AGRUP G309 (2) Info Moya - Anexos r2

ALA/PY/2004/016-713 EUROPEAID/120503/SV/PY
Proyecto de Fortalecimiento de la Competitividad del Sector Exportador Paraguayo
G309 (2): CAPACITACIN EN TCNICAS ESPECFICAS DE LABORATORIO PARTE 2 CURSO BSICO DE VALIDACIN DE MTODOS ANALTICOS
PERIODO: DEL 20 DE JUNIO AL 11 DE JULIO DE 2009
Anexos
CONSULTOR: ING. DIEGO MOYA ALARCN ASUNCIN, 21 DE JULIO DE 2009
Este informe ha sido preparado con la asistencia financiera de la Comisin Europea. La responsabilidad sobre los puntos de vista y opiniones expresadas en el mismo corresponde exclusivamente al consultor y no reflejan de ningn modo la opinin oficial de la Comisin Europea ni de ninguna de las instituciones implicadas en el proyecto.
En consorcio con Agriconsulting, Icon Institut, Inypsa y PTB
CENTRO NACIONAL DE METROLOGA
GUA TCNICA SOBRE TRAZABILIDAD E INCERTIDUMBRE EN LAS MEDICIONES ANALTICAS QUE EMPLEAN LAS TCNICAS DE CROMATOGRAFA DE GASES (CG) Y CROMATOGRAFA DE LQUIDOS DE ALTA RESOLUCIN (CLAR)
Mxico, Julio 2004

Derechos reservados
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en CG y CLAR/Mayo 2004 Fecha de emisin 2004-07-12, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00 1 de 71
PRESENTACIN
Durante la evaluacin de la competencia tcnica de los laboratorios de calibracin y de ensayo, la demostracin de la trazabilidad y la estimacin de la incertidumbre de las mediciones, requiere la aplicacin de criterios tcnicos uniformes y consistentes. Con el propsito de asegurar la uniformidad y consistencia de los criterios tcnicos en la evaluacin de la trazabilidad y la incertidumbre de las mediciones, la entidad mexicana de
acreditacin, a. c., solicit al Centro Nacional de Metrologa que encabezara un programa
de elaboracin de Guas Tcnicas de Trazabilidad e Incertidumbre de las Mediciones. Los Subcomits de los Laboratorios de Calibracin y de Ensayo se incorporan a este programa y su participacin est orientada a transmitir sus conocimientos y experiencias tcnicas en la puesta en prctica de las Polticas de Trazabilidad y de Incertidumbre establecidas por ema, mediante el consenso de sus grupos tcnicos de apoyo. La incorporacin de estos conocimientos y experiencias a las Guas, las constituyen en referencias tcnicas para usarse en la evaluacin de la competencia tcnica de los laboratorios de calibracin y ensayo. En este programa, el CENAM se ocupa, entre otras actividades, de coordinar el programa de las Guas Tcnicas; proponer criterios tcnicos sobre la materia; validar los documentos producidos; procurar que todas las opiniones pertinentes sean apropiadamente consideradas en los documentos; apoyar la elaboracin de las Guas con eventos de capacitacin; asegurar la consistencia de las Guas con los documentos de referencia indicados al final de este documento.
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en CG y CLAR/Mayo 2004 Fecha de emisin 2004-07-12, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00
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La elaboracin de las Guas est vinculada con la responsabilidad que comparten mutuamente los laboratorios acreditados de calibracin y de ensayo, de ofrecer servicios con validez tcnica en el marco de la evaluacin de la conformidad. La calidad de estos servicios se apoya en la confiabilidad y uniformidad de las mediciones, cuyo fundamento est establecido en la trazabilidad y en la incertidumbre de las mismas. Los que ejercitan la evaluacin de la competencia tcnica de los laboratorios, as como los que realizan la prctica rutinaria de los servicios acreditados de calibracin y ensayo, encontrarn en las Guas una referencia tcnica de apoyo para el aseguramiento de las mediciones. Las Guas Tcnicas de Trazabilidad e Incertidumbre de las Mediciones no reemplazan a los documentos de referencia en que se fundamentan las polticas de trazabilidad e incertidumbre de ema. Las Guas aportan criterios tcnicos que servirn de apoyo a la aplicacin de la norma NMX-EC-17025-IMNC-2000. La consistencia de las Guas con esta norma y con los dems documentos de referencia, permitir conseguir el propsito de asegurar la confiabilidad de la evaluacin de la conformidad por parte de los laboratorios de calibracin y ensayo.
Dr. Hctor O. Nava Jaimes Director General Centro Nacional de Metrologa
Mara Isabel Lpez Martnez Directora Ejecutiva

entidad mexicana de acreditacin a.c.
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Grupo de Trabajo que particip en la elaboracin de esta Gua:

LVAREZ TAPIA Rubn, LABORATORIO SAS CARBAJAL ALARCN Carlos Enrique, CENAM CORTS COLN Roco E. GARZA ULLOA Humberto Jess, ALS-INDEQUIM, S.A. de C.V. GUEVARA HERNNDEZ Alicia, CENAM HERNNDEZ RIVERA Rosalba, CIDESI MONTANTE L. Miriam E., CFPPNL Laboratorio Central Regional de Monterrey MURAIRA MARTNEZ Luca M., CFPPNL Laboratorio Central Regional de Monterrey PREZ CASTORENA Alejandro, CENAM PREZ URQUIZA Melina, CENAM ROSAS GARCA Eva, entidad mexicana de acreditacin, a.c. SOTO GARCA Noem, INDUSTRIA TEQUILERA CMARA NACIONAL DE LA
TAPIA HERNNDEZ Alfredo Marcos. USTARAN CERVANTES Juan Ignacio, LABORATORIOS ABC QUMICA, INVESTIGACIN Y ANLISIS, S.A. DE C.V.
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NDICE
Pgina PRESENTACIN.. GRUPO DE TRABAJO QUE PARTICIP EN LA ELABORACIN........... NDICE 1. PROPSITO DE LA GUA TCNICA.. 2. ALCANCE DE LA GUA TCNICA..
2.1 Cromatografa.
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3. MENSURANDO
3.1 Intervalo de trabajo de los mtodos de medicin 3.2 Incertidumbre ...
4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN...

4.1 Sistema de Medicin.. 4.2 Mtodo de Medicin.. 4.3 Procedimiento de Medicin... 4.4 Competencia Tcnica del Analista
5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS

5.1 Confirmacin Metrolgica (CM).......... 5.2 Calificacin de Equipos e Instrumentos de Medicin Analtica (CEIMA).. 5.3 Casos particulares...
6. TRAZABILIDAD DE LA MEDICIN.
6.1 Trazabilidad, calibracin, patrones y Materiales de Referencia Certificados (MRC).
7. INCERTIDUMBRE DE MEDICIN 8. VALIDACIN DE MTODOS. 9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO. 10. BIBLIOGRAFA
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11. AGRADECIMIENTOS................................................................................... 12. ANEXOS ..

Anexo 1 Tabla de trazabilidad e incertidumbre de CG . Anexo 2 Glosario de Trminos........... Anexo 3. Ejemplo de Proceso de Confirmacin Metrolgica de una Balanza Analtica.............................. Anexo 4. Ejemplo para la Calificacin de Equipos de Instrumentos de Medicin Analtica (CEIMA). 4.1 Ejemplo para la Calificacin de Cromatgrafo de Gases para la determinacin de compuestos organoclorados 4.2 Ejemplo para la Calificacin de Cromatgrafo de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR) Anexo 5. Ejemplo Estimacin de la incertidumbre de medicin de la fraccin de masa de metanol... Anexo 6. Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL) . Anexo 7. Informacin adicional sobre las tcnicas de CG y CLAR
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1. PROPSITO DE LA GUA TCNICA

Las medidas o resultados de medicin, son caracterizados por su trazabilidad y por un valor estimado de su incertidumbre. La confiabilidad del resultado de una medicin es el factor de mayor importancia para la toma de decisiones de los usuarios de este resultado. En el marco de la evaluacin de la conformidad, se entiende que el resultado de un ensayo es una declaracin de conformidad o no conformidad con el requisito establecido por una norma. Este resultado puede estar soportado por: a) el examen directo de un atributo; b) la conclusin sobre un atributo a partir de resultados de medicin; o, c) la realizacin directa de mediciones. El ejercicio de la calibracin de instrumentos, patrones de medicin y materiales de referencia constituyen un elemento fundamental en la tarea de extender la trazabilidad de las mediciones, que inicia en los patrones nacionales de medida para llegar a mltiples usuarios. En las actividades de la evaluacin de la conformidad, los Institutos Nacionales de Metrologa, los Laboratorios Primarios y los Laboratorios acreditados de calibracin tienen la responsabilidad de extender la trazabilidad de las mediciones a otros usuarios. Por su parte, los laboratorios acreditados de ensayos, apoyndose en la confiabilidad de las mediciones, son responsables de la evaluacin de la conformidad de productos y servicios respecto de normas y documentos de referencia, asegurando de esta manera, la diseminacin de la trazabilidad de las mediciones. Con el objetivo de que la evaluacin de la conformidad sea realizada por estos laboratorios con un mismo nivel de rigor tcnico, se ha considerado elaborar la documentacin que permita homologar este nivel. Estos documentos se han llamado Guas Tcnicas sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas. El propsito de esta Gua Tcnica es establecer los criterios y requisitos de trazabilidad e incertidumbre en la aplicacin de las tcnicas de medicin de Cromatografa de Gases (GC) y Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR), para lograr medidas con incertidumbre de medicin y trazabilidad confiables. La Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas que emplean las tcnicas de Cromatografa de Gases (GC) y Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR) no reemplaza ni total, ni parcialmente, a los documentos de referencia en que se fundamentan las polticas de trazabilidad e incertidumbre de la ema. La aportacin de criterios tcnicos de esta Gua especfica sirven de apoyo en la aplicacin de la norma NMX-EC-17025-IMNC-2000 [2] La consistencia de esta Gua con esta norma y con los dems documentos de referencia, apoyan a conseguir el propsito de asegurar la
confiabilidad de la evaluacin de la conformidad por parte de los laboratorios de ensayo, en lo concerniente a trazabilidad e incertidumbre. Los criterios descritos en esta Gua Tcnica sern aplicados por: a) Los evaluadores de laboratorios de ensayos que participan en el proceso de evaluacin y acreditacin de la entidad mexicana de acreditacin, a.c. b) Los laboratorios de ensayo acreditados en procesos de continuacin a la acreditacin inicial (Renovacin de la Acreditacin). c) Los laboratorios de ensayos en preparacin para ser acreditados. d) Los interesados en iniciar un laboratorio de ensayos.
2. ALCANCE DE LA GUA TCNICA

Esta Gua Tcnica es aplicable para las tcnicas de medicin de Cromatografa de Gases (GC) y Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR), las cuales se describen a continuacin. 2.1 Cromatografa. La cromatografa es una tcnica de separacin con aplicacin directa principalmente a compuestos orgnicos y en algunos casos a compuestos inorgnicos. La separacin cromatogrfica est fundamentada en el continuo y selectivo equilibrio de los componentes de una mezcla entre una fase estacionaria y una fase mvil. La mezcla a ser separada es introducida en la fase mvil que es inducida a moverse a travs de la fase estacionaria contenida dentro de una columna. Los componentes de la mezcla se separan debido a su diferente afinidad por la fase estacionaria, lo cul provoca que se transporten a diferentes velocidades en la fase mvil. El estado fsico y composicin de la fase estacionaria y de la fase mvil pueden ser muy variables, as como los mecanismos de separacin de los cuales la particin, adsorcin, intercambio inico y exclusin por tamao son ejemplos de las diferentes posibilidades. A la salida de la columna, los componentes separados podrn ser detectados por medio de un dispositivo llamado Detector que ve los cambios en la composicin de la fase mvil, de tal manera que si la fase mvil llega con algn componente diferente, este es detectado, dependiendo de las caractersticas del sistema de deteccin. El sistema de medicin entrega una diferencia en el voltaje del detector llamada respuesta, la cual est en funcin de la concentracin del componente. Se obtiene en forma de picos, al conjunto de picos se le llama cromatograma.
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La cuantificacin se realiza cuando se comparan las respuestas de componentes de concentracin conocida contra los componentes en la muestra desconocida, ya sea en forma directa o por medio de una curva de calibracin, obedeciendo a la Ley de Ohm. V = RI La CG y CLAR son los tipos de configuraciones instrumentales cromatogrficas con mayor amplitud de aplicaciones. Ver en el anexo 7 informacin adicional de CG y CLAR
3. MENSURANDO
Un ejemplo de mensurando que puede ser medido a travs de la tcnica de Cromatografa de Gases (GC) se describen en la Tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas, Anexo 1. Los evaluadores deben solicitar a los laboratorios la identificacin clara y precisa del (los) mensurando(s) sujeto(s) al alcance de la acreditacin, incluidos en los Mtodos de Medicin que utilizan las Tcnicas de Medicin objeto de esta gua, empleando el formato de la tabla del Anexo 1. En la elaboracin de los informes de resultados de ensayo, en caso de que los mtodos de ensayo o los clientes requieran la expresin del mensurando en unidades diferentes a las del SI, se debe reportar el resultado en las Unidades SI[3] y a su vez en las unidades equivalentes como parte del Informe de Resultados Por ejemplo, X mg/kg (Y ppm) Para mayor informacin ver captulo I, artculos 5 y 6 de la Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin (LFMN) y NOM-008-SCFI-2002. Ver Glosario de Trminos, Anexo 2 para las definiciones correspondientes. 3.1 Intervalo de trabajo de los mtodos de medicin Los evaluadores deben verificar que los intervalos de trabajo de los mtodos de medicin que emplean las tcnicas de Cromatografa de Gases (CG) y Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR) estn documentados con evidencia de su determinacin en la validacin del mtodo (parcial o total) y estos deben ser coherentes con la aplicacin del resultado del ensayo (ver Anexo 2, Glosario de Trminos para definicin del trmino de validacin).
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El intervalo de trabajo de los mtodos de medicin debe tomar en cuenta los lmites mximos permisibles o las especificaciones de la norma a la que se evale su conformidad, las especificaciones de procesos que se estn evaluando o los requerimientos de los clientes del laboratorio, los cuales idealmente deben estar en la seccin media del intervalo de trabajo. Por ejemplo, para Metanol por CG en Bebidas alcohlicas (NOM-142-SSA1-1995/B.5) el lmite mximo es de 300 mg/100 mL de alcohol anhidro, el intervalo de trabajo ideal es de 100 mg/100 mL a 1000 mg/100 mL; para lactosa por CLAR en leche deslactosada (NOM155-SCFI-2003/8.6) el lmite mximo es de 10 g/L, el intervalo de trabajo ideal es de 1 a 50 g/L. 3.2 Incertidumbre Los evaluadores deben verificar la estimacin de incertidumbre de los mtodos de medicin que emplean las tcnicas de Cromatografa de Gases (CG) y Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR), solicitando la documentacin que proporcione evidencia de la estimacin de incertidumbre por parte del laboratorio, en base a lo estipulado en el captulo 7 de esta Gua Tcnica. Para el caso de las acreditaciones iniciales, ampliaciones o actualizaciones de mtodos de ensayo renovaciones hacia la NMX-EC-17025-IMNC-2000[2], el laboratorio deber iniciar su proceso de estimacin de incertidumbre en la validacin parcial del mtodo y tener un plan de implantacin de acuerdo al captulo 4 inciso 4.2.3 de las Polticas Referentes a la Trazabilidad e incertidumbre de mediciones de la ema, para cuantificar todos aquellos componentes de incertidumbre que contribuyan significativamente a la incertidumbre final de la medicin. Esto ltimo debe ser realizado segn el punto 7 de esta gua.
4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN

