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Elaborado por: M.C. Jos Gerardo Alejandro Ceballos Corona M.C. Mara del Rosario Ortega Murillo M.C.

Reyna Alvarado Villanueva Bil. Juan Diego Snchez Heredia M.C. Alejandra Snchez Trejo Bil. Marbella Arredondo Ojeda M.C. Rubn Hernndez Morales Bil. Sandy Fabiola Andrade Hernndez Bil. Patricia Herrera Hernndez
Morelia, Michoacn, Febrero del 2012

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CONTENIDO INTRODUCCIN ......................................................................................................................... 1 PRCTICA N 1 EL PROCESO DE LA INVESTIGACIN CIENTFICA .............................. 3 PRCTICA N 2 SISTEMTICA Y TAXONOMA ................................................................. 24 PRCTICA N 3 CONOCIMIENTOS BSICOS DE MICROSCOPA Y MORFOLOGA GENERAL DE LOS PROTISTA ...................................................................................................... 41 PRCTICA N 4 COLECTA, FIJACIN Y PRESERVACIN DE PROTISTAS DULCEACUCOLAS .................................................................................................................. 70 PRCTICA N 5 COLECTA, FIJACIN Y PRESERVACIN DE PROTISTAS MARINOS .78 PRCTICA No 6 PROTOZOOS ASOCIADOS SARCOMASTIGOPHOREA (flagelados y sarcodinos) .................................................................................................................................... 88 PRCTICA N 7 PROTOZOOS ASOCIADOS (Esporozoarios) ............................................... 95 PRCTICA N 8 PROTOZOOS ASOCIADOS (Opalnidos) .................................................... 98 PRCTICA N 9 CRYPTOPHYTA (Criptomnidos) ............................................................... 100 PRCTICA N 10 DYNOPHYTA (Dinoflagelados) ................................................................ 103 PRCTICA N 11 HETEROCONTOFCEAS: TRIBOFCEAS ...................... 109 PRCTICA N 12 HETEROCONTOFCEAS: CRISOFCEAS (algas doradas) y DICTYOCHOPHYCEAE (silicoflagelados) ............................................................................. 112 PRCTICA N 13 HETEROCONTOFCEAS: BACILARIOFCEAS (Diatomeas centrales) ..................................................................................................................................................... 116 PRCTICA N 14 HETEROCONTOFCEAS: BACILARIOFCEAS (Diatomeas pennales) ..................................................................................................................................................... 121 PRCTICA N 15 HAPTOFCEAS (Cocolitofridos) ............................................................. 126 PRCTICA N 16 EUGLENOFCEAS (euglenas) ................................................................... 130 PRCTICA N 17 PROTOZOOS SARCODINOS (de vida libre dulceacucolas y marinos) .. 134 PRCTICA No 18 PROTOZOOS CILIADOS (de vida libre dulceacucolas y marinos) ........ 140 BIBLIOGRAFA ........................................................................................................................ 147

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INTRODUCCIN La observacin de los microorganismos inicia con la construccin del primer microscopio por los europeos, en particular Anton van Leeuwenhoek fue el primero en observar a los protozoos a quienes llamo animalnculos por lo cual se le considera como el padre de la Protozoologa y que junto con De Jussieu (padre de la ficologa), abrieron un campo no imaginado por los cientficos de su poca. La controversia de considerar a los microorganismos unicelulares eucariticos como vegetales o animales dur mucho tiempo. Ya desde el siglo antepasado se consideraron ms de cinco reinos para tratar de explicar y sistematizar la enorme biodiversidad del planeta, sin embargo, en la dcada de los 70 del siglo pasado, Wittaker y Margulis son quines le dan mayor fuerza a esta propuesta; ubicando en particular a los unicelulares eucariticos en el Reino Protista, an cuando este fue concebido por Heckel a finales del siglo XIX. El avance en los inventos y mejoramiento de la microscopa, ha permitido tener una visin ms amplia del mundo microscpico, es emocionante colocar una gota de agua de cualquier charco bajo el microscopio y darnos cuenta de la gran cantidad de organismos que conviven en ella. El presente tiene una doble finalidad, primero es una gua para el trabajo de campo y laboratorio con la perspectiva de apoyar el proyecto de investigacin que los alumnos se propongan, y en segundo lugar que el alumno cuente con una orientacin en forma de notas para estudiar. El aporte y asesora de investigadores externos a la UMSNH, ha sido un factor de suma relevancia, ya que ellos fueron quienes nos iniciaron y alentaron para el estudio de los protistas, vaya pues un reconocimiento a las Doctoras Angela Catalina Mendoza Gonzlez, Luz Elena Mateo Cid y la Q.B.P. Laura Huerta Mzquiz (Q.E.P.D), del Instituto Politcnico Nacional, as como al Dr. David Uriel Hernndez Becerril del Instituto de Biologa de la UNAM y a los Bilogos Luz del Socorro Rodrguez Jimnez, Jos L. Magaa Mendoza y Ana Isabel Reza de nuestra Facultad de Biologa.

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PRCTICA N 1 EL PROCESO DE LA INVESTIGACIN CIENTFICA 1. INTRODUCCIN La investigacin cientfica no es exclusivamente de nuestro siglo, ya que se remonta a los tiempos de Galileo quin utiliz lo que se llam por mucho tiempo, "Mtodo Cientfico". La Investigacin Cientfica es un procedimiento que utilizan las personas de ciencias para comprobar hiptesis, solucionar problemas, formular teoras, etc. La metodologa de la investigacin cientfica, en la actualidad, es una asociacin de conocimientos slidos a partir de lo generado a lo largo de muchos siglos de prctica. A diferencia de otros grupos de conocimientos que se hallan en permanente evolucin, la metodologa de la investigacin, por ser la herramienta para desarrollar el conocimiento, es ms bien estable, convencional con criterios estandarizados y cruzados que permiten que la ciencia sea comunicable en diferentes campos disciplinares, contextos y regiones del planeta. Es el idioma universal de la ciencia que posibilita el avance en todos los campos, el intercambio y transferencia de tecnologa, el consenso y el trabajo multidisciplinario, por lo cual se convierte en esencial para el avance del conocimiento. La investigacin, en trminos operativos, orienta al investigador en su razonamiento y aproximacin a la realidad, ordena sus acciones y aporta criterios de rigor cientfico de supervisin de todo el proceso. El proyecto de investigacin debe situar las bases de la investigacin a realizar, su valor se establece en la medida en que tiene plena claridad y concrecin en las razones para analizar el objeto de estudio elegido, la perspectiva terica desde donde se sita el investigador, el tema elegido para investigar y que sustenta todo el estudio y, por tanto, la metodologa de aproximacin a la realidad: poblacin, muestra, estrategias de bsqueda de la informacin, tcnicas de anlisis de los resultados generados y temporalidad de todo el proceso. En suma, el documento demuestra que el estudioso conoce suficientemente el tema de investigacin y tiene las ideas claras sobre la estructura del proceso y el camino por el que pretende aportar al conocimiento cientfico. Para realizar tu proyecto debers emplear el mtodo cientfico. Este es la herramienta que usan los bilogos y cientficos en general para encontrar las respuestas a sus interrogantes. Antes de empezar tu proyecto, es conveniente repasar los pasos de este mtodo de investigacin, que te presentaremos de manera muy simplificada: Observar e investigar. Plantearse una pregunta o problema. (S especfico) Establecer una hiptesis, lo que es una posible respuesta a la pregunta. Realizar la investigacin necesaria, esto es experimentar, recopilar datos, buscar informacin. Llegar a una conclusin, que compruebe o rechace tu hiptesis. El mtodo cientfico es un proceso dinmico, que requiere observar todo el tiempo, buscar informacin continuamente y planificar experimentos para demostrar tu hiptesis.

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No vayas a pensar que es un capricho de tus profesores (as) que aprendas el mtodo cientfico. Los cientficos lo usan hoy en da ms que nunca. La razn es que los grandes proyectos investigativos se hacen en instituciones y universidades en forma multidisciplinaria, involucrando una gran cantidad de cientficos de diferentes pases y de diferentes especialidades. Para que todos puedan colaborar juntos con eficiencia necesitan un mtodo sistemtico. Antes de comenzar con tu proyecto es conveniente verificar los siguientes pasos, de manera que puedas tener claridad y ests organizado: GUA PARA INICIAR EL PROCESO DE INVESTIGACIN 1. Qu quiero investigar, descubrir o comprobar?, Este es el tema. 2. Por qu quiero indagar o experimentar sobre este tema?, Justificacin e importancia. 3. De qu manera o por qu ocurre o se produce el fenmeno que deseo investigar?, Problema Se plantea una pregunta para formularlo, Qu? Por qu? 4. Para qu quiero investigar?, Objetivo 5. Qu explicacin o respuesta podra tener el problema planteado?, Hiptesis 6. Qu se ha escrito y cmo se ha enfocado en los libros, las revistas, artculos en Internet o los peridicos sobre este tema?, Marco terico, marco de referencia o antecedentes. 7. Qu debo hacer para lograr realizar este descubrimiento o esta investigacin?, Metodologa o procedimiento 8. Dnde voy a hacer la investigacin?, rea o lugar 9. Cundo la voy a realizar?, Es el cronograma. El perodo de tiempo. 10. Qu materiales se necesitan para realizar este experimento o investigacin?, Materiales 11. Qu descubrimos despus de realizar el experimento o la investigacin?, Resultados (Discusin Esquemas, Grficos Modelos) 12. Qu fuentes consult para informarme sobre el tema? Libros, Revistas y otros, Bibliografa 13. Quines vamos a realizarla?, El equipo humano 14. Dnde voy a presentar los resultados?, Lugar de exposicin 15. De qu manera voy a presentar la informacin?, Informe escrito, modelo experimental,
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ponencia oral, cartel, etc. Para adentrarse en el tema es necesario conocer los estudios, investigaciones y trabajos anteriores. Conocer lo que se ha hecho con respecto a un tema ayuda a: No investigar sobre algn tema que ya ha sido estudiado muy a fondo. Estructurar ms formalmente la idea de investigacin. La eleccin del tema para el proyecto, deber de estar sustentada en una investigacin de tipo bibliogrfico y electrnico, para este caso, necesitamos conocer que se ha hecho sobre los protistas microalgales y protozoos en Mxico y en particular en Michoacn. FORMULACIN DE LOS ANTECEDENTES Todo hecho anterior a la formulacin del problema que sirve para aclarar, juzgar e interpretar el problema planteado, constituye los antecedentes del problema. Establecer los antecedentes, de ninguna manera es hacer un recuento histrico del mismo, o presentar fuentes bibliogrficas que se van a utilizar, o los datos recolectados que no sabemos en dnde ubicar, o la descripcin de las causas del problema, a no ser que la investigacin sea causal. En los antecedentes se trata de hacer una sntesis conceptual de las investigaciones o trabajos realizados sobre el problema formulado, con el fin de determinar el enfoque metodolgico de la misma investigacin. El antecedente puede indicar conclusiones existentes en torno al problema planteado. En la presentacin de antecedentes se busca aprovechar las teoras existentes sobre el problema con el fin de estructurar el marco metodolgico. Debe estar en funcin del problema y ser un medio seguro para lograr los objetivos del mismo. Antecedentes que no hayan sido trabajados mediante algn tipo de relacin con el problema, son sobrantes. Consultando antecedentes libramos el riesgo de investigar lo que ya est hecho.
Un dato aislado frecuentemente es infructuoso. Una vez detectado el problema a investigar es necesario revisar los escritos sobre el tema, o sobre otros muy ligados a l, lo cual puede ampliar el panorama o afirmar las dudas respecto a los antecedentes. Despus de consultarlos es conveniente hacer un resumen de los datos recolectados a fin de tenerlos al alcance cuando sea necesario. Si no se resumen se corre el riesgo de olvidar lo aportado por cada autor; si no se consulta la obra de otros investigadores se corre el riesgo de repetir investigaciones o buscar soluciones ya encontradas. (Arias Galicia)

Una forma para darle orden a nuestra investigacin de la informacin (bibliogrfica, electrnica, iconogrfica, etc.) y adems de la manera como debern presentarse los antecedentes, puede ser a partir de la ley del embudo (Fig. 1), en este sentido primero se abordarn aquellos trabajos de tipo general, para despus irse centrado a los de mayor relacin con el tema que se decidi En otras palabras, redactar utilizando una estructura lgica deductiva.

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LA INVESTIGACIN DE LA INFORMACIN

DE LO GENERAL

A LO PARTICULAR

Figura 1. Ley del embudo para presentar el orden de los antecedentes Obviamente todo trabajo consultado requiere de un resumen, los resmenes sirven para facilitar la retencin del material que has estudiado, ya que se asimila en sntesis los aspectos esenciales de cada tema. Adems te sirven para preparar tus exmenes, ya que con ellos puedes evaluar tu comprensin de los temas de estudio. Para realizar un resumen debes haber ledo previamente el material y haber comprendido, de manera tal que puedas expresarlo con tus propias palabras o puedas ligar las frases que usa el autor de manera adecuada. La elaboracin de un resumen implica algunos pasos que facilitarn su redaccin: Elimina el material innecesario o secundario Esto quiere decir que descartes aquellas frases que te sirvieron para comprender la idea principal de un prrafo, pero que ahora puedes prescindir de ellas y dejar solo la idea principal. Elimina el material importante pero redundante. Este material es el que se repite o abunda en la idea principal Encuentra trminos generales que incluyan varios objetos similares. Esto quiere decir que tendrs que encontrar una o varias palabras para utilizarlas en lugar de objetos con caractersticas comunes. Sustituye una serie de eventos o sucesos por un trmino ms general que los incluya. Es similar al paso anterior solo que aplicado a acciones o situaciones. Identifica la oracin tpico.

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La oracin tpico es aquella en la que se expone el tema central, la idea ms importante de la que se trata un prrafo. La puedes encontrar al inicio, al final o en medio de un prrafo. Frecuentemente tendrs que localizar dentro del prrafo datos, hechos o personajes que aparezcan separados, para despus ligarlos y as formar oraciones tpico. Si no encuentras una oracin tpico Elabora una! Es importante que captes la esencia del o los prrafos para luego expresarlas con tus propias palabras. Siempre debes conservar la idea original del escrito. Para elaborar un resumen puedes elegir uno o todos los pasos que te sean convenientes. RECUERDA QUE: LA PRCTICA HACE AL MAESTRO, AS QUE MIENTRAS MS RESMENES HAGAS, MEJORAR TU HABILIDAD PARA REDACTARLOS Y NOTARS RESULTADOS MUY PRONTO EN TU APRENDIZAJE Para el caso de la elaboracin de los resmenes, en la investigacin biolgica, es necesario que consideres los siguientes aspectos adicionales a los arriba mencionados: Ubica el ttulo del documento a analizar. Lee el resumen que pudiera presentarse en los artculos a leer, normalmente las publicaciones cientficas exigen a los autores un resumen de su trabajo, sin embargo, este no es el resumen que tu vas a realizar, solamente es una gua para lo que llevaras a cabo posteriormente. Sita el o los objetivos del trabajo. Localiza el rea o lugar donde se realiz el trabajo. Ubica la metodologa que se utiliz para llevar a cabo la investigacin, la de campo, laboratorio y de gabinete que utilizaron para procesar los datos obtenidos. Analiza a detalle las figuras, grficos y tablas que contiene el documento y concatnalas con los objetivos y las posibles hiptesis. Examina las conclusiones y relacinalas con los objetivos e hiptesis planteados si es el caso Lo anterior nos lleva a considerar el papel que tienen la investigacin bibliogrfica, incluyendo la electrnica, para nuestro protocolo, esto nos obliga entonces a llevar una serie de citas en los prrafos que empleemos en la redaccin de nuestros antecedentes, lo cual nos permite acreditar cul fue nuestra fuente de informacin, todas estas referencias se plasmarn en un capitulo llamado literatura citada o bibliografa citada, donde se incluyen todos los elementos del autor (es), u otro tipo de fuente utilizado en la investigacin y preparacin del trabajo. La bibliografa consultada, la conforman los trabajos que han servido de apoyo al trabajo realizado y que pueden ser tiles para estudios posteriores o relacionados, y que adems, nos permiten analizar y discutir los resultados que obtengamos para poder establecer las posibles conclusiones. Se distinguen varios tipos de citas, entre ellas: Cita textual: Cuando se transcribe un texto literalmente. a) Si la cita tiene menos de 40 palabras, sta se coloca entre comillas a continuacin del prrafo que se est exponiendo, generalmente nos permite reforzar ideas que surgen del anlisis de resultados, es decir, en la discusin de estos.

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Ejemplo: En ambas localidades es notorio el valor de importancia de Akashiwo sanguinea, siendo ms alto en Boca de La Necesidad. En el primer caso es la biomasa de los individuos de esta especie la que le da el mayor valor a este ndice, en tanto que en el segundo es el nmero de individuos la que proporciona mayor peso al valor de importancia de la especie. De acuerdo a Krebs (1985) las especies dominantes de una comunidad efectan un gran control sobre las dems. stas se detectan fcilmente por su abundancia numrica o su biomasa. "... no existe una sola forma correcta de presentar un trabajo. ... Resulta difcil, al respecto, tratar de formular procedimientos o tcnicas que resuelvan esta tarea, pues no se trata de una actividad mecnica sino esencialmente creadora" (Sabino, 1986). b) Si la cita tiene 40 o ms palabras (cita larga), sta se escribe en una nueva lnea, como una nueva divisin; escriba todo el prrafo con una sangra de cinco puntos desde el margen izquierdo y termnela de igual manera hacia la derecha, siempre y cuando se trate de un prrafo extrado de un texto completo. Ejemplo: ..... La dominancia se produce cuando una o varias especies controlan las condiciones ambientales que influyen en las especies asociadas. Se dice que una especie es dominante cuando tiene una gran influencia sobre la composicin y forma de la comunidad, stas son de gran xito ecolgico y relativamente abundantes dentro de la comunidad (Krebs, 1985).... Cita contextual: Cuando se resume una parte especfica de un documento o del contenido del mismo. Ejemplo: Alvarado et al. (1996), a partir de muestras de fitoplancton de las playas de El Salto y El Naranjito del municipio de Aquila, Mich., durante una Marea Roja, detectaron que sta estuvo dominada por Ceratium tripos var. ponticum, seguida de Pyrodinium bahamense, sin embargo, no se pudo definir la toxicidad de la misma debido a la falta de anlisis de toxinas en otros organismos filtradores o en peces. Cita de cita: Cuando se hace referencia a citas mencionadas por otros autores. Corts (1994), alude al hecho de que a partir de los aos 80s el nmero de publicaciones sobre las mareas rojas, ha aumentado notablemente. Hace mencin de que se crea que no era el nmero de mareas rojas el que haba aumentado sino la cantidad de investigadores sobre el tema, sin embargo, el mismo se responde y analiza lo que ocurre en Mxico. Estima que para los noventas la carencia de informacin sobre MR era bastante considerable, en tanto que los reportes ms antiguos que se tenan eran los de Brongersma-Sanders de 1957, considerndolo como el reporte ms antiguo del sureste del Golfo de California; aunque si bien ya en 1878 se reportaba una decoloracin amarilla en las aguas del Golfo, y para 1937 Allen menciona la existencia de este fenmeno cerca de la Isla ngel de la

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Guardia, donde se observaron hasta 3 000 000 cls/l de Noctiluca scintillans; en la misma rea pero hacia 1939 Gilbert y Allen mencionan que el causante de la marea roja es Gymnodinium catenatum. NOTA CUIDADO NO DEBEMOS DE ABUSAR EL USO DE CITA DE CITA! La cita se puede redactar de tres maneras:

Con nfasis en el autor: Apellido del autor, el ao entre parntesis, el texto analizado.

Ejemplo: Alvarado y Ceballos (1997), reportan la primera mortalidad masiva de tortuga negra para el Pacfico Mexicano ocurrido en el invierno de 1995 en Tierra Colorada, Gro; en el mismo perodo ocurrieron episodios de marea roja en las costas de los estados de Guerrero (Baha Petacalco) y Michoacn (Playa Azul). Los mismos mencionan que aunque la evidencia es circunstancial, la coincidencia espacio-temporal entre estos dos eventos sugiere a la marea roja provocada por Pyrodinium bahamense var. compresa, como el agente causante de la mortalidad.

Con nfasis en el contenido del texto: El texto analizado y, entre parntesis, el apellido del autor y el ao.

Ejemplo: En mares tropicales y subtropicales es considerable la diversidad de especies de fitoplancton, especialmente de dinoflagelados, entre los que podemos encontrar formas muy vistosas. Esta condicin tambin se refleja en aguas del Pacfico Tropical Mexicano, donde se reporta un nmero de especies notablemente alto (Hernndez-Becerril, 1988).

Con nfasis en la fecha de publicacin: Es una narracin que comienza con el ao, luego el apellido del autor y el texto analizado.

Ejemplo: En 1988, Hernndez-Becerril, publica un documento donde menciona un estudio de 16 especies de dinoflagelados marinos procedentes de muestras recolectadas con red en diversos puntos del Pacfico Tropical Mexicano y Golfo de California. Las observaciones son hechas por medio de microscopio fotnico y MEB. Presenta referencias bsicas para la identificacin: medidas, microfotografas. Discutindose su posicin y relaciones taxonmicas. De los trece gneros estudiados, dos son monoespecficos (Acanthogonyaulax y Spiraulax).

Con nfasis en la fecha de realizacin de la investigacin: Es una narracin que comienza con el ao, luego el apellido del autor y el texto analizado.

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Ejemplo: En mayo del 2004, se estudia la composicin y estructura de los dinoflagelados nocivos en la costa de Michoacn, durante un evento de marea roja. Registrndose 132 especies y 7 variedades, solamente 19 especies y dos variedades se consideran potencialmente nocivas, entre las cuales se encuentran Alexandium catenella, Amylax triacantha, Gonyaulax polygramma, Gonyaulax spinifera y Linglodinium poyedrum. Se encontr que la temperatura di origen a este florecimiento provocando un aumento de nutrientes, favoreciendo el desquistamiento de dinoflagelados nocivos en la superficie, los resultados muestran que la comunidad se ordena por una correlacin inversa del oxgeno disuelto con las especies provocadoras del agotamiento del mismo, adems de la relacin inversa entre la abundancia de las especies nocivas con la salinidad y transparencia (Ceballos, 2006). NOTAS Cuando sean tres o ms autores, cite al primero y a los subsecuentes como "et al."; en la lista de referencias se mencionan todos los autores. Ejemplo: Ortiz et al. (1987), estimaron la diversidad y densidad fitoplanctnica de una marea roja ocasionada por Ceratium furca en la Baha de Manzanillo, Colima en junio de 1986, para lo cual establecieron seis estaciones de dos niveles cada una. Los resultados arrojan una biomasa poco elevada (315,142.0 cls/l en la estacin cuatro), de sta el 84.2 % corresponde a C. furca y en la estacin dos se localizaron 13,985 cls/l de las cuales C. furca solamente ocup el 2.0%, mientras que en la estacin seis se localizaron 5, 530, 000.0 cls/l, en sta, el porcentaje de C. furca fue de 95.58%. Si un mismo autor publica ms de un artculo en el mismo ao, entonces la cita de cada artculo, incluir a continuacin del ao de publicacin una letra minscula en orden sucesivo dependiendo del nmero de artculos publicados. Ejemplo: Hernndez-Becerril (1995a), durante 5 cruceros realizados en el aos de 1984, 1985 y 1986 en distintos meses, analiz la dominancia de los organismos pertenecientes a los gneros de Rhizosolenia, Proboscia, Pseudosolenia presentes en el Golfo de California. Hernndez-Becerril (1995b), en coordinacin con CONACYT realiz un crucero denominado CONACYT I a bordo del B/O El PUMA para determinar la abundancia de fitoplancton en base a la composicin de grupos concretos como lo son las diatomeas y los dinoflagelados, encontrando 216 diferentes taxa (especies, formas y variedades), entre las cuales se pueden mencionar algunas especies de diatomeas pertenecientes al gnero Rhizosolenia, como son: R. alata, R. bergonii, R. delicatula, R. hebetata, R. imbricata, R. robusta.

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Contextual especfica, manuscrito indito En el Pacfico Mexicano Ceratium divaricatum con su sinnimo de C. dens se ha reportado para el Golfo de California y la Baha de Mazatln, vinculada a mareas rojas, asocindola con posibles efectos de anoxia y obstruccin de branquias en peces; tambin se reporta como un componente de un florecimiento en Faro de Buceras, su presencia en mayo del 2004 fue notoria, tanto en la costa de Michoacn como en Colima y Jalisco, (Hernndez et al. Indito). Comunicaciones personales Una parte de la muestra (un litro) se fij con formol a una concentracin final de 1% (HernndezBecerril(1). Dos litros se trasladaron en hielo para su anlisis en vivo, todo el material fue transportado al laboratorio de Biologa Acutica Javier Alvarado Daz de la Facultad de Biologa de Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. _________________ (1) Com. Pers. Dr. D.U. Hernndez-Becerril, Laboratorio de Fitoplancton Marino, ICMyL, UNAM Citas para el anlisis cartogrfico Ejemplos: Hacia el sur se presenta una precipitacin mnima de 25 a 50 mm coincidiendo con la parte norte, en tanto que la precipitacin mxima en la parte sur es de 1000 a 1200 mm y en el norte va de 900 a 1000 mm, mientras que para el centro las precipitaciones mnimas son de 50 a 100 mm y las mximas de 900 mm a 1200 mm (INEGI, 1989). Para llevar a cabo la caracterizacin de las localidades se utilizaron las cartas 1:250,000: Geolgica, Hidrolgica y Edafolgica (INEGI, 1983), y la Topogrfica 1:250,000 (INEGI, 1997), adems de las cartas de caracteres geogrficos 1:224,000 Aquila y Lzaro Crdenas (Correa y Vargas, 1979; INEGI, 1985). NOTA Si diferentes cartas son publicadas el mismo ao, la cita de cada una, incluir a continuacin del ao de publicacin una letra minscula en orden sucesivo dependiendo del nmero de cartas publicadas. Ejemplo: De acuerdo a INEGI (1983a), la zona de estudio se ubica en la Provincia Fisiogrfica Sierra Madre del Sur y a la subprovincia Costa del Sur, el conjunto de sierras que integra esta subprovincia se extienden a lo largo de las costas michoacanas, guerrerenses y oaxaqueas, desde la desembocadura del Ro Coahuayana (limite entre Michoacn y Colima), hasta el puerto de Salina Cruz, Oaxaca.

