ANTIBIOGRAMA

TEST DE RESISTENCIA O SENSIBILIDAD ANTE DIVERSOS ANTIBITICOS PARA STAPHILOCOCCUS AUREUS Y OTRAS BACTERIAS

Acua Barragn Julio Cesar - Rodrguez Monroy Cesar Andrs Rondn Prez Alexander - Salgado Ruiz Jesica 1109101 11091020 - 11091007 - 11091022 Programa de Qumica Industrial, Quinto Semestre Microbiologa Corporacin Tecnolgica de Bogot Abril 27 de 2011

Resumen: Se realizo un estudio de caracterizacin para medir la sensibilidad In Vitro de tres bacterias patgenas comunes: S. aureus, E. coli, y Pseudomona (cultivos en agar muller-Hilton).En antibiticos penicilnicos como: Gentamicina, Penicilina, Ampicilina y Cloxacilina. El objetivo de esta prctica es conocer el efecto que tienen las bacterias ante los antibiticos. Se obtuvo resultados variados de inhibicin y difusin. E.Coli fue la nica bacteria que presento sensibilidad para Cloxacilina. Palabras Claves: Actividad antimicrobiana, caracterizacin sensibilidad, antibiticos penicilnicos, bacterias patgenas comunes. Introduccin: El antibiograma es un test de resistencia o sensibilidad de las bacterias bajo la accin de diversos antibiticos. Si un microorganismo est en contacto con la droga y an as persiste su capacidad vital, se deduce la inoperancia farmacolgica del producto para tal germen. Hay resistencia al antibitico. Inversamente si la zona que rodea al antibitico est totalmente libre, o sea, que no hay desarrollo de la bacteria: esta es sensible a la droga. Esta zona circundante al antibitico, llamada halo de inhibicin, es de gran valor clnico para iniciar, continuar o modificar una terapia.1

Resultados: Las diferentes observaciones se describen a continuacin y estn soportadas en las imgenes proporcionadas.

http://fotografia.tripod.com/textos/antibioticos1.htm

24 horas

1 semana

Vista General Antibiograma para S. aureus

Cultivo con S. aureus Disco1. Gentamicina

Disco2. Penicilina

Descripcin 24 horas Los resultados muestran que la bacteria se contiene de estar cerca al antibitico, se distingue una pequea inhibicin del S. aureus vindose transparente alrededor del disco y una difusin un poco ms alejada, en ste tiempo, el antibitico cumple la caracterstica primordial de un bacteriosttico. Con este antibitico no se observ inhibicin del S. aureus, pero si se not que la penicilina se difundi. Este antibitico en el tiempo indicado es bacteriosttico.

Imgenes

Inhibicin= 0,7cm Difusin= 2,3cm

Inhibicin= 0 cm Difusin= 1,5 cm

Disco3. Ampicilina

Con ste antibitico la bacteria se inhibi ms fuertemente que con los dems, quedando alrededor del disco libre de S. aureus, 2cm bactericida. Adems este medicamento tambin tuvo una difusin que indica que el antibitico en este segundo halo es bacteriosttico.

Inhibicin= 2 cm Difusin= 3 cm

Disco4. Cloxacilina

Cultivo con S. aureus Disco1. Gentamicina

Disco2. Penicilina

Al igual que con la penicilina, no hubo inhibicin, pero si se present una propagacin (mayor que con la penicilina). El antibitico es bacteriosttico durante este tiempo. Descripcin 168 horas (1semana) Despus de una semana de accin del antibitico sobre la bacteria, este muestra abstencin sobre ella, indica su propiedad bactericida sobre este microorganismo. Debido a su facultad anaerobia, la gentamicina no actua el primer dia, por eso actua a la semana. Despus de este tiempo, el antibitico sigue siendo bacteriosttico frente a S. aureus.

Inhibicin= 0 cm Difusin= 2,1 cm Imgenes

Inhibicin= 1,9cm Difusin= 0cm

Inhibicin= 0 cm Difusin= 1,5 cm Disco3. Ampicilina Como en las primeras observaciones, con el antibitico se forman dos halos: el primero bactericida y el segundo, que solo se difunde, bacteriosttico. Inhibicin= 2cm Difusin= 3cm Disco4. Cloxacilina El antibitico sigue con su propiedad bacteriosttica frente al S. aureus.

