11) MUTACIONES MUTACIONES: CONCEPTO Y CLASES Es todo cambio en la informacin hereditaria.

Esto es, ser una mutacin todo cambio que afecte al material gentico: ADN, cromosomas o cariotipo. Las mutaciones pueden producirse tanto en clulas somticas como en clulas germinales, en estas ltimas tienen mayor transcendencia. Las mutaciones slo son heredables cuando afectan a las clulas germinales. Si afectan a las clulas somticas se extinguen por lo general con el individuo, a menos que se trate de un organismo con reproduccin asexual. Las mutaciones pueden ser: naturales (espontneas) o inducidas (provocadas artificialmente con radiaciones, sustancias qumicas u otros agentes mutgenos).

Segn la extensin del material gentico afectado se distinguen los siguientes tipos de mutaciones: 1) Gnicas 2) Cromosmicas estructurales 3) Cromosmicas numricas o genmicas 1) Mutaciones gnicas: Son aquellas que producen alteraciones en la secuencia de nucletidos de un gen. Existen varios tipos:

a) Sustituciones de pares de bases. stas pueden ser: - Transiciones: Es el cambio en un nucletido de la secuencia del ADN de una base prica por otra prica o de una base pirimidnica por otra pirimidnica. - Transversiones: Es el cambio de una base prica por una pirimidnica o viceversa.

b) Perdida o insercin de nucletidos. Este tipo de mutacin produce un corrimiento en el orden de lectura. Pueden ser: - Adiciones gnicas: Es la insercin de nucletidos en la secuencia del gen. - Deleciones gnicas: Es la prdida de nucletidos. Las sustituciones provocan la alteracin de un nico triplete y, por tanto, salvo que indiquen un triplete de parada, o un aminocido del centro activo de una enzima, no suelen tener grandes efectos sobre la protena codificada, pues afectan a un nico aminocido y la protena seguir pudiendo realizar la misma funcin. Sin embargo, las mutaciones que impliquen un corrimiento en el orden de lectura, adiciones o deleciones, salvo que se compensen entre s, pueden alterar la secuencia de aminocidos de la protena codificada a partir del punto donde se produjo la mutacin y sus consecuencias suelen ser graves, pues todos los aminocidos de la secuencia proteica a partir de dicho punto sern diferentes..

Mutacin Gnica La alteracin de la secuencia de ADN, mediante el proceso de mutacin, es el origen primario de toda la variacin gentica. Las variantes allicas que surgen por mutacin y que son transmitidas de generacin en generacin hacen posible la evolucin. Las mutaciones que se producen en las lneas germinales son las importantes porque pueden ser transmitidas a la descendencia; aunque hay algunas mutaciones somticas que pueden ser heredadas cuando las estructuras reproductivas surgen de meristemos somticos. Durante la replicacin y en otras ocasiones el ADN es frecuentemente daado por eventos fsicos y qumicos, pero la mayora de los daos son reparados por enzimas. Sin embargo, algunas de tales alteraciones escapan a la reparacin enzimtica, constituyndose en mutaciones gnicas. Dos conclusiones importantes que se derivan son que (1) el proceso de mutacin no es una adaptacin sino la consecuencia de un error (un dao no reparado del ADN) y (2) las mutaciones afectan solo rasgos pre-existentes. La mutacin es un proceso aleatorio (estocstico) en el sentido de que la ocurrencia de una mutacin particular no est determinada por la presencia o ausencia del organismo que la sufre en un ambiente donde la mutacin podra ser ventajosa; es decir, cuando la mutacin causa una sustitucin de un aminocido en una protena lo hace sin considerar si el cambio es ventajoso para la protena. Tambin es aleatorio porque si bien podemos predecir la probabilidad de que ocurra una mutacin particular, no podemos predecir cual de un gran nmero de copias gnicas sufrir la mutacin. Que la mutacin sea un proceso estocstico no significa que todos los sitios en el ADN se alteren con igual frecuencia o que el ambiente no afecte las tasas mutacionales; en efecto, sabemos que la exposicin a varias clases de radiacin, a ciertas sustancias qumicas o an la desnutricin incrementan las tasas de mutacin. Las mutaciones pueden consistir en la alteracin de un nucletido en la secuencia del ADN, caso en el cual se denominan mutaciones puntuales, o en la prdida o reorganizacin de grandes fragmentos de ADN, caso en el cual se denominan alteraciones del cariotipo o aberraciones cromosmicas.

