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Introduo

Smear layer o nome dado ao material depositado nas paredes dentinrias, toda vez que a dentina cortada por brocas ou limas endodnticas (Figura 1). A dentina humana , estruturalmente, formada por tbulos e composta, aproximadamente, por 70% de material inorgnico (principalmente a

hidroxiapatita), 10% de gua e 20% de material orgnico (principalmente o colgeno). As caractersticas do smear layer formado durante o tratamento endodntico vo depender de diversos fatores, como: a anatomia do canal radicular, os tipos de instrumentos utilizados no tratamento, o estado da polpa, a presena de contaminao microbiana e os produtos qumicos utilizados para
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facilitar o debridamento (Cohen & Burns, 2000). De acordo com Mader et al. (1984), o smear layer encontrado na superfcie das paredes dentinrias do canal radicular, apresenta aproximadamente 1-2 m de espessura e pode penetrar at 40 m para o interior dos tbulos dentinrios. Essencialmente, o smear layer uma camada de material lamacento, de estrutura no homognea, fracamente aderido s paredes do canal radicular, composto de partculas orgnicas e inorgnicas, protenas coaguladas, tecido pulpar, saliva, clulas sangneas e, em canais infectados, bactrias e fungos (Gulabivala et al. 2005).

Figura 1: Imagens de dentina humana atravs de microscopia eletrnica de varredura. A) tbulos dentinrios; B) tbulos dentinrios cobertos pelo smear layer.

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Moss et al. (2001) realizaram uma pesquisa com o objetivo de descobrir qual a conduta da comunidade endodntica dos Estados Unidos em relao ao smear layer. Eles observaram que a maior parte dos estudantes de odontologia e de endodontia no realiza habitualmente a remoo do smear layer, apesar da maioria dos professores universitrios indicarem esse procedimento antes da obturao do canal radicular. Esse estudo demonstra a controvrsia existente na endodontia sobre esse tema. Desde que McComb & Smith (1975) observaram, pela primeira vez, o smear layer nas paredes do canal radicular, surgiram duas correntes na endodontia com opinies controversas sobre o assunto. Uma corrente defende a permanncia do smear layer recobrindo a superfcie das paredes dentinrias antes do procedimento de obturao do canal radicular. Esses profissionais se apoiam em estudos como o de (Michelich et al., 1980), que afirma que essa camada atua como uma barreira fsica para bactrias e seus subprodutos, dificultando a penetrao desses agentes infecciosos na dentina.
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A outra corrente defende a remoo do smear layer principalmente para evitar a ocorrncia da microinfiltrao, ou seja, a recontaminao do canal radicular aps a obturao, causada pela invaso microbiana nos espaos existentes entre as paredes dentinrias e o material obturador (Mader et al., 1984; White et al., 1984; Sen et al., 1995). A microinfiltrao pode ocorrer por motivos biolgicos ou tcnicos que envolvem o tratamento endodntico. A tridimensionalidade do canal radicular uma questo crtica para o sucesso do tratamento, e levou Schilder a introduzir h aproximadamente 30 anos, dois conceitos indissociveis que so a base da terapia endodntica bem sucedida: limpeza e modelagem e obturao tridimensional (Schilder, 1967). Limpeza e modelagem tem como objetivo obter um sistema de canais radiculares totalmente limpo, livre de restos orgnicos e inorgnicos, e preparado adequadamente para receber a obturao. Geralmente, o primeiro objetivo no alcanado devido complexidade do sistema de canais radiculares, que pode apresentar istmos, deltas apicais e canais laterais, impedindo o contato direto das substncias qumicas com o material contaminado. Assim, a obturao tridimensional visa selar, dentro desse sistema, quaisquer irritantes que no possam ser removidos durante os procedimentos de limpeza e modelagem, alm de eliminar todas as possveis vias de infiltrao. Torabinejad et al. (2002) analisaram as implicaes clnicas do smear layer, e salientaram a importncia de

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sua remoo baseada em diversas investigaes que comprovaram a influncia desses aspectos citados no sucesso do tratamento endodntico. Biologicamente, a permanncia do smear layer nas paredes dentinrias, alm de abrigar bactrias viveis, serve como fonte de substrato para que elas entrem em atividade e proliferem (Bystrm & Sundqvist, 1981; Akpata & Blechman, 1982; Williams & Goldman, 1985; Meryon et al., 1986). Tecnicamente, essa camada pode representar uma barreira intermediria, impedindo o ntimo contato entre as paredes dentinrias e o material de obturao, interferindo na adeso e na penetrao dos cimentos endodnticos nos tbulos dentinrios. Alm disso, a infiltrao da obturao pode ocasionar a dissoluo do smear layer e/ou sua desintegrao por ao de enzimas bacterianas. Esses fatores, sozinhos ou combinados, podem resultar nos vazios da obturao responsveis pela microinfiltrao, ocasionando a contaminao da superfcie dentinria e, conseqentemente, o fracasso do tratamento endodntico (Mader et al., 1984; Sen
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et al., 1995; De-Deus et al., 2002; Zhender, 2006). Outra questo de controvrsia relacionada ao smear layer o modo pelo qual ele deve ser removido, j que diversos mtodos, como utilizao de substncias quelantes, ultra-som e laser, e diferentes protocolos tm sido sugeridos. Na mesma pesquisa citada anteriormente, Moss et al. (2001) tambm observaram a contradio existente entre os profissionais que responderam positivamente questo da remoo do smear layer. Porm, dentre os procedimentos utilizados, a aplicao do EDTA, uma substncia quelante, foi o mtodo de escolha da maioria. As substncias quelantes so cidos fracos, capazes de capturar ons metlicos. Foram introduzidas na medicina como antdoto para o gs venenoso de arsnico durante a I Guerra Mundial (1914). Os quelantes tornam o on metlico muito menos reativo quimicamente, produzindo um complexo que solvel em gua, permitindo assim, que o on entre na corrente sangnea e seja excretado sem causar danos ao organismo (Patrick, 2006). No canal radicular, quando inicialmente o quelante introduzido, uma pequena solubilizao de fosfato de clcio, um componente mineral da dentina, pode ser observada (Hlsmann et al., 2003). Os ons clcio so ento incorporados s molculas do quelante formando complexos estveis. A reao qumica continua at a saturao da soluo quelante, que interrompe o processo (Lopes & Siqueira 1999). Assim, os agentes

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quelantes foram introduzidos na endodontia com o objetivo de ajudar a preparao de canais radiculares estreitos e calcificados e remover o smear layer (McComb & Smith, 1975; Hlsmann et al., 2003; Gulabivala et al. 2005). Aps a II Guerra Mundial, a medicina se confrontou com um grande nmero de marinheiros incapacitados ao trabalho pelo envenenamento com a tinta utilizada para repintar os cascos dos navios de guerra. Foi nessa poca que o cido etileno-diamino-tetractico (EDTA) foi introduzido para o tratamento desses profissionais contaminados (Hlsmann et al., 2003). Hahn & Reygadas (1951) foram os primeiros a relatar a desmineralizao em tecidos dentais duros pelo EDTA. Entretanto foi Nygaard-tsby (1957), que introduziu o uso dos agentes quelantes na Endodontia. Ele observou que a aplicao do EDTA causava uma zona desmineralizada em amostras de dentina radicular que atingia at 50 m aps 24-48 horas de exposio. A partir desse estudo diversas investigaes cientficas foram realizadas com objetivo de compreender melhor o mecanismo de
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ao do EDTA, avaliar o efeito de diferentes concentraes e associaes na remoo do smear layer e na desmineralizao dentinria (Patterson, 1963; Lewinstein & Grajower, 1981; Lopes & Siqueira, 1999; Verdelis et al., 1999; Kawasaki et al., 1999; Coli et al., 1999; Hlsmann et al., 2002; Hlsmann et al., 2003; OConell et al., 2000; Serper & alt, 2002; Perez & Rouqueyrol-Pourcel, 2005). Alm do EDTA e suas associaes, outros cidos e substncias tm sido propostos sugerindo melhor capacidade de remoo do smear layer e menos danos matriz dentinria (Loel, 1975; Kaufman et al., 1978; alt & Serper, 2000; Cruz-Filho et al., 2001; Torabinejad et al., 2003). A primeira observao do smear layer nas paredes dentinrias do canal radicular foi realizada por McComb & Smith (1975). Essa anlise s foi possvel devido a utilizao da microscopia eletrnica de varredura, pois o smear layer uma camada muito fina, solvel em cido e se solubiliza durante o processamento histolgico para anlise em microscopia ptica por luz transmitida. O Microscpio Eletrnico de Varredura tradicional (MEV) um equipamento verstil, que permite a obteno de informao estrutural e qumica das amostras. A interao de um feixe de eltrons com a amostra, gera partculas e radiao que podem ser usadas para formar uma imagem ampliada em at 105 vezes. Outra propriedade importante do MEV a profundidade de foco, que permite a observao de amostras com alteraes de relevo na superfcie. Apenas

