I. TTULO DE LA INVESTIGACIN Efecto conjunto del extracto de cebolla y ajos ( allim cepa l. allium sativum l.

) Como coadyuvante de la amoxicilina(penicilina) contra cepas de s. aureus en el laboratorio de farmacologa de UNFV. De abril ah agosto del 2008

II. RESUMEN En este trabajo vamos a investigar sobre el efecto coadyuvante del extracto de ajos y cebolla en cepas de S. aureus y ver sus dimensiones en la caja petri, este estudio se hace con la finalidad de encontrar mtodos alternativos bactericidas por ser de comercio comn los ajos y las cebolla y fcil accesibilidad la poblacin de lima puede tener un metodo mas para ayudar a la mejor calidad de vida III. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Cual es Efecto conjunto del extracto de cebolla y ajos ( allim cepa l. allium sativum l.) Como coadyuvante de la amoxicilina(penicilina) contra cepas de s. aureus en el laboratorio de farmacologa de UNFV. De abril ah agosto del 2008? IV. JUSTIFICACION E IMPORTANCIA Los procesos de infecciones bacterianas de vas respiratorias se han convertido en uno de los problemas ms frecuentes de salud pblica en nuestro pas teniendo en cuenta las estadsticas y la realidad en la que se sita la poblacin peruana. Es muy conocido que en la ciudad de Lima se presentan cada hora personas, sobretodo infantes con afecciones respiratorias Muy poco se conoce de la medicina natural que sirve para tratar estos cuadros, por lo cual se pretende hacer conocer las propiedades antibacterianas de dos plantas caseras y mundialmente conocidas, como es el caso del Allium Sativum, o el coloquialmente denominado, ajo y Allium Cepa que es la cebolla.

Esta planta tiene muchas propiedades medicinales, entre las principales figuran, su propiedad antiinflamatoria, antioxidante, antialergico y una muy poco conocida antibacterino. La mayora de estas propiedades se debe a la presencia de un flavonoide, la quercetina, allisina (bacteriosttico). El presente trabajo tiene la intencin de demostrar que esta planta en su forma de extracto puro, tiene la capacidad de competir y ayudar a un frmaco de buena eficacia y poco costo como es la amoxicilina.

V. FUNDAMENTO TERICO

MARCO TEORICO
En el presente trabajo debemos hablar primero del uso comn de un antibitico que es un medicamento que se utiliza para tratar una infeccin bacteriana, y que por su efecto, mata o impide el crecimiento de ciertas clases de bacterias, pero que normalmente es inofensivo para el husped (aunque ocasionalmente puede producirse una reaccin adversa al medicamento o puede afectar a la flora bacteriana normal del organismo). El trmino fue utilizado por primera vez para describir solamente las formulaciones antibacterianas derivadas de los organismos vivos, pero en la actualidad est siendo usada para referirse a los antimicrobianos sintticos como las quinolonas, sulfamidas y otros. En trminos estrictos, un antibitico es una sustancia secretada por un microorganismo, que tiene la capacidad de afectar a otros microorganismos como bacterias y hongos. De ah que los antibiticos no sean efectivos en las enfermedades vricas. Uno de los efectos colaterales del mal uso o abuso de los antibiticos es que la bacteria se vuelva resistente a los antibiticos. En 1984 la mitad de las personas con tuberculosis activa en los Estados Unidos tena una variedad que resista al menos a un antibitico. Entre 1985 y 1991 la tuberculosis aument en un 12% en los Estados Unidos y un 300% en frica donde el VIH y la tuberculosis se suelen encontrar conjuntamente. El Staphylococcus aureus resistente a meticilina es un microorganismo particularmente nocivo, que es muy comn en hospitales.

