DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITO EN SANGRE. RECUENTO DE ERITROCITOS. 1.

INTRODUCCION La hemoglobina es una de las variables de mayor importancia dentro de la biometra hemtica, se mide en gramos por decilitro (g/dL), lo que representa la cantidad de esta protena por unidad de volumen. Sus cifras normales o de referencia son variables, y dependen de la edad, sexo, raza, altitud sobre el nivel del mar (snm) del lugar de residencia, ocupacin, entre otras variables1. Algunos autores, refieren que el nivel de hemoglobina sangunea define la existencia de anemia, y que slo en presencia de valores inferiores a los parmetros normales puede aseverarse la presencia de esta enfermedad. Sin embargo, existen algunos tipos de anemia en los que exi ste hemoglobina normal como la presente en el choque hipovolmico.1 Las diferencias raciales son importantes al hablar de cifras de hemoglobina; los individuos afroamericanos clnicamente sanos presentan concentraciones

inferiores cuando se les compara con sujetos de raza blanca. Esta diferencia se atribuy inicialmente a dietas deficientes en hierro2; sin embargo, eventualmente se descubri que las personas de raza negra poseen niveles sricos de

transferrina ms elevados en comparacin con las de raza blanca, lo que se traduce en concentraciones menores de hemoglobina3. Sobre la influencia de la edad, se ha demostrado que el nivel de hemoglobina sangunea aumenta desde la infancia hacia la adolescencia4, y que la concentracin de hemoglobina puede ser normal en adultos mayores que presentan anemia clnica, esto debido a alteraciones hepticas propias del envejecimiento5. Por otra parte, el hematocrito, que expresa el porcentaje aproximado que representa el volumen de clulas dentro del volumen de sangre, es otra variable de la biometra hemtica que ayuda a definir el estado de salud de una persona, y

al igual que la hemoglobina, sus cifras estn influenciadas por la edad, el sexo y la geografa, entre otras variables5. En cuanto al recuento de hemates (nmero de hemates/ mm3) tambin constituye uno de los ndices eritrocitarios primarios empleados para evaluar la normalidad, anemia o policitemia de un paciente.6 En diversos estudios se ha establecido que este parmetro presenta variaciones entre las personas, es as que los hombres presentan un recuento eritrocitario mayor que el de las mujeres,7 el promedio del recuento eritrocitario va disminuyendo con la edad hasta los 20 aos en donde estabiliza, tambin se muestran variaciones en funcin al rea geogrfica en donde se realice el estudio.8

2. RESUMEN En el presente trabajo se realiz la toma de muestras de sangre venosa de dos estudiantes de medicina de cuarto ao, y se analiz los niveles de hemoglobina y hematocrito en sangre, y el posterior recuento de eritrocitos. 3. PROBLEMA Existe diferencias en el valor de hemoglobina, hematocrito y en el recuento de eritrocitos de dos alumnos de diferente sexo que cursan el cuarto ao de

medicina en la facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo? 4. HIPTESIS:

S existen diferencias en el valor de hemoglobina, hematocrito y en el recuento de eritrocitos de dos alumnos de diferente sexo que cursan el cuarto ao de

medicina en la facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.

5. OBJETIVOS: Objetivo General: o Determinar las diferencias en el valor de hemoglobina, hematocrito y en el recuento de eritrocitos de dos alumnos de diferente sexo que cursan el cuarto ao de medicina en la facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo. Objetivo Especficos: o Realizar de manera correcta la toma de muestras de sangre venosa. o Realiza de manera correcta el clculo de la hemoglobina y hematocrito. o Realizar de manera correcta el recuento de eritrocitos en sangre.

6. MATERIALES Y EQUIPOS: Jebe ltex tubular. Guantes descartables

Agujas N 21.

 Algodn.

Camara de Neubauer, para recuento de eritrocitos.

Alcohol iodado.

Boquillas

Frascos

pequeos

con Microscopio

anticoagulante (EDTA).

Tubos de ensaye 13x100 Micropipeta Gradilla y tubos de ensayo

 Espectrofotmetro.

Capilares para hematocrito.

