Ciclo de la urea y alteraciones

Mg Ins Arnao Salas 2013

EAP Medicina Humana

Eliminacin del grupo amino: Reacciones de Transaminacin, Descarboxilacin y Desaminacin oxidativa. Utilizacin del amonio: Glutamato deshidrogenasa, glutamina sintetasa, asparagina sintetasa, carbamoil-P sintetasa. Ciclo de la rea: funciones y alteraciones. Transportadores de rea. Aplicacin clnica: deficiencia de Ornitina transcarbamilasa.

Eliminacin del grupo amino

Reacciones de eliminacin del grupo amino Transaminacin Desaminacin Directa A) Serina deshidratasa. Requiere de PP y forma piruvato B) Treonina deshidratasa. Requiere de PP y forma cetobutirato C) Glutaminasa y asparaginasa D) Histidina urocanato Desaminacin oxidativa A) Glutamato deshidrogenasa B) L-amino oxidasa C) D-amino oxidasa

Transaminacin
Primer paso del catabolismo de la mayora de AA. Enzimas: aminotransferasas (hgado, rin, intestino y msculo) Sustratos: alfa AA y alfa ceto glutarato. Productos: alfa cetocido (der del AA original) y glutamato. Coenzima: piridoxal P Usan los pares Glu/CetoGlut, Asp/OA, Ala/pyr. Excepcin: lisina y treonina. Enzimas inducibles (tiroxina, glucocorticoides)

Componentes de la transaminacin

Especificidad de sustrato Son especficas para uno o unos pocos donadores de grupo amino. Funcionan en el anabolismo y catabolismo. Reaccin reversible AST : aminotransferasa asprtica o TGO. Transfiere grupos amino del glutamato al OA para formar aspartato ciclo de la rea. ALT: aminotransferasa alanina o GPT Transfiere grupos amino de la alanina al cetoglutarato piruvato y glutamato colector de N procedente de la alanina.

TRANSAMINACIN

Keq = 1

Reacciones de desaminacin no oxidativa

Serina deshidratasa

L-Serina

Fosfato de Piridoxal

Piruvato + NH4+

Treonina deshidratasa
Fosfato de Piridoxal

L-Treonina

a- cetobutirato + NH4+

Eliminacin del grupo amino

Enzima mitocondrial, dependiente de P Muy activa en hgado, rin, branquias. En hgado, inhibida por pH bajo y estimulada por NH3

Glutamato deshidrogenasa

Mitocondria Hgado, rin Alto Km para NH3

Para liberar el grupo amino, la transaminacin se acopla a la GluDH

En el catabolismo de AA, acta de manera concertada con la GDH.

Las amino oxidasas eliminan grupos amino

Estas flavoprotenas se encuentran en los peroxisomas junto con la catalasa Rin e hgado de mamferos D amino amino en plantas y paredes celulares de microorganismos. Presentes en la dieta y se metabolizan en el hgado.

Fijacin del NH3

Biognesis del N orgnico

Carbamoil P sintetasa
Existen 2 isoenzimas: a) mitocondrial (CPS-I) . NH3 + HCO3- + 2ATP CP + 2ADP + Pi b) citoslica (CPS-II) Gln + HCO3- + 2ATP + H2O CP + 2ADP + Pi + Glu

Glutamato deshidrogenasa

CE 1. 4. 1. 2 Aminacin reductiva Mitocondria

NH4+ NADH + H+ Estimulada por ADP y NAD+ GDP

Cetoglutarato

NADPH + H+ Estimulada por ATP y GTP NADP+

GLUTAMATO DESHIDROGENASA

Glutamato

Glutamato deshidrogenasa

Homohexamrica

Glutamato DH humana
GLUD 1 y GLUD 2, en matriz mitocondrial. GLUD 1: hgado, cerebro, pncreas y riones pero no en msculos. Importante en el metabolismo del N, glutamato y homeostasis energtica. Inhibido por GTP GLUD 2: retina, testculos y cerebro. Importante para reciclar el glutamato en la neurotrasmisin.

Efectos multi-orgnicos de HHS

Neurochem Int. 2011: 59(4): 445455

Efectos multi-orgnicos de HHS

Neurochem Int. 2011: 59(4): 445455

Glutamina
Acarreador importante del amonio. Donador de grupo amino de muchas reacciones biosintticas. Sntesis en msculo hgado y rin. Concentracin en estado postabsortivo = 0.5-0.6 mmol/l.

Regulacin de la glutamina sintetasa

Citoslica. El hgado y cerebro Formada por 8
subunidades idnticas, pudiendo existir como tetrmero. Inhibidores: gly, ser, ala y C-P. Activador: oxoglutarato (+) desadenilacin: activa (-) adenilacin : inactiva Inhibida por metionina sulfoximina.