Mtodos para detectar la variacin gentica Existen numerosos mtodos para detectar la variacin gentica. Cada uno tiene sus alcances y limitaciones y se han desarrollado para diferentes casos. A continuacin damos una descripcin muy breve de los ms importantes: RFLP (Restriction Fragment Site Polymorphism): Mediante cortes de determinadas secuencias del ADN con enzimas que reconocen especficamente tales sitios se generan fragmentos cortos y largos (fragmentos de restriccin) que hibridan con sondas de ADN construidas especficamente para reconocerlos. En la poblacin algunas secuencias de ADN contienen sitios particulares de restriccin, mientras que en otras homlogas faltan a causa de la mutacin. Los individuos que presentan un sitio de restriccin determinado en ambas secuencias homlogas sern homocigotos y generarn una sola banda electrofortica, la cual puede ser larga o corta. Los individuos con un sitio de restriccin presente en un cromosoma pero no en el homlogo sern heterocigotos y generarn dos bandas electroforticas, una larga y una corta. Debido a que con los RFLPs podemos diferenciar los individuos homocigotos de los heterocigotos concluimos que estos polimorfismos son codominantes. AFLP (Amplified Fragment Lenght Polymorphism): estos polimorfismos se detectan con iniciadores de PCR que son homlogos a ciertas secuencias de ADN doble hebra, las cuales a su vez se han unido previamente a fragmentos de restriccin genmicos usando la enzima ADN ligasa. Las secuencias unidas se conocen como adaptadores. Los fragmentos de restriccin ligados a sus adaptadores producen muchos fragmentos que se amplifican simultneamente con iniciadores de PCR especficos. Al igual que con los RAPDs, los polimorfismos generados son dominantes; es decir, no se diferencian los individuos homocigotos de los heterocigotos.

Polimorfismos Microsatlites y Minisatlites de ADN: Existen en el ADN numerosas regiones donde se encuentran secuencias repetidas de 2 a 9 pb (microsatlites) o de 10 a 60 pb (minisatlites), las cuales se pueden identificar utilizando iniciadores de PCR que hibridan secuencias nicas que flanquean los micro- o los minisatlites. Estos polimorfismos difieren en el nmero de repeticiones; cada sitio en un cromosoma que contenga repeticiones tiene un nmero diferente de copias de las repeticiones en la poblacin. Estos polimorfismos son codominantes, los heterocigotos generan dos bandas electroforticas y los homocigotos una cuyo tamao depende del nmero de secuencias repetidas. Figura 1.

RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA): Con este mtodo no se requieren sondas de ADN ni informacin previa acerca de la secuencia como en los RFLPs. En este mtodo se usa un conjunto de iniciadores de PCR (Reaccin en Cadena de la Polimerasa) de 8 a 10 pb cuya secuencia es aleatoria. Se generan un conjunto de bandas electroforticas que indican la presencia de fragmentos de ADN que son dominantes sobre su ausencia. Es decir, dos secuencias homlogas que son amplificadas se visualizarn como una sola banda en las electroforesis; si se amplifica una secuencia pero no la homloga, igualmente, se visualizar una sola banda electrofortica (la correspondiente al fragmento amplificado). En el individuo cuyas secuencias homlogas no amplifiquen a causa de que la mutacin hizo perder el sitio de acoplamiento de los iniciadores de la replicacin del ADN, no se generarn bandas electroforticas. Tenemos, entonces que los individuos heterocigotos no se diferencian en las electroforesis de los homocigotos y por ello los polimorfismos son dominantes. Figura 2.

Polimorfismos de protenas: Frecuentemente se encuentran en el citoplasma celular enzimas que a pesar de catalizar un sustrato nico presentan formas alternativas que difieren en su composicin aminoacdica a causa de mutaciones no sinnimas en el ADN. La presencia de formas alternativas de una misma enzima (isoenzimas) se puede detectar en electroforesis como polimorfismos codominantes.

