AMBIENTES DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA

1. OBJETIVO GENERAL Determinar los sectores en donde se realizaran los estudios de la microbiologa clnica.

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS Especificar la distribucin de los materiales en un laboratorio de microbiologa clnica. Determinar las normas que deben existir en un laboratorio de microbiologa.

3. INTRODUCCION Los laboratorios clnicos, especialmente aquellos que funcionan dentro de centros de atencin de la salud, reciben especmenes clnicos con pedidos de una variedad de servicios de soporte clnico y de diagnstico. En general, se desconoce la naturaleza infecciosa del material clnico, y los especmenes, habitualmente se entregan con un amplio pedido de exmenes microbiolgicos de agentes mltiples (por ejemplo, esputo presentado para cultivos de rutina, acidorresistentes y fngicos). El director del laboratorio es el responsable de establecer los procedimientos estndar dentro del laboratorio que tenga en cuenta en forma realista el riesgo infectivo de los especmenes clnicos. 4. MARCO TEORICO Est en funcin del tamao y de la cantidad de trabajo que en l se realice. Est dividido en secciones y estas pueden estar individualizadas o bien todas juntas. 4.1 Secciones del laboratorio de microbiologa 4.1.1 Seccin de toma de muestras: Se toman las muestras a pacientes ambulatorios; all se almacena el material necesario para la toma, que deber ser revisado y repuesto peridicamente. 4.1.2 Recepcin y registro de muestras: (independientemente del lugar donde se hallan recogido las muestras). - Registro y asignacin de un nmero o cdigo. - Primera evaluacin de las muestras: las muestras, dependiendo del anlisis q se valla a realizar, deben cumplir una serie de requisitos y caractersticas fijadas en el laboratorio. Se deben rechazar las q no cumplan ese criterio pues es posible q los resultados no sean correctos. 4.1.3 Seccin de siembra de muestras 4.1.3.1 Procesamiento inicial

Siembra (en el medio de cultivo ms adecuado) Tincin (en colorantes cidos o bsicos) Tcnicas especiales Esquemas claros del procesamiento rutinario y procedimientos especiales: no son iguales de un laboratorio a otro. depender de la experiencia del profesional, entre otras cosas. 4.1.4 Seccin de medios de cultivo 4.1.4.1 Preparacin y lavado de material. 4.1.4.2 Esterilizacin (tanto de los medios de cultivo como de los productos de desecho). - En seco (generalmente para material de vidrio) - En autoclave 121 C/1 atm (productos contaminados antes de desechar) 4.1.5 rea de almacn de productos y reactivos. 4.1.6 Seccin de bacteriologa. 4.1.6.1 Se interpretan cultivos, tinciones y otras tcnicas, realizando identificacin y pruebas de sensibilidad (se refiere a que tipo de antibitico es sensible el microorganismo). 4.1.6.2 Tcnicas de diagnstico rpido para la deteccin de antgenos/anticuerpos directamente en las muestras: - Urocultivos (muestra =orina). - Coprocultivos y parsitos (muestra=heces). - Exudados y anaerobios (muestras=secreciones) - Hemocultivos (muestras=sangre) 4.1.7 Seccin de micobacterias. Debera estar aislada del resto del laboratorio con el fin de evitar la contaminacin del resto del personal. 4.1.7.1 Identificacin y aislamiento de micobacterias (ej. Tuberculosis). 4.1.8 Seccin de micologa. 4.1.8.1 Estudio de infecciones producidas por hongos: - Unicelulares (levaduras) - Filamentosos (mohos) 4.1.9 Seccin de antibiticos. 4.1.10 Seccin de serologa o inmunomicrobiologia. 4.1.11 Otras secciones: virologa y biologa molecular. 4.2 NORMAS GENERALES DEL LABORATORIO. 4.2.1 4.2.2 Calidad en las tcnicas y en los resultados. Seguridad e higiene en el trabajo.