GS
activa

GS

AMP

inactiva

Asparagina sintetasa

Equilibrio en el metabolismo de amonio

Fuentes: 1.- Transaminacin acoplada a GDH Oxidasa de AA (peroxismica) 3.- Serina y treonina deshidratasa 4.- Aminooxidasa (mitocondrias) 5.- Hidrlisis de Gln intestinal y renal Escisin de la Gly enNH4, CO2 formando N5,N10 metilenTHF Desaminacin de purina y pirimidinas Ureasa bacteriana

Utilizacin: 1.- Sntesis de Glutamato (GluDH) 2.- Sntesis de Glutamina 3.- Sntesis de rea 4.- Excrecin de NH4+ en orina

En tejidos extra hepticos se realiza la remocin de 2 mol de amonio

NADH a-Ketoglutarate + NH4+

NAD+

Glutamate Glutamato deshidrogenasa

NH4+ + ATP

Glutamine sintetasa ADP + Pi Glutamine

Excrecin de amonio a nivel renal

Glutamine

Glutaminasa NAD+
NH4+

NADH

Glutamate dehydrogenase
Glutamate a-Ketoglutarate + NH4+ (30%)

Proceso sensible a pH. Mantiene la homeostasis cido bsica y elimina N Glutaminasa mitocondrial dependiente de P

En el hgado, el N de los AA se convierte en rea

NADH + NH4+ a-Amino acid a-Ketoglutarate Glu dehydrogenase Urea cycle UREA

Aminotransferase a-Keto acid

Glutamate

NAD+ + H2O

Transporte de N al hgado

Etapas en la eliminacin del amonio

Ciclo de la UREA

Excrecin de compuestos N urinario

Compuesto Urea Urobilingeno N-Metilhistidina Creatinina Aminocidos Acido rico Fuente catabolismo de AA, formacin de amonio ruptura del hemo ruptura de la protena miofibrilar creatina muscular protenas tisulares, pirimidinas Degradacin de purinas

1. Urea es el 85-90% del nitrgeno en orina (20-35 g / 24 h). 2. Amonio es 2-3% (0.7-1 g) 3. El resto de compuestos nitrogenados (10%): cido rico, creatinina , creatina

Ciclo de la rea
Transforma el in amonio en rea. Permite la sntesis de arginina. Localizacin: mitocondrias y citosol del hepatocito. Se requiere 4 enlaces de alta energa . Los tomos de N provienen: NH4+ y Asp GlutDH NH4+ Carbamil-P rea Glu AST Asp Arginosuccinato rea

CICLO DE LA UREA
Comprende las siguientes reacciones:

1. 2.

3.
4. 5.

Sntesis de carbamil fosfato Sntesis de citrulina Sntesis de argininsuccinato Ruptura de argininsuccinato Hidrlisis de arginina

Balance del ciclo de la rea

Eliminacin del amonio

Hepatocitos periportales Hepatocitos perivenosos

Glutamato Glutamina
1 NH4
+

Glutamato Urea
NH4+ 2

Glutamina

Vena porta Glutamina

NH4+

Vena heptica Urea Glutamina

Ciclo glutamato/glutamina Ciclo de la urea

Regulacin de la ureognesis
Existen 2 tipos de regulacin: 1) Control a largo plazo: protenas de la dieta y ayuno.

2) Corto plazo: carbamil-P sintetasa I. activador alostrico: N-acetil glutamato

La sntesis de carbamil-P depende de las concentraciones mitocondriales de Arg y Glu

Mitocondria

Citosol
Ornitina
5

Urea Arginina

2ATP NH4+
1 +

Ornitina
Carbamil-P
2

+
HCO3-

Fumarato

Citrulina N-acetilGlutamato
+ Arg

Arginosuccinato
3 2ATP

Citrulina

Glutamato

Acetil- CoA Aspartato Glu

Aminocidos

Relaciones del ciclo de la rea con el ciclo de Krebs

Respuesta a la acidosis metablica de los mecanismos de eliminacin de amonio

Urea RION

30%

HIGADO Sustratos energticos HCO3HCO3(1) Urea Glucosa

Urea
Glucosa 2-Oxo -glut (4)

Glu NH4+ NH4+ (2) Glu Gln Gln (3)

NH4+

70%

NH4+

Rol del rin bajo condiciones fisiolgicas (a) y en acidosis (b)

a b

J Clin Nutr 2004; 79: 185-97

Destino de la urea
Excrecin a nivel renal Parte de la urea difunde al intestino: ureasa bacteriana. Pacientes con insuficiencia renal: hiperamonemia

Transportadores de rea (UT)

La reabsorcin pasiva de rea se realiza mediante protenas transportadoras de rea (UT) UT-A1-4 son expresados en tbulos renales y UT-A5 slo en testculos. UT-B1 es expresado en los glbulos rojos. Niveles altos de rea en los fludos, participan en mecanismos de osmoregulacin. Niveles urmicos de rea inhiben el transporte de Arg en clulas endoteliales.

