Coloration de Gram

1 But : Bactries Caractristiques de structure Comportement lgard de ractif ou de colorant Violet de Gentiane Lugol Gram positif Paroi paisse qui ne contient pas ou peu de lipide. Paroi impermable lalcool. Gram ngatif Paroi plus fine contenant des lipides. -

Ethanol

Fuschine

Rsultat 2 Technique :

Le violet se fixe dans la bactrie sur un constituant du cytoplasme et engendre un complexe violet. Cytoplasme color en violet. Le Lugol favorise, renforce la stabilit du complexe. Cytoplasme est violet fonc. La paroi des Gram + ne contenant Les lipides de la membrane externe pas de lipides est impermable de la paroi sont solubles dans lalcool. lalcool. La paroi est donc Cytoplasme reste violet. fragilise. Cytoplasme est dcolor. La Fuschine est sans action sur Le colorant de contraste peut agir. ces bactries. Cytoplasme color en rose. Cytoplasme reste violet. Bactrie colore en violet Bactrie colore en rose

Faire un frottis des bactries sur une lame propre et sche ; Scher le frottis ; Fixer lalcool puis rincer leau, ou la flamme en passant trois fois dans la flamme (ou au-dessus du bec) ; Colorer au Violet de Gentiane pendant 30 secondes ; Recouvrir la lame de Lugol 3 fois 10 secondes ; Faire couler lthanol sur la lame jusqu dcoloration ; Rincer leau distille ; Contre colorer la Fuschine phnole pendant 15 secondes. Rincer leau distille ; Scher le frottis.

http://www.arnobio2.com

Arnaud Delahaye

3 Observation de la prparation : Observer le frottis limmersion (objectif 100).

4 Rsultat : Il faut noter la forme, la taille et le mode de groupement. Il faut aussi observer attentivement le cytoplasme : coloration homogne ou htrogne.

http://www.arnobio2.com

Arnaud Delahaye