Bioenergtica e Reaces RedoxMitocondriais

Respirao Celular
Constituintes e caracterizao da cadeia mitocondrial de transporte de electres

Cadeia Respiratria
Mecanismos de transporte de electres na Mitocndria Fosforilao oxidativa

Oxi-redues com e sem oxignio Formas activas de oxignio Sistema de proteco celular anti-oxidante
Realizado no mbito da unidade curricular de Metabolismo e Endocrinologia do Curso de MEBM (2Ano)por: Grupo 2 Andr Zamith, n58556 Eduardo Bicacro, n58615 Pedro teixeira , n58482

 As clulas do organismo humano necessitam de energia para realizar as funes que permitem a sustentabilidade da vida. A fosforilao oxidativa o culminar de um processo de obteno de energia realizado pelos organismos - a respirao celular aerbia.

A fosforilao oxidativa tem lugar na matriz mitocondrial.

Mitocndria
na matriz que ocorre o Ciclo de Krebs em eucariotas. Membrana externa permevel maioria das pequenas molculas e ies. Membrana interna pouco permevel (canais transportadores especficos).

Resumo dos eventos at concluso da fosforilao oxidativa

Molculas altamente energticas (passveis de serem oxidadas)
Fluxo de electres na cadeia mitocondrial (reaces redox) Liberta (r. exergnica)

ENERGIA

Energia armazenada sob a forma de potencial electroqumico

Movimento de protes atravs da membrana interna mitocondrial

consumida (r. endergnica)

Sntese ATP

(Teoria quimiosmtica Peter Mitchell, 1961)

Constituintes da Cadeia Mitocondrial de transporte de Electres

Desidrogenase
uma Oxirredutase. Enzima que oxida um substrato, transferindo um ou mais protes e um par de electres para um aceitador.
Desidrogenase

Existem diferentes tipos de molcula aceitadora que intervm neste tipo de reaco, que seguidamente se apresentam.

2e- + H+

NAD+ e NADP +
NAD Nicotinamida-adenina-dinucletido (estrutra com 2 nucletidos nicotinamida e adenina). So coenzimas de desidrogenases.

(Grupo fosfato no caso de NADP+)

FMN e FAD
D-se o nome de Flavoprotenas s desidrogenases com coenzima FAD ou FMN FMN flavina-mononucletido FAD flavina-adenina-dinucletido

Ribitol FMN FAD

Centro reactivo

FAD + 2H++ 2e-FADH2

O potencial de reduo padro do nucletido de flavina depende da protena a que est associado. (interaces que este estabelece com ela)

Coenzima Q10
uma benzoquinona solvel em lpidos (consegue movimentar-se no interior da bicamada fosfolipdica). Pode aceitar um electro, tornando-se o radical semiquinona. Se aceitar outro, denomina-se ubiquinol. Consegue transportar protes e electres.

Citocromo
Protena com um grupo prostticoheme (com Fe). Estado Oxidado Fe3+ ; Estado Reduzido Fe2+ Mitocndrias tm 3 tipos de citocromo: a, b e c. Os diferentes tipos so distinguidos tendo em conta os comprimentos de onda de mxima absoro de luz.

 Os grupos heme a e b esto fortemente ligados parte proteica do citocromo. O heme c, est ligado covalentemente atravs de dois resduos de Cistena.

4 anis azotados numa estrutura cclica - porfirina

Protenas Fe-S
O ferro surge associado a protenas, mas no em grupos heme. A associao feita atravs de tomos de enxofre orgnicos, inorgnicos ou atravs de ambos os tipos. Como os citocromos, participam em transferncias de apenas um electro.

Complexosda Cadeia Mitocondrial de transporte de Electres

(changepresenter)

Cadeia Respiratria:
Cadeiade transporte de electres na Mitocndria FosforilaoOxidativa

Cadeia de transporte de electres na Mitocndria

A transferncia de electres da molcula dadora (NADH) at aceitadora (O2), um processo globalmente exergnico que ocorre atravs de uma srie de reaces redox intermdias. Este facto revela-se muito favorvel do ponto de vista energtico.
Potenciais de Reduo Padro dos Transportadores Electrnicos

(determinados experimentalmente)

Balanos Energticos

NADH EO=-0.320V

O2 EO=0.8166V

Electres no sentido de potenciais crescentes

E0 =1.1366

G0 = -nFE0

Representao esquemtica da cadeia de transporte electrnico

UQ Ubiquinona Cytc Citocromo C IMM Membrana Mitocondrial Interna

Setas pretas so as transferncias de electres

Elementos dadoresde electres com alta energia

NADH

Cadeia de transporte de electres para o oxignio

Relembrar Ciclo de Krebs...