Inhibicin= 0 cm Difusin= 2,1 cm

Cultivo con Pseudomona Disco1. Gentamicina

Descripcin 168 horas (1semana) Bactericida

Imgenes Inhibicin= 2,8cm Difusin= 0cm Inhibicin= 0cm Difusin= 3,1 cm Inhibicin= 0 cm Difusin= 3 cm Inhibicin= 0 cm Difusin= 2cm Imgenes Inhibicin= 2cm Difusin= 0cm Inhibicin= 0,9cm Difusin= 0cm Inhibicin= 0cm Difusin= 0cm Inhibicin= 2,4cm Difusin= 0cm

Disco2. Penicilina Disco3. Ampicilina Disco4. Cloxacilina Cultivo con Escherichia coli Disco1. Gentamicina Disco2. Penicilina

Bacteriosttico Bacteriosttico Bacteriosttico Descripcin 168 horas (1semana) Bactericida Bactericida

Disco3. Ampicilina Disco4. Cloxacilina

Bacteriosttico Bactericida

Discusin: Un antibitico acta por limitador y parador (y por lo tanto matando) el crecimiento de un microorganismo especfico. Probablemente realiza esto al inmiscuir con la pared de la clula de la bacteria mientras tienen poco efecto sobre las clulas normales de cuerpo.2 La Gentamicina, es un antibitico aminoglucsido de amplio espectro. Acta sobre bacterias gramnegativas aerobias, incluyendo enterobactericeas, Pseudomonas y Haemophilus. Acta tambin sobre estafilococos (Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis) incluyendo cepas productoras de penicilinasa, tiene actividad muy limitada sobre estreptococos. Carece de actividad sobre bacterias anaerobias.3 La penicilina es un antibitico del grupo de los betalactmicos que se emplea en el tratamiento de infecciones provocadas por bacterias sensibles. Mata bacterias e impide que stas continen con su crecimiento, slo tiene el poder de combatir a aquellos microorganismos patgenos que se encuentran en
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http://fotografia.tripod.com/textos/antibioticos1.htm http://www.facmed.unam.mx/bmnd/gi_2k8/prods/PRODS/Gentamicina%20Iny.htm

crecimiento y multiplicacin, y no a esos que an se encuentran en estado latante.4 Las penicilinas son antibiticos de origen natural (producidos por hongos del genero Penicillum) o semisintticos. Estos ltimos se obtienen mediante la modificacion de la estructura qumica de las penicilinas naturales. Son sustancias de caracter cido, tambin llamadas betalactaminas en razn de poseer en su molcula un anillo beta lactmico.5 La Ampicilina, est indicada en el tratamiento de infecciones causadas por cepas susceptibles de diferentes microorganismos, tales como E. coli, P. mirabilis, enterococos, Shigella, S. typhosa Salmonella, N. gonorrhoeae Shigella, S. typhosa y otras salmonelas, E. coli, P. mirabilis y enterococos H. influenzae no productora de penicilinasa y estafilococos sensible a la penicilina G, estreptococos incluyendo Streptococcus pneumoniae y neumococos.6 La Cloxacilina, es un antibitico betalactmico, bactericida de espectro pequeo. Su mecanismo de accin es la inhibicin de la sntesis de la pared bacteriana con la consecuente lisis de la bacteria. La cloxacilina pertenece al grupo de las penicilinas antiestafiloccicas ya que fue desarrollada para tratar las infecciones ocasionadas por estafilococos productores de lactamasa. Es activa contra estafilococos, microorganismos sensibles y resistentes a la penicilina, Streptococcus pyogenes y Streptococcus pneumoniae. Sin embargo, es menos activa que la penicilina G contra bacterias sensibles a la penicilina, Enterococcus faecalis y microorganismos gramnegativos.7 Bactericida. Inhibe transpeptidasas y carboxipeptidasas impidiendo la sntesis de la pared celular bacteriana. Resistente a penicilinasa estafiloccica.8 S. aureus posee resistencia a travs de una beta-lactamasa inducible que le confiere resistencia ante la penicilina, esta -lactamasa est codificada en un plsmido presente en ms del 90% de las cepas. La resistencia al xido ntrico es una cualidad peculiar del S. aureus, capacidad que lo distingue de otros patgenos, incluyendo los comensales S. epidermidis y S. saprophyticus. Esa resistencia se debe a que el microorganismo produce una enzima llamada lactato-deshidrogenasa, que la faculta para tolerar el estrs causado por el
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http://www.slideshare.net/marinarr/la-penicilina

http://www.uam.es/departamentos/medicina/farmacologia/especifica/F_General/FG_T6 2.pdf
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http://www.facmed.unam.mx/bmnd/gi_2k8/prods/PRODS/Ampicilina.htm http://aprendertodo.info/cloxacilina/ http://www.vademecum.es/principios-activos-cloxacilina-j01cf02

radical del xido ntrico. Esta observacin se ha hecho tanto en especies resistentes a la meticilina como en las que son susceptibles al antibitico, as como en cepas hospitalarias como adquiridas en la comunidad.9 Se pudo observar que la Gentamicina tiene poder bactericida frente a las tres bacterias en especial con la Pseudomona. Caso contrario es el de la Penicilina, esta no actu como antisptico con ninguna de los microorganismos utilizados. En cuanto a la Ampicilina y la Cloxacilina, hubo inhibicin con E. coli y S. aureus y, en E. coli respectivamente. Se puede deducir la ineficiencia farmacolgica de algunos de los antibiticos utilizados frente a las bacterias estudiadas al ver que la capacidad vital de estas persiste aun despus del contacto con los medicamentos. Adems, es importante el tiempo de accin del medicamento sobre la bacteria, ya que como se pudo observar con S. aureus, por ejemplo, en un corto lapso en contacto con la Gentamicina no hubo inhibicin, mientras que ya transcurrido cierto perodo de tiempo se observ el efecto antibitico sobre la bacteria.

