Estudio Entomotoxicologico en Larvas de Dipteros Provenientes de Material Biologico en Descomposicion PDF

ESTUDIO ENTOMOTOXICOLOGICO DE COCAINA EN LARVAS DE DIPTEROS PROVENIENTES DE MATERIAL BIOLOGICO (PORCINO) EN DESCOMPOSICION.
AUTORES ANGIE KATHERINE MUOZ CASTRO LEIDY PAOLA ARIAS HERNANDEZ GERALDINE BELTRAN RAMIREZ ANGIE NATALIA LAGUNA CORTES KAREN GERALDINE RUIZ MARIO
CORPORACION EDUCATIVA NACIONAL C.E.N. DETECTIVE INVESTIGADOR BOGOTA (CUNDINAMARCA) 2012
ESTUDIO ENTOMOTOXICOLOGICO DE COCAINA EN LARVAS DE DIPTEROS PROVENIENTES DE MATERIAL BIOLOGICO (PORCINO) EN DESCOMPOSICION.
AUTORES ANGIE KATHERINE MUOZ CASTRO LEIDY PAOLA ARIAS HERNANDEZ GERALDINE BELTRAN RAMIREZ ANGIE NATALIA LAGUNA CORTES KAREN GERALDINE RUIZ MARIO
TRABAJO FINAL DE INVESTIGACION COMO REQUISITO PARA OPTAR POR EL CERTIFICADO APTITUDINAL DE OCUPACION DE DETECTIVE INVESTIGADOR.
ASESORES JOHAN ALFREDO GRACIA RODRIGUEZ MSC. JAVIER ANDRES MATULEVICH PELAEZ
CORPORACION EDUCATIVA NACIONAL C.E.N. DETECTIVE INVESTIGADOR BOGOTA (CUNDINAMARCA) 2012-2
INTRODUCCION
Este trabajo tiene como objetivo mostrarles la forma con la que se puede determinar una muerte partiendo de una sobredosis de cocana (benzoilmetilecgonina) teniendo en cuenta la descomposicin del cuerpo con ayuda de las larvas de dpteros.
DEDICATORIA
A Dios, por brindarnos la dicha de la salud y bienestar fsico y espiritual, A nuestros padres, como agradecimiento a su esfuerzo, amor y apoyo incondicional, durante nuestra formacin tanto personal como profesional, a quienes les debemos toda la vida, les agradecemos el cario y su comprensin, a ustedes quienes han sabido formarnos con buenos sentimientos, hbitos y valores, lo cual nos ha ayudado a salir adelante buscando siempre el mejor camino. A nuestros docentes, por brindarnos su gua en el desarrollo de este Trabajo, gracias por su tiempo, por su apoyo as como por la sabidura que nos transmitieron en el desarrollo de nuestra formacin profesional, en especial a los Profesores Johan Alfredo Garca y Javier Andrs Mathulevich, por haber guiado el desarrollo de este trabajo y llegar a la culminacin exitosa del mismo.
AGRADECIMIENTOS
Primero le agradecemos a Dios, por estar con nosotras en cada paso que damos, por fortalecer nuestros corazones e iluminar nuestras mentes y por haber puesto en nuestro camino a aquellas personas que han sido nuestro soporte y compaa durante todo el periodo de estudio. Agradecer hoy y siempre a nuestras familias por el esfuerzo realizado por ellos. El apoyo en nuestros estudios, de ser as no hubiese sido posible. A nuestros padres y dems familiares ya que nos brindan el apoyo, la alegra y nos dan la fortaleza necesaria para seguir adelante. Un agradecimiento especial a los profesores Johan Alfredo Garca y Javier Andrs Mathulevich, por la colaboracin, paciencia, apoyo y sobre todo por esa gran amistad que nos brindaron, por escucharnos y aconsejarnos en todo momento.
TABLA DE CONTENIDO
TITULO
PGINA
1. GLOSARIO 2. LISTA DE IMGENES 3. LISTA DE TABLAS 4. DESCRIPCION DEL PROYECTO 5. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 5.1. Descripcin del Problema 5.2. Formulacin del Problema 5.3. Delimitacin del problema 6. OBJETIVOS 6.1. General 6.2. Especficos 7. ANTECEDENTES 7.1 Determinacin de cianuro y su incidencia en la Alteracin del ciclo de vida de larvas de mosca Provenientes de material biolgico en descomposicin. Realizado en el ao 2011. 7.2 Identificacin de morfina en muestras de origen Entomolgico provenientes de conejos muertos por Intoxicacin. Realizado en el ao 2009. 7.3 Determinacin de xtasis y su incidencia en la Alteracin del ciclo de vida en larvas de moscas Provenientes de material biolgico en descomposicin.1
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( Antecedentes de la corporacin educativa nacional C.E.N )
8. MARCO TEORICO 8.1 Esquema de los insectos 8.2 Dpteros y sus generalidades 8.3 Esquema de los dpteros 8.4 Ciclo de vida del dptero 8.5 Entomologa forense 8.6 Cocaina 8.7 Fases de elaboracin de la cocina 8.8 Toxicocintica de la cocana 8.9 Aspectos toxicolgicos de la cocana 8.10 Intoxicacin por cocana 8.11 Aspectos de la adiccin de la cocana 8.12 Cromatografa de gases 9. METODOLOGIA DEL TRABAJO 10. RESULTADO Y DISCUSIONES 10.1 Dosis de cocana suministrada al porcino estudio 10.2 Recoleccin de larvas del 3 al 19 de octubre de 2012 10.3 Clasificacin taxonmica de mosca adulta 10.4 Comparacin del dptero con la clave taxonmica 10.5 Mtodos de extraccin de metabolitos de orina 10.6 Cromatografa de la muestra del porcino control 10.7 Cromatografa de la muestra del porcino estudio 10.8 Mtodos de extraccin de metabolitos en larvas das 3 y 7
30 31 31 34 34 37 38 39 39 40 41 42 44 45 46 46 48 50 50 52 52 53 53
10.9 Cromatografa de la muestra del porcino estudio 10.10 Cromatografa de la muestra del porcino control 10.11 Mtodos de extraccin de metabolitos en larvas das 11,15 y 19 10.12 Cromatografa la muestra del porcino control 10.13 Cromatografa de la muestra del porcino estudio 10.14 Curva de crecimiento de las larvas de dpteros encontrada En el porcino control y porcino estudio 10.15 Comparacin de la morfologa de las larvas de dptero Encontradas en el porcino control y estudio 10.16 Larvas del porcino control y estudio bajo estereoscopio 10.17 Porcino control y estudio en estado de descomposicin Da 23 de octubre 11. CONCLUSIONES 11.1 Espectro realizado a la orina obtenida de los porcinos Estudio y control 11.2 Primer espectro realizado en larvas obtenidas de los porcinos (Estudio y control) de los das 3 y 7 de octubre 11.3 Segundo espectro realizado en larvas obtenidas de los porcinos (Estudio y control) de los das 11, 15 y 19 de octubre. 11.4 Datos de la curva de crecimiento 11.5 Conclusin general 12. SUGERENCIAS 13. RECOMENDACIONES 14. PRESUPUESTO 15. BIBLIOGRAFIA WEB 16. ANEXOS 16.1 Actividades
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16.2 Avance del proyecto de investigacin 16.3 Grafica de deteccin de cocana en material biolgico en Descomposicin 16.4 Cuadro de asesoras
1. GLOSARIO Intervalo post-mortem (IPM): uno de los objetivos fundamentales de la entomologa forense es la estimacin del intervalo pos-mortem, o estimacin de la fecha del deceso a partir de datos entomolgicos. para esto se analizan dos aspectos bsicos; por un parte se observa la fauna adulta presente en el lugar donde se encontr el cuerpo. Esta datacin se realiza mediante estudios de sucesin de los artrpodos sobre el cadver. La segunda manera es estima IPM es mediante el anlisis del desarrollo de los estudios larvales, prepupales y pupas, correlacionados con tablas de desarrollo de la especie encontrada. Artrpodos: son los invertebredos. Insectos , crustceos, aragnidos y mariapodos. Bioqumica: se emplea en espaol para identificar a la ciencia que se encarga de estudiar desde una perspectiva qumica la estructura y las funciones de los seres vivos. Toxicocinetica: conjunto de fenmenos que experimenta el toxico desde el momento que se pone en contacto con el hombre hasta que es eliminado por el mismo. Es todo lo que el organismo le hace al toxico. Toxicologa : Ciencia que estudia las sustancias qumicas y los agentes fsicos en cuanto son capaces de producir alteraciones patolgicas a los seres vivos, a la par que estudia los mecanismos de produccin de tales alteraciones y los medios para contrarrestarlas, as como los procedimientos para detectar, identificar y determinar tales agentes y valorar su grado de toxicidad. Sustancia que puede producir algn efecto nocivo sobre un ser vivo, alterando sus equilibrios vitales. Traza: componentes de la cocana Dpteros: los dpteros son un grupo de insectos muy variado y diversificado.
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Larva:Los taqunidos poseen 3 estadios larvales, que cumplen por definicin dentro del husped atacado. La duracin media de este estado oscila entre 12 y 16 das. El requerimiento de oxgeno de larvas de estas moscas, est provisto por la formacin de un embudo respiratorio en el extremo posterior del cuerpo de la larva, que se adhiere al tubo traqueal del husped
Cocana: La cocana (benzoilmetilecgonina) es un alcaloide tropano cristalino que se obtiene de las hojas de la planta de coca. Es un estimulante del sistema nervioso central, un supresor del apetito, y unanestsico tpico. Especficamente, es un inhibidor de la recaptacin de serotonina-norepinefrina-dopamina (tambin conocido como un inhibidor de la recaptacin triple, que media la funcionalidad de estos neurotransmisores como un ligando de transportador de catecolaminaexgeno. Es adictiva debido a la forma en que afecta el sistema de recompensa mesolmbico. Metabolito: Los metabolitos son los productos intermedios y productos del metabolismo. El trmino metabolito generalmente se limita a pequeas molculas. Un metabolito principal est directamente implicada en el crecimiento normal, el desarrollo y la reproduccin. Alula: Lbulo en la base del ala, posteriormente. ngulos vibrisales: ngulos ms o menos redondeados formados por las crestas faciales justo encima del margen oral. Cerdas acrsticas: Las hileras de cerdas del mesonoto entre las dorso centrales y las 2 hileras de medianas de cerdas del trax. Caliptras: (=escamas =tgulas). Las escamas o lbulos conectando basalmente las alas con el trax. Hay 2 lbulos, el superior y el inferior. Este est frecuentemente agrandado y es al que generalmente. se refieren como escama, tgulas o Caliptras.
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Cerdas hipo pleurales: Cerdas de la hipo pleura, usualmente en hilera vertical.
Dorso centrales: Cerdas dorso centrales del trax. Hipo pleura: Espacio debajo del espirculo posterior y encima de la coxa 3. Pelos acrsticos: Pelos entre las cerdas dorso centrales. Postescutelo: Una fuerte convexidad transversal debajo del escutelo. Cerdas postverticales: (=postocelares). Un par (o ms) de cerdas surgiendo justo debajo del vertex y detrs del tubrculo ocular. Cerda presutural: Cerda situada delante del extremo interno de la noto pleura delante de la sutura. La cerda lateral situada delante o prxima a la sutura. Vibrisas: grandes cerdas surgiendo de los ngulos vibrisales a los lados de la boca. Espirculo: es la denominacin del orificio respiratorio de algunos animales. Hidrosubilidad: es aquello que se puede disolver en agua Diptero Sarcophagidae: tipo de mosca ( fimilia de la mosca) Lidocaina: El lidocana es un medicamento que se utiliza como anestsico local. Bloquea la conduccin nerviosa, previniendo el inicio y la propagacin de las seales de dolor.
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2. LISTAS DE IMGENES No Descripcin imgenes 1 Esquema de los insectos Fuente : Ciencia naturales anatoma externa de un insecto 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Esquema de los dpteros. Fuente : el diccionario visual ciclo de vida de un dptero fuente moscasparasitarias.blogspot.com/ caractersticas morfo cromticos de la larva grafica de crecimiento del tamao Vs tiempo de la larva Hoja de la mata de cocana Eritroxylon coca lam Fuente. Herbario ENCB, IPN Cocana suministrada al porcino estudio. Porcino control Porcino estudio Recoleccin de dptero en material biolgico para clasificacin taxonmica Recoleccin de orina porcino control. Recoleccin de orina porcino estudio Recoleccin de huevos de larvas en material biolgico Recoleccin de larvas en material biolgico. Recoleccin de larvas en material biolgico. Recoleccin de larvas en material biolgico. Recoleccin de larvas en material biolgico. Recoleccin de larvas en material biolgico. N Pagina 31 34 35 36 37 38 46 46 46 47 47 47 48 48 48 49 49 49
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Recoleccin de larvas en material biolgico. Sarcophagidae Sarcophagidae Sarcophagidae Sarcophagidae Sarcophagidae Sarcophagidae Sarcophagidae ala tabanus sp (tabanidae) 1 Cromatografa negativa 2 Cromatografa positiva Equipo, elementos y reactivos que se usaron en el proceso de extraccin. Larvas maceradas del porcino control Larvas maceradas del porcino estudio mezcla del macerado con el cloroformo isopropanol 11 Filtrado de las mezclas Filtrado con sulfato de sodio. Reconstituciones Presencia de cafena en el porcino control Presencia de colesterol en el porcino control Presencia de cafena en el porcino estudio.
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40 Presencia de colesterol en el porcino estudio 41 42 43 44 45 46 47 Presencia de lidocana en el porcino estudio Espectro positivo Espectro negativo Macerado de material biolgico del porcino estudio Macerado de material biolgico del porcino control presencia de neronina en el porcino estudio Presencia de Isoquino 2,1 beta isoquinoleina en el porcino estudio Macerado de material entomolgico del porcino estudio. Espectro negativo Espectro positivo Viales plsticos que contienen larvas de dptero del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control.
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Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio
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Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio
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Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio Curva de crecimiento de las larvas de dpteros recolectadas del porcino estudio. Viales plsticos que contienen larvas de dptero del porcino estudio. variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Curva de crecimiento de las larvas de dpteros recolectadas del porcino control. Curva de crecimiento de las larvas de dpteros recolectadas del porcino control y estudio. Cambio de morfologa de la larva de dptero encontrada en el porcino estudio Se puede observar que la larva de dptero encontrada en el porcino estudio presenta una alteracin en su morfologa, Se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino control no presenta ninguna alteracin morfocromatica. Se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino control no presenta ninguna alteracin morfocromatica. Se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino control no presenta ninguna alteracin morfocromatica. Se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino estudio no presenta ninguna alteracin morfocromatica.
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106 Se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino estudio no presenta ninguna alteracin morfocromatica. 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 Porcino control en estado de descomposicin da 23 de octubre. Porcino estudio en estado de descomposicin da 23 de octubre. Espectro positivo en orina del porcino estudio, Espectro negativo en Del porcino control. Espectro negativo en Del porcino control. Espectro positivo en orina del porcino estudio. Espectro negativo en Del porcino control. Espectro positivo en orina del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control.
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Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. Variacin morfolgica en las larvas del porcino control. Variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio.
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3. LISTA DE TABLAS No de tablas 1 2 3 Descripcin fases de la elaboracin de la cocana Metodologa Datos para la curva de crecimiento del da 3 de octubre del porcino estudio. Datos para la curva de crecimiento del da 3 de octubre del porcino control. Datos para la curva de crecimiento del da 7 de octubre del porcino estudio. Datos para la curva de crecimiento del da 7 de octubre del porcino control. Datos para la curva de crecimiento del da 11 de octubre del porcino estudio. Datos para la curva de crecimiento del da 11 de octubre del porcino control. Datos para la curva de crecimiento del da 15 de octubre del porcino estudio. Datos para la curva de crecimiento del da 15 de octubre del porcino control. Datos para la curva de crecimiento del da 19 de octubre del porcino estudio. Datos para la curva de crecimiento del da 19 de octubre del porcino control. N PAGINAS 39 45 95
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4. DESCRIPCIN DEL PROYECTO
La entomotoxicologia es una ciencia interdisciplinaria (entomologa y toxicolgica forense), realiza anlisis a insectos que se alimentan de material biolgico en descomposicin, con el fin de identificar y cuantificar drogas y toxinas presentes en cadveres, adems investiga los efectos causados por estas sustancias sobre el desarrollo de los artrpodos con el fin de asistir la estimacin forense del intervalo postmortem (IPM). (Sohath Zamira, Yusseff Vanegas).2 La entomologa forense es la ciencia que estudia los insectos asociados al proceso de descomposicin cadavrica, lo que la convierte en una herramienta til para esclarecer incgnitas que rodean a los cadveres encontrados en circunstancias particulares. (Sohath Zamira, Yusseff Vanegas). 3 La toxicologa forense tiene como objetivo el esclarecimiento del origen de una intoxicacin o envenenamiento de la(s) sustancia(s) que bajo determinadas condiciones pueden haber provocado la muerte del individuo. Como los cambios primarios producidos por los txicos en varios tejidos son bioqumicos y no anatmicos, (http://entomologoputrefacto.blogspot.com/2011/06/entomotoxicologia.html ). 4
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(http://lunazul.ucaldas.edu.co/index.php?option=content&task=view&id=312). (http://lunazul.ucaldas.edu.co/index.php?option=content&task=view&id=312) 4 (http://entomologoputrefacto.blogspot.com/2011/06/entomotoxicologia.html)
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5. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Establecer la presencia de trazas de cocana metabolizadas en las larvas de dptero.
5.1 Descripcin del Problema La aplicacin de los conocimientos de la entomologa forense en la toxicologa podra convertirse en una herramienta determinante en los casos de difcil diagnstico de la posible causa de muerte, cuando esta pudiera estar relacionada con el consumo de drogas y que por el estado avanzado de descomposicin del cadver no se cuenten con los tejidos idneos para realizar dichas pruebas toxicolgicas por tal motivo el utilizar las larvas de dpteros que se alimentan de material biolgico en descomposicin es una alternativa en el anlisis toxicolgico forense.
5.2 Formulacin Del Problema Ante la problemtica planteada por el consumo de la cocana sin ningn tipo de control y las muertes por sobredosis alguna de ellas sin esclarecer surge la siguiente pregunta investigativa: Es posible identificar de manera cualitativa metabolitos derivados de la cocana (benzoilmetilecgonina) en la fauna cadavrica y a su vez establecer si esta presenta alteraciones morfo cromticas en las larvas de dpteros?
5.3 Delimitacin del problema El proyecto de investigacin se desarrollara en el barrio El Recodo zona 9 localidad Fontibn, Para este estudio se utilizaran dos porcinos (sus scrofa) de los cuales uno seria el porcino control y el otro el porcino de estudio (muestra problema), al cual se le suministrara una dosis diaria de cocana (benzoilmetilecgonina) por va oral la cual