Ver definiciones de estos conceptos en el captulo de Glosario de Trminos (Anexo 2). 4.1 Sistema de Medicin El evaluador debe solicitar una descripcin suficiente de los componentes del sistema de medicin que empleen la tcnica de CG y CLAR, y que influyan sobre la trazabilidad y el valor de la incertidumbre de la medicin
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Ejemplos de Sistema de medicin. Para medicin de alcoholes: Cromatgrafo de gases con detector de ionizacin de flama (CG/DIF) Columna cromatogrfica Polietilenglicol-20M Balaza analtica; calibrada Material volumtrico; calibrado Materiales de referencia certificados
Para medicin de aflatoxinas Cromatgrafo de lquidos con detector de arreglo de diodos (CLAR/DAD) Columna cromatogrfica de fase reversa de octadecil siloxano Pipetas volumtricas; calibradas Balanza analtica; calibrada Materiales de referencia certificados
Ver ejemplo en la tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas (Anexo 1) para los mtodos de ensayo que se requieren acreditar. 4.2 Mtodo de Medicin Ver definiciones de estos conceptos en el captulo de Glosario de Trminos (Anexo 2). 4.3 Procedimiento de medicin El evaluador debe verificar que los procedimientos de medicin (procedimientos internos, instructivos, protocolos, entre otros.) estn conformes con las especificaciones de desempeo de los mtodos de medicin del alcance de la acreditacin. Nota: Para los mtodos propios ver el capitulo de validacin. Los aspectos ms comunes del procedimiento de medicin que tienen efecto en la trazabilidad y en la incertidumbre en la tcnica de Cromatografa de Gases (CG) y Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR) son: Etapa de sub muestreo (toma de la muestra para anlisis en el laboratorio) 1. Balanza 2. Material volumtrico Etapa de Preparacin de la muestra:
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3. Control de Temperatura Ambiental, en caso aplicable, de acuerdo a los disolventes a utilizar. 4. Reactivos adecuados (ausencia de interferencias) 5. Mtodo de separacin, concentracin y/o derivatizacin 6. Material volumtrico Etapa de medicin: 7. MRC 8. Controles de calidad, en caso aplicable (Blancos, muestras de control de calidad, duplicadas, adicionadas, entre otros). 9. Curva de calibracin (material volumtrico, algoritmo empleado en la calibracin) 10. Confirmacin metrolgica de balanzas y dems instrumentos en donde aplique (Ver capitulo 5 de esta Gua). 11. Calificacin de equipos e instrumentos de medicin analtica (CEIMA) donde aplique (Ver capitulo 5 de esta Gua). Las magnitudes de influencia y las fuentes de incertidumbre se detallan en el captulo 7 de esta Gua Tcnica y en la Tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas (Anexo 1). El evaluador debe solicitar evidencia de como el laboratorio realiza la evaluacin de los blancos de reactivos para determinar si se deben restar de los valores de las muestras o se deben utilizar como criterios de aceptacin y rechazo de los lotes analticos. Dicha interpretacin depende del mtodo de ensayo que se utilice y debe estar fundamentado en dicho mtodo o si no est explicito en el mtodo, no se deben restar los blancos de reactivos. 4.4 Competencia Tcnica del Analista El evaluador debe solicitar registros sobre la aptitud tcnica (anteriormente llamada Prueba Inicial de Desempeo del Analista) que incluyan al menos datos sobre su sesgo, recuperacin, repetibilidad, lmite de cuantificacin, lmite de deteccin si aplica al mtodo, recuperacin y adicionalmente si es posible, los resultados de su participacin en pruebas intralaboratorio o interlaboratorio. El evaluador debe solicitar al laboratorio los registros que demuestran la competencia tcnica de todos y cada uno de los analistas que realizan la medicin, los criterios de aceptacin y rechazo as como las evidencias de los resultados obtenidos de los analistas, basados en las especificaciones del mtodo. En caso de que el mtodo no cuente con dichas especificaciones los criterios de aceptacin y rechazo debern estar sustentados en una fuente reconocida
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5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS

En la prctica, la seleccin de un instrumento de medicin se inicia delimitando su uso previsto y definiendo las caractersticas metrolgicas requeridas para obtener mediciones confiables. Se selecciona entonces un instrumento de medicin, mediante la comparacin de estos requisitos metrolgicos y las declaraciones del fabricante. Es importante que los instrumentos de medicin se mantengan bajo control, con la finalidad de evaluar su desempeo y cumplir con los requisitos de la NMX-EC-17025-IMNC2000[2], que requieren a los laboratorios de ensayo la evidencia de que los instrumentos cumplen con el propsito de uso establecido, con un estado de mantenimiento adecuado y calibrados a patrones nacionales o internacionales, esto con la finalidad de demostrar la validez de sus resultados de medicin. La presentacin de evidencia se realiza mediante los resultados de los procesos de la Confirmacin Metrolgica (CM)[6] y de la Calificacin de Instrumentos Analticos (CEIMA) [7]. El proceso de CM se aplica a los instrumentos que se emplean en mediciones fsicas y que se calibran externamente por medio de laboratorios de calibracin acreditados, este proceso evidenci que el equipo es adecuado para el uso propuesto. El proceso de CEIMA se debe aplicar a todos los instrumentos de medicin analtica. 5.1 Confirmacin Metrolgica (CM) Las Caractersticas Metrolgicas del Equipo de Medicin (CMEM) son factores que contribuyen a la incertidumbre de la medicin. Las CMEM permiten realizar la comparacin directa con los Requisitos Metrolgicos del Cliente (RMC) para establecer la Confirmacin Metrolgica (CM). Los RMC en este sentido se refieren normalmente a los requerimientos del mtodo de ensayo acreditado para satisfacer las necesidades del cliente del laboratorio, en cuanto al desempeo y especificaciones de los equipos a utilizarse. Ver definiciones correspondientes a la confirmacin metrolgica en el Glosario de Trminos (Anexo 2). El evaluador debe solicitar la documentacin que contenga los requisitos metrolgicos del cliente (RMC) considerados en el proceso de CM.
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Ejemplo de algunos RMC: Intervalo de trabajo, sesgo, incertidumbre, estabilidad, deriva, resolucin, entre otros. Ver en el Anexo 3 un ejemplo especfico.
El evaluador debe solicitar la documentacin que contenga las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin (CMEM) consideradas en el proceso de CM. Ejemplo de documentos que contengan CMEM: Certificado de calibracin, Informe de calibracin. El evaluador debe solicitar los registros de la Verificacin Metrolgica. El evaluador debe solicitar las evidencias y documentos usados para determinar los intervalos de CM y verificar que los mismos intervalos de la CM estn basados en los datos obtenidos en el historial de las confirmaciones metrolgicas. Los intervalos de CM deben ser revisados y ajustados a las necesidades de aseguramiento continuo con los RMC. Los intervalos de calibracin y de CM pueden ser iguales. l evaluador debe solicitar evidencia de que la confirmacin metrolgica (CM) sea realizada cada vez que el instrumento sea reparado, ajustado o modificado. En el Anexo 3 se encuentra un ejemplo de confirmacin metrolgica, incluye el diagrama del proceso de la confirmacin metrolgica y tablas que muestran los RMC bsicos de algunos instrumentos de medicin, para realizar el proceso de Confirmacin Metrolgica. En el caso de los siguientes componentes de los sistemas de medicin empleados en la(s) tcnica(s) de esta Gua, el laboratorio: Debe seguir los lineamientos de la CM, para los termmetros, as como para las balanzas analticas que se utilicen para pesar muestras y materiales de referencia. Debe seguir los lineamientos de la CM, para el material volumtrico que se utilice para la preparacin de los materiales de referencia (disoluciones de trabajo), salvo que dichas disoluciones sean preparadas gravimtricamente. Cuando no aplica la calibracin del material volumtrico (indicado en el glosario), se debern solicitar registros de los controles que demuestren la verificacin del mismo con referencia a las especificaciones del fabricante.
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5.1.1 Adicional a la CM, el evaluador debe solicitar al laboratorio los procedimientos empleados y registros (cartas de control, registros, entre otros) de los controles implementados en los equipos de medicin, con el objeto de asegurar la vigencia de la confirmacin metrolgica y que los equipos estn dentro de los requerimientos de sta. 5.2 Calificacin de Equipos e Instrumentos de Medicin (CEIMA) Ver definicin de CEIMA en el Glosario de Trminos (Anexo 2). El evaluador debe solicitar al laboratorio procedimientos protocolos de Calificacin de Equipo de Instrumentacin Analtica (CEIMA), en el cual se incluyan todas las etapas, as como evidencia de su cumplimento. En el Anexo 4.1 y 4.2, se presentan ejemplos de CEIMA con tablas de parmetros bsicos por etapa de calificacin, para CG y CLAR. El evaluador debe solicitar que los registros del CEIMA se encuentren documentados de acuerdo a las caractersticas metrolgicas del equipo, ver ejemplos del Anexo 4.1 y 4.2 Adicionalmente el evaluador debe solicitar evidencia de recalificacin del equipo en la(s) etapa(s) aplicable(s), en los siguientes casos: Cambio de localizacin del equipo. Interrupcin prolongada de los servicios que pueda poner en duda la estabilidad del desempeo del equipo. Mantenimiento mayor con cambio de partes que afecten la medicin (Inyector, Columna, Detector, Sistema de Datos, entre otros). Modificacin de diseo. Cambio de uso. Por ejemplo: si se tena el cromatgrafo de gases calificado para uso de anlisis de plaguicidas y actualmente se le emplea para el anlisis de Bifenilos policlorados (PCB) en Aceites de Transformador, cambio de niveles de composicin prxima a niveles traza. En el caso de los siguientes componentes de los sistemas de medicin que emplean las tcnicas que se incluyen en esta Gua, se debe considerar el siguiente lineamiento: Para los cromatgrafos y sus accesorios, sus sistemas de introduccin de muestras y sistemas especiales de extraccin, entre otros, se deben seguir los lineamientos del CEIMA [7]
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5.3 Casos particulares El material volumtrico que se utilice en las disoluciones de muestras, debe ser clase A verificado considerando su estado fsico y con base a criterios estadsticamente significativos (se deben tener criterios estadsticos para el muestreo de los materiales volumtricos a verificar basados en el nmero de piezas y el tiempo entre verificaciones). La verificacin contra las especificaciones debe ser realizada por el Laboratorio con un procedimiento tcnicamente vlido y los registros correspondientes, sta debe ser realizada antes de ser puesto en servicio y en periodos establecidos durante su vida til. Los hornos de microondas, autoclaves, baos termostticos, cmaras ambientales y sistemas especiales de digestin, deben ser verificados de acuerdo a sus especificaciones y mantenerse bajo control.
6. TRAZABILIDAD DE LA MEDICIN
6.1 Trazabilidad, calibracin, patrones y Materiales de Referencia Certificados (MRC) Consultar el Glosario de Trminos (Anexo 2) para las definiciones correspondientes. La trazabilidad del resultado de una medicin est relacionada con la diseminacin de la unidad correspondiente a la magnitud que se mide. La expresin del valor de una magnitud incluye la referencia a una unidad de medida, la cual ha sido elegida por acuerdo, y por tanto, las medidas de la misma magnitud deben estar referidas a la misma unidad. An cuando la definicin de trazabilidad no impone limitaciones sobre la naturaleza de las referencias determinadas, es conveniente lograr la uniformidad universal de las mismas mediante el uso de las unidades del Sistema Internacional de Unidades, SI, las cuales ya han sido convenidas en el marco de la Convencin del Metro. En Mxico, es obligatorio el uso del Sistema General de Unidades, el cual contiene a las unidades del SI. Los elementos de la trazabilidad en este tipo de mediciones son: a. El resultado de la medicin cuyo valor es trazable. (La trazabilidad es hacia el SI, mediante los valores de los MRC con su incertidumbre) b. Las referencias determinadas a patrones nacionales o internacionales. (Los valores de los patrones de trabajo deben ser trazables a valores de los MRC nacionales o internacionales) c. Cadena ininterrumpida de comparaciones. (Contar con una carta de trazabilidad o esquema en que se evidencie la utilizacin de MRC trazables al SI)
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d. El valor de la incertidumbre de las mediciones en cada comparacin. (La carta de trazabilidad debe contar con los valores y las incertidumbres estimadas en cada comparacin) e. La referencia al procedimiento de calibracin o mtodo de medicin qumica en cada comparacin preferentemente. f. La referencia al organismo responsable de la calibracin, de la certificacin del material de referencia, de la realizacin del mtodo de referencia, o del Sistema de medicin de referencia, en cada comparacin. Existen algunos mensurandos definidos por mediciones dependientes del mtodo de medicin, en tales casos la trazabilidad del valor del resultado esta establecida al mtodo, por medio de la utilizacin de MRC en la etapa de cuantificacin y trazabilidad al SI de cada una de las magnitudes que intervienen en el clculo del valor del mensurando. Adicionalmente, se deber asegurar que el mtodo est bajo control mediante el uso de materiales de control de calidad, ya sean MRC o MR y la participacin continua en pruebas interlaboratorio, si existen. Por ejemplo en el caso de compuestos orgnicos CRETI, se debe tener trazabilidad de las magnitudes de volumen y concentracin de masa mediante la calibracin de la balanza, y material volumtrico por laboratorios acreditados, y la utilizacin de MRC para la elaboracin de las curvas de calibracin, adems de llevar a cabo un programa de control de calidad estadstico con Materiales de Control de Calidad, de preferencia certificados y la participacin continua en pruebas interlaboratorio, si existen. El evaluador debe solicitar que los Materiales de Referencia Certificados utilizados en las mediciones que emplean las tcnicas de CG y CLAR proporcionen trazabilidad a patrones nacionales certificados por el CENAM, siempre y cuando estn disponibles, o en su defecto a patrones extranjeros con la autorizacin respectiva de la Direccin General de Normas (DGN), segn lo especificado en los Art. 26 de la LFMN, 20 y 24 del Reglamento de la LFMN y la Poltica de Trazabilidad de la ema. Los evaluadores deben solicitar, donde aplique, lo establecido en la Tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas del Anexo 1, donde se indican los instrumentos y equipos de medicin que requieran calibracin externa, CM o CEIMA, y las caractersticas de los materiales de referencia, as como las formas prcticas de establecer trazabilidad para las mediciones por CG y CLAR. El evaluador debe revisar los mecanismos que el laboratorio tiene para mantener la trazabilidad, como el uso de patrones, con los propsitos de: Asegurar el mantenimiento de la trazabilidad de las mediciones mediante la comprobacin del estado de la caducidad de los MRC, la CM y la CEIMA de los instrumentos, entre las calibraciones programadas.
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Evidenciar mediante criterios estadsticos los periodos de calificacin y recalibracin de los equipos e instrumentos.
El evaluador debe solicitar:
La demostracin de la trazabilidad mediante el examen detallado de los certificados de calibracin de los instrumentos de medicin y de los materiales de referencia asociados a cada uno de los elementos de la cadena de comparaciones, dichos documentos deben ser expedidos por Laboratorios de Calibracin Acreditados en las magnitudes especficas y en el caso de los MRC, deben ser expedidos por el CENAM o por instituciones extranjeras trazables a patrones nacionales de sus respectivos pases y con la autorizacin de la DGN. La demostracin esquemtica de la trazabilidad a travs de las cartas de trazabilidad de cada uno de los mtodos de ensayo dentro del alcance de la acreditacin, (en las cuales se muestran en rectngulos: la magnitud, unidades, MRC y la incertidumbre de medicin; y en valos: el mtodo y el modelo matemtico), basadas en los certificados o dictmenes de calibracin y de sus MRC, y una tabla donde se especifiquen los analitos cubiertos por el mtodo de ensayo.
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Por ejemplo:
Carta de trazabilidad para la medicin de metanol por CG/DIF