Mutacin gnica

Mutacin de ADN.

En Gentica se denomina mutacin gentica, mutacin molecular o mutacin puntual a los cambios que alteran la secuencia de nucletidos del ADN. Estas mutaciones pueden llevar a la sustitucin de aminocidos en las protenas resultantes. Un cambio en un solo aminocido puede no ser importante si es conservativo y ocurre fuera del sitio activo de la protena. De lo contrario puede tener consecuencias severas, como por ejemplo: La sustitucin de valina por cido glutmico en la posicin 6 de la cadena polipptidica de la beta-globina da lugar a la enfermedad anemia falciforme en individuos homocigticos debido a que la cadena modificada tiene tendencia a cristalizar a bajas concentraciones de oxgeno. Las protenas del colgeno constituyen una familia de molculas estructuralmente relacionadas que son vitales para la integridad de muchos tejidos includos la piel y los huesos. La molcula madura del colgeno est compuesta por 3 cadenas polipeptdicas unidas en una triple hlice. Las cadenas se asocian primero por su extremo C-terminal y luego se enroscan hacia el extremo N-terminal. Para lograr este plegado, las cadenas de colgeno tienen una estructura repetitiva de 3 aminocidos: glicina - X - Y (X es generalmente prolina y Y puede ser cualquiera de un gran rango de aminocidos). Una mutacin puntual que cambie un solo aminocido puede distorsionar la asociacin de las cadenas por su extremo C-terminal evitando la formacin de la triple hlice, lo que puede tener consecuencias severas. Una cadena mutante puede evitar la formacin de la triple hlice, an cuando haya 2 monmeros de tipo salvaje. Al no tratarse de una enzima, la pequea cantidad de colgeno funcional producido no puede ser regulada. La consecuencia puede ser la condicin dominante letal osteognesis imperfecta. Entre las mutaciones genticas podemos distinguir: Mutacin por sustitucin de bases: Se producen al cambiar en una posicin un par de bases por otro (son las bases nitrogenadas las que distinguen los nucletidos de una cadena). Distinguimos dos tipos que se producen por diferentes mecanismos bioqumicos: o Mutaciones transicionales o simplemente transiciones, cuando un par de bases es sustituido por su alternativa del mismo tipo. Las dos bases pricas son adenina (A) y guanina (G), y las dos pirimdicas son citosina (C) y timina (T). La sustitucin de un par AT, por ejemplo, por un par GC, sera una transicin. o Mutaciones transversionales o transversiones, cuando un par de bases es sustituida por otra del otro tipo. Por ejemplo, la sustitucin del par AT por TA o por CG. Mutaciones de corrimiento , cuando se aaden o se quitan pares de nucletidos alterndose la longitud de la cadena. Si se aaden o quitan pares en un nmero que no sea mltiplo de tres (es decir si no se trata de un nmero exacto de codones), las consecuencias son especialmente graves, porque a partir de ese punto, y no slo en l, toda la informacin queda alterada. Hay dos casos: o Mutacin por prdida o delecin de nucletidos: En la secuencia de nucletidos se pierde uno y la cadena se acorta en una unidad. o Mutacin por insercin de nuevos nucletidos: Dentro de la secuencia del ADN se introducen nucletidos adicionales, interpuestos entre los que ya haba, alargndose correspondientemente la cadena. Mutaciones en los sitios de corte y empalme (Splicing) Las mutaciones de corrimiento del marco de lectura tambin pueden surgir por mutaciones que interfieren con el splicing del ARN mensajero. El comienzo y final de cada intrn en un gen estn definidos por secuencias conservadas de ADN. Si un nucletido muta en una de las posiciones altamente conservada, el sitio no funcionar ms, con las consecuencias predecibles para el ARNm maduro y la protena codificada. Hay muchos ejemplos de estas mutaciones, por ejemplo, algunas mutaciones en el gen de la beta globina en la beta talasemia son causadas por mutaciones de los sitios de splicing.

