TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusin de estractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes. El gar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l. La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuacin. En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.

Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Grampositivas).

CONDICIONES PARA EL MEJOR FUNCIONAMIENTO DEL MEDIO DE CULTIVO

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio medio. 1- disponibilidad de nutrientes adecuados 2- consistencia adecuada del medio 3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases 4- condiciones adecuadas de humedad 5- Luz ambiental 6- pH 7- Temperatura 8- Esterilidad del medio

TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

atendiendo a su estado fsico: lquidos semislidos slidos atendiendo a su utilidad prctica:

Medios para aislamientos primarios: para usos generales: no selectivos, para cultivo de una amplia variedad de organismos difciles de hacer crecer. A menudo estn enriquecidos con materiales como: sangre, suero, Hemoglobina, FX, FV, glutamina, u otros factores accesorios para el crecimiento de las bacterias (Agar Sangre, Schaeadler, etc) selectivos: (pueden ser de moderada o de alta selectividad) se aaden sustancias que inhiban el crecimiento de ciertos grupos de bacterias, permitiendo a la vez el crecimiento de otras. Variando las sustancia aadidas, se vara el tipo y grado de selectividad (Mac Conkey, Kanamicina-Vancomicina) enriquecidos: ralentizan/suprimen el crecimiento de la flora competitiva normal potenciando el cultivo y crecimiento deseado (Selenito, medio con Vitamina K). para aislamientos especializados: formulaciones nutritivas especiales que satisfacen requerimientos de grupos especficos de bacterias, ayudando a su identificacin (Lowenstein). Medios para identificacin: diferenciales: formulaciones especiales en las que se estudian las peculiaridades fisiolgicas (nutricin y respiracin sobre todo) especficas de las bacterias. Seleccionando los medios adecuados se puede llegar a la identificacin de casi cualquier bacteria (Oxidacin-Fermentacin)

MEDIOS DE CULTIVO DE USO HABITUAL

AGAR SANGRE : Medio enriquecido, estndar (ver ms) AGAR POLIVITEX (chocolate) : Medio enriquecido, para bacterias que no crecen en medios habituales y para atmsfera de CO2 (ver ms) MAC CONKEY : Selectivo para BGN. Lactosa+indicador (ver ms) MULLER-HINTON : medio slido estndar para antibiogramas con discos y por difusin

MULLER-HINTON/SANGRE : ATB bacterias que requieran sangre (Neumo. Strepto) MULLER-HINTON/CHOCO : ATB microorganismos que requieran Factores (Haemophilus) THAYER-MARTIN : selectivo Neisserias patg. (N. lactamica,

Gono/Meningo) para atmsfera de CO2 OXIDACION/FERMENTACION (GLUCOSA) : Estudio de utilizacin de Glucosa por los BGN TREE SUGAR-IRON : tubo en pico flauta (base larga, pico corto), para estudiar Oxid/Ferm de Gluc-Lact-Sac, produccin gas y SH2 TIOGLICOLATO : Medio lquido (ver ms) SCHAEDLER : medio bsico enriquecido con sangre. Para ANA (ver ms) KANA-VANCO : Con Kanamicina y Vancomicina. Selectivo para Bacteorides y otros BGN anaerobios. Para atmsfera ANA (ver ms) BBE: Bacteroides Bilis Esculina. Selectivo para Bacteorides. Para atmsfera ANA (ver ms) SABOURAUD : Cultivo de hongos (incubar a T ambiente y a 37 gC) SAB + Cloranfenicol y Actidione : Selectivo hongos patgenos CZAPEK : Medio para Hongos. Identificacin de Aspergillus (ver ms)

SALMONELLA-SHIGELLA : medio altamente selectivo para Salmonella y Shigella (ver ms) XLD : Selectivo Salmonella y Shigella SELENITO : Medio lquido de enriquecimiento selectivo para SalmonellaShigella CIN : Selectivo Yersinia CLED : Medio de recuento urinario. Indicador de fermentacin de Lactosa GARDNERELLA : Selectivo Gardnerella vaginalis. Contiene sangre humana para valorar hemlisis CAMPY : Cultivo de Campylobacter