Niveles de urea y amonio en sangre

Significado fisiolgico: Uremia : ndice de funcionamiento renal Amonemia: ndice de funcionamiento heptico. Hiperamonemia > 60 umoles/L La deficiencia de alguna de las enzimas del ciclo de la urea suelen conllevar a hiperamonemia y alcalosis respiratoria. Manifestaciones: letargia, hipotermia y apnea, Visin borrosa, temblores, habla incoherente y por ltimo coma y muerte

Hiperamonemias
Hiperamoniemias congnitas
Defectos del ciclo de la urea Defecto de transporte de los metabolitos intermediarios del ciclo de la urea: LIP (Intolerancia proteica lisinrica) y HHH. Acidurias orgnicas Trastornos de la beta-oxidacin de los cidos grasos Otros errores innatos del metabolismo

Hiperamoniemias adquiridas
Sndrome de Reye Fallo heptico

Tratamiento con valproato Infecciones por bacterias ureasa Tratamiento de la leucemia Enfermedades sistmicas graves (RN)

Alteraciones en el transporte de aminocidos

Biochemical Society Transactions (2005) Volume 33, part 1

Sndrome HHH
Hiperornitemia, hiperamonemia, Homocitrulinemia Deficit de transporte de la ornitina a la mitocondria. Ello causa una deficiencia funcional de ornitina transcarbamilasa y ornitina aminotransferasa. Los signos clnicos iniciales son el coma por hiperamonemia, convulsiones e hipotona, puede causar deficiencia mental. Caractersticas bioqumicas: hiperamonemia, excrecin urinaria de homocitrulina, hiperornitinemia plasmtica y excrecin elevada de cido ortico.

Enfermedades congnitas del ciclo de la rea

Hiperamonemia I: CP-sintetasa. Hiperamonemia II: OTC Deficiencia de argininosuccinato sintetasa: citrulemia, hiperamonemia. Deficiencia de arginosuccinato liasa: arginosuccinato en sangre. Deficiencia de arginasa: Argininemia. Deficiencia de acetilglutamato sintasa: hiperamonemia

Hiperamonemia tipo I

Hiperamonemia tipo I

Deficit de arginasa

Citrulinuria

Acidemia arginosuccnica

Causas de la toxicidad del amonio

Interfiere con los intercambios inicos a travs de membrana. Disminuye la concentracin de alfa cetoglutarato. El NH4+ se incorpora al Glu Gln (edema cerebral). La Gln forma por transaminacin alfa ceto glutarmico (txico).
[NH4+] uso de-cetoglutarato TCA [ATP] Necrosis Celular

Caso clnico: Hiperamonemia

Un lactante de 6 meses comenz a vomitar de forma ocasional y dej de ganar peso. Las pruebas habituales de laboratorio: normales Sntomas: somnolencia habitual, temperatura: 39.4 C, pulso acelerado y hepatomegalia. Electroencefalograma : numerosas anomalas. El lactante no retena la leche (por sonda) por lo que se le administr glucosa por va i.v. Mejor Anlisis de orina: presencia de Gln y uracilo . Anlisis de sangre: hiperamonemia.

Preguntas de bioqumica
Qu enzimas podran estar afectadas? Por qu la concentracin de Gln era elevada? Cmo se altera el equilibrio cido-bsico por la hiperamonemia? El paciente fue tratado usando los procedimientos disponibles: Dieta de 1.5 g/kg de peso (2 aos). Su peso y estatura fueron normales.Cul es el efecto de la dieta en un nio en crecimiento en trminos de equilibrio N? Cmo tratara a un paciente similar el da de hoy?

Diagnstico de enfermedades del ciclo de la rea

60 h tras el nacimiento

Sntomas clnicos
Alcalosis respiratoria hiperamonemia Plasma

L-citrulina no detectable Eliminacin renal de orotato Alteraciones compensadoras

L-citrulina elevada

L-argino succinato

L-arginina
normal anormal L ornitina L-glutamina L-alanina Dficit de arginosuccinato sintetasa

Dficit de CPS-I

Dficit de OTC

Dficit de arginosuccinasa

Tratamiento de hiperamonemias

Benzoato
200-300 mg/kg/da

Glicina

Acido hiprico

Glutamina
Acido fenilactico
200 a 600 mg/kg/da

Fenilacetil glutamina

Valina

Leucina

Tratamiento de Hiperamonemias con Cetocidos

Bibliografa
Bioqumica : Herrera Bioqumica un enfoque clnico: Marks Bioqumica : Mathews Bioqumica: Montgomery Bioqumica: Daz Zagoya Hicks Bioqumica clnica: Gonzlez de Buitrago Bioqumica: Villavicencio Van de Poll, Marcel y col. Renal metabolism of aminoacids: its role in interorgan aminoacid. Am J Clin Nutr 2004; 79: 185-97

MUCHAS GRACIAS

POR SU ATENCIN