Magnitud: cantidad de substancia Unidad : mol
CENAM u otro Laboratorio Nacional de Metrologa
Tcnica de medicin: CG-DIF y CG-EM
MRC: Mezcla certificada de alcoholes, steres y acetaldehdo en etanol al 40% Alc. Vol. Magnitud: concentracin de masa
Unidad: mg/ 100 mL Urel = 0,3 %
Mtodo NOM-142-SSA1-1995: B.5 para medicin de metanol por CG en bebidas alcohlicas A Am b A EI m C Am = C EI m fd m
Laboratorios de Ensayo
Concentracin de Metanol en la bebida alcohlica Magnitud: concentracin de masa Unidad: mg/ 100 mL Urel = 6 %
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7. INCERTIDUMBRE DE MEDICIN
Consultar el Glosario de Trminos Anexo 2 para las definiciones correspondientes. Los ensayos usualmente tienen el propsito de llevar a cabo la evaluacin de la conformidad con requisitos establecidos, mediante la comparacin de stos con los resultados de sus mediciones, esto no los excluye de una declaracin de la incertidumbre de medicin en los resultados, adems de ser una parte indispensable en la expresin de un resultado de medicin. Los resultados de tal evaluacin pueden ser: conforme o no conforme. 7.1 Elementos de la incertidumbre de la medicin [4] El modelo matemtico de la medicin, descrito mediante una expresin matemtica acompaada de la nomenclatura correspondiente, y la mencin explcita de las hiptesis necesarias para su validez. La lista de las fuentes de incertidumbres significativas y una descripcin, breve y suficiente de las mismas. La mencin a fuentes de incertidumbre que tpicamente no aportan contribuciones significativas, pero que pueden resultar significativas bajo condiciones que pudieran ocurrir en el transcurso de una medicin. Una tabla con los componentes de incertidumbre que contenga al menos, para cada uno de ellos su incertidumbre, su variabilidad, la distribucin de probabilidad que se le asocie, el coeficiente de sensibilidad y su contribucin a la incertidumbre estndar combinada de la medicin. La tabla tambin debe mostrar la incertidumbre estndar combinada y expandida. Una nota relativa a la distribucin de probabilidad del mensurando. Recomendaciones sobre el clculo y la expresin de la incertidumbre expandida de la medicin, incluyendo preferentemente y cuando aplique, los grados de libertad asociados a cada contribucin y el nmero efectivo de grados de libertad. Una nota de advertencia sobre el propsito nico de ilustracin de la tabla presentada y sobre la obligacin de cada laboratorio a realizar sus propios ensayos y consideraciones sobre la estimacin de la incertidumbre de sus mediciones.
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De acuerdo a la Poltica de Trazabilidad e Incertidumbre de la ema, para mediciones por CG y CLAR el laboratorio debe aplicar alguna de las siguientes opciones: a) Estimar la incertidumbre con base al punto 4.2.1 considerando las magnitudes de entrada del modelo matemtico, cuando el resultado de la medicin por CG y CLAR sea generado a partir de un proceso de medicin directa. Ejemplo: Estimacin de la incertidumbre de medicin de la fraccin de masa de metanol, cuya medicin se basa en la NOM-142-SSA1-1995. b) Estimar la incertidumbre con base a lo establecido en el punto 4.2.2. cuando el mensurando depende del mtodo de ensayo (prueba), es decir, la medicin es posterior a una serie de etapas complejas de tratamiento de la muestra. Ejemplo: Compuestos Orgnicos Semivoltiles por CG/EM en Lixiviados de Residuos Industriales segn mtodo USEPA 8270C-1996. En el ejemplo de Tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas (Anexo 1), se presentan algunas fuentes de incertidumbre en la tcnica de medicin de CG, el evaluador debe revisar el procedimiento que realiza el laboratorio para determinar las principales fuentes de incertidumbre [4] identificadas, las cules al menos deben ser las sealadas en la Tabla 7, pero que pueden ser ms dependiendo de los mtodos especficos contenidos en el alcance de la acreditacin. En el Anexo 5 se encuentran ejemplos de la estimacin de Incertidumbre. Las principales fuentes de incertidumbre identificadas en las mediciones incluidas en esta gua son: Etapa operativa Tabla 7 Fuentes de Incertidumbre Fuentes de incertidumbre Magnitudes involucradas Volumen y/o Masa Masa Volumen
1. Sub muestreo Toma de muestra 2. Mtodo de preparacin de la Secado, Extraccin, muestra Derivatizacin, Eliminacin de Interferencias, pre-concentracin 3. Calibracin de la Medicin MRC, Analtica (Trazabilidad) Disoluciones involucradas 4. Medicin Repetibilidad y reproducibilidad
Volumen y/o masa, concentracin de masa del MRC Concentracin de masa
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Cuando se disponga de un estudio de precisin del mtodo (mediante el uso de Material de control de calidad, MCC) el cual ya incluye la incertidumbre correspondiente a las etapas 1, 2 y 4, se deber estimar adicionalmente la fuente sealada en la etapa 3. Si el laboratorio demuestra que alguna de las fuentes de incertidumbre no es significativa puede no ser considerada en su evaluacin.
8. VALIDACIN DE MTODOS
Consultar el Glosario de Trminos Anexo 2, para su definicin. La validacin examina las caractersticas de desempeo de un mtodo para identificar y establecer cualquier limitacin que pueda esperarse del mtodo cuando se aplique a un tipo especfico de muestras[8]. Los parmetros recomendados para la validacin de un mtodo de ensayo que incluye mediciones por CG y CLAR son: 1. Recuperacin 2. Sensibilidad 3. Selectividad 4. Robustez 5. Lmite de deteccin 6. Lmite de cuantificacin 7. Intervalo lineal y de trabajo 8. Reproducibilidad 9. Repetibilidad 10. Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de la recuperacin) 11. Incertidumbre (de acuerdo al punto 7 de esta gua) Para el caso de los mtodos incluidos en esta Gua, los parmetros para realizar una validacin parcial son los siguientes: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Recuperacin Lmite de deteccin Lmite de cuantificacin Intervalo lineal y de trabajo Reproducibilidad (medicin durante al menos tres das) Repetibilidad Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de la recuperacin) Incertidumbre (de acuerdo al punto 7 de esta gua)
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Para el caso de las acreditaciones iniciales, renovaciones, ampliaciones o actualizaciones de mtodos de ensayo en la NMX-EC-17025-IMNC-2000[2], el laboratorio deber iniciar su proceso de estimacin de incertidumbre en la validacin parcial del mtodo y tener un plan de implantacin de acuerdo al captulo 4 inciso 4.2.3 de las Polticas Referentes a la Trazabilidad e incertidumbre de mediciones de la ema, para cuantificar todos aquellos componentes de incertidumbre que contribuyan significativamente a la incertidumbre final de la medicin. Esto ltimo debe ser realizado segn el punto 7 de esta gua. Nota. En el caso descrito en la seccin 7 de incertidumbre inciso b se asume que el sesgo asociado al mtodo de medicin es cero. En la tabla 8 se resumen los requisitos que el evaluador deber solicitar respecto a la validacin de los mtodos de ensayo a acreditar: Tabla 8 Requisitos de la Validacin GRADO DE VALIDACIN O SITUACIN REVALIDACIN REQUERIDA Desarrollo de un mtodo para un problema en particular Existe un mtodo evaluado para aplicarlo en un problema en particular Un mtodo establecido, realizar una revisin para incorporar innovaciones Un mtodo establecido, extenderlo o adaptarlo a un problema nuevo Cuando el control de calidad indica que un mtodo establecido cambia con el tiempo Establecer un mtodo en un laboratorio diferente Establecer un mtodo con diferente instrumentacin Establecer un mtodo con diferente operador Completo Completo Parcial o completo Parcial o completo Parcial o completo Parcial Parcial Parcial
El evaluador debe solicitar al laboratorio la validacin de todos los mtodos (ya sea parcial completa), que son empleados en estas tcnicas de medicin, an cuando estos sean normalizados. Para el caso de evidencia de una Validacin Parcial: En el caso de realizar una validacin parcial, el evaluador deber solicitar al laboratorio la documentacin analtica y los registros que la sustenten.
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Para el caso donde se midan concentraciones cercanas al lmite de deteccin se deben solicitar todos los parmetros listados para validacin parcial.
Nota: En el caso donde no se mida a nivel de trazas el lmite de cuantificacin y el lmite de deteccin no son requisitos. Para todos los casos se deber referir al Captulo 7 de esta Gua, para la estimacin de incertidumbre.
9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO

El evaluador debe solicitar que las Buenas Prcticas de Laboratorio que sigue en su operacin el laboratorio se encuentren documentadas, las cuales deben tenerlas referidas y aplicadas dentro de su sistema de calidad (ver Anexo 6) Una referencia til es la publicacin tcnica de Manual de Buenas Prcticas de Laboratorio del CENAM[5]. Otra referencia a considerar es la publicacin tcnica de Buenas Prcticas de Laboratorio en Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin del CENAM[9].
10. BIBLIOGRAFA
[1] NMX-Z-055:1996 IMNC Metrologa Vocabulario de trminos fundamentales y generales, equivalente al documento International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology, BIPM, IEC, IFCC, ISO, IUPAC, IUPAP, OIML, 1993. [2] NMX-EC-17025-IMNC-2000 (ISO/IEC 17025:1999) Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y calibracin. [3] NOM-008-SCFI 2002 Sistema General de Unidades de Medida. [4] Eurachem-Citac Guide Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement 2nd. Edition, 2000. [5] Manual de Buenas Prcticas de Laboratorio, CENAM, CNM-MRD-PT008, 2nd. Edicin, 5 impresin, septiembre 2002. [6] PROY NMX CC 10012 IMNC 2003 (ISO 10012-2002) Sistemas de Gestin de Mediciones, -Requisitos para Procesos de Medicin y Equipos de Medicin
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[7] Calificacin de Calificacin de Equipo de Instrumentos Analticos, DI-2-PTC-620RAT-001-2004, CENAM, abril del 2004. [8] Mtodos analticos adecuados a su propsito. Gua de laboratorio para validacin de mtodos y tpicos relacionados. CNM-MRD-PT-030, CENAM, 1998. [9] CENAM, Buenas Prcticas de Laboratorio en Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin, febrero 1998. [10] Polticas referentes a la trazabilidad e incertidumbre de mediciones, 2002, Serie documentos, ema. http://www.ema.org.mx/ema/pdf/PROCEDIMIENTOS/TRAZABILIDAD%20E%2 0INCERTIDUMBRE%20SC-2002-12-12.pdf
11. AGRADECIMIENTOS
Agradecimiento especial a los responsables de la elaboracin de esta Gua: CARBAJAL ALARCN Carlos Enrique, CENAM GARZA ULLOA Humberto Jess, ALS-INDEQUIM, S.A. de C.V. GUEVARA HERNNDEZ Alicia, CENAM PREZ CASTORENA Alejandro, CENAM PREZ URQUIZA Melina, CENAM
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12. ANEXOS
ANEXO 1 TABLA DE TRAZABILIDAD E INCERTIDUMBRE DE CG
MENSURANDO REFERENCIA
No. NOMBRE DE LA PRUEBA (1)