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En la zona costera se pueden encontrar combinaciones de arenisca- conglomerado constituida por una secuencia detrtica de origen continental, formada por una alternancia de limonitas, areniscas, areniscas conglomerticas y conglomerados depositados en un ambiente fluviolacustre (INEGI, 1983b). Los suelos predominantes fuera de la lnea de playa son regosoles eutrcos con una fase fsica ltica y de textura gruesa, presentndose tambin litosoles, redzinas y en menor proporcin feozen hplico y regosol calcrico con fase textural media. En desembocaduras de ros y arroyos predominan fluvisoles eutrcos con fase textural gruesa (INEGI 1983c). Cita de un lugar en la red, pero no un documento especfico Altavista.com es un sitio que facilita el acceso al tema o informacin que usted necesite en internet (http:www.altavista.com) Cita de un lugar en la red, de un documento especfico Los corales se consideran las comunidades marinas ms diversas y complejas un arrecife puede albergar hasta 3.000 especies, y desempean un importante papel en el balance de masas geoqumica de los ocanos. Se ha calculado que, anualmente, los arrecifes de coral son responsables de la precipitacin de la mitad del calcio arrastrado a los ocanos por los ros y son especialmente importantes en el contexto del cambio climtico mundial (IPIECA 1992). Cita de programas de computadora Para la elaboracin de la clave dicotmica artificial se construy una matriz de datos morfolgicos a partir de la cual se gener un anlisis de agrupamiento cualitativo, mediante el software NTSYSpc v. 2.02c, los datos obtenidos a partir de esta comparacin se utilizaron para confrontar mediante la teora de conjuntos las posibilidades de agrupacin para la clave dicotmica. NO SABES QUE TEMA ESCOGER PARA TU PROYECTO? Aqu te presentamos algunas ideas que te pueden ayudar a seleccionar el tema de tu trabajo. Recuerda que lo ms importante es que te interese el tema. Busca algo que despierte tu curiosidad cientfica, auxliate de lo que el profesor (a) haya expuesto con respecto al tema a desarrollar. FICOFLORA Cuntas especies de microalgas existen en la costa?, Cul grupo de microalgas es dominante en la costa?, Existen diferencias en cuanto especies en toda la costa? ESTRUCTURA Y DISTRIBUCIN DE LA FICOFLORA Son las mismas especies en todos los sustratos en un mismo cuerpo de agua?

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Las especies de microalgas son diferentes en el medio marino a las localizadas en sistemas dulceacucolas o salobres adyacentes? Las especies de microalgas son indicadoras de particularidades ecolgicas (calidad del agua, perturbaciones, sucesin, etc.), en un mismo cuerpo de agua? Qu origen climtico tiene la ficoflora en la costa michoacana? RELACIONES DE CAUSA Y EFECTO Qu importancia tiene el hbitat en la presencia o ausencia de diferentes microalgas? Cul expresin filofentica de las microalgas es dominante en los diferentes cuerpos de agua? Influyen las condiciones ambientales en la expresin morfolgica de las microalgas? PROTOZOOLOGA Cuntas especies de protozoos existen en un cuerpo de agua? Cul grupo de protozoos es dominante en un cuerpo de agua? ESTRUCTURA Y DISTRIBUCIN DE LOS PROTOZOOS Existen diferencias en cuanto especies de protozoos entre un sistema marino y uno dulceacucola adyacente? Se distribuyen de igual manera todas las especies de protozoos en todos los cuerpos de agua estudiados? RELACIONES DE CAUSA Y EFECTO Las especies de protozoos son indicadoras de particularidades ecolgicas (calidad del agua, perturbaciones, sucesin, etc.), en un cuerpo de agua determinado? Qu importancia tiene el hbitat en la presencia o no de diferentes protozoos? Cul expresin morfolgica de los protozoos es dominante en los diferentes cuerpos de agua? Influyen las condiciones ambientales en la expresin morfolgica de los protozoos? Aade nuevas ideas o aspectos a otros trabajos investigativos y crea tu propio proyecto. Como vez, el cielo es el lmite, hay infinidad de cosas que investigar. Una vez que se ha planteado el problema, el investigador debe formular la hiptesis. Las hiptesis son las posibles explicaciones, soluciones, conjeturas que se formulan acerca del problema planteado. PLANTEAMIENTO DE PROBLEMAS Y FORMULACION DE HIPTESIS EN LA INVESTIGACIN CIENTFICA De la observacin directa o indirecta de un hecho o fenmeno pueden surgir ideas que llevan al investigador a plantear un problema.

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Para iniciar una investigacin cientfica es fundamental plantearse un problema, que es el cuestionamiento de una observacin, un hecho o un fenmeno. El problema puede formularse personalmente como una pregunta a la cual el investigador tratar de dar respuesta, despus de experimentar y comprobar los resultados. El problema debe ser claro, preciso y debe plantearse en trminos en que el proceso que se siga para su posible solucin, pueda ser: realizable, observable, medible y estar sujeto a comprobaciones repetidas. Una vez que tengas clara tu hiptesis debes definir la forma como la vas a demostrar. Tienes que disear un experimento en el que puedas probar tu hiptesis. Escribe en tu manual una descripcin paso a paso de lo que hars para investigar. Esto se conoce como Plan de Investigacin o Procedimiento Experimental. FORMULACION DE LOS OBJETIVOS EN LA INVESTIGACIN CIENTFICA Existen diversas concepciones acerca de los objetivos a continuacin te presentamos la que consideramos ms acorde y de fcil entendimiento de acuerdo a Tamayo y Tamayo: Cuando se ha seleccionado el tema de investigacin y se ha formulado el problema, debe procederse a formular los objetivos de la investigacin; que deben estar acordes con los del investigador y los de la investigacin. El objetivo de la investigacin es el enunciado claro y preciso de los propsitos por los cuales se lleva a cabo la investigacin. El objetivo del investigador es llegar a tomar decisiones y a desarrollar una teora que le permita generalizar y resolver en la misma forma problemas semejantes en el futuro. Todo trabajo de investigacin es evaluado por el logro de los objetivos de la investigacin. Los objetivos deben haber sido previamente formulados y seleccionados al comienzo de la investigacin. La evaluacin de la investigacin se realiza con base en los objetivos propuestos y puede ser progresiva; esto lleva a clasificar los distintos niveles de resultados que se quieren lograr en le investigacin. Si la investigacin es planeada cientficamente, debe tener validez en cada una de sus etapas, en razn de objetivos y el logro de ste en cada etapa es lo que permite pasar a la siguiente. Al final de la investigacin, los objetivos han de ser identificables con los resultados; es decir, toda la investigacin deber estar respondiendo a los objetivos propuestos. Los objetivos son fundamentales en la investigacin, ya que sin ellos es imposible decidir sobre los medios de realizacin de la misma. A partir del planteamiento del problema se comienza a dar respuesta al objetivo propuesto. El objetivo de una investigacin es lo que se ha de demostrar a partir de un problema o de la hiptesis propuesta, lo cual nos permite formular objetivos generales y especficos. Objetivo general Consiste en enunciar lo que se desea conocer, lo que se desea buscar y lo que se pretende realizar en

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la investigacin; es decir, el enunciado claro y preciso de las metas que se persiguen en la investigacin a realizar. Para el logro del objetivo general nos apoyamos en la formulacin de objetivos especficos. Un objetivo general puede enunciar varios resultados a lograr, lo importante es que su enunciado pueda ser diferenciado dentro del contexto total del enunciado del objetivo general. Objetivos especficos Los objetivos generales dan origen a objetivos especficos que son los que identifican las acciones que el investigador va a realizar para ir logrando dichos objetivos. Los objetivos especficos se van realizando en cada una de las etapas de la investigacin. Estos objetivos deben ser evaluados en cada paso para conocer los distintos niveles de resultados y se reflejan en la metodologa planteada. La suma de los objetivos especficos es igual al objetivo general y por tanto a los resultados esperados de la investigacin. Conviene anotar que los objetivos especficos son los que se investigan y no el objetivo general, ya que ste se logra con los resultados. El nmero de objetivos especficos depende de las acciones necesarias a realizar para el logro de un objetivo general, conviene no olvidar que para cada resultado enunciado en el objetivo general hay que establecer una gama de objetivos especficos que me permita su logro. Ms que el nmero de ellos, interesa interrogarnos si con esos enunciados de actividades puedo obtener el logro enunciado y as con cada uno de los resultados formulados en el objetivo general. Para una buena formulacin de objetivos conviene redactar todos los posibles enunciados que se tengan en mente, lo cual nos ayuda a pulir el o los objetivos hasta lograr el enunciado que responda a nuestro propsito. El enunciado de un objetivo consta de un conjunto de palabras, las cuales permiten varias combinaciones y hacen posible el logro de la expresin de un propsito determinado. En la combinacin de palabras o smbolos es necesario tener cuidado, pues se puede correr el riesgo de indicar con palabras una cosa diferente a lo que queremos expresar. Por tal razn, el enunciado oracional del objetivo debe responder a lo que el investigador tiene en mente como fin de la investigacin. En la redaccin de objetivos se requiere tomar en consideracin que hay palabras o smbolos con muchas interpretaciones e igualmente los hay que admiten pocas interpretaciones; por ello, se debe seleccionar la palabra o el verbo que ms convenga a su sentido de exactitud respecto a lo que se piensa. Otra caracterstica importante en la declaracin de un objetivo es que ste debe identificar el tipo de resultados concretos que se pretende lograr. Adems los objetivos deben sealar acciones relacionadas con las observaciones y descripciones de situaciones que el investigador est en capacidad de realizar y que no se salgan de sus posibilidades reales.

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A continuacin se presenta un ejemplo para la redaccin de los objetivos: Objetivo General Llevar a cabo un reconocimiento de microalgas en la playa de El Zapote de Madero, Mpio. de Aquila, Michoacn. Objetivos particulares Realizar el listado sistemtico de las especies del fitoplancton de la playa de El Zapote de Madero. Elaborar una lista comentada de las especies de microalgas del fitoplancton de la playa El Zapote de Madero, que contenga la descripcin morfomtrica y variables fisicoqumicas. Determinar la estructura de la comunidad microalgal en la playa El Zapote de Madero, considerando su abundancia, frecuencia, dominancia y valor de importancia. Definir la diversidad microalgal de la playa El Zapote de Madero LA CARACTERIZACIN DEL REA DE ESTUDIO Cuando el proyecto de investigacin est enfocado a trabajo de campo, es necesario que se haga una descripcin detallada del rea de estudio, cuyo principal sustento se encuentra primeramente en el anlisis cartogrfico, y posteriormente en la literatura especializada para el caso, incluso se puede utilizar como herramienta el programa de imgenes satelitales Google Earth, que se encuentra disponible en la red de manera gratuita. A continuacin se presenta una propuesta del contenido que deber de llevar sta unidad dentro del protocolo de investigacin: 5. CARACTERIZACIN DEL REA DE ESTUDIO 5.1. Localizacin Geogrfica 5.2. Fisiografa 5.3. Geologa 5.4. Edafologa 5.5. Hidrologa 5.5.1. Hidrologa Superficial 5.5.2. Variables Fisicoqumicas 5.5.3. Corrientes 5.5.4. Mareas 5.5.5. Transparencia 5.5.6. Temperatura 5.5.7. Salinidad 5.5.8. Oxigeno Disuelto y Nutrientes 5.6. Clima 5.7. Vegetacin 5.7.1. Fitoplancton Marino

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5.7.2. Algas Bnticas 5.7.3. Vegetacin Costera 5.8. Fauna 5.8.1. Zooplancton 5.8.2. Invertebrados Bentnicos 5.8.3. Vertebrados Marinos 5.9. Influencia Humana LA SECCIN DE MATERIALES Y MTODOS (Propuesta tomada de la Facultad de Biologa) No debe faltar en el proyecto de investigacin la unidad de Materiales y Mtodos, describindose en ella el material y equipo que se pretende utilizar en la investigacin. Tanto el equipo como los materiales deben describirse en conexin con la metodologa, evitando enumerarlos en una lista y correspondiendo a la solucin de cada uno de los objetivos especficos planteados. Si en la investigacin se har uso de varios experimentos que difieran en su metodologa, se sugiere que en esta seccin se describan los mtodos generales y las variaciones propias para cada experimento, refirindolas bajo el subttulo de Metodologa Particular en relacin a los objetivos con los que tiene relacin directa. Para la descripcin de los mtodos deben aplicarse las siguientes reglas: Cuando se trata de un proyecto que tiene relacin con investigacin en diferentes niveles, la metodologa corresponder a cada uno de ellos, por ejemplo: De Campo De Laboratorio De Gabinete Las sustancias tales como fertilizantes, insecticidas, frmacos, reactivos, colorantes, etc., no se citan por su nombre comercial sino por la sustancia qumica activa, segn la nomenclatura internacional. Las concentraciones que se usen se deben expresar como material activo. La maquinaria (tractores, bombas, etc.) se describe cuando sea necesario, pero sin incluir la marca comercial. No as el instrumental de precisin que deber incluir marca y modelo (microscopios, salinmetros, conductivmetros, etc.). Los mtodos de conocimiento general, como diseos experimentales y mtodos de anlisis muy comunes, se mencionarn sin, mayor descripcin indicando, si es el caso, una fuente para la informacin usada. El equipo comn que no se considere como de precisin o en el caso de que la utilizacin de equipo similar con marcas o modelos distintos no impliquen efectos sobre los resultados, no deber describirse con detalle y slo se mencionar. Si el mtodo es original o muy modificado, se describe tan ampliamente como sea necesario. Si el mtodo no es de conocimiento general, pero ya ha sido descrito por otro autor, se menciona y se har la cita bibliogrfica correspondiente.

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Todas las medidas deben darse segn el Sistema Mtrico Decimal (SMD), acorde al Sistema Internacional de Unidades (ISO 9000, 2006). Si se trata de una cita literal de trabajos, las medidas se dan tal como se encuentran en el trabajo citado, y a continuacin, entre parntesis, la equivalencia en el Sistema Mtrico Decimal. Para describir las unidades de medida se utilizarn los smbolos o abreviaturas internacionales. Para la escritura de nombres cientficos deben respetarse las reglas de nomenclatura establecidas en los cdigos internacionales correspondientes. LA SECCIN DE LITERATURA CITADA En ella debern presentarse solamente aquellas obras a las que se hace referencia en el texto. Se ordenarn siguiendo las normas que se anexan a continuacin: GUA PARA LAS CITAS BIBLIOGRFICAS EN UN TRABAJO DE ENSAYO (Tomado de la revista BIOLGICAS) Las normas para citar referencias bibliogrficas en el protocolo de investigacin sern las siguientes: De los autores Dependiendo del nmero de autores, las citas sern de la forma: Un autor: Carren A. Y. 2002. Estructura y funcin de la simbiosis micorrzica arbuscular. Ciencia Nicolaita (31): 65-74. Dos autores: Ceballos C., J.G.A. y S.P. Canedo Y. 1995. Anlisis del fitoplancton y su productividad en la Baha de Maruata, Michoacn Mxico. Biolgicas Rev. Fac. Biol. UMSNH (3): 3-19. Ms de dos autores: Lyons, J., S. Navarro-Prez, P. A. Cochran, E. Santana y M. Guzmn-Arroyo. 1995. Index of Biotic Integrity Based on Fish Assemblages or the Conservation of Streams and Rivers in WestCentral Mexico. Conservation Biology 3 (9): 569-584. Del tipo de publicacin Artculo proveniente de una revista peridica: Caso en que slo hay nmero y no hay volumen: Alvarado D., J. y G. Ceballos C. 1997. Mortalidad de tortuga negra en el Pacfico Mexicano: posible

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implicacin de la marea roja. Ciencia Nicolaita, Rev. Coord. Invest. Cient. UMSNH, Nm. 15, agosto: 77-82. Caso en que hay nmero y volumen: Alonso R., R., J. L. Ochoa and M. Uribe A. 2005b. Grazing of heterotrophic dinoflagellate Noctiluca scintillans (Mcartney) Kofoid on Gymnodinium catenatum Graham. Rev. Latinoam. Microbiol. 2005, 47(1-2): 6-10. Cita de un libro: Begon, M., J.L. Harper y C.R. Townsen. 1988. ECOLOGA Individuos, poblaciones y comunidades. Ediciones Omega,. S.A., Barcelona. XII+886. Brard-Therriault, L., M. Poulin and L. Boss. 1999. Guide deidentification du phytoplancton marin de lestuaire et du golfe du Saint-Laurent incluant galement certains protozoares. Publication spciale canadienne des sciences halieutiques et aquatiques 128, CNRC-NRC. XIII + 439. Cita de un captulo de un libro: Boltovskoy, A. 1995a. Taxonoma y Morfologa de los Dinoflagelados: Mtodos De Trabajo. En: Manual de Mtodos Ficolgicos. K. Aveal, M.E. Ferrario, E.C. Oliveira y E. Sar (eds.), Universidad de Concepcin, Concepcin-Chile: 55-82. Cita de un trabajo de ensayo: Ceballos C., J.G.A. 1988. Contribucin al Conocimiento de la Composicin y Distribucin del Fitoplancton de la Baha de Maruata, Michoacn, Mxico. Ensayo de Licenciatura, Escuela de Biologa, UMSNH, Mxico. 110 pp. Cita de un trabajo publicado en Memorias de eventos acadmicos: Ceballos C., J.G.A. 2002. Los Tintnnidos de la Provincia Nertica en el Pacfico Tropical de Mxico entre Guerrero y Jalisco, Un Grupo Poco Estudiado. XII Raunin Nacional de la Sociedad Mexicana de Planctologa y V International Meeting of the Mexican Society of Planktology: 39. Cita proveniente de una fuente en Internet Caso sin autor: Se cita como Annimo y se sigue el siguiente formato: Annimo. Ao. Ttulo del trabajo o de la pgina consultada. Direccin electrnica que permite acceder a la informacin (fecha de acceso). Anonymus. 2000. Environmental Management Branch. Phytoplankton Monitoring Program.

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Phytoplankton Monthly Report May. Technical Report No. 00-15. California Department Of Health Services 2151 Berkeley Way, Berkeley CA 94704-1011. www.cdph.ca.gov/healthinfo/environhealth/water/Documents/Shellfish/MonthlyandQuarterl yReports/2001/0104_06_MR_final.pdf. 27/01/2009. Si no se dispone del ao en que se cre el documento, debe ponerse s.f. (sin fecha). El ao debe corresponder a la fecha en que se hizo el trabajo, NO A LA QUE SE PUSO EN LNEA). Si la pgina es de una institucin, sta deber aparecer como autor. En todos los casos es importante poner la fecha de acceso al final de la cita. Caso con autora explcita: Se aplican las mismas reglas que para un documento impreso en papel, adicionando la direccin electrnica. Ejemplos: Zambrano A., I. 1983. Tintinnidos del Golfo de Guayaquil. Acta Oceanogrfica del Pacfico. INOCAR, Ecuador, 2 (2). www.inocar.mil.ec/download.php?uniqid=882&t=&id_exists=1. 27/01/2009. Molina-Astudillo, F.I.; H. Quiroz-Casteln; J. Garca-Rodrguez y M. Daz-Vargas. 2005 Distribucn vertical del plancton en un estanque rstico de produccin pisccola en el municipio de Cuautla, Morelos, Mxico (Vertical distribution of plankton in a rural fishery pond, Cuautla, Morelos, Mxico). Revista Electrnica de Veterinaria REDVET - ISSN 1695-7504 http://www.veterinaria.org/revistas/redvet Vol. VI, N 4, Abril 2005 http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040405.html. 27/01/2009. Nota: Si se consulta un artculo en su formato original, deber citarse como si fuera el original impreso y slo comentar en el texto que la consulta se hizo en Internet. Una vez que se haya terminado con la parte de procesamiento de muestras, se requiere de la presentacin de los resultados, para lo cual es necesario que lleves a cabo un anlisis de datos procesados y los cuales se tendrn que presentar en forma de un ensayo escrito, la estructura del mismo que se muestra a continuacin ha sido tomado del protocolo propuesto por la Facultad de Biologa: CUERPO DEL ENSAYO Portada Resumen 1. Introduccin 2. Antecedentes 3. Objetivos 3.1. Objetivo General 3.2. Objetivos Particulares

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4. Hiptesis 5. Caracterizacin del rea de estudio 5.1. Localizacin Geogrfica 5.2. Geologa 5.3. Hidrologa Superficial 5.4. Regionalizacin Oceanogrfica 5.5. Oceanografa 5.5.1. Batimetra 5.5.2. Corrientes 5.5.3. Mareas 5.5.4. Transparencia 5.5.5. Temperatura 5.5.6. Salinidad 5.5.7. Oxigeno Disuelto 5.5.8. Nutrientes 5.6. Clima 5.7. Vegetacin 5.7.1. Fitoplancton Marino 5.7.2. Algas Bentnicas 5.7.3. Vegetacin Costera 5.8. Fauna Acutica 5.8.1. Zooplancton 5.8.2. Macroinvertebrados Bentnicos 5.8.3. Vertebrados Marinos 5.9. Influencia Humana 6. Materiales y Mtodos 6.1. De campo 6.2. De Laboratorio 6.3. De Gabinete 7. Resultados y Discusin 8. Conclusiones 9. Literatura Citada El Resumen siempre forma parte del cuerpo de la ensayo, constituyendo un compendio del material en ella presentado. La extensin de este escrito no deber ir ms all de una pgina. No debe incluir tablas ni figuras, pero puede referirse a ellas. La Introduccin se considera el principio del cuerpo de la ensayo, y su primera pgina llevar el nmero 1, sealndose los dems a partir de sta, con numeracin corrida. La introduccin tiene por objeto explicar la idea general, propsito, importancia y alcance del trabajo desarrollado, con breves antecedentes si son necesarios, sin que se convierta en una revisin de bibliografa. La seccin de Antecedentes es una parte indispensable en la ensayo, como seccin aparte. Cierta informacin precisa (en algunos casos), puede citarse en relacin con los mtodos o con los

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resultados y discusin obtenidos. Fundamentalmente, en esta seccin se citarn los trabajos que han servido de base para la comprensin, planteamiento y desarrollo del trabajo. Se har referencia solamente a aquellos artculos, libros u otras fuentes relacionados directa y de manera importante con el tema, los objetivos y los mtodos empleados, evitando la mencin de generalidades y la referencia a artculos de divulgacin o textos elementales. El o los objetivos son indispensables en el escrito. Estos debern ser concisos e indicar claramente lo que se pretende investigar. Se evitarn aquellos objetivos muy generales que comprendan: Contribuciones al conocimiento...., colaborar en el proyecto..., Engrandecer la base de datos... , Enriquecer la coleccin ..., etc. Puede haber objetivo (s) general (es) y objetivos particulares. La hiptesis, en el proceso de investigacin es necesario tener una o ms hiptesis, segn el caso. Muchas veces la hiptesis est implcita en los objetivos y puede ser innecesario explicitarla; sin embargo, si a juicio del ensayota y su director de ensayo se considera importante escribirla, deber plantearse como una suposicin relacionada con los objetivos y que ser sometida a experimentacin y/o anlisis. Tambin deber ser muy concreta refirindose especficamente a aquello que se va a comprobar, de tal manera que en las conclusiones del trabajo se acepte o se rechace la hiptesis, particularmente en aquellos trabajos que impliquen un diseo experimental con trabajo de laboratorio o campo. La Seccin de Caracterizacin del rea de Estudio esta seccin corresponde a la descripcin del lugar donde se va a llevar a cabo el estudio, en la misma se deber de especificar detalladamente rubros como: localizacin geogrfica, descripcin ambiental, entre otros. Si el trabajo se lleva a cabo en laboratorio se puede obviar esta seccin y describir a detalle en la seccin de Materiales y Mtodos. La seccin de Materiales y Mtodos no debe faltar en la ensayo, describindose en ella el material y equipo usado y los mtodos seguidos en la investigacin; tanto el equipo como los materiales deben describirse en conexin con la metodologa, evitando enumerarlos en una lista. Si la ensayo describe varios experimentos que difieran en su metodologa, se sugiere que en esta seccin se describan los mtodos generales y las variaciones propias de cada experimento, refirindolas bajo el subttulo de Metodologa Particular en relacin a los objetivos con los que tiene relacin directa. Para la descripcin de los mtodos deben aplicarse las siguientes reglas: a) Las sustancias tales como fertilizantes, insecticidas, frmacos, etc., no se citan por su nombre comercial sino por la sustancia qumica activa, segn la nomenclatura internacional. Las concentraciones que se usen se deben expresar como material activo. La maquinaria (tractores, bombas, etc.) se describe cuando sea necesario, pero sin incluir la marca comercial. No as el instrumental de precisin que deber incluir marca y modelo. b) Los mtodos de conocimiento general, como diseos experimentales y mtodos de anlisis muy comunes, se mencionarn sin, mayor descripcin indicando, si es el caso, una fuente para la informacin usada. El equipo comn que no se considere como de precisin o en el caso de