4.3 NIVELES DE SEGURIDAD BIOLOGICAS Segn las tcnicas, los equipos de seguridad y la estructura del laboratorio. 4.3.1 NIVEL 1: Laboratorios de enseanza: microorganismos no patgenos y oportunistas (se refiere a aquellos microorganismos que no son capaces de

producir enfermedad en un individuo sano, pero si en determinadas condiciones de defensas bajas). Los laboratorios deben tener puertas para el control de acceso. Cada laboratorio contiene una pileta para el lavado de manos. El laboratorio ha sido diseado para que su limpieza sea sencilla. Las alfombras no son adecuadas para los laboratorios. Las superficies de las mesas de trabajo son impermeables al agua y son resistentes al calor moderado y a solventes orgnicos, cidos, lcalis y productos qumicos utilizados para descontaminar la superficie de trabajo y los equipos. Los muebles de laboratorio deben tener la capacidad de soportar cargas y usos previstos. Los espacios entre las mesas de trabajo, gabinetes y equipos deben ser accesibles para su limpieza. Si el laboratorio tiene ventanas que se abren hacia el exterior, estn provistas de mosquiteros.

4.3.2

NIVEL 2: Microorganismos de peligrosidad potencialmente moderada. Proveer puertas con llave para las instalaciones que contengan agentes restringidos. Considerar la ubicacin de nuevos laboratorios lejos de las reas pblicas. Cada laboratorio contiene un lavatorio para el lavado de manos. Se recomiendan los lavatorios controlados con los pies, las rodillas o los que operan automticamente. El laboratorio est diseado para que pueda limpiarse fcilmente. Es inadecuado el uso de alfombras y felpudos en los laboratorios. Las superficies de las mesas de trabajo deben ser impermeables al agua y resistentes al calor moderado y a los solventes orgnicos, cidos, lcalis y sustancias qumicas empleadas para descontaminar las superficies y equipos de trabajo. Los muebles del laboratorio pueden soportar las cargas y usos anticipados. Los espacios entre las mesas de trabajo, gabinetes y los equipos son accesibles para su limpieza. Las sillas y otros muebles utilizados en el trabajo de laboratorio deben estn cubiertos por otro material que no sea tela que se pueda limpiar fcilmente. Instalar gabinetes de seguridad biolgica de tal manera que las fluctuaciones del aire de entrada y escape de la sala no hagan funcionar a los gabinetes de seguridad biolgica fuera de sus parmetros para contencin. Coloque los gabinetes de seguridad biolgica lejos de las puertas, de las ventanas que se pueden abrir, de las reas del laboratorio de mucho trnsito y de otros equipos potencialmente interruptores a los fines de mantener los

parmetros del flujo de aire para contencin de los gabinetes de seguridad biolgica. Se debe disponer de una estacin para el lavado de ojos. La iluminacin es adecuada para todas las actividades, evitando los reflejos y el brillo que puedan molestar la visin. No existen requisitos de ventilacin especficos. Sin embargo, la planificacin de nuevas instalaciones debe considerar los sistemas de ventilacin mecnica que ofrezcan flujo de aire hacia el interior sin la recirculacin a espacios fuera del laboratorio. Si el laboratorio tiene ventanas que se abren al exterior, deben colocarse mosquiteros.