Cuestionario: 1. Cules son las estrategias para disminuir la aparicin de resistencias a los antibiticos? Uso racional de los antibiticos mediante la educacin a los mdicos y la poblacin. Incremento en los planes de educacin mdica de pregrado y posgrado del estudio de las enfermedades infecciosas, el uso de los agentes antimicrobianos y su prescripcin basada en la evidencia. Establecimiento de programas de vigilancia para detectar la aparicin de cepas resistentes, y mejoramiento de la calidad de los mtodos de susceptibilidad para guiar la teraputica emprica contra los patgenos que producen las enfermedades infecciosas ms comunes. Rotacin cclica de antibiticos en las instituciones de salud para reducir la resistencia, se considera un concepto novedoso y atractivo ya que el uso de los antibiticos constituye un estmulo para la emergencia de la resistencia; sin embargo, la incorporacin de otros factores potencialmente determinantes en la adquisicin de resistencia en la estructura gentica como bacterifagos, plsmidos, transposones y el ms reciente descubrimiento de genticos movibles denominados integrones y cassettes de genes, ha creado cierto grado de escepticismo en el xito de esta estrategia.

http://es.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus

2. Clasifica a los antimicrobianos usados en la prctica de acuerdo a su estructura qumica y mecanismo de accin en la estructura celular.10

Ampicilina

Penicilina

Gentamicina

Cloxacilina

Inhibe la sntesis de la pared celular de la bacteria en sus ltimas dos etapas unindose a las PBP, lo que lleva a la destruccin de la pared y lisis celular.

Ejerce una accin bacterici da por alterar la pared celular bacteria na.

Su mecanismo de actuacin consiste en interferir en la sntesis normal de protenas, originando protenas no funcionales en microorganismos susceptibles.

-lactamicos

-lactamicos

Aminoglucosido

Su mecanismo de accin es similar al de resto de las penicilinas actuando sobre la pared celular e inhibiendo una serie de enzimas, lo que impide la sntesis de peptidoglicano y la formacin de enlaces cruzados necesarios para la pared celular bacteriana. -lactamicos11

3. Cules son las bases para la utilizacin clnica de los antimicrobianos? Empleo cada vez ms de las vacunaciones. En este sentido, en la actualidad se buscan nuevas opciones contra grmenes de alta virulencia y multirresistencia, productor de procesos infecciosos graves en los seres humanos como el Neumococo.12 4. Qu otros mtodos se pueden utilizar para la valoracin y seleccin de antimicrobianos? En la mayora de los laboratorios de diagnstico veterinario, el mtodo de difusin por discos es la tcnica ms utilizada para evaluar la sensibilidad
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http://bvs.sld.cu/revistas/mil/vol32_1_03/mil07103.htm http://es.wikipedia.org http://bvs.sld.cu/revistas/mil/vol32_1_03/mil07103.htm

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antimicrobiana de patgenos de desarrollo rpido. Para obtener resultados confiables, los detalles tcnicos deben ser cuidadosamente estandarizados y controlados. Las tcnicas de dilucin en caldo y agar, se pueden utilizar para medir cuantitativamente la actividad in vitro de un antimicrobiano frente a un cultivo bacteriano. Estos mtodos se basan en la preparacin de una serie de tubos, pocillos o placas con caldo o agar respectivamente, a los cuales se les agrega el antibitico en distintas concentraciones.13 Bibliografa: http://fotografia.tripod.com/textos/antibioticos1.htm http://fotografia.tripod.com/textos/antibioticos1.htm http://www.facmed.unam.mx/bmnd/gi_2k8/prods/PRODS/Gentamicina %20Iny.htm http://www.slideshare.net/marinarr/la-penicilina http://www.uam.es/departamentos/medicina/farmacologia/especifica/F_Gen eral/FG_T62.pdf http://www.facmed.unam.mx/bmnd/gi_2k8/prods/PRODS/Ampicilina.htm http://aprendertodo.info/cloxacilina/ http://www.vademecum.es/principios-activos-cloxacilina-j01cf02 http://es.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus http://bvs.sld.cu/revistas/mil/vol32_1_03/mil07103.htm http://es.wikipedia.org
http://bvs.sld.cu/revistas/mil/vol32_1_03/mil07103.htm

www.cdc.gov/ncidod/dbmd/gss/.../CIM_ATB_ANIMALES.pdf

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www.cdc.gov/ncidod/dbmd/gss/.../CIM_ATB_ANIMALES.pdf