2) Mutaciones cromosmicas estructurales: Son los cambios en la estructura interna de los cromosomas. Se pueden agrupar en dos tipos: a) Las que suponen prdida o duplicacin de segmentos o partes del cromosoma: - Delecin cromosmica: Es la prdida de un segmento de un cromosoma. - Duplicacin cromosmica: Es la repeticin de un segmento del cromosoma. b) Las que suponen variaciones en la distribucin de los segmentos de los cromosomas. - Inversiones: Un segmento cromosmico de un cromosoma se encuentra situado en posicin invertida. - Traslocaciones: Un segmento cromosmico de un cromosoma se encuentra situado en otro cromosoma homlogo o no.

CARIOTIPOS CON MUTACIONES CROMOSMICAS ESTRUCTURALES

ORIGEN DE ALGUNAS MUTACIONES CROMOSMICAS ESTRUCTURALES Todos los cambios estructurales que se producen en los cromosomas pueden explicarse por la rotura y reunin de sus fragmentos. Podemos considerar 3 casos posibles, el primero se refiere a un solo cromosoma y los dos ltimos a parejas de cromosomas. a) Roturas que afectan a un cromosoma: 1er caso.- Si la rotura se produce dentro de un brazo del cromosoma los fragmentos pueden reunirse dando lugar a una delecin o a una inversin ms un fragmento sin centrmero (acntrico) que se pierde. b) Roturas que afectan a cromosomas distintos: 2 caso.- Si la rotura afecta a dos cromosomas homlogos simultneamente. Despus de la rotura la reunin de los fragmentos puede producir una duplicacin ms una delecin. 3er caso.- Afecta a dos cromosomas no homlogos. Despus de la rotura se produce un intercambio de fragmentos dando lugar a una translocacin entre cromosomas no homlogos: translocacin recproca. Efecto fenotpico de las mutaciones cromosmicas estructurales: Las deleciones y duplicaciones producen un cambio en la cantidad de genes y por tanto tienen efectos fenotpicos, por lo general deletreos. Sin embargo las inversiones y translocaciones no suelen tener efecto fenotpico, pues el individuo tiene los genes correctos, aunque de las translocaciones pueden derivarse problemas de fertilidad por apareamiento defectuoso de los cromosomas durante la gametognesis o la aparicin de descendientes con anomalas. "Le cri du chat" (grito de gato) como ejemplo de mutacin cromosmica estructural: En la especie humana, una delecin particular en el cromosoma 5 provoca el sndrome "cri du chat" (grito de gato) que se caracteriza por microcefalia, retraso mental profundo y detencin del crecimiento. El nombre alude al tipo de llanto particular de los bebs con este sndrome. Importancia evolutiva de las mutaciones cromosmicas estructurales.- La delecin apenas tiene importancia evolutiva, mientras que la duplicacin posee una importancia evolutiva grande. A su vez, las inversiones y translocaciones estn tambin asociadas de una forma importante a la evolucin de los seres vivos. As, por ejemplo, la fusin de dos cromosomas acrocntricos puede dar lugar a uno metacntrico, como ha ocurrido con el cromosoma 2 de la especie humana, que es el

resultado de la fusin de dos cromosomas de un mono antepasado antropomorfo. Distintos genes de hemofilia se han adquirido tambin por duplicaciones en el transcurso de la evolucin. 3) Mutaciones cromosmicas numricas: Son alteraciones en el nmero de los cromosomas propios de la especie. Pueden ser: Euploidas y Aneuploidas a) Euploida: Cuando la mutacin afecta al nmero de juegos completos de cromosomas con relacin al nmero normal de cromosomas de la especie. Las euploidas se pueden clasificar por el nmero de cromosomas que se tengan en: - Monoploida o haploida: Si las clulas presentan un solo juego (n) de cromosomas. - Poliploida: Si presentan ms de dos juegos; pudiendo ser: triploides (3n), tetraploides (4n), etc.