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va variando de acuerdo a su peso en kilogramos, despus del mes de haberle suministrado esta dosis se le dar una dosis letal (0,1g/ kg de peso). Cada uno de los porcino (sus scrofa) ser puesto en una jaula de acero inoxidable con el fin de alejar los depredadores naturales pero a su vez permitir su proceso de descomposicin natural y la llegada de la entomofauna, el material biolgico estarn separadas a una distancia aproximada entre 5 y 7 metros uno del otro. Esta investigacin se desarrollara nicamente con larvas de dpteros pertenecientes a la fauna cadavrica inicial las cuales sern recolectadas cada tercer da, partiendo del primer da y terminando en el da diecisis. Las muestras sern recolectadas y almacenadas a temperaturas entre seis y diez grados centgrados y posteriormente se realizara anlisis qumicos cualitativos por medio de una espectrometra de masas y cromatografa de gases de manera independiente para el estudio toxicolgico. Muestras requeridas para entomologa: entre 10 a 15 larvas. Muestras requeridas para toxicologa: 10gr. Las muestras recolectadas del estudio entomolgico se preservaran igualmente, para el estudio de los dpteros se realizara una clasificacin taxonmica, para las larvas de dpteros se realizara una comparacin morfo cromtica la cual consiste en analizar el tamao y color.
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6. OBJETIVOS
6.1. General Determinar trazas de cocana metabolizada y la variacin morfocromatica en larvas de dpteros provenientes de material biolgico (porcino) en descomposicin.
6.2. Especficos Adquirir habilidad en los procedimientos de extraccin y tcnicas de identificacin de sustancias qumicas, y claves de clasificacin taxonmicas. Identificar los cambios morfo cromticos sufridos en larvas de dpteros provenientes de un cuerpo en descomposicin el cual ha tenido contacto con la sustancia.
Realizar exmenes toxicolgicos para determinar la presencia de metabolitos de cocana (benzoilmetilecgonina) en larvas de dpteros.
Aportar material investigativo a la comunidad tcnico-cientfica interesada en este anlisis.
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7. ANTECEDENTES.
En la corporacin educativa nacional C.E.N estn los siguientes antecedentes internos. 7.1 Determinacin de cianuro y su incidencia en la alteracin del ciclo de vida de larvas de mosca provenientes de material biolgico en descomposicin. Realizado en el ao 2011. Este proyecto se encuentra orientado a la identificacin cualitativa de metabolitos del cianuro en larvas provenientes de material bilgico en descomposicin .Para tal efecto, se realizaran los anlisis de forma simulada en dos hgados de porcino; donde uno de ellos ser inyectado con la sustancia y el otro ser tomado de control. El material entomolgico ser recolectado durante la eclosin y se determinara en primera instancia las alteraciones morfocromticas en el ciclo de vida de las larvas ,para finalizar se aplicaran procesos de extraccin e identificacin del metabolito generado por tcnicas de anlisis qumicos. Las muestras sern recolectadas en viales durante los primeros cinco das, se llevaran a cmara de sacrificio y sern almacenados a temperaturas inferiores a los cero grados centgrados, posteriormente sern analizadas en el laboratorio donde se desarrollara la investigacin. Una vez desarrollada la investigacin se determinaran las caractersticas morfocromticas que presentan las larvas recolectadas del material biolgico en descomposicin, realizando una comparacin entre la muestra de control y la muestra inyectada con la sustancia, esperando que se evidencien diferencias significativas en el material objeto de estudio y obteniendo resultados positivos se realizara una tabla de datos indicando tamao , color y dems caractersticas de las larvas tomando como referencia trabajos de investigacin desarrollados anteriormente con la misma lnea de investigacin. La investigacin de campo se desarrollara en el barrio : Pastranita , Localidad: Kennedy , situado a una altitud de 2600 m, con una
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temperatura aproximada entre los 5 y 20 C, con una media de 13,5C. 7.2 Identificacin de morfina en muestras de origen entomolgico provenientes de conejos muertos por intoxicacin. Realizado en el ao 2009. Este proyecto consiste en la identificacin de morfina por medio de tcnicas clsicas e instrumentales de anlisis qumico en muestras de fauna entomolgica recolectadas en los cuerpos en estado de descomposicin de dos conejos; los cuales sern tratados de la siguiente manera: Conejo 1: este conejo ser sacrificado con la aplicacin va parenteral de una dosis letal de morfina. Conejo 2: este se utilizara como muestra control, el cual ser sacrificado por dislocamiento cervical y servir como blanco de comparacin, una vez se obtengan los resultados. Cada uno de los conejos ser colocado en una jaula metlica de tamao mediano para impedir la extraccin de estos animales por otros que circunden el lugar estas estarn separados entre s de tres a cuatro metros una de otra. La fauna cadavrica asociada a los conejos ser recolectada una vez al da las 12:00 horas, durante treinta das. Dichas muestras sern recolectadas en viales los cuales sern almacenados temperaturas inferiores a los cero grados centgrados, posterior mente ser analizados diariamente en los diferentes laboratorios donde se desarrollara investigacin. La investigacin de campo del presente trabajo se desarrollara en el municipio de Bogot- Cundinamarca situado a una altura de 2.548 msnm, con una temperatura aproximada de 13 C en una finca ubicada en la localidad 11 suba en la carrera 87 N 128 30. 7.3 Determinacin de xtasis y su incidencia en la alteracin del ciclo de vida en larvas de moscas provenientes de material biolgico en descomposicin.5
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( Antecedentes de la corporacin educativa nacional C.E.N )
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El primer estudio que se realizo con miras a incluir la entomotoxicologia en Colombia como una herramienta eficaz de apoyo a las ciencias forenses fue desarrollado en Medelln Colombia , el cual consisti en utilizacin de la tcnica de HPLC (Cromatografa Lquida de Alta Eficiencia) con ejemplares colectados durante la sucesin ecolgica entomologa asociada a los cadveres de tres conejos, los cuales fueron sacrificados con una sobredosis de propoxur y contando con un cuarto conejo control que fue sacrificado por dislocamiento cervical. Los conejos fueron monitoreados durante 28 das, tres veces al da (7, 13 y 18 horas). Durante este periodo se colectaron insectos inmaduros y adultos, se midi la temperatura ambiental, la temperatura corporal y la prdida de peso. Del material colectado, se seleccionaron 73 individuos entre inmaduros (larva I, II, III, pupas) y adultos de los rdenes Dptera y Coleptera, en los que se evalu el analito de inters por la tcnica de Cromatografa Lquida de Alta Eficiencia (HPLC), con un resultado positivo en el 56% de las muestras desde larva I hasta adulto y en todos los estados sucesiones de la descomposicin. Esta tcnica permiti una alta sensibilidad a partir de 0,1g o menos por cada muestra, para la cuantificacin de residuos de propoxur en larvas y adultos. En Dptera se cuantific a partir de muestras con un peso de 0,0029 g y para Coleptera en muestras con un peso de 0,002 g. La concentracin mnima detectada (0,671 ppm) se encontr en larvas en estadio II de dpteros Calliphoridae y Muscidae y la concentracin mxima cuantificada (229,7121 ppm) se encontr en larvas en estadio III de Lucilia eximia (Dptera: Calliphoridae), con porcentajes de 0,04 y 0,34 respectivamente. Este proyecto se encuentra encaminado a la identificacin cualitativa de metabolitos de xtasis (conocido tcnicamente como MDMA o 3-4 metilendioximetanfetamina).en larvas provenientes de material biolgico. Para lograr este resultado se realizaran los estudios y anlisis de forma simulada en dos porcinos (Sus scrofa domestica) de la misma edad y camada en los cuales uno de ellos ser el blanco de referencia y el otro la muestra problema al cual se le suministrara una dosis letal por va oral de acuerdo a su peso en kilogramos de la sustancia objeto de estudio. Las mu8estras sern analizadas por la tcnica de 6 c-ms Se hace su primer descubrimiento en Colombia en 1999, cuando se realizo el primer estudio de insectos asociando cuerpos en descomposicin. Primero se utilizo un perro en Cali (Olaya), y porcinos en Medelln (Uribe & wolff, Restrepo & Valderrama). Obteniendo el primer trabajo publicado en 2001 (wolff et al), tomando la sucesin de los insectos de importancia legal como herramienta en la determinacin del intervalo postmortem. (Entomologa forense en Latinoamrica)4
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En el estudio de Blaho y cols, ya citado, dos de los enfermos fallecieron. Uno tena una cocainemia de 0,387 g/mL y el otro, de 0,029. En cambio, como ya he dicho, un paciente con una cocainemia de 3,9 g/mL tena pocos sntomas y le dieron el alta hospitalaria. As pues, se solapan las concentraciones de cocana obtenidas del estudio de cadveres con las obtenidas en los ensayos clnicos. Por eso no es de extraar que los investigadores concluyan que las determinaciones postmortales aisladas de cocana y de benzoilecgonina en sangre no pueden usarse para evaluar o predecir la toxicidad de la droga.(Cuadernos de Medicina Forense)6
(cuadernos de medicina forense)
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8. MARCO TEORICO Los insectos son una clase de animales invertebrados, del filo de los artrpodos, caracterizados por presentar un par de antenas, tres pares de patas y dos pares de alas (que, no obstante, pueden reducirse o faltar). La ciencia que estudia los insectos se denomina entomologa. Su nombre proviene del latn insectum, 'cortado en medio'.17 Los insectos comprenden el grupo de animales ms diverso de la Tierra, con aproximadamente 1 milln especies descritas, 2 ms que todos los otros grupos de animales juntos, y con estimaciones de hasta 30 millones de especies no descritas, con lo que, potencialmente, representaran ms del 90% de las formas de vida del planeta.3 Otros estudios ms recientes rebajan la cifra de insectos por descubrir a entre 6 y 10 millones.4
5
Los insectos pueden encontrarse en casi todos los ambientes del planeta, aunque slo un pequeo nmero de especies se ha adaptado a la vida en los ocanos. Hay aproximadamente 5.000 especies de odonatos (liblulas, caballitos del diablo), 20.000 de ortpteros (saltamontes, grillos), 120.000 de lepidpteros (mariposas y polillas), 120.000 de dpteros (moscas, mosquitos), 82.000 de hempteros (chinches, pulgones, cigarras), 350.000 de colepteros (escarabajos, mariquitas), y 110.000 especies de himenpteros (abejas, avispas, hormigas). Los insectos no slo presentan una gran diversidad sino que tambin son increblemente abundantes. Se estima que hay 200 millones de insectos por cada ser humano. Algunos hormigueros contienen ms de 20 millones de individuos. Se calcula que hay 1015 hormigas viviendo sobre la Tierra. En la selva amaznica se estima que hay unas 60.000 especies y 3,2 x 108 individuos por hectrea.
1 Diccionario mdico-biolgico, histrico y etimolgico 2 Chapman, A. D., 2009. Numbers of Living Species in Australia and the World, 2nd edition. Australian Biodiversity Information Services ISBN (online) 9780642568618 3 Erwin, Terry L. (1982). Tropical forests: their richness in Coleoptera and other arthropod species. Coleopt. Bull. 36: pp. 7475. 4 Erwin, Terry L. (1997). Biodiversity at its utmost: Tropical Forest Beetles. pp. 27 40. En: Reaka-Kudla, M. L., D. E. Wilson & E. O. Wilson (eds.). Biodiversity II. Joseph Henry Press, Washington, D.C.. 5 Vojtech Novotny, Yves Basset, Scott E. Miller, George D. Weiblen, Birgitta Bremer, Lukas Cizek & Pavel Drozd (2002). Low host specificity of herbivorous insects in a tropical forest. Nature 416: pp. 841844. doi:10.1038/416841 .
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8.1 ESQUEMA DE LOS INSECTOS
IMAGEN N 1: Esquema de los insectos Fuente: Ciencia naturales anatoma externa de un insecto 8.2 DIPTEROS Y SUS GENERALIDADES CLASE DIPTERA Caracteres usados en su clasificacin Los principales caracteres usados son: antenas, patas, nerviacin de las alas y quetotaxia (disposicin de las cerdas, principalmente en la cabeza y en el trax). Ocasionalmente se usan otros caracteres tales como: presencia o ausencia de ciertas suturas, forma de la cabeza o del abdomen, forma de las piezas bucales y presencia o ausencia de ocelos.
Antenas Son de morfologa variable en las diferentes familias y dentro de una misma familia. En el suborden Nematcera las antenas son multisegmentadas y los
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segmentos (con la posible excepcin de los 2 basales) son semejantes entre s. En el suborden Brachycera, las antenas tienen generalmente 3 segmentos, siendo los segmentos basales pequeos y el tercero mayor. En algunos Brachycera, el tercer segmento de las antenas es anillado, divididos en subsegmentos Los anillos son difciles de ver si la antena no est convenientemente iluminada, muchas veces es difcil decidir si estn tri o multisegmentadas, pero las subdivisiones del tercer segmento nunca son tan marcadas como las existentes entre los 3 segmentos principales. Muchos Brachycera tienen en la parte distal de la antena un proceso llamado estilo, otros tienen en el tercer segmento una cerda grande o arista esta puede ser simple o plumosa. Patas Las principales caractersticas de las patas empleadas en la separacin de las familias de Dpteros son: la estructura del empodio y la presencia o ausencia de espolones tibiales. El empodio es una estructura que se encuentra entre los uas, en el ltimo segmento tarsal. En la mayora de los dpteros tiene forma de cerda o no existe, pero en algunas familias es grande, membranosa y semejante a las pulvillii. Los pulvilli son almohadillas situadas en el pice del segmento tarsal, uno en la base de cada ua. As un dptero puede presentar 2 almohadillas (los pulvilli), tres almohadillas (2 pulvilli y un empodio pulvilliforme) o ninguna almohadilla (pulvilli ausentes) en el ltimo segmento tarsal, o pulvilli y empodio setiforme. Espolones tibiales Son estructuras en forma de espinas localizadas generalmente en la extremidad distal de la tibia En algunos dpteros muscoides se hallan cerdas en la superficie externa de la tibia un poco antes del pice, que se denominan cerdas tibiales preapicales El cuerpo de la mayora de los dpteros es aproximadamente cilndrico con los coxas cercanas entre si; en algunas familias parsitas el cuerpo es achatado y coriceo, y los coxas estn bien separadas En gral. las coxas son cortas, pero en algunos grupos, por ej. Mycetophylidae su largo es semejante al de los fmures. Venacin alar Se usan mucho los caracteres de la venacin alar en la identificacin de los dpteros, y frecuentemente es posible identificar un dptero hasta familia, basndose nicamente en los caracteres de las alas, la venacin en este orden es relativamente simple, y en las familias superiores hay una tendencia a la reduccin del nmero de nervaduras. Pueden usarse dos sistemas de nomenclatura. La mayor parte de los especialistas usan el de Comstock-Needham otros emplean el sistema antigo que no ser considerado aqu. Para C-N, la nervadura mediana se divide en tres. Se denomina clula cerrada a aquella que no alcanza el margen del
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ala, Cuando el espesamiento del borde anterior del ala o nervadura costal o costa, termina cerca del pice del ala se dice que la costa se extiende apenas hasta el pice cuando no hay afinamiento abrupto del margen anterior cerca del pice de sta se dice que la costa se prolonga en torno del ala. Algunos dpteros tienen 1 2 lbulos en al lado posterior de la base del ala, que se doblan bajo sta cuando el ala est doblada hacia atrs sobre el abdomen, estos lbulos son las caliptras (tambin llamadas lulas o escamas). Se usa con frecuencia el tamao relativo de las caliptras para distinguir familias o grupos de familias. La costa de muchos dpteros muscoides tienen uno o dos puntos donde la esclerotizacin es dbil o ausente y la nervadura parece estar en brada, estos puntos se denominan fracturas costales y pueden ocurrir cerca del pice y de la nervadura humeral Las fracturas se ven mejor con luz transmitida. Algunos dpteros muscoides tienen una serie de largos pelos o cerdas a lo largo de la costa hasta el pice y en estos casos se habla de costa espinosa. Quetotaxia Para identificar dpteros muscoides se usa mucho el nmero, el tamao, la posicin y disposicin de las cerdas mayores de la cabeza y el torax. La quetotaxia. Suturas de la cabeza y el torax La principal sutura ceflica usada es la sutura frontal En los Cyclorrapha el adulto emerge del pupario a travs de una abertura circular en la extremidad anterior, esta abertura resulta de la presin ejercida por el ptilinum sobre el pupario. Esta es una estructura saculiforme que se evierte en la parte frontal de la cabeza, encima de la base de las antenas. Despus de la emergencia del adulto, el ptilinum es absorvido en el interior de la cabeza y en la mayora de las familias de Cyclorrapha permanece una sutura en la lnea de eversin de esa estructura. Esa recibe el nombre de sutura frontal y usualmente tiene forma de U invertida. Entre el pice de la U y la base de las antenas se encuentra un pequeo esclerito que se llama lnula frontal. La presencia de esta sutura distingue a los muscoides de los otros grupos. Cuando la sutura no se observa bien, se puede reconocer igual claramente la lnula frontal encima de la base de las antenas. Una sutura transversa en la parte anterior del mesonoto distingue la mayora de los muscoides caliptrados de los acaliptrados. Los caliptrados tienen gralmente. suturas en las partes lateroposteriores del mesonoto separando los callos posteriores Estas suturas faltan en los acaliptrados.
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Tamao En la clave, tamao medio corresponde al tamao aproximado de una mosca domstica. Muy pequeo o diminuto significa menor de 3mm. de largo, y muy grande, 25mm o ms. 8
8.3 ESQUEMA DE LOS DIPTEROS
IMAGEN N 2: Esquema de los dpteros Fuente: el diccionario visual 8.4 CICLO DE VIDA DEL DIPTERO La mosca atraviesa durante su desarrollo distintos estadios en un proceso que se denomina metamorfosis completa. Los distintos estadios son: huevo, larva, pupa y adulto. Los primeros tres suelen nombrarse estadios inmaduros. Las larvas de color crema crecen y cambian a pupa a los 4 a 8 das, el perodo de pupa dura 4 a 5 das aunque puede extenderse en climas fros. Cuando se completa este estadio, emerge la mosca adulta. El ciclo de huevo a adulto dura 8 a 20 das.9
8
Introduccin al conocimiento de los dpteros coleccin previa universidad del valle serie de investigacin 1992
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Las moscas se reproducen generalmente en materia orgnica en descomposicin de origen animal y vegetal. Se alimentan principalmente de lquidos sangre y materia fecal; disuelve las sustancias secas por medio de secreciones salivales y de regurgitacin.10
IMAGEN N 3: ciclo de vida de un dptero FUENTE: moscasparasitarias.blogspot.com/ Comparacin morfocromatica en larvas de dpteros Esta comparacin la vamos a basar en tres aspectos importantes de las larvas los cuales son los espirculos anteriores y posteriores, cantidad de segmentos (tamao) y el color. Esta determinacin morfocromatica se realizar utilizando el instrumento ptico estereoscopio y comparando cada una de las larvas que se recolectaran.
10
moscasparasitarias.blogspot.com/
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CARACTERISTICAS MORFOCROMATICOS DE LA LARVA