(2)
SUBCOMIT (3)
MATRIZ (4)
ANALITO, COMPUESTO PARMETRO (5) MAGNITUD (6) UNIDADES (7) NORMA (8) DOCUMENTO (9)
TCNICA DE MEDICION TCNICA ANALTICA (10)
Medicin de hexaclorobenceno en suelo
Ambiente Laboral, Residuos y Fuentes Fijas
suelo
hexaclobenceno
concentracin de masa masa del estndar interno en la muestra masa de la disolucin de estndar interno Masa de la muestra
mg/L
Mtodo EPA 8270C
Cromatografa de gases
Slidos Totales
gravimetra
gravimetra
gravimetra
(1) (2) (3) (4)
Nmero consecutivo Nombre de la prueba Nombre del subcomit Especificar la matriz en la cual se encuentra el analito o compuesto. Por ejemplo: Leche, suelo, agua, aceite, cermica, etc. (5) Nombre del analito o compuesto. (6) Indicar en las filas: el nombre de la magnitud de inters, nombre de aquellas magnitudes que son medidas para determinar el valor del mensurando, nombre de aquellas magnitudes de influencia que participan en la prueba. Usar tantas filas como sea necesario. (7) Unidades correspondientes al valor del mensurando, a aquellas magnitudes que son medidas para determinar el valor del mensurando, a aquellas magnitudes de influencia que participan en la prueba. (8) Norma(s) en la que se basa la medicin de la magnitud correspondiente. (9) Nombre del (los) documento(s) (procedimiento interno, mtodo de referencia nacional o internacional), en el que se basa la medicin de la magnitud correspondiente. (10) Nombre de la tcnica de medicin o tcnica analtica utilizada para realizar la medicin de la magnitud correspondiente
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Continuacin, Tabla de trazabilidad e incertidumbre de los mtodos de ensayo (prueba) que se solicita acreditar ms comnmente.
TRAZABILIDAD
INSTRUMENTO Y/O SISTEMA DE MEDICIN MATERIAL VOLUMTRICO CALIBRADO
VALIDACIN DE METODO DE MEDICIN
CEIMA y/o CONFIRMACIN METROLOGCA INSTRUMENTO MTODO DE REFERENCIA MRCs o Patrn de Referencia
ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE
OBSERVACIONES
Cromatografo Gases con Detector selectivo de masa (CG/EM),
Si
CEIMA
Si
La medicin se lleva a cabo con curva de calibracin y con un estndar interno
Balanza analtica
CM
Balanza analtica
CM
Balanza analtica
CM
(11) Nombre del instrumento o sistemas instrumentales de medicin que se utilizan para efectuar la medicin de cada magnitud. (12) Nombre del instrumento y/o material volumtrico calibrado (13) Indicar si requiere validacin (14) Instrumento o Equipo que requiere CEIMA o CM (15) Forma de establecer trazabilidad (16) Indicar si requiere estimar incertidumbre ANEXO 2 GLOSARIO DE TRMINOS En las reuniones y talleres realizadas en las instalaciones del CENAM para la elaboracin de las Guas Tcnicas de Trazabilidad e Incertidumbre, entre los integrantes de los Grupos de Trabajo del CENAM y la ema, se acord incluir los criterios de interpretacin a las definiciones que se utilizaran en las Guas Tcnicas con el objeto de tener ms claridad y uniformizar los conceptos entre los evaluadores que las aplicarn. Debido a la importancia de poder distinguir adecuadamente las relaciones y diferencias entre los conceptos de mtodos de medicin, mtodos de ensayo (prueba), procedimientos de medicin, procedimiento de ensayo (prueba), procedimiento interno, protocolo, entre otros, se elabor la siguiente tabla de interpretacin:
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DOCUMENTO
Ensayo (Prueba)
DEFINICIN Operacin tcnica que consiste en la determinacin de una o ms caractersticas o desempeo de un producto, material, equipo, organismo, fenmeno fsico, proceso o servicio dado, de acuerdo a un procedimiento especificado. Procedimiento tcnico especfico para desarrollar un ensayo (prueba).
Qu solicita el evaluador? Este no se localiza en ningn documento, el evaluador no lo debe solicitar. El evaluador lo debe solicitar como documento de referencia, (generalmente una norma, indicado en el alcance de la acreditacin) para compararlo con el procedimiento interno. Se encuentra descrito generalmente dentro del documento de referencia. El evaluador no lo debe solicitar. Se encuentra descrito especficamente dentro del procedimiento interno. Este documento lo debe solicitar el evaluador para compararlo con el mtodo de ensayo (prueba) y evaluarlo en sitio.
Mtodo de ensayo (prueba)
Mtodo de medicin
Secuencia lgica de operaciones, descrita genricamente, usada en la realizacin de mediciones Conjunto de operaciones, descritas especficamente, usadas en la realizacin de mediciones particulares de acuerdo a un mtodo dado. Trascripcin especifica para las condiciones del laboratorio de lo establecido en el mtodo de ensayo (prueba).
Procedimiento de medicin Procedimiento Interno, PNT, Instructivo Tcnico, Protocolo interno, entre otros.
AJUSTE: Operacin de llevar un instrumento de medicin a un estado de funcionamiento adecuado para su uso. [VIM 4.30, NMX Z 055 IMNC 1996] CADENA DE MEDICIN: Serie de elementos de un instrumento de medicin o de un sistema de medicin, que constituye la trayectoria desde la entrada hasta la salida de la seal de medicin. [VIM 4.4, NMX Z 055 IMNC 1996] EJEMPLO: en una medicin de espectrometra de absorcin atmica incluye el nebulizador, el quemador, el control de gases de la flama, el monocromador, el fotomultiplicador y el voltmetro o el transductor de la salida de la seal para la computadora personal. CALIBRACIN: Conjunto de operaciones que establecen en condiciones especificadas, la relacin entre los valores de las magnitudes indicadas por un instrumento de medicin o un sistema de medicin o los valores representados por una medida materializada o material de referencia, y los valores correspondientes de la magnitud realizada por los patrones. [VIM 6.11, NMX Z 055 IMNC 1996]
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CRITERIO: El trmino calibracin se utilizar en dos aplicaciones diferentes: En lo que respecta a la calibracin en las mediciones fsicas, la calibracin de los instrumentos de medicin deber ser realizada por Laboratorios de Calibracin Acreditados. En lo que respecta a la calibracin en las mediciones analticas, la realizarn los Laboratorios de Ensayo empleando Materiales de Referencia Certificados. En las mediciones qumicas se establece la trazabilidad a cantidad de sustancia a travs de la curva de calibracin, en la cul se establece la relacin entre la seal del instrumento de medicin y la concentracin del mensurando por medio de los Materiales de los Referencia Certificados. Respecto a la calibracin del material volumtrico, termmetros u otros instrumentos de medicin (manmetros, higrmetros, etc.), se deber exigir su calibracin, realizada por Laboratorios de Calibracin Acreditados, slo si su influencia en la incertidumbre de la medicin es significativa, lo cul deber demostrarse documentalmente. En estos casos, el laboratorio debe tener evidencias de la verificacin peridica de la calibracin de sus instrumentos o materiales, de acuerdo a su uso. Los casos en los que no se requiere la calibracin de material volumtrico, termmetros u otros instrumentos, por no ser sta significativa en la incertidumbre de la medicin, an as, el laboratorio deber mostrar evidencias de la verificacin, segn las especificaciones del fabricante, antes de su uso y peridicamente, de acuerdo a su uso. NOTA: Debido a que la calibracin de instrumentos de mediciones fsicas no incluyen operaciones de ajuste, el laboratorio debe tener establecidos criterios de aceptacin y rechazo documentados para saber si los instrumentos estn dentro de las caractersticas metrolgicas originales y que son adecuadas para cumplir con los requisitos metrolgicos del uso propuesto. En el caso de mediciones qumicas lo anterior no aplica, ya que la mayora de los instrumentos de medicin qumica requieren una optimizacin de la seal de respuesta y esto se logra efectuando diferentes ajustes, dgase posicin del nebulizador, flujos de gas, alineacin de lmparas, temperatura de flama, seleccin de eluyentes, etc., siguiendo las recomendaciones correspondientes a cada tcnica de acuerdo al manual del instrumento. CALIFICACIN DE EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE MEDICIN ANALTICA (CEIMA): Proceso general que asegura que un instrumento es apropiado para el uso propuesto y que su desempeo est de acuerdo a las especificaciones establecidas por el usuario y el proveedor.
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[Calificacin de Equipo de Instrumentos Analticos, DI-2-PTC-620-RAT-001-2004, CENAM, abril del 2004] NOTA: La CEIMA se compone de los siguientes procesos, la Calificacin de diseo (CD), Calificacin de instalacin (CI), Calificacin de operacin (CO) y Calificacin de desempeo (C de D). CALIFICACIN DEL DISEO (CD): Cubre todos los procedimientos previos a la instalacin del sistema en el ambiente seleccionado. La CD define las especificaciones operacionales y funcionales del instrumento y detalla las decisiones deliberadas en la seleccin del proveedor. CALIFICACIN DE INSTALACIN (CI): Cubre todos los procedimientos relacionados a la instalacin del instrumento en el ambiente seleccionado. La CI establece que el instrumento se recibi como se dise y se especific, que este instrumento fue adecuadamente instalado en el ambiente seleccionado, y que este ambiente es apropiado para la operacin y uso del instrumento. CALIFICACIN DE OPERACIN (CO): Es el proceso en donde se demuestra que un instrumento funcionar de acuerdo a su especificacin operacional en el ambiente seleccionado. CALIFICACIN DE DESEMPEO (C DE D): Es definida como el proceso en donde se demuestra que un instrumento se desempea consistentemente de acuerdo a una especificacin apropiada para su uso rutinario. CARACTERSTICA METROLGICA: Caracterstica identificable que puede influir en los resultados de la medicin. NOTA 1: Los equipos de medicin generalmente tienen varias caractersticas metrolgicas. NOTA 2: Las caractersticas metrolgicas pueden ser el objeto de la calibracin. CRITERIO: Este trmino se refiere a resultados de calibracin. Ref [6] CONFIRMACIN METROLGICA: Conjunto de operaciones requeridas para asegurarse de que el equipo de medicin es conforme a los requisitos correspondientes a su uso previsto. NOTA 1: La confirmacin metrolgica generalmente incluye la calibracin y verificacin, cualquier ajuste o reparacin necesario, y la subsiguiente recalibracin,
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la comparacin con los requisitos metrolgicos del uso previsto del equipo, as como cualquier sellado y etiquetado requerido. NOTA 2: La confirmacin metrolgica no se logra hasta que se haya demostrado y documentado la adecuacin del equipo de medicin para el uso previsto. NOTA 3: Los requisitos para el uso previsto incluyen consideraciones tales como alcance, resolucin y error mximo permitido. NOTA 4: Los requisitos metrolgicos normalmente difieren de los requisitos para el producto y no estn especificados en stos. CRITERIO: El proceso de confirmacin metrolgica se debe aplicar solo a los instrumentos que se utilizan en mediciones fsicas tales como b balanzas analticas, termmetros, manmetros, hidrmetros, picnmetros, sonmetros, luxmetros, cronmetros y flujmetros, entre otros. Ref [6] ENSAYO (PRUEBA): Operacin tcnica que consiste en la determinacin de una o ms caractersticas o desempeo de un producto, material, equipo, organismo, fenmeno fsico, proceso o servicio dado. [Gua ISO/IEC 2, NMX-Z-109-IMNC-1996 CRITERIO: Las Pruebas (ensayos) pueden ser cualitativas o cuantitativas, pueden tambin ser la determinacin de las caractersticas de desempeo de un proceso o servicio, sin embargo, en lo relativo a las pruebas analticas cuantitativas, la prueba (ensayo) incluye siempre un Mtodo de Medicin y por lo mismo, los conceptos de Trazabilidad e Incertidumbre se aplican a este tipo de mtodos de prueba (ensayos). INCERTIDUMBRE DE MEDICIN: Parmetro asociado al resultado de una medicin que caracteriza la dispersin de los valores que podran razonablemente ser atribuidos al mensurando. INSTRUMENTO DE MEDICIN: Dispositivo destinado a ser utilizado para hacer mediciones, solo o asociado a uno o varios dispositivos anexos. [VIM 4.1, NMX Z 055 IMNC 1996] INTERVALO DE TRABAJO: En anlisis cuantitativo, el intervalo de trabajo es obtenido a travs de la medicin de muestras con diferente concentracin del analito, y seleccionando el intervalo de concentracin que proporciona un nivel de incertidumbre aceptable.
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NOTA 1: Dentro del intervalo de trabajo puede existir un intervalo de respuesta lineal. Dentro de ste intervalo lineal de respuesta habr una relacin lineal con la concentracin del analito. NOTA 2: El intervalo de trabajo es generalmente ms amplio que el intervalo lineal y puede establecerse durante la evaluacin del intervalo de trabajo. NOTA 3: El intervalo de trabajo se refiere al intervalo de valores de concentracin en las disoluciones que se miden realmente y no a la concentracin en la muestra original. [CITAC/EURACHEM Guide to Quality in Analytical Chemistry; EURACHEM The Fitness for Purpose of Analytical Methods] LIMITE DE DETECCION: La menor concentracin del analito en una muestra que puede detectarse, pero no necesariamente cuantificarse bajo las condiciones establecidas de la prueba. [NATA Tech Note #13, EURACHEM The fitness for Purpose of Analytical Methods 1998] LMITE DE CUANTIFICACIN: Es la concentracin ms baja del analito que puede determinarse con un nivel de incertidumbre aceptable. NOTA: Debe establecerse empleando materiales de referencia o muestras apropiadas. Este lmite, generalmente es el punto ms bajo de la curva de calibracin (excluyendo el blanco). No debe ser determinado extrapolando la curva de calibracin. Algunas convenciones toman el lmite de cuantificacin como 5, 6 o 10 veces la desviacin estndar de la medicin del blanco: xL = xbl + ksbl Donde xbl es la media de las mediciones del blanco y sbl la desviacin estndar de las mediciones del blanco, y k es un factor numrico elegido de acuerdo al nivel de confianza deseado, siendo k = 5, 6 10. [CITAC/EURACHEM Guide to Quality in Analytical Chemistry] LINEALIDAD: Define la habilidad del mtodo para obtener resultados proporcionales a la concentracin del analito en la prueba.
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Nota: Se infiere que el intervalo lineal es el intervalo de concentraciones del analito sobre las cuales el mtodo proporciona resultados de pruebas proporcionales a la concentracin del analito. [AOAC PVMC; EURACHEM The fitness for Purpose of Analytical Methods 1998] MAGNITUD: Atributo de un fenmeno, cuerpo o sustancia que puede ser diferenciado cualitativamente y determinado cuantitativamente. [VIM 1.1, NMX Z-055 IMNC 1996] MATERIAL DE REFERENCIA: Material o sustancia en el cul uno o ms valores de sus propiedades son suficientemente homogneos y bien definidos, para ser utilizadas para la calibracin de aparatos, la evaluacin de un mtodo de medicin o para asignar valores a los materiales. [VIM 6.13, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: cuando se requiere demostrar trazabilidad, la calibracin de instrumentos empleados en las mediciones fsicas deber ser realizado por Laboratorios de Calibracin Acreditados. En lo que respecta a la calibracin en las mediciones analticas, la realizarn los Laboratorios de Ensayo empleando Materiales de Referencia Certificados. MATERIAL DE REFERENCIA CERTIFICADO: Material de referencia acompaado de un certificado, en el cul uno o ms valores de sus propiedades estn certificados por un procedimiento que establece trazabilidad a una realizacin exacta de la unidad en la cul se expresan los valores de la propiedad y en la que cada valor certificado se acompaa de una incertidumbre con un nivel declarado de confianza. [VIM 6.14, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: Existen 2 tipos de MRC, los que se utilizan para elaborar curvas de calibracin y dar trazabilidad a las mediciones, los cuales son regularmente en matrices simples y de alta concentracin y los MRC para control de calidad los cuales son matrices reales (suelo, agua de mar, sangre humana, hgado de pato, etc.) a la cual se les ha agregado o contienen una(s) sustancia(s) qumicas en concentraciones en las que se encuentran en las muestras reales y que regularmente se utilizan para control de calidad o pruebas de aptitud, los valores, incertidumbres, homogeneidad y estabilidad de ambos deben ser determinadas por un laboratorio primario o nacional o un organismo competente aprobado por ellos. Para llevar a cabo los programas de control de calidad el uso principal de los MRC de Control de Calidad es para asegurar
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la confiabilidad de sus mediciones con cierta periodicidad, y rutinariamente se pueden utilizar MR para llevar su control estadstico.
Para demostrar trazabilidad en una medicin qumica el laboratorio requiere utilizar MRC para la elaboracin de curvas de calibracin (o en la ejecucin de cualquier otro mtodo de calibracin qumica). CRITERIO: El certificado de un MRC debe especificar claramente el valor certificado, la incertidumbre correspondiente con un nivel de confianza declarado. El mtodo utilizado para la determinacin del valor certificado, analito al que corresponde el valor certificado, matriz, recomendaciones de uso, limitaciones, fecha de caducidad, entre otros MENSURANDO: Magnitud particular sujeta a medicin. [VIM 2.6, NMX Z-055 IMNC 1996; ISO 34] CRITERIO: Para mayor claridad en mediciones analticas, la identificacin del mensurando debe ser acompaada por la matriz, el mtodo de prueba y la tcnica de medicin con que se determina, ya que en muchos casos existen resultados de un mismo mensurando que son diferentes y dependientes del mtodo analtico, por ejemplo calcio soluble en agua residual por la NMX AA 051 SEMARNAT 2001 (AAE) es diferente a calcio soluble en agua potable por volumetra. MEDICIN: Conjunto de operaciones que tienen por objetivo determinar el valor de una magnitud. [VIM 2.1, NMX Z-055 IMNC 1996] MTODO DE ENSAYO (PRUEBA): Procedimiento tcnico especfico para desarrollar una prueba (ensayo). NOTA: Los ensayos (pruebas s) pueden ser cualitativos, cuantitativos y la determinacin de las caractersticas de desempeo de un proceso o servicio. Los ensayos (pruebas) cuantitativos son mtodos de medicin (ver definicin); algunos de ellos estn incluidos dentro de los mtodos de ensayo (prueba). Los ensayos (pruebas) cualitativos no incluyen cuantificaciones de mensurandos, por lo que en stos no se aplican los conceptos de trazabilidad e incertidumbre. MTODO DE MEDICIN: Secuencia lgica de operaciones, descrita genricamente, usada en la realizacin de mediciones.
CRITERIO: Para los propsitos de esta Gua, los mtodos de prueba en qumica analtica cuantitativa (ver definicin), siempre incluyen un mtodo de medicin. Para los fines de acreditacin, el nombre de la identificacin del mtodo de medicin es el mismo que el empleado para el mtodo de prueba que se quiere acreditar. [VIM, NMX Z-055 IMNC 1996] METODO PRIMARIO: Por definicin un mtodo primario de medicin es un mtodo que tiene la ms alta calidad metrolgica, cuya operacin se describe y se entiende completamente, para el cual se tiene una declaracin completa de incertidumbre en trminos de unidades del SI, y cuyos resultados son, por lo tanto, aceptados sin referencia a un patrn de la misma magnitud que es medida. [Metrologa, 2001, 38, 289-296] MTODO DE REFERENCIA: es un mtodo ampliamente investigado, que describe clara y exactamente las condiciones y procedimientos necesarios, para la medicin de uno o ms valores de la propiedad, que han demostrado tener exactitud y precisin de acuerdo con su propsito de uso y que puede, por lo tanto, ser usado para evaluar la exactitud de otros mtodos por la misma medicin, permitiendo en particular la caracterizacin de un MR. [3.10 Gua ISO 30] CRITERIO: En la ema este trmino se ha aplicado a los mtodos que se acreditan. Desde el punto de vista metrolgico y en esta gua el significado es el establecido en esta definicin. PATRN: Medida materializada, instrumento de medicin, material de referencia o sistema de medicin destinado a definir, realizar, conservar o reproducir una unidad o uno o ms valores de una magnitud para servir de referencia. [VIM 6.1, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: Para los propsitos de esta gua y en lo que se refiere a mediciones qumicas (mediciones de cantidad de sustancia), los patrones de medicin son Materiales de Referencia Certificados (MRC). PRINCIPIO DE MEDICION: Es la base cientfica de una medicin, por ejemplo, el efecto termoelctrico en la medicin de temperatura, el efecto Doppler en la medicin de velocidad, el efecto Raman en la medicin del nmero de onda de vibraciones moleculares.
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[VIM 2.3, NMX Z-055 IMNC 1996] NOTA: En mediciones qumicas se utiliza el concepto de Tcnica analtica para designar el principio qumico o fsico en que se fundamenta una medicin analtica. Este principio, solo o combinado con otros, se materializa generalmente mediante un instrumento (ejemplos: espectrometra de masas, cromatografa de gases, espectrofotometra de absorcin atmica) PROCEDIMIENTO DE MEDICIN: Conjunto de operaciones, descritas especficamente, usadas en la realizacin de mediciones particulares de acuerdo a un mtodo dado. [VIM 2.5, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: Estas operaciones estn descritas en: procedimientos o instructivos internos del laboratorio. stos deben estar basados en el Mtodo de Medicin que los laboratorios de ensayo desean acreditar. RECUPERACION (RECOBRO): Proporcin de la cantidad de analito, presente en la porcin de la muestra o adicionado a esta, que es cuantificada por el mtodo de ensayo. [HARMONISED GUIDELINES FOR THE USE OF RECOVERY INFORMATION IN ANALYTICAL MEASUREMENT1999] CRITERIO: normalmente se utiliza para evaluar la recuperacin en porcentaje (% de recuperacin) del analito presente o agregado a una muestra de control de calidad, evala la eficiencia de extraccin, proceso de preparacin o interferencias que pueden existir al aplicar el mtodo de ensayo . REPETIBILIDAD (DE LOS RESULTADOS DE MEDICIONES): Proximidad de la concordancia entre los resultados de las mediciones sucesivas del mismo mensurando, con las mediciones realizadas con la aplicacin de la totalidad de las siguientes condiciones: - el mismo procedimiento de medicin; - el mismo observador; - el mismo instrumento de medicin utilizado en las mismas condiciones; - el mismo lugar; - la repeticin dentro de un perodo corto de tiempo. [VIM 3.6, NMX Z 055 IMNC 1996] NOTAS 1 A stas les llama condiciones de repetibilidad. 2 La repetibilidad se puede expresar cuantitativamente con la ayuda de las caractersticas de la dispersin de los resultados.
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REPRODUCIBILIDAD (DE LOS RESULTADOS DE MEDICIONES): Proximidad de la concordancia entre los resultados de las mediciones del mismo mensurando, con las mediciones realizadas haciendo variar las condiciones de medicin. [VIM 3.7, NMX Z 055 IMNC 1996] NOTAS 1 Para que una expresin de la reproducibilidad sea vlida, es necesario especificar las condiciones que se hacen variar. 2 Las condiciones que se hacen variar pueden ser: - el principio de medicin; - el mtodo de medicin; - el observador; - el instrumento de medicin; - el patrn de referencia; - el lugar - las condiciones de uso; - el tiempo. 3 La repetibilidad puede ser expresada cuantitativamente con la ayuda de las caractersticas de la dispersin de los resultados. 4 Los resultados considerados aqu son, habitualmente, los resultados corregidos.
REQUISITOS METROLGICOS DEL CLIENTE: Los requisitos metrolgicos del cliente son aquellos requisitos de medicin especificados por el cliente como pertinentes para el proceso de produccin del propio cliente. [NMX-CC-10012-2003] NOTA 1: El cliente puede ser interno o externo a la organizacin (apartado 3.3.5 de la Norma ISO 9000:2000). CRITERIO: Este trmino se refiere a los requisitos explcitos e implcitos definidos en el mtodo de ensayo con respecto al instrumento de medicin, como la resolucin de un termmetro, la capacidad y sensibilidad de una balanza analtica. SISTEMA DE MEDICIN: Conjunto completo de instrumentos de medicin y otro equipo, acoplados para realizar mediciones especficas. [VIM 4.5, NMX Z 055 IMNC 1996] CRITERIO: Se refiere a todos los equipos e instrumentos de medicin, equipo de laboratorio, materiales y reactivos que intervienen en la realizacin de una medicin, por ejemplo: Sistema de medicin para la determinacin de plomo en agua potable consta de:
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Espectrmetro de absorcin atmica Pipetas volumtricas Matraz aforado Sistema de Medicin para la determinacin de cadmio en cermica consta de: Espectrmetro de absorcin atmica Balanza Pipetas volumtricas Matraz aforado Termmetro Solucin de cido actico al 4% ROBUSTEZ: La robustez de un procedimiento analtico, es una medida de su capacidad de permanecer inalterado por pequeas, pero deliberadas, variaciones en los parmetros del mtodo y proporciona una indicacin de su confiabilidad durante su uso normal. [ICH Q2A, CPMP/ICH/381/95] SELECTIVIDAD (O ESPECIFICIDAD): La capacidad de un mtodo para determinar exactamente y especficamente el analito de inters en la presencia de otros componentes en la matriz bajo condiciones de prueba establecidas. [NATA Tech Note #13] SENSIBILIDAD: El cambio en la respuesta de un instrumento de medicin dividido por el correspondiente cambio del estmulo (seal de entrada). [IUPAC Orange Book] NOTA: El estmulo puede ser por ejemplo: la cantidad del mensurando presente. La sensibilidad puede depender del valor de estmulo. Aunque esta definicin se aplica claramente al instrumento de medicin, tambin puede aplicarse al mtodo analtico en conjunto, tomando en cuenta otros factores como el efecto de los pasos para una concentracin. SESGO: La diferencia entre los resultados de prueba esperados y el valor de referencia aceptado. [ISO 3534-1] NOTA: El sesgo es el error sistemtico total en contraste con el error aleatorio. Puede existir uno o ms componentes del error sistemtico que contribuyen al sesgo. Una diferencia sistemtica mayor con respecto al valor de referencia aceptado se refleja por un valor de sesgo ms grande.
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TITULANTE: Solucin que contiene el agente activo con el cual se lleva a cabo la reaccin de titulacin. [IUPAC Compendium of Chemical Terminology 2nd Edition (1997)] CRITERIO: el agente activo se refiere a la sustancia qumica de concentracin conocida, que reacciona con el analito bajo una estequiometra determinada, se utiliza para cuantificar el analito, normalmente los titulantes son parte de la cadena de mediciones para proporcionar la trazabilidad del valor del mensurando. TRAZABILIDAD: Propiedad del resultado de una medicin o del valor de un patrn, tal que sta pueda ser relacionada con referencias determinadas, generalmente patrones nacionales o internacionales, por medio de una cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo todas incertidumbres determinadas [VIM 4.5, NMX Z 055 IMNC 1996] NOTAS i. ii. iii. El resultado de una medicin o el valor de un patrn son los que estn relacionados con referencias determinadas Este concepto se expresa frecuentemente por el adjetivo trazable. La cadena ininterrumpida de comparaciones es llamada cadena de trazabilidad.
VALIDACIN: Es la confirmacin por examen y la provisin de evidencia objetiva de que se cumplen los requisitos particulares para un uso especfico propuesto. [NMX EC 17025 IMNC 2000] VALIDACIN DE MTODO: Es el proceso de establecer las caractersticas de desempeo y limitaciones de un mtodo de medicin y la identificacin de aquellas influencias que pueden modificar estas caractersticas y a que grado lo afectan. NOTA: Qu analitos puede determinar el mtodo?, En qu matrices, en la presencia de qu interferencias? Dentro de estas condiciones que niveles de incertidumbre pueden alcanzarse. [EURACHEM The fitness for Purpose of Analytical Methods 1998] VALOR DE BLANCO (EN MEDICIN): Una lectura o resultado originado por la matriz, reactivos y cualquier sesgo residual, en un proceso o instrumento de medicin que contribuye al valor obtenido de una magnitud en el procedimiento de medicin analtica. [IUPAC Compendium of Chemical Terminology 2nd Edition (1997)]
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VERIFICACIN: Existen varias definiciones que se aplican a ste trmino: La Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin tiene la siguiente definicin: La constatacin ocular o comprobacin mediante muestreo y anlisis de laboratorio acreditado, del cumplimiento de las normas. Asimismo indica en su glosario que las Unidades de verificacin son las personas fsicas o morales que hayan sido acreditadas para realizar actos de verificacin por la Secretara en coordinacin con las dependencias competentes. La Poltica de Trazabilidad de la ema indica en el inciso 3.2.4 que los laboratorios de calibracin y/o ensayo acreditados por ema no pueden realizar actividades de unidades de verificacin si no cuentan con la acreditacin y aprobacin correspondiente. La Gua ISO 8402 define verificacin como: Confirmacin por examen y la provisin de evidencia objetiva de que se cumplen los requisitos especificados. En el contexto de la Confirmacin Metrolgica se indica que los laboratorios de ensayo y calibracin deben realizar el proceso de Verificacin Metrolgica. CRITERIO: En el contexto de la confirmacin metrolgica, la confirmacin por examen consiste en la comparacin directa entre las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin y los requisitos metrolgicos del cliente, esto se denomina verificacin. Ver Guas ISO 9000 e ISO 10012. Los laboratorios de ensayo no realizan actividades de verificacin en el sentido descrito en la LFMN (las responsables son las Unidades de Verificacin), realizan actividades de comprobacin que son comnmente denominadas como de verificacin en las NMX EC 17025 IMNC 2000, NMX CC 10012 IMNC 2004 y ISO 8402.
ANEXO 3 EJEMPLO DEL PROCESO DE CONFIRMACIN METROLGICA PARA UNA BALANZA ANALTICA Requisitos metrolgicos del cliente (RMC)
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El proceso de confirmacin metrolgica inicia con la identificacin de requisitos metrolgicos del cliente (RMC) (A), por ejemplo: el cliente requiere hacer mediciones de masa en un intervalo de trabajo de 30 - 180 g; por lo tanto, la balanza analtica debe ser capaz de medir en el intervalo de 20 200 g. Adicionalmente a esto, requiere medir con una con una resolucin de 0,01mg, una repetibilidad de 0,03 mg y una incertidumbre de 0,04 mg. Tambin requiere que los RMC sean consistentes en intervalos de 20 en 20 g. Tabla 1 RMC Intervalo de trabajo Incertidumbre Repetibilidad Resolucin Especificaciones del proveedor. La persona encargada de hacer la compra de la balanza analtica encuentra que en el mercado puede adquirir una balanza con las siguientes especificaciones del equipo: alcance nominal de 210 g con resolucin de 0,01mg, una repetibilidad < 0,025 mg, linealidad < 0,1 mg. Tabla 2 Especificaciones Intervalo de trabajo Incertidumbre Repetibilidad Resolucin (0 210 )g < 0,000 1 g < 0,000 025 g 0,000 01 g (20 200) g < 0,000 40 g < 0,000 03 g 0,000 01 g
Caractersticas metrolgicas del equipo de medicin (CMEM) El equipo adquirido es enviado a calibracin solicitando que la calibracin (B) sea realizada en el intervalo de trabajo de 20 a 200 g y en intervalos de 20 g. Producto de la calibracin se obtienen las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin (CMEM). A continuacin se muestra el ejemplo de lo que se emite en un certificado o informe de calibracin para una balanza analtica (C). Prueba de carga excntrica: Variacin mxima de lectura obtenida en la prueba de carga excntrica. Resolucin 0,02 mg Carga 100 g Variacin mxima 0,16 mg
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Pruebas de repetibilidad: Resolucin 0,01 mg 0,01 mg
Carga 100g 200g
Repetibilidad 0,000 01 g 0,000 04 g
Prueba de linealidad: (intervalo de 0 a 200 g) Carga nominal (g) 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 Tabla 3 Correccin (g) - 0,000 06 -0,000 12 -0,000 20 -0,000 25 -0,000 29 -0,000 32 -0,000 36 -0,000 37 -0,000 36 -0,000 34 Incertidumbre (g) 0,000 08 0,000 09 0,000 09 0,000 11 0,000 09 0,000 11 0,000 12 0,000 12 0,000 15 0,000 12
Enseguida se procede a realizar la identificacin del estado de la calibracin (D) Verificacin metrolgica Una vez que se tienen los datos de la calibracin, se realiza la verificacin metrolgica, la cual consiste en comparar las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin, CMEM, y los requisitos metrolgicos del cliente, RMC (E).
Ejemplo: Tabla 4 RMC CMEM Verificacin
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Intervalo de trabajo (20 200) g Incertidumbre Repetibilidad Resolucin < 0,000 40 g < 0,000 03 g 0,000 01 g
(20 200 )g Mximo 0,000 15 g Mxima 0,000 04 g 0,000 01 g
Cumple Cumple No cumple Cumple
Derivado de la verificacin metrolgica anterior, se tiene que la repetibilidad no cumple los RMC, esto se documenta, se debe investigar si es posible realizar un ajuste a la balanza (G). Si es posible realizarlo se enva a ajuste (H), si no es posible se debe emitir un informe de verificacin fallida (I) y se identifica para indicar el estado del equipo (J). Una vez realizado el ajuste, la balanza es calibrada nuevamente (B) obtenindose las siguientes CMEM: Resultado de la Calibracin (C) Prueba de carga excntrica: Variacin mxima de lectura obtenida en la prueba de carga excntrica. Resolucin 0,01 mg Pruebas de repetibilidad: Resolucin 0,01 mg 0,01 mg Carga 100 g Carga 100g 200g Variacin mxima 0,000 03 g Repetibilidad 0,000 01 g 0,000 02 g
Prueba de linealidad: (intervalo de 0 a 200 g)
Carga nominal 20 40
(g)
Tabla 5 Correccin (g) - 0,000 06 -0,000 12
Incertidumbre (g) 0,000 08 0,000 09
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60 -0,000 20 0,000 09 80 -0,000 25 0,000 11 100 -0,000 29 0,000 09 120 -0,000 32 0,000 11 140 -0,000 36 0,000 12 160 -0,000 37 0,000 12 180 -0,000 36 0,000 15 200 -0,000 34 0,000 12 Una vez obtenidos los datos de la calibracin se realiza nuevamente la verificacin metrolgica. Verificacin metrolgica Se comparan las CMEM y los RMC (E). Tabla 6 RMC Intervalo de trabajo (20 200) g Incertidumbre Repetibilidad Resolucin < 0,000 40 g < 0,000 03 g 0,000 01 g CMEM (20 200 )g Mximo 0,000 15 g Mxima 0,000 02 g 0,000 01 g Verificacin metrolgica Cumple Cumple Cumple Cumple
Como resultado de la verificacin metrolgica, se concluye que las CMEM cumplen los RMC, se documenta la Confirmacin Metrolgica (F), se realiza la identificacin del estado de calibracin (D) y se concluye que la balanza puede ser utilizada para el propsito para el cual fue confirmada.
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DIAGRAMA DEL PROCESO DE CONFIRMACIN METROLGICA

