BIOENSAYO DE TOXICIDAD EN Artemia salina L.

Basurto Alcntara Abigail, Prez Vallejo Guadalupe, Reyes Garca Lucero, Reyes Prez Estela, Tllez Sols Claudia Gabriela, Equipo: 1, # Prctica: 6
Laboratorio de Farmacologa L-202, Facultad de Estudios Superiores Zaragoza, UNAM. Av. Guelatao 66, Col. Ejrcito de Oriente, 09230, Mxico D.F.

Resumen . Para determinar el efecto de la CL50 de las distintas sustancias (acetato de plomo 1%,dicromato de potasio 1 %,Tiocianato de potasio 1 %,Nicotina 3%,etanol 42 %, nitrato de plata 1%) sobre un numero de individuos se realizo un bioensayo en Artemias Salinas L., las cuales tenan 48 hrs de vida tras una previa incubacin de huevecillos liofilizados, para administrar la concentracin de cada sustancia se colocaron de 6 a 10 nauplios para cada tubo de ensayo ( 11 tubos), en los diferentes tubos los nauplios fueron expuestos a diferentes concentracin da cada sustancia, despus de 2 horas de exposicin a las diferentes sustancias toxicas se realizo un conteo de los nauplios vivos y muertos para calcular p ( nmeros de individuos en los que se presento el efecto) y as con las concentraciones graficar %E Vs Log D, y por el mtodo Probit calcular CL50 de cada sustancia ad ministrada. De acuerdo a los resultados obtenidos se llego a la conclusin de que la CL50 del cloruro de mercurio fue 3.16 g/mL. La sustancia con mayor efecto letal fue dicromato de potasio al 1% y la que menor efecto presento fue el etanol al 42% . Abstract. To determine the effect of the LC50 of the various substances (lead acetate 1% 1% potassium dichromate, potassium thiocyanate 1% 3% Nicotine, ethanol 42%, 1% silver nitrate) over a number of individuals Artemia bioassay conducted a L. Salinas, which had 48 hrs of life after a prior incubation of eggs lyophilized, to manage the concentration of each substance were placed 6-10 nauplii for each test tube (11 tubes), in the different tubes nauplii were exposed to different concentration gives each substance, after 2 hours of exposure to various toxic substances was made a count of live and dead nauplii to calculate p (number of individuals in which the effect is present) and well with the concentrations plotted% E Vs Log D, and by the Probit method calculate LC50 of each substance ad ministered. According to the results the conclusion was reached that the LC50 of mercuric chloride was 3.16 g / mL. The substance most lethal effect was potassium dichromate 1% and less effect that was present at 42% ethanol. Introduccin Se define como txico a toda sustancia que puede producir algn efecto nocivo sobre un ser vivo, alterando sus equilibrios vitales, y toxicologa a la ciencia que estudia las sustancias qumicas y los agentes fsicos (cuanto son capaces de producir alteraciones patolgicas) a los seres vivos. Los bioensayos de toxicidad involucran la exposicin de organismos a una serie de diferentes concentraciones de la sustancia y determinando la respuesta del organismo, que usualmente depende de la especie y el tipo de prueba, y puede incluir una reduccin del crecimiento o supervivencia. Caractersticas de la artemia salina: crustceos de pequeo tamao llegan a alcanzar 10-15 mm en etapa adulta. Longevidad. Menos de un ao, sus huevos pueden permanecer metablicamente inactivos durante largos perodos (quistes). Se alimentan de fitoplancton, la hembra adulta posee un ovisaco en el que incuba de 10 a 30 huevecillos generalmente. . Objetivo: Determinar la CL50 y la potencia relativa del cloruro de mercurio(II) y del sulfato de plata por medio del bioensayo en Artemia salina L. para determinar el grado de toxicidad de los mismos en el sistema de la prueba. Hiptesis: Tomando en cuenta que una sustancia es mas toxica a menor cantidad, se espera que las sustancias utilizadas para la prueba tengan los siguientes resultados de manera decreciente: Acetato de plomo (CH3COOPb), Dicromato de potasio (K2Cr2O7) , Tiocianato de potasio (KSCN), Nicotina 3% y Etanol 42% (ETOH). Metodologa
Se coloco volumen de agua de mar artificial necesario para completar volumen total de 2 mL. Incubacin de huevecillos Se coloco 10 nauplios de Artemia por cada tubo de ensaye, evitando agregar demasiada agua de mar. Preparacin de agua de mar artificial Se realizaron las pruebas con: Montaje de dispositivo de incubacin Acetato de plomo, Dicromato de potasio, Tiocianato de potasio, Nicotina 3% y Etanol 42%. Al trmino se contaron los nauplios de Artemia salina L. que sobrevivieron. Se observo el movimiento de los organismos por 120 minutos.

Resultados

Resultados Curvas logartmicas de % de efectividad VS log de dosis

Sustancia Acetato de plomo 1% Dicromato de potasio 1% Tiocianato de potasio 1% Nicotina 3% Etanol 42% Nitrato de plata 1% Cloruro de plata

CL50 (g/mL) 7.94 2.45 5.12 11.22 75.85 3.31 3.16

Potencia relativa (Pr) 2.51 0.77 1.62 3.55 24 1.04 ---

Anlisis de resultados En la grafica se puede observar que la sustancia con mayor efecto letal es el dicromato de potasio, ya que con menor cantidad de reactivo se logra acabar con el 50% de la poblacin y de manera ms rpida, en comparacin con el etanol al 42%, que requiere una cantidad mucho mayor para lograr el mismo efecto. La CL50 del cloruro de mercurio fue 3.16 g/mL. Debido a que la potencia relativa es la relacin de la dosis requerida de dos sustancias para lograr el mismo efecto, se puede decir que, tomando en cuenta que el estndar fue cloruro de mercurio, entre mas se acerque el valor a 0, menor cantidad de sustancia analizada ser utlizada para producir el mismo efecto letal que el cloruro de mercurio Conclusin La CL50 del cloruro de mercurio fue 3.16 g/mL. La sustancia con mayor efecto letal fue dicromato de potasio al 1% y la que menor efecto presento fue el etanol al 42% . Bibliografa Katzung B. farmacologa bsica y clnica. 9 edicin. El manual moderno. Mxico. 2005. Senz Desire. Principios de Farmacologa General y Administracin de Farmacos. Ed.CEUC. 1993. Flores J. Farmacologa Humana 3 edicin. Masson Editores, Espaa. 1998.

Se consideraron: Vivos, presentaron movimiento. Muertos que permanecieron inmviles

Incubacin de 24 horas. Aprox 26-28 C

Se coloco el vol. de disolucin de prueba en cada tubo ya marcado.