4.3.3

NIVEL 3: Microorganismos de alto riesgo. El laboratorio est separado de otras reas abiertas al flujo de trfico irrestricto dentro del edificio, y el acceso al laboratorio est restringido. El pasaje a travs de una serie de puertas que se cierran automticamente es el requisito bsico de ingreso al laboratorio desde los corredores de acceso. Las puertas se pueden cerrar con llave (remtase al Anexo F). Se puede incluir un vestuario en el camino. Cada sala de laboratorio contiene un lavadero de manos. El lavadero se opera automticamente o sin manos y est ubicado cerca de la puerta de salida. Las superficies interiores de paredes, pisos y cielorrasos de las reas donde se manipulan agentes de BSL-3 estn construidas para facilitar la limpieza y descontaminacin. Si existen bordes, deben sellarse. Las paredes, cielorrasos y pisos deben ser lisos, impermeables a los lquidos y resistentes a las sustancias qumicas y desinfectantes normalmente utilizados en el laboratorio. Los pisos deben ser monolticos y antideslizantes. Se debe considerar el uso de cobertores de pisos acanalados. Se sellan las penetraciones en los pisos, paredes y cielorrasos. Las aberturas alrededor de los ductos y los espacios entre puertas y marcos se pueden sellar para facilitar la descontaminacin. Las superficies de las mesas de trabajo deben ser impermeables al agua y resistentes al calor moderado y a los solventes orgnicos, cidos, lcalis y sustancias qumicas empleadas para descontaminar las superficies y equipos de trabajo. Los muebles del laboratorio pueden soportar las cargas y usos anticipados. Los espacios entre las mesas de trabajo, gabinetes y los equipos son accesibles para su limpieza. Las sillas y otros muebles utilizados en el trabajo de laboratorio deben estar cubiertos por otro material que no sea tela que se pueda limpiar fcilmente. Se deben cerrar y sellar todas las ventanas en el laboratorio.

Se cuenta con un mtodo de descontaminacin de los desechos de laboratorio en las instalaciones y se utiliza, preferentemente, dentro del laboratorio (por ejemplo, autoclave, desinfeccin qumica, incineracin, u otro mtodo de descontaminacin aprobado). Se deben considerar los mtodos de descontaminacin de los equipos. Si se transportan los desechos fuera del laboratorio, se debe sellar de manera adecuada y no transportar por los corredores pblicos. Es necesario que se coloquen los gabinetes de seguridad biolgica lejos de las puertas, de las rejillas de ventilacin de la sala y de las reas de laboratorio muy transitadas. Se prev un sistema de ventilacin de aire escape por conductos. Este sistema crea un flujo de aire direccional que toma el aire para el laboratorio de reas limpias y lo elimina en reas contaminadas. El aire de escape no se recircula a ninguna otra parte del edificio. Es probable que no se exija el filtrado y otros tratamientos de aire de escape, pero puede considerarse sobre la base de los requisitos del centro y las manipulaciones de agentes especficos y condiciones de uso. El aire viciado debe dispersarse lejos de las reas ocupadas y de las entradas de aire o se debe filtrar con HEPA. El personal del laboratorio debe verificar que la direccin del flujo de aire (en el laboratorio) sea la adecuada. Se recomienda la colocacin de un dispositivo de monitoreo visual que indique y confirme el flujo de aire direccional hacia adentro en la entrada del laboratorio. Se debe considerar la instalacin de un sistema de control HVAC para evitar la presurizacin positiva constante del laboratorio. Se debe considerar la instalacin de alarmas audibles para notificar al personal las fallas del sistema HVAC. El aire de escape viciado por HEPA desde un gabinete de seguridad biolgica Clase II puede recircularse en el laboratorio si se controla y certifica el gabinete por lo menos una vez por ao. Cuando se tenga que descargar el aire viciado de los gabinetes de seguridad Clase II al exterior a travs de un sistema de aire de escape, se deben conectar los gabinetes de tal forma que se evite interferir con el equilibrio de aire de los gabinetes o el sistema de escape del edificio (por ejemplo, un espacio de aire entre el gabinete de escape y el ducto de escape). Cuando se utilicen gabinetes de seguridad biolgica Clase III, deben estar directamente conectados con el sistema de escape. Si se conectan los gabinetes Clase III al sistema de alimentacin o suministro, debe realizarse de manera tal que se evite la presurizacin positiva de los gabinetes. Las centrifugadoras de flujo continuo u otros equipos que pueden producir aerosoles deben estar contenidos en dispositivos que liberen el aire a travs de filtros HEPA, antes de descargarlo al laboratorio. Estos sistemas HEPA se deben controlar por lo menos

