a) b) c) d) e)

El proceso de separacin en GC Inyeccin de las muestras Detectores Preparacin de muestra Puesta a punto de un mtodo en GC

En GC se hace pasar el analito en forma gaseosa a travs de la columna, arrastrado por una fase mvil (gas portador)

La columna debe estar lo suficientemente caliente para que los analitos alcancen una presin de vapor adecuada y eluyan en un tiempo razonable. El detector se mantiene a una T ms elevada que la columna, de forma que los analitos se encuentren en forma gaseosa.

La cromatografa de gases es una tcnica cromatogrfica en la que la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos de cromatografa, la fase mvil no interacciona con las molculas del analito; su nica funcin es la de transportar el analito a travs de la columna.

Gas de acarreo Controladores de flujo Inyectores Columnas Detectores Sistema de datos

El gas portador o fase mvil, es el que transporta a los compuestos a travs de la columna Debe ser qumicamente inerte, puro (>99%), seco y se aconseja colocar un filtro de carbn activo y una trampa para humedad antes de la entrada del gas al instrumento El tipo de gas acarreador depende de la velocidad requerida para el anlisis y el tipo de detector a emplear. Los ms utilizados son helio, nitrgeno, hidrgeno o una mezcla argn con 5 % de metano

Con ciertos tipos de columnas y detectores, se requiere el uso de un gas de complemento en el detector (make-up). El make-up, es un gas de arrastre adicionado al efluente de la columna antes de que pase al detector. El sistema del gas portador, por lo general contiene uno o varios tamices con el objeto de eliminar humedad, hidrocarburos y oxgeno. Los caudales utilizados en las columnas empacadas oscila entre 25 y 90 ml/min y de 1 a 2 ml/min en las capilares.

Split

Splitless

Modo con divisin para analitos en concentraciones altas Modo sin divisin para analitos en concentraciones traza Instalacin de una columna capilar en el inyector

Inyeccin sobre la columna

On-column

Vaporizacin de T programada (PTV)

 Eficacia de la columna requiere que la

muestra sea de un tamao apropiado

Es necesario que la muestra sea como un

tapn de vapor

La inyeccin lenta de muestras demasiado

grandes provoca un ensanchamiento de las bandas y una mala resolucin

En general, se inyecta la muestra con una micro jeringa a travs de un septum. El septum, esta situado en una cmara de vaporizacin instantnea en la cabeza de la columna. La cmara debe estar a 50 C por encima del punto de ebullicin del compuesto ms voltil.

Split: Mtodo de rutina 0.1-1% de la muestra va a la columna Resto a desperdicios Splitless: Toda la muestra va a la columna Ideal para anlisis cuantitativo Solo para anlisis de trazas o muestras de baja concentracin On-column: Para muestras que se descomponen por encima de su punto de ebullicin- portal de inyeccin no calentado La columna debe encontrarse a una T baja para condensar la muestra en una banda estrecha Al calentar la columna la cromatografa comienza.

Es donde ocurre la separacin y es el corazn de un cromatgrafo.

Columnas empacadas de: cobre, aluminio, acero inoxidable, vidrio o tefln. Columnas capilares de slice fundida recubiertas con poliimida. El empaque puede ser un slido, un lquido o un slido recubierto por un lquido.

Empacadas o rellenas

Las dimensiones de una columna empacada oscilan entre: - 2 y 4.6 mm de dimetro interno (DI) y de 1/8 a 1/4 de pulgada de dimetro externo (DO). - Longitud entre 6 y 30 pies para las ms comunes Superficie especfica grande (1 a 20 m2/g), un ejemplo de stas son la serie Chromosorb (tierra de diatomeas) (G, P y W).

 Soporte

slido (diatomita), de partculas porosas y uniformes (10mm), libre de xidos catalticos (causan descomposicin parcial de la muestra). estable trmica y qumicamente.

Fase

Tubo abierto capilar

W.C.O.T. (Wall Coated Open Tubular)

P.L.O.T. (Porous layer Open Tubular)

S.C.O.T. (Support Coated Open Tubular)

F.S.O.T. (Fused Silica Open Tubular)

Longitud de la Columna Dimetro de la Columna (1/4", 1/8", 1/16" de dimetro externo) Tamao de las partculas del empaque Naturaleza de las fases Grosor de fase estacionaria Temperatura de la columna Velocidad del gas portador Cantidad de muestra inyectada

SKOOG,Douglas y LEARY,James. Anlisis Instrumental. 4 Edicin. McGraw-Hill. Espaa.1994

Polidimetilsiloxano

Polietilenglicol

SKOOG,Douglas y LEARY,James. Anlisis Instrumental. 4 Edicin. McGraw-Hill. Espaa.1994

Detectores

Empleado frecuentemente para compuestos halogenados

Empleado para hidrocarburos, poco sensible a compuestos muy oxidados

Consiste de una llama de hidrgeno-aire y una placa colectora. El efluente de la columna pasa a travs de la llama, que ioniza las molculas orgnicas. Los iones se recogen en un electrodo de polarizacin negativa y producen una seal elctrica. El FID es extremadamente sensible y es el detector ms ampliamente utilizado, su desventaja es que destruye la muestra.

