VALORACIN POTENCIOMTRICA DE LA GLICINA

(Prctica 1) -OBJETIVOEl objetivo de esta prctica es comprender el fundamento de una valoracin potenciomtrica, en nuestro caso, la valoracin de un aminocido muy importante como es la Glicina y que llevaremos a cabo con una base fuerte NaOH (Hidrxido Sdico), observando el cambio de pH durante el curso de la misma, deduciendo al final, la concentracin de Glicina y los valores de pKa1 y pKa2 del aminocido.

-FUNDAMENTO TERICOPara el desarrollo de la prctica tenemos que tener en cuenta varios conceptos importantes como el de cido y base: cido: Toda sustancia que al disolverse (disociarse) aumenta la concentracin de iones positivos del disolvente (H + o H3O+, caso del agua). Base: Toda sustancia que al disociarse, aumenta la concentracin de iones negativos del disolvente (OH-, caso del agua). Lo mismo ocurre con el pH o con el pOH: pH = -log [H+] pOH = -log [OH-] pH + pOH = pKw = 14

Ambos valores son formas de expresar la concentracin de H + y de OH-. Para la determinacin del pH se usan unos aparatos llamados Potencimetros o tambin pH-metros o simplemente utilizando sustancias llamadas indicadores de pH. Cuando reacciona un cido fuerte con una base fuerte tiene lugar una reaccin qumica llamada neutralizacin de forma que en las primeras adiciones de base de concentracin conocida sobre el cido, el pH casi no vara hasta llegar a las proximidades del Punto de equivalencia.

En dicho punto la base habr reaccionado con todo el cido, producindose a partir de ah un aumento brusco del valor de pH debido al aumento de [OH -], hasta la estabilizacin del pH mediante sucesivas adiciones de lcali.

En los casos de reacciones entre cidos fuertes y bases fuertes, el pH de neutralizacin completa es 7, y como todas las reacciones transcurren equivalente a equivalente se cumple que: Vbase . Mbase = Vacido . Macido siendo V el volumen y M la molaridad tanto de la base como del cido. En disolucin acuosa la disociacin de un cido dbil se puede expresar como: K

AH <====> A- + H+ La constante de equilibrio de esta reaccin se relaciona con el pH por la ecuacin de Henderson-Hasselbach (para disoluciones muy diludas se toma aH+, aA- y aAH como valores de [H+], [A-] y [AH]), pudindose calcular el pKa del cido a partir de esta ecuacin, por medidas potenciomtricas de pH. K = [A-][H+] / [AH] ===> log K = log [A-]/[AH] + log [H+]

Reordenando quedar: - log K + log ([A-]/[AH]) = - log [H+] ; pH = pKa + log [A-]/[AH] Ec. Henderson-Hasselbalch Cuando las especies A- y AH se encuentren en igual concentracin (punto de semiequivalencia), su cociente ser la unidad, el logaritmo ser 0, y el pH de la disolucin coincidir con el pKa del cido. As lo determinaremos grficamente. Representando pH frente al Volumen del reactivo titulante obtendremos la curva de valoracin que presentar una forma sigmoidea, con un salto brusco en las proximidades del Punto de equivalencia. Para apreciarlo visualmente se aadir un indicador de pH. Ahora tendremos que aplicar la teora a nuestro caso: La Glicina. Todos los aminocidos poseen un punto en el que se comportan como una sal neutra. En ese punto la carga neta del aminocido es nula ya que los dos grupos disociables tienen su carga de signo contrario y compensada. Dicho punto se llama Punto isoelctrico. La valoracin potenciomtrica de glicina protonada, NaOH dar lugar a una curva (pH frente a volumen de valorante), caractersticas de un cido diprtido y a partir de ella se podrn calcular la concentracin de glicina y los valores de las constantes de equilibrio (Ka1 y Ka2):

En la grfica se pueden observar los dos puntos de equivalencia con un primer salto muy brusco y un segundo salto mucho menos brusco, hasta alcanzar la forma gly- concluyendo as la valoracin.

Para poder calcular las constantes tendremos que considerar los dos equilibrios de disociacin cida de la glicina: Ka1 + NH3 -CH2-COOH <=======> NH3+-CH2-COO- + H+ Ka2 + NH3 -CH2-COO <=======> NH2-CH2-COO- + H+ Y considerando que los coeficientes de actividad pueden considerarse la unidad ya que trabajamos con disoluciones muy diludas: Ka1= [H+][glyH] / [glyH2+] = [H+]o2 / Co - [H+]o Ka2= [H+][gly-] / [glyH] Siendo [H+]o la concentracin inicial de protones y Co la concentracin inicial de glicina.