Complexo I - NADH: quinona-oxidorredutase

(EC 1.6.5.3) ; 850kDa ; 43 subunidades proteicas

Complexo I
Catalisa a oxidao do NADH e a reduo da coenzima Q a Ubquinol.

Componentes: Flavoprotena-FMN. Minimo 6 centros Fe-S

Reaces Exergnicas:

Reaco Endergnica:
4H+ in 4H+out

Reaco total do complexo I

NADH + CoQ + 5H+ in NAD+ + CoQH2 + 4H+out

Vias de reduo da Ubiquinona

Complexo II - succinatodesidrogenase
(EC 1.3.5.1) ; 140 kDa ; 4 subunidades proteicas

Complexo II
Catalisa a oxidao do Succinato e a reduo da coenzima Q.

Componentes: Flavoproteina-FAD ; Subunidades C e D so protenas integradas com No ocorre bombeamento Protnico neste complexo grupos heme; Proteinas de Fe-S Reaces Exergnicas:

Reaco total do complexo II

Succinato + CoQ Fumarato + CoQH2

Complexo III ubiquinona:citocromocoxirredutase

(EC 1.10.2.2) ; 250 kDa ; 11 subunidades proteicas

Complexo III
Catalisa a oxidao doUbiquinole a reduo do Citocromoc.

Componentes: Citocromob e c1 Grupos heme Protenas Fe-S

Reaces Exergnicas:

Reaco Endergnica:

4H+ in 4H+out

Reaco total do complexo I

QH2 + 2 cytochrome c1 (FeIII) + 2 H+in Q + 2 cytochrome c1 (FeII) + 4 H+out

Complexo IV - citocromocoxidase
(EC 1.9.3.1) ; 160kDa ; 13 subunidades proteicas

Complexo IV
Catalisa a oxidao do citocromoc e a reduo do Oxignio a gua.

Componentes: CuA (centro binuclear de Cu) Citocromo a Centro binuclear Citocromo a3-CuB
Reaces Exergnicas:

Reaco Endergnica: Reaco total do complexo I

4 Cit-c (reduzido) + 8 H+in+ O2 4 Cit-c (oxidado) + 2 H2O + 4 H+out
4H+in 4 H+out

Quanta energia se conseguiu armazenar?

G0 = -nFE0=-220kJ/mol (de NADH) Fora motriz protnica devido ao gradiente de concentrao e potencial da membrana.

= 20kJ/mol (de H+)

200kJ/10mol (de H+) Grande parte da energia foi armazenada. Permite a sintese de ATP

FosforilaoOxidativa
ATP Sintase
ATPases enzimas que efectuam transporte activo (com gasto de ATP);

Quando funcionam de forma inversa so denominadas ATP sintases;

Domnios: F0 e F1
Poro integrada Subunidades: a;b;c Poro perifrica Subunidades: ;;;

FosforilaoOxidativa
ATP Sintase
Como realizada a sntese?
Junto superfcie da poro F1 a reao ADP+P ocorre quase espontaneamente. O que requere energia a quebra da ligao que se estabelece entre a enzima e a ATP formada. O mecanismo funciona por mudanas conformacionais das subunidades .

(changepresenter)

Transporte de Electes (Grande Eficcia) Contudo h uma percentagem que no se liga premanentemente ao Oxignio

Resulta na formao de formas activas de oxignio

Formas activas de oxignio Sistema de proteco celular anti-oxidante

Formas Activas de oxignio

(Reactive oxygenspecies ROS) OxignioMolecular (Grande Poder Oxidante)
Ideal Aceitador de Electres para a Cadeia

Embora: Transferncia de 4 electres e 4 protes reduza o oxignio em gua (Inofensivo) Durante esse processo ocorre: Transferncia de 1 ou 2 electres para produzir um superxido e perxido, respectivamente (Potencialmente perigoso)

Estas espcies reactivas de oxignio e os seus produtos de reaco (Ex:radical Hidroxilo), so muito perigosas para as celulas. Estas leses celulares podem contribuir para o desencadear de doenas.

Formas activas de oxignio

ROS

ROS ies de oxignio radicais livres perxidos

Geralmente pequenas molculas altamente reactivas devido presena de pares de electres de valncia desemparelhados.

Formao das ROS

As formas activas de oxignio so formadas por : - interaco de radiao ionizada com molculas - enzimas especficas para o efeito em clulas fagocticas (por ex.: macrfagos) - produto indesejado da respirao celular. 1-4% do oxignio que reage com a cadeia respiratria sofre uma reduo incompleta, originando ROS; A mitocndria o principal produtor de ROS; O io superxido frequentemente formado quando uma molcula de O2 prematura e incompletamente reduzida .