1 5 2
3 3
IMAGEN N 4: caractersticas morfo cromticos de la larva Rasgos a evaluar de la larva para su estudio morfocromtico. 1. Espinas del anillo 2. Espirculos anteriores 3. Espinas del anillo (ampliadas) 4. Espirculos posteriores 5. Esqueleto cefalofaringeo
Curva de crecimiento: se realiza de la siguiente manera Utilizando el instrumento de precisin pie de rey digital. Medir cada larva que se recolecte en los viales (frasco). Obtener un promedio aritmtico de las larvas recolectadas por cada vial (frascos).
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Realizar un plano cartesiano en donde se plasme el promedio del tamao de las larvas VS el da de recoleccin. Por ltimo esperamos obtener una curva de las siguientes caractersticas.
IMAGEN N 5: grafica de crecimiento del tamao Vs tiempo de la larva.
8.5 ENTOMOLOGIA FORENSE La entomologa forense es la ciencia que estudia los insectos asociados al proceso de descomposicin cadavrica, lo que la convierte en una herramienta til para esclarecer incgnitas que rodean a los cadveres encontrados en
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circunstancias particulares. En muchos pases, los estudios sobre entomologa forense son amplios y utilizan esta ciencia como herramienta legal. Sin embargo, en Colombia an el trabajo es escaso y Faltan investigaciones que enriquezcan y fortalezcan esta ciencia para lograr que se convierta en una herramienta legal y que sea parte fundamental en el anlisis de las escenas de crimen11 8.6 COCAINA 4La cocana es un alcaloide extrado de las hojas del arbusto Erythroxylon coca (Figura 5), que crece mayormente en Sudamrica (Lange y Hills, 2001) en regiones clidas y hmedas entre 600-1500 m sobre el nivel del mar. Perteneciente a la familia de las eritroxilceas, con hojas alternas, aovadas y enteras, flores blanquecinas y fruto en baya pequea y roja, crece hasta una altura media de un metro y contiene hasta 1417 alcaloides distintos de los que el ms conocido y estudiado es la cocana. Existen entre setenta y cinco y doscientas cincuenta especies de eritroxilceas, aunque las ms extendidas son la Eritroxylon coca lam y la Erytroxylon novogratense, destinadas en la regin andina al cultivo para consumo tradicional y su transformacin en cocana. (Pascual et al., 2001).
IMAGEN N 6: Hoja de la mata de cocana FUENTE: Eritroxylon coca lam Fuente. Herbario ENCB, IPN En Sudamrica y Centroamrica el habito de masticar hoja de coca se remonta a tiempos muy antiguos, pero fue hasta que los primeros exploradores llevaron a Europa noticias sobre la planta y sus propiedades (Arif, 1988).
11
lunazul.ucaldas.edu.co- ENTOMOLOGA FORENSE: LOS INSECTOS EN LA ESCENA DEL CRIMEN
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8.7 FASES DE ELABORACION DE LA COCAINA