La creciente resistencia de las bacterias a los antibiticos qumicos y los efectos secundarios derivados de su mal uso, hacen que cada vez ms no tenga el efecto deseado. Mientras que los antibiticos utilizados racionalmente son indispensables en la prctica mdica, el abuso de los mismos tanto a nivel mdico como en la agricultura est produciendo generaciones de bacterias resistentes; las infecciones se agravan y el paciente no se cura. Incluso ya se han detectado bacterias indestructibles a las que no les afectan ningn tipo de antibitico conocido. La ciencia mdica nos advierte del empleo masivo e irreflexivo de antibiticos, que no slo se han convertido en productos qumicos carentes de eficiencia, sino que tienen notables efectos nocivos. Las primeras seales de alarma saltaron cuando varias centros hospitalarios anunciaron que la vancomicina, un potente antibitico, era incapaz de combatir el staphylococus aureus, la bacteria responsable de muchas infecciones hospitalarias. Ocurre lo mismo con la penicilina: un 40% de las cepas de streptococus pneumoniae, causante de neumonas, meningitis y otitis se ha vuelto resistente total o parcialmente a la misma. Ms peligrosas an se han tornado algunas cepas de enteroccoccus (capaces de provocar graves infecciones del tracto urinario y las vlvulas cardacas), inmunes a todos los frmacos existentes en el mercado. Esta situacin plantea la desconcertante posibilidad de que llegar un momento en que los antibiticos, como sistema teraputico, tendrn inters slo desde un punto de vista histrico, ha advertido el doctor Stuart Levy, experto de fama mundial sobre la resistencia a las bacterias. Fleming ya advirti en 1945: El abuso de la penicilina acabar provocando el desarrollo inevitable de bacterias resistentes. Y eso que entonces no se saba que estos microorganismos, adems de comunicarse entre s de forma inteligente, son capaces de prevenir estratgicamente el ataque de otros medicamentos cuando se hacen inmunes a uno. As pues, cualquier intento de destruirlas est destinado a fracasar tarde o temprano porque, por otra parte, segn sealan los expertos, las bacterias producen una nueva

generacin cada veinte minutos y se multiplican 500.000 veces ms deprisa que los humanos. Sin duda, tenemos un grave problema, observa Stephen H. Buhner, autor del libro Antibiticos naturales. la era de los antibiticos se ha acabado -afirma el mismo-. El grado y velocidad de evolucin de las bacterias son tan rpidos que los nuevos antibiticos generan resistencia en pocos aos, en lugar de las dcadas que necesitaban antes. Es un futuro estremecedor. Pero an quedan unos rayos de esperanza. Efectivamente, algunos cientficos sealan que si empezamos por reducir drsticamente el uso de los antibiticos en la produccin ganadera y avcola (los alimentos crnicos, pollos y huevos que nos venden estn con frecuencia contaminados con bacterias como el campylobacter y la salmonela, ambas resistentes a los antibiticos) y limitamos su utilizacin a los casos ms graves para la salud, quiz podamos superar al menos parte del problema porque... los investigadores han descubierto tambin que cuando las bacterias no topan regularmente con antibiticos, empiezan a olvidar cmo resistirse a ellos. Diallyl thiosulfinate (allicin) es el agente encontrado en el ajo que es responsable de la actividad antibacteriana y antifungal de los extractos de esta planta. El efecto de las concentraciones bacteriostatic de allicin (0.2 a 0.5 mm) sobre el crecimiento de Salmonella typhimurium revel un modelo de inhibicin caracterizada. Por otra parte, el hecho de que los antibiticos naturales no generen resistencias por parte de las bacterias ya es suficiente para plantearse su empleo regular, pero no hay que olvidar que, adems, favorecen el proceso de regeneracin epiteliar, estimulan los mecanismos naturales de eliminacin, promueven el funcionamiento de los rganos en general, inhiben el crecimiento de los grmenes patgenos y aumentan las defensas del organismo, mientras que los antibiticos sintticos suelen bajarlas. Y para poder entender un poco mas de este agente infeccioso con el que vamos a tratar diremos que el Staphylococcus aureus (estafilococo ureo) es una bacteria que se encuentra en la piel y fosas nasales de las personas sanas, que causa gran variedad de infecciones, desde infecciones menores de la piel (forunculos, ampollas, vejigas) y