As zonas mais vulnerveis so o complexo I e complexo III Todo o Ciclo Q tambm uma das principais fontes de ROS

(Complexo I)

Superxido

HO2 (forma especialmente reactiva)

Efeitos prejudiciais das ROS

- Danos no DNA - Oxidaes de cidos gordos poli insaturados - Oxidaes de aminocidos em protenas. - Oxidao de co-factores - Esta, alm de produtora, um alvo destes mesmo ROSs que vo interferir no mDNA.

Sistemas de Proteco Celular

As clulas apresentam uma variedade de defesas contra os efeitos nocivos das ROS.
Reagem com oxidantes no citoplasma e plasma sanguneo

Enzimas : -Superxidodismutase (SOD) -Catalase -Ascorbatoperoxidase

Antioxidantes : -Vitamina C -cido rico -Glutatio -Vitamina E -Ubiquinol

Hidrfilo Hidrofbico

Proteco das membranas celulares da peroxidao lipdica

Aco Enzimtica

SuperxidoDismutase
M(n+1)+ SOD + O2 Mn+ SOD + O2 Mn+ SOD + O2 + 2H+ M(n+1)+ SOD + H2O2

M = Cu (n=1) ; Mn (n=2) ; Fe (n=2) ; Ni (n=2) Consoante o tipo de Dismutase

Catalase

2 H2O2 2 H2O + O2

A caracterstica importante a reter elevada velocidade de converso

Aco Antioxidante
Capaz de atrasar ou prevenir a oxidao de outras molculas Remoo de radicais livres e inibio de oxidaes oxidando-se a si prprio.

Vitamina C (ascorbato)
a coenzima da ascorbatoperoxidase. Ascorbate + Hydrogenperoxide Dehydroascorbate + Water C6H8O6 + H2O2 C6H6O6 + 2 H2O

cido rico
Aproximadamente metade da capacidade antioxidante do plasma sanguneo. Forte capacidade de doar electres.

Glutatio
Tripptido sintetizado no fgado. Presente na maioria das clulas (reservas prprias da mitocndria e ncleo) 2 estados oxidao defesa antioxidante importante para os organitos.

Cadeia mitocondrial de transporte electrnico (mecanismos de defesa inerentes)

Voltar Slide Comlexo II

ROS: aco benfica

ROS (pequenas quantidades) Sinalizao celular Recrutamento de plaquetas migrao de plaquetas para o local da ruptura (sinalizao oxidativa) Sistema imunitrio Mobilizao de sistemas de transporte inico

Stress oxidativo

Sumrio geral
Respirao Celular
Constituintes e caracterizao da cadeia mitocondrial de transporte de electres

Cadeia Respiratria
Mecanismos de transporte de electres na Mitocndria
Fosforilao oxidativa

Oxi-redues com e sem oxignio Formas activas de oxignio Sistema de proteco celular anti-oxidante

Bibliografia
(Bioenergtica e reaces redoxmitocondriais)

InteractiveAnimationaboutOxidativePhosp Nelson DL; Cox MM (Apr 2005). horylation LehningerPrinciplesofBiochemistry, 4th http://www.wiley.com/legacy/college/boyer/0470003790/animations/elec ed, W. H. Freeman tron_transport/electron_transport.htm Harper'sIllustratedBiochemistry Nicholls DG; Ferguson SJ (Jul 2002). (Murray, Mcgraw-Hill Medic, 26th ed Bioenergetics 3. AcademicPress. Lus S. Campos, Entender a Matill HA (1947). Antioxidants. Bioquimica AnnuRevBiochem 16: 177192 Seco Voet D; Voet JG (Mar 2004). Biochemistry, MetabolicPathwaysofBiochemistry da 3rd ed, Wiley George Washington University Lectures Antony Crofts, 1996, Lodish - Molecular CellBiology 5th UniversityofIllinoisatUrbana-Champaign Oxford DictionaryofBiochemistryand LecturesBioquimica e Biologia Molecular Molecular Biology Instituto Superior Tcnico CellBiologyAnimations fromtheinstitute John Kyrk InteractiveConceptsof Biochimestry Realizado no mbito da Willy internet website unidade curricular de Metabolismo e Endocrinologia do Curso de MEBM (2Ano)por: Grupo 2 Andr Zamith, n58556 Eduardo Bicacro, n58615 Pedro teixeira , n58482

http://www.johnkyrk.com/mitochondrion.html