Etapa
De hojas de coca a la pasta
Sustancia Qumica
Queroseno. cido sulfrico. Carbonato sdico. cido sulfrico.
Sustituto
Gasolina, benzeno. Carbonato de sodio. Hidrxido sdico. cido clorhdrico. Dicromato de potasio. Hidrxido sdico. Cloroformo.
De la pasta a la base de cocana
Permanganato potsico.
De la base de cocana al clorhidrato de cocana
ter etlico. Acetona. cido clorhdrico.
Metimetilo acetona. Gas cloruro de hidrgeno.
TABLA N 1: fases de la elaboracin de la cocana
8.8 TOXICOCINETICA DE LA COCAINA La cocana (Benzoylmetilecgonina) se consume ms frecuente en su forma soluble (clorhidrato de cocana) o en su forma alcaloide, free-base, que en su estado slido, conocido como crack. La forma soluble tiene un alto poder de penetracin por las membranas biolgicas. El alcaloide es estable a altas temperaturas y por lo tanto puede fumarse o administrarse por va endovenosa. Cualquier dosis es potencialmente toxica, habindose registrado muertes incluso tras un primer consumo. En general, es difcil predecir qu exposicin ser toxica, debido a la variabilidad en el grado de pureza, la presencia de adulterantes y la diferente tolerancia individual de los consumidores. Se ha visto como los niveles plasmticos bajos de colinesterasa se relaciona con mayores complicaciones de consumo de cocana. Segn su va de entrada, la absorcin es ms o menos rpida (entre 30 ser y 90 min) y su duracin de accin oscila entre 23 y 180 min. Una vez absorbida produce un bloqueo de la receptacin presinaptica de aminas piognicas (dopamina, adrenalina, noradrenalina y serotonina). Tambin se producen un aumento de aminocidos excitadores (asparto y glutano). las catecolaminas producen estimulacin alfa y beta, responsables de la aparicin de hipertensin y taquicardia, diaforesis, temblor y midriasis. El exceso de dopamina aparece ser el responsable de agitacin psicomotriz, mientras que la serotonina se relaciona con
39
la presencia de termorregulacin.
alucinaciones,
psicosis,
anorexia,
actividad
sexual
A nivel local la cocina produce anestesia por bloqueo de los canales de sodio de las membranas axonales, y vasoconstriccin por aumento de la produccin de la endotelina y disminucin de la produccin de oxido ntrico. Hay que tener en cuenta tambin el consumo de alcohol y cocana, pues ambos dan lugar a un metabolito, el cocaetileno, formado por la transesterificacion a nivel heptico de ambas sustancias, Este metabolito prolonga la sensacin de euforia, produce mayor depresin miocrdica y aumenta la vida media en 2.5 veces respecto a la cocana sol, lo que puede dar lugar a manifestaciones clnicas tardias.12
8.9 ASPECTOS TOXICOLOGICOS DE LA COCAINA La cocana es bien absorbida por la mayora de las vas de administracin. Las sales de cocana son muy difusibles en agua y termolbiles; la hidrosolubilidad de las sales de cocana permite que sean fcilmente absorbibles por las mucosas nasales (sniffin), pero no permite que sean fumadas, una lnea tpica de cocana para aspiracin nasal contiene entre 20-30 mg. Las sales de cocana tambin pueden ser absorbidas por va parenteral. El basuco o base de coca es una sustancia insoluble en agua, pero soluble en lpidos y solventes orgnicos. Su composicin qumica depende de las impurezas que lo acompaan, que son agregadas en el proceso de preparacin. Tiene como va de penetracin principal la inhalatoria en forma fumada, pero no se administra de forma aspirada, ya que su absorcin es muy escasa por no ser hidrosoluble. La va parenteral tampoco es una va de administracin difundida, en razn de los inconvenientes para una absorcin ptima, por los productos y sustancias que lo componen y que se adicionan en su preparacin. Una vez absorbida la cocana pasa rpidamente a la sangre y se distribuye por todo el organismo, teniendo especial afinidad por el cerebro. Tambin atraviesa la barrera hematoenceflica y la barrera feto placentaria debido a su alta liposolubilidad. La cocana tiene un volumen de distribucin de 2 l/k. La biotransformacin del principio activo se inicia rpidamente en la sangre misma debido al pH del medio acuoso, el cual es potenciado por la presencia de colinesterasas y posteriormente se completa en el hgado donde es hidrolizada por colisnesterasas produciendo sus dos metaboltos principales la
12
Intoxicacin por drogas Drug poisoning
40
benzoilecgonina (BEG) y la ecgoninametilester (EME). 15-30 minutos despus de la administracin aparece la benzoilecgonina (BEG), el principal metabolito del cual se pensaba que era farmacolgicamente inactivo. La BEG puede detectarse en plasma hasta 24 horas despus de su administracin. Ni la cocana ni sus metabolitos se unen a protenas plasmticas, la vida media de sus metabolitos oscila entre 4-6 horas y es ms larga que la de la cocana libre que es de aproximadamente 60 minutos (15). La cantidad encontrada en sangre corresponde fielmente a la cantidad a la que estn expuestos los receptores. En personas con sobredosis, la sustancia muestra concentraciones diferenciales importantes en cerebro y sangre, llegando a encontrarse en el primero hasta 10 veces la concentracin en la sangre, tomada al mismo tiempo (Karch, 1.991). Su eliminacin se efecta por va renal principalmente como metabolitos, los cuales pueden ser detectados hasta seis horas despus del consumo y con una pequea cantidad en forma libre.
8.10 INTOXICACION POR COCAINA La cocana es un extracto natural de las hojas de la coca que se utiliza como anestsico local en las mucosas. La cocana se puede administrar por diferentes vas: aspiracin nasal; intravenosa, area (cigarrillo) y aplicacin a mucosas. La dosis letal es difcil de cuantificar puesto que vara segn la va de administracin. Sin embargo, se pueden considerar: 1,4 g para un hombre de 70 Kg en caso de inhalacin 700 mg si la va es la intravenosa Dosis ms elevadas son necesarias en caso de ingestin por va oral (hidrlisis rpida en el estmago).
La vida media plasmtica es de 60-90 minutos despus de la inyeccin o inhalacin, pero puede sobrepasar varias horas despus de la toma por va oral o nasal. Las manifestaciones clnicas de la intoxicacin evolucionan de manera bifsica, presentndose primero una fase de estimulacin y luego una de depresin en orden descendente, desde la corteza hasta la mdula. Los hallazgos patolgicos
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en muertes ocurridas por envenenamiento con cocana son congestin del aparato digestivo, cerebro y otros rganos.13 8.11 EFECTOS DE LA ADICCION A LA COCAINA La cocana es una droga muy poderosa, capaz de alterar significativamente el estado psicofisiolgico del consumidor. A lo largo de la historia de la coca se ha usado como un vigorizante fsico. La capacidad de la coca para reducir el hambre y la fatiga y estimular la actividad muscular ha sido ampliamente reconocida. Se ha sugerido que este efecto se debe al consecuente aumento de la acidez de la sangre, a partir del cido rico, y a la estimulacin del proceso de degradacin de carbohidratos para obtener energa en los tejidos. Aun suponiendo que esta accin metablica ocurre, el efecto en el consumidor sigue dependiendo de numerosos factores. Como con cualquier otra droga, los efectos de una dosis mnima en particular varan con el estado mental y el bienestar fsico del consumidor. La estimulacin es mucho ms profunda si el individuo est por debajo de lo normal, se siente fatigado o con hambre. Los efectos son mnimos si est presente la euforia normal asociada a una buena salud. La cocana ha demostrado tener un efecto positivo en la actividad muscular en general y, ms especficamente, sobre el tiempo de reaccin y fortaleza muscular. Los investigadores no han sido capaces de demostrar ningn efecto directo de la cocana sobre los nervios motores o sobre un grupo de msculos; por ello, han concluido que su efecto es probablemente indirecto, actuando para aumentar la sensacin general de bienestar y la disposicin al trabajo. Farmacolgicamente, la cocana produce dos acciones diferentes y no relacionadas: En primer lugar acta como anestsico local. Despus de la aplicacin local, la cocana bloquea la conduccin de impulsos en las fibras nerviosas durante cerca de 20 a 40 minutos, debido a su capacidad de interferir con el movimiento de iones de sodio a travs de la clula nerviosa. En segundo lugar es un poderoso estimulante del sistema nervioso central. Este efecto empieza en el sistema nervioso simptico cortical, probablemente debido al bloqueo por
13
INTOXICACION POR COCAINA- Carlos Snchez David, MD
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competencia de la reabsorcin de norepinefrina de regreso a la fibra adrenrgica. La accin sobre el sistema nervioso central, que produce euforia y excitacin, representa el principal motivador para el uso de cocana. Esta droga refuerza las ms caras aspiraciones de iniciativa y realizacin al proporcionar al consumidor mayor energa y optimismo. Psicolgicamente, la cocana causa un aumento del ritmo cardaco y respiratorio, elevacin de la temperatura corporal y la presin arterial, constriccin de los vasos sanguneos y dilatacin de las pupilas. Dado que la cocana es de corta accin, puede usarse repetidamente, y tomarse en un solo da cantidades excesivas (ms de 10 gramos). La dosis letal es aproximadamente 1.2 gramos (1200 mg.) para la mayora de los individuos, si se toma de una sola vez. La muerte, en este caso, se debe a una falla respiratoria, aunque ocurre raras veces. Las dosis grandes o el uso crnico pueden producir angustia, alucinaciones, impotencia e insomnio; crean una sensacin de fortaleza mental y muscular, as como alucinaciones visuales, auditivas y tctiles. Las ilusiones paranoides, combinadas con la sensacin excesiva de poder personal, pueden hacer de una persona que consume grandes dosis, especialmente inyectadas, alguien muy antisocial y peligroso. Frecuentemente ocurren cambios rpidos en la percepcin; se embota el juicio; se produce una liberacin de inhibiciones; y son caractersticas de aquellos que abusan de la cocana la agresin, las reacciones de pnico y, con el tiempo, la depresin agitada. A pesar de que se crea una fuerte dependencia psquica hacia la cocana, el uso de esta droga no provoca dependencia fsica. No existe sndrome de abstinencia ni se presentan sntomas de privacin cuando la droga es retirada. Debido al rpido metabolismo de la cocana, pueden administrarse grandes cantidades en perodos relativamente cortos. En general se considera que esta droga no crea tolerancia, aunque este punto sigue siendo debatido por varios investigadores. A pesar de la posible ausencia de tolerancia fsica o dependencia, esta droga se caracteriza por una fuerte tendencia por parte de los consumidores a seguirla usando. Induce un alto nivel de dependencia psquica y a menudo da lugar a un tipo destructivo de abuso de drogas. Este patrn es a menudo difcil de entender ya que muchos consumidores ocasionales no informan de efectos adversos, necesidad de la droga, ni adiccin. Sin embargo, hay voluminosos reportes de abuso que siguen este patrn general: poco despus de administrada la droga hay una prdida de sensibilidad en la
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cavidad bucal y a menudo sensacin de no tener lengua. Una sensacin agradable de calor por todo el cuerpo es seguida de una sensacin de excitacin creciente. El consumidor se siente fuerte y animado, capaz de emprender cualquier accin. El consumidor se siente fuerte y animado, capaz de emprender cualquier accin. La fatiga se reduce y frecuentemente se experimentan sensaciones agradables de riqueza y poder. Esta sensacin de regocijo dura desde 45 minutos hasta 2 horas, dependiendo de la calidad de la cocana y del grado en que ha sido rebajada A medida que los efectos desaparecen, generalmente se presentan la depresin y la fatiga. El dolor de cabeza y el malestar producen a menudo un fuerte deseo de elevarse de nuevo. No es por tanto difcil de comprender el deseo de continuar usndola, aunque no se cree dependencia fisiolgica . Pero nuevamente, como en el caso de otras drogas, la forma de usar la cocana depende del individuo. Algunas personas la usan ocasionalmente con resultados favorables, mientras que otras quedan atrapadas en un crculo vicioso de abuso.14
8.12 CROMATOGRAFIA DE GASES La cromatografa es la separacin fsica de dos o ms compuestos basada en la diferente distribucin de dos fases, una de las cuales es la estacionaria y otra la mvil. La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido dispuesto libre un slido que acta como soporte, de gran rea superficial. La fase mvil es un fluido (puede ser gas, liquido o fluido supercrtico) que se usa como portador de la mezcla En la cromatografa ocurren dos fenmenos muy importantes y que son prcticamente los rectores del proceso de separacin La adsorcin es la retencin de una especie qumica en los sitios activos de la superficie de un slido, quedando delimitado el fenmeno a la superficie que separa las fases o superficies interfacial. Esta retencin superficial puede ser fsica o qumica. La absorcin depende de la naturaleza de la subtancia adsorbida, de la temperatura, de la naturaleza y estado de subdivisin del adsorbente, y de la concentracin. La absorcin: es la retencin de una especie qumica por parte de una masa y depende de la tendencia que tiene esta a formar mezcla o reaccionar qumicamente con la misma
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9. METODOLOGIA DEL TRABAJO
RECOLECCION DE MATERIAL ENTOMOLOGICO (LARVAS)
ESTUDIO ENTOMOLOGICO
ESTUDIO TOXICOLOGICO
1. Clasificacin taxonmica de mosca adultas. 2. Variacin morfo cromtica. 3. Curva de crecimiento.
COMPARACIN DE RESULTADOS
4. Realizar un mtodo de extraccin de metabolitos en orina. 5. Determinacin de metabolitos por Cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas
TABLA N 2 metodologa
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10. RESULTADOS Y DISCUSIONES 10.1 Dosis de cocana suministrada al porcino estudio
Dosis de cocaina suministrda al porcino Dosis suministrada estudio

