LAS ENZIMAS

PROF. MIGUEL SANDOVAL VEGAS.

LAS ENZIMAS

Son protenas especficas que actan como catalizadores biolgicos

Caractersticas: Funcionan en cantidades muy pequeas Permanecen inalteradas despus de actuar en la reaccin qumica No alteran el equilibrio de reaccin

LAS ENZIMAS

Por ejemplo:

Una reaccin esencial en los animales es la transferencia del bixido de carbono, que se produce en las clulas, al torrente circulatorio y de aqu a los pulmones para su eliminacin. En este proceso interviene una de las enzimas ms veloces que se conocen, la anhidrasa carbnica; cada molcula de enzima cataliza la produccin de 600,000 molculas de cido carbnico por segundo; esta reaccin es unas 107 veces ms rpida que la no catalizada.

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CINTICA ENZIMTICA

Mecanismo de accin enzimtica

producto formado por unidad de tiempo. Tal variacin se debe a la disminucin de la energa de activacin Ea; en una reaccin qumica, la Ea es la energa

Una enzima, por s misma, no puede llevar a cabo una reaccin, su funcin es modificar la velocidad de la reaccin, entendindose como tal la cantidad de

necesaria para convertir los reactivos en formas moleculares inestables denominadas especies en estado de transicin, que poseen mayor energa libre que los reactivos y los productos

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MODELOS DE UNION E-S

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MODELO CINTICO DE MICHAELIS-MENTEN

Los estudios sistemticos del efecto de la concentracin inical del sustrato sobre la actividad enzimtica comenzaron a realizarse a finales del siglo XIX. Ya en 1882 se introdujo el concepto del complejo enzima-sustrato como intermediario del proceso de catlisis enzimtica. En 1913, Leonor Michaelis y Maud Menten desarrollaron la teora del efecto de la concentracin inical del sustrato sobre la actividad enzimtica y propusieron una ecuacin de velocidad que explica el comportamiento cintico de los enzimas.

MODELO CINTICO DE MICHAELIS-MENTEN

Este modelo cintico adopta la hiptesis del estado estacionario, segn la cual la concentracin del complejo enzimasustrato es pequea y constante a lo largo de la reaccin (Figura de la derecha). Por tanto, la velocidad de formacin del complejo enzima-sustrato (v1) es igual a la de su disociacin (v2+ v3): v1 = v2 + v3 Adems, como [ES] es constante, la velocidad de formacin de los productos es constante: v = v3 = k3 [ES] = constante

MODELO CINTICO DE MICHAELIS-MENTEN

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KM es la concentracin de sustrato para la cual la velocidad de reaccin es la mitad de la velocidad mxima. En efecto, si KM = [S], la ecuacin de Michaelis-Menten se reduce a: v = Vmax/2. El valor de KM da idea de la afinidad del enzima por el sustrato: A menor KM, mayor afinidad del enzima por el sustrato, y a mayor KM, menor afinidad

LAS ENZIMAS, representacin de Lineweaver-Burk

Para determinar grficamente los valores de KM y Vmax es ms sencillo utilizar la representacin doble recproca (1/v0 frente a 1/[S]0), ya que es una lnea recta. Esta representacin doble recproca recibe el nombre de representacin de Lineweaver-Burk

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ACTIVIDAD ENZIMTICA

Se define la unidad de actividad enzimtica (U) como la cantidad de enzima que cataliza la conversin de 1 mol de sustrato en un minuto. La actividad especfica es el nmero de unidades de enzima por miligramo de protena (U/mg prot) o por mililitro de disolucin (U/ml).

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ACTIVIDAD ENZIMTICA
Recientemente, el Sistema Internacional de unidades (SI) ha definido la unidad de actividad enzimtica como la cantidad de enzima que transforma 1 mol de sustrato por segundo. Esta unidad se llama katal (kat). Como 1 mol son 106 moles y 1 minuto son 60 segundos, resulta que 1 katal equivale a 60 x 106 U. Esta unidad es muy grande, de forma que se utilizan frecuentemente los submltiplos como el microkatal (kat, 10-6 kat) o el nanokatal (nkat, 10-9 kat).

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Sitio cataltico de la beta glicosidasa

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No todas las enzimas son michaelianas

Hay enzimas que no obedecen la ecuacin de Michaelis-Menten. Se dice que su cintica no es Michaeliana. Esto ocurre con los enzimas alostricos, cuya grfica v frente a [S] no es una hiprbola, sino una sigmoide. En la cintica sigmoidea, pequeas variaciones en la [S] en una zona crtica (cercana a la KM) se traduce en grandes variaciones en la velocidad de reaccin

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Acompaantes no proteicos de las enzimas

Mg

Acompaantes no proteicos de las enzimas

COFACTORES: son iones inorgnicos que se unen temporariamente a las enzimas

molcula papel en la reaccin catalizada

Hierro Fe 2+ o Fe 3+
Cobre, Cu + o Cu 2+ Cinc, Zn2+

Oxidacin / reduccin
Oxidacin / reduccin Ayuda a unir el NAD

Acompaantes no proteicos de las enzimas

COENZIMAS:

molculas pequeas que tiene carbono, interaccionan dbilmente durante la catlisis. La mayor parte de las coenzimas son vitaminas, muchas de las cuales deben ser incorporadas con la dieta.

molcula Biotina Coenzima A NAD y FAD

papel en la reaccin catalizada transporta -COOtransporta -CH2-CH3 transportan electrones

Acompaantes no proteicos de las enzimas

GRUPOS PROSTETICOS: estn permanentemente unidos a las enzimas

molcula
Hemo Flavina

papel en la reaccin catalizada une iones O2 y electrones, contiene el cofactor hierro

Une electrones Cofactor en la absorcin de la luz

Retinal

EFECTO DE LOS INHIBIDORES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

INHIBICION COMPETITIVA

EFECTO DE LOS INHIBIDORES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Inhibidor no competitivo

El gas nervioso ejerce su efecto letal al unirse con la enzima ACETILCOLINESTERASA, que es la encargada de disociar la molcula de ACETILCOLINA para su posterior sntesis. Este proceso no se puede llevar a cabo sin la primera disociacin y sus consecuencias son trgicas. Al no poder ser sintetizada, la Acetilcolina comienza a acumularse en los centros de transmisin, como entre neuronas, ganglios, uniones neuromusculares, impidiendo la transmisin de ordenes a los msculos tanto de accin voluntaria como de accin involuntaria.

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EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Los enzimas poseen grupos qumicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos. Segn el pH del medio, estos grupos pueden tener carga elctrica positiva, negativa o neutra. Como la conformacin de las protenas depende, en parte, de sus cargas elctricas, habr un pH en el cual la conformacin ser la ms adecuada para la actividad cataltica

MODULACIN ALOSTRICA DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Activador alostrico: favorece la unin del sustrato

MODULACIN ALOSTRICA DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Inhibidor alostrico: impide la unin del sustrato

EFECTO DE LA MODIFICACIN COVALENTE SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Otros enzimas pasan de una forma menos activa a otra ms activa unindose covalentemente a un grupo qumico de pequeo tamao como el Pi o el AMP.

EFECTO DE LA MODIFICACIN COVALENTE SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

ACTIVACIN PROTEOLTICA DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA Algunos enzimas no se sintetizan como tales, sino como protenas precursoras sin actividad enzimtica. Estas protenas se llaman proenzimas o zimgenos. Para activarse, los zimgenos sufren un ataque hidroltico que origina la liberacin de uno o varios pptidos. El resto de la molcula proteica adopta la conformacin y las propiedades del enzima activo

ACTIVACIN PROTEOLTICA DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Las enzimas son protenas altamente especializadas que tienen como funcin la catlisis o regulacin de la velocidad de las reacciones qumicas que se llevan a cabo en los seres vivos.

TAREA ACADEMICA: Averiguar cmo se clasifican de las enzimas

Prof. MIGUEL SANDOVAL VEGAS