Tabla

para

lectura

de

hematocrito.

7. METODOS: Extraccin de sangre venosa: 1. Tener listo materiales a utilizar (aguja, guantes, jebe, etc.). 2. Desinfectar con alcohol el rea de puncin. 3. Realizar torniquete con el jebe de ltex en el brazo. 4. Palpar vena superficiales mayores para la puncin respectiva (donde la vena sea ms notoria). 5. Recoger la sangre en un frasco con EDTA. 6. Retirar el jebe. 7. Retirar aguja. 8. Colocar algodn con alcohol y pedir que se haga presin en ese lugar para evitar sangrado (en caso de que sea en antebrazo, flexionar). 9. Desechar materiales utilizados. 10. Etiquetar muestra. Determinacin de la Hemoglobina en sangre: Reactivo: o Bicarbonato de sodio: 1,0 gr. o Cianuro de K: o Ferricianuro de K: Muestra: o Sangre venosa con antigoagulante (EDTA) Procedimiento: En un tubo de prueba se coloc el reactivo (5ml) y la sangre (medida con la micropipeta 0,02ml). Se enjuago bien la boquilla utilizada con la solucin reactiva varias veces (aspirando y expulsando). Se mezcl bien y se dej en repodo de 5 a 10 minutos, luego se ley en el espectrofotmetro a 540mm, usando el mismo reactivo como blanco de lectura. Se tom datos de la hemoglobina en sangre de ambos estudiantes. 0,05gr. 0,2 gr.

o Agua destilada C.S.P: 1,000ml

Determinacin del hematocrito: Muestra o Sangre venosa con EDTA. Procedimiento: o Se mezcl bien la muestra de sangre con EDTA, luego se llen el tubo capilar con sangre hasta las tres cuartas partes, mediante la accin capilar, luego se sell el extremo seco del tubo con plastilina. o Se coloc los tubos capilares en las ranuras de la microcentrifuga, se centrifugo durante 5 minutos a 10,000RPM, luego se ley en la escala para hematocrito. Lectura: o En un lector de hematocrito (escala), se alineo la base de la sangre del tubo capilar en la columna cero de la escala y la parte superior del menisco del plasma con el 100 de la escala, se ley la columna de glbulos rojos, y el resultado se expres en porcentaje (%) Recuento de eritrocitos: Procedimiento: o Se diluyo la sangre 1/20 con un lquido que hemoliza los glbulos blancos y no altera los glbulos rojos, luego con la micropipeta y una boquilla se recogi 10 microlitros de esta mezcla, y se hizo caer una gota en la cmara de Neubauer para el recuento posterior de los eritrocitos. Anexo 1. o Se us un microscopio con el objetivo en 10X para la lectura. o El procedimiento de lectura de la cmara se muestra en el anexo 2.

Valores normales: HEMOGLOBINA - Adulto: a) mujeres: 12-16 g/100 mL. b) hombres: 13-17 g/100 mL Gestante: > 11 g/100 ml Nios. De acuerdo a Edad

HEMATOCRITO Adulto: a) mujeres: 36-46%. b) hombres: 39-52% Gestante: >33 % Nios: Segn edad

HEMATIES - Adulto: a) mujeres: 3,5 5,0 millones/mm3 b) hombres: 4.0 5,5 millones/mm3 - R/N: 5,0 - 6,5 millones/mm3

8. RESULTADOS Estudiante de sexo masculino Hemoglobina Hematocrito Recuento de Hemates Alumno (A) 14,7 gr/dl 45% 4.7 millones/ mm3. Alumna (B) 13.1 gr/dl 38% 4.3 millones/ mm3

9. DISCUSIN

Evaluando los ndices eritrocitarios primarios de los dos alumnos, en cuanto a su hemoglobina tanto de A cuya hemoglobina fue de 14,7 g/dl (valor anormal: 13-17) como de B cuya hemoglobina fue de 13.1 g/dl (valor normal: 12-16) se encuentra dentro del valor normal; Tambin se puede apreciar una mayor concentracin de hemoglobina en el alumno de sexo masculina (A), aunque esto no necesariamente siempre ocurre pero promedio general los hombres presentan un nivel de hemoglobina mayor que el de las mujeres.6.7

