los compuestos inorgnicos son numerosos los ejemplos de compuestos inicos solubles en agua. Dentro de los compuestos orgnicos, tambin se presentan casos de compuestos de naturaleza inica, como las sales de los cidos carboxlicos y de las aminas. Ejemplos de ellos son el benzoato de sodio y el cloruro de anilinio que fueron anteriormente mencionados.

La mayor parte de los compuestos orgnicos tienen una naturaleza molecular. Sin embargo, muchos de ellos se disuelven en agua a causa de las interacciones dipolo-dipolo o de los puentes de hidrgeno que se establecen entre molculas de agua y las del soluto. Podemos generalizar que el agua es un buen solvente para compuestos que contengan 20% o ms de oxgeno o nitrgeno, como la mayora de los carbohidratos y cidos, alcoholes, aldehdos, y aminas de bajo peso molecular. Ahora bien, la solubilidad, como ya se ha anotado, depende no slo del peso molecular del soluto y de la presencia de grupos polares, sino de la participacin que stos tengan dentro de toda la molcula. En los alcoholes menores por ejemplo, el grupo OH (grupo polar) representa una porcin considerable de la molcula. De ah, que los alcoholes (hasta de 3 carbonos) sean solubles en agua. A medida que ascendemos en la serie, las propiedades de los compuestos se va haciendo cada vez mas similares a las de los hidrocarburos de igual nmero de carbonos, ya que la parte alqulica (apolar) va alcanzando una mayor proporcin en la estructura molecular. Es as que la solubilidad del butanol (C4) es de apenas 7,9 g. /100 ml de agua, en tanto que los alcoholes mayores, son prcticamente insolubles en dicho solvente. B.SOLUBILIDAD EN ETER. Como se acaba de mencionar, los compuestos inicos y los compuestos moleculares de marcada polaridad, son por lo general, solubles en agua. Como es de esperar, esta solubilidad disminuye en solventes menos polares como son el ter, el benceno, compuestos de baja polaridad. Por el contrario, la solubilidad de solutos apolares es favorecida por solventes tambin apolares. El pentanol, p.ej. es prcticamente insoluble en agua, pero se disuelve en ter en todas las proporciones. De manera similar, el tetradecanol es insolubles en agua pero completamente miscible con ter o benceno. De lo anterior se desprende que un ensayo de solubilidad en ter para compuestos solubles en agua, podra aportar nuevos datos sobre la constitucin de dichos compuestos. Efectivamente, este tipo de ensayos hacen parte de las pruebas sistemticas de solubilidad. Un resumen muy general de la solubilidad de los compuestos orgnicos en solventes polares y apolares , puede realizarse por medio del siguiente esquema: Aumento de la solubilidad en agua y solventes polares.

Compuestos inicos. Compuestos altamente Polares Compuestos Polares. Compuestos de Compuestos Baja polaridad Apolares.

Aumento de la solubilidad en ter y solventes apolares. Segn la solubilidad en agua o ter los compuestos orgnicos pueden ser clasificados en cuatro grandes grupos, as:

Grupo I- Compuestos orgnicos solubles en ter e insolubles en agua. Hidrocarburos, halogenuros de alquilo, alcoholes superiores, compuestos carbonlicos superiores, aminas superiores, cidos carboxlicos y derivados de elevado peso molecular, fenoles y teres. Grupo II- Compuestos orgnicos solubles en agua e insolubles en ter. Alcoholes polihidroxilados, aminoalcoholes, carbohidratos, sales de aminas y cidos carboxlicos. Grupo III- Compuestos orgnicos solubles en agua y ter: Compuestos carbonlicos de elevado peso molecular, hidrocarburos oxigenados, cidos, nitrilos y amidas. Grupo IV - Compuestos orgnicos insolubles en agua y terCompuestos macromoleculares, hidrocarburos superiores condensados, amidas de elevado peso molecular, quinonas. Como se deduce con base en este tipo de clasificacin la informacin que se obtiene no es muy exacta y a veces contradictoria, problema que es comn para casi todas las clasificaciones de compuestos orgnicos por solubilidad. A pesar de esto es, es posible obtener con las pruebas de solubilidad importante informacin acerca de los compuestos orgnicos - carcter inico, molecular, presencia de heterotomos y grupos funcionales, si estas pruebas se hacen de una manera sistemtica y utilizando adems de ter y agua otros reactivos como cidos y bases minerales. 6.3.2. LAS CONSTANTES FISICAS. Se denominan constantes fsicas a aquellas propiedades de una sustancia qumica orgnica que la diferencian plenamente de otras. Las constantes comnmente utilizadas son los puntos de ebullicin y de fusin (p.e.; p.f.), la densidad (d, g/ml), el ndice de refraccin (n), entre otros. El punto de ebullicin, es decir la temperatura a la que un lquido ebulle o se convierte en gas a presin atmosfrica, es una constante muy til cuando se trata de separar sustancias que se encuentren disueltas en determinado solvente (como es el caso que nos ocupa), puesto que los puntos de ebullicin de cada una de las sustancias orgnicas disueltas, al igual que el del solvente, son diferentes, por tanto al someter a calentamiento una solucin (un extracto), las sustancias van a evaporarse, diferencialmente, a medida que la temperatura de la mezcla se incrementa. Para atrapar los gases de ebullicin se utilizan equipos de destilacin sencilla (Fig. 5.), cuando la diferencia en los valores de p.e. de las sustancias es suficientemente grande o de destilacin fraccionada, cuando la diferencia entre los p.e. es reducida (Fig. 6). La destilacin se utiliza tanto para la separacin como para la purificacin de lquidos. Al calentar el lquido, se evapora, a la vez que se forma un equilibrio dinmico lquido-vapor. El vapor, por su parte ejerce presin sobre el lquido, presin que aumenta con el crecimiento de la temperatura. Para destilar sustancias con p.e. entre 40 y 150 oC se utiliza la destilacin sencilla a presin atmosfrica, entre cuyas mayores ventajas, est la simplicidad de equipo ( Fig.5) que consta fundamentalmente de lo siguiente: Baln termorresistente con tubuladura lateral.Termmetro.Refrigerador o condensador, con agua como refrigerante. Receptor de destilado.

El lquido al calentarse, en el baln, se evapora. El vapor pasa por la tubuladura lateral al refrigerador, donde se condensa y alcanza, luego, el receptor de destilado. Es importante que el bulbo del termmetro sea anegado por los vapores de la sustancia en destilacin, esto, con el fin de determinar con la mayor precisin el p. e. en las condiciones dadas, dos tres minutos despus de haber comenzado la condensacin.

Los otros mtodos de destilacin, como son: la destilacin al vaco, la destilacin fraccionada, con arrastre de vapor y la rectificacin, son menos comunes y se utilizan en casos especiales. La destilacin con arrastre de vapor se realiza cuando una sustancia es soluble en determinado solvente (por lo general agua) y su p.e. es inferior al punto de ebullicin del solvente. Luego la sustancia capturada se puede separar del solvente por destilacin sencilla o fraccionada o por cualquier otro mtodo de separacin

Tabla 1. Relacin entre el punto de ebullicin del benceno y el tolueno con relacin a la presin del sistema.