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para efeito comparativo, um excelente microscpio ptico (utilizando um aumento de 1000X), apresentar uma profundidade de campo da ordem de 0,25 m, ou seja, entre 27 e 160 menor do que o MEV pode alcanar (Goldstein, 1984). Dessa forma, a grande maioria dos estudos utiliza a microscopia eletrnica de varredura para observar as paredes dentinrias do canal radicular, pois alm de um exame detalhado da microestrutura do smear layer e da dentina, possvel obter uma viso com perspectiva tridimensional, evidenciando o relevo. Os estudos presentes na literatura, que avaliam a qualidade de limpeza do sistema de canais radiculares atravs do MEV, demonstram resultados conflitantes, o que abre precedentes para algumas crticas. Primeiramente, alteraes na superfcie dentinria podem ser causadas pela utilizao do alto vcuo no MEV e pelo recobrimento da amostra com material condutor (metalizao) necessrio para a interao com o feixe de eltrons emitido pelo microscpio. O segundo aspecto est relacionado ao carter subjetivo da seleo
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de regies da dentina para a anlise. A metalizao da amostra no permite a sua observao antes e aps o ataque cido. Como a dentina e o smear layer podem apresentar diferentes composies e caractersticas em um mesmo dente, e at mesmo em regies muito prximas, fica a critrio do operador a eleio da regio que julgar mais adequada. Isso impede a observao do verdadeiro efeito da substncia quelante em uma determinada regio da dentina. Outro aspecto importante a ausncia da quantificao dos resultados, pois as anlises so realizadas, geralmente, por scores. O sistema de scores uma classificao por observadores calibrados, qualificando as imagens capturadas no MEV em relao presena ou ausncia de debris, smear layer e orifcios de tbulos dentinrios expostos. Esse sistema pode apresentar 3, 4, 5 ou at 7 nveis de classificao dependendo do estudo. O sistema de scores impede uma comparao real entre os estudos, alm de depender da avaliao subjetiva dos observadores, que mesmo sendo calibrados, podem apresentar opinies diferentes de uma mesma imagem (Gulabivala et al. 2005). At hoje, o tempo ideal de ataque cido da dentina para a remoo do smear layer permanece desconhecido. Zehnder (2006), em uma extensa reviso de literatura sobre as substncias irrigantes do canal radicular, sugere um protocolo de irrigao, porm no indica o tempo que as substncias quelantes devem permanecer no canal. De acordo com Goldberg & Spielberg (1982), o melhor

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efeito do EDTA s pode ser observado aps 15 minutos de aplicao na dentina. Contudo, McComb & Smith (1975) afirmaram que esse quelante deveria ser deixado no canal por 14 horas. Eldarrat et al. (2004) relataram que a remoo do smear layer ainda uma observao clnica subjetiva e sugeriram a utilizao de espectroscopia para observao da capacidade de remoo do smear layer. Assim, atualmente, no existe um consenso sobre os efeitos de cada substncia, seus respectivos tempos de aplicao e a forma de interrupo do ataque cido da dentina com o objetivo de remover o smear layer. O estudo de De-Deus (2004) analisou quantitativamente os efeitos de substncias quelantes (cido ctrico 10%, EDTA e EDTAC) na dentina. A avaliao da microdureza dentinria revelou maior capacidade do EDTA para a desmineralizao dentinria, e o cido ctrico a menor. Outra tcnica utilizada foi a microscopia de ponta de prova, na qual, atravs de um microscpio de fora atmica (AFM), imagens do ataque cido in situ so capturadas. A anlise dessas
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imagens, ao contrrio da microdureza, demonstraram efeitos agressivos do cido ctrico na superfcie dentinria e maior capacidade de desmineralizao em relao ao EDTA. Outro procedimento importante utilizado nesse mesmo estudo foi o Processamento e Anlise Digital de Imagens (PADI). O PADI realizado atravs de softwares especializados que realizam operaes matemticas com os pixels das imagens digitais, com o objetivo de melhorar a sua qualidade e extrair as informaes quantitativas de interesse. Assim, medies complicadas podem ser realizadas com alta preciso e rapidez, o que representa um grande progresso nas anlises quantitativas de imagens microscpicas. Contudo, as imagens obtidas pelo AFM apresentaram algumas distores que dificultaram esse tipo de anlise. Na ltima dcada, o desenvolvimento de hardware e software para computao tem contribudo para as grandes mudanas observadas na caracterizao microestrutural de materiais. A Microscopia Digital a integrao entre um microscpio e um computador para captura digital de imagens, automao do microscpio e processamento e anlise de digital de imagens. Em um caso particular dessa tcnica, chamado de microscopia co-localizada, uma coleo de imagens de uma amostra obtida em um grande nmero de posies nos eixos x-y, em diferentes tempos experimentais. No intervalo de cada tempo experimental a amostra pode ser removida do microscpio para a realizao de

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qualquer tipo de modificao na sua superfcie. Assim, as mudanas na amostra podem ser acompanhadas atravs do tempo para as mesmas posies x,y, fornecendo avaliao um carter longitudinal. O presente estudo surgiu com o propsito de utilizar a microscopia digital co-localizada para avaliar o efeito das substncias quelantes sobre a dentina, tendo em vista a contradio existente na literatura sobre esse tema.

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