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que la utilizacin de equipo similar con marcas o modelos distintos no implique efectos sobre los resultados, no deber describirse con detalle y slo se mencionar. c) Si el mtodo es original o muy modificado, se describe tan ampliamente como sea necesario. d) Si el mtodo no es de conocimiento general, pero ya ha sido descrito por otro autor, se menciona y se har la cita bibliogrfica correspondiente. e) Todas las medidas deben darse segn el Sistema Mtrico Decimal. Si se trata de una cita literal de trabajos, las medidas se dan tal como se encuentran en el trabajo citado, y a continuacin, entre parntesis, la equivalencia en el Sistema Mtrico Decimal. Para describir las unidades de medida se utilizarn los smbolos o abreviaturas internacionales. f) Para la escritura de nombres cientficos deben respetarse las reglas de nomenclatura correspondientes. La seccin de Resultados y Discusin describe lo ms concretamente posible los resultados obtenidos en la investigacin. Se sugiere que en lo posible los datos se sinteticen en tablas, o sean comentados en el texto. Para la discusin de los resultados se debern interpretar los resultados obtenidos y se comparan con los resultados de otros autores, haciendo la referencia bibliogrfica debida. En esta seccin se pueden elaborar hiptesis, hacer algunas especulaciones y discutir las limitaciones o perspectivas del trabajo, utilidad y repercusiones de los resultados. Lo cual forma parte de la discusin. Para la elaboracin de las tablas o grficas vanse las reglas correspondientes ms adelante. LAS TABLAS Y FIGURAS DEBERN DE INTERCALARSE EN EL TEXTO DE LOS RESULTADOS Y DISCUSIN REGLAS PARA LA PRESENTACIN DE TABLAS Y FIGURAS En un protocolo de investigacin se pueden incluir tablas y figuras, las mismas debern estar referenciadas en los prrafos correspondientes, para su presentacin se debern tomar en cuenta las siguientes reglas: Las tablas deben enumerarse por orden de aparicin en el texto, con nmeros arbigos. Las grficas, fotografas, dibujos, etc., se incluyen bajo la denominacin general de Figuras y se numeran por orden de aparicin en el texto, con nmeros arbigos. Los ttulos de las tablas y figuras, al igual que las notas al pie de pgina, debern ir a rengln seguido. Las tablas y figuras que aparezcan longitudinalmente en la pgina, debern respetar los mismo mrgenes ya establecidos para la escritura ordinaria (3.0 cm margen izquierdo y 2.5 cm para los otros tres). La posicin de estas tablas y figuras debe ser en tal forma que la parte

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superior de ellas d hacia el lomo y la base hacia el extremo exterior de la pgina. Estas pginas podrn no tener el nmero. Las tablas deben ser auto-explicativas. Deben llevar un encabezado explcito sobre datos mostrados en ellas; si es necesario dar algunos datos adicionales, se har por medio de llamadas en el lugar correspondiente, que se refieran a notas a pie; las llamadas se harn por medio de nmeros arbigos entre parntesis, y los smbolos (*) y (**) deben usarse exclusivamente para indicar diferencias de significacin estadstica Las figuras deben llevar un pie que explique claramente lo que se desea mostrar en ellas. Las grficas deben ser fciles de leer, a escala conveniente, y con sealamientos y smbolos fcilmente diferenciables. Las tablas y las figuras deben insertarse lo ms prximo posible al lugar en que se hace la referencia. Cuando ocupen menos de media pgina, pueden incluirse en el texto, del cual se separarn por un espacio doble al usual. Cuando ocupen ms de media pgina, deben escribirse en pginas aparte, que se intercalarn entre las del texto siguiendo a aquella pgina en la que se haga referencia al cuadro o figura. La seccin de Conclusiones es parte integrante de todo ensayo, debe presentar de manera ordenada y sinttica los hechos que han sido definitivamente probados o rebatidos en el ensayo, nos deben dar respuestas a los objetivos e hiptesis planteadas Debe evitarse todo tipo de discusin. La seccin de Literatura Citada es indispensable. En ella debern presentarse solamente aquellas obras a las que se hace referencia en el texto. Se ordenarn siguiendo las normas ya expuestas anteriormente. A PARTIR DE AQU SOLAMENTE SE TE PROPORCIONAN GUAS PARA TU PROCESO DE INVESTIGACIN, LA PARTE MS IMPORTANTE TE CORRESPONDE A TI, ES EL INICIO DE UNA NUEVA ETAPA EN EL PROCESO DE TU FORMACIN DENTRO DE ESTA FACULTAD! En este sentido el objetivo principal de todas las siguientes prcticas, es el de proporcionarte una orientacin para el anlisis de los posibles especies que puedas encontrar en las muestras colectadas en los diferentes sistemas acuticos y terrestres.

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PRCTICA N 2 SISTEMTICA Y TAXONOMA 1. INTRODUCCIN El hombre en su afn de conocer el mundo que lo rodea en todas sus dimensiones, ha optado por clasificar, ya sea por la necesidad de procurarse alimento, medicarse o protegerse, sta actividad le ha permitido sistematizar los conocimientos. Este hecho milenario permiti ir creando las bases para la clasificacin actual. Una actividad inicial fue la de separar a los organismos de acuerdo a sus usos: medicinales, comestibles, de construccin, etc., a medida que su conocimiento avanzo, pudo entonces hacer los primeros intentos de utilizar una clasificacin ms natural, en la cual se utiliz por ejemplo los hbitos de vida que para el caso de las plantas pudo ser: hierbas, arbustos, rboles, etc. Sin embargo, el primer intento de una clasificacin ms sistematizada se encuentra entre las antiguas culturas como los griegos, es el caso de Aristteles quien dividi a los organismos en animales y vegetales. El avance en los descubrimientos e inventos dio un vuelco al arte de clasificar, ya que permiti avanzar a grandes pasos en esta ciencia, dando como resultado una secuencia evolutiva, la cual se manifiesta en las diferentes escuelas de la taxonoma, EVOLUTIVA, FENTICA Y CLADSTA, esto a derivado en una oportunidad para debatir los diferentes conceptos implcitos en el arte de la clasificacin, SISTEMTICA, TAXONOMA, CLASIFICACIN, NOMENCLATURA, IDENTIFICACIN y DETERMINACIN, entre otros. La sistemtica es la ciencia de la diversidad, es decir, la organizacin del conjunto total del conocimiento sobre los organismos. Incluye la informacin filogentica, taxonmica, ecolgica o paleontolgica. Es una disciplina de sntesis, de abstraccin de conceptos, de enunciado de teoras explicativas de los fenmenos observados. Por lo tanto, tiene en s, un trasfondo terico que supera al de la taxonoma y una tendencia predictiva. La taxonoma ha sido definida como una forma de organizar la informacin biolgica con arreglo a diferentes mtodos como el feneticismo, el cladismo, la taxonoma evolutiva, criterios de tipo ecolgico, paleontolgico, etc. Es una disciplina eminentemente emprica y descriptiva, acumula fenmenos, hechos, objetos, y a partir de dicha acumulacin genera las primeras hiptesis explicativas. Adems de describir organismos, la importancia de la taxonoma estriba en que organiza la diversidad biolgica en forma de clasificaciones. Existe una cierta confusin en el uso de los trminos taxonoma y sistemtica. Si taxonoma significa ordenar entonces sistemtica significa reunir, juntar. Aunque ambos trminos abarcan conceptos semejantes, la sistemtica se ocupa ms de la diversidad y de las relaciones entre los organismos, mientras que la taxonoma atiende a la clasificacin de esa diversidad. Se ha criticado que la taxonoma deba tener necesariamente relacin con la filogenia, a lo que se ha respondido diciendo que la clasificacin se ha de realizar sobre alguna base slida, sea del tipo que sea. Esta relacin ha sido la de los parentescos de tipo evolutivo que llevan a parentescos de tipo

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morfolgico. Es un criterio al que podemos llamar natural, ya que se puede observar directamente en la naturaleza. El problema, en el fondo, es determinar hasta qu punto la taxonoma debe ser compatible con la filogenia pues no necesariamente ha de ser un compendio exhaustivo de esta ltima, "las clasificaciones que utilizamos en taxonoma son, de hecho, resmenes de hiptesis filogenticas, o filogenias simplificadas". La clasificacin es el mtodo bsico que emplea el hombre para enfrentarse con la organizacin del mundo que le circunda. Intuitivamente ordena los seres con unos criterios, los reagrupa en conjuntos jerarquizados y forma con ellos una clasificacin, entonces una clasificacin se podra definir como la ordenacin de los seres en jerarquas de clases. Los organismos que comparten muchas caractersticas se dice que forman un grupo nico, es la ordenacin de los seres en grupos de tamao creciente, dispuestos de una manera jerrquica. Los distintos niveles de jerarquas de una clasificacin se denominan CATEGORAS TAXONMICAS y los grupos que se forman en una clasificacin, independientemente de las categoras que tengan, se denominan taxones (plural TAXA en latn, en singular taxn) o grupos taxonmicos. Es importante que se establezcan diferencias claras entre TAXN y CATEGORA TAXONMICA, el primero se refiere a un conjunto de organismos agrupados debido a que comparten ciertos caracteres, en tanto que el segundo se refiere al ordenamiento jerrquico de los taxones, es decir, integra y subordina diferentes categoras de manera ordenada como si fuera una gran biblioteca, donde cada seccin de la misma correspondera a una categora muy amplia y dentro de cada seccin se establecen anaqueles con diferentes temticas, por ejemplo: ciencias naturales, ciencias exactas, ciencias econmicas, etc., y dentro de cada seccin existen compartimentos correspondientes a nuevas subdivisiones: biologa, medicina, qumica, etc., a su vez stas se subdividen por ejemplo en biologa tendramos: microbiologa, botnica, zoologa, ecologa, entre otras. De la misma manera los organismos los agrupamos, actualmente las grandes categoras taxonmicas reconocidas son: DOMINIO, REINO, DIVISIN O PHYLUM, CLASE, ORDEN, FAMILIA, GNERO y ESPECIE, (Fig. 1).
DOMINIO EUKARIA REINO PROTISTA REINO PLANTAE REINO ANIMALIA

DIVISIN O PHYLUM

DIVISIN O PHYLUM

DIVISIN O PHYLUM

CLASE

CLASE

CLASE

ORDEN

ORDEN

ORDEN

FAMILIA GNERO

FAMILIA GNERO

FAMILIA GNERO

ESPECIE

ESPECIE

ESPECIE

Figura 1. Categoras taxonmicas

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A partir de la categora Divisin o Phylum, se pueden establecer diferentes subcategoras las cuales suelen ser de dudosas relaciones filogenticas y su aceptacin depende del CDIGO DE NOMENCLATURA BIOLGICA utilizado. Los cdigos internacionales de nomenclatura biolgica reconocen la especie como la categora taxonmica bsica sobre la que se sustenta toda la jerarquizacin de los organismos vivos. Existen muchas definiciones de especie, pero en nuestro caso prctico para definir especie empleamos caracteres morfolgicos. Estos caracteres son reflejo de sus genes, son la fuente de datos que mide ms fielmente las interrelaciones evolutivas, y por ello deben ser la nica base para el reconocimiento de las especies como una unidad taxonmica, aunque el hecho de que las especies se definan por sus caracteres morfolgicos plantea problemas metodolgicos muy serios. Por ejemplo: CASO 1 Al analizar la morfologa de una sola especie de diatomea, Coscinodiscus asteromphalus, sino se considera su forma de reproduccin asexual podramos clasificarla como ms de una especie, ya que el tamao de las clulas hijas resultantes de la mitosis cambia drsticamente, despus de un tiempo determinado, en el cual ocurren varias divisiones mitticas (Fig. 2).
1a mitosis (1 hora) 2a mitosis (2 horas) 3a mitosis (3 horas) 4a mitosis (4 horas) 5a mitosis (5 horas) 6a mitosis (6 horas)

Figura 2. Mitosis reduccional en Coscinodiscus asteromphalus En este caso el dimetro de las clulas no es un factor morfomtrico que nos ayude a definir la especie de Coscinodiscus, sin embargo, otras observaciones de los ejemplares nos pueden ayudar para identificar dicha especie, por ejemplo, el nmero de areolas en la valva y la presencia de una roseta central con un nmero definido de areolas mantienen su proporcin, an cuando los organismos se reproduzcan por mitosis reduccional. CASO 2 Cuando comparamos diferentes ejemplares de un dinoflagelado marino del gnero Ceratium, si desconocemos la plasticidad gentica del mismo, los morfos que este pueda presentar podran clasificarse como especies diferentes, es as que, Ceratium divaricatum, ha desatado una polmica morfolgica entre diferentes investigadores, la forma y tamao de los cuernos antapicales y el apical presentan fuertes variaciones, y para sumar ms problemas si los investigadores no observan adecuadamente los individuos pueden cometer errores de interpretacin, ya que no es lo mismo mirar

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el organismo en posicin ventral que dorsal, puesto que el lugar del cuerno antapical ms grande cambiara de ser derecho a ser izquierdo o viceversa (Fig. 3).

Vista ventral Vista dorsal Figura 3. Ejemplares de Ceratium divaricatum Para este caso tambin es importante que consideremos que los cuernos antapicales pueden cambiar de tamao y de ngulo, lo cual llev a establecer diferentes categoras subespecfica para el caso de Ceratium divaricatum. Incluso han llevado a diferentes investigadores a establecer esta misma especie como Ceratium balechii (Fig. 4).

Meave del Castillo et al. 2003

Hernndez-Becerril and Alonso-Rodrguez 2004

Figura 4. Problemtica morfolgica de Ceratium divaricatum o Ceratium balechii

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CASO 3 Las formaciones de valvas teratognicas en diatomeas de agua dulce es otro problema en la taxonoma de dicho grupo, ya que estos organismos son altamente sensibles a las variaciones ambientales, las cuales en caso de llegar al grado de elevada contaminacin generan la modificacin estructural de su frstula. Algunas caractersticas utilizadas en la taxonoma de diatomeas son el contorno valvar, la disposicin y densidad de estras, la presencia y prolongacin del rafe, caracteres que pueden presentar formas aberrantes para la naturaleza de la especie provocadas por mutaciones debidas a la exposicin excesiva de las especies a toxinas, material orgnico, nutrimentos y metales pesados, causando mutaciones morfolgicas, principalmente cambiando el contorno valvar, la estructura del rafe, la disposicin de estras as como su densidad. Algunos de los gneros con mayor incidencia en mutaciones valvares son Fragilaria sp., Gomphonema sp., Encyonema sp., Eunotia sp., Navicula sp. y recientemente en el Ro Lerma el gnero Eolimna sp. (Fig. 5)

Normal Modificada Encyonema sp. Normal Modificada Eunotia sp.

Normal Modificada Gomphonema sp.

Normal Modificada Ulnaria sp.

Figura 5. Efecto teratolgico en diatomeas de agua dulce CASO 4 El efecto teratolgico tambin se presenta en otro tipo de microalgas como es el caso de los silicoflagelados. En Dictyocha spp., se han podido observar formas aberrantes de los endoesqueletos silceos de las mismas, como consecuencia de una falta de slice en el medio o bien anomalas trmicas que impiden una correcta asimilacin del silicato para la formacin de endoesqueletos (Fig. 6).

Normal Aberrante Dictyocha californica

Normal Aberrante Dictyocha octanaria

Figura 6. Efecto teratolgico en silicoflagelados marinos

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La nomenclatura biolgica es la parte de la sistemtica que asigna nombres a los seres vivos y grupos de seres vivos (taxones), Los primeros nombres que tuvieron los seres vivos fueron los nombres vernculos o nombres comunes, pero estos tienen los siguientes inconvenientes: No son universales, slo son aplicables a una lengua. Slo algunos seres vivos tienen nombre vernculo. A menudo dos o ms seres vivos no relacionados tienen el mismo nombre o un mismo ser vivo tiene diferentes nombres comunes. Se aplican indistintamente a gneros, especies o variedades. Por ejemplo: El perro mexicano los Nahuatl lo llaman Xoloscuintle, los Purpechas Huicho. La nomenclatura biolgica trata de evitar estos problemas y establece una serie de reglas llamadas CDIGOS DE NOMENCLATURA. En la antigedad (poca prelinneana) cada planta era conocida en crculos eruditos por una larga frase descriptiva en latn, el SISTEMA POLINOMIAL O POLINOMINAL, que creca a medida que se encontraban nuevas especies semejantes. As, por ejemplo, la "hierba gatera" (Nepeta cataria L.) se mencionaba como: Nepeta floribus interrupte spiculatus pedunculatis (que quiere decir Nepeta con flores en una espiga pedunculada interrumpida). El primero que sugiri la idea para adoptar slo dos palabras (sistema binomial/binominal) fue Gaspar Bauhin. Pero no fue hasta la publicacin de Species Plantarum por Linneo en 1753 que el SISTEMA BINOMIAL fue establecido definitivamente. Linneo describi y nombr por tal sistema todo el mundo vivo conocido hasta la fecha (Fig. 7).

Figura 7. Linneo y su obra El nombre cientfico o nombre especfico de un organismo vivo es una combinacin de dos palabras en latn: EL NOMBRE GENRICO O GNERO EL EPTETO ESPECFICO Los cuales siempre debern de escribirse en cursivas. Por ejemplo, el encino es Quercus rotundifolia Lam., el pino pionero es Pinus pinea L. El Gnero inicia con mayscula y la especie con minscula. El nombre cientfico siempre se acompaa del apellido abreviado del autor que lo describi por primera vez de forma efectiva o vlida. Lam. es abreviacin de Lamarck y L. es la breviacin de Linneo.

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Ningn nombre cientfico est completo sino se acompaa del nombre del autor o forma abreviada de este, adems del ao en que fue descrito ya sea el gnero o la especie. Actualmente existen diferentes cdigos de nomenclatura biolgica, aplicables al Reino Protista, a continuacin se mencionan los principales: CDIGO INTERNACIONAL DE NOMENCLATURA BOTNICA (conocido por sus siglas en ingls: ICBN), es el compendio de reglas que rigen la nomenclatura taxonmica de los organismos vegetales y las algas, a efectos de determinar, para cada taxn vegetal, un nico nombre vlido internacionalmente. CDIGO INTERNACIONAL DE NOMENCLATURA ZOOLGICA (conocido por sus siglas en ingls: ICZN) tiene como propsito fundamental proporcionar la mxima universalidad y continuidad de los nombres cientficos de los animales compatibles con la libertad de los cientficos para clasificar los animales segn sus criterios taxonmicos. El Cdigo reglamenta los nombres de los taxones de animales (reino Animalia) y de otros clados de eucariotas tradicionalmente considerados "protozoos". QUE HACE UN TAXNOMO? Para clasificar los taxnomos usan los parecidos y las diferencias que hay entre los organismos. Se trabaja para encontrar caracteres o las peculiaridades de cada especie. El intento de clasificar a toda la diversidad del mundo vivo es muy antiguo este intento enfrenta grandes dificultades debido a que es necesario unificar los criterios para que cada grupo de organismos se halle claramente diferenciado del resto. Por lo tanto, una buena clasificacin es aquella que permite desarrollar un rbol evolutivo a partir de los grupos creados, aunque el rbol no sea exhaustivo. La taxonoma no tiene en cuenta aspectos evolutivos en su elaboracin del trabajo diario. No obstante, la taxonoma tradicional, basada casi exclusivamente en caracteres morfolgicos, ha establecido una clasificacin que en la actualidad se muestra como bastante cercana a la realidad. Esto es debido a que las semejanzas morfolgicas obedecen a criterios de relaciones filogenticas: cuanto ms cercanas sean dos especies, evolutivamente hablando, ms parecidas sern en su morfologa. Por lo tanto, cuando un taxnomo trabaja, an no siendo consciente de ello, est realizando comparaciones de tipo filogentico aunque sea a un nivel bsico. Por ello las clasificaciones son teoras acerca de la base del orden natural, y no tediosos catlogos compilados con el nico fin de evitar el caos. Cules son entonces las herramientas que utilizan los taxnomos? Bsicamente son dos la DETERMINACIN y/o la IDENTIFICACIN, consisten en dar nombre a un organismo por referencia a una clasificacin existente, con ayuda de bibliografa (CLAVES), o por comparacin con un organismo de identidad conocida (identificacin). En algunos casos, luego de eliminar las posibilidades de que sea semejante a un elemento conocido, podra ser descubierto un nuevo organismo para la ciencia (determinacin). La nomenclatura no est involucrada en el proceso de identificacin. Para llevar a cabo estas actividades, es necesario que la informacin sobre los taxones est disponible de una forma accesible.

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La otra parte indispensable en el quehacer del taxnomo corresponde a los medios fsicos que utilizar, elementos como lupas o microscopios, son necesarios para observar los caracteres del organismo que permiten ubicarlo en uno u otro taxn, y como ya se mencion requiere de una base bibliogrfica especializada, la informacin normalmente est disponible en enormes libros llamados CLAVES DE IDENTIFICACIN ("clave o key en ingls), que poseen un sistema que va guiando al lector hacia el taxn al que pertenece su organismo. Normalmente las claves de identificacin son para una zona especfica, ya que sera intil ingresar en ellas la informacin sobre taxones que no se localizan en la regin en la que se encontr el organismo a determinar. Las claves o llaves, son instrumentos que sirven por lo tanto, para determinar organismos desconocidos. Con ellas es posible ubicar la especie a que pertenece un determinado ejemplar, asignarle un nombre y sobre todo, un lugar en el sistema de clasificacin. Tambin existen claves que permiten ubicar las distintas categoras sistemticas (taxa) a que pertenece un organismo, como son: Gnero, Familia, Orden, Clase y Divisin (Fig. 8).

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CLAVE DIDCTICA PARA LA DETERMINACIN DE DIVISIONES DE ORGANISMOS VEGETALOIDES 1. Clulas con cripta evidente ..................................................................................................... CRYPTOPHYTA 1. Clulas sin cripta ............................................................................................................................................. 2 2. Organismos generalmente multinucleados ............................................................................ XANTHOPHYTA 2. Organismos nunca multinucleados ................................................................................................................. 3 3. Clulas con sutura sagital y/o sulcus y cngulo ....................................................................... PYRROPHYTA 3. Clulas sin sutura sagital ni sulcus ................................................................................................................ 4 4. Clulas con cubierta celular a manera de pared, endoesqueleto, cocolitos, escamas o lrica ...................... ..................................................................................................................................................CHRYSOPHYTA 4. Clulas slo con periplasto anillado (metabolia), o con lrica ........................................... EUGLENOPHYTA
CLAVE DIDCTICA PARA LAS CLASES DE ORGANISMOS VEGETALOIDES 1. Organismos generalmente multinucleados sifonados, la mayora filamentosos y globosos ................................. ................................................................................................................................................ XANTHOPHYCEAE 1. Organismos solamente uninucleados, la mayora unicelulares, poco comn filamentosos .............................. 2 2. Organismos con una cripta evidente y eyectosomas ............................................................. CRYPTOPHYCEAE 2. Organismos sin cripta ni eyectosomas ............................................................................................................... 3 3. Clulas ovales, con una sutura sagital que une dos valvas ..................................................... DESMOPHYCEAE 3. Clulas sin sutura sagital ................................................................................................................................... 4 4. Clulas generalmente con cngulo y sulcus evidente, algunas veces presentan tentculo .......... DINOPHYCEAE 4. Clulas de otra forma y sin tentculo ................................................................................................................. 5 5. Clulas con pared celular en forma de exoesqueleto silceo o lricas silceas y mucilaginosas ........................... .................................................................................................................................................CHRYSOPHYCEAE 5. Clulas sin exoesqueleto ni lricas silceas ........................................................................................................ 6 6. Clulas con pared celular silcea a manera de caja de petri, presentan dos vistas una valvar y otra conectiva o cingular (cngulo) ............................................................................................................... BACILLARIOPHYCEAE 6. Clulas sin pared celular pero si con periplasto, pueden presentar lricas mucilaginosas pero nunca silceas algunos presentan metabolia .................................................................................................. EUGLENOPHYCEAE

CLAVE ARTIFICIAL PARA DINOPHYTA DINOPHYCEAE 1. Clulas sin placas o tecas ................................................................................................ 2 1. Clulas con placas o tecas .............................................................................................. 5 2. Clulas con cngulo y sulcus evidentes ..................................................... Gymnodinium 2. Clulas sin cngulo y sulcus evidentes ........................................................................... 3 3. Clulas globosas .............................................................................................................. 4 3. Clulas fusiformes convexas .......................................................................... Pyrocystis 4. Clulas con tentculo ........................................................................................ Noctiluca 4. Clulas sin tentculo ...................................................................................... Pyrocystis 5. Clulas aplanadas lateralmente ..................................................................................... 6 5. Clulas si aplanadas no lateralmente ........................................................................... 9 6. Clulas con sutura sagital en alguna de sus vistas .................................. Prorocentrum 6. Clulas cuando menos con cngulo evidente ................................................................. 7 7. Clulas con epicono muy reducido e hipocono demasiado largo ............. Amphisolenia 7. Clulas con epicono poco reducido e hipocono cuando menos cinco veces el epicono . 8 8. Clulas con membranas alares sulcales muy evidentes y con costillas .... Ornithocercus 8. Clulas con membranas alares sulcales poco evidentes ............................... Dinophysis 9. Clulas con sulcus muy ancho y cuando menos un cuerno antapical grande .. Ceratium 9. Clulas con sulcus angosto con o sin cuernos antapicales .......................................... 10

Figura 8. Claves dicotmicas artificiales para diferentes categoras taxonmicas Las claves usualmente son diagnsticas, esto es, identifican un organismo desconocido utilizando slo los rasgos ms notorios por los cuales varios taxa pueden ser reconocidos, los caracteres diagnsticos usados en tales claves deben ser notorios y claramente diferenciables. La mayora de las claves usadas hoy en da son dicotmicas, o sea, presentan 2 alternativas contrastantes en cada paso. Cada par de claves alternativas es llamado pareja, la clave se disea de manera que una parte de la pareja es aceptada y la otra rechazada. Algunas claves pueden no ser dicotmicas y pueden proporcionar tres o cuatro alternativas, pero se prefieren los pares de alternativas. En este sentido

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podemos encontrar diferentes tipos de claves dicotmicas, a continuacin se presentan algunas de ellas: CLAVES INDENTADAS: Las claves indentadas, son las ms utilizadas en manuales para la identificacin de organismos. En estas, la descripcin de cada grupo de caractersticas est a una determinada distancia del margen izquierdo de la pgina, de manera que el grupo de caractersticas contrastantes est a la misma distancia del margen y generalmente empieza con la misma palabra. A medida que se avanza por la clave, las lneas estn cada vez ms indentadas en cada grupo de caractersticas subordinadas (Fig. 9).
A-1. Membrana pedal extensa y que cubre por lo menos 2/3 partes de los dedos .................................... C. agilis A-2. Membrana pedal mnima o ausente. B-1. Raya dorsolateral presente; raya ventrolateral presente o ausente; lnea lateral oblicua incompleta (no hasta el ojo). C-1. Raya ventrolateral presente (a veces no se nota en los animales preservados); vientre inmaculado; una raya longitudinal obscura en parte postero-distal del muslo ...................................... C. pratti C-2. Raya ventrolateral ausente; vientre manchado o reticulado; raya longitudinal obscura en la parte postero-distal del muslo ausente ................................................................................... C. latinasus B-2. Raya dorsolateral ausente (a veces perceptible en C. imbricolus); raya ventrolateral ausente (excepto, ocasionalmente, en C. nubicola); lnea lateral oblicua completa (de ingle a ojo) incompleta o ausente. C-1. Lnea lateral oblicua ausente ......................................................................................... C. mertensi C-2. Lnea lateral oblicua presente. D-1. Lnea lateral oblicua incompleta (no hasta el ojo). E-1. Vientre moteado de blanco (azul); una mancha clara en parte prxima de muslo ........... ..................................................................................................................... C. imbricolus E-2. Vientre inmaculado; mancha en parte proxima de muslo ausente ............. C. inguinalis

Figura 9. Clave indentada CLAVES PARALELAS: En stas, los dos grupos de caractersticas contrastantes se escriben en lneas consecutivas (seguidas), de manera que es muy fcil hacer la comparacin. al final de cada lnea (en el margen derecho de la pgina), se encuentra un nmero que indica el nuevo par de caracteres contrastantes a comparar, o el nombre de la especie que se pretende identificar. este tipo de clave es muy til cuando se trata de un gran nmero de especies (Fig. 10).
1. Organismos con un solo flagelo .................... 2 1. Organismos con ms de un flagelo ................... 5 2. Organismos con un collar de microfibrillas bordenado al flagelo ............. 3 2. Organismos sin collar de microfibrillas en el flagelo ............................... 4 3. Organismos con collar trapezoidal .............. Cosmoeca 3. Organismos con collar cnico ................... Pleurosiga 4. Organismos con una membrana alar sobre el flagelo ............. Trypanosoma 4. Organismos sin membrana alar sobre el flagelo ........... Leishmania 5. Organismos solamente con axostilo .................................. 6 5. Organismos con rsotrum y axostilo ................ 7 6. Organismos con axostilo muy largo y cinco flagelos ................. Giardia 6. Organismos con axostilo corto y siete flagelos ................... Trichomonas 7. Organismos con flagelos en forma de penacho, rostrum no evidente .......... Lophomonas 7. Organismos con flagelos hacia la parte posterior, rostrum evidente ...... Trichonympha

Figura 10. Clave paralela

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2. OBJETIVO: familiarizar al alumno con el trabajo bsico que realiza un taxnomo. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA a) El ejercicio lo iniciaremos con un conjunto de formas geomtricas, lo cual nos facilitarn la tarea, recorta las figuras de la lmina 1. b) Debes tomar en cuenta las siguientes instrucciones: LA TEORA DE CONJUNTOS HERRAMIENTA INDISPENSABLE PARA FACILITAR EL TRABAJO Recuerda que la clave es de tipo dicotmico paralela y por lo tanto manejaras dos alternativas contrastantes por ejemplo: Forma oblonga Forma cuadrangular Cada alternativa nos deber de llevar a un nuevo nmero, siempre y cuando no se haya separado de manera individual alguno de los elementos, en tal caso debers asignarle un nombre y esa opcin se cierra. Comnmente, los elementos debern quedar separados de manera individual en la segunda alternativa, de tal manera que a la primera le asignes el nmero siguiente y puedas continuar tu clave. Debes iniciar redactando el primer criterio que utilizaste. Cuando tengas separados ambos grupos, inicia la redaccin del siguiente paso a partir del primer grupo que formaste, solamente podrs continuar con el segundo grupo hasta que hayas terminado el primero. El anterior procedimiento deber de aplicarse en todos los casos en los que se hayan creado nuevos subconjuntos. Finalmente, cuando hayas terminado el primer subconjunto, podrs continuar con el segundo, asignndole al mismo el nmero que le corresponda y as sucesivamente. c) A continuacin redacta la clave que obtuviste. d) Ahora, procede a realizar el mismo ejercicio, pero utilizando las fotografas de diferentes protistas que se presentan en las lminas 2 y 3, para lo cual debers guiarte con los siguientes pasos: Recorta las figuras y asgnale letras o nombres a cada una. Separa tu conjunto de protistas en dos subconjuntos considerando por ejemplo la forma. En cada subconjunto formado utiliza un nuevo criterio, por ejemplo: la simetra, presencia de poros, ordenacin de los poros o areolas, existencia de flagelos y nmero de los mismos, presencia de ranuras o canales longitudinales, presencia de surcos longitudinales o transversales, entre otras.

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OJO: no utilices el tamao, recuerda que este puede variar dependiendo del tipo de reproduccin asexual que se presente. En general sigue los mismos pasos que utilizaste para las figuras geomtricas hasta que termines de separar las hojas totalmente. RECUERDA ANOTA LAS CARACTERSTICAS CONTRASTANTES QUE UTILIZASTE PARA CADA PASO. Son los datos que te permitirn elaborar y redactar tu clave, lo que corresponde al paso final de tu ejercicio.

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Lmina 1. Formas Geomtricas

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Lmina 2a. Protistas vegetaloides (microalgas)

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Lmina 2b. Protistas vegetaloides (microalgas)

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Lmina 3a. Protistas animaloides (protozoos)

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Lmina 3b. Protistas animaloides (protozoos)

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PRCTICA N 3 CONOCIMIENTOS BSICOS DE MICROSCOPA Y MORFOLOGA GENERAL DE LOS PROTISTA 1. INTRODUCCIN A LA MICROSCOPA El microscopio, es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn de microscopio y el primero que se invent es el ptico, este es un instrumento que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga las formas pequeas utilizando este instrumento se llama MICROSCOPA. El microscopio se invento, hacia 1610, por Galileo, segn los italianos, o por Jansen, en opinin de los holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los integrantes de la "Accademia dei Lincei" una sociedad cientfica a la que perteneca Galileo y que publicaron un trabajo sobre la observacin microscpica del aspecto de una abeja. Las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teora de Harvey sobre la circulacin sangunea al observar al microscopio los capilares sanguneos y Hooke publica su obra Micrographia. A mediados del siglo XVII un comerciante holands, Leenwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricacin propia describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos Durante el siglo XVIII el microscopio sufri diversos adelantos mecnicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras pticas. Las mejoras ms importantes de la ptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teora del microscopio y por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopa de inmersin sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener aumentos de 2000. A principios de los aos 30 del siglo XX, se haba alcanzado el lmite terico para los microscopios pticos los mximos aumentos logrados eran de 500X o 1000X. En el segundo cuarto del siglo XX, se desarrolla un nuevo tipo de microscopio, el electrnico de transmisin (MET), fue el primero en su tipo, este utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra, consiguiendo aumentos de 100.000X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernest Ruska en Alemania en 1931. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrnico de barrido (MEB). El microscopio ptico est constituido de las siguientes partes (Fig. 1): Sistema ptico CABEZAL: El cual es metlico y contiene prismas internos, tubos portaoculares y escala de Vernier. Su funcin es captar el haz luminoso que lleva la informacin de la imagen hacia los oculares, se encuentra en la parte superior del brazo.

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OCULARES: estas lentes permiten aumentar el tamao de la imagen primaria. Se componen por un mnimo de dos lentes separados entre s, una est localizada cerca de la imagen primaria y se llama lente colectora o de campo y la segunda se encuentra por encima de la anterior y es la que transmite la imagen al ojo, llamada lente ocular. OBJETIVOS: producen la imagen primaria y es responsable de la claridad de la misma, de los detalles estructurales, etc., que no pueden ser mejorados por los dems elementos pticos del microscopio. CONDENSADOR: Su finalidad es la de conducir los rayos procedentes de la fuente luminosa hacia la preparacin en la parte enfocada por el objetivo, de modo que el campo visual presente una iluminacin uniforme. El condensador tiene adems una segunda finalidad que es proporcionar al objetivo un cono de luz de tamao y naturaleza adecuada para la obtencin de resultados pticos. DIAFRAGMA: Controla la apertura numrica y regula la cantidad de luz que entra en el condensador. Sistema de iluminacin FOCO: Es la fuente de luz, la cual se dirige hacia un condensador y se regula mediante un diafragma.

Oculares

Cabezal

Revlver Objetivos Platina Condensador Tornillos de ajuste para el haz de luz Palanca de ajuste para el diafragma del condensador Diafragma de la fuente de luz Base Desplazador de platina Macromtrico Brazo

Micromtrico

Fuente de luz

Figura 1. Componentes del microscopio compuesto

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Sistema mecnico SOPORTE: Es el sostn de todas las partes del microscopio. PLATINA: es una pieza metlica colocada en la parte superior del porta condensador, es la que sostiene al carro de aluminio o porta objetos. Tiene un orificio en el centro por el cual pasa los rayos luminosos, sirve de soporte al portaobjetos. Su funcin es el desplazamiento por medio del tornillo macromtrico de ascender o descender para buscar la distancia focal. CARRO DE ALUMINIO: Es una pieza metlica con desplazamiento horizontal y vertical compuesta con escala de Vernier, graduada en los ejes "X y Y", pinza tensor del porta objetos, por medio del desplazamiento se localiza el objeto a identificar, utilizando las coordenadas de los ejes. REVLVER: Es una pieza metlica giratoria estriada, con orificios estndar para la colocacin de los lentes objetivo. Su funcin es el giro hacia la izquierda o derecha de los objetivos de menor a mayor aumento. CONTROLES DE ENFOQUE: tienen un finsimo mecanismo coaxial para los movimientos macromtrico y micromtrico, consta de dos partes: TORNILLOS MACROMTRICOS, accionan el movimiento macro (desplazamiento de ascenso y descenso) rpido. TORNILLOS MICROMTRICOS, accionan el movimiento micro (le dan nitidez a la imagen observada), dan precisin a la imagen. 2. INTRODUCCIN A LA MORFOLOGA GENERAL DEL REINO PROTISTA El anlisis de organismos del Reino Protista cae dentro de la rama de la biologa que estudia a las clulas tomando en cuenta su estructura, funciones e importancia en la complejidad de los seres vivos, rama que recibe el nombre de Citologa. En el Reino Protista se encuentran agrupados tanto organismos que presentan similitudes con clulas vegetales (VEGETALOIDES o microalgas), (Fig. 2), como aquellos que presentan semejanzas con clulas animales (ANIMALOIDES o protozoos), (Fig. 3), lo cual nos obliga a conocer las caractersticas citolgicas de cada una de las clulas mencionadas.

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Membrana Plasmtica

Pared Celular

Vacuola

Mitocondrias

Pirenoide Retculo Endoplsmico Rugoso Cloroplasto

Aparato de Golgi

Leucoplasto

Nuclelo

Membrana Nuclear Ncleo

Figura 2. Clula vegetal tpica

Membrana celular Vacuola contrctil Ncleo Centrilo Nuclelo

Fagocitos Aparato de Golgi

Mitocondrias

Retculo endoplsmico

Figura 3. Clula animal tpica

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La morfologa comparada del reino protista es la fuente principal de caracteres utilizados para reconocer las relaciones y las diferencias entre todos los niveles taxonmicos de las diversas formas. El estudio de las caractersticas morfolgicas de los integrantes de este Reino, han sido abordadas por diferentes investigadores, para el caso de Mxico, Gonzlez (1994), y Lpez y Serrano (1994), han propuesto una serie de criterios que nos permiten distinguir entre los diferentes tipos morfolgicos de las clulas vegetaloides y animaloides, ambas versiones pueden considerarse como complementarias y de gran utilidad para los propsitos del presente manual. Lpez (1994), menciona que: ...La aceptacin de la protistologa como entidad vlida permite ignorar la mayor parte de las controversias acerca de la animalidad o vegetalidad de los organismos en cuestin. Es importante citar que Gonzlez (Op. Cit.), menciona que todos los elementos microalgales (clulas vegetaloides) al igual que todas las algas, se unifican porque comparten las expresiones morfolgicas, por lo cual se les consideran como un grupo filofentico, tomando en cuenta el grado de complejidad estructural y funcional como un estatus morfofiolgico de la expresin fsica de una especie o grupos de especies. Todos los pasos de un nivel de organizacin inferior a otro inmediatamente superior estn ligados a la presencia de una nueva propiedad o adquisicin de una capacidad importante, lo que tiene por consecuencia una modificacin fundamental en la estructura y en la forma de vida. Lo anterior permite tener un criterio de orden para sistematizar a la diversidad microalgal, de tal forma que se pueden subdividir las microalgas en dos grandes grupos PROTOFITAS Y TALOFITAS (Tabla 1). PROTOFITAS: algas cuyo cuerpo se encuentra constituido por una sola clula y cuya forma primaria es la esfera; la misma desempea todas las funciones bsicas de los seres vivos. TALOFITAS: La estructura fundamental eucaritica es un cuerpo formado por una masa de clulas con poca diferenciacin a lo cual se le llama TALO.

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Tabla 1. Principales Caractersticas Morfolgicas de las Microalgas (Gonzlez, 1994)


GRUPO BASE PROTOFITAS SUBGRUPO Procariontes CARACTERIZACIN Clulas sin membranas internas que delimiten los organelos, pueden presentar zonas o regiones como son: nucleoide o centroplasma y cromoplasma o zona de pigmentacin (no se presentan elementos en el Reino Protista). Las clulas presentan membranas internas que delimitan perfectamente a todos los organelos, aqu se consideran los elementos unicelulares. Talo constituido por un agregado celular bien definido con respecto al arreglo y nmero de clulas que lo constituyen, su forma puede ser esfrica, cilndrica o filamentosa, etc. El conjunto esta rodeado por una matriz gelatinosa (mucilago) comn (CENOBIO), es pues una asociacin de talfitos que duran una sola generacin (todos mueren simultneamente a diferencia de la colonia) y los elementos descienden de una misma clula madre. Constituidos por una masa protoplasmtica multinucleada, carente de paredes celulares (PLASMODIO), se originan por la divisin del ncleo, sin haber formacin de membranas o por fusin de varias clulas que se renen y pierden sus membranas. Talo constituido por una masa protoplasmtica multinucleada en forma de tubo o sifn (CENOCITO), que resulta de diversas divisiones nucleares sin que haya divisin citoplasmtica, las paredes transversales solo se forman para dar lugar a las estructuras reproductoras. Este estadio tambin es conocido como SIFONADO cuando realmente no presentan tabiques transversales que separen clulas, y CENOCTICO cuando se presentan tabiques transversales entre clulas multinucleadas. Los talos estn conformados por agrupaciones celulares en las cuales se presenta divisin del trabajo, es decir, no todas las clulas realizan el conjunto de las funciones del organismo, sino existen clulas especializadas en funciones determinadas, asociacin de talfitos en la que las clulas proceden todas de una sola clula madre, similar a los cenobios pero ms permanentes y en la que se suceden las generaciones. (Fig. 4): CONSORCIOS, la agregacin se lleva a cabo despus de que se originan las clulas. COLONIAS VERDADERAS, la agregacin se realiza desde el momento del origen de las clulas. Considerando como verdaderos talos multicelulares, siendo el resultado de la divisin sucesiva de una sola clula a partir del cual se derivan clulas ntimamente unidas con membranas celulares compartidas, pueden ser simples o ramificados.

Eucariontes (Fig. 4) Cenobiales (Fig. 5) TALOFITAS

Plasmodiales (Fig. 6)

Cenocticas (Fig. 7)

Coloniales (Fig. 8)

Filamentosas (Fig. 9)

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Ornithocercus sp.

Surirella sp.

Discosphaera sp.

Chlamydomonas sp.

Figura 4. Protofitos eucariontes unicelulares

Cymbella sp. Filamentoso

Figura 5. Talofitos cenobiales

Planktoniella sp. Esfrico

Chlorella sp.

Tribonema sp. Cenoctica

Vaucheria sp. Sifonada

Figura 6. Talofito palmeloide

Figura 7. Talofito cenoctico

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Pediastrum sp. Radial o estrellado Ceratium sp. Chaetoceros sp. Consorcios filamentosos Thalassionema sp. En zig zag

CONSORCIOS

Phaeocystis sp. Esfrica sin diferenciacin evidente de trabajo

COLONIAS VERDADERAS

Volvox sp. Esfrica con alta diferenciacin de trabajo

Figura 8. Talofitas coloniales

Aulacoseira sp.

Figura 9. Talofitas filamentosas

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Considerando a los grupos animaloides, los protozoos, Lpez (1994), menciona que entre los indicadores taxonmico filogenticos distintivos de los diferentes phyla de los protzoos, destacan las caractersticas flagelares y ciliares, los cuerpos basales, centriolos y estructuras corticales o peliculares asociadas, formas seudopodiales y estructuras citoesquelticas de diversas clases, mitocondrias y caractersticas de su estructura y funcin, caracteres de los plastidios, estrucdtura del aparato de Golgi, la organizacin nuclear, caractersticas ecolgicas y de comportamiento, rasgos especficos bioqumicos y moleculares. Cada una de estas son descritas por Lpez y Serrano (1994), y se presentan en la Tabla 2. Tabla 2. Principales Caractersticas Morfolgicas de los Protozoos (Lpez y Serrano, 1994) CARACTERSTICA Esqueletos externos (Fig. 10) Organelos de locomocin (Fig. 11) Tamao y forma del cuerpo (Fig. 12) Organelos de adherencia a sustratos (Fig. 13) Organizacin celular (Fig. 14) DESCRIPCIN Productos no vivos del organismo (testas, conchas, lricas, placas, membranas de quistes, varillas silceas internas, etc.). Seudpodos, flagelos, cilios y sus modificaciones Existen todas las formas posibles (simetra radial y bilateral) y el tamao varia desde 106 m hasta 1m. Pednculos, ventosas, ganchos, espinas.

Unicelular, colonial como cenobios (discoidales, arborescentes, esferoidales), catenoides (amorfas o de forma irregular). Diferenciacin pelicular o superficial Ornamentaciones de las tecas, surcos, espinas, (Fig. 15) distribucin y modelo de los flagelos y la ciliatura. Cuerpos subpeliculares y sistemas fibrilares Grnulos basales, fibras cinetodesmales, (Fig. 16) raicillas ciliares y sistemas de mionemas en ciliados y flagelados. Organelos de alimentacin Presencia o ausencia de citostoma o de un (Fig. 17) aparato oral y posesin de estructuras como seudpodos, organelos ciliares y tentculos relacionados con la fagotrofa. Diferenciacin interna e inclusiones citoplasmticas Vacuolas, sistema mastigonte o (Fig. 18) cariomastigonte y otras inclusiones. Caractersticas nucleares Tipo de ncleos monomorfismo, dimorfismo (Fig. 19) (microncleo y macroncleo) y multinucleados.

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Eimeria sp. valvas

Ornithocercus sp. extensiones corporales

Peridinium sp. placas o tecas

Bolivina sp. conchas

Eucyrtidium sp. testas

Dictyocha sp. esqueletos internos

Dictyocysta sp. lricas

Figura 10. Esqueletos Externos

Leishmania sp. Flagelos

Arcella sp. Seudpodos

Euplotes sp. Cilios y membranelas

Figura 11. Organelos de Locomocin

Actinophrys sp. Simetra radial

Giardia sp. Simetra bilateral

Amoeba sp. Amorfos

Figura 12.Tamao y forma del Cuerpo

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Epistylis sp. Pednculos

Plasmodium sp. Ganchos

Giardia sp. Ventosas

Figura 13. Organelos de Adherencia a Sustratos

Opalina sp.

Unicelular

Sphaeroeca sp. Discoide

Proterospongia sp. Esfrica

Zootamium sp. Arborescente

Codonocladium sp. Catenoide o irregular

Multicelulares coloniales

Figura 14. Organizacin celular

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Actinelius sp.

Stauracon sp.

Trichonympha sp

Surcos, poros, espinas

Estras

Trichonympha sp. Disposicin de flagelos

Trypanosoma sp. membranas

Codonellopsis sp. Arcella sp. Disposicin de materia orgnica

Paramecium sp. Coleps sp. Disposicin de estras y cilios

Figura 15. Diferenciacin pelicular o superficial

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Grnulos basales

Estructura infraciliar

Fibras

Giardia sp. Axostilos

Trichonympha sp. Rostrum

Figura 16. Cuerpos subpeliculares y sistemas fibrilares

c c

Paramecium sp. Euplotes sp. Cistostoma (c) y membranelas (m)

Acineta sp. Tentculos alimentarios

Figura 17. Organelos de Alimentacin

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Leishmania sp. Uninucleado

Paramecium sp.
Vacuolas: a) contrctiles y b) digestivas

Trichonympha sp.
Cariomastigonte

Figura 18. Diferenciacin interna e inclusiones citoplasmticas

Macronclero

Micronclero Opalina sp. Multinucleado Binucleado

Figura 19. Caractersticas nucleares

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3. LAS TCNICAS DE TINCIN PARA LA OBSERVACIN DE ESTRUCTURAS CELULARES EN PROTISTAS La mayora de las clulas son diminutas para ser detectadas a simple vista, por lo cual se requiere el uso del microscopio para ver la forma y estructura de estas. Sin embargo, no solo el microscopio basta para ello, es necesaria la utilizacin de otros implementos que nos faciliten poder distinguir a las clulas y sus estructuras. El uso de sustancias especficas, permiten la observacin de las diferentes partes que las constituyen. Las tcnicas de tincin son diversas, pero en general todas buscan el mismo objetivo: lograr que el ndice de refraccin de las distintas estructuras celulares sea diferente, para que al ser atravesadas por la luz den una imagen no homognea. Si no se utilizarn colorantes, los rayos de luz pasaran a travs de las clulas sin modificar su trayectoria, o modificndola muy poco, y nos daran una imagen muy homognea, casi sin ninguna diferencia. Los mtodos de coloracin no funcionan si no consideramos algunos factores como los siguientes: Para que el objeto sea visible a travs del microscopio, este debe de poseer cierto grado de contraste con el medio circundante. El microscopio debe poseer un poder de resolucin suficiente para permitir la percepcin, como objetos separados, de dos puntos adyacentes muy prximos en la imagen. Una vez que estamos seguros de que se cumplen los anteriores requisitos, entonces podemos proceder al uso de los colorantes. La mayora de los colorantes son compuestos que tienen alguna afinidad especfica por las estructuras celulares. Con frecuencia son molculas cargadas positivamente (cationes - cidos) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los cidos nucleicos y los polisacridos cidos. Ejemplos de colorantes catinicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros son molculas cargadas negativamente (aniones - bsicos) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas protenas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina cida y el rojo congo. Los colorantes se clasifican en cidos, bsicos y neutros, segn la parte de los mismos que imparta el color. Las molculas de los colorantes estn constituidas de dos partes: Grupo cromforo, el cual confiere el color. Grupo axcromo, que le da la capacidad de transferir el color a la estructura. En los colorantes cidos el grupo cromforo (el que distribuye el color), es el componente cido, el componente bsico es incoloro. Lo contrario sucede con los colorantes bsicos. Los colorantes neutros tienen coloreado el componente cido y el bsico. La mayora de los colorantes son sintticos, aunque se emplean todava algunos naturales.

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Las soluciones colorantes tambin son clasificadas de acuerdo a su accin sobre clulas vivas o muertas: Soluciones colorantes no vitales: El Lugol, el carmn actico, el cristal violeta y la solucin colorante de Gram tien ciertas estructuras de la clula. Durante este proceso de coloracin o teido, algunas protenas son desnaturalizadas y la clula muere inmediatamente. Las clulas vivas no pueden ser estudiadas con estas soluciones. Soluciones colorantes vitales: En muchas ocasiones es necesario resaltar detalles especficos en clulas vivas. Las soluciones colorantes vitales matan los organismos lentamente, estos absorben las soluciones colorantes y continan con sus funciones vitales por algn tiempo. En consecuencia, es posible teir la clula viva para mostrar cilios, flagelos o estructuras intracelulares (ncleo, vacuolas, cloroplastos, etc.). Estas soluciones colorantes vitales son el azul de metileno, azul de crecil o crecilo, azul tripano, verde brillante, rojo neutro y el rojo congo. Existen cuatro tipos de tcnicas de tincin: simples, diferenciales, especficas y combinadas: Tinciones simples. En estas se usa un slo colorante, siempre de tipo bsico. Son usados exclusivamente para incrementar el contraste; todas las clulas absorbern el colorante y quedarn teidas del mismo color. Por tanto, la tincin simple mejora la observacin de la clula completa. Tinciones diferenciales Se utilizan para distinguir entre tipos de clulas. La tcnica de tincin diferencial consta de dos etapas: a) tincin primaria, siguiendo el mismo mtodo que en una tincin simple y b) tincin de contraste. En la tincin de contraste se utiliza otro colorante que tie las clulas no teidas por el primer colorante. Estas tinciones son muy utilizadas en microbiologa. Por ejemplo, la tincin de Gram y la tincin de cido-alcohol, ambas aplicadas a bacterias. Tinciones especficas Mientras las tinciones diferenciales permiten distinguir entre distintos tipos de clulas, las tinciones especficas incrementan el contraste en las mismas y revelan estructuras particulares, entre las que se incluyen las endosporas, los flagelos, las cpsulas, el ncleo, paredes celulares, cloroplastos, pirenoides y placas, entre otras. Coloracin combinada Se tien los elementos nucleares y citoplasmticos recurrindose, al empleo sucesivo de colores bsicos y cidos que contrastan por sus colores. En el estudio citolgico de las clulas vegetales se utilizan diferentes colorantes, los cuales se muestran en la Tabla 1, en la misma se describe la tcnica para su aplicacin y cules son los detalles de las estructuras celulares que permiten observar.

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Tabla 3. Colorantes ms utilizados en Citologa COLORANTE TCNICA DE APLICACIN ESTRUCTURAS CELULARES Es usado exclusivamente para incrementar el contraste de la pared celular, se pueden observar las interconexiones citoplasmticas entre clulas (puntos de conexin, cribum y plasmodesmos.), o bien extensiones de la pared celular como procesos alares o membranosos, papilas, trgonos, lamelas, etc.). Adems permite la diferenciacin de tejidos en caso de las plantas vasculares (xilema, floema, etc.). Es usado exclusivamente para incrementar el contraste; toda la clula absorber el colorante y quedara teida del mismo color. Por tanto, la tincin simple mejora la observacin de la clula completa y har resaltar los organelos ms grandes como ncleo y cloroplastos. Permite distinguir el o los ncleos, incrementando el contraste entre el citoplasma y el ncleo.

Azul de Crecil o Tincin simple, a la muestra se le agrega Crecilo directamente una o ms gotas del colorante (dependiendo del tamao de la misma). Si se trata de muestras acuosas de microalgas, nicamente se deber quitar el exceso mediante papel absorbente si es necesario. Cuando la muestra es ms grande, ya sean algas, musgos o plantas vasculares, entonces debemos de pasar agua gota a gota despus de haber agregado el colorante para hacer un lavado de la muestra y de esta manera quitar el excedente del colorante.

Azul de Metileno

Carmn Actico

Tincin simple, a la muestra se le agrega directamente una o ms gotas del colorante (dependiendo del tamao de la misma). Si se trata de muestras acuosas de microalgas, nicamente se deber quitar el exceso mediante papel absorbente si es necesario. Cuando la muestra es ms grande, ya sean algas, musgos o plantas vasculares, entonces debemos de pasar agua gota a gota despus de haber agregado el colorante para hacer un lavado de la muestra y de esta manera quitar el excedente del colorante. Tincin diferencial, se requiere de colocar la muestra en un portobjetos y agregar el suficiente colorante gota a gota hasta que cubra la misma. El portaobjetos es tomado mediante pinzas de diseccin y pasado varias veces por una flama hasta que comience a hervir, sin llegar a dejar secar completamente la muestra, sta se retira de la flama y se le coloca el cubre objetos: Con las mismas pinzas se sujeta el porta y cubreobjetos para hacerles pasar agua, de preferencia destilada, gota a gota hasta que la muestra queda lavada. Si se trata de muestras acuosas de microalgas, nicamente se deber quitar el exceso mediante papel absorbente si es necesario.

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Tabla 3. Colorantes ms utilizados en Citologa (Cont.)


Lugol Tincin diferencial, se requiere de colocar la muestra en un portobjetos y agregar el suficiente colorante gota a gota hasta que cubra la misma, se coloca el cubre objetos y con las pinzas de diseccin se sujeta el porta y cubreobjetos para hacerles pasar agua, de preferencia destilada, gota a gota hasta que la muestra queda lavada. Si se trata de muestras acuosas de microalgas, nicamente se deber quitar el exceso mediante papel absorbente si es necesario. Tincin simple, a la muestra se le agrega directamente una o ms gotas del colorante (dependiendo del tamao de la misma). Si se trata de muestras acuosas de microalgas, nicamente se deber quitar el exceso mediante papel absorbente si es necesario. Cuando la muestra es ms grande, ya sean algas, musgos o plantas vasculares, entonces debemos de pasar agua gota a gota despus de haber agregado el colorante para hacer un lavado de la muestra y de esta manera quitar el excedente del colorante. Permite distinguir las estructuras que contengan polisacridos como el almidn o sus derivados, incrementando el contraste entre el citoplasma y estas estructuras (pirenoides y cloroplastos).

Rojo Congo

Rojo Neutro

Rojo Sudn

Verde Brillante

Tincin simple, a la muestra se le agrega directamente una o ms gotas del colorante (dependiendo del tamao de la misma). Si se trata de muestras acuosas de microalgas, nicamente se deber quitar el exceso mediante papel absorbente si es necesario. Cuando la muestra es ms grande, ya sean algas, musgos o plantas vasculares, entonces debemos de pasar agua gota a gota despus de haber agregado el colorante para hacer un lavado de la muestra y de esta manera quitar el excedente del colorante. Tincin simple, a la muestra se le agrega directamente una o ms gotas del colorante (dependiendo del tamao de la misma). Si se trata de muestras acuosas de microalgas, nicamente se deber quitar el exceso mediante papel absorbente si es necesario. Cuando la muestra es ms grande, ya sean algas, musgos o plantas vasculares, entonces debemos de pasar agua gota a gota despus de haber agregado el colorante para hacer un lavado de la muestra y de esta manera quitar el excedente del colorante. Tincin diferencial, a la muestra adicione una o ms gotas de verde brillante. Lave con agua corriente, como se indica en los casos anteriores, Cubra la lmina con fluoroglucina durante 2 minutos. Transcurridos los 2 minutos elimine el exceso de colorante, cubra con cido clorhdrico, y coloque el cubreobjetos.

Es usado exclusivamente para incrementar el contraste de la pared celular, se pueden observar las interconexiones citoplasmticas entre clulas (puntos de conexin, cribum y plasmodesmos.), o bien extensines de la pared celular como procesos alares o membranosos, papilas, trgonos, lamelas, etc.). Adems permite la diferenciacin de tejidos en caso de las plantas vasculares (xilema, floema, etc.). Permite distinguir las vacuolas, incrementando el contraste entre el citoplasma y las vacuolas.

Sirve para poner de manifiesto la regin lipdica de la membrana.

Sirve para diferenciar los tejidos conductores. Si solamente se utiliza el verde brillante, incrementa el contraste; toda la clula absorber el colorante y quedara teida del mismo color. Por tanto, la tincin simple mejora la observacin de la clula completa y har resaltar los organelos ms grandes como ncleo y cloroplastos.

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4. OBJETIVO Obtener los conocimientos bsicos del manejo y limpieza de microscopios, para su correcta aplicacin en la observacin de organismos del reino protista. 5. MATERIALES Y EQUIPO Microscopio compuesto Porta y cubreobjetos Goteros Pipetas Pasteur Agujas de diseccin Colorantes: Lugol Azul de crecil Azul tripano Azul de metileno Carmn actico Rojo neutro Otros: Papel seda Papel higinico Aceite de inmersin Solucin limpia lentes Material biolgico: Muestras de agua dulce y marina

6. DESARROLLO DE LA PRCTICA Antes de iniciar tu sesin es conveniente que observes el microscopio que se te proporciono, familiarzate con l, toma en cuenta que existen diferentes modelos, pero en general tienen las mismas partes bsicas (Fig. 20).

Figura 20. Microscopios pticos compuestos

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Normalmente tu microscopio ya se encuentra calibrado (Fig. 21).

Figura 21. Fotografas que muestran cuando un microscopio est mal calibrado Para saberlo, es necesario que sigas estos pasos: a) Conecta el microscopio a la de toma corriente y encindelo, cuidado no subas toda la luz o te deslumbraras por un rato. b) Coloca una gota de agua con organismos en un portaobjetos y ponle el cubreobjetos, sitalo en la platina, asegrate de que el objetivo de 10x este en la posicin para observar, sube la platina hasta el tope mediante el tornillo macromtrico y observa tu muestra. Busca tu enfoque del organismo utilizando el tornillo micromtrico, no todos tenemos la misma definicin (Fig. 22).

Mal enfocado

Bien enfocado

Figura 22. Enfoque adecuado de tus muestras c) Ya que has logrado enfocar al organismo, ahora pasa el revlver al objetivo de 5x, en caso de no contar con este objetivo djalo en el de 10x. Cierra totalmente ambos diafragmas, sube toda la luz y trata de buscar un hexgono de luz bien definido y de un solo color en su entorno al centro del campo de observacin.

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SI TIENES EL HEXGONO DE LUZ, ENTONCES YA ESTA CALIBRADO TU MICROSCOPIO SINO TIENES EL HEXGONO DE LUZ O ESTA MUY DIFUSO O HACIA UN LADO, ENTONCES TU MICROSCOPIO NO ESTA CALIBRADO EL PROCESO DE CALIBRACIN DE LA LUZ DEL MICROSCOPIO a) Colocar una o dos gotas de muestra en un portaobjetos y ponle su cubreobjetos (puedes usar la misma muestra del paso anterior). b) Enfoca con el objetivo de 5x cualquier partcula orgnica o inorgnica. c) Sube a su tope mximo la luz (CUIDADO HAZLO SIN OBSERVAR POR EL OCULAR). d) Cierra ambos diafragmas (el del condensador y el de la fuente de luz). e) Observa por los oculares, busca un hexgono de luz perfectamente definido en el interior del campo de observacin. f) Si el hexgono de luz no est definido, utiliza el tornillo de elevacin del condensador para subir el mismo hasta delimitar perfectamente la figura del hexgono. g. Checa que ese hexgono de luz se encuentre en el centro del campo. h) Si el hexgono esta desplazado hacia algn lado fuera del centro, utiliza los tornillos del condensador para desplazarlo lentamente hacia el centro del campo de observacin (Fig. 23).

Figura 23. Desplazamiento del hexgono de luz mediante los tornillos del condensador i. Una vez ubicado en el centro del campo el hexgono de luz, procede a abrir el diafragma de la fuente de luz, el del condensador mantenlo cerrado, BAJA LA INTENSIDAD DE LA LUZ. j) Ahora s, ya est listo el microscopio para poder utilizarlo, pasa el revlver al objetivo de 10x y busca los organismos en tu muestra.

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k) Si deseas ms detalle de lo que estas observando puedes seguir dos pasos: i. Pasar del objetivo de menor aumento a uno de mayor aumento, si la distancia focal es la correcta, entonces este paso es automtico, es decir, si tu mueves el revlver a cualquiera de los objetivos de mayor aumento no tendrs ningn problema, por precaucin hazlo lentamente, cuando pases del objetivo de 10x al de 40x, si notas que va a chocar con tu portaobjetos entonces baja un poco la platina y pasa el objetivo, despus enfoca con el tornillo micromtrico y listo a observar. ii) Si deseas hacer observaciones a detalle ya sea en un organismo muy pequeo o para ubicar algn organelo, entonces tendrs que utilizar el objetivo de 100x. CUIDADO Este objetivo solamente se puede usar con ayuda de un aceite especial que normalmente es de cedro, por eso se le llama objetivo de inmersin Para colocar la pequea gota de aceite, primero cierra el diafragma de la platina hasta que quede un pequeo rayo de luz en el rea del cubreobjetos donde deseas observar, mueve el revlver a que quede entre el objetivo de 40x y el de 100x, en el haz de luz agrega la pequea gota sobre el cubreobjetos, ahora abre tu diafragma y pasa automticamente, pero lentamente, al objetivo de inmersin, checa que este no vaya a pegar con el cubreobjetos, si es as, entonces baja un poco la platina y enfoca despus con el tornillo micromtrico. Una vez que se haya puesto el aceite de inmersin sobre el cubreobjetos, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Ya finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin. NOTA: Limpia el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica, as mismo comprueba tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio. 7. OBJETIVO Observar y diferenciar las estructuras citolgicas y morfolgicas de organismos del Reino protista 8. MATERIALES Y EQUIPO Microscopio compuesto Porta y cubreobjetos Goteros Pipetas Pasteur Agujas de diseccin Colorantes: Lugol Azul de crecil Azul tripano Azul de metileno Carmn actico Rojo neutro Otros: Papel seda Papel higinico Aceite de inmersin Solucin limpia lentes Material biolgico: Muestras de agua dulce y marina
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9. DESARROLLO DE LA PRCTICA Para la prctica se ocuparan muestras de agua dulce con organismos vivos y fijados con formol y marinas fijadas con formol. El anlisis de las primeras, permitir diferenciar entre microalgas y protozoos, para lo cual debemos observar si los organismos presentan o no plastidios y el color que estos tienen, adems, tambin nos da la oportunidad de poder distinguir otros organelos como la pared celular, el periplasto o la membrana celular, los ncleos, ornamentaciones, y algo ms interesante, el movimiento que pudieran tener. El anlisis de las muestras fijadas nos dar la oportunidad de observar una mayor diversidad de organismos y muchas de las ornamentaciones que no son fcilmente distinguibles cuando los organismos estn vivos. Para llevar a cabo esta actividad, sigue los pasos que a continuacin se te muestran: a) Coloca sobre el portaobjetos una o dos gotas de muestra conteniendo sedimentos de agua dulce fresca no fijada con formol, ponle el cubre objetos, procurando que la muestra quede extendida a lo largo y ancho del cubreobjetos (Fig. 24)

Gotas de agua

Figura 24. Preparacin de la muestra para la observacin en microscopio ptico b) Sita el portaobjetos sobre la platina y observa. Recuerda que observar, no solo implica ver, tambin se requiere de que analices lo que contiene la muestra para poder diferenciar cules organismos son protistas y cules no. Ya que ubiques los posibles protistas, hay que distinguir las microalgas de los protozoos. En una muestra de agua con organismos vivos: Cmo podras diferenciar a una microalga de un protozoo? Explica:

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Si consideras lo expuesto en las Tablas 1 y 2, te dars cuenta de que algunas o muchas de las caractersticas de los protistas, no se pueden observar tan fcilmente. Qu materiales, equipos y/o sustancias tendras que utilizar para hacer resaltar las caractersticas citolgicas en los organismos que ests viendo? Explica: Para el tipo de cubierta externa (membrana celular, periplasto, pared celular, ornamentaciones).

Para grnulos de reserva (pirenoides en su caso) y plastidios (forma y posicin).

Para ncleo o ncleos (forma y posicin).

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Algunos mtodos para aplicar los colorantes c) Si tu muestra ya est preparada, es decir, si vas a utilizar la misma muestra de la fase anterior, basta con agregar una o dos gotas del colorante elegido por un extremo del cubreobjetos, teniendo cuidado de no derramar la muestra sobre el cubreobjetos, inclina ligeramente el portaobjetos y permite que el colorante se diluya en la muestra (Fig. 25)

Figura 25. Procedimiento para agregar el colorante a una muestra ya preparada d) Si vas a realizar una preparacin a partir de muestras fijadas con formol, agua dulce o marinas, sin agitar el agua, coloca una o dos gotas de la misma con sedimento y solamente tienes que agregar una o dos gotas del colorante elegido, revuelve ligeramente la muestra con una aguja de diseccin y sigue los mismos pasos que en la Figura 24. Para la observacin del o los ncleos, se puede utilizar una tcnica ms especfica para el caso de filamentos a base de Carmn Actico. e) Coloca una muestra de filamentos en un portaobjetos, agrega una o dos gotas de Carmn Actico y deja reposar por 2 minutos. f) Antes de colocar el cubreobjetos, mediante las pinzas de diseccin sujeta el portaobjetos y psalo por una flama de mechero, calentando lentamente hasta que la muestra se ponga densa. g) Una vez calentada la muestra coloca el cubreobjetos y sujetndolo con las mismas pinzas, procede a eliminar el excedente de colorante mediante goteo lento del grifo, esquinando tu muestra, OJO DEBE SER A GOTEO O TU MUESTRA DESAPARECERA. Seca tu portaobjetos por la parte de abajo, en tanto que el cubreobjetos scalo con una esquina de un cuadro de papel higinico (Fig. 26)

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Figura 26. Procedimiento para preparar una muestra con Carmn Actico

Finalmente un aspecto importante lo constituye la morfologa y organizacin celular, esto se pueden observar a partir de las muestras que tu preparaste. Esta prctica se dar en cinco sesiones, considerando el siguiente material biolgico: PRIMERA SESIN MICROALGAS CRYPTOPHYTA: Cryptomonas sp. XANTOPHYTA: Vaucheria sp. y Tribonema sp. DICTYOCHOPHYCEAE: Dictyocha sp. HAPTOPHYTA: Emiliania sp., Gephyrocapsa sp. EUGLENOPHYTA: Euglena sp., Phacus sp., Trachelomonas sp. SEGUNDA SESIN MICROALGAS DINOPHYTA: Gymnodinium sp., Ceratium sp., Peridinium sp., Protoperidinium sp. DIATOMEAS CENTRALES: Coscinodiscus sp., Rhizosolenia sp., Chaetoceros sp. DIATOMEAS PENNALES: Navicula sp., Gomphonema sp., Synedra sp., Fragilaria sp., y Cocconeis sp. TERCERA SESIN SARCODINOS DE VIDA LIBRE DESNUDOS: Amoeba sp. LORICADOS: Arcella sp. CON CONCHAS (FORAMINFEROS): varios gneros TECADOS (RADIOLARIOS): varios gneros

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CUARTA SESIN PROTOZOOS ASOCIADOS KINETOPLSTIDOS: Trypanosoma sp., y Leishmania sp. DIPLOMONADIDOS: Giardia sp. HIPERMASTIGINOS: Trichonympha sp. SARCODINOS DESNUDOS: Entamoeba hystolitica QUINTA SESIN CILIADOS OPALNIDOS: Opalina sp. CILIOPHORA: Paramecium sp., Euplotes sp., Vorticella sp.y Favella sp. ES IMPORTANTE QUE DE CADA MUESTRA REALICES ESQUEMAS DE LOS ORGANISMOS OBSERVADOS, COLOCNDOLES LOS NOMBRES DE LAS ESRUCTURAS VISIBLES Realiza un cuadro comparativo de los gneros observados, utiliza los que se te presentan a continuacin: REALICE UNA CLAVE DICOTMICA ARTIFICIAL TOMANDO EN CUENTA LOS TIPOS MORFOLGICOS OBSERVADOS.

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GNERO

TIPO DE CUBIERTA EXTERNA

ORGANELOS DE LOCOMOCIN

TAMAO Y FORMA DEL CUERPO

ORGANIZACIN CELULAR

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GNERO

DIFERENCIACIN ESTRUCTURAS DIFERENCIACIN NMERO DE SUPERFICIAL ALIMENTARIAS INTERNA NCLEOS (ORGANELOS)

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PRCTICA N 4 COLECTA, FIJACIN Y PRESERVACIN DE PROTISTAS DULCEACUCOLAS 1. INTRODUCCIN Los grupos vegetaloides (microalgas) y animaloides (protozoos), se encuentran en una gran diversidad de sistemas tanto terrestres como acuticos, en el caso particular de los sistemas dulceacucolas, ambos grupos los ubicamos en los gremios del PLANCTON y PERIFITON. Entendemos como plancton, aquel gremio compuesto por organismos que se encuentran en la superficie del agua flotando libremente los cuales no son capaces de contrarrestar las corrientes, an cuando presentan cierto movimiento es de poca importancia, sin embargo, ste si juega un papel significativo en cuanto a la alimentacin. Considerando su ciclo de vida este gremio se divide en: a) EUPLANCTON, constituido por organismos cuyo ciclo de vida es totalmente planctnico. b) TICOPLANCTON, formado por organismos que una parte de su ciclo de vida es planctnico y otra generalmente bentnico. Adems los planctontes tambin se separan de acuerdo al tamao que estos presentan, establecindose la siguiente clasificacin: a) MACROPLANCTON , organismos mayores de 500 m. b) MICROPLANCTON, organismos entre 20 m y 500 m. c) NANNOPLANCTON, organismos entre 2 m y 20 m. d) PICOPLANCTON, organismos menores de 2 m. La captura de organismos planctnicos se lleva a cabo mediante diferentes tcnicas, dependiendo de los objetivos establecidos: a) Por el tamao de los organismos Bajo esta situacin es conveniente que se utilicen redes cnicas (Fig. 1), de abertura de malla menor de 50, puesto que arriba de esta abertura no se captura el nannoplancton ni el picoplancton. Una red con estas caractersticas no siempre es 100 % eficiente, ya que deja escapar las formas ms pequeas menores de 5 m. Los colectores de este tipo se utilizan solamente para trabajos de tipo cualitativo.

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a) De Arrastre

b) De Cuchara

Figura 1. Redes Cnicas Si queremos realizar cuantificaciones, entonces debemos utilizar un colector directo, como las botellas Van Dorn (Fig. 2), o bien un muestreador Schindler-Patalas (Fig. 3), an cuando se requiere de un proceso posterior de sedimentacin, estos son ms eficientes en la captura de todos los tamaos de organismos planctnicos, adems, sirven para obtener muestras en diferentes niveles verticales en cuerpos de agua con ms de dos metros de profundidad.

a) Vertical

b) Horizontal

Figura 2. Colectores Van Dorn

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Figura 3. Muestreador Schindler-Patalas b) Por la profundidad de los sistemas Si se trata de sistemas con profundidades mayores de cinco metros, es conveniente la utilizacin de redes cnicas de arrastre, para lo cual se utiliza una lancha con motor fuera de borda, mantenindose una velocidad baja ms o menos constante. El arrastre puede ser horizontal ya sea en lnea recta, zig-zag o circular (Fig. 4), o vertical para lo cual a la red se le coloca una plomada, ya sea en el aro mayor o en la unin de los cabos, bajndose a una profundidad generalmente definida por la transparencia del sistema y efectuando un movimiento diagonal del fondo hacia arriba (Fig. 5).

Figura 4. Colecta por arrastre horizontal con lancha de motor fuera de borda

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Figura 5. Colecta por arrastre vertical con lancha de motor fuera de borda Si los sistemas presentan profundidades menores de cinco metros o son charcas temporales, canales, bordos, lagunas y lagos con profundidades menores de un metro, no es conveniente usar lancha con motor fuera de borda, ni redes de arrastre; en estos casos se recomienda una lancha movida por remos, procurando mantener tambin una velocidad constante en lo posible, la red recomendable es pequea y con un mango llamada RED DE CUCHARA (Fig.1b). Es posible que ni siquiera se pueda utilizar la lancha, cuando as ocurra entonces la colecta tendr que realizarse de manera estacionaria, es decir, el agua se colecta mediante una cubeta la cual se hace pasar a travs de una red cnica de arrastre (Fig. 6), o bien utilizando una red de cuchara (Fig. 7), la cual se arrastra calculando un tiempo aproximado de cinco minutos o menos, para obtener una buena concentracin y representacin de organismos la cantidad de agua que deber de filtrarse depender de las condiciones del sistema, si este es eutrfico se recomienda como mximo 20 l, de lo contrario si es oligotrfico se filtrarn arriba de 100 l.

Figura 6. Muestreo estacionario con red de arrastre

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Figura 7. Muestreo estacionario con red de cuchara Independientemente del mtodo utilizado, las muestras se pueden transportar al laboratorio de dos formas: 1) fijadas con formol al 4% y 2) en vivo a bajas temperaturas para evitar la degradacin natural, es preferible hacerlo de las dos formas, mxime si se van a utilizar en los microcultivos. El perifiton se caracteriza como una derivacin del bentos, es decir, son organismos que se encuentran fijos o entorno a diversos sustratos, de acuerdo a esto se clasifican en: a) EPIFITOS, aquellos que viven sobre las plantas y sus races. b) EPIXILTICOS las que se localizan sobre la madera muerta. c) EPILTICOS o las relacionadas con rocas o concretos prefabricados, as como metales o vidrio. d) EPIZOICOS ubicadas sobre organismos animales, por ejemplo: conchas, carapachos de tortugas, etc. e) ENDOZOICOS que se encuentran dentro de las conchas, caracoles, carapachos, recto de larvas de insectos, etc. f) EPISMICOS, que viven sobre la superficie del fondo lodoso. Algunos organismos se encuentran relacionados con sustratos que el humano a introducido en los ecosistemas, es el caso de pedazos de tela, plsticos, PVC, entre otros, en este sentido nos referimos al nombre directo del sustrato. La colecta del perifiton (Fig. 8), se lleva a cabo en los diferentes sustratos, las muestras se obtienen raspando la superficie de los mismos, utilizando para ello un cuchillo, navaja o esptula para aquellos sustratos duros o bien un cepillo de dientes para los suaves, en este ltimo caso el raspado se realiza de manera circular, algunos sustratos como plantas acuticas pueden ser exprimidos suavemente dentro de una bolsa de plstico o frasco.

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Figura 8. Muestreo del perifiton

Figura 9. Cuadros para el muestreo cuantitativo

Si el estudio que nos planteamos requiere de cuantificaciones, entonces adems de la tcnica descrita arriba, se requiere de cuadros que nos permitan obtener muestras por reas definidas (Fig. 9). Las muestras as obtenidas son colocadas en bolsas o frascos de plstico, uno por cada sustrato, las cuales pueden ser transportadas en vivo o fijadas con formol al 4 %. Independientemente del gremio que se pretenda colectar, las muestras debern de portar una etiqueta (Fig. 10) para asegurar que nuestros ejemplares no se van a confundir con otros materiales.
Localidad: ___________________________________ Municipio: ___________________________________ Fecha ____________ Hora de colecta _____________ Coordenadas: _________________________________ ______________________________________________ Plancton: Tipo de colector: ______________________________ Tiempo de muestreo: ___________________________ Cantidad del Concentrado: ______________________ Fijador: ______________________________________ Nombre del colector: ____________________________ Localidad: _______________________________ Municipio: ________________________________ Fecha ________Hora de colecta _______________ Coordenadas: _____________________________ __________________________________________ Perifiton: Tipo de sustrato: ___________________________ Color de la muestra: ________________________ Dimensiones de cuadro: _____________________ Fijador: ___________________________________ Nombre del colector: ________________________

Figura 10. Etiquetas para muestras de plancton y perifiton La etiqueta deber de colocarse pegada por fuera del frasco o bolsa, pero adems los mismos datos se anotaran en la libreta de campo. 2. OBJETIVOS Realizar uno o varios muestreos de sistemas dulceacucolas someros para obtener material biolgico, que nos permita su correcta identificacin y/o determinacin. Determinar las variables ambientales fisicoqumicas del sistema muestreado, que permita tener una visin de las condiciones bajo las que se desarrollan los Protista.

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3. EQUIPO Y MATERIALES Red cnica de cuchara con abertura de malla de 39m Frasco de vidrio aproximadamente de 200 250 mililitros Frascos de vidrio de cuatro litros con tapa Termmetro Brjula Altmetro Papel indicador de pH Equipo winkler para oxgeno disuelto Cinta mtrica Libreta de trnsito (diario de campo) Lpiz nmero dos Marcador grueso de tinta permanente contra el agua Disco de Sechii Zonda graduada en metros Escala de Beaufort (velocidad del viento) 4. DESARROLLO DE LA PRCTICA Determinacin de parmetros fisicoqumicos a) Antes de iniciar la colecta de plancton y perifiton es necesario realizar la determinacin de los parmetros fisicoqumicos mencionados en los objetivos, para lo cual se debern de tomar en cuenta los siguientes pasos: i. Determine la transparencia del sistema utilizando para ello el disco de secchi, las unidades a utilizar sern los centmetros. ii. Obtenga la profundidad del medio, para lo cual se auxiliarn del disco de secchi, al igual que la transparencia las unidades sern los centmetros. iii. Determine la temperatura del agua (superficie y fondo). iv. Utilizando un frasco para DBO y mediante el adaptador obtenga una muestra de agua, recuerde que no debe provocar burbujas, puesto que alterara los resultados de oxgeno disuelto, una vez obtenida la muestra aplique la tcnica de Winkler para determinar el oxgeno disuelto. v. A la sombra pero en el medio areo determine la temperatura. vi. Mediante la escala de porcentaje determine la nubosidad. vii. Utilizando la escala de Beaufort determine la velocidad del viento, adems de la direccin del mismo con ayuda de la brjula.
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Colecta de plancton y perifiton a) Con base a las caractersticas del estanque rstico asignado para llevar a cabo los muestreos, determinar que tipo de equipo se deber utilizar. b) Una vez elegido el material se procede a la colecta, la cual implica los siguientes pasos: i. Con la red de cuchara de 39m, realice varios arrastres manuales sobre la superficie y fondo del rea elegida, durante 5 minutos. ii. Despus de cada arrastre vaci el contenido de la red en un frasco de vidrio de cuatro litros, cercirese de que todo el contenido de la red se vaci al frasco, de ser necesario utilice agua del medio para enjuagar la red. iii. El frasco de vidrio debe contener la suficiente agua (aproximadamente la mitad), para evitar la excesiva concentracin de organismos y con ello la descomposicin rpida de los mismos. iv. Con un marcador de tinta permanente escriba sobre el cristal el nombre de la localidad, fecha y hora de colecta, as como los nombres de los integrantes del equipo y seccin. v. Es conveniente que en el frasco tambin se coloquen algunas de las plantas acuticas del medio. Una vez concluida la actividad, los frascos de vidrio sern transportados al laboratorio para su mantenimiento.

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PRCTICA N 5 COLECTA, FIJACIN Y PRESERVACIN DE PROTISTAS MARINOS Y COSTEROS 1. INTRODUCCIN Los ecosistemas marinos conforman un grupo heterogneo, en trminos generales se pueden dividir considerando la distancia con respecto a la orilla, en este sentido se pueden detectar dos grandes provincias: a) La Nertica y b) La Ocenica (Fig. 1). a) La provincia nertica. Esta corresponde a la zona ms cercana a la lnea de costa, bsicamente la podemos ubicar sobre la plataforma continental, y aproximadamente tiene una amplitud de 200 m, por su proximidad al continente y por su menor profundidad, muestra condiciones ambientales ms variables en el tiempo y en el espacio, permitiendo que se encuentre en ella esta gran diversidad de formas vivas, presenta abundante microflora (algas) y microfauna (protozoos), ya que sus aguas tienden a ser ms ricas, por contar con los nutrientes y porque la luz solar penetra en toda ella y por la accin del oleaje y las corrientes, se acumula gran cantidad de nutrientes, lo que permite un rico crecimiento de algas. Muchas de las especies encontradas aqu generalmente no se localizan en otros lugares del mar o en aguas abiertas; los microorganismos, adems de ser abundantes, presentan gran diversidad, al grupo pelgico se le denomina PLANCTON NERTICO. b) La provincia ocenica. Se presenta ms all de los 200 m de la lnea de costa, arbitrariamente se dice que comienza donde termina la plataforma continental, es un ambiente netamente pelgico (que corresponde a la totalidad de la masa de agua). En esta zona se va a distribuir el llamado PLANCTON OCENICO, con una diversidad menor de especies que el plancton nertico, y en este dominan los representantes microalgales sobre los protozoos.

Figura 1. Provincias marinas

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Considerando su ciclo de vida en el medio marino el plancton ha sido clasificado de la siguiente manera: a) EUPLANCTON, organismos cuyo ciclo de vida es totalmente planctnico. b) MEROPLANCTON, formado por organismos que parte de su ciclo de vida son planctnicos y otra generalmente bentnicos. c) TICOPLANCTON, formado por organismos incidentales en el plancton. En el plancton marino tambin se clasifica de acuerdo al tamao, como en el caso de los cuerpos de agua continentales. Para la colecta de plancton marino se requieren diferentes modelos de muestreadores, dependiendo de los objetivos del trabajo que se vaya a realizar; generalmente se consideran colectas para estudios cuantitativos y cualitativos. a) Estudios cuantitativos La colecta para este tipo de investigaciones requiere de dos modelos de colectores: a) Botellas tomamuestras (Fig, 2 y 3) y b) Tubos segmentados (Fig. 4).

Figura 2. Botella tomamuestras tipo Van Dorn

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Individual

En carrucel

Figura 3. Botella tomamuestras tipo Niskin

Figura 4. Tubo muestreador segmentado

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b) Estudios cualitativos La colecta para este tipo de investigaciones requiere solamente de redes de tipo cnico, cuya abertura de malla va desde 20 m hasta 100 m, los modelos de las mismas son muy variados, dependen del tipo de muestreo que se quiera realizar. i) Colecta vertical en reas profundas (Fig. 5)

Figura 5. Redes de cierre para colecta vertical ii) Colecta horizontal en reas profundas (Figs. 6 y 7)

Figura 6. Redes de aro estndar para colecta horizontal

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Figura 7. Redes tipo bongo para colecta horizontal c) Redes para colecta en reas someras En este tipo de reas la recolecta puede realizarse con red cnica de aro o de cuchara (Figs. 8 y 9), de manera estacional o por arrastre.

Muestreo estacionario

Muestreo estacionario

Muestreo por arrastre

Muestreo por arrastre

Figura 8. Red de aro estndar

Figura 9. Red de cuchara

A diferencia de la recolecta en los cuerpos de agua continentales (dulceacucolas y salobres), el tamao de las redes puede variar mucho, adems, para la provincia nertica, se requiere de una embarcacin, mnimamente de 7 m de eslora y motor fuera de borda, lo cual implica poder realizar muestreos en circulo o en zig-zag (Fig. 10), y en el caso de la provincia ocenica forzosamente se deber de utilizar una embarcacin de mayor calado (Fig. 11).

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Figura 10. Embarcaciones con motor fuera de borda para la Provincia Nertica

B/O El Puma B/O Justo Sierra Buques oceanogrficos (B/O) de la UNAM

B/O CICESE 1

Buques oceanogrficos (B/O) de la Secretara de Marina de Mxico

Figura 11. Embarcaciones oceanogrficas para trabajo en la Provincia Ocenica

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Otra diferencia que existe con respecto a la colecta de plancton en medios dulceacucolas y salobres, es el tiempo de duracin de los arrastres en embarcaciones, estos dependen de la trasparencia y la coloracin del agua de mar, cuando la trasparencia es mayor de un metro y la coloracin es de un azul oscuro, el tiempo de arrastre ser aproximadamente de cinco minutos, mientras que si la trasparencia es menor de un metro y la coloracin del agua va de un verde amarillento a un caf rojizo el tiempo deber de reducirse hasta dos minutos, incluso cuando existen fenmenos como las mareas rojas el arrastre se suprime ya que las redes se acolmatan inmediatamente y corremos el riesgo de que nuestra malla se rompa. 2. OBJETIVOS Realizar uno o varios muestreos de sistemas marinos y costeros para obtener material biolgico, que nos permita su correcta identificacin y/o determinacin. Determinar las variables ambientales fisicoqumicas del sistema muestreado, que permita tener una visin de las condiciones bajo las que se desarrollan los Protista. 3. EQUIPO Y MATERIALES Red cnica de cuchara con abertura de malla de 39m Frasco de vidrio aproximadamente de 200 250 mililitros Frascos de plstico de cuatro litros con tapa Termmetro Brjula Papel indicador de pH Equipo winkler para oxgeno disuelto Kit para nutrientes Libreta de trnsito (diario de campo) Lpiz nmero dos Marcador grueso de tinta permanente contra el agua Disco de Sechii Zonda graduada en metros Escala de Beaufort (velocidad del viento) 4. DESARROLLO DE LA PRCTICA DETERMINACIN DE VARIABLES FISICOQUMICAS a) Antes de iniciar la colecta de plancton es necesario realizar la determinacin de las variables fisicoqumicas mencionados en los objetivos, para lo cual se debern de tomar en cuenta los siguientes pasos: i. Determine la transparencia del sistema utilizando para ello el disco de Secchi, las unidades a utilizar sern los centmetros.

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ii. iii. iv.

v. vi. vii. viii.

Obtenga la profundidad del medio, para lo cual se auxiliarn del disco de Secchi, las unidades sern los centmetros o metros. Determine la temperatura del agua (superficie y fondo). Utilizando un frasco para DBO y mediante el adaptador obtenga una muestra de agua, recuerde que no debe provocar burbujas, puesto que alterara los resultados de oxgeno disuelto, una vez obtenida la muestra aplique la tcnica de Winkler para determinar el oxgeno disuelto. Mediante el kit determine los nutrientes. A la sombra en el medio areo determine la temperatura. Mediante la escala de porcentaje determine la nubosidad. Utilizando la escala de Beaufort y Douglas (Tabla 1), determine la velocidad del viento y oleaje, adems de la direccin del mismo con ayuda de la brjula. Tabla 1. Escala de Beaufort y Douglas

Valor Escala de Beaufort

Nombre

Valor (km/h) Tierra

Efectos Mar

Altura olas (m)

Valor Escala Douglas

Nombre

Calma

Ventolina

1-5

Flojito

6-11

Flojo

12-19

Moderado

20-28

Fresquito

29-38

Fresco

39-50

Las hojas de los rboles se mueven, el humo se eleva verticalmente Las hojas de los rboles no se mueven, el humo se eleva en pequeas ondulaciones Las hojas de los rboles susurran, las banderas ondean ligeramente Las hojas de los rboles estn en constante movimiento, las banderas estn extendidas al viento Las ramas pequeas de los rboles se mueven, las banderas ondean Se balancean los rboles pequeos, las banderas ondean dando aletazos Las ramas grandes de los rboles se balancean, las banderas ondean fuertemente Los rboles grandes se mueven fuertemente

Mar completamente en calma como un espejo. En el mar hay pequeas ondulaciones, rizos como escamas de pescados pero sin espuma Olas pequeas en el mar, de apariencia vtrea sin romperse Pequeas olas en el mar, crestas rompientes, espuma de aspecto vtreo y aislados vellones de espuma Pequeas olas creciendo, cabrilleo numeroso y frecuente de las olas Olas medianas alargadas, cabrilleo con salpicaduras

Llana

0.1

Rizada

0.2-0.5

Marejadill a

0.6-1

Marejada

1-2

Fuerte marejada

2-3

Mar gruesa

Se forman olas grandes, crestas de espuma blanca y salpicaduras El mar crece, la espuma blanca que proviene de las olas es arrastrado por el viento

3-4

Muy gruesa

Frescachn

51-61

4-5.5

Muy gruesa

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Tabla 1. Escala de Beaufort y Douglas (continuacin)


Valor Escala de Beaufort Valor (km/h) Efectos Altura olas (m) Valor Escala Douglas

Nombre

Nombre

10

11

12

Olas de altura media y ms alargadas, del borde superior Las ramas pequeas de Temporal 62-74 de sus crestas comienzan a 5.5-7 los rboles se rompen destacarse torbellinos de salpicaduras Grandes olas, espesas estelas Las ramas grandes de de espuma a lo largo del Temporal los rboles se rompen, viento, las crestas de las olas 75-88 7-9 Fuerte las lminas de los se rompen en rollos, las tejados vuelan salpicaduras pueden reducir la visibilidad Olas muy grandes con largas crestas en penachos, la Los rboles son espuma se aglomera en Temporal arrancados, se grandes bancos y es llevada 89-101 10-11.5 Duro producen daos en las por el viento en espesas casas estelas blancas en conjunto la superficie esta blanca, la visibilidad esta reducida Olas de altura excepcional, pueden perderse de vista tras Se producen daos Temporal ellas barcos de tonelaje 102-117 generalizados en 11.5-14 muy Duro pequeo y medio, mar rboles y casas cubierto de espuma, la visibilidad esta reducida En el mar aire lleno de Grandes y extensos espuma, salpicaduras Temporal daos en las casas, > 117 abundantes, mar cubierto de > 14 Huracanado muchos rboles espuma y visibilidad muy arrancados reducida.

Arbolada

Montaosa

Montaosa

Montaosa

Enorme

COLECTA DE PLANCTON a) Con base a las caractersticas del sistema asignado para llevar a cabo los muestreos, determinar qu tipo de equipo se deber utilizar. b) Una vez elegido el material se procede a la colecta, la cual implica los siguientes pasos: Mediante red de cuchara para reas muy someras i. ii. Con la red de cuchara de 39m, realice varios arrastres manuales sobre la superficie y fondo del rea elegida, hasta obtener un concentrado abundante. Vaci dos veces el contenido del frasco colector en un frasco de plstico de grande, cercirese de que todo el contenido de la red se vaci al frasco, de ser necesario utilice agua del medio para enjuagar la red.

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iii. iv. v.

vi.

El frasco de vidrio debe contener la suficiente agua (aproximadamente la mitad), para evitar la excesiva concentracin de organismos y con ello la descomposicin rpida de los mismos. Con un marcador de tinta permanente escriba sobre el cristal el nombre de la localidad, fecha y hora de colecta, as como los nombres de los integrantes del equipo y seccin. Realice una segunda colecta colocando el material capturado en un frasco pequeo el cual debe contener previamente el formol necesario para que la muestra quede a una concentracin final del 3 %. Con un marcador de tinta permanente escriba sobre el frasco y su tapa el nombre de la localidad, fecha y hora de colecta, as como nmero de equipo y seccin, adems de pegar una etiqueta con los datos correspondientes, los cuales debern de vaciarse tambien a su diario de campo. Mediante red de arrastre convencional para reas profundas

i. ii.

En una lancha con motor fuera de borda se llevar a cabo el arrastre mediante una red cnica con malla de 39 m, el tiempo de arrastre depender de la trasparencia y el color del agua. Una vez hecho el arrastre, se deber de bajar con agua del medio el contenido de plancton que se haya pegado en la malla, para posteriormente vaciar este en un frasco de plstico, previamente etiquetado y con el formol necesario para que la muestra quede a una concentracin final del 3 %.

Una vez que has elaborado el proyecto de investigacin, vas a requerir de ayuda para poder identificar los organismos que pudieras encontrar en las muestras de agua que hayas colectado o se te proporcionen , para lo cual las siguientes prcticas te sern de utilidad. En todas ellas requerirs de materiales y equipos bsicos los cuales se mencionan a continuacin: Microscopio compuesto Porta y cubreobjetos Goteros Pipetas Pasteur Agujas de diseccin Papel seda Papel higinico Aceite de inmersin Solucin limpia lentes

Estos materiales son comunes para todas las prcticas, adems de ellos, en cada una se te har mencin de los colorantes que ocupars y para que sern necesarios. RECUERDA A PARTIR DE AQU SOLAMENTE SE TE PROPORCIONAN GUAS PARA TU PROCESO DE INVESTIGACIN, LA PARTE MS IMPORTANTE TE CORRESPONDE A TI, ES EL INICIO DE UNA NUEVA ETAPA EN EL PROCESO DE TU FORMACIN DENTRO DE ESTA FACULTAD. En este sentido el objetivo principal a partir de la Prctica N 6, es el de proporcionarte una gua para el anlisis de los posibles especies que puedas encontrar en las muestras colectadas en los diferentes sistemas acuticos y de aquellas asociadas con otros organismos.

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PRCTICA N 6 PROTOZOOS ASOCIADOS SARCOMASTIGOPHOREA (flagelados y sarcodinos) FLAGELADOS 1. INTRODUCCIN Estos organismos son considerados como protistas animaloides hetertrofos, la mayora de estos son parsitos, otros son de vida libre, comensales o simbiontes; pueden ser desde formas ameboides, ovoides circulares, entre otros con o sin flagelos, entre sus orgnelos caractersticos algunos presentan costa y axostilo. La reproduccin ms comn es asexual por divisin longitudinal, en tanto que de la sexual se conoce muy poco, son formadores de quistes relacionado esto con las formas parsitas. Se clasifican en 8 ordenes, los ms importantes por su relacin parsita con el humano y otros vertebrados e invertebrados son: KINETOPLASTIDA (Trypanosoma spp.), DIPLOMONADIDA (Giardia spp.), OXYMONADIDA (Oxymonas spp.), TRICHOMONADIDA (Trichomonas spp.), HYPERMASTIGIDA (Lophomonas spp. y Trichonympha spp.) KINETOPLASTIDA. La mayora son parsitos, presentan de uno a dos flagelos desiguales (heterocontos), originados a partir de una depresin; pueden ser ovales o alargados en forma de hoja, en el caso de los tripanosomas puede existir un fuerte polimorfismo. Presentan un ncleo central y una o varias vacuolas contrctiles, presentan blefaroplasto; su alimentacin puede ser holozoica u coprozoica (kinetoplstidos de vida libre), en tanto que los parsitos muestran una nutricin saprozoica. Presentan dos subrdenes, el ms importante es TRYPANOSOMATINA, el cual est representado por el gnero Trypanosoma (Fig. 1).
Membrana ondulante Ncleo Grnulo basal Flagelo Eritrocito

Figura 1. Trypanosoma sp. A continuacin se indican los posibles tipos morfolgicos de este grupo de acuerdo a Martnez y Elas (1985), (Fig. 2): AMASTIGOTA: cuerpo redondeado a oval, con un grnulo basal y un flagelo corto, tambin es conocida como leishmnica.

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PROMATISGOTA: las clulas son alargadas o periformes, presentan un ncleo central, un flagelo anterior no se observa membrana ondulante, se conoce como forma leptomondica. EPIMASTIGOTA: El flagelo parte de la regin cercana al ncleo dirigindose hacia delante bordeando a una membrana ondulante corta, la forma es alargada, tambin se le conoce como forma critidial. TRIPOMASTIGOTA: su cuerpo es alargado ondulado, el origen del flagelo (cinetoplasto) y el grnulo basal se localizan en el extremo posterior de la clula, el flagelo se dirige hacia delante bordeando una larga membrana ondulante, la cual recorre a toda la clula, sta es la tpica forma tripanosoma.

Anterior

Flagelo Cuerpo basal Kinetoplasto

Anterior

Posterior Amastigota

Ncleo Promastigota

Posterior

Anterior

Flagelo Cuerpo basal Kinetoplasto

Anterior

Posterior Epimastigota

Ncleo Tripomastigota

Posterior

Figura 2. Tipos morfolgicos tripanosomatinos

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OXYMONADIDA: Son exclusivamente parsitos, principalmente en termitas y cucarachas. Su forma es ovoide o periforme se caracterizan por presentar uno o muchos cariomastigontes, cada uno con cuatro flagelos arreglados tpicamente en dos pares, en su etapa mvil (Martnez y Elias, 1985). Cada organismo tiene uno o varios axostilos contrctiles, son uninucleados, el gnero Oxymonas presenta un rostelo evidente, en el extremo anterior se ubica una copa succionadora (Fig. 3).

Rostelo Cariomastigontes

Axostilos

Ncleos

Figura 3. Proboscidiella sp. (Oximonadido flagelado) TRICHOMONADIDA: la mayora de los integrantes de este grupo son parsitos o simbiontes del tracto digestivo o genital de metazoarios. Se caracterizan por presentar cariomastigontes con cuatro a seis flagelos, puede haber gneros con un solo flagelo o sin l, los mismos cuando presentes pueden ser libres o adheridos a la superficie del cuerpo y de haber membrana ondulante sta se encuentra asociada a los flagelos. El axostilo frecuentemente se proyecta ms all de la clula. La nutricin puede ser holozoica o saprozoica, slo presentan reproduccin asexual levada a cabo por fisin binaria longitudinal; el gnero ms conocido es Trichomonas spp. (Fig. 4.)

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Flagelos

Trofozoito

Ncleo

Axostilo Flagelo con membrana ondulante

Figura 4. Trichomonas vaginalis HYPERMASTIGIDA: Son organismos caracterizados por su complejidad flagelar, presentan un cuerpo de oval a alargado con un solo ncleo en el centro o extremo anterior. Se les puede observar un sistema de mastigontes, cada uno constituido de numerosos flagelos, o bien presentarse en forma de penacho terminal en dos o cuatro grupos dirigidos hacia la parte anterior y bordeando todo el cuerpo sobre canales longitudinales o sobre bandas espirales (Martnez y Elas, 1985). Es comn que se les observe el rostrum; la importancia de este grupo est dada por su capacidad de degradar la celulosa, estableciendo una relacin simbitica vital con sus hospederos. Lophomonas sp., tpicamente se encuentra en termitas y cucarachas; fcilmente observable por el caracterstico penacho flagelar anterior (Figs. 5 y 6)
Penacho flagelar Ncleo vesicular

Organismo vivo

Figura 5. Lophomonas spp.

Organismo vivo

Penacho flagelar Rostrum

Ncleo

Figura 6. Hipermastiginos (Trichonympha sp.)

vista apical

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2. OBJETIVOS Distinguir las principales estructuras celulares y tipos morfolgicos de sarcomastigforos parsitos y simbiontes. Realizar la determinacin y/o identificacin de los principales grupos a partir de muestras vivas. 3. MATERIALES Y EQUIPO Microscopio compuesto Microscopio estereoscpico Porta y Cubreobjetos Agujas de diseccin Navaja o bistur Pinzas de diseccin Cajas de petri Papel seda Algodn Goteros Guantes

4. MATERIAL BIOLGICO: 10 Termitas grandes vivas 5. DESARROLLO DE LA PRCTICA Observacin de organelos celulares (flagelos, rostelo o rostrum) a) En un portaobjetos coloque una termita y en el microscopio estereoscpico haga la diseccin del abdomen y extraiga el tubo digestivo. b) Elimine el resto del cuerpo y realice un frotis del tubo digestivo, inmediatamente coloque el cubreobjetos. c) Observe al microscopio compuesto Disposicin flagelar Rostelo o Rostrum REALICE ESQUEMAS Observacin de muestras en laminillas permanentes (Trypanosoma sp., Leishmania y Giardia sp.) REALICE ESQUEMAS 6. CUESTIONARIO 1. Elabore un cuadro con las caractersticas observadas en cada gnero.

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Cuadro Comparativo de los Gneros Observados GENERO FORMA DEL CUERPO ROSTRUM FORMACIN AXOSTIL FLAGELAR O QUISTE

2. Describa cual es la importancia ecolgica de los gneros observados. 3. A qu se debe que estos organismos slo se encuentren en el intestino de termitas? 4. Cules son las funciones de los organelos celulares observados en los gneros? SARCODINOS 1. INTRODUCCIN Se caracterizan por su capacidad para producir pseudpodos, para capturar alimentos y para la locomocin. Se multiplican sin fase sexual conocida, mediante fisin binaria durante la fase de trofozoito mvil. Algunas especies pueden formar quistes. En el hombre, las amebas se encuentran sobre todo en el tubo digestivo. Fundamentalmente se pueden colectar a partir de materia fecal, aunque tambin pueden obtenerse a partir de un aspirado duodenal. Si las heces son lquidas o semilquidas es muy importante efectuar el procesamiento antes de los primeros 30 minutos desde su emisin. Las especie ms importante es Entamoeba histolytica (Fig. 7), que como su nombre indica es capaz de invadir y lisar las clulas epiteliales del intestino grueso, penetrando activamente en su pared. La enfermedad que produce es la disentera amebiana, caracterizada por diarrea mucosanguinolenta con fuertes dolores y graves complicaciones.

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Trofozoito de Entamoeba histolytica

Figura 7. Tipo Caracterstico Ameboide Parsito Se contrae por la ingesta de quistes maduros presentes en los alimentos y aguas contaminadas. Estos quistes pueden resistir varios das en el medio externo. Una vez digeridos, se produce el desenquistamiento y la liberacin de cuatro metaquistes que, al llegar al intestino grueso se multiplican como trofozoitos. El diagnstico mediante observacin del parsito es muy difcil y es muy importante diferenciarlo de otras amebas que pueden parasitar al hombre, tales como Entamoeba coli, Endolimax nana o Dientamoeba fragilis. Es posible, pero difcil, el cultivo de E. histolytica, prefirindose para el diagnstico el examen serolgico. 2. OBJETIVOS Distinguir las principales estructuras celulares y tipos morfolgicos de sarcodinos parsitos. 3. MATERIALES Y EQUIPO Microscopio compuesto Microscopio estereoscpico Porta y Cubreobjetos Agujas de diseccin Navaja o bistur Pinzas de diseccin Cajas de petri Papel seda Algodn Goteros Guantes

4. MATERIAL BIOLGICO: muestras semipermanentes 5. DESARROLLO DE LA PRCTICA Observacin de muestras en laminillas permanentes (Entamoeba hystolitica) REALICE ESQUEMAS

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PRCTICA N 7 PROTOZOOS ASOCIADOS (Esporozoarios) PHYLUM APICOMPLEXA 1. INTRODUCCIN Carecen de rganos locomotores, su movimiento puede ser por flexin del cuerpo o deslizamiento. Presentan un organelo complejo polar que comprende un conoide, anillos apicales, un corpsculo alargado (toxonema), sarconema, roptra, micronema y corpsculos polares, adems en todo el cuerpo existen microporos que se observan como unos cilindros cortos y densos (Fig. 1)

Trofozoitos Figura 1. Diversidad Morfolgica en Apicomplexos

Estos organismos presentan un ciclo de vida muy complejo, el cual consta de varias fases: la esquizognica que es la reproduccin asexual por fisin mltiple, algunos adems sufren la reproduccin sexual, llegan a formar ooquistes que contienen a los esporozoitos (fase infectiva), (Fig. 2). Las especies de este phylum son endoparsitas de nutricin saprozoica, ya sea intracelular o extracelular de vertebrados e invertebrados. En el caso de los vertebrados aparecen principalmente en la sangre, en el sistema retculo-endotelial y en el revestimiento epitelial del intestino, en los invertebrados se encuentran en el intestino, as como en el aparato reproductor o en el excretor. Se conocen dos clases: Perkinsea y Sporozoea. La ms conocida es esta ltima, ya que dentro de este grupo se ubica Plasmodium causante de la malaria.

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esporogonia

quistes

Figura 2. Fases del Ciclo Reproductivo de Apicomplexos

2. OBJETIVOS 1. Conocer la morfologa tpica de los gneros representativos de los esporozoarios. 3. MATERIAL Y EQUIPO Microscopio compuesto Porta objetos Cubreobjetos Navajas de rasurar o Bistur Agujas de diseccin Pinzas de diseccin Solucin salina Cloroformo Algodn Caja de petri

4. MATERIAL BIOLGICO: Grillos, Pollos de rancho (no gallinas), pichn y lombriz 5. DESARROLLO DE LA PRCTICA Diseccin de los organismos a) En una charola se coloca los animales (pollito y lombriz) por separados b) Se anestesia con un algodn impregnado de cloroformo c) Esperar hasta que el animal este perfectamente dormido. d) Se coloca el animal con la regin ventral hacia arriba e) Se realiza un corte longitudinal medioventral para dejar expuestos los rganos internos
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f) Localizar el intestino grueso y cortar la parte final de ste que corresponde a la cloaca g) Colocar un poco del material localizado en la cloaca en un portaobjetos y se disgrega con las agujas de diseccin. h) Se le agrega la solucin salina i) Observar al microscopio compuesto. R E A L I C E E S Q U E M A S. 6. CUESTIONARIO 1. Elabore un cuadro con las caractersticas observadas en los diferentes gneros. 2. En que fase de su ciclo de vida se presentaron los gneros observados? 3. Investigue los trminos de esporozoito, trofozoito, merozoito y gomonto? 4 Qu entiendes por esporogonia, esquizogonia y gamogonia?

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PRCTICA N 8 PROTOZOOS ASOCIADOS (Opalnidos) 1. INTRODUCCIN Los protistas animaloides que corresponden a este grupo fueron observados por Leeuwenhock, en 1683, en las heces fecales de la rana, ms tarde Purkinje y Valentn en 1835 crearon el nombre genrico Opalina, debido a la coloracin opalescente de estos organismos. Son organismos muy aplanados cuya forma puede ser oval a alargada; el cuerpo esta uniformemente cubierto por cilios distribuidos en hileras longitudinales, no presenta citostoma. Adems carece de vacuolas contrctiles; la mayora de los opalnidos presentan un gran nmero de ncleos iguales aunque existen pocos gneros que solo poseen dos ncleos (Fig. 1)

Cubierta ciliar Ncleos

Figura 1. Estructura Celular de un Opalnido

Su reproduccin es asexualmente por fisin binaria longitudinal o transversal, algunos organismos sufren plasmotoma (se refiere a la divisin de los protozoo multinucleados en dos o ms individuos de la misma condicin nuclear), siendo la divisin citoplasmtica independiente de la nuclear. Todos los representantes de este grupo son endocomensales del intestino grueso de ranas y sapos principalmente, su nutricin es saprozoica solamente se han encontrados en urodelos, reptiles y en peces. 2. OBJETIVOS 1. Conocer la estructura celular de los opalnidos 2. Realizar la determinacin y/o identificacin de estos organismos

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3. MATERIAL Y EQUIPO Microscopio compuesto Porta y Cubre objetos Navajas de rasurar o Bistur Agujas de diseccin 4. MATERIAL BIOLGICO: Rana o sapo 5. DESARROLLO DE LA PRCTICA Diseccin de los organismos a) En una charola se coloca los animales (rana o sapo) b) Se anestesia con un algodn impregnado de cloroformo c) Esperar hasta que el animal este perfectamente dormido. d) Se coloca el animal con la regin ventral hacia arriba d) Se realiza un corte longitudinal medioventral para dejar expuestos los rganos internos e) Localizar el intestino grueso y cortar la parte final de ste que corresponde a la cloaca f) Colocar un poco en un portaobjetos y de disgrega con las agujas de diseccin inmediatamente se coloca el cubreobjetos para observar al microscopio La hilera de cilios Los ncleos Forma del cuerpo R E A L I C E E S Q U E M A S. 6. CUESTIONARIO 1. Cmo se lleva a cabo el movimiento ciliar de los opalnidos? 2. Investigue si estos organismos pueden ser cultivados o no? 3. Qu relaciones o diferencias existen entre los opalnidos y los ciliados? Pinzas de diseccin Charola Cloroformo Algodn

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PRCTICA N 9 CRYPTOFCEAS (Criptomnidos) 1. INTRODUCCIN Son organismos cuya coloracin vara notablemente desde verdeamarillento, pardo, verdeazulados hasta rojo. Las especies pigmentadas poseen uno o dos cloroplastos parietales acintados con o sin pirenoides los que continen clorofilas "a" y "c2", y -caroteno, adems de aloxantina, presentan ficobilinas del tipo de Cr- ficoeritrina (coloraciones rojas) y Cr ficocianina (coloraciones azules), su nutricin comprende auttrofos y auxtrofos stos ltimos requieren de colabamina (Vitamina B12). La sustancia de reserva puede ser almidn o sustancias amiloides ya sea en los pirenoides o disuelto en el citoplasma. No presentan pared celular tpica, en su lugar se les puede observar un periplasto constituido de placas orgnicas hexagonales, solamente se pueden ver en MEB (Fig. 1), estas placas no se encuentran en la cripta; en la parte anterior de las clulas se presenta un surco simple y poco profundo que recibe el nombre de CRIPTA la que puede o no estar revestida de TRICOCISTOS o EYECTOSOMAS cuya probable funcin sea la de evitar la depredacin. La forma del cuerpo es asimtrica algo comprimida en sentido dorsoventral. Estos organismos presentan dos flagelos, el ms corto es pectinado (mastigonemas en un solo lado), mientras que el ms grande es pinnado (mastigonemas en ambos lados), (Fig. 1).
Flagelo pinnado Flagelo pectinado Vacuola contrctil

Cripta

Manchas oculares Pirenoide

Placas orgnicas hexagonales MEB Eyectosomas o tricocistos

Ncleo

Cloroplasto

Figura 1. Estructura celular de criptomnidos

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El tipo morfolgico caracterstico del grupo corresponde a organismos unicelulares mviles o inmviles (Fig. 2). Su principal forma de reproduccin es asexual (vegetativa) por divisin longitudinal, algunos tienen la capacidad de formar quistes endgenos de pared engrosada, la reproduccin sexual se desconoce. Se localizan en aguas dulces con cierto contenido de materia orgnica, algunos son marinos y otros son simbiontes de radiolarios y corales. Llegan a ingerir algunos ciliados como Myrionepta rubra.
Flagelo Cripta Tricocistos

Vacuola contrctil

Tricocistos

Ncleo Cryptomonas spp.

Cloroplasto

Ochroomonas sp. Cryptomonas ovata

Rhodomonas

Chilomonas paramecium

Figura 2. Tipos morfolgicos unicelulares mviles

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2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Crecil, en tanto que los grnulos de reserva mediante el Lugol, si lo que pretendes es observar el nmero de ncleos, entonces el Azul de Metileno es el adecuado. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (periplasto). Organelos celulares (ncleos, grnulos de reserva, cloroplastos, flagelos). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos unicelulares NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados)

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PRCTICA N 10 DINOFCEAS (Dinoflagelados) 1. INTRODUCCIN Esta divisin comprende especies incoloras y pigmentadas estas ltimas se conocen como pardodoradas o pardoverdosas, presentan clorofila "a" y "c2", -caroteno, peridinina, dinoxantina y diadinoxantina; los pigmentos generalmente se encuentran encerrados en cloroplastos en las formas pigmentadas, observndose de uno a dos en las formas ms primitivas, mientras que en las mas evolucionadas son numerosos y discoidales. Las especies incoloras contienen los pigmentos en grnulos o disueltos en el citoplasma. Este grupo es nico entre las eucariotas, debido a que carecen de protenas histnicas, lo que hace que los cromosomas permanezcan compactos dndole un aspecto de rosario al ncleo (moniliforme). La mayora de los miembros de esta divisin son mviles, presentando dos flagelos, uno pinnado y otro pectinado, por su posicin pueden ser apicales o laterales. La cubierta celular puede ser en forma de una Pared o un periplasto, las mismas pueden o no presentar ornamentaciones, las cuales se caracterizan por la presencia de valvas o placas y poros o pliegues. En general los dinoflagelados se encuentran divididos en dos partes mediante un surco transverso llamado CINGULO, a la parte superior se le denomina EPICONO y su extremo anterior APICE o PARTE APICAL, a la parte inferior se le llama HIPOCONO y su extremo posterior ANTAPICE o PARTE ANTAPICAL, el hipocono a su vez se divide en dos por un surco longitudinal llamado SULCUS (Fig. 1).

pice o parte apical Ncleo moniliforme Flagelo cingular Sulcus Flagelo sulcal Antpice o parte antapical Gymnodinium sp. Cngulo Hipocono Epicono

Figura 1. Principales estructuras morfolgicas de dinoflagelados

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De las formas desnudas se complica un tanto cuanto su determinacin, sin embargo, el tipo morfolgico que llegan a presentar muchas de ellas, facilita este trabajo puesto que son muy caractersticos para cada especie; estos son de los organismos donde podemos observar los PLIEGUES DEL PERIPLASTO como parte de su ornamentacin (Fig. 2).
Ncleo moniliforme Pliegues del periplasto

Pyrocystis sp.

Figura 2. Ornamentaciones del Periplasto y Ncleo Moniliforme En tanto que las formas que presentan valvas, la estructura y disposicin de las mismas nos permite definir el tipo de organismos de que se trata, es caracterstico de este grupo un surco longitudinal que une las valvas y el cual es llamado SUTURA SAGITAL, los flagelos en estos organismos son de insercin apical (Fig. 3).

Espina apical Flagelos apicales Sutura sagital Ncleo

b) Vista lateral c) Vista ventral Prorocentrum sp.

Figura 3. Dinoflagelados Valvados Las especies con placas tambin son conocidas como TECADAS, sus estructuras son fciles de detectar, aunque en otras ocasiones se tienen que limpiar previamente a la determinacin, estas placas se encuentran dispuestas como se muestra en la Tabla 1, y Figura 4.

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Tabla 1. Tabulacin en Dinoflagelados EPICONO SIMBOLO ' ap " pr a 1' r

NOMBRE PLACAS APICALES PLACAS PRECINGULARES PLACAS INTERCALARES ANTERIORES PLACA ROMBICA

LOCALIZACION APICE DE LA CELULA CONTACTO CON EL CINGULO ENTRE APICALES Y PRECINGULARES PRESENTE O NO, PUEDE LOCALIZARSE DELANTE DEL SULCUS Y PERTENECE A LAS PLACAS APICALES

HIPOCONO NOMBRE PLACAS ANTAPICALES PLACAS POSTCINGULARES PLACAS INTERCALARES POSTERIORES

SIMBOLO '''' at ''' pst p

LOCALIZACION ANTAPICE DE LA CELULA EN CONTACTO CON EL CINGULO ENTRE ANTAPICALES Y POSTCINGULARES

Figura 4. Disposicin de las Placas en Dinoflagelados

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La numeracin de las diferentes placas se efecta a partir del borde izquierdo del surco longitudinal girando hasta terminar en el lado derecho, de esta manera podemos establecer las formulas para los gneros peridiniales, por ejemplo: Gonyaulax sp. [3', 0a, 6", 6c, 6-7s, 6''', 1p, 1''''] Peridinium sp. [4', 2-3a, 7" 5-6c, 0s, 5''', 0p, 2''''] Ceratium sp. [4', 0a, 5", 4-5c, 0s, 5''', 0p, 2''''] Existe tambin una gran cantidad de estructuras, presentndose como extensiones cingulares o sulcales a las que se les llama PROCESOS ALARES o tambin una serie de bordes alargados denominados COSTILLAS que suelen ser extensiones o prolongaciones de la pared celular; la misma pared se puede extender en porciones alargadas llamadas CUERNOS y ESPINAS (Figs. 5 y 6).
Procesos Alares Cingulares

Poros Proceso Alar Sulcal

Costillas o radios Ornithocercus sp.

Figura 5.Ornamentaciones en Dinofceas

Cuerno apical

Espinas Cuernos antapicales Ceratium sp.

Figura 6. Cuernos y Espinas

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La importancia ecolgica de este grupo est basada en la presencia de los mismos en el fitoplancton por lo cual son la mayora de ellos productores primarios, siendo alimento de peces y otros organismos principalmente de zonas tropicales. La MAREA ROJA es producto de grandes florecimientos de gneros como: Gonyaulax sp., Pyrodinium sp., y Gymnodinium sp., entre otros, dichas mareas son causantes de una gran mortandad de peces e invertebrados como los moluscos y cuyo consumo humano puede llegar a producir la muerte. 2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Tripano, en tanto que los grnulos de reserva mediante el Lugol, si lo que pretendes es observar el nmero de ncleos, entonces el Azul de Metileno es el adecuado. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (periplasto, valvas, placas o tecas). Organelos celulares (ncleos, grnulos de reserva, cloroplastos, flagelos). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados)

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Elabore un cuadro con las caractersticas observadas en cada gnero GENERO VALVAS PLACAS SURCOS PLACA EPICONO HIPOCONO ROMBOIDAL

GENERO

CAP

CANT

PAS

PAC

COSTILLA POROS ESPINAS S

CAP: cuerno apical; CANT: cuerno antapical; PAS: proceso alar sulcal; PAC: proceso alar cingular
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PRCTICA N 11 HETEROCONTOFCEAS: XANTOFCEAS (Tribofceas) 1 INTRODUCCIN Estas algas poseen uno o varios cloroplastos en forma de disco ubicados en la periferia de la clula, el retculo endoplsmico presenta continuidad desde su envoltura hasta los cloroplastos, son de color amarilloverdoso, cuyos pigmentos son clorofilas a y c, caroteno, xantfilas como: diatoxantina, didinoxantina y vaucheraxantina, los pirenoides pueden estar o no asociados con el almacenamiento del almidn, el cual se produce fuera del cloroplasto, las sustancias de reserva pueden ser polisacridos de bajo peso molecular, cidos grasos y esteroles y probablemente en algunos casos este presente la crisolaminarina. La pared celular est compuesta por celulosa, sustancias pcticas y en otras de slice, es el caso de las especies donde la pared est formada por dos partes iguales o desiguales que al unirse en su parte posterior forman una "H". La mayora poseen un solo ncleo cuando jvenes, pero cuando maduran pueden ser multinucleadas de tipo sifonado, cuyas formas pueden ser esfricas (Botrydium sp.), o tubulares (Vaucheria sp.), otras son multicelulares cenocticas en forma de filamentos (Tribonema sp.), (Fig. 1).
Arquegonio Anteridio Ncleos

Pared celulsica Ncleos

Vaucheria sp., sifonada tubular

Botrydium sp., sifonada esfrica Pared celular silcea en forma de H

Ncleos Cloroplastos

Tribonema sp., cenoctica filamentosa

Figura 1. Morfologa de Tribofceas Multinucleadas

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Son raras las tribofceas que son mviles, generalmente esto ocurre en la fase vegetativa, y puede llevarse a cabo el desplazamiento mediante flagelos o contracciones ameboidales, algunas utilizan ambos tipos y al igual que las zoosporas y gametos presentan dos flagelos desiguales, el ms corto es de tipo ltigo (liso) y se dirige hacia la parte posterior, mientras que el ms largo es pinnado y se orienta a la parte anterior, existen algunas excepciones como las clulas mviles de Vaucheria sp., ya que sus clulas mviles son multiflageladas. La reproduccin generalmente es asexual por esporas, las zoosporas y aplanosporas se pueden producir una vez en la clula o el protoplasto se puede dividir para originar varias esporas. Las zoosporas la mayora de las veces son simtricas bilateralmente con dos cloroplastos dispuestos dorsoventralmente, algunas forman acinetos o quistes internos. La reproduccin sexual no es frecuente, aunque si en el gnero Vaucheria, en cuyos filamentos sifonados se pueden observar los anteridios y oogonios, siendo la nica fase en la que se forman paredes transversales para darles origen (Fig. 1), en las formas dulceacucolas la meiosis ocurre durante la germinacin del cigoto (MEIOSIS CIGOTICA) siendo entonces un ciclo haplntico. Son organismos principalmente dulceacucolas, poco conocidos ya que son microscpicos, Tribonema sp. se puede localizar en aguas fras de hasta 10 C en la primavera, en tanto que el gnero Vaucheria crece en reas fangosas en las orillas de lagos; estos organismos son considerados colonizadores extensivos en aguas salobres y ensenadas, muchos de ellos viven en charcas cidas, alpinas y subalpinas, adems de pantanos donde conviven con el musgo Sphagnum sp. 2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Crecil, en tanto que los grnulos de reserva y cloroplastos mediante el Lugol, si lo que pretendes es observar el nmero de ncleos, entonces el Carmn Actico es el adecuado. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta, solamente considera por separado la tcnica para la observacin de ncleos, puesto que sta requiere de calentamiento. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (pared celular). Organelos celulares (ncleos, grnulos de reserva, cloroplastos). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos (sifonados y cenocticos) NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO.

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REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados)

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PRCTICA N 12 HETEROCONTOFCEAS: CRISOFCEAS (algas doradas) y DICTIOCOFCEAS (silicoflagelados) 1. INTRODUCCIN CHRYSOPHYCEAE Los pigmentos fotosintetizadores caractersticos de este grupo estn representados por las clorofilas a, c1 y c2, as como xantofilas como: Fucoxantina y violaxantina, que en conjunto les dan coloraciones doradas. La sustancia de reserva corresponde a la crislaminarina y gotitas de aceite. Presentan dos flagelos heterocontos, uno liso en forma de ltigo y otro pinnado (con mastigonemas), asociado al flagelo liso se encuentra una mancha ocular (Fig. 1).
Flagelo liso corto Flagelo pinnado largo

Mancha ocular Vacuola Cloroplastos Gotitas de aceite

Ncleo

Figura 1. Estructura celular caracterstica de una clula Crisofcea Las especies de este grupo se caracterizan por formar estatostoras (caractersticas de formas bentnicas dulceacucolas), son esporas de resistencia con pared constituida por dos mitades desiguales que se empalman, un tapn pequeo (puede o no estar silicificado) y una urna ms grande fuertemente silicificada y con un poro (Fig. 2).
Tapn Poro

Urna

Estatospora o estomatocisto

Estatosporas en Dinobryon sp.

Figura 2. Estructura de las estatosporas de Crisofceas

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Las especies en su fase vegetativa pueden presentar un recubrimiento celular a manera de periplasto mejor representado en las formas unicelulares (Chromulina sp., Ochromonas sp.) o bien como lricas caractersticas de las formas coloniales como el caso del gnero Dinobryon sp. (Fig. 3).

Chromulina sp.

Ochromonas spp. Formas unicelulares con periplasto Lrica

Clula Dinobryon spp. Colonia arborecente

Uroglena spp. Colonia esfrica

Figura 3. Tipos morfolgicos de Crisofceas DICTIOCOFCEAS (silicoflagelados) Los fotoauttrofos presentan varios cloroplastos discoidales, contienen clorofilas a, c1 y c2, adems de pigmentos accesorios como: Fucoxantina y diadinoxantina. La sustancia de reserva es crisolaminarina, pueden presentar gotas de aceites. Los flagelos son heterocontos apicales, uno pinnado y largo, el otro expresado como un cuerpo basal, no tienen mancha ocular. Con respecto a su

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tipo de nutricin las podemos encontrar como fotoauttrofas, mixo y hetertrofas. La pared celular es silcea en forma de endoesqueleto a manera de varillas es el caso los (Fig. 4).
Endoesqueleto silceo Ncleo

Vacuolas

Cloroplastos

Diversidad de esqueletos silceos de Dictyocha

Figura 2. Estructura morfolgica en silicoflagelados (Dictyocha spp.) Especies como Dinobryon sp. y Dictyocha sp., son indicadoras biolgicas de aguas dulceacucolas y marinas fras respectivamente. Por su distribucin las vamos a localizar tanto en aguas dulces como marinas. 2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Crecil, en tanto que los grnulos de reserva mediante el Lugol, si lo que pretendes es observar el nmero de ncleos, entonces el Azul de Metileno es el adecuado. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio.

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Cubierta celular (periplasto o esqueleto silceo). Organelos celulares (ncleos, grnulos de reserva, cloroplastos, flagelos). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos (unicelulares o coloniales) NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados)

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PRCTICA N 13 HETEROCONTOFCEAS: BACILARIOFCEAS (Diatomeas centrales) 1. INTRODUCCIN En este grupo los cloroplastos son discoidales, los pigmentos fotosintetizadores estn representados por las clorofilas a y c, adems de -caroteno y fucoxantina, en tanto que su reserva alimenticia corresponde a la crisolaminarina y aceites; presentan un slo ncleo (Fig. 1).
Cloroplastos

Ncleo

Coscinodiscus sp. Figura 1. Estructura citolgica de una diatomea central La pared celular es tipo silcea arreglada en forma de una caja de petri, por lo cual podemos encontrar dos vistas, una valvar y otra conectiva o cingular, en esta ltima se puede observar la conexin de ambas valvas a la cual se le llama CNGULO y que divide al organismo en dos partes EPITECA la parte ms ancha e HIPOTECA la parte ms angosta (Fig. 2).

VISTA VALVAR

Epiteca

VISTA CONECTIVA

Cngulo

Hipoteca Coscinodiscus sp.

Figura 2. Estructura valvar de una diatomea central

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Este grupo est compuesto por especies cuya ornamentacin es de simetra radial, en la mayora de las especies la vista valvar es circular, sin embargo las podemos encontrar triangulares, oblongas, ovoides y cuadrangulares entre otras. La vista conectiva generalmente es de tipo rectangular (Fig. 3). Las ornamentaciones estn representadas por una serie de perforaciones comnmente hexagonales denominadas areolas en cuyo interior se pueden ubicar puntuaciones. Presentan tambin una serie de espinas y/o espnulas, adems de prolongaciones alares, tubulares gelatinosas llamadas sedas y cuernos que no siempre terminan aguzndose hacia los extremos (Fig. 4). Cabe mencionar que este orden no presenta gneros que se desplacen o tengan movimiento propio ya que carecen de rafe y seudorafe. El grupo se encuentra mejor representado en el medio marino, aunque tambin se encuentran en aguas dulces, todas son fotosintetizadoras, las formas ms grandes se ubican en zonas fras y templadas y las ms pequeas en las zonas subtropical y tropical, tambin se localizan como organismos bentnicos y perifitnicos adheridos a filamentos de otras algas.

Actinoptychus sp.

Chaetoceross sp. Triceratium sp.

Figura 3. Formas de la Vista valvar en Diatomeas Centrales

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Ocelos Areolas

Roseta

Thalassiosira sp.
Coscinodiscus sp. (vista valvar)

Procesos alares

Seda Panktoniella sp (vista valvar) Espinas

Ditylum sp. (vista conectva)

Cuernos

Sedas

Chaetoceros sp. (vista conectiva)

Odontella sp. (vista conectiva)

Figura 4. Principales Ornamentaciones de las Diatomeas Centrales

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2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Crecil, en tanto que los grnulos de reserva mediante el Lugol, si lo que pretendes es observar el nmero de ncleos, entonces el Azul de Metileno es el adecuado. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (pared celular silcea). Organelos celulares (ncleos, grnulos de reserva, cloroplastos). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos (unicelulares o coloniales) NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados)

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Realice un cuadro comparativo con las diferentes ornamentaciones de los gneros observados. GENERO VISTA VISTA ROSET VALVAR CONECTIVA A SEDAS ESPINAS ESPNULAS

GENERO MEMBRANA AREOLAS OCELO RADIOS BANDAS CUERNOS ALAR S INTERCALARES

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PRCTICA N 14 HETEROCONTOFCEAS: BACILARIOFCEAS (Diatomeas pennales) 1. INTRODUCCIN Este grupo est compuesto por especies cuya ornamentacin se dirige a una lnea longitudinal (simetra bilateral), en la mayora de las especies la vista valvar es alargada en forma romboidal, sin embargo, las hay oblongas, ovoides, con forma de bat, sigmoides y curvadas entre otras. La vista conectiva generalmente es de tipo rectangular (Fig. 1).