abscesos cutneos hasta enfermedades que pueden poner en peligro la vida como neumona, meningitis, endocarditis, sndrome del shock toxico (SST) y sepsis. Es un coco que crece agrupado en racimos (de ah su raz "Staphylo"), que responde positivamente a la tincin de Gram, es aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una atmsfera con oxgeno y tambin sin el mismo, no presenta movilidad ni forma cpsula. Es capaz de crecer hasta con un 10 % de sal comn. Por esto puede crecer en el agua del mar. Produce la fermentacin lctica. Es catalasa positivo y coagulasa positivo. Por tanto se usan medicamentos como la amoxicilina que es un antibitico semisinttico derivado de la penicilina. Se trata de una amino penicilina. Acta contra un amplio espectro de microorganismos, tanto Gram positivos como Gram-negativos. Por esto se emplea a menudo como primer remedio en infecciones de diferente gravedad, tanto en medicina humana como tambin en veterinaria. Se utiliza por va oral o parenteral, aunque la forma parenteral (intramuscular o intravenosa) no est aprobada en todos los pases. La amoxicilina fue aprobada por primera vez en 1987. Desde entonces se comercializa entre otros por parte de GlaxoSmithKline con el nombre de Augmentine, Amoxil o Clamoxil. Hoy la patente ha caducado y se encuentra en el mercado tambin con otros nombres como Actimoxi, Amoxibiotic, Amoxicilina, Amoxidal, Pamoxicillin, Lamoxy, Polymox, Trimox, Tolodina y Zimox A pesar de su amplio espectro, no es estable frente a beta lactamasas, por lo que no debe usarse frente a infecciones por grmenes productores de las mismas. Sin embargo, hay preparados comerciales con la adicin de cido clavulnico o sulbactam, que aumentan su estabilidad y amplan su espectro en estos casos. Como todas las penicilinas puede provocar reacciones alrgicas severas o efectos secundarios como fiebre, nuseas, vmitos o diarrea. Su mecanismo de accin como las dems penicilinas seria que la amoxicilina impide en las bacterias la correcta formacin de las paredes celulares. Concretamente inhibe la conexin entre las cadenas peptidoglicneas lineares que forman la mayor parte de las

paredes de los microorganismos Gram-positivos. Al impedir que la pared celular se construya correctamente, la amoxicilina ocasiona, en ltimo trmino, la lisis de la bacteria y su muerte. Es absorbida rpidamente en el intestino delgado (disponibilidad de aprox. el 80 %) tanto en ayunas como tras la ingesta de alimentos. Es eliminado con la orina sin ser metabolizado. La amoxicilina no resiste la accin hidroltica de las beta-lactamasas de muchos estafilococos, por lo que no se usa en el tratamiento de estafilococias. Aunque la amoxicilina es activa frente a los estreptocos, muchas cepas se estn volviendo resistentes mediante mecanismos diferentes de la induccin de -lactamasas, por lo que la adicin de cido clavulnico no aumenta la actividad de la amoxicilina frente a estas cepas resistentes. Dado que muchos otros grmenes se estn volviendo resistentes a la amoxicilina, se recomienda realizar un antibiograma antes de instaurar un tratamiento con amoxicilina, siempre que ello sea posible.

Staphylococcus aureus (estafilococo ureo) es una bacteria que se encuentra en la piel y fosas nasales de las personas sanas, que causa gran variedad de infecciones, desde infecciones menores de la piel (forunculos, ampollas, vejigas) y abscesos cutneos hasta enfermedades que pueden poner en peligro la vida como neumona, meningitis, endocarditis, sndrome del shock toxico (SST) y sepsis. Es un coco que crece agrupado en racimos (de ah su raz "Staphylo"), que responde positivamente a la tincin de Gram, es aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una atmsfera con oxgeno y tambin sin el mismo, no presenta movilidad ni forma cpsula. Es capaz de crecer hasta con un 10 % de sal comn. Por esto puede crecer en el agua del mar. Produce la fermentacin lctica. Es catalasa positivo y coagulasa positivo.

Grupo de riesgo El Staphylococcus aureus es un agente patgenico que acta como un microorganismo saprfito, se encuentra en la piel del individuo sano pero en ocasiones en que las defensas de la piel caen puede causar enfermedad Infeccin Infeccin de piel y partes blandas. Neumona, sialadenitis, sepsis con o sin metstasis (ostetis, artritis, endocarditis, abscesos localizados), orzuelos. Enfermedades por toxinas (sndrome de la piel escaldada, sndrome del shock txico y gastroenteritis). tratamiento Esta bacteria produce la enzima penicilinasa, pero hay que tomar en cuenta que est logrando un alto grado de tolerancia contra penicilinas resistentes a penilicinasas como la ozacilina, cloxacilina y dicloxacilina. Penicilina 4 Generacin (Meticilina), si no es resistente (SARM Staphylococcus aureus Resistentes a Meticilina). Estos Staphylococcus resistentes a Meticilina son muy peligrosos ya que provocan multitud de infecciones nosocomiales (contraidas en el hospital) y son multiresistentes a gran cantidad de antibiticos (adems de ste); se ha visto que estos microorganismos pueden ser ahora sensibles a la penicilina G. Han provocado un gran problema en los pases desarrollados, siendo estos patgenos portada de peridicos en Reino Unido o Estados Unidos y en otros paises Alternativas Vancomicina (es el antibitico de eleccin en caso de resistencia a la cloxacilina), cotrimoxazol, cefalosporina, amoxicilina asociada a cido clavulnico, imipenem, clindamicina, ciprofloxacino o un aminoglicsido (no debe utilizarse como frmaco nico). S. aureus es cogulasa positivo, lo cual constituye su caracterstica ms distintiva. En los pocos casos de un posible S aureus que no produce coagulasa puede realizarse la prueba para desoxirribonucleasa termoestable que es an ms especfica.

Referencias y notas Es una bacteria muy completa que es mortal y se puede desarrollar tanto con oxigeno o sin el, puede tambien desarrollarse en el mar , se situa en la piel y las fosas nasales la mayoria de estas infecciones pueden ser leves como granos y forunculos y pueden tratarse sin antibioticos. Pero tambien pueden causar infecciones graves como heridas quirrgicas, infecciones de la sangre y neumona. El SARM es un tipo de estafilococo que es resistente a ciertos tipos de antibitico. Entre ellos la meticilina y otros antibiticos ms comunes como oxacilina, penicilina y amoxicilina. Y se debe a que el uso extensivo de los antibioticos a causado el desarrollo de tal resistencia Existen algunas cepas resistentes a este frmaco. Especialmente todas las cepas de Pseudomonas spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., indol-positivos Proteus spp., Serratia marcescens, y Citrobacter spp. son resistentes. La cantidad de cepas resistentes de E. Coli parece aumentar. Por tanto se trata de usar este antibitico aumentando el grado de espectro con coadyudantes como son el ajo (Aliumm Sativum) y la cebolla (Alium Cepa) que gracias a sus propiedades pueden actuar contra la cepa de S.aureus. Entre estos coadyudantes tenemos el ajo (Allium sativum) presenta un amplio espectro de actividad antimicrobiana frente a una gran variedad de patgenos que incluyen virus, bacterias, hongos como los del gnero cndida y parsitos. Se ha demostrado que es ms potente que otros fungicidas ms comnmente utilizados y los estudios de investigacin han demostrado el poder fungicida del ajo frente a la meningitis criptoccica, una de las infecciones fngicas ms devastadoras. Ciertos estudios sobre la poblacin, han demostrado claramente la capacidad de proteccin celular que ofrece el consumo de ajo en zonas donde su ingesta es elevada. Estudios en humanos han revelado que el ajo inhibe la formacin de nitrosaminas (poderosos compuestos que daan a las clulas y que se forman en el proceso digestivo). Adems estos compuestos tiosulfonatos podran reducir la hipertensin y el colesterol (ambos factores de riesgo en patologa cardiovascular). Pero se ha de tener en cuenta que en las presentaciones "desodorizadas" se refina e producto y se eliminan parte de los compuestos sulfurosos que provocan el olor