Calibracin (comparacin tcnica del equipo de medicin con un patrn de medida) B
Calibracin
Necesidad Identificada: Inicio Definicin de RMC A
Certificado informe de calibracin
PROCESO DE CONFIRMACIN METROLGICA
Identificacin del estado de calibracina
Verificacin metrolgica
El equipo cumple con los requisitos?
Si
Documento de verificacin/confirma
cin
Acciones y decisiones
Es posible ajustarlo o repararlo?
No
Informe de prueba: Verificacin fallida
G
Si
Identificacin del estado H
Ajuste o reparacin Revisin del intervalo de confirmacin
Cliente b
Devolucin al cliente
Fin
a Para la identificacin ver la seccin 5.5.8 de la NMX-EC-17025-IMNC-2000. b Organizacin o persona que recibe un producto (por ejemplo: consumidor, cliente, usuario, distribuidor, beneficiario y Gua comprador).Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en CG y CLAR/Mayo 2004 45 Nota: ElFecha de emisin 2004-07-12, fecha de entradala organizacin (apartado 3.3.5 de la Norma ISO 9000:2000). de 71 cliente puede ser interno o externo a en vigor 2005-01-03, revisin 00
ANEXO 4 EJEMPLO PARA LA CALIFICACIN DE EQUIPOS DE INSTRUMENTOS DE MEDICIN ANALTICA (CEIMA) 4.1 Ejemplo para la Calificacin de Cromatgrafo de Gases para la determinacin de compuestos organoclorados
REQUISITO Configuracin del Instrumento de Medicin (Mdulos y sus caractersticas, Hardware, Software, Consumibles, ) Especificaciones tcnicas Condiciones Fsicas y Ambientales Apropiadas Recepcin completa de Configuracin solicitada del Instrumento de Medicin y documentos relacionados. Comprobacin de Especificaciones del Instrumento de Medicin. Alcances en funcin del detector y de los accesorios de introduccin de muestras adquiridos. Cada de presin (psi) Exactitud de Flujo (mL/min) Ruido del detector Precisin (DER, reas) Precisin (DER, tR) Respuesta del Detector (No. Cuentas) Representacin Estadstica del Desempeo de la aplicacin del Instrumento de Medicin (Muestras de Control de Calidad) Desempeo de Columna Analtica CALIFICACIN DE DISEO CD CALIFICACIN DE INSTALACION CI CALIFICACIN OPERACIONAL CO CALIFICACIN DE DESEMPEO C de D
x x x x
x x x x x x x x x x x x x
Nota: Los requisitos incluidos se presentan de manera de ejemplo y no como nicas opciones.
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4.1.1 Ejemplo de Calificacin de Diseo (CD) para CG -DCE

Configuracin del Instrumento de Medicin (IM) Especificacin Funcional Especificacin Proveedor Seleccionado Calificacin de Diseo (CD)
Cromatgrafo de gases con EPC, microprocesador teclado funcional, con pantalla alfanumrica
Cromatgrafo de Gases Control de Temperatura, en cinco zonas Operacin a 120V, 60 Hz Puerto de inyeccin empacado con EPC y purga de septum. Puerto de inyeccin capilar con Split/Splitless con EPC. Intervalo de 0-100 psi
Cromatgrafo de gases (2 inyectores, teclado funcional con pantalla alfanumrica de 4 lneas de 20 caracteres cada una, programacin del tiempo de corrida y activacin de mtodos comunicacin LAN nter construida, control de inyector automtico proteccin de memoria por fallas de poder Programacin de temperatura en el horno de columnas en 6 rampas, control de calentamiento en 6 zonas adicionales al horno Opera a 120V/60 Hz. Puerto de inyeccin para columnas empacadas y capilares Split/Splitless con control neumtico electrnico (EPC). Capacidad de programacin de las funciones de flujo y/o presin de 0 a 100 psi. sistema de ahorro de gas de arrastre (Gas saver) Detector de captura de electrones propsito general con micro celda, con un lmite de deteccin menor a 8 fg/s
Cumple ( X ) No cumple ( )
Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( )
Inyector
Detector
Detector de Captura de Electrones con make-up con lmite de deteccin de Lindano al menos de 15 fg/s Intervalo de temperatura hasta 350 C
Muestreador Automtico
Intervalo de temperatura hasta 400 C, Cumple ( X ) No cumple ( Control neumtico electrnico Cumple ( X ) No cumple ( Con velocidad de muestreo variable Cumple ( X ) de 5 a 50 Hz No cumple ( Muestreador/Inyector automtico con Inyector y muestreador Cumple ( X ) capacidad de 100 muestras en viales automtico para 100 No cumple ( de 2 mL y con muestra prioritaria. muestras Con acceso para control de Con acceso para control de Cumple ( X ) temperatura a travs de un temperatura a travs de un No cumple ( recirculador de agua recirculador de agua
) ) ) ) )
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4.1.2 Ejemplo de Calificacin de Instalacin (CI) para CG-DCE

Magnitud
Temperatura ambiental Humedad Relativa Tensin elctrica Frecuencia Fraccin de masa
Especificacin Funcional 5 a 40C 50 a 80 % 120 V 5% 48 a 66 Hz Helio 0,999 995 g/g Argn/Metano 0,999 995 g/g
Resultado 20 a 27 C 50 a 60 % 118 a 122 V 60 Hz Helio 0,999 995 g/g Argn/Metano 0,999 995 g/g
Calificacin de Instalacin (CI) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( ) Cumple ( X ) No cumple ( )
4.1.3 Ejemplo de Calificacin Operacional (CO) para CG-DCE

Caracterstica
Fugas en el Inyector Flujos del Detector (DIF) Ruido del detector
Especificacin Operacional Cada de presin (PC) < 2 psi ( En un perodo de 2 horas) Gas auxiliar 252.5 mL/min
Resultado P inicial P final = PC 20 psi 19.08 psi = 0,02 psi 23 mL/min
Calificacin Operacional (CO) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( )
Seal inicial <1 000 Hz 110 Hz 0,08 Hz Ruido de ASTM <1,0 Hz Drift < |15| Hz 9,0 Hz
4.1.4 Ejemplo de Calificacin de Desempeo (C de D) para CG-DCE

Calificacin funcional del DIF con inyeccin Split-splitless
Especificacin Funcional Lindano > 890 Lindano Desviacin estndar < a 3%
Resultado
Calificacin de desempeo (C de D)
Cuentas de rea (Usando un MRC) Tiempo de retencin (Usando un MRC)
9120 0,01%
Cumple ( X ) Cumple ( X )
No cumple ( ) No cumple ( )
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4.2 Ejemplo para la Calificacin de Cromatgrafo de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR)

REQUISITO Configuracin del Instrumento de Medicin (Mdulos y sus caractersticas, Hardware, Software, Consumibles, ) Especificaciones tcnicas Condiciones Fsicas y Ambientales Apropiadas Recepcin completa de Configuracin solicitada del Instrumento de Medicin y documentos relacionados. Comprobacin de Especificaciones del Instrumento de Medicin. Alcances en funcin del detector y de los accesorios de introduccin de muestras adquiridos. Exactitud de la longitud de onda Volumen de inyeccin Comprobacin de la velocidad de flujo Espectro del filtro de Holmio Prueba Oscura CALIFICACIN DE CALIFICACIN DE DISEO INSTALACION CD CI CALIFICACIN OPERACIONAL CO CALIFICACIN DE DESEMPEO C de D
x x
X X
X X X X X
Nota: Los requisitos incluidos se presentan de manera de ejemplo y no como nicas opciones.
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4.2.1 Ejemplo de Calificacin de Diseo (CD) PARA CLAR-UV

Configuracin del Instrumento de Medicin (IM) Especificacin Funcional Cromatgrafo de Lquidos con sistema central de control, adquisicin, anlisis y proceso de datos. Cromatgrafo de Lquidos de alta Resolucin Sistema isocrtico y gradiente binario, de suministro de disolventes. Especificacin Proveedor Seleccionado Cromatgrafo de Lquidos con sistema central de control, adquisicin, anlisis y proceso de datos. Sistema isocrtico y gradiente binario, terciario y cuaternario de suministro de disolventes, incluye unidad de gasificacin con helio programable Con programa de validacin del sistema y desarrollo de metodologas Sistema auto inyector para 48 y 96 muestras Volumen de inyeccin de 0,1 100 l con <0,5% de DER en el intervalo de 5-100 l, Calificacin de Diseo (CD)
Cumple ( X )
No cumple ( )
Cumple ( X )
No cumple ( )
Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X )
No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( )
Inyector
Sistema auto inyector para 48 muestras Volumen de inyeccin de 0,1 - 100 l
Detector
Detector espectrofotomtrico Detector espectrofotomtrico UVUV-visible visible programable, de longitud Cumple ( X ) de onda variable Intervalo de operacin de 190-700 Intervalo de operacin de nm, con fuente luminosa de 190 a 700 nm, con fuente deuterio, exactitud de la longitud luminosa de deuterio, Cumple ( X ) de onda de 1 nm , exactitud de la longitud de reproducibilidad de la longitud de onda de 1 nm , ancho de onda de 0,1 nm, ancho de banda banda de 5 nm de 5 nm, deriva de 1,0E-4 UA Intervalo de respuesta Intervalo de respuesta 0,000 1 a 4 Cumple ( X ) 0.0001 a 4 AUFS AUFS Linealidad de 5% a 2,5 UA Linealidad de 5% a 2,5 UA Cumple ( X )
No cumple ( )
No cumple ( )
No cumple ( ) No cumple ( )
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4.2.2 Ejemplo de Calificacin de Instalacin (CI) para CLAR

Magnitud
Especificacin Funcional Resultado Calificacin de Instalacin (CI)
Temperatura ambiental 4 a 40C Humedad Relativa 20 a 80 % sin condensacin Tensin elctrica 100 a 240 Vac Frecuencia 50 a 60 Hz Consumo de poder 145 VA (nominal)
20 a 30 C 35 a 50 % 180 Vac 60 Hz 145 VA
Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X )
No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( )
4.2.3 Ejemplo de Calificacin Operacional (CO) para CLAR-UV

Caracterstica Especificacin Operacional Resultado Calificacin Operacional (CO)
Exactitud de la longitud de onda (Usando un MRC de cafena) Volumen de inyeccin (Mtodo gravimtrico)
272 nm 1.5 nm El error aceptado es de 0,3 % Para 0,25 mL/min de 0.220 a 0,281 mL/min Para 1,0 mL/min de 0,968 a 1,032 mL/min Para 5,0 mL/min de 4,94 a 5,06 mL/min
273 nm 0,25% 0,253 mL/min 0,996 mL/min
Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X )
No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( )
Comprobacin de la velocidad de flujo
4,967 mL/min
Cumple ( X )
4.2.4 Ejemplo de Calificacin de Desempeo (C de D) para CLAR-UV

Especificacin Funcional 360-362 nm 452,7-454,7 nm 535,7-537,7 nm Valor mximo: Resultado 361 nm 453,7 nm 536,7 nm 354 6 cuentas Calificacin de desempeo (C de D) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) Cumple ( X ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( ) No cumple ( )
Espectro del filtro de Holmio
Prueba Oscura
< 1 200 cuentas

Valor mnimo: > 291 6 cuentas
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ANEXO 5 EJEMPLO ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE MEDICIN DE LA FRACCIN DE MASA DE METANOL 1. Objetivo
Estimacin de la incertidumbre de medicin de fraccin de masa de metanol en una disolucin acuosa de etanol. Empleando la tcnica de medicin de cromatografa de gases con detector de ionizacin de flama (CG/DIF) 2. Procedimiento de medicin.
La medicin de fraccin de masa de metanol en matriz de etanol, se realiza a travs de la medicin de las disoluciones de calibracin y de la muestra problema, empleando el mtodo de cuantificacin de estndar interno y la tcnica de medicin de cromatografa de gases con detector de ionizacin de flama (CG/DIF). Las etapas involucradas en la medicin del metanol en una disolucin acuosa de etanol son las siguientes: a) Preparacin del Estndar Interno (EI): Se prepara gravimtricamente una disolucin madre de 2-Pentanol de 0,08 g/mL de concentracin de masa. b) Preparacin de las disoluciones para la curva de calibracin (CC): Las disoluciones de calibracin son preparadas gravimtricamente a partir de compuestos puros, donde la pureza e impurezas son medidas por cromatografa de gases; enseguida se mezclan el EI y las disoluciones de calibracin para realizar las mediciones en CG/DIF y obtener los datos para la construccin de la CC. c) Preparacin de la muestra con el EI: La muestra es preparada gravimtricamente en un vial de 2 mL de capacidad; mezclando 0,9 g de disolucin de calibracin y 0,09 g de EI para obtener una concentracin aproximada de EI de 0,007g/mL. d) Medicin: Inyeccin de 1L en el CG/DIF de cada una de las disoluciones de calibracin y de la muestra.
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El siguiente diagrama es una representacin esquemtica de las etapas de medicin