8 7 6 5 4 3 2 1 0
7.0 gr
0.1gr
0.2 gr
0.3gr
0.4gr
0.5 gr
0.6gr
0.7gr
0.8gr
0.9 gr
1.0 gr
IMAGEN N 7: Dosis de cocana suministrada al porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn
IMAGEN N8: Porcino control FUENTE: Angie Natalia Laguna
IMAGEN N9: Porcino estudio FUENTE: Angie Natalia Laguna
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Los dos porcinos se encontraban en igualdad de condiciones, alimentarias y climticas. Con la nica diferencia que a l porcino estudio se le suministro la cocana
IMAGEN N10: Recoleccin de dptero en material biolgico para clasificacin taxonmica FUENTE: Angie Natalia Laguna.
IMAGEN N 11: recoleccin de orina cerco IMAGEN N12: recoleccin de orina cerco Control. FUENTE: Angie Natalia Laguna. Estudio. FUENTE: Angie Natalia Laguna.
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IMAGEN N13: Recoleccin de huevos de larvas en material biolgico FUENTE: Angie Natalia Laguna 10.2 Recoleccin de larvas del 3 al 19 de octubre de 2012
IMAGEN N14: Recoleccin de larvas en Material biolgico. FUENTE: Karen Geraldine Ruiz.
48
49
10.3 Clasificacin taxonmica de mosca adulta: La clasificacin taxonmica se realizo en un estereoscopio donde se comparan los dpteros que colonizaron el porcino estudio y el blanco, consiste en observar las partes del dptero encontrado con ayuda de las claves taxonmicas para la identificacin de la clase de dptero encontrado y determinar la familia. 10.4 COMPARACION DEL DIPTERO CON LA CLAVE TAXONOMICA MOSCA ESTUDIO DIPTERO SARCOPHAGIDAE
IMAGEN N 20: sarcophagidae fotografia de recolecion autores) FUENTE:leidy paola arias hernandez
IMAGEN N 21: SARCOPHAGIDAE (museo univalle, dibujo de los
CUATRO CERDAS NOTOPLEURALES
IMAGEN N 22: sarcophagidae fotografia de recolecion FUENTE: leidy paola arias hernandez
IMAGE N 23: SARCOPHAGIDAE (museo univalle, dibujo de los autores)
50
Vista ventral del pretarsus
IMAGEN N 24: sarcophagidae fotografia de recolecion FUENTE:leidy paola arias hernandez
IMAGEN N 25: SARCOPHAGIDAE (museo univalle, dibujo de los autores)
Vena desnuda
IMAGEN N 26: sarcophagidae IMAGEN N 27: ala tabanus sp (tabanidae) fotografia de recolecion (museo univalle, dibujo de los autores) FUENTE: leidy paola arias hernandez
51
10.5 Mtodos de extraccin de metabolitos de orina: Este procedimiento se realiza de la siguiente manera Se toma 0.5ml de orina tanto la estudio como la control. Se le ajusta el PH que quede entre 8-9 con el reactivo de amoniaco. Le agregamos una mezcla de cloroformo isopropanol 11. Hacemos la separacin de la fase acuosa y orgnica en el embudo de decantacin. Filtramos la fase orgnica en sulfato de sodio. Se deja evaporar. Se realiza reconstruccin con 2ml de metanol. Envi al laboratorio para anlisis.
Como resultado obtuvimos 2 cromatografas:
10.6 cromatografa de la muestra del porcino control