caracterstico, pero que tambin aportan beneficios teraputicos. Existe la posibilidad de "reducir" el olor combinndolo con aceites vegetales (p.e. crtamo), no perdiendo de esta manera su eficacia teraputica. Tambin tenemos a la cebolla que son ricas en flavonoides y en compuestos azufrados (sulfxido alkyl cisteina), responsables de su aroma. Entre los flavonoides, los antocianos son los responsables del color rosado o violceo de determinadas variedades de cebolla, pero sobre todo destaca el contenido en quercetina (300 mg/100g) con una importante funcin antioxidante. La quercetina contribuye a la inhibicin de la oxidacin de las lipoprotenas de baja densidad (LDL-Colesterol), previniendo el riesgo de sufrir enfermedades cardiovasculares. Tambin se han relacionado los flavonoides presentes en la cebolla con la reduccin de la tensin arterial y con una actividad antiagregante plaquetaria (impiden la formacin de trombos). Algunos estudios indican que los compuestos sulfurados que contiene la cebolla ejercen un efecto protector en el inicio de la carcinognesis a travs de un proceso de modulacin enzimtica en el metabolismo de las sustancias cancergenas. Concretamente, los estudios realizados en humanos han mostrado un efecto protector frente al cncer de esfago y estmago. Por otra parte, componentes derivados de las cebollas han mostrado poseer actividad antiasmtica. La capacidad antiasmtica y antiinflamatoria de las cebollas se debe en parte a la presencia de tiosulfinatos (compuestos azufrados). El mecanismo de accin parece estar relacionado con una inhibicin en la sntesis de ciclooxigenasa y lipooxigenasa, enzimas que participan en el metabolismo de los eicosanoides que inducen obstruccin bronquial. Adems, la cebolla cruda ejerce un potente efecto antifngico y antibacteriano. Es interesante destacar que los procesos culinarios (fritura, coccin...) no ocasionan grandes prdidas sobre el contenido total de flavonoides en la cebolla, por lo que los platos elaborados con cebolla constituyen una buena fuente de estos componentes. La quercetina presente en la cebolla es adems, muy fcilmente absorbida por el organismo (se ha comprobado que su absorcin es cuatro veces mayor que la de la

quercetina procedente de la manzana o el t), lo que ayuda a alcanzar los niveles de antioxidantes necesarios para la promocin de la salud. VI. HIPOTESIS LA adicin de la mezcla de ajos y cebolla al uso de amoxicilina potencia su actividad antibacteriana

VII. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN O. GENERAL: Determinar el efecto conjunto de alliun cepa l. Y allium sativum l. como coayyuvante de la amoxicilina (penicilina) en cepas de S. aureus O. ESPECIFICOS Determinar el grado de eficacia del efecto conjunto de allium cepa y allium sativum Determinar el grado de eficacia del efecto conjunto de allium cepa, allium sativum y Amoxicilina VIII. METODOLOGA 1. TIPO Y DISEO GENERAL DEL ESTUDIO

Cuantitativo, Longitudinal experimental 2. Variable dependiente: Dimetro de las cepas de s. aureus caja petri Variable independiente: Cantidad de extracto de allium cepa, allium sativum y dosis amoxicilina DEFINICIONES OPERACIONALES

IDENTIFICACION Y MEDICION DE VARIABLES Escala Variable Definicin conceptual Tipo de Medicin Indicadores

Dimetro de diametro establecido las cepas de por regla despues del s. aureus inoculo en cepas de s. V.Dependiente caja petri aureus cualitativa Cantidad de extracto cantidad de en ml. de allium cepa, Del extracto deallium allium sativum cepa, allium sativum y V.Independiente y dosis amoxicilina dosis amoxicilina cuantitativa

ordinal

N/ %

continua

N/ %

3.

