EXTRACCIN DE ACIDOS NUCLEICOS (ADN) DE TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES MEDIANTE UN MTODO CASERO

Laura Ximena Cabrera Casas, Cristian Camilo Quiroz, Yemay Toro Lpez INTRODUCCIN Todas las clulas contienen la informacin necesaria para realizar distintas reacciones qumicas mediante las cuales las clulas crecen, obtienen energa y sintetizan sus componentes. Est informacin est almacenada en el material gentico, el cual puede copiarse con exactitud para transmitir dicha informacin a las clulas hijas. Sin embargo estas instrucciones pueden ser modificadas levemente, es por eso que hay variaciones individuales y un individuo no es exactamente igual a otro de su misma especie (distinto color de ojos, piel, etc.). De este modo, podemos decir que el material gentico es lo suficientemente maleable como para hacer posible la evolucin. La informacin gentica o genoma, est contenida en unas molculas llamadas cidos nucleicos. Existen dos tipos de cidos nucleicos: ADN y ARN. El ADN guarda la informacin gentica en todos los organismos celulares, el ARN es necesario para que se exprese la informacin contenida en el ADN; en los virus podemos encontrar tanto ADN como ARN conteniendo la informacin (uno u otro nunca ambos). Hay diferentes tcnicas que permiten obtener cidos nucleicos con alto grado de pureza. Las ms utilizadas suelen incluir una etapa de ultracentrifugacin en gradientes de CsCl o una cromatografa de intercambio inico. Sin embargo, muchas aplicaciones de laboratorio no necesitan un grado de pureza tal que justifique incluir estas tcnicas (laboriosas y/o caras) en los protocolos de purificacin. En esta prctica se utilizo el mtodo de homogenizacin para las muestras vegetales y animales. El objetivo de esta prctica es extraer el material gentico ADN de tejidos animales y vegetales, utilizando mtodos caseros y comerciales

MATERIALES Y MTODOS Extraccin ADN vegetal (tradicional) Se coloco en un recipiente (en hielo) un tubo de ensayo con 5 ml de etanol al 70%, se homogenizo 50 g de material vegetal (banano), utilizando 50 ml de agua destilada, en un beacker se mezclo una cucharadita de champ con 1 g de NaCl y 20 ml de agua destilada, esta procedimiento se realizo cuidando que no hubiese formacin de espuma. A la ultima preparacin se le agrego 3 cucharadas de la muestra homogenizada y se mezclo durante 5 minutos. Luego se filtro a travs de la gasa y se tomo 5 ml del filtrado el cual se virti en el etanol helado, cuidando que se desliz ara por las paredes; se dejo reposar sin mover y las fibras de ADN se precipitaron en la interface. Extraccin ADN Animal (tradicional)

Se coloco en un recipiente (en hielo) un tubo de ensayo con 5 ml de etanol al 70%, se homogenizo el tejido animal (hgado de pollo), se agrego al homogenizado 15 ml de agua destilada hasta formar una especie de papilla. Luego se filtro a travs de la gasa varias veces hasta retener todos los posibles trozos de tejido en suspensin; se midi el filtrado en la probeta. Posteriormente se agrego al filtrado una cantidad igual de solucin de cloruro de sodio 10% y una cucharadita de champ; se mezclo suavemente evitando la formacin de espuma y se virtio en el etanol helado, cuidando que se deslizara por las paredes; se dejo reposar y por ultimo se formo un sistema bifsico y en la interface quedaron suspendidas las fibras de ADN. RESULTADOS Y DISCUSIN Despus de realizar el procedimiento como resultado se observo en el tubo de ensayo las fibras de ADN del tejido vegetal (banano) sobre la mezcla heterognea como se puede ver en la figura N1.El ADN queda en la superficie del tubo a causa de el rompimiento de la membrana celular, a causa de el champ que se le adiciono a el material vegetal para homogenizar.

Figura N1: Fibras de ADN de Material Vegetal ( Banano).

Figura N 2: fibras de ADN de material animal (hgadode pollo) sobre la mezcla heterognea

CONCLUSIONES

Para romper la membrana plasmtica y membrana nuclear se utilizo champ el cual rompe la barrera lipdica solubilizando las protenas e interrumpiendo la interaccin lpidolpido, lpido-protena y protena-protena. Se extrajo el material gentico ADN de tejidos animales y vegetales, utilizando mtodos caseros y comerciales. Se observo un sistema bifsico y como en la interface quedaron suspendidas las fibras de ADN.

BIBLIOGRAFIA Bioqumica de los cidos nucleicos de davidson; J. Davidson; R. L. P. Adams; Reverte, 1980 Qumica bioinorganica; Baran; Enrique J.; McGraw-Hill. Madrid. ES. 1995. 321 p.