Tambin se pueden clasificar por la procedencia de los cromosomas en: Autopoliploida. Si todos los juegos proceden de la misma especie. Alopoliploida. Si los juegos proceden de la hibridacin de dos especies. Origen de las euploidas.- Si durante la meiosis se produce en algunas clulas la no disyuncin de todos los cromosomas homlogos se originarn dos gametos con 2n cromosomas y dos gametos sin cromosomas (0). La unin de estos gametos entre s o con gametos n, puede producir zigotos haploides, triploides o tetraploides (n+0, n+2n, 2n+2n). En las plantas pueden conseguirse tetraploides, experimentalmente por tratamientos con colchicina. Efectos fenotpicos de las euploidas.- En general, las anomalas de los euploides son menores que en los aneuploides, en los que los efectos fenotpicos son mayores al no mantenerse equilibradas las dosis relativas de genes. b) Aneuploidias: Se dan cuando est afectada slo una parte del juego cromosmico y el zigoto presenta cromosomas de ms o de menos. Las aneuploidas pueden darse tanto en los autosomas (por ejemplo: el Sndrome de Down), como en los heterocromosomas o cromosomas sexuales (por ejemplo: el Sndrome de Turner o el Sndrome de Klinefelter).

stas alteraciones se denominan: - Monosomas: si falta uno de los cromosomas de la pareja de homlogos. - Trisomas: si se tienen tres cromosomas en lugar de los dos normales.

- Tetrasomas: si se tienen cuatro, pentasomas si tiene 5, etc. Ejemplo de trisoma: el Sndrome de Down o trisoma 21. Existe un tipo de trisoma particularmente corriente en la especie humana, es la llamada trisoma 21 o sndrome de Down (tambin conocida como mongolismo). Las personas que presentan este sndrome se caracterizan por tener retraso mental, cuerpo corto, dedos cortos y gruesos, lengua hinchada y un pliegue en el prpado parecido al de las razas monglicas. Parece estar demostrada una cierta relacin entre el sndrome de Down y una avanzada edad en la madre. En ciertos casos de mongolismo el individuo presenta una placa metafsica normal con 46 cromosomas, pero uno de los cromosomas del grupo 13-15 es mayor, por lo que se cree que lo que ha sucedido es una translocacin de uno de los cromosomas 21 en exceso a uno de los cromosomas del grupo 13-15. Parece ser que las trisomas se originan por una no disyuncin (animacin de 240KB) de los cromosomas en la primera divisin de la meiosis.

Importancia evolutiva de las aneuploidas.- Tienen ms importancia evolutiva que las anteriores de cara a la obtencin de nuevas especies.

LAS ANEUPLOIDAS MS IMPORTANTES EN LA ESPECIE HUMANA Y SUS EFECTOS Aneuploidas en los autosomas Sndrome Sndrome de Down Mutacin Trisoma del par 21 Caractersticas fenotpicas Ojos oblicuos, retraso mental, cabeza ancha y cara redondeada. Boca y nariz pequeas, deficiencia mental, lesiones cardacas, membrana interdigital. Poca viabilidad. Labio leporino, paladar hendido, deficiencias cerebrales y cardiovasculares. Poca viabilidad.

Sndrome de Edwards

Trisoma del par 18

Sndrome de Patau

Trisoma del par 13

Aneuploidas en los cromosomas sexuales Sndrome Sndrome de Klinefelter Mutacin Uno o ms cromosomas X en Caractersticas fenotpicas Sexo masculino. Esterilidad, deficiencias

exceso (XXY, XXXY,..). Sndrome de Turner Monosoma del cromosoma X.

Sndrome de doble Y

Dos cromosomas Y (XYY)

Sndrome de triple X

Tres cromosomas X

mentales y algunos caracteres sexuales secundarios femeninos. Sexo femenino con un slo cromosoma X, esterilidad, baja estatura, trax ancho. Varones de estatura elevada, se relaciona con una mayor agresividad, bajo coeficiente mental. Sexo femenino.Rasgos fsicos similares a otras mujeres de su edad, aunque ms altas de lo normal. Problemas de lenguaje. Frtiles.