Colesterol
Cafena
IMAGEN N 28: Cromatografa negativa. FUENTE: Chromatogram negativo qumica\MATULEVICH\negativo.qgd
C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital
52
10.7 cromatografas de la muestra del porcino estudio
Lidocaina
Colesterol
Colesterol
IMAGEN N 29: cromatografa positiva. FUENTE: Chromatogram positivo qumica\MATULEVICH\positivo.qgd
C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital
Donde se obtuvo como resultado en ambas muestras la presencia de cafena, colesterol y en la muestra del porcino estudio se encontr la presencia de lidocana. 10.8 METODOS DE EXTRACCION DE METABOLITOS EN LARVAS DIAS 3 Y 7 DE OCTUBRE Se realiza el siguiente procedimiento para la extraccin en las larvas que fueron recolectadas el da 27 de septiembre del 2012 tanto para el porcino control como para el porcino estudio. 1. Se pesan las larvas del porcino control, las cuales pesan 2. Se pesan las larvas del porcino estudio, las cuales pesan 3. Se maceran( este procedimiento es para las dos muestras control y estudio)
53
IMAGEN N 30: equipo, elementos y reactivos que se usaron en el proceso de extraccin. FUENTE: Angie Natalia Laguna.
IMAGEN N 31: Larvas maceradas porcino control. FUENTE: Angie Natalia Laguna.
IMAGEN N 32: Larvas maceradas del Porcino estudio. FUENTE: Angie Natalia Laguna.
4. Se le agrega 10ml de etanol al mortero y se disuelve. 5. En un beacker se realiza una mezcla de cloroformo isopropanol 11.
54
6. Se le agrega el macerado del mortero al beacker donde se encuentra la mezcla de cloroformo isopropanol 11(IMAGEN N 34).
IMAGEN N 33: mezcla del macerado con el cloroformo isopropanol 11 FUENTE: Angie Natalia Laguna. 7. Se filtra la mezcla (imagen N35).
IMAGEN N34: filtrado de las mezclas FUENTE: Angie Natalia Laguna.
55
8. Se vuelve a filtrar pero le agregamos al papel filtro sulfato de sodio para eliminar el exceso de agua (IMAGEN N 36).
IMAGEN N 35: filtrado con sulfato de sodio. FUENTE: Angie Natalia Laguna. 9. Se deja evaporar a temperatura ambiente. 10. 11. Se reconstituye con cloroformo agregndole 2ml de esta sustancia y agitamos hasta hacer la reconstitucin de las partculas que quedan despus de la evaporacin del solvente(imagen N37)
56
IMAGEN N 36: reconstituciones FUENTE: Angie Natalia Laguna. 12. Se envi al laboratorio para anlisis.
Se obtuvieron los resultados del primer espectro enviado a hacer, los cuales fueron los siguientes en orina: 1. En la muestra del porcino control se encontr presencia de cafena y colesterol.
IMAGEN N 37: Presencia de cafena en el porcino control FUENTE: Chromatogram negativo C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\negativo.qgd
57
IMAGEN N 38: Presencia de colesterol en el porcino control FUENTE: Chromatogram negativo C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\negativo.qgd 2. En la muestra del porcino estudio se encontr presencia de cafena, colesterol y lidocana ( cocana metabolizada)
IMAGEN N 39: Presencia de cafena en el porcino estudio. FUENTE: Chromatogram positivo C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\positivo.qgd
IMAGEN N 40: Presencia de colesterol en el porcino estudio FUENTE: Chromatogram positivo C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\positivo.qgd
58
IMAGEN N 41: Presencia de lidocana en el porcino estudio FUENTE: Chromatogram positivo C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\positivo.qgd 3. Se enviaron nuevas muestras pero esta vez no son de orina sino que de las larvas del porcino control y del porcino estudio por lo tanto estamos en espera de las cromatografas de estos dos espectros. Se obtuvieron como resultado del envi de las primeras larvas: 10.9 Cromatografa de la muestra del porcino estudio
Neronina
Isoquino
IMAGEN N 42: Espectro positivo FUENTE: Chromatogram POSITIVO C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\POSITIVO 2.qgd
59
10.10 Cromatografia de la muestra del porcino control.
IMAGEN N 43: Espectro negativo FUENTE: Chromatogram NEGATIVO C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\NEGATIVO2.qgd 10.11 METODOS DE EXTRACCION DE METABOLITOS EN LARVAS DIAS 11,15 Y 19 Se realiza el mismo procedimiento anteriormente realizado para la extraccin de larvas, a continuacin mostramos las muestras a analizar.
IMAGEN N 44: Macerado de Material entomolgico del Porcino estudio. FUENTE: Angie Natalia Laguna.
IMAGEN N 45: Macerado de material Entomolgico del porcino control. FUENTE: Angie Natalia Laguna.
60
Se obtuvo en el espectro positivo neronina el cual es un alcaloide indolico.
IMAGEN N 46: presencia de neronina en el porcino estudio FUENTE: Chromatogram POSITIVO C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\POSITIVO 2.qgd
IMAGEN N 47: Presencia de Isoquino 2,1 beta isoquinoleina en el porcino estudio FUENTE: Chromatogram POSITIVO C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\POSITIVO 2.qgd
Se realiza el mismo procedimiento anteriormente realizado para la extraccin de larvas, a continuacin mostramos las muestras a analizar.
61
IMAGEN N 48: Macerado de material entomolgico del porcino estudio. FUENTE: Angie Natalia Laguna Como resultado de esto se obtienen dos espectros, son los siguientes: 10.12 Cromatografa de la muestra del porcino control
IMAGEN N 49: Espectro negativo FUENTE: Chromatogram NEGATIVO 3 C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\NEGATIVO 3.qgd
62
10.13 Cromatografa de la muestra del porcino estudio
IMAGEN N 50: Espectro positivo FUENTE: Chromatogram POSITIVO 3 C:\GCMSsolution\Data\Project1\UDistrital qumica\MATULEVICH\POSITIVO 3.qgd Se realizo la curva de crecimiento de las larvas de dptero de tercera etapa, la cual la diferenciamos porque su medida tamao es mayor a 10 mm encontradas entre el porcino control y el porcino estudio. 10.14 CURVA DE CRECIMIENTO DE LAS LARVAS DE DIPTERO ENCONTRADAS EN EL PORCINO CONTROL
IMAGEN N 51: Viales plsticos que contienen larvas de dptero del porcino control. FUENTE: Geraldine Beltrn
63
IMAGEN N 52: variacin morfolgica en las larvas del porcino control. FUENTE: Geraldine Beltrn
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IMAGEN N 69: variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. FUENTE: Angie Natalia Laguna Cortes.
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IMAGEN N 71: variacin morfolgica en las larvas del porcino control. FUENTE: Angie Natalia Laguna Cortes.
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IMAGEN N 94: Curva de crecimiento de las larvas de dpteros recolectadas del porcino control. FUENTE: Geraldine Beltrn
CURVA DE CRECIMIENTO DE LAS LARVAS DE DIPTERO ENCONTRADAS EN EL PORCINO ESTUDIO
IMAGEN N 95: Viales plsticos que contienen larvas de dptero del porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn
85
IMAGEN N 96: variacin morfolgica en las larvas del porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn
IMAGEN N 97: Curva de crecimiento de las larvas de dpteros recolectadas del porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn
86
IMAGEN N 98: Curva de crecimiento de las larvas de dpteros recolectadas del porcino control y estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn 10.15 COMPARACION DE LA MORFOLOGIA DE LAS LARVAS DE DIPTERO ENCONTRADAS EN EL PORCINO CONTROL Y ESTUDIO
IMAGEN N 99: Cambio de morfologa de la larva de dptero encontrada en el porcino estudio FUENTE: Geraldine Beltrn
87
IMAGEN N 100: Se puede observar que la larva de dptero encontrada en el porcino estudio presenta una alteracin en su morfologa, FUENTE: Geraldine Beltrn 10.16 LARVAS DEL ESTEREOSCOPIO PORCINO CONTROL Y ESTUDIO BAJO
IMAGEN N 101: se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino control no presenta ninguna alteracin morfocromatica. FUENTE: Geraldine Beltrn
88
89
IMAGEN N 104: se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino estudio l no presenta ninguna alteracin morfocromatica. FUENTE: Geraldine Beltrn
IMAGEN N 105: se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino estudio l no presenta ninguna alteracin morfocromatica. FUENTE: Geraldine Beltrn
90
IMAGEN N 106: se puede observar la larva de dptero encontrada en el porcino estudio l no presenta ninguna alteracin morfocromatica. FUENTE: Geraldine Beltrn 10.17 PORCINO CONTROL Y ESTUDIO EN ESTADO DE DESCOMPOSICION DI 23 DE OCTUBRE.
IMAGEN N 107: porcino control en estado de descomposicin da 23 de octubre. FUENTE: Angie Natalia Laguna Cortes.
91
IMAGEN N108: porcino estudio en estado de descomposicin da 23 de octubre. FUENTE: Angie Natalia Laguna
92
11. CONCLUSIONES
Conclusin de los espectros realizados en la orina obtenida de los porcinos (estudio y control) y las larvas recolectadas de los mismos.
11.1 ESPECTROS REALIZADOS A LA ORINA OBTENIDA DE LOS PORCINOS (ESTUDIO Y CONTROL)
Lidocana
IMAGEN N109: espectro negativo en orina porcino control.
IMAGEN N110: espectro negativo en Del Orina Del porcino estudio.
Se obtuvo en el espectro positivo o porcino estudio la presencia de lidocana. Y como podemos observar en el espectro realizado al porcino control no hay presencia de este alcaloide.
93
11.2 PRIMER ESPECTRO REALIZADO EN LARVAS OBTENIDAS DE LOS PORCINOS (ESTUDIO Y CONTROL) DE LOS DIAS 3 Y 7 DE OCTUBRE
Neronina
Isoquino
IMAGEN N111: espectro negativo en orina Del porcino control.
IMAGEN N112: espectro negativo en orina Del porcino estudio.
Se obtuvo en el espectro positivo neronina el cual es un alcaloide indolico. Y Presencia de Isoquino 2,1 beta isoquinoleina en el mismo, sin obtener alguna presencia de alcaloides en el espectro realizado al porcino control.
94
11.3 SEGUNDO ESPECTRO REALIZADO EN LARVAS OBTENIDAS DE LOS PORCINOS (ESTUDIO Y CONTROL) DE LOS DIAS 11, 15 Y 19 DE OCTUBRE.
IMAGEN N113: espectro negativo en orina Del porcino control.
IMAGEN N114: espectro negativo en Orina Del porcino estudio.
Se detecto la presencia de colesterol y cidos grasos producto de material biolgico en descomposicin, es importante resaltar que este segundo grupo de larvas estudiadas corresponden a muestras tomadas quince das despus del sacrificio de los porcinos y no se evidenciaron trazas de alcaloides. 11.4 DATOS DE LA CURVA DE CRECIMIENTO
N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 11.78 11.58 10.38 10.73 09.86 10.44 9.37 8.93 8.47 9.44 en mm TABLA N3: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 3 DE OCTUBRE DEL PORCINO ESTUDIO.
N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 8.34 8.43 6.52 9.97 10.28 10.37 10.44 10.79 11.15 11.19 en mm TABLA N4: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 3 DE OCTUBRE DEL PORCINO CONTROL.
95
N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 12.86 11.54 13.67 11.71 7.22 11.33 11.82 10.43 11.76 12.37 en mm TABLA N5: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 7 DE OCTUBRE DEL PORCINO ESTUDIO. N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 12.14 9.12 13.63 10.14 9.93 10.42 11.59 8.27 8.25 7.34 en mm TABLA N6: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 7 DE OCTUBRE DEL PORCINO CONTROL. N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 13.34 10.41 11.83 13.02 12.62 11.33 10.84 12.74 11.26 13.33 en mm TABLA N7: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 11 DE OCTUBRE DEL PORCINO ESTUDIO. N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 13.58 12.57 14.55 12.33 14.55 12.70 14.70 14.37 14.63 14.87 en mm TABLA N8: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 11 DE OCTUBRE DEL PORCINO CONTROL. N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 14.33 14.03 12.16 11.92 14.74 12.95 12.40 14.90 13.40 13.10 en mm TABLA N9: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 15 DE OCTUBRE DEL PORCINO ESTUDIO.
N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 14.33 14.03 12.76 11.92 14.74 12.95 12.40 14.90 13.90 13.10 en mm TABLA N10: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 15 DE OCTUBRE DEL PORCINO CONTROL.
96
N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 19.44 15.94 16.83 16.03 17.61 15.17 15.86 17.18 16.65 19.66 en mm TABLA N11: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 19 DE OCTUBRE DEL PORCINO ESTUDIO. N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 larva Medida 14.96 15.14 14.10 14.62 15.13 14.36 14.36 13.05 15.92 16.65 en mm TABLA N12: DATOS PARA LA CURVA DE CRECIMIENTO DEL DIA 19 DE OCTUBRE DEL PORCINO CONTROL.
IMAGEN N 115: variacin morfolgica IMAGEN N 116: variacin Morfolgica en las larvas del porcino control. Las larvas del porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn FUENTE: Angie Natalia Laguna.
97
IMAGEN N 117: variacin morfolgica IMAGEN N 118: variacin morfolgica en En las larvas del porcino control. Las larvas del porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn FUENTE: Angie Natalia Laguna Cortes.
IMAGEN N 119: variacin morfolgica IMAGEN N 120: variacin morfolgica en En las larvas del porcino control. Las larvas del porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn FUENTE: Angie Natalia Laguna Cortes.
98
IMAGEN N 121: variacin morfolgica IMAGEN N 122: variacin morfolgica En las larvas del porcino control. En las larvas del porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn FUENTE: Angie Natalia Laguna
99
Se observa en la morfologa de las larvas del porcino estudio son ms grandes de acuerdo a su longitud (tamao), frente a las larvas del porcino control segn las curvas de crecimiento. Se observa que no hay variacin morfocromatica en las larvas del porcino estudio comparadas con el porcino control.
11.5 CONCLUSION GENERAL: Segn los objetivos trazados desde el comienzo de nuestro proyecto los cuales se cumplieron se concluye que si se encuentran trazas de cocana metabolizada en las larvas de dptero provenientes de material biolgico (porcino) en descomposicin pero hasta el 8 da de descomposicin del cuerpo, al igual que su morfologa varia en su longitud (tamao) aproximadamente de 2mm a 4mm en general, su variacin morfocromatica no cambia en el porcino estudio.
100
12. SUGERENCIAS 1. En el momento de recolectar las larvas de dptero asegurar que la cmara de sacrificio sea correcta. 2. Hervir bien el agua para que la cmara de sacrificio sea correcta. 3. Usar frascos de cierre seguro para preservar las larvas en alcohol y que estas no se daen. 4. Utilizar los elementos de bioseguridad pertinentes en el momento de realizar la recoleccin.
101
13. RECOMENDACIONES
1. No usar la poli sombra para proteger el material biolgico a estudiar ya que este elemento preserva este material biolgico retrasando la descomposicin y preservndolo. 2. En el momento en que el material biolgico se va descomponiendo por el tiempo las trazas van desapareciendo por tal motivo estos anlisis se deben enviar pronto al laboratorio para que el espectro arroje un resultado positivo.
102
14. PRESUPUESTO
No. MATERIAL 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Dos (2) porcinos (sus scrofa domestica) Analito cocana (benzoilmetilecgonina) Dos (2) jaulas en acero inoxidable Predio Comida, viruta por un mes Jaulas de madera Poster Materiales de laboratorio Papelera Exmenes qumicos especializados Transportes TOTAL
COSTO $ 200.000 $ 122.000 $ 140.000 $100.000 $ 119.000 $ 15.000 $ 50.000 $ 80.000 $ 100.000 $ 400.000 $ 372.000 $ 1698.000
103
15. BIBLIOGRAFIA WEB
1.
Entomologa forense en Latinoamrica http://entoforenselatam.wordpress.com/2009/04/29/entomologia-forense-encolombia-marta-wolff-universidad-de-antioquia-medellin-colombia/ Servicio comunitario en entomologa forense http://entomologoputrefacto.blogspot.com/2011/06/entomotoxicologia.html Revistas cientficas ( revista luna azul) universidad de caldas http://lunazul.ucaldas.edu.co/index.php?option=content&task=view&id=312 Revista del Hospital J. M. amos Mejia Edicion Electronica Volumen XI- N 1 2006 http://www.ramosmejia.org.ar15 Cuadernos de Medicina Forense http://scielo.isciii.es/scielo.php?pid=S113576062003000300002&script=sci_arttext
2.
3.
4.
5.
6.
Intoxicacin por cocana http://www.aibarra.org/Guias/10-15.htm
7.
efectos toxicolgicos y neuropsiquitricos producidos por consumo de cocana http://www.scielo.org.co/pdf/rfmun/v53n1/v53n1a03.pdf
8. intoxicacin aguda por drogas
http://www.cfnavarra.es/salud/anales/textos/vol26/sup1/suple6a.html
104
16.2 AVANCE DEL PROYECTO DE INVESTIGACION CENTRO DE INVESTIGACIONES C.E.N. AVANCES DEL PROYECTO DE INVESTIGACION
CORPORACIN EDUCATIVA NACIONAL CEN CENTRO DE INVESTIGACIONES