UNIVERSO

DE

ESTUDIO,

SELECCIN

TAMAO DE MUESTRA, UNIDAD DE ANLISIS Y OBSERVACIN. CRITERIOS DE INCLUSIN Y EXCLUSIN. Se utilizaran 5 cajas petri todas inoculadas con S. aureus control, una con extracto de ajos, otro extracto de cebolla, otra con amoxicilina , y el ultimo un extracto conjunto de ajos, cebolla y amoxicilina. Universo de estudio: 5 cajas petri inoculasdas con S.aureus Unidad de estudio: dimetro de las cepas S.aureus inoculadas con el extracto y con el antibitico 4. PROCEDIMIENTOS PARA LA RECOLECCIN

DE INFORMACIN, INSTRUMENTOS A UTILIZAR Y MTODOS PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE LOS DATOS Se escogern plantas recolectadas en el universidad la agraria la Molina predisponiendo su misma siembra la misma distribucin y su rendimiento adecuado la garantzacion de la elaboracin del extract lo dar la universidad agraria la Molina. Este extracto se aplicara a las cepas inoculadas en las caja petri con agar nutritivo a la primera no se le aplicara nada a la segunda se le pondr el extracto de el ajos a la tercera se le pondr el extracto de cebolla y al cuarto se le pondr la dosis de amoxicilina a la quinta se le pondr los dos extractos y la amoxicilina se medira con una regla previa estandarizacin

y se vera el resultado y se comparara todos esos datos se pondrn en una ficha preestablecida con el grupo de investigacin. 5. HUMANOS En este trabajo de investigacin las pautas ticas tomadas en cuenta para un mejor y correcto desarrollo de la investigacin y son seguidas como se indica en la leyes a continuacin podemos ver las diferentes leyes de tica que si son tomadas en cuenta ratifican un mejor trabajo. La Ley 31/1995 , desarrollada en el Real Decreto 664 /1997 determina el cuerpo bsico de garantas y responsabilidades preciso para establecer un adecuado nivel de proteccin de la salud de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos durante el trabajo. Comit de tica en Investigacin con Organismos Modificados y Agentes Biolgicos (CIOMAB): Emitir informes sobre la utilizacin confinada y la liberacin voluntaria de agentes biolgicos y de organismos modificados genticamente, en el desarrollo de proyectos de investigacin.

PROCEDIMIENTOS

PARA

GARANTIZAR

ASPECTOS TICOS EN LAS INVESTIGACIONES CON SUJETOS

Elaborar y aplicar cdigos locales de conducta para seguridad del Velar por el cumplimiento de normas especficas de seguridad e

personal investigador y para la seguridad biolgica del medio ambiente.

higiene profesional y aplicar los principios de buenas prcticas microbiolgicas.

IX. PLAN DE ANLISIS DE LOS RESULTADOS MTODOS Y MODELOS DE ANLISIS DE LOS DATOS SEGN TIPO DE VARIABLES Se utilizaran las fichas creadas por el grupo y se introducirn a un programa para su anlisis y diferenciacin. PROGRAMAS A UTILIZAR PARA ANLISIS DE DATOS SPSS anlisis con este programa

X. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

XI. CRONOGRAMA

XII. PRESUPUESTO

El presente trabajo ser realizado con el financiamiento de los 5 integrantes de este proyecto, para lo cual se estimara un costo de 300 soles aproximadamente tanto en materiales, como en uso del instrumental de laboratorio y en recursos humanos, en el transcurso de Abril a Julio del 2008. Entre los materiales que se piensa comprar estn: Materiales Costo

1 Cepa de Staphylococcus Aureus 5 Placa Petri 5 Agar nutritivo 10 capsulas de Amoxicilina Cebolla Ajo

S/.15.00 S/.15.00 S/. S/.5.00 S/.1.00 S/.1.00