Detector de Conductividad trmica, TCD

Utilizado particularmente con columnas empacadas, detecta H2O, CO, CO2 e H2. Mide la conductividad trmica de un analito en un gas acarreador. La velocidad de prdida de calor de un cuerpo caliente hacia un cuerpo ms fro es proporcional a la conductividad trmica del gas que separa estos cuerpos.

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Estudia las masas de tomos, molculas o fragmentos de molculas. Las especies desorbidas de fases condensadas se ionizan, los iones se aceleran en un campo elctrico y se separan segn su relacin m/z.

Grfico que representa detector frente m/z.

la

respuesta

del

Detecta bajas Co de analito Da informacin cualitativa y cuantitativa de los compuestos que eluyen en la columna Se utiliza para estudiar la secuencia de los aminocidos en protenas, de cidos nucleicos en ADN y estructuras complejas de hidratos de carbono

La operacin general del espectrmetro de masas es:

a) crea iones en fase gaseosa b) separa los iones en base a su relacin (m/z). c) mide la cantidad de iones de cada relacin (m/z).

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Una vez ionizadas las molculas, estas pasan al

analizador de iones el cual los transporta hacia el detector: Existen diferentes tipos de analizadores los que son utilizados de acuerdo a las necesidades. Dentro de los analizadores podemos citar, la trampa de iones, el sector magntico, el tiempo de vuelo, el

cuadrupolo, etc.

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Detector TCD FID ECD FPD

Lmite de deteccin g 10-5-10-6 10-12 10-14 10-13

Rango lineal 103-104 106-107 102-103 102

Comentarios Detector universal Detector universal Detector selectivo Detector Selectivo S,P

Tratamiento soluto No destructivo Destructivo No destructivo Destructivo

NPD
MSD

10-8-10-14
10-12

105-107
Segn tipo detector

Detector Selectivo N,P

Detector universal

Destructivo
Destructivo

Mtodo sencillo de extraccin de lquidos, aire y lodos. Componente clave es una fibra de Si fundida recubierta de una fina pelcula de un lquido no voltil.

Tcnica utilizada en Q. A. compuestos qumicos para identificacin.

para extraer su posterior

Desarrollada a principios de los 90 por el equipo del Dr. Pawliszyn en la Universidad de Waterloo. Es novedosa y relativamente econmica. Se puede implementar tanto en el laboratorio como en el campo.

La extraccin se realiza de manera rpida.

No requiere el uso de solventes. Partes por trilln (ppt).

La SPME posee un gran potencial en aplicaciones en el campo: el muestreo se puede llevar a cabo en lugares remotos sin necesidad de que el personal tenga un alto nivel de experticia.

SPME: When placed into the headspace gas or a liquid, the compounds adsorb onto the fibre

SPME Operation
Es una fibra cubierta con una fase que sirve para la extraccin. Puede estar constituida de un polmero liquido o un absorbente slido. Esta capa puede extraer diferentes tipos de molculas, voltiles o no voltiles, de diferentes tipos de medios en fase lquida o gaseosa.

El segundo paso es la desorpcin de los compuestos extrados. Luego de la extraccin, la fibra de SPME es transferida al puerto de inyeccin del instrumento de separacin (generalmente un GC), donde la desorpcin de las molculas toma lugar. La GC permite cuantificar los compuestos separados y en algunos casos identificarlos, pero si el anlisis lo requiere, la espectrometra de masas (EM) es ms cualitativa.

JENNINGS, Walter. Analytical Gas Chromatography. Academic Press. USA. 1987

McNAIR, Harold M. and BONELLI, Ernest J. Basic Gas Chromatography. 5th Edition. Varian Aerograph. USA. 1969
SKOOG,Douglas y LEARY,James. Edicin. McGraw-Hill. Espaa.1994 Anlisis Instrumental. 4

WILLARD, H. H.; MERRITT, L. L. and DEAN, J. A. Instrumental Methods of Analysis. 5th Edition. D. Van Nostrand. USA. 1974.

http://www.chem.vt.edu/chem-ed/ms/ms-intro.html