PROGRAMA DE FORMACIN ESCRIBIR EL PROGRAMA DE FORMACION FECHA DE SUSTENTACION
NOMBRE DEL PROYECTO:
ESTUDIO ENTOMOTOXICOLOGICO DE COCAINA EN LARVAS DE DIPTEROS PROVENIENTES DE MATERIAL BIOLOGICO (PORCINO) EN DESCOMPOSICION ARIAS HERNANDEZ LEIDY PAOLA BELTRAN RAMIREZ GERALDINE MUOZ CASTRO ANGIE RUIZ MARIO KAREN LAGUNA CORTES ANGIE JOHANN ALFREDO GARCIA RODRIGUEZ MSC. JAVIER QUIMICA ANDRES MATULEVICH
AUTORES:
DIRECTOR: CO-DIRECTOR: NORMA DE COMPETENCIA EN LA CUAL SE ENMARCA EL TRABAJO: PORCENTAJE DE AVANCES:
OBJETIVOS PLANTEADOS EN EL ANTEPROYECTO (General y Especficos) Objetivo General: determinar trazas de cocaina metabolizada y la variacion
morfocromatica en larvas de dipteros provenientes de material biologico (porcino) en descomposicion
Objeticos Especficos: 1. adquirir habilidad en los procedimientos de extraccion, tecnicas de identificacion de sustancias quimicas y claves de identificacin taxonomica 2. realizar examenes toxicologicos para determinar la presencia de metabolitos de cocaina ( benzoilmetilecgonina ) en larvas de dipteros 3. identificar los cambios morfocromaticos sufridos en larvas de
105
dipteros provenientes de un cuerpo en descomposicion el cual ha tenido contacto con la sustancia 4. aportar material investigativo a la comunidad tecnico cientifica interesada en este analisis FORMULACION DEL PROBLEMA PLANTEADO EN EL ANTEPROYECTO Ante la problemtica planteada por el consumo de la cocana sin ningn tipo de control y las muertes por sobredosis algunas de ellas sin esclarecer surge la siguiente pregunta investigativa es posible identificar de manera cualitativa metabolitos derivados de la cocana (benzoilmetilecgonina) en la fauna cadavrica y a su vez establecer si esta presenta alteraciones morfocromaticas en larvas de dipteros? RESULTADOS ALCANZADOS Procedimiento de sacrifico, recoleccin de dipteros, larvas. RESULTADOS PENDIENTES Objeticos Especficos: 1. adquirir habilidad en los procedimientos de extraccion, tecnicas de identificacion de sustancias quimicas y claves de identificacin taxonomica 2. realizar examenes toxicologicos para determinar la presencia de metabolitos de cocaina ( benzoilmetilecgonina ) en larvas de dpteros 3. identificar los cambios morfocromaticos sufridos en larvas de dipteros provenientes de un cuerpo en descomposicion el cual ha tenido contacto con la sustancia 4. aportar material investigativo a la comunidad tecnico cientifica interesada en este analisis
DIFICULTADES EN EL DESARROLLO DEL TRABAJO El dia 21 de septiembre se tom la decisin de quitar la poli sombra porque esto nos dificulto la obtencin de larvas puesto que estas mismas se deshidrataron.
NOTA: EL PRESENTE FORMATO DEBE SER SUSTENTADO POR LOS AUTORES SEGN LA FECHA Y HORA ESTIPULADA POR EL CENTRO DE INVESTIGACIONES, ADEMAS DEBE ESTAR PRESENTE EL DIRECTOR DEL TRABAJO.
106
16.3 GRAFICA DE DETECCION DE COCAINA EN MATERIAL BIOLOGICO EN DESCOMPOSICION
107