DETECCIN DE EUPLOIDAS

AGENTES MUTGENOS Un agente mutgeno es todo factor capaz de aumentar la frecuencia de mutacin natural. Existen diversos factores, tanto fsicos como qumicos, capaces de actuar como agentes mutgenos. En realidad, actuarn como agentes mutgenos todos aquellos agentes capaces de alterar el material gentico y en particular, aquellos que alteren la secuencia del ADN. Los principales agentes mutgenos son:

1) Agentes fsicos: - Las radiaciones electromagnticas como los rayos X y los rayos gamma. - Las radiaciones corpusculares como los rayos , los rayos y los flujos de protones o neutrones que generan los reactores nucleares u otras fuentes de radiactividad natural o artificial. - Ciertos factores fsicos como los ultrasonidos, los choque trmicos, la centrifugacin, etc. 2) Agentes qumicos: -Los anlogos de las bases nitrogenadas. -El cido nitroso (HNO2), porque desamina ciertas bases nitrogenadas. -Los alcaloides como la cafena, la nicotina, etc. -El gas mostaza, el agua oxigenada (H2O2), el ciclamato, etc. MUTACIONES Y EVOLUCIN La evolucin se debe a aquellos procesos por los que las poblaciones cambian sus caractersticas genticas a lo largo del tiempo. Se llama "pool" gnico de una poblacin al conjunto de genes de la misma, formado por todos los alelos de los genes que tienen los individuos que la constituyen. Una combinacin favorable de alelos en un individuo favorece su supervivencia y por tanto su reproduccin y su extensin en la poblacin. La mutacin es la fuente primaria de variacin, pero no la nica. La recombinacin gnica incrementa la variabilidad. La mayora de los cambios evolutivos se producen por acumulacin gradual de mutaciones en los genes y por variaciones en su nmero y organizacin. Ahora bien, la mayor parte de las mutaciones gnicas son deletreas (mortales) y las que se han mantenido es porque producen una mejora y son las esenciales para la evolucin. La separacin entre los miembros de una poblacin impide el intercambio gentico entre los mismos. Esto produce cada vez ms diferenciacin al necesitar adaptarse a ambientes distintos. Cuando con el tiempo se acumulan diferencias que impiden la reproduccin entre los miembros de esos grupos decimos que se trata de especies distintas. Parece ser que los seres, a lo largo del tiempo, han ido aumentando la cantidad de genes (duplicaciones) lo que ha supuesto que sobre estos genes duplicados pudieran generarse mutaciones con un menor riesgo y favorecer el proceso de creacin de variabilidad. As, en eucariotas, la cantidad de ADN es mayor que en otros grupos y mayor que la necesaria para contener la informacin gentica.

EL CNCER: ENFERMEDAD GENTICA CONCEPTO DE CNCER Y SU RELACIN CON EL ADN Se desarrolla un tumor cuando se produce una multiplicacin y crecimiento irregular de las clulas. En general, los tumores pueden ser: - Tumores benignos: Localizados y sin crecimiento indefinido. - Tumores malignos: Son aquellos tumores que crecen invadiendo y destruyendo a los dems tejidos. El cncer es una enfermedad o un conjunto de ellas que consiste en la multiplicacin de ciertas clulas alteradas que forman tumores malignos y pueden emigrar a otros puntos a travs del sistema linftico o circulatorio: metstasis. Las clulas cancerosas crecen a gran velocidad, tienen protenas de membrana distintas, presentan alteraciones en la forma e invaden a los tejidos prximos. El paso de clula normal a cancerosa se denomina transformacin cancerosa. Puede deberse a: - Mutaciones. - Influencia de factores ambientales. - Presencia de ciertos genes (protooncogenes) que pasan a oncogenes, al sufrir una mutacin. - Presencia de ciertos genes (antioncogenes) o genes inhibidores o supresores de la divisin celular.

1) Cncer producido por virus Se conocen virus que favorecen o facilitan la aparicin de clulas cancergenas, debido a que producen mutaciones y algunas de estas mutaciones pueden ser cancergenas. 2) Cncer producido por sustancias qumicas o por radiaciones. En humanos, la mayora de los cnceres estn fundamentalmente relacionados con agentes cancergenos como: Radiaciones UV, X y nucleares Alquitrn Ahumados Pan tostado chamuscado Amianto Cloruro de vinilo Anilinas Algunos conservantes y edulcorantes artificiales Bebidas alcohlicas (sobre todo de alta graduacin) Tabaco (pulmn) Los agentes mutgenos, en general, pueden ser cancergenos. No son de efectos inmediatos. Es necesario que acten repetidamente y que se presenten otros factores complementarios para que se produzca la transformacin de una clula normal en clula cancerosa.