Surirella sp. Simetra bilateral romboidal

Cymbella sp. Simetra bilateral cncava

Gomphonema sp. Moniliformes

Pinnularia sp. valvar conectiva Elipsoidal

Navicula sp naviculoides Surirella sp. valvar conectiva Oblonga

Figura 1. Simetra y Formas del Orden Pennales

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Las ornamentaciones estn representadas por una serie de perforaciones denominadas costillas si son muy gruesas o estras si son delgadas, pueden presentarse una serie de bandas de diferente constitucin a lo que se le llama bandas intercalares (Fig. 2)

Costillas

Estras

Pinnularia sp. Surirella sp.

Bandas intercalares

Gomphonema sp.

Epithemia sp.

Amphora sp.

Figura 2. Ornamentaciones en Diatomeas Pennales Morfolgicamente podemos encontrar organismos unicelulares o multicelulares conformando colonias en zig-zag, radiales o filamentosas como empalizadas. Cabe mencionar que este orden presenta gneros que se desplazan ya que presentan rafe y seudorafe (Fig. 3).
pn r pn: nodo polar cn: nodo central r: rafe pr: seudorafe

cn

pr

Cymbella sp. Figura 3. Rafe y Seudorafe

Staurosira sp.

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Una caracterstica de importancia taxonmica para este grupo lo representa la simetra, es decir, se requiere de saber si las valvas son simtricas o no tanto longitudinalmente como transversalmente y en ambas vistas (valvar y cingular o conectiva) para lo cual trazamos una lnea imaginaria longitudinal o transversal segn sea el caso (Fig. 4).

Epithemia sp.
L: Plano longitudinal T: Plano transversal

Surirella sp.

Ulnaria sp.

Figura 4. Simetra en Diatomeas Pennales El grupo se encuentra mejor representado en el medio dulceacucola y salobre, aunque tambin se encuentran en aguas marinas, todas son fotosintetizadoras, las formas ms grandes se ubican en zonas fras y templadas y las ms pequeas en las zonas subtropical y tropical, tambin se localizan como organismos bentnicos y perifitnicos adheridos a filamentos de otras algas. 2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Crecil, en tanto que los grnulos de reserva mediante el Lugol, si lo que pretendes es observar el nmero de ncleos, entonces el Azul de Metileno es el adecuado. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (pared celular silcea). Organelos celulares (ncleos, grnulos de reserva, cloroplastos).

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Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos (unicelulares o coloniales) NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados) Realice un cuadro comparativo con las diferentes ornamentaciones de los gneros observados.

GENERO

VISTA VISTA SIMETRA SIMETRA ESTRA VALVAR CONECTIVA LONG. TRANSVEr. S

COSTILLA S

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GENERO

RAFE SEUDORAFE

BANDAS INTERCALARES

FORMA ORGANIZACIN DE CELULAR CLULA

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PRCTICA N 15 HAPTOFCEAS (Cocolitofridos) 1. INTRODUCCIN La mayora de las especies de las haptofitas son unicelulares, mviles que presentan dos flagelos, los pigmentos fotosintetizadores, en el caso de las formas auttrofas y mixotrficas, son las clorofilas a. c1 y c2, as como la -caroteno y xantofilas como diatoxantina, diadinoxantina y fucoxantina y como sustancia de reserva se ha observado a la crisolaminariana, adems de grandes concentraciones de aceites; comprende a los organismos que presenta un haptonema, escamas y cocolitos; el haptonema es una estructura semejante a un flagelo, pero difiere por su ultraestructura, ya que se compone de tres membranas concntricas que rodean a seis microtbulos, sus funciones pueden ser como rgano de fijacin, sirve para alimentarse mediante la fagocitosis con capacidad de enroscarse y extenderse rpidamente (Fig. 1).
Haptonema

Fagocitosis

Figura 1. Haptonema y Proceso de fagocitosis Las escamas pueden ser de constitucin celulsica (orgnicas), los cocolitos son estructuras de carbonato de calcio, que varan de forma desde circulares a elipsoidales los cuales se localizan en la superficie de la clula, sta y sus cocolitos reciben el nombre de cocsfera, la formacin tanto de las escamas como los cocolitos est vinculada con el aparato de Golgi, para posteriormente depositarse en la superficie de la clula (Fig. 2) Casi todos pertenecen al nanoplancton y algunos pueden ser causantes de mareas txicas (Phaeocystis globosa). Los cocolitofridos son evidentes en el registro fsil, debido a la constitucin calcrea de sus discos los que se depositan en el fondo de las aguas marinas y se conocen desde el devoniano.

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Escamas en prymnesiales (Microscopa electrnica de trasmisin)

Cocosfera Cocolitos

Cocosfera y cocolitos Emiliania sp.(microscopia de luz)

Emiliania sp. Cocsfera y cocolitos (microscopia electrnica de barrido)

Figura 2. Escamas y Cocolitos

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2. MATERIAL BIOLGICO Fitoplancton marino (Emiliania sp., Coccolithus sp., Discosphaera sp., Pontosphaera sp., Scyphosphaera sp.) 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA Observacin de la morfologa. a) Coloque una pequea parte de la membrana millipore que contenga cocolitofridos en un portaobjetos y agrguele una gota de aceite de inmersin. b) Coloque el cubreobjetos y observe al microscopio compuesto, primero con el objetivo de 40X y una vez localizados los organismos, con cuidado observe con el objetivo de 100X: Forma de las cocsferas, Forma de los cocolitos, Tipo de cocolitos REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados) NOTA: EN CASO DE NO LLEVARSE A CABO LA OBSERVACIN UTILICE LAS FOTOGRAFAS QUE SE LE PROPORCIONEN Realiza un cuadro comparativo de los gneros observados Cuadro Comparativo de los Gneros Observados GENERO FORMA DE TIPO DE COCOSFERA COCOLITO S FORMA DE LOS COCOLITOS

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A partir de las fotografas proporcionadas realice un cuadro comparativo de los gneros Cuadro Comparativo de los Gneros de las Fotografas GENERO FORMA DE TIPO DE COCOSFERA COCOLITO S FORMA DE LOS COCOLITOS

Realice una clave dicotmica a partir del anlisis de ambos cuadros y utilizando la teora de conjuntos.

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135PRCTICA N 16 EUGLENOFCEAS (Euglenas) I. INTRODUCCIN Esta divisin comprende organismos cuya coloracin verde, verde-amarillenta o roja esta dada por la presencia de pigmentos como: clorofilas a y b, -caroteno y xantofilas diadinoxantina (anteraxantina) y astaxantina (hematocromo); pueden o no presentar cloroplastos y cuando los hay pueden contener o no pirenoides; la sustancia de reserva se encuentra en forma de un derivado del almidn llamado PARAMILON y lpidos. Son organismos que presentan un ncleo bastante evidente (uninucleados) y pueden presentar o no MANCHA OCULAR, esta ltima nunca se encuentra asociada a los cloroplastos. No presentan pared celular sino PERIPLASTO y/o LRICA (Fig. 1), el primero en algunos organismos se encuentra constituido de una serie de anillos asociados a la secrecin de mucilagos y a la actividad de METABOLIA proceso por el cual pueden cambiar de formas alargadas a esfricas y viceversa (Fig. 4), en los mismos se pueden observar una serie de ornamentaciones a manera de estras longitudinales o diagonales, espinas o materia orgnica (Fig. 2).
Ncleo Cloroplastos

Periplasto Flagelo Mancha ocular Euglena sp. Vacuola

Figura 1. Estructura Celular de Euglenofcea


Estras

Cauda

Espinas Lrica

Phacus sp.

Trachelomonas sp. Figura 2. Ornamentaciones en Euglenofcea

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En aquellos organismos con periplasto se presenta en el extremo anterior una invaginacin (la CITOFARINGE y RESERVORIO) en forma de conducto y cuya abertura es llamada CITOSTOMA. Todos los organismos de esta divisin pueden presentar de 1 - 3 flagelos pectinados de posicin apical colocados en la base del reservorio (Fig. 1). Los tipos morfolgicos presentes en este grupo van desde unicelulares hasta coloniales dendroides con pednculos mucilaginosos; en cuanto a la forma de las clulas vara desde esfricas, ovoides hasta las alargadas (Fig. 3).
Unicelulares Auttrofos

Euglena sp.

Phacus sp.

Strombomonas sp.

Peranema sp. Hetertrofo

a) Larva de liblula; b) Colacium sp. c) zoospora

Figura 3. Tipos Morfolgicos La reproduccin asexual es la ms conocida en este grupo y se lleva a cabo por escisin longitudinal aun en aquellas especies coloniales, pueden formar quistes cuando las condiciones del medio les son adversas, en tanto que la sexual es poco conocida.

Figura 4. Metabolia en Astasia sp.

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Se conocen aproximadamente 450 especies repartidas en 25 gneros, agrupados en una sola clase EUGLENOPHYCEAE y dos rdenes EUGLENALES y COLACIALES. La mayor parte viven en aguas dulces ricas en materia orgnica, cuando son muy abundantes producen floraciones de color verde-brillante, amarillento, parduzco o rojizo, son frecuentes en el suelo y limo hmedo, algunas son de aguas salobres y pocos gneros pueden ser localizados en aguas marinas, otras son endozoicas y no presentan pigmentos viven en el cuerpo de rotferos, nematodos, turbelaridos, oligoquetos y coppodos. Algunas especies son consideradas como productores primarios como fuente de alimento para herbvoros del zooplancton, por su tasa de crecimiento tan sensible a la vitamina B12 y cobalamina se emplean como organismos de ensayo bioqumico y de nutricin. 2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Crecil, en tanto que los grnulos de reserva mediante el Lugol, si lo que pretendes es observar el nmero de ncleos, entonces el Azul de Metileno es el adecuado. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (periplasto). Organelos celulares (ncleos, grnulos de reserva, cloroplastos). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos (unicelulares o coloniales) NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados) Realice un cuadro comparativo con las diferentes ornamentaciones de los gneros observados.

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Cuadro Comparativo de los Gneros Observados GENERO FORMA DEL CUERPO ORNAMEN- CLOROPLASTOS CUBIERTA ORGANIZACIN TACIONES CELULAR CELULAR

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PRCTICA N 17 PROTOZOOS (Sarcodinos de vida libre dulceacucolas y marinos) 1. INTRODUCCIN En este grupo se ubican las formas ameboides con seudpodos de diferente tipo (lobpodo, filpodos, rizpodos y auxpodos (Fig. 1). Su cuerpo puede estar protegido o desnudo; las especies dulceacucolas poseen de una a varias vacuolas contrctiles, en tanto que las marinas.

Lobpodo

Filpodos

Rizpodos

Auxpodos

Figura 1. Tipos de seudpodos en los sarcodinos Sistemticamente se encuentran repartidos en 2 subclases GYMNAMOEBIA y TESTACEALOBOSIA, las cuales son separadas por la presencia o ausencia de estructuras protectoras y la forma como se dividen el o los ncleos. De ambos grupos por su importancia se describen los rdenes Amoebida y Arcellinida. ORDEN AMOEBIDA Este grupo es cosmopolita, de vida libre, todo tipo de aguas, incluyendo suelos hmedos con alto contenido de humus, parsitos de diversos animales llegando a ser patgenos. Poseen un solo ncleo, carecen de etapas flageladas y solo presentan membrana celular. El grupo ms importante son los Tubilinos donde se ubican las especies ameboidales de vida libre como: Amoeba spp., Chaos spp., Saccamoeba spp., Neoparamoeba spp., y Vexillifera spp. Su cuerpo va de tubular a cilndrico ramificado o no, el flujo citoplasmtico no es bidireccional y la divisin nuclear es mesomittica son formadores de quistes (Fig. 2).

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Seudpodos Macroncleo

Vacuola contrctil Vacuolas alimenticias Endoplasma

Ectoplasma Amoeba proteus

Figura 2. Tipo ameboide de vida libre ORDEN ARCELLIDA Este grupo es exclusivamente dulceacucola, los organismos se caracterizan por presentar una cubierta protectora llamada testa y lrica o conchas (membrana rgida), puede ser lisa o esculpida, con una gran cantidad de ornamentaciones a base de materia orgnica, arena, cristales de sal y en ocasiones hasta heces fecales, pueden tener dos o ms ncleos, puede presentar o no la lrica o concha quitinosa y entonces se fijan a la misma mediante cientos de filamentos, los ejemplos ms tpicos son los gneros Arcella y Difflugia (Fig. 3).
Concha quitinosa Lrica o testa Poro

Seudpodos Materia orgnica y granos de arena Cuello Arcella sp. (vista ventral)

Poro Diffugia sp.

Figura 3. Tipos morfolgicos de ameboides con concha, lrica o testa

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CLASE HELIOZOEA Este grupo tambin es conocido como heliozoarios o animalnculos sol, principalmente son de forma esfrica con bastantes auxpodos radiales, que slo pueden ser vistos en el microscopio ptico. El citoplasma se diferencia en un ectoplasma burdamente vacuolado adems del endoplasma con pocas vacuolas y opaco, no presentan endoesqueleto, cuando hay exoesqueleto este puede ser silceo o de materia orgnica, la mayora son dulceacucolas. El orden ms representativo en los medios de agua dulce es ACTINOPHRYDA, el gnero que ms fcilmente podemos encontrar es Actinosphaerium que presenta varias especies (Fig. 4).
Auxpodos

Ncleo Ectoplasma vacuolado

Figura 4. Actinophrys un heliozoario de charcas perennes o temporales someras SUPERCLASE RHIZOPODA CLASE GRANULORETICULOSEA Las especies de esta clase se caracterizan por la presencia de conchas o testas perforadas a travs de las cuales se proyectan los reticulopodios, seudpodos muy finos de aspecto hialino (transparente) o finamente granulados, estas estructuras son ramificadas de tal manera que forman una especie de red entorno del cuerpo. La composicin de las conchas puede ser silcea o calcrea o bien presentar una serie de materiales extraos como: arena, espculas de esponjas, etc. Todos los representantes son de vida libre y la mayora marinos, algunos de agua dulce; se agrupan en tres rdenes (ATHALAMIDA, MONOTHALAMIDA y FORAMINIFERIDA), sin menospreciar la importancia ecolgica de los dems ordenes, consideramos que los foraminferos son los de mayor relevancia. Algunos gneros representativos de este orden son: Rotalia sp., Asterigerina sp., Bolivina sp., Discorvis sp., y Globigerinasp. (Fig. 5).

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Globigerina bulloides

Bulimina spp.

Nonionella sp. Figura 5. Tipos Morfolgicos de Foraminferos SUPERCLASE ACTINOPODA Son organismos de formas esfricas, los seudpodos ms comunes son de tipo axpodos, menos comunes son otros tipos, la simetra de estas estructuras es radial a partir del centro del organismo, pueden ser desnudos o protegidos por un esqueleto este puede ser de slice o silicatos de calcio y magnesio. Presentan reproduccin asexual y sexual esta ltima implica gametos que son generalmente flagelados. Se clasifican en cuatro clases: ACANTHAREA, POLYCYSTINEA y PHAEODAREA, anteriormente conocidas como el orden RADIOLARIDA (Kudo, 1966) y HELIOZOEA, a las que corresponden 17 rdenes. A continuacin se describen dos de las clases consideradas ms importantes a nuestro criterio, debido a que fcilmente las podemos encontrar representadas en nuestro estado. CLASE ACANTHAREA Se caracterizan por presentar un esqueleto de composicin tpica de la superclase, en la mayora de los casos presentan una cantidad variable de espinas en disposicin de simetra radial algunos no presentan una clara simetra, contienen un ectoplasma vacuolado separado del endoplasma granular por una cpsula central que no presenta poros especiales; se clasifican en 5 ordenes: HOLACANTHIDA, SYMPHYACANTHIDA, CAHUNACANTHIDA, ARTHRACANTHIDA y ACTINELIDA, los cuales se separan por la cantidad y disposicin de las espinas as como por la presencia o ausencia de quistes. Algunos gneros representativos son: Acanthochiasma sp., Acanthocolla sp., Acantholithium sp., Stauracon sp. y Actinelius sp. (Fig. 6).

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Eucecryphalus clinatus Anomalacantha dentata

Acantholithium spp.

Arachnocorallium sp.

Peromelissa phalacra

Figura 6. Tipos Morfolgicos de los Radiolarios y Acantridos 2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Metileno, en tanto que los ncleos, con el Rojo Neutro o Congo. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (membrana). Organelos celulares (ncleos, vacuolas digestivas y contrctiles, tipos de seudpodos y ornamentaciones). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos (unicelulares o coloniales) NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados) Realice un cuadro comparativo con las diferentes ornamentaciones de los gneros observados.

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Cuadro Comparativo de los Gneros Observados GENERO FORMA TIPO DE SEUDPODOS ORNAMENTACIONES DE CUBIERTA CLULA

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PRCTICA N 18 PROTOZOOS CILIADOS (de vida libre dulceacucolas y marinos) 1. INTRODUCCIN Su principal caracterstica es la presencia de cilios o conjunto de estos, que pueden ser ms complejos (cirros, membranelas, etc.); si bien algunas especies en la fase adulta pierden los cilios, en algunas etapas de su ciclo la van a presentar, o bien puede existir una infraciliatura. Adems se les observa uno o ms ncleos; algunos pueden contar con una boca bien definida llamada citostoma, que se comunica con una estructura tubular, la citofaringe, quien abre al interior de la clula. Este grupo es considerado como los animaloides de mayor complejidad, morfolgica, estructural y fisiolgicamente. La reproduccin ms comn es de tipo asexual por fisin binaria, gemacin, y fisin mltiple, en tanto que la sexual se da por conjugacin y autogamia, no presentan una verdadera singamia. Algunas de sus caractersticas se pueden observar en la Figura 1.

Vacuola digestiva Citofarnge Citostoma Ciliatura oral Citoprocto

Cilios

Fagocito

Vacuola contrctil Membrana Macroncleo Vacuola contrctil Microncleo

Figura 1. Estructura citoplasmtica y ciliar

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En el caso de las especies de vida libre se pueden localizar en aguas dulces, salobres, marinas y salinas tambin asociados a races y musgos con alto contenido de humedad. CLASE KINETOFRAGMINOPHOREA Presentan infraciliatura oral ligeramente distinta de la somtica, se les observa un citostoma apical, subapical o medio ventral, pueden tener o no atrio o vestbulo, con un anillo de cilios ms largos cerca de la zona oral, tambin algunos presentan placas esqueletales (exoesqueleto), (Fig. 2)

Platyophrya

Urotricha

Prorodon

Lacrymaria spp.

Figura 2. Diversidad Morfolgica de Kinetofragminophorea CLASE OLIGOHYMENOPHORA El aparato oral se encuentra en una cavidad bucal bien definida, solo en un grupo no se presenta. La ciliatura citostomtica (bucal) es diferente a la del cuerpo sta generalmente es uniforme y densa, presentan ciliatura paraoral en forma de membranela en uno de los lados y adoral con tres membranelas en el opuesto. El citostoma generalmente en posicin ventral y cercana al lado anterior en el fondo de la cavidad bucal o infundibular, varias especies presentan lrica. SUBCLASE HYMENOSTOMATIA Los cilios del cuerpo normalmente son uniformes, las estructuras orales no son notorias, algunos gneros representativos son: Colpidium, Paramecium (Fig. 3).

Colpidium

Tetrahymena

Paramecium Figura 3. Morfologa de Hymenostomatia

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SUBCLASE PERITRICHA Formas principalmente ssiles, con ciliatura corporal reducida, sta slo se ubica oralmente o en bandas conspicuas (Vorticella y Zoothamnium), (Fig. 4)

Vorticella

Zoothamnium

Cilios Microtbulos Vacuola contrctil Vestbulo Cistostoma Macroncleo Vacuola digestiva Fibras contrctiles Pednculo

Figura 4. Tipos Morfolgicos de Vorticlidos CLASE POLYMENOPHOREA Presentan una zona adoral de multimembranas muy evidentes y bien desarrolladas, las cuales frecuentemente se extienden ms all del cuerpo en uno de los lados. En todo el cuerpo se pueden observar cilios, o slo en una parte del mismo o en su defecto aparecen cirros. El citostoma se localiza al fondo de la cavidad bucal o infundibulo, la ciliatura del cuerpo pocas veces incluye cinetodesmata, comnmente presentan postciliodesmata que suele ser prominente, frecuentemente no contienen citoprocto, en muchos casos existen especies con quistes y lrica. (Fig. 5)

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Leprotintinnus spp.

Tintinnopsis sp.

Favella sp.

Metacylis sp. Rhabdonella sp. Xystonella sp. Codonellopsis sp.

Tintinnopsis sp. Amphorella sp. Tintinnus sp.

Figura 5. Algunos Tintinnidos Nerticos de Mxico

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ORDEN HIPOTRICHIDA Organismos aplanados dorsiventralmente con cirros en el lado ventral, como los gneros: Urostyla sp., Euplotes sp. y Stylonichia sp. (Fig. 5)

Euplotes

Urostyla

Stylonichia

Membranelas Microncleo Cavidad bucal Macroncleo Citostoma Citofarnge Vacuola contrctil Cirros

Figura 6. Tipos Morfolgicos en Hipotrichida

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2. MATERIAL BIOLGICO Muestras de agua colectadas en los diferentes sistemas acuticos. 3. DESARROLLO DE LA PRCTICA La cubierta de las clulas se puede resaltar utilizando Azul de Metileno, en tanto que los ncleos, con el Rojo Neutro o Congo. Si lo deseas puedes probar con una coloracin mixta. a) Coloca una o dos gotas de concentrado de tu muestra, agrega 1 2 gotas del colorante elegido, deja reposar durante 1 2 minutos, coloca el cubreobjetos y observar al microscopio. Cubierta celular (membrana). Organelos celulares (ncleos, vacuolas digestivas y contrctiles, tipos de cilios y ornamentaciones). Utilice las muestras preparadas para el caso anterior y observe: - Tipos morfolgicos (unicelulares o coloniales) NOTA: SI EXISTE EXCESO DE COLORANTE QUITARLO CUIDADOSAMENTE CON PAPEL HIGINICO. REALICE ESQUEMAS TOME FOTOGRAFAS (Recuerda que las fotografas te sern tiles para la presentacin de tus resultados) Realice un cuadro comparativo con las diferentes ornamentaciones de los gneros observados.

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Cuadro Comparativo de los Gneros Observados


GNERO FORMA DE CLULA TIPO DE CUBIERTA TIPO DE CILIOS CITOSTOMA VESTBULO ORGANIZACIN CELULAR

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BIBLIOGRAFA Ayala-Castaares, A. y L. R. Segura. 1981. Foraminferos recientes de la Laguna de Tamiahua, Ver., Mxico. An. Inst. Cienc. Del Mar y Limnologa. Univ. Nal. Autn. Mxico. 8 (1):1 314 pp. Balech, E. 1979. Dinoflagelados de la campaa oceanogrfica Argentina Isla Orcadas 0675. Repblica Argentina, ARMADA ARGENTINA Servicio de Hidrografa Naval, Talleres Grficos del SHN, Buenos Aires Argentina. 86 pp. Ceballos C. J. G. A. 1998. Contribucin al Conocimiento de la Composicin y Distribucin del Fitoplancton de la Baha de Maruata, Michoacn. Mxico. Ensayo de Licenciatura. Escuela de Biologa. UMSNH. Mxico. Ceballos C., J. G. A. 2002. Los Tintinidos de la Provincia Neritica en el Pacifico Tropical de Mxico, entre Guerrero y Jalisco. Un grupo poco estudiado. XII Reunin Nacional de la Sociedad Mexicana de Planctologa. V International Meeting of the Mexican Society of Plancktology: 39. Ceballos C., J.G.A. 2005. Los Tintnnidos de la Provincia Nertica de la Costa del Estado de Michoacn. En: La biodiversidad en Michoacn: Estudio de Estado. Villaseor G., L. (editora). 2005. Comisin Nacional para el Conocimiento y Uso de la Biodiversidad, Secretara de Urbanismos y Medio Ambiente, Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Mxico. ISBN: 970 900 028 4. Ceballos C., J.G.A. 2006. Dinoflagelados Raros en la Zona Nertica Durante el Perodo InviernoPrimavera del 2004 en la Costa de Michoacn, Mxico. XIV Reunin Nacional de la Sociedad Mexicana de Planctologa y VII International Meeting of the Mexican Society of Planktology. Ceballos C., J.G.A., S.F. Andrade H. y P. Herrera H. 2006. Silicoflagelados (Dyctyochophyceae) Planctnicos en la Costa de Michoacn, Mxico. XIV Reunin Nacional de la Sociedad Mexicana de Planctologa y VII International Meeting of the Mexican Society of Planktology. Ceballos C., J.G.A. y E. Snchez M. 2006. Anlisis de Ceratium (Dinophyceae) en el Fitoplancton de la Provincia Nertica Frente al Arrecife Rocoso de El Zapote de Madero, Mpio. Aquila, Mich. Mx. XIV Reunin Nacional de la Sociedad Mexicana de Planctologa y VII International Meeting of the Mexican Society of Planktology. Chvez V., L. Zariana, E. Novelo y R. Tavera. 2005. Variacin morfolgica de algunas especies de Ophiocytium Ngeli (Xantophyceae) de cuerpos de agua temporales del Estado de Mxico. Hidrobiolgica 15 (3): 311-320.

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