Estudio Entomotoxicologico en Larvas de Dipteros Provenientes de Material Biologico en Descomposicion PDF

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Estudio Entomotoxicologico en Larvas de Dipteros Provenientes de Material Biologico en Descomposicion PDF

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ESTUDIO ENTOMOTOXICOLOGICO DE COCAINA EN LARVAS DE DIPTEROS PROVENIENTES DE MATERIAL BIOLOGICO (PORCINO) EN DESCOMPOSICION.

CORPORACION EDUCATIVA NACIONAL C.E.N. DETECTIVE INVESTIGADOR BOGOTA (CUNDINAMARCA) 2012

CORPORACION EDUCATIVA NACIONAL C.E.N. DETECTIVE INVESTIGADOR BOGOTA (CUNDINAMARCA) 2012-2

( Antecedentes de la corporacin educativa nacional C.E.N )

67 88 91 93 93 94 95 95 100 101 102 103 104 105

Cerdas hipo pleurales: Cerdas de la hipo pleura, usualmente en hilera vertical.

122 123 124 125 126

4. DESCRIPCIN DEL PROYECTO

(http://lunazul.ucaldas.edu.co/index.php?option=content&task=view&id=312). (http://lunazul.ucaldas.edu.co/index.php?option=content&task=view&id=312) 4 (http://entomologoputrefacto.blogspot.com/2011/06/entomotoxicologia.html)

Aportar material investigativo a la comunidad tcnico-cientfica interesada en este anlisis.

( Antecedentes de la corporacin educativa nacional C.E.N )

(cuadernos de medicina forense)

8.1 ESQUEMA DE LOS INSECTOS

8.3 ESQUEMA DE LOS DIPTEROS

CARACTERISTICAS MORFOCROMATICOS DE LA LARVA

IMAGEN N 5: grafica de crecimiento del tamao Vs tiempo de la larva.

lunazul.ucaldas.edu.co- ENTOMOLOGA FORENSE: LOS INSECTOS EN LA ESCENA DEL CRIMEN

8.7 FASES DE ELABORACION DE LA COCAINA

De la pasta a la base de cocana

De la base de cocana al clorhidrato de cocana

ter etlico. Acetona. cido clorhdrico.

Metimetilo acetona. Gas cloruro de hidrgeno.

TABLA N 1: fases de la elaboracin de la cocana

Intoxicacin por drogas Drug poisoning

INTOXICACION POR COCAINA- Carlos Snchez David, MD

9. METODOLOGIA DEL TRABAJO

RECOLECCION DE MATERIAL ENTOMOLOGICO (LARVAS)

1. Clasificacin taxonmica de mosca adultas. 2. Variacin morfo cromtica. 3. Curva de crecimiento.

10. RESULTADOS Y DISCUSIONES 10.1 Dosis de cocana suministrada al porcino estudio

Dosis de cocaina suministrda al porcino Dosis suministrada estudio

IMAGEN N 7: Dosis de cocana suministrada al porcino estudio. FUENTE: Geraldine Beltrn

IMAGEN N8: Porcino control FUENTE: Angie Natalia Laguna

IMAGEN N9: Porcino estudio FUENTE: Angie Natalia Laguna

IMAGEN N 21: SARCOPHAGIDAE (museo univalle, dibujo de los

CUATRO CERDAS NOTOPLEURALES

IMAGE N 23: SARCOPHAGIDAE (museo univalle, dibujo de los autores)

Vista ventral del pretarsus

IMAGEN N 24: sarcophagidae fotografia de recolecion FUENTE:leidy paola arias hernandez

IMAGEN N 25: SARCOPHAGIDAE (museo univalle, dibujo de los autores)

Como resultado obtuvimos 2 cromatografas:

10.6 cromatografa de la muestra del porcino control

IMAGEN N 28: Cromatografa negativa. FUENTE: Chromatogram negativo qumica\MATULEVICH\negativo.qgd

10.7 cromatografas de la muestra del porcino estudio

IMAGEN N 29: cromatografa positiva. FUENTE: Chromatogram positivo qumica\MATULEVICH\positivo.qgd

IMAGEN N34: filtrado de las mezclas FUENTE: Angie Natalia Laguna.

10.10 Cromatografia de la muestra del porcino control.

Se obtuvo en el espectro positivo neronina el cual es un alcaloide indolico.

10.13 Cromatografa de la muestra del porcino estudio

CURVA DE CRECIMIENTO DE LAS LARVAS DE DIPTERO ENCONTRADAS EN EL PORCINO ESTUDIO

11.1 ESPECTROS REALIZADOS A LA ORINA OBTENIDA DE LOS PORCINOS (ESTUDIO Y CONTROL)

IMAGEN N109: espectro negativo en orina porcino control.

IMAGEN N110: espectro negativo en Del Orina Del porcino estudio.

IMAGEN N111: espectro negativo en orina Del porcino control.

IMAGEN N112: espectro negativo en orina Del porcino estudio.

IMAGEN N113: espectro negativo en orina Del porcino control.

IMAGEN N114: espectro negativo en Orina Del porcino estudio.

15. BIBLIOGRAFIA WEB

Intoxicacin por cocana http://www.aibarra.org/Guias/10-15.htm

efectos toxicolgicos y neuropsiquitricos producidos por consumo de cocana http://www.scielo.org.co/pdf/rfmun/v53n1/v53n1a03.pdf

8. intoxicacin aguda por drogas

CORPORACIN EDUCATIVA NACIONAL CEN CENTRO DE INVESTIGACIONES

NOMBRE DEL PROYECTO:

DIRECTOR: CO-DIRECTOR: NORMA DE COMPETENCIA EN LA CUAL SE ENMARCA EL TRABAJO: PORCENTAJE DE AVANCES: