______________________________________________________________________ RESUMO: Com o objetivo de fazer um estudo da enzima amiloglicosidase, analisou-se o comportamento desta, em relao aos fatores que

influenciam a velocidade de reao enzimtica. Sendo estes: a temperatura, ph, concentrao de enzima e substrato, assim obteve-se um meio de timo de atuao. Considerando-se a temperatura, a velocidade de reao aumentou at atingir um ponto timo, 55C, e posteriormente declinou. O mesmo comportamento foi observado para o ph, obtendo-se maior velocidade de catlise enzimtica no ph 5,0. Em relao concentrao de substrato, elevou-se a velocidade, at que todos os stios ativos estivessem ligados a este, e a partir deste ponto estabilizou-se. O mesmo foi observado para a concentrao enzimtica, estabilizou-se a atividade da amiliglicosidase aps todo o substrato disponvel no meio, estar ligado ao stio ativo. Portanto, a enzima teve um comportamento padro, esperado pela literatura. ______________________________________________________________________ INTRODUO: Enzimas so protenas que catalisam reaes biolgicas, baixando a energia de ativao necessria pra que se d a reao, acelerando o tempo de ocorrncia desta. Na catlise de uma reao qumica, as enzimas interagem com os substratos, formando com eles, temporariamente, o chamado complexo enzima-substrato. Esses locais de encaixe so chamados de stio ativos e ficam na superfcie da enzima. Ao se encaixarem nos stios ativos, os substratos ficam prximos um do outro e podem reagir mais facilmente. Assim que ocorre a reao qumica com os substratos, desfaz-se o complexo enzima-substrato. Liberam-se os produtos e a enzima volta a atrair novos substratos para a formao de outros complexos. A ligao entre o substrato e o stio ativo muito precisa lembrando a relao existente entre uma fechadura e sua respectiva chave. Existem alguns fatores que influenciam na velocidade de uma reao enzimtica, e por meio deles pode-se fazer um estudo do meio timo de atuao de cada enzima. Estes fatores so: ph, temperatura, concentrao de substrato, concentrao de enzima, dentre outros. Considerando a temperatura, seu aumento provoca maior agitao das molculas e, portanto, maiores possibilidades de elas se chocarem para reagir. Porm, se for ultrapassada certa temperatura, a agitao das molculas se torna to intensa que as ligaes que estabilizam a estrutura espacial da enzima se rompem e ela se desnatura. Em relao ao ph, cada enzima possui uma um ph timo de atuao em que a atividade de reao mxima, depois, essa atividade declina rapidamente. Isso ocorre por que a estrutura tridimensional das enzimas se rompe, impossibilitando-a de formar o complexo enzima-substrato. Concentrao de enzimas e substrato, esto relacionadas quantidade de soluto e de solvente de uma substncia. Se aumentar a concentrao de reagentes, aumenta o nmero de molculas dos reagentes, aumentando o nmero de colises e aumentando tambm a velocidade da reao. Sendo a amiloglicosidase, a

enzima que libera como produto unidades de glicose, e possui elevada importncia industrial.

Este trabalho tem por objetivo fazer um estudo da enzima amiloglicosidase, analisando os fatores que influenciam na velocidade da catlise enzimtica.

RESULTADOS: A atividade da amiloglicosidase foi medida utilizando um espectrofotmetro, medindo a absorbncia a 510nm. A partir desses dados, utilizando a equao Y= 0,005x-0,0105, obteve-se a concentrao de glicose. Os resultados encontram-se expostos nos grficos abaixo:

Figura1: Curva de glicose em funo do ph.

Figura 2: Curva de glicose em funo da temperatura.

Figura 3: Curva de glicose em funo da concentrao de enzima.

Figura 4: Curva de glicose em funo da concentrao de substrato.

Analisando-se os grficos, evidente que para todos os fatores, onde a concentrao de glicose foi maior, a enzima teve sua atividade mxima, porque ela fez a quebra do amido, resultando em glicose. Considerando-se primeiramente a temperatura, a

atividade mxima se deu em torno de 55C, depois foi declinando. Quanto mais calor, mais agitadas ficam as molculas. Se aumentar a temperatura, aumenta a energia cintica das molculas. Se as molculas se movimentam mais, elas se chocam mais

e com mais energia, diminuindo a energia de ativao e em conseqncia, aumenta o nmero de colises efetivas e, portanto a velocidade da reao tambm aumenta. Porm, aps essa faixa de temperatura tima que foi em torno de 55C, a enzima comea a sofrer o processo de desnaturao. Em se tratando do ph, a amiloglicosidase apresentou melhor desempenho em ph 5,0, o grfico teve o mesmo comportamento da temperatura. Nesse valor de ph timo, a distribuio de cargas eltricas da molcula da enzima e, em especial do stio cataltico, ideal para a catlise. Posteriormente a enzima sofreu desnaturao, esta consiste no rompimento das ligaes peptdicas ou perda das estruturas secundrias e tercirias, podendo ser reversveis ou no, j que provoca um re-arranjo da protena. Analisando a concentrao de substrato, sabe-se que a enzima liga-se

temporariamente ao substrato, formando o complexo enzima- substrato, posteriormente, libertam-se os produtos, da catlise enzimtica, mantendo-se a enzima inalterada. Observando-se o grfico, a atividade enzimtica aumentou at que todos os stios ativos da enzima estivessem ligados ao substrato onde a concentrao foi em torno de 1%, assim aumentando a quantidade de substrato no elevaria a catlise enzimtica. Posteriormente, os produtos so liberados e o substrato liga-se novamente ao stio ativo, estabilizando a velocidade da reao. Levando-se em conta a concentrao das molculas de enzimas, quanto maior o seu teor, maior ser a velocidade da reao, seguindo proporcionalmente a quantidade suficiente de substratos para reagir com as enzimas. Conforme a demanda no consumo de reagentes vai ocorrendo, a velocidade da reao decai gradativamente.

CONCLUSO: A partir das anlises feitas, conclui-se que a enzima amiloglicosidase teve um comportamento padro para enzima, justificado pela literatura, levando-se em conta os erros experimentais. Obteve-se assim conhecimento do meio de: ph, temperatura, concentrao de substrato e concentrao enzimtica onde a amiloglicosidase apresenta um melhor desempenho.