Sociedade Brasileira de Qumica (SBQ)

Construo de um biossensor de glicose utilizando lquido inico

Kelly Suely Galhardo * (PG), Susana Ins Crdoba de Torresi (PQ)
1 1 1

Instituto de Qumica, Universidade de So Paulo

*kellygalhardo@usp.br

Palavras Chave: Glicose oxidase, lquido inico

Introduo
A presena de lquidos inicos em biossensores crescente, isto se deve as suas caractersticas de estabilidade e seletividade na presena de biomolculas. Diversos fatores, tais como viscosidade e hidrofobicidade so sugeridos para 1 explicar este comportamento diferenciado . Importante ressaltar que muitos trabalhos estudam o comportamento de biomolculas na presena de lquidos inicos e nanotubos de carbono, justificando que a melhora dos resultados devida a presena do lquido inico sendo que ela pode estar 2 relacionada aos nanotubos . Este trabalho tem o intuito de verificar o papel do lquido inico (tetrafluoroborato de 1-butil-2,3dimetilimidazlio, BMMIBF4) na presena da glicose oxidase, na ausncia de nanotubos de carbono.

Tabela 1. Sensibilidade da deteco de glicose a -1 -1 0,00V vs. Ag/AgCl em 0,1 mol L PBS + 0,1 mol L NaCl (pH 7) para diferentes eletrodos modificados.
Biossensor 10L Glut + 25L (GOx -1 10mg mL ) 10L Glut + 25L (GOx -1 10mg mL + 4%BMMIBF4) -1 5L (GOx 10mg mL ) depois de seco 2L de Glut -1 5L (GOx 10mg mL + 4%BMMIBF4) depois de seco 2L de Glut Sensitivity / -2 -1 A cm mmol L 7.48 10.4 14.6 17.1

*Todos os eletrodos foram modificados com o hbrido (CuHCNFe/ppi). O glutaraldedo foi preparado em gua 2,5% v/v e a glicose oxidase foi preprada em PBS 0,1mol L-1 pH7.

Figura 1. Espectro de UV-vis da glicose oxidase -1 (10mg mL ) em meio de PBS 0,1mol L-1 pH7.
1,8 1,6 1,4 1,2
GOx GOx + 4% LI GOx + 30% Glut GOx + 4% LI + 30% Glut

Resultados e Discusso
A presena do hbrido de hexacianoferrato de 3 cobre/polipirrol (CuHCNFe/ppi) na superfcie do eletrodo de carbono vtreo, aumentou sensivelmente o sinal obtido em nossas amostras. Portanto, todo o trabalho desenvolvido aqui utiliza este eletrodo modificado. Alm disso, foi utilizado BMMIBF4 e glutaraldedo juntamente com a glicose oxidase. O modo como a enzima imobilizada sobre o eletrodo, um dos fatores determinantes para a estabilizao e boa reprodutibilidade do biossensor. Neste trabalho usamos duas modificaes, a primeira misturando a enzima, o lquido ionico e o glutaraldedo e a segunda colocando a enzima+lquido inico e o glutaraldedo sobre o eletrodo em camadas distintas. Como podemos observar na tabela 1 adicionando o glutaraldedo separadamente o resultado melhora. O glutaraldedo forma ligaes covalentes com grupos amina residuais livres de enzimas, muito estvel do ponto de vista mecnico, alterando a 4 estrutura secundria da protena . Por isso, quando adiconado junto a enzima a sensibilidade diminuda. Porm, quando adicionamos o lquido inico a sensibilidade aumenta, mostrando que ele estabiliza a biomolcula. Pela figura 1 vemos que a presena do glutaraldedo modifica a estrutura secundria da enzima enquanto que o lquido inico a mantem.
34a Reunio Anual da Sociedade Brasileira de Qumica

A / ua

1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650

/ nm

Concluses
Os resultados obtidos mostram que a presena de lquido inico blinda a estrutura secundria da biomolcula melhorando a sensibiilidade do biossensor. Enquanto que, o contato direto da enzima com o glutaraldedo leva a formao de ligaes cruzadas que mudam a estrutura secundria da protena.

Agradecimentos
CNPq, USP, IQ _________________________________________
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D. Wei, A. Ivaska; Anal. Chim. Acta 2008, 60, 126. X. Zeng, X. Li, L. Xing, X. Liu, S. Luo, W. Wei, B. Kong, Y. Li; Bios. Bioelect. 2009, 24, 9, 2898. 3 V. R. Gonales, R. P. Salvador, M. R. Alcntara, S. I. C. Torresi; J. Electrochem. Soc. 2008, 155, 9, K140. 4 G. Oliveira Neto, H. Yamanaka; Qum. Nova 1988, 11, 4432.