Si el punto de ebullicin de una sustancia es muy elevado, se recurre a separarla de otras sustancias por destilacin al vaco, esto es posible, en razn que el p.e. de las sustancias orgnicas disminuye al disminuir la presin del sistema en el que se realiza la

destilacin. Esta aseveracin se ilustra con el ejemplo de la Tabla 1 y las Fig.9 y 10. para el benceno y el tolueno por separado

Cuando se requiere obtener un extracto o solucin concentrada de una sustancia de reconocido p.e., se utiliza el sistema de reflujo, que consiste en que un baln se evapora continuamente la sustancia, se condensa en un refrigerador de bola y, luego regresa al baln, en el que vuelve a evaporarse. As, sucesivamente hasta lograr extraer la mayor cantidad posible.

En los casos en los que se conoce que una sustancia se disuelve en un solvente a la

temperatura de punto de ebullicin de este ltimo, se recurre a la extraccin continua, comnmente conocida por mtodo se Soxchlet que consta de tres componentes bsicos. El recipiente central, o equipo de Soxchlet propiamente dicho, en el que se ubica, dentro de un cartucho de material poroso, el material del que se va a extraer la sustancia. El equipo est dotado, por un lado, de tubuladura para el ascenso de los vapores del solvente y, por el otro lado, de otra tubuladura, en forma de sifn, para el descenso del solvente con la sustancia extrada. El equipo, adems est dotado de un baln de calentamiento y de un condensador para atrapar los vapores del solvente y enviarlos al Soxchlet, en el que al contactar con el material se extrae la sustancia en estudio. Esta operacin se repite a lo largo del experimento, por tanto se considera que la extraccin es continua.

La diferencia de la solublidad de una sustancia en diferentes solventes y la diferencia de la densidad de los mismos, permite separarlos con el embudo decantacin, puesto que luego de agitar la mezcla y someter a reposo la mezcla, las sutancias involucradas se separan formando capas diferentes que se pueden evacuar por la llave de flujo que el equipo posee.

6.3.3. LAS PROPIEDAES QUIMICAS. Las propiedades qumicas de las sustancias a extraer del material vegetal, juegan, al igual que las caractersticas arriba analizadas, un papel importante en los procesos de extraccin, identificacin y separacin de los compuestos orgnicos en estudio. Lo deseable es que los compuestos extrados no reaccionen con el solvente, por tanto la seleccin de ste es una tarea seria e importante, como ya se indic. Por el contrario, las reacciones caractersticas que presentan las sustancias extradas son la base para la identificacin, al igual que las constantes fsicas. Por tanto el conocimiento terico de la conducta qumica de los componentes del material vegetal, es una condicin fundamental para el logro de los objetivos. Sin embargo, a lo largo del trabajo, se har evidente que el conocimiento profundo de las propiedades fsicas y qumicas de los compuestos orgnicos del material vegetal, al igual que las destrezas en los proceso de extraccin e identificacin, hacen posible la realizacin del reconocimiento de los contenidos del objeto de estudio seleccionado.

7. ACCIONES PRELIMINARES: Una vez realizada la de seleccin del material vegetal, objeto de estudio, la exploracin de su posible composicin qumica, se hace necesario precisar la tcnica de extraccin lleve a determinar el contenido real del material y a la posible separacin de sustancias de inters especial. Para este fin se puede proceder a realizar procesos de extraccin preliminar por medio de tcnicas comunes como el remojo en solventes tales como agua y etanol1, en fro y en caliente. Los ensayos se deben adelantar con un volumen de 200 ml. del solvente y alrededor de 20 gms. de material vegetal. El material se debe utilizar tanto hmedo como seco, luego del proceso de secado establecido en las averiguaciones anteriores. Con los extractos obtenidos en estas condiciones se puede proceder a realizar los siguientes ensayos, sin olvidar en cada caso realizar la prueba correspondiente con el solvente, de manera que sea posible diferenciar la conducta del solvente de la del extracto: 7.1- Pruebas con Indicadores de pH : La finalidad de esta prueba es determinar el pH del extracto en comparacin con el solvente utilizado (agua o etanol). El valor del pH puede indicar que tipo de sustancias del material vegetal se disolvieron y estn presentes en el extracto. Utilice papel indicador universal o los pH-metros disponibles. 7.2- Accin de Acidos. Agite en un tubo de ensayo 2 mls de H2SO4 concentrado con 1 ml. del extracto. Tenga en cuenta que en H2SO4 : a.
1

Los hidrocarburos aromticos y saturados no presentan solubilidad, igual que los

No se recomienda utilizar otros solventes por la dificultad en el manejo en las condiciones actuales (Dic.2009) del laboratorio.

nitrocompuestos y los haloderivados, sin embargo los hidrocarburos aromticos pueden reaccionar, por tanto puede presentarse desprendimiento leve de calor. b. Los Hidrocarburos insaturados, los alcoholes, los teres y los steres de disuelven sin presentar ninguna clase de coloracin. C. Los compuestos carbonlicos aromticos o alifticos se disuelven dando un tono oscuro a la solucin. 7.3- Accin de Bases. Trate 1 ml.100 mg. Del extracto 1 ml. de NaOH al 10% y agite. Observe si hay o no reaccin en fro o en caliente. Tenga en cuenta que : a. b. c. d. e. Los cidos y los fenoles se disuelven en fro. Los halgenos de acilo y los anhdridos se disuelven en caliente. Los polihidrofenoles dan coloracin oscura. Los compuestos carbonlicos se resinifican al calentarlos. Los nitrofenoles dan coloracin roja o amarilla.

f. El amoniaco es liberado por diferentes compuestos nitrogenados y se puede reconocer por el olor o por reaccin con indicadores humedecidos. 7.4 -Prueba con Permanganato ( Prueba de Wagner) : A 2 ml. Del extracto agregue, en agitacin constante, no ms de 10 gotas (gota a gota) de KMnO4. La prueba es positiva si la coloracin violeta del permanganato. desaparece acompaada de la formacin de un precipitado de color caf, correspondiente al oxido de manganeso. 7.5-Prueba con Bromo : A 2 ml del extracto fro, agregue 3 gotas de una solucin de bromo al 2% en CCl4. Observe y tenga en cuenta que: El color oscuro del bromo al 2% desaparece en presencia de compuestos a. insaturados como resultado de la reaccin de adicin. b. Si la decoloracin de la solucin de bromo en CCl4 va acompaada del desprendimiento de gas (burbujas) se puede asegurar que la reaccin es de sustitucin, que puede ser presentada por fenoles, aminas aromticas fundamentalmente, como tambin hidrocarburos aromticos. 7.6 - DETERMINACION CUALITATIVA COMPUESTOS ORGANICOS. DE ELEMENTOS PRESENTES EN

ADVERTENCIA 1. Esta prueba es importante en el proceso de identificacin de sustancias orgnicas, puesto que lleva a determinar, cualitativamente, que elementos qumicos hacen presencia en el extracto elaborado, sin embargo, dados los riesgos que se deben asumir con su realizacin, debe ser evaluada, detenidamente evaluada por el profesor a cargo. La determinacin cualitativa de los elementos presentes en los compuestos orgnicos del extracto, proporciona informacin que permite clasificarlos dentro de los grupos de compuestos orgnicos que contengan los elementos identificados. Los elementos de mayor presencia en la composicin de sustancias orgnicas son el carbono, oxgeno, nitrgeno, hidrgeno, azufre y halgenos. El carbono y el hidrgeno estn presentes en todos los compuestos orgnicos, (no slo en los hidrocarburos formados exclusivamente por estos dos elementos) en calidad de cadena o esqueleto hidrocarbonado que sostiene a toda la sustancia en su conjunto. La cadena hidrocarbonada es la parte ms estable de un compuesto orgnico, la menos sujeta a ataques por parte de reactivos y por tanto, es la ltima que se destruye. Los dems elementos (O, N, Halgeno, P, S) por el contrario, son la parte ms vulnerable de un compuesto orgnico. La presencia de carbono se demuestra sometindola sustancia estudiada a calentamiento con xido de cobre. El carbn en estas condiciones se convierte en bixido de carbono, simultneamente el hidrgeno, presente, produce agua. Esta reaccin es, adems, parte constituyente y fundamental, en la determinacin de la frmula emprica de un compuesto. El oxgeno presente en sustancias orgnicas, en las pruebas cualitativas, no se determina y muchas veces tampoco se recurre a su determinacin en pruebas cuantitativas; la cantidad de este elemento se obtiene por diferencia, teniendo en cuenta los porcentajes de todos los dems elementos, presentes en la sustancia analizada. El nitrgeno est presente en una amplia gama de compuestos tales como las aminas, los nitrocompuestos, los aminocidos y las protenas entre otros. El azufre est presente en los sulfocidos, sulfolpidos, tioles, mientras que los halgenos en los halogenuros de acilo, alquilo y arilo, entre otros, Para detectar la presencia de azufre, nitrgeno y halgeno es necesario realizar la fusin sdica, consistente en calentar la sustancia estudiada con sodio metlico hasta lograr la descomposicin del compuesto. Este procedimiento convierte el azufre, nitrgeno, y halgenos en iones sulfuro, cianuro y haluro respectivamente y permite, en esta forma determinar su presencia en la sustancia analizada. Los resultados que se obtienen, a partir de la fusin sdica, son suficientemente satisfactorios, aunque el procedimiento requiere de trabajar cuidados extremos por la elevada peligrosidad del sodio.

El ion sulfuro se detecta por la formacin del precipitado negro de sulfuro de plomo que se obtiene al tratar la solucin, obtenida en la fusin sdica, con una solucin de acetato de plomo, acidificada con cido actico, de conformidad con la ecuacin siguiente: Pb2+ + S2 PbS

El ion cianuro se identifica al tratar la solucin de la fusin sdica, con iones ferrosos, seguida de calentamiento y acidificacin. Este procedimiento convierte los iones cianuros en ferrocianuros: Fe SO4 + 6NaCN- Na4[ Fe( CN )6] + Na2 SO4

Al calentar , hasta ebullicin, la solucin alcalina de iones ferrosos, algunos de ellos se oxidan a iones frricos, los cuales, al acidificar la solucin, reaccionan con los iones ferrocianuros parar formar azul de Prusia que se reconoce por su color azul brillante 4Fe Cl 3 + 3 Na4 [ Fe ( CN )6 ] Fe3 [ Fe 4 ( CN )6]3 + 12 NaCl Azul de PrusiaFinalmente los iones haluros se detectan por la formacin de un precipitado de plata al tratar la solucin de la fusin sdica, acidulada con cido ntrico, con nitrato de plata, de acuerdo con: Ag+ + X Ag X

Los cloruros, los bromuros y yoduros pueden diferenciarse entre s, por el color del precipitado: los cloruros, bromuros y yoduros de plata son blancos, amarillos y amarillos plido respectivamente. Pero difieren fundamentalmente, por la solubilidad que presentan en amoniaco acuoso, as: el cloruro de plata es fcilmente soluble, el bromuro de plata es parcialmente soluble y el yoduro es completamente insoluble. 7.6.1 PRUEBA PARA CARBONO E HIDROGENO

Coloque, en un tubo de ensayo mediano, 0.1 g de xido de cobre II. Mezcle cuidadosamente con 1 ml. del extracto; caliente por 1-2 minutos y acerque a la boca del tubo de ensayo, un tubo pequeo que contenga 1-2 ml de solucin de hidrxido de bario. La formacin de un precipitado blanco de carbonato de bario, en el tubo pequeo y la aparicin de gotas de agua en las paredes de los dos tubos, indican la presencia de carbono e hidrgeno en el compuesto original. 7.6.2 FUSION CON SODIO.

ADVERTENCIA 2. El sodio es un metal que debe manipularse con sumo cuidado. Sobre todo, hay que evitar que haga contacto con el agua. No lo toque con los dedos, use esptula o pinzas. Los residuos se deben destruir con exceso de etanol (alcohol etlico) o metanol.

Coloque un trozo de sodio en un tubo de ensayo mediano, y termorresistente (Pyrex), completamente seco; fije el tubo en una posicin vertical y tenga el extracto preparado para depositarlo en el tubo. Caliente el tubo hasta que el sodio se funda. Tan pronto como el sodio se haya fundido, retire la llama, agregue cerca de 1 ml del extracto (20 gotas) de tal modo que caiga directamente sobre el sodio, sin tocar las paredes del tubo de ensayo. Caliente fuertemente el tubo de nuevo, hasta alcanzar rojo blanco durante 2 minutos (para completar plenamente la reaccin entre sodio y los compuestos del extracto debe lograrse esta condicin). Deje enfriar el tubo hasta temperatura ambiente y luego agregue 1 ml. de metanol gota a gota, y agite el residuo slido con una varilla de vidrio para asegurarse que el sodio est completamente destruido. Finalmente, agregue al tubo 10 ml. de agua destilada y agite la solucin. Pase la solucin a un enlenmeyer con agua destilada extrayendo la mayor cantidad del residuo del tubo que sea posible. Someta a ebullicin el contenido del enlenmeyer, durante 5 minutos y filtre la solucin en caliente. Guarde la solucin para las siguientes pruebas. 7.6.3 PRUEBAS PARA AZUFRE.

Acidule, con cido actico al 10%, 2 ml. de la solucin obtenida en la fusin con sodio y compruebe la acidez con papel tornasol. Agregue a la solucin acidulada, 5 gotas de una solucin de acetato de plomo al 1%. La aparicin de un precipitado negro indicar la presencia de plomo en el compuesto estudiado. 7.6.4 PRUEBAS PARA NITROGENO.

Alcalinice 2 ml. del filtrado de la fusin con sodio hasta alcanzar valores de pH entre 11 y 13 unidades, agregue 2 gotas de sulfato ferros al 5 %, 5 gotas de floruro de potasio al 10 %, lleve la mezcla a ebullicin, enfre y agregue 3 gotas de cloruro frrico al 2% y acidule con cido clorhdrico 2N, hasta disolver el precipitado de hidrxido que pudo haberse formado. En presencia de iones cianuro y, por tanto de nitrgeno, aparecer un precipitado o suspensin de coloracin azul, en dependencia de la cantidad de iones presentes. Para apreciar mejor cantidades pequeas de precipitado, filtre la solucin, dado que el color azul contrastar con el color blanco del papel filtro. En ausencia de nitrgeno, la solucin ser incolora o de color amarillo plido. En presencia de azufre (lo que debi definirse en las pruebas anteriores), al agregar sulfato sulfato ferroso, aparece un precipitado oscuro, generalmente negro, que puede ser separado por filtracin y al filtrado aplicarle cloruro frrico y cido clorhdrico para verificar la aparicin de la coloracin que indica la presencia de nitrgeno. En algunos casos, cuando estn presentes el nitrgeno y el azufre, se obtiene una coloracin roja, debido a que se forman sulfocianuros de hierro y la prueba permite la determinacin de azufre e hierro simultneamente. 7.6.5 PRUEBAS PARA HALOGENOS

Acidifique 3 ml. De la solucin de la fusin sdica con cido ntrico al 5%, verifique la acidez de la solucin con indicadores. Si ha encontrado azufre o nitrgeno en el compuesto estudiado, someta a ebullicin la solucin acidulada durante 5 minutos, e un tubo de ensayo (esto es importante, puesto que los iones CN- y S2- dan precipitados con sulfato de plata en solucin caliente estos se desprenden en forma de HCN y H2 S). A la solucin fra, agregue 4 o 5 gotas de solucin de nitrato de plata al 5%. La formacin de un precipitado blanco, indica la presencia de cloro, de un precipitado amarillo brillante - de yodo o bromo: La identidad del halgeno, puede confirmarse con exceso de hidrxido de amonio, puesto que el cloruro de plata es completamente soluble en, el bromuro de plata -parcialmente soluble y el yoduro -insoluble. 7.7 PRUEBAS DE GRUPO FUNCIONAL.

El paso siguiente, en el anlisis orgnico, son las pruebas de grupo funcional. Estas pruebas permiten situar a las sustancias extradas dentro de determinado grupo o familia de compuestos orgnicos. La pruebas de grupo funcional se pueden realizar de manera indiscriminada, esto es, comenzar por los anhdridos y derivados de cidos y concluir con las los hidrocarburos (numerales 7.7.1- 7.7.11, en la presente gua). Sin embargo el trabajo, se puede simplificar, si antes de realizar la marcha analtica para grupo funcional, se determina la acidez o basicidad del compuesto estudiado. Las pruebas de acidez o basicidad para un compuesto orgnico, cuya determinacin se contempla en los numerales 7.7.2 7.7.3 de la presente gua, aportan importante informacin; veamos: A- Si el extracto presenta prueba positiva de acidez, se puede suponer que las sustancias extradas pertenecen a cualquiera de los siguientes grupos funcionales: cidos carboxlicos y derivados halogenados y anhdridos de cidos, steres, fenoles, alcoholes, aldehdos, cetonas y ciertos nitrocompuestos. Si la prueba de acidez es positiva an despus de la adicin de una pequea cantidad de una solucin de una base dbil (bicarbonato de sodio), se puede pensar que se contacta con sustancias de caractersticas cidas acentuadas como los cidos carboxlicos, sus derivados halogenados, anhdridos de cido, fenoles sustituidos (halogenados y nitrados) que son sustancias que admiten la adicin de bases dbiles sin cambiar la reaccin cida. Los alcoholes, fenoles comunes, los steres, los nitrocompuestos no sostienen la prueba de acidez luego de la adicin de bases dbiles. BSi el extracto en estudio presenta prueba negativa de acidez y prueba positiva de basicidad lo ms probable es que se contacte con amina, de pronto, una amida o sustancia nitrogenada fcilmente reducible. CSi las pruebas de acidez y basicidad son negativas, lo ms probable es que haya presencia de hidrocarburos, teres o una amida de elevado peso molecular.

Por lo expuesto se ve, que por las pruebas de acidez o basicidad, se puede determinar para todos los casos, las pruebas a realizar y las que se den omitir en el anlisis de grupo funcional de un compuesto orgnico. Realizadas las pruebas de acidez y basicidad, se puede proceder, de manera diferencial, a efectuar las pruebas de grupo funcional de conformidad con los siguientes procedimientos: 7.7.1. ANHIDRIDOS Y DERIVADOS HALOGENADOS DE ACIDO. En un tubo de ensayo se tratan 3 gotas del extracto con 5 gotas de anilina. La prueba es positiva si hay calentamiento inmediato y la aparicin de cristales, proceso que se facilita al frotar las paredes internas del tubo con una varilla de vidrio. La reaccin de los anhdridos y los halogenuros de acilo con anilina es exotrmica. Los productos de la reaccin son sustancias slidas (las anilidas). 7.7.2 ACIDOS CARBOXILICOS- Prueba de acidez.

Valore el pH del extracto. Este deber presentar una acidez acentuada, la que se conservar an despus de agregar a la solucin 3 gotas de bicarbonato de sodio al 5%. Los anhdridos, los halogenuros de acilo, los fenoles sustituidos y algunos steres se pueden comportar de igual manera., por tanto esta prueba puede servir como de prueba de acidez. 7.7.3 AMINAS.

A. Las aminas solubles en agua, las identifican por la reaccin alcalina que presentan sus soluciones acuosas al valorar el pH. La reaccin alcalina se conserva an despus de agregar a la solucin unas gotas de cido actico glacial. B. Las aminas solubles en agua, con cadena carbonada de 6 a 10 tomos, pueden ser identificadas por la solubilidad que presenta en HCl al 5%. C. Para la identificacin de aminas no solubles en agua, con cadena carbonada con ms de 10 tomos de carbono, se debe proceder de la siguiente manera: 12Agite1ml del extracto con 2 ml. de HCl al 5% y filtre, si es necesario. Agregue a la solucin o al filtrado un volumen igual de bicarbonato al 10%.

La presencia de amina se determinar por la aparicin de precipitados o por el enturbiamiento de la solucin. Despus de haber determinado la presencia de la amina, es necesario, diferenciar, si la amina es primaria, secundaria o terciaria, por intermedio de la reaccin de acilacin con cloruro de acetilo (cloruro de etanoilo), la cual es positiva para las dos primeras y negativa para las ltimas. Para ello, a 0.5 ml. del extracto agregue se le agrega, por gotas, cloruro de acetilo, se observa una reaccin bastante enrgica para las aminas primarias y secundarias, mientras que las aminas terciarias no presentan esta reaccin.

7.7.4

FENOLES

A 1 ml del extracto agregue 1 ml. de alcohol etlico y luego unas gotas de cloruro frrico al 5%. La presencia del fenol se determina por la paricin de una coloracin verde, violeta o roja. Debido a que el cloruro frrico tiene color amarillo, la aparicin de coloracin amarilla o carmelita no puede tomarse como resultado positivo en esta prueba. Para las hidroquinonas o nitrofenoles esta prueba siempre es negativa. 7.7.5 ALCOHOLES

A 0.5 ml. del extracto en un tubo de ensayo, se le mide la temperatura y agitando con el termmetro se agregan dos gotas de cloruro de acetilo. Si se observa abundante desprendimiento de calor puede deducirse la presencia de alcoholes primarios y secundarios. Si la reaccin no se realiza se agregan 5 gotas ms de cloruro de acetilo, se agita con el termmetro y se observa los posibles cambios de temperatura. El aumento de la temperatura en menos de 10oC indica la presencia de un alcohol terciario. 7.7.6 ALDEHIDOS

A. A 1 ml. del reactivo de Schiff se le agrega una gota del extracto. En presencia de aldehdos instantneamente se forma una coloracin violeta. La prueba puede ser negativa para el extracto acuoso, si los aldehdos del material vegetal no son solubles en agua, pero para el extracto en alcohol - puede ser positiva. El resultado es negativo si la coloracin puede realizarse en presencia del oxgeno del aire. B. Los aldehdos reaccionan con el reactivo del Tollens (ver 7.7.9) presentando la reaccin del espejo de plata consistente en que la plata metlica adhiere a las paredes del tubo de ensayo en forma de pelcula brillante. 7.7.7 ESTERES

En un tubo de ensayo mezclar 1 ml. de hidrxido de potasio en metanol y tres gotas de clorhidrato de hidroxilamina. Separa la solucin del precipitado que se forma de la mezcla anterior. A la solucin le agregan 2 gotas del extracto analizado y la calientan hasta la ebullicin. Se enfra y se agrega una gota de cloruro frrico al 5% y 10 gotas de cido clorhdrico 2N para disolver el precipitado que puede formarse en ciertos casos. La identificacin de steres es positiva si se forma una coloracin roja. 7.7.8 NITRILOS Y AMIDAS

Al calentar un nitrilo o una amida con hidrxido de potasio acuoso se hidrolizan dando como resultado el desprendimiento de amoniaco o la formacin de aminas. Disuelva 5 grnulos de hidrxido de potasio en 5 gotas de agua, agregue 2 ml. de dietilenglicol y 8 gotas del compuesto extracto. Caliente cuidadosamente hasta la ebullicin. Si la reaccin es alcalina (comprobar con papel indicador humedecido) la prueba es positiva para nitrilos y amidas.

7.7.9

NITROCOMPUESTOS

Por reduccin de nitrocompuestos en soluciones neutrales se forman hidroxilaminas que pueden precipitar la plata metlica del reactivo de Tollens (solucin amoniacal del nitrato de plata) o de otro reactivo de caractersticas similares. Por tanto, para la identificacin del grupo nitro proceda as : A 5 ml. de alcohol al 50% agregue 1ml. del extracto, 0.5 g. de cloruro de amonio y 0.5 g. de polvo de Zinc. Agite la mezcla, calintela 2 minutos hasta la ebullicin. Enfre y filtre y agregue el reactivo de Tollens. La aparicin del precipitado gris (plata metlica) indica la presencia del grupo nitro. Reactivo del Tollens: debe prepararse en el momento de ser utilizado. Preparacin: Agregar 2 gotas de NaOH al 5% a 1 m de AgNO3 al 5%. Adicionar NH4OH, 2 N, agitando la mezcla, hasta que los precipitados se disuelvan completamente. 7.7.10 HALOGENUROS DE ALQUIlLO O ARILO Si el compuesto analizado es insoluble, en cido de clorhdrico y sulfrico concentrados y se ha identificado la presencia de halgenos por anlisis de elementos presentes, se puede deducir que el compuesto tratado es un halogenuro de alquilo o arilo. 7.7.11 HIDROCARBUROS En el extracto analizado hay presencia de hidrocarburos si despus de haber realizado la marcha (del 7.7.1 a 7.7.10) antes citada, la prueba ha sido negativa en todos los casos. Adems se debe tener en cuenta que: A Los hidrocarburos saturados (alcanos) son insolubles en agua, lo mismo que en cido sulfrico concentrado en caliente. B. Los hidrocarburos insaturados son solubles en cido sulfrico concentrado y adicionan bromo (ver pruebas preliminares). C. Los hidrocarburos aromticos no se disuelven en cido sulfrico concentrado en fro, pero pueden disolverse en caliente adems pueden presentar reacciones de sustitucin caractersticas. 7.8 - SELECCIN DEL METODO DE EXTRACCION DE COMPUESTOS ORGANICOS. INDIVIDUALES. Realizadas la totalidad de las pruebas anteriores (Numerales 7.7.1-7.7.11) se puede decidir cules son los compuestos orgnicos individuales que presentan inters especial para ser extrados del material vegetal en estudio. En la seleccin del mtodo o mtodos de extraccin se deben tener en cuenta los mtodos investigados por los estudiantes en la exploracin preliminar y los que se proponen en la presente gua (numerales 6.2 y 6.3).

7.9 -

OBTENCION DE DERIVADOS.

En la identificacin definitiva de una sustancia orgnica, despus de la realizacin de las pruebas preliminares, de grupo funcional, suele ser til la obtencin de un derivado slido del compuesto estudiado que posea propiedades fsicas plenamente identificables. Este procedimiento, al cual no siempre hay necesidad de recurrir, est suficientemente estudiado y en la literatura especializada se condensa abundante informacin sobre las propiedades fsicas de los derivados de los grupos de compuestos orgnicos por intermedio de los cuales se les puede identificar. De tal manera que si con base en las pruebas realizadas, se supone que se est contactando con una sustancia orgnica determinada, con la obtencin de un derivado, se puede identificar la sustancia luego de comparar las propiedades fsicas del derivado, halladas en el laboratorio, con la que se encuentran en la literatura sobre la materia. Para cada familia o grupo de compuestos orgnicos se ha establecido la obtencin de derivados con base en los mtodos de la sntesis orgnica. As por ejemplo, para los alcoholes se propone obtener steres de los cidos benzoico, p-nitrobenzoico, 3,5 dinitrobenzoico; para los fenoles , adems de los steres del caso anterior- obtener bromofenoles, fenoxicidos, acetatos (etanoatos); para aldehdos y cetonas- pnitrofenilhidrazonas, semicarbazonas y oximas; para los acidos carboxlicos- derivados de los mismos; para las aminas -amidas y anilidas. En calidad de ejemplo, en la presente prctica, se propone la obtencin de la acetanilida como derivado slido de la anilina (amina aromtica primaria) que se obtiene por reaccin de acilacin de sta con halogenuros de cido o anhdridos de cidos carboxlicos. 7.9.1 GENERALIDADES DE LA REACCION E ACILACION DE LAS AMINAS.

La acilacin es una reaccin de tipo cido- base, en la cual el grupo amino (base) efecta un ataque sobre el carbono carbonlico que es el centro cido.

La reaccin, generalmente, transcurre rpidamente con cloruro de cido, ms lentamente con los anhdridos y tan lentamente con los cidos mismos que se requieren condiciones rgidas. En la reaccin de acilacin se introduce el grupo , caracterstico en los cidos, halogenuros y anhdridos de cido carboxlico, segn las siguientes ecuaciones: 1- Para aminas primarias:

2.- Para las aminas secundarias:

3-Para las aminas terciarias:

En este ensayo se obtiene la acetanilida, al tratar anilina con una mezcla caliente de cido actico y anhdrido actico. Esta mezcla da una buena velocidad de reaccin que, aunque es inferior a la que se obtiene utilizando cloruro de acetilo, es adecuada para la acilacin en el laboratorio, de conformidad con:

7.9.2

USOS DE LA ACETANILIDA

La acetanilida pertenece al grupo de las anilidas, sustancias que son utilizadas como plaguicidas, en la prctica agronmica. Adems la acetanilida es empleada como antipirtico (para bajar la fiebre de seres vivos) y analgsico (calmar dolores) y, a veces como depresor. Es un ingrediente comn de las drogas para el dolor de cabeza, tambin se usa como producto intermedio de la sntesis orgnica. 7.9.3 PRECAUCIONES EN EL DESARROLLO DE LA PRACTICA.

Dado que en el desarrollo de la presente prctica se ver obligado a trabajar con sustancias como el cido y el anhdrido actico (etanoico), es importante saber que tanto el cido como el anhdrido poseen vapores casticos, por tanto en causa de accidente ingiera o lvese con abundante agua y neutralice con solucin de bicarbonato de sodio. 7.9.4. REACTIVOS Y MATERIALES.

Anilina al 90%, densidad 1.025 g/c.c. Anhdrido actico al 98%, densidad 1.082 g/c.c. Acido actico al 96%, densidad 1.06 g/c.c. Etanol, Hielo, Vidrio molido. 7.9.5 PROCEDIMIENTO.

Prepare el material necesario para el montaje de calentamiento con un equipo de reflujo (ver Fig.7). En un baln de 200 ml. vierta 12 c.c. de cido actico glacial y 20 c.c. de anhdrido actico (La reaccin entre estos reactivos es exotrmica, por tanto actu con precaucin). Una el baln con un refrigerador de reflujo y caliente la mezcla por 20 minutos en ebullicin. Al final del calentamiento, enfre el baln con agua y vierta su contenido en un erlenmeyer que contenga 30 c.c. de agua y 30 g. de hielo, agite bien la mezcla y recoja los cristales sobre un embudo de buchner. Lave los cristales con agua fra, squelos y calcule el rendimiento en bruto. Conserve la acetanilida para las prximas prcticas. 7.10. METODOS ORGANICOS. DE SEPARACION Y PURIFICACION DE COMPUESTOS

Una vez obtenido el derivado (la acetanilida, en el ejemplo de la presente gua), se hace necesario purificarlo por medio de la separacin de los residuos de los reaccionantes, antes de determinar sus propiedades fsicas. Por tal motivo, en esta prctica se har un esbozo general sobre los mtodos ms importantes de purificacin y separacin de sustancias orgnicas. La purificacin y la separacin de compuestos orgnicos se realizan de manera simultnea, puesto que una sustancia no es pura si tiene mezclas y separndola de stas se le purifica, lo que trae como consecuencia que la informacin que se obtiene del compuesto estudiado sea confiable. Para purificar sustancias orgnicas se conoce, como los ms comunes, los siguientes mtodos: la recristalizacin o cristalizacin y la sublimacin para slidos; la destilacin y la extraccin para lquidos y la cromatografa para toda clase de compuestos orgnicos. 7.10.1 LA RECRISTALIZACION Este mtodo, denominado tambin, cristalizacin, se utiliza para la separacin y purificacin de sustancias slidas y tiene como fundamento, la diferencia de solubilidad que presentan distintos compuestos en un mismo solvente. La sustancia impura se disuelve en el solvente adecuado, hasta lograr una solucin sobresaturada, se filtra en caliente, para luego, dejarla cristalizar a medida que la solucin se enfra.

El xito de la cristalizacin depende de la escogencia del solvente, en el cual debe disolverse en caliente slo la sustancia en estudio, mas no las mezclas que deben ser atrapadas por filtracin al encontrarse en estado slido y no en solucin. Adems, el solvente debe llenar un sinnmero de requisitos que obligan al analista a utilizar una compleja gama de mtodos empricos con base en leyes generales y su experiencia personal. As, lo ideal es que la solubilidad de la sustancia en estudio llegue al mximo a una temperatura cercana al punto de ebullicin del solvente y tienda al mnimo, a temperatura ambiente. Las mezclas o impurezas debern ser completamente insolubles en caliente, as se podrn separar por filtracin de la solucin o completamente solubles, de tal manera que se queden en solucin despus del enfriamiento y la cristalizacin del compuesto analizado. Se recomienda tambin que el punto de ebullicin del solvente se encuentre entre 1015 grados por debajo del punto de fusin del compuesto estudiado. 7.10.2 SOLVENTES COMUNMENTE UTILIZADOS EN LA CRISTALIZACION. a. SELECCIN DEL SOLVENTE. Como seleccionar el solvente? Para la escogencia del solvente se toma una pequea cantidad de la sustancia analizada y se deposita en un tubo de ensayo. Si la sustancia se disuelve en fro se debe hacer una sola conclusin: este solvente no sirve, en este caso, para la cristalizacin. Si la sustancia se disuelve parcialmente o no se disuelve se debe calentar el tubo de ensayo hasta la ebullicin. Si es necesario se debe agregar unas cuantas gotas ms de solvente para lograr total disolucin. Se filtra la solucin en caliente y si despus de enfriarla aparecen cristales se puede concluir que el solvente sirve en el caso dado, para la cristalizacin. Si la sustancia no se cristaliza al enfriase la solucin, la conclusin es de que el solvente no sirve para la cristalizacin en la situacin en estudio.Los solventes ampliamente utilizados en la recristalizacin se exponen en la Tabla 2 Tabla 2. Caractersticas de los solventes de uso comn en los procesos de recristalizacin.
Nombre comn Formula O // CH3CCH3 C6H6 H2 O HCON ( CH3 )2 C2 H5 0 C2 H5 C6 H5 NO2 p.e., C p.f.,C

Acetona Benceno Agua Dimetilformamida Eter Etlico Nitrobenceno

56.1
80,2 100.0 153.0 34.6 210.9

-95.0
5,0 0,0 -61.0 -116. 5.7

Tolueno Cloroformo Etanol Acetato de etilo

C6H5CH3 CHCl3 C2 H5 OH CH3 COOC2 H5

110.9 61.3 78.3 77.2

-95.0 -63.5 -114.5 -84.0

7.10.3- PROCEDIMIENTO DE LA CRISTALIZACION. Para realizar la cristalizacin se monta un equipo de calentamiento con reflujo (ver Fig.10) que consiste en un baln de fondo redondo y un refrigerador de bola. La sustancia se coloca en el baln y se agrega una cantidad de solvente, insuficiente pues el exceso puede lograr la disolucin en fro, luego se agrega a travs del refrigerador pequeas cantidades de solvente hasta lograr que el compuesto se disuelva en caliente (algunas mezclas pueden quedar insolutas), se agrega una pequea cantidad de carbn activado, la solucin se filtra en caliente y se deja enfriar hasta la cristalizacin plena (aparicin de precipitado). 7.10.4 SUBLIMACION. Este mtodo para la separacin y purificacin de slidos, consiste en el paso de una sustancia de estado slido a gaseoso, sin pasar por el estado lquido. Para realizar experimentalmente la sublimacin se procede de la siguiente manera: la sustancia a sublimar se coloca en una cpsula que se cubre con papel filtro agujereado, encima del cual debe ir un cono de cartn o un embudo (ver Fig. 13). Por efectos del calentamiento la sustancia se evapora, atraviesa el papel filtro por los poros y agujeros y se deposita, en forma de cristales en las paredes del cono o embudo, de donde puede ser recogida con una esptula y conservada para posteriores anlisis.

La sublimacin al vaco se realiza en equipos complejos, en casos especiales, cuando es necesario reducir el punto de sublimacin de la sustancia analizada. La metodologa se expone en la literatura especializada. 7.10.5 LA DESTILACION. Este mtodo, al que ya se hizo alusin, en todas sus variedades, se utiliza para la separacin y purificacin de lquidos. Los elementos y equipos bsicos de la destilacin fueron expuestos en el numeral 6.3.2 de la presente gua. 7.10.6 EXTRACCION La extraccin consiste en el paso de una sustancia en solucin de un solvente a otro en el que presenta por lo general, mayor solubilidad. En la forma ms elemental, la extraccin se realiza en embudos de decantacin (ver Fig. 12.) agitndolos enrgicamente. De soluciones acuosas, en la mayora de las veces, las sustancias orgnicas son extradas con solventes como el ter, benceno y otros de carcter orgnico. La sustancia pasa de la capa acuosa a la capa del solvente orgnico, del que puede ser separada por cualquiera de los mtodos de destilacin. Para casos ms complejos se utilizan equipos ms eficientes y precisos como el equipo de Soxhlet (ver Fig. 11.). 7.10.7. LA CROMATOGRAFIA. Por cromatografa se distingue un grupo de mtodos, cuyo principio comn se basa en que la mezcla a separar se le deja pasar por un adsorvente, capaz de interactuar con todos o casi todos, los componentes de la mezcla, de tal manera que las sustancias que son absorbidas con mayor intensidad, se van rezagando de las que son absorbidas dbilmente y de esta manera se produce la separacin de unas y otras. Los mtodos cromatogrficos ms conocidos son: cromatografa de columna, cromatografa de capa delgada, cromatografa de papel, cromatografa gas-lquido. Con algunos de estos mtodos el estudiante se encontrar en asignaturas como la bioqumica, adems del reconocimiento preliminar que deba hacerse para cada caso concreto dentro del estudio de materiales vegetales del presente curso (numeral 6.2), 7.10.7 DETERMINACION ORGANICOS. DE PROPIEDADES FISICAS EN COMPUESTOS

Las propiedades fsicas tambin llamadas constantes fsicas son utilizadas como criterio de pureza y para demostrar la individualidad de sustancias orgnicas. Entre las propiedades fsicas ms importantes y comunes tenemos: a- Punto de fusin, b- Punto de ebullicin, c- Densidad, d- Indice de refraccin.

Otras propiedades como el peso molecular, la refraccin molecular, la viscosidad, de gran importancia requieren de modos complejos en su determinacin por tanto estn por fuera del alcance del presente programa. PUNTO DE FUSION (p.f.) El p.f. es la temperatura a la cual un slido se convierte en lquido, se utiliza en la identificacin de sustancias slidas. Una sustancia puede ser considerada pura, si se funde en un intervalo no superior a 12 grados oC; las sustancias impuras se funden en intervalos trmicos mucho ms amplios. Es importante tener en cuenta que muchas veces el p.f. vara segn los solventes empleados en la cristalizacin. DETERMINACION DEL PUNTO DE FUSION. Cuando existe una cantidad suficiente de sustancia, esta se funde con un termmetro introducido en lla, luego se separa la fuente de calor y se determina la temperatura en el momento de solidificacin. Si no se dispone de grandes cantidades, se usan tubos capilares. Para ello, se coloca una pequea cantidad de la sustancia pulverizada y bien seca en un tubo de vidrio estirado (capilar) de unos 6 mm. de longitud, unido a un termmetro. Se coloca el capilar y el termmetro en un tubo termorresistente que contenga cido sulfrico concentrado, aceite u otro lquido de elevado punto de ebullicin, hasta un tercio de su capacidad. A continuacin se calienta el conjunto hasta la fusin del slido contenido en el capilar que debe tomar un aspecto transparente. La temperatura no vara mientras transcurre la fusin., por eso la velocidad de calentamiento no debe superar 2-3oC por minuto. Para la medicin del p.f. se utilizan varios equipos, entre ellos, los ms conocidos son: El tubo de THIELE, El tubo de TERENTIEV y equipos elctricos (ver Fig. 12).

PUNTO EBULLICION (p.e.) El punto de ebullicin es la temperatura en la cual una sustancia pasa de estado lquido al estado gaseoso (vapor) y se utiliza en la identificacin de sustancias lquidas. La manera ms exacta de medir el p.e. a presin atmosfrica, es utilizando el proceso de destilacin, cuando los vapores del compuesto en destilacin, aneguen el termmetro entes de llegar al refrigerador en este se fijar una temperatura igual al p.e. de la sustancia. Para mayor exactitud, se debe esperar dos o tres minutos despus de la aparicin de los primeros vapores. El p.e. depende sensiblemente de la presin, de ah que en cada caso concreto sea necesario anotar las condiciones en las que se realizan la destilacin de lo contrario la informacin obtenida puede perder su valor. DENSIDAD (d, g/l). Llmese densidad a la relacin existente entre las unidades de masa de una sustancia y el volumen que esta ocupa o desaloja en determinadas condiciones de presin y temperatura. La determinacin de la densidad se puede realizar para slidos, lquidos y gases, pero fundamentalmente se determina en lquidos, caso que vamos a analizar a continuacin 1. La densidad para lquidos se puede medir utilizando densmetros que dan directamente su valor. Este mtodo se utiliza para casos donde no se requiere de alta precisin. 2. Cuando se necesita exactitud en la medicin de la densidad de un lquido, se utilizan picnmetros. 3. Por lo general se trabaja con pequeas cantidades, por eso veamos cmo realizar la medicin de la densidad de un lquido con ayuda de picnmetros. 4. El picnmetro es un recipiente de vidrio de volumen exacto (1, 2, 5, 10 o ms ml.), de tal manera que si se pesa el picnmetro vaco (Ppv) y luego con el contenido del lquido (Ppl) podemos obtener: El peso del lquido (pl) sustrayendo del peso del picnmetro con el lquido el peso del picnmetro vaco, esto es: Pl = Ppl - Ppv - Pero como el picnmetro tiene un volumen exacto que es el volumen que ocupa el lquido podemos conocer la densidad dado que la relacin es: d = pl/v Es importante tener en cuenta que este valor de la densidad es vlido slo a la temperatura de la medicin, que debe ser indicada de lo contrario no se sabr a qu

atenerse, puesto que la densidad de un lquido es funcin de la temperatura y vara sensiblemente con la variacin de esta y como al realizar determinada medicin la temperatura ambiente no siempre concuerda con los datos bibliogrficos, se hace necesario realizar mediciones a diferentes temperaturas para que se pueda hallar el coeficiente que permita pasar de la densidad experimental a la tabulada. INDICE DE REFRACCION. El ndice de refraccin absoluto de una sustancia representa la relacin de la velocidad de haz en el vaco con la velocidad del mismo en las sustancias analizadas. En las determinaciones comunes se toma como medio de comparacin no al vaco sino al aire. Como la velocidad de la luz en el aire siempre ser mayor que la velocidad de la luz en una sustancia, se llega a la conclusin que el ndice de refraccin siempre ser mayor que la unidad, as para el agua el ndice de refraccin a 20o C de D - longitud de onda de la luz utilizada es ND20 =1,3333. El ndice de refraccin vara con la variacin de la temperatura del lquido y la longitud de onda de la luz utilizada y cada vez que se haga una medicin deben ser indicados estos valores. Adems es necesario reunir la informacin que permita convertir los valores del ndice de refraccin a la temperatura de la medicin a valores del mismo tabulados (generalmente 20o C). Para tal fin se emplea la siguiente ecuacin: ND 1 = ND 2 A . t Donde ND 1 -valor del ndice de refraccin a temperatura tabulada. t ND 2 -valor del ndice de refraccin a la temperatura de la medicin. A - coeficiente trmico, en promedio, A= 1 .10-4 t -= t2 - t1 t1 - t2; El signo (+) ante el coeficiente A se utiliza cuando t2 > t1 y el signo (-) cuando t2 < t1. El ndice de refraccin se mide con el refractmetro, formado por lentes de Nicol en forma de prismas que dan la relacin de la velocidad de la luz en el aire y en lquido de estudio. Dada la complejidad del refractmetro, todo lo que tiene que ver con su funcionamiento y manejo se ver en el laboratorio. 7.10.8 PASOS PARA LA IDENTIFICACION DE UNA SUSTANCIA ORGANICA Un compuesto orgnico puede ser considerado completamente identificado cuando existe completa identidad de sus propiedades fsicas y qumicas con relacin a un compuesto cuyas caractersticas son conocidas y han sido descritas en la literatura especializada. Por ejemplo, se puede asegurar que una sustancia analizada es etanal (acetaldehdo), as: a. Las propiedades fsicas determinadas experimentalmente alcanzaron los siguientes valores: Densidad, d = 0-783 g/c.c. a 20 C; Indice de refraccin, N20D = 1.3392 Punto de ebullicin, p.e. = 21 C a 760 mm Hg
t t t

b. Present prueba positiva de acidez que no se mantuvo al adicionar gotas de NaHCO3. c. Present la prueba del espejo de plata con el reactivo de Tollens. Esto es, que para identificar una sustancia orgnica se necesita poseer informacin sobre sus propiedades fsicas para compararlas con las mismas de sustancias orgnicas plenamente conocidas. Adems que sus propiedades qumicas sean semejantes a las del respectivo grupo funcional. En la presente gua se propone los siguientes pasos para la identificacin de una sustancia orgnica. 1. Purificarla en el caso de que haya sospechas sobre su grado de pureza. 2. Determinar sus contantes fsicas 3. Comparar las propiedades fsicas determinadas con las propiedades fsicas de sustancias orgnicas conocidas en la literatura especializada. Para ello escoja cinco sustancias con propiedades fsicas mayores de cinco sustancias con propiedades fsicas menores que las de la sustancia analizada. O sea que para el caso del acetaldehdo, arriba expuesto, sera:

Sustancia A

P.E, C. 18.5

d,g/ml 0.7650

ND20 (Indice de refraccin) 1.3350

B C D

19.0 19.5 20.5

0.7700 0.7750 0.7800

1.3360 1.3370 1.3380

Sustancia Analizada F

21.0 21.5

0.7839 0.7850

1.3392 1.3395

G H Y

21.9 22.0 22.5

0.7890 0.7900 07920

1.3396 1.3400 1.3405

Cuando se haya logrado (como ya se expres) plena identidad de las propiedades fsicas y las pruebas presentadas por la sustancia analizada con las propiedades fsicas tabuladas y las propiedades qumicas de una sustancia orgnica determinada, se puede declarar que la identificacin de la sustancia desconocida ha sido plenamente realizada. 5. En ciertos casos se puede recurrir a anlisis ms preciso como los mtodos de espectroscopia infrarroja, ultravioleta, resonancia magntica, pero estos no se incluyen en el presente compendio, aunque estn descritos en la literatura de la materia. 6. Elabore un informe escrito en el que describa todo los pasos realizados que le permitieron identificas plenamente la sustancia analizada. BIBLIOGRAFIA 1. PHYTOCHEMICAL AND ETHNOBOTANICAL DATABASES. Disponible en: http://www.ars-gri.gov/duke/. ADOLFO PAZMIO. ALELOPATIA. UNIVERSIDAD DE CHILE. ESCUELA DE AGRONOMA .FISIOLOGIA VEGETAL .Disponible en: http://www.emas.co.cl/categorias/cnaturales/alelopatia.htm ELABORACION DE EXTRACTOS DE HIERBAS MEDICINALES. Disponible en: http://elaboracionextractos.blogspot.com/2009/08/1.html RESTREPO FABIO, ARANGO LIA. Qumica Orgnica. Manual de laboratorio. UNAL. Medelln.1980. ELABORACIN DE CHAMP ECOLGICO (A BASE DE PRODUCTOS ORGNICOS Y PLANTAS). Disponible en: http://www.monografias.com/trabajos15/elaboracionchampu/elaboracion-champu.shtml. CHERONIS NICHELAS D. Seminario Cualitative organic analysis. The sistematic identification of organic comprends. Intersciencie Publishers. McELVIN SASMUD M. La caracterizacin de compuestos orgnicos (Anlisis orgnico funcional) Madrid. Aguilar: 1960. Fotocopia. RICHE ALFRED. Qumica orgnica tcnica. Fundamentos de qumica industrial .Zaragoza. Espaa, Acribia .1967. SHINER RALPHI. Identificacin sistemtica de compuestos orgnicos. Mxico, Limusa Wiley. 1972. DOMINGER JORGE A. Fundamentos y problemas de qumica orgnica.Mxico, Limusa.1975. ORGANISH-CHEMISCHES-PRAKTIKUM. Prof.Dr. nat hqabil G. Kampter Hochshule Postdam . En ruso . Mosc. 1973.

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