-MATERIAL Y REACTIVOS Bureta con soporte y pinza para sujetar el electrodo. 2 Vasos de precipitados altos (250 mL). 2 Matraces aforados (250 mL). Pipetas graduadas ( 1 de 1 mL y 1 de 10 mL). Pipetas aforadas ( 1 de 25 mL y 1 de 50 mL). Probeta 10 mL. Pipeta Pasteur y pesasustancias. Reactivo valorante: 250 mL NaOH 0,2M. Reactivos: 250 mL Glicina 0,04M. pH-metro o potencimetro.

-DESARROLLO EXPERIMENTALEl desarrollo experimental es muy sencillo y solo hay que seguir unos cuantos pasos importantes: - Primeramente vaciaremos la bureta de 50 mL que estaba rellena con agua, y la lavaremos con el valorante que vamos a utilizar eliminando as restos de agua. Una vez realizado esto, rellenaremos la bureta con la disolucin de valorante enrasando hasta 0 mL. - Despus habr que preparar la disolucin de la glicina calculando cuanto tendremos que pesar. Una vez pesada la cantidad de glicina que utilizaremos diluiremos con agua y lo verteremos todo con cuidado para no perder nada de la disolucin en un matraz aforado de 250 mL y enrasaremos. - En un vaso de precipitados descargaremos 100 mL de la disolucin que hemos preparado en dos pasos con la pipeta de 50 mL. - Ahora introduciremos el electrodo combinado del potencimetro, lavado y seco, en la disolucin problema con sumo cuidado y comenzaremos la valoracin con descargas de volmenes de 2 en 2 mL de valorante de la bureta, anotando el pH de la disolucin que nos da el potencimetro despus de homogeneizar la disolucin por agitacin durante 5 segundos. - Finalmente al acabar la valoracin se sacar el electrodo y se lavar con agua, guardndolo en su protector. Despus representaremos los datos obtenidos en una grfica y realizaremos todo el proceso 2 veces.

-CLCULOS-

1.) Clculo de la cantidad a pesar de glicina: Conociendo los datos: P.M. = 111,5 g/mol Vol = 0,250 L ==========> 0,04 mol/L 0,250 L 111,5 g/mol = 1,12 g M = 0,04 mol/L Glicina

2.) Determinacin de la concentracin de glicina: Calcularemos la concentracin de glicina mediante la ecuacin que vimos en el fundamento terico: Vvalorante en P.E. Mvalorante = Vinicial problema (100mL). Mproblema En la grfica que viene a continuacin observaremos el volumen de NaOH gastado en el primer punto de equivalencia de forma que: 20,5 mL 0,2 M = 100 mL Mproblema ====> Mproblema = 0,041 M

3.) Clculo de las constantes de equilibrio: Vamos a calcular las constantes de equilibrio observando en la grfica el valor de los pKa pero tambin se pueden calcular mediante las ecuaciones: Ka1= [H+][glyH] / [glyH2+] = [H+]o2 / Co - [H+]o Ka2= [H+][gly-] / [glyH] =====> Ka2= [H+] cuando [gly-] = [glyH]

En la grfica 1: pKa1 = 2,6 pKa2 = 9,7 -----------> -----------> Ka1 = 2,51210-3 Ka2 = 1,99510-10

En la grfica 2:

 pKa1 = 2,8 pKa2 = 9,9

-----------> ----------->

Ka1 = 1,58510-3 Ka2 = 1,25910-10

Grfica 1

Grfica 2

Vval / ml 0 2 10 14 18 20 21 22 23 24 25 26 30 32 34 36 38 40 44 46 48 50 6

pH 2,08 2,15 2,34 2,54 2,88 3,55 4,43 7,7 8,6 9

8,87 9,14 9,69 10,03 10,22 10,48 10,72 11,47 11,65 11,74 11,84 9,82 9,3

Vval / ml 0 4 10 12 13 14 15 16 17 18 19 20 22 24 26 30 34 36 40 42 44 46 48 50 8

pH 2,03 2,18 2,36 2,49 2,63 2,71 2,78 2,87 2,96 3,12 3,25 3,47 3,85 7,3 8,83 9,17 9,58 9,87 10,34 10,62 10,99 11,34 11,55 11,68 11,78

Grfica 1

14

12

10

8 pH 6 4 2 0 0 10 20 30 Vvalorante / mL 40 50 60

Grfica 2

14

12

10

8 pH 6 4 2 0 0 10 20 30 Vvalorante / mL 40 50 60