una vez por ao. De manera opcional, se puede ventilar el escape de dichos equipos al exterior si se dispersa lejos de las reas ocupadas y de las entradas de aire. Se protegen las lneas de vaco con trampas de desinfectante lquido y filtros HEPA o equivalentes. Se deben reemplazar los filtros segn sea necesario. Una alternativa es usar bombas de vaco porttiles (tambin adecuadamente protegidas con trampas y filtros). Se dispone de una estacin para lavado de ojos dentro del laboratorio. La iluminacin es adecuada para todas las actividades, evitando los reflejos y el brillo que molestan la visin. El diseo y los procedimientos operativos del establecimiento del Nivel de Bioseguridad 3 deben estar documentados. Se debe hacer una prueba para verificar si se ha cumplido con el diseo y con los parmetros operativos del establecimiento antes de comenzar a operar. Luego se deber hacer una reverificacin del establecimiento, por lo menos una vez al ao, sobre la base de estos procedimientos, segn hayan sido modificados por la experiencia operativa. Se deber considerar la inclusin de proteccin ambiental adicional (por ejemplo: duchas para el personal, filtracin HEPA de aire de escape, contencin de otros servicios entubados y la provisin de descontaminacin de efluentes), si as lo recomienda el informe resumido del agente, segn se determine por la evaluacin del riesgo, las condiciones del lugar, u otras normas federales, estatales o locales aplicables.

4.3.4

NIVEL 4: Debe aplicarse para trabajar con agentes peligrosos y exticos que poseen un riesgo individual alto de producir infecciones de laboratorio transmitidas por aerosoles y enfermedades mortales. Hay dos modelos para los laboratorios de Nivel de Bioseguridad 4: Laboratorio con Gabinete: Donde toda manipulacin del agente es realizada en un Gabinete de Seguridad Biolgica Clase III. Laboratorio en el que se requiere el uso de trajes especiales de seguridad: Donde el personal utiliza un traje de proteccin.

Los laboratorios de Nivel de Bioseguridad 4 pueden estar basados en uno de estos modelos o en la combinacin de ambos en el mismo establecimiento. Si se utiliza una combinacin, cada tipo debe cumplir todos los requerimientos necesarios. 4.4 MATERIAL NECESARIO Medios de cultivo

Placas de Petri (de vidrio y desechables) Morteros de porcelana o vidrio: Para muestras de tejido que necesitan ser machacadas antes de preparar el cultivo. Asas de siembra: Nos permiten tomar la muestra y realizar la extensin en el medio de cultivo. Pueden ser redondas (al cargarla se forma, por capilaridad, una pelcula en el asa) o pueden ser rectas. estas ltimas sirven para llevar a cabo el mtodo de siembra en picadura que sirve para estudiar la movilidad de las bacterias. La movilidad se manifiesta por q hay crecimiento hacia ambos lados de la lnea de siembra.

4.5 APARATAJE BASICO. Cabinas de seguridad: Para la siembra de muestras y minimizar en lo posible la contaminacin como consecuencia de la manipulacin de las muestras (ej. Formacin de aerosoles) Estufas de cultivo: Sirven para conseguir unas condiciones ptimas de temperatura y permitir el crecimiento de microorganismos. Neveras-congeladores: Las neveras sirven para preservar las muestras cuando no se procesan inmediatamente al llegar al laboratorio (2-8 C). los congeladores sirven para conservar las cepas q luego nos servirn para compararlas con otras nuevas. Microscopio Autoclave

5. CONCLUSIONES De acuerdo a lo anteriormente expuesto podemos concluir que cada nivel de laboratorio tiene que contar con ambientes adecuados y observar normas de bioseguridad recomendados para poder tener un proceso fluido, controlado y seguro. 6. BIBLIOGRAFIA http://www.csicsif.es/andalucia/modules/mod_ense/revista/pdf/Numero_3/LABORATORIO %20MICROBIOLOGIA_rosarioalbors.pdf http://www0.unsl.edu.ar/~fqbf/cicua/Archivos/Manual-Bioseguridad-LabMicrobiologia.pdf

UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA Ciencias de la salud Bioqumica y Farmacia Microbiologa Clnica

Elaborado por: Nicolle Villamor Lizarazu Docente: Dra. Griselda Gamboa

La Paz-Bolivia 2013