En cuanto al hematocrito, el alumno A tubo 45 %(39-52 %) y la alumna B tubo 38 % (36-46 %), el hematocrito de ambos alumno est dentro del rango normal. Tambin se puede apreciar un mayor nivel de hematocrito en el alumno de sexo masculino.6.7

Al evaluar el recuento de hemates, encontramos que el alumno a tubo 4,7 millones/mm3 (4- 5.5 millones/mm3) y la alumna B tubo 4.3 millones/mm3 (3.5-5millones / mm3), en ambos casos los valores se encuentran dentro de los lmites normales.6.7

Evaluando los ndices eritrocitarios secundarios, encontramos que la hemoglobina corpuscular media (HCM) del alumno A fue de 31,28 pg (30 +-3 pg) y de la alumna B fue de 30,46 pg (30 +- 3 pg), en ambos casos los valores estn dentro del rango normal, mostrndose los eritrocitos normocrmicos.8.9

En cuanto al volumen corpuscular medio (VCM) en el alumno A fue de 95,74 fl (90 +-8 fl) y en la alumna B fue de 88,37 fl (90+-8 fl), en ambos casos los valores estn dentro del rango normal, mostrndose los eritrocitos normocticos.8.9

Por ltimo se evalu la concentracin media de hemoglobina corpuscular (CMHC) la cual en el alumno A fue de 32, 67% (33+-2%) y en la alumna B fue de 34,47% (33+-2%).8.9 Entendindose la anemia como un sndrome y como tal involucra mltiples causas, los parmetros evaluados nos permiten descartar diversos tipos de anemias entre ellas por deficiencia de hierro o B12, aplasia medular, esferocitosis hereditaria, hemoltica megaloblstica, entre otras, pero sin embargo en algunas de estas causas se requieren otros exmenes auxiliares para confirmalos.6.9

BIBLIOGRAFIA 1. Ruiz-Argelles GJ. Fundamentos de Hematologa. 3a Ed. Editorial Panamericana. Mxico D.F., Mxico. 2004. Pp.45. 2. Beutler E, West C. Hematologic differences between African-Americans and whites: the roles of iron deficiency and alpha-thalassemia on hemoglobin levels and mean corpuscular volume. Blood 2005;15(2):7405. 5. Perry GS, Byers T, Yip R., Margen S. Iron nutrition does not account for the hemoglobin differences between blacks and whites. J Nutr 1992;122(7):1417-24. 3. Bao W, Dalferes ER Jr, Srinivasan SR, Webber LS, Berenson GS. Normative distribution of complete blood count from early childhoos through adolescence: the Bogalusa Heart Study. Prev Med 1993;22(6):825-37. 4. Eisenstaedt R, Penninx BW, Woodman RC. Anemia in the elderly: Current understanding and emerging concepts. Blood Reviews 2006;20(4):213-26. 5. Secretara de Salud. Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993 Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos. Mxico D.F., Mxico. Diario Oficial de la Federacin. 1994. P.p.10. 6. Carlos Amalguer Gaona, Interpretacin Clnica de la Biometra Hemtica, Medicina Universitaria, 2003; 5(18):35-40. 7. R. Hurtado Monroy, Y. Mellado Ortiz, G. Flores Rico et al, Semiologa de la Citometra Hemtica, Revista de la Facultad de Medicina de la UNAM, Vol. 53, N.o 4. Julio-Agosto 2010. 8. Pablo Daz Piedra, Gabriela Olay Fuentes, Ricardo Hernndez Gmez, R Daniel Cervantes- Villagrana, Jos Miguel Presno-Bernal, Luz Elena, Alcntara Gmez, Determinacin de los intervalos de referencia de biometra hemtica en poblacin mexicana, Rev Latinoamer Patol Clin, Vol. 59, Nm. 4, pp 243-250 Octubre - Diciembre, 2012. 9. T.L.C. Sara E. Cambero Martnez, Manual de prcticas de laboratorio Biometra Hemtica, CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial y de Servicios No. 41

ANEXOS ANEXO 1

ANEXO 2