Preparacin de la disolucin de EI Preparacin de las disoluciones de CC con EI Preparacin de la muestra con EI
Medicin en CG/DIF
Resultado
3.
Mensurando
La concentracin de masa de metanol en la disolucin acuosa de etanol, expresada como g de metanol por cada mL de etanol acuoso, se calcula por medio de la ecuacin de la funcin de calibracin (y = mx +b), sustituyendo las igualdades y = AA/AEI y x = CA/CEI y reordenando la funcin de calibracin; se obtiene lo siguiente:
= A Am A EI m m b C
(1)
EI
m
fd
Donde: AAm AEIm CEIm CAm m b fd 4.
rea bajo la curva (cromatograma) del compuesto de inters en la muestra. rea bajo la curva (cromatograma) del estndar interno en la muestra. Concentracin del estndar interno en la muestra. Concentracin del compuesto de inters en la muestra. pendiente de la regresin lineal Ordenada al origen Factor de dilucin Identificacin de las fuentes de incertidumbre.
Las principales fuentes de incertidumbre que se identifican de acuerdo al modelo matemtico propuesto son las siguientes:
a) Incertidumbre debida al modelo matemtico de la regresin lineal. b) Incertidumbre debida a: i. La concentracin de estndar interno en la muestra ii. Las relaciones de rea de la muestra iii. El factor de dilucin stas se esquematizan en el diagrama de causa-efecto de la figura 1:
Regresin lineal de la CC
Aam AEIm
Repetibilidad
Cm
W de la dis. Total de la muestra u de la balanza u de la balanza W de la muestra tomada W de la dis. total pureza u de la balanza W del EI agregado a la muestra u de la balanza densidad W del EI W de la dis. total
CdmEI
fd
CEIm
Figura 1 5. Cuantificacin de las fuentes de la incertidumbre. 5.1 Incertidumbre debida al modelo matemtico de la regresin lineal. Se construyo una curva de calibracin, Aa/Aei vs Ca/Cei, de 8 niveles de concentracin (concentraciones de 0,002 g/mL a 0,019 g/mL con una concentracin aproximada de EI de 0,007 g/mL en cada uno de los niveles) para la medicin de metanol en una muestra problema. En la tabla 5 se muestran los datos (cocientes de reas y de concentraciones) correspondientes a las disoluciones de calibracin con sus respuestas correspondientes, con los cuales se construye la curva de calibracin. Las disoluciones de calibracin se midieron por triplicado.
Tabla 1
x (Ca/Cei) 2,297 0 2,001 7 1,755 7 1,392 3 1,109 3 0,753 5 0,577 3 0,283 1 y (Aa/Aei-1) 1,260 9 1,116 3 0,992 7 0,779 4 0,618 4 0,419 0 0,320 5 0,158 3 y (Aa/Aei-2) 1,274 0 1,102 4 0,990 0 0,775 1 0,617 1 0,418 7 0,319 6 0,157 4 y (Aa/Aei-3) 1,266 3 1,113 6 0,955 4 0,779 1 0,615 4 0,418 0 0,321 1 0,157 2 y (promedio Aa/Aei) 1,267 1 1,110 7 0,979 4 0,777 9 0,617 0 0,418 6 0,320 4 0,157 6
En la figura 2, se muestra la curva de calibracin obtenida.
CC de metanol
1.4000 1.2000 1.0000 y (Aa/Aei) 0.8000 0.6000 0.4000 0.2000 0.0000 0.0000 y = 0,553 3 x + 0,002 7 R2 = 0,999 9
promedio Aa/Aei Aa/Aei-1 Aa/Aei-2 Aa/Aei-3 Lineal (promedio Aa/Aei)
0.5000
1.0000
1.5000
2.0000
2.5000
x (Ca/Cei)
Figura 1
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El mtodo de mnimos cuadrados utilizada supone que las incertidumbres de los valores de las disoluciones de calibracin, valores del eje de abscisas, son considerablemente ms pequeos que las incertidumbres de sus respuestas, valores del eje de ordenadas, por lo que pueden considerarse despreciables tales incertidumbres. La estimacin de la incertidumbre asociada al valor interpolado empleando la funcin de calibracin, involucra la variabilidad de los valores de las respuestas de los niveles de concentracin de las referencias empleadas en la calibracin, S, el valor de la pendiente, b1, el nmero de rplicas de la muestra, p, el valor predicho o interpolado de la muestra, xpred, y el nmero de puntos de la curva de calibracin, n. La expresin que permite estimar esta incertidumbre se muestra a continuacin [1]:
S2 1 1 + + b12 p n
var(x pred ) =
(x x) ((x ) ( x )
2 pred 2 i i
/n
(2)
Donde: b1 n xi xpred x S p var(xpred) Pendiente de la curva de calibracin Nmero de datos de la calibracin i-simo valor del calibrante x Valor obtenido con la curva de calibracin Media de los n valores x1, x2... de los calibrantes Desviacin estndar de los residuales Nmero de replicas yi de la muestra Varianza del valor obtenido con la curva de calibracin
La incertidumbre asociada al valor interpolado empleando la curva de calibracin es 0,0002 g/mL. 5.2 Estimacin de la incertidumbre estndar combinada debida al EI, reas y factor de dilucin En esta seccin se estima la incertidumbre a las fuentes que se mencionan en el inciso a) de la seccin 7.1. 5.2.1 Estimacin de la incertidumbre de la concentracin del estndar interno en la disolucin madre. 5.2.1.1 Clculo de la concentracin del EI en la disolucin madre. La contraccin del EI en la disolucin madre involucra la siguiente informacin: pureza del 2pentanol, densidad de la disolucin de 2-pentanol en etanol y los datos de pesado del proceso de preparacin.
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a) Pureza. Se realizaron 12 mediciones de 2-pentanol en cromatografa de gases con una columna WAX (polietilenglicol enlazado), obteniendo una pureza de 0,986 6 g/mL con desviacin estndar de 0,000 3 g/mL. b) Densidad. La densidad de la disolucin de 2-pentanol en etanol fue medida con un picnmetro calibrado obtenindose una densidad de 0,925 5 g/mL e incertidumbre estndar de 0,005 4 g/mL. c) Pesado. Se preparo una disolucin de 0,070 8 g/mL de 2-pentanol en etanol; con los siguientes datos de pesado W2-pentanol = 2,084 3 g y Wdisolucin total = 23,537 3 g. La concentracin de la disolucin madre se calcula con los datos de los incisos a, b y c; y es la siguiente:
C dmEI = disolucin total pureza 2 pen tan ol
W2 pen tan ol Wdisolucin total
(3)
Done W2-pentanol es la masa del 2-pentanol sin correccin por pureza. Sustituyendo los valores correspondientes a cada trmino en la ecuacin (3) se obtiene el siguiente valor de concentracin de EI.
CdmEI = (0,925 5 0,986 6 ) 2,084 3 = 0,080 9 g / mL 23,537 3
(4)
5.2.1.2 Incertidumbre estndar combinada de la disolucin madre del EI. La incertidumbre combinada del EI de la disolucin madre se estima sustituyendo los valores relevantes de incertidumbre, correspondientes al modelo de la ecuacin (3), en la expresin correspondiente a la regla 2 de la referencia [1], relativa a la posibilidad de sumar cuadrticamente las incertidumbres relativas si el modelo es multiplicativo:
5,773 5 10 5 2,084 3 + 5,773 5 10 5 uc (Cdm EI ) = 0,080 9 23,537 3 + 0,001 56 0,000 3 0,925 5 + 0,986 6
2 2 2 2
(5)
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u c (C dmEI ) = 1,381 2 10 4
Nota 1. Para la estimacin de la incertidumbre de la masa que se pesa se obtiene, u peso = ubalanza 3 = 0,0001/ 3 = 5,7735 105 , con el certificado de calibracin de la balanza analtica. Nota 2. Para la estimacin de la incertidumbre de la densidad se obtine, udensidad = ues tan dar de la densidad 3 = (0,005 4 / 2) / 3 = 0,001 56 , con el informe de medicin de la densidad del 2-pentanol. 5.2.1.3 Clculo de la concentracin del EI en la muestra. La concentracin del estndar interno en la muestra, se calcula empleando la siguiente informacin: a) Los datos de la seccin 5.2.1.1 relacionados con la preparacin de la disolucin madre de EI. b) Datos de pesado. Se agrego una alcuota de EI a la muestra para obtener una concentracin de EI en la muestra de 0,006 4 g/mL; con los siguientes datos de masa WdmEI = 0,092 0 g y Wmuestra+EI = 1,019 9 g. Sustituyendo (4) y b) en la ecuacin siguiente se obtiene la concentracin del EI en la muestra.
C EI m = C dmEI W dmEI W muestra + EI = (0,080 9 ) 0,092 0 = 0,007 3 g / mL 1,019 9
(6)
5.2.1.4 Estimacin de incertidumbre de la concentracin del EI en la muestra. Esta estimacin considera como modelo matemtico la expresin (6) que involucra: la concentracin del EI en la disolucin madre, la masa de la disolucin madre y la masa de la muestra con EI. Sustituyendo las incertidumbres asociadas a las magnitudes de entrada de (6) en la expresin correspondiente a la regla dos de la referencia [1], relativa a la posibilidad de sumar cuadrticamente las incertidumbres relativas si el modelo es multiplicativo:
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uc (C EI m ) = 0,007 3
5,773 5 10 5 0,092 0 + 5,773 5 10 5 1,381 2 10 4 + 1,019 9 0,080 9

2 2
(7)
uc (CEI m ) = 1,328 0 10 5
5.2.2. Incertidumbre estndar combinada del factor de dilucin. l calculo del factor de dilucin y su incertidumbre involucra los resultados de pesado de la muestra, que es de 0,927 9 g, y la masa de la muestra + la masa del EI, cuya suma resulta 1,019 9g.
fd = W muestra + EI 1,019 9 = = 1,099 1 0,927 9 W muestra
(8)
Para la estimacin de la incertidumbre del factor de dilucin se utiliza la regla 2 de la referencia [1] nuevamente, obtenindose el siguiente resultado:
5,773 5 10 5 5,773 5 10 5 uc ( fd ) = 1,099 1 0,927 9 + 1,019 9
2 2
(9)
uc ( fd ) = 9,245 9 105
5.2.3. Incertidumbre de las relaciones de rea de la muestra Se realizaron tres mediciones independientes de la muestra con estndar interno, en cromatgrafo de gases con detector de ionizacin de flama (CG/DIF), obteniendo las siguientes reas para el metanol y para el 2-pentanol:
Tabla 2
A-1 A-2 A-3
rea de la muestra (metanol) 1 852,540 04 1 867,385 5 2 045,928 83 rea del EI (2-pentanol) 1 885,286 13 1 909,616 7 2 080,2541 5
El resultado del clculo de las relaciones de rea (AA/AEI) correspondientes se muestra en la tabla 3.
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Tabla 3
(AA/AEI)1 (AA/AEI)2 (AA/AEI)3 Promedio Desv. est. Relacin de reas 0.982 6 0.977 9 0.983 5 0.981 3 0.003 0
Finalmente la incertidumbre asociada a la medicin de la muestra por triplicado se estima a partir de la desviacin estndar experimental de la media:
u relacin reas = srelacin reas n = 0,003 0 = 0,001 7 3
(10)
Esta incertidumbre expresada en unidades de concentracin es:

u relacin de reas = 0,001 7 0,007 3 = 1,241x10 5 g / mL
(11)
Es importante mencionar que la estimacin de la incertidumbre del valor interpolado no incluye la variabilidad debida a la repetibilidad de la relacin de reas correspondientes a la muestra y EI.
5.3
Clculo de la concentracin del metanol en la muestra.
La concentracin del metanol en la muestra se calcula con la ecuacin descrita en el punto 3 de este ejemplo, como sigue:
C Am = c Am (estimada) C EI m fd + 1
(0,981 3 0,002 7 ) 0,007 3 1,099 1 + 1 C Am = 0,553 3 C A = C + 1 A

m m
(12)
C Am = 0,014 2 g / mL
CAm cAm(estimada) CAm CEIm fd 1
Concentracin de masa del analito en la muestra Concentracin de masa estimada con la curva de calibracin Concentracin de masa corregida del analito en la muestra Concentracin de masa de EI en la muestra Factor de dilucin Efecto de la relacin de reas: rea muestra / rea EI
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5.4
Incertidumbre asociada a la concentracin de la muestra.
Las incertidumbres asociadas a la concentracin (corregida por de factor de dilucin y EI) del analito en la muestra (modelo de regresin, factor de dilucin, EI en la muestra y relacin de reas) se combinan empleando la ecuacin 11 y la regla 2 de la referencia [1], como se muestra a continuacin:
) 2 u (C 2 u(C (modeloderegre )) uc ( fd ) c EI m sin Am + + u C = C fd A A C C EI Am m m m

uc CA = u 2 (C ) + u 2 1 Am m
(13)
(14)
sustituyendo los resultados valores correspondientes en la ecuacin 13 se obtiene el valor de incertidumbre estndar combinada siguiente:
uc (muestra ) = 0,000 2 g / mL
(15)
En la tabla 4 y figura 3 se muestra el resumen correspondiente a la contribucin de incertidumbre en la estimacin del valor de la concentracin corregida de analito en la muestra. Tabla 4
Magnitud CAm(regresi n lineal) CEIm fd CAm vi 0,0142 0,0073 1,09919 0,0142 ui 0,0002 1,33E-05 9,25E-05 0,0002 Tipo de distribucin Normal Normal Normal ci 1 ciui 0,0002 (ciui)
2
4,00E-08 6,67E-10 1,43E-12
1,945205479 2,58323E-05 0,01292 1,19444E-06
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fd
CEIm
CAm(regresin lineal)
0,00005
0,0001
0,00015
0,0002
0,00025
Figura 3 En la tabla 5 y figura 4 se muestran muestra el resumen correspondiente a las contribuciones de incertidumbre en la estimacin del valor de la concentracin de masa corregida de analito en la muestra considerando la incertidumbre asociada a la variabilidad de las relaciones de rea experimentales, correspondientes a la muestra y al EI. Tabla 5
Magnitud CAm 1 CAm vi 0,0142 0 0,0142 ui 0,0002
1,241E-05
Tipo de distribucin normal Normal
ci 1 1
ciui 2,0166E-04 1,2410E-05
(ciui)
4,07E-08 1,54E-10
0,00020
d1
CAm
0,00000
0,00005
0,00010
0,00015
0,00020
0,00025
Figura 4
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5.5 Incertidumbre expandida

La incertidumbre expandida es estimada con un factor de cobertura igual a 2, que representa un intervalo de confianza de aproximadamente 95%, como sigue:
U exp = u c 2 = 0,000 2 2 g / mL = 0,000 5 g / mL
6.0
Referencias
[1] Eurachem-Citac Guide Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement 2nd. Edition, 2000.pginas 26, 74,75 y 106.
ANEXO 6 BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO (BPL)

A continuacin se enlistan algunas de las BPL para mediciones CG-CLAR, considerndolas como medidas preventivas a efectuar con el fin de minimizar la obtencin de resultados de operacin o de mediciones incorrectas, las actividades realizadas deben ser documentadas con el fin de evidenciar su cumplimiento: A) Suministro de Fase Mvil: A.1) CG - Al finalizar las labores diarias deben cerrarse las vlvulas de los tanques de suministro, y los manmetros. - Debe cuidarse no agotar al 100% el contenido de los tanques, siguiendo las recomendaciones del proveedor. - Utilizar pureza de gases adecuada al Instrumento de Medicin (IM) y a la aplicacin. A.2) CLAR - Todos los disolventes a usarse como eluentes deben filtrarse a travs de filtros de 0,45 m antes de su uso. - En el caso de disolventes a utilizarse con detectores UV-Vis, debe de verificarse su absorbancia a las longitudes de onda de la aplicacin. - Se recomienda degasificar los disolventes empleados, mediante agitacin, sonicacin, vaco, desplazamiento con helio, etc. B) Fase estacionaria (Columnas): B.0) CG y CLAR - Antes de su uso, el laboratorio debe de comprobar y documentar, por su propio personal, el desempeo de las columnas, a condiciones del fabricante. - Peridicamente es necesario limpiar las columnas de compuestos altamente retenidos, mediante calentamiento a temperatura lmite de operacin (CG) y / lavado con disolventes apropiados (CLAR).
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- Para mejor repetibilidad de resultados es conveniente marcar el extremo de la columna conectado al suministro de fase mvil y siempre utilizarla en el mismo sentido. B.1) CG - En lo posible utilizar precolumnas. - No sobre calentar las columnas. Usar Temperaturas lmites de operacin, tanto isotrmico y como con rampa, de acuerdo con los datos del proveedor. B.2) CLAR - Usar precolumna. - No sobre presurizar las columnas. Revisar y acatar instrucciones del proveedor. C) Mezcla Problema (MP) C.0) CG y CLAR - Con el fin de evitar contaminaciones del Instrumento de Medicin (IM) y para obtener mejor resolucin cromatogrfica, la concentracin de la MP [no del analito(s) de inters] debe ser tan baja como lo permita la sensibilidad del IM a los analitos de inters. Limpiando las muestras o tomando cantidades pequeas de muestra - Hay que poner cuidado especial en las fechas de caducidad de las MP, as como mantenerse en condiciones adecuadas de conservacin para minimizar su deterioro fsico /qumico. C.1) CG - En lo posible, debe evitarse introducir MP con alto contenido de no-voltiles por que se adhieren al puerto de inyeccin y a la columna, que pueden generar picos fantasma, en caso contrario darle el mantenimiento adecuado y oportuno al inyector, columna y detector. - En CG Gas-Lquido debe procurarse inyectar el menor volumen posible con el fin de disminuir el efecto del disolvente en el proceso de particin cromatogrfica. C.2) CLAR - Debe comprobarse, antes de introducir la MP al IM, su compatibilidad con la fase mvil, para prevenir problemas de sobre presiones, o formacin de emulsiones. - La MP debe de filtrarse a travs de filtros de 10 m antes de introducirla al IM. D) Instrumentos de Medicin (IM) D.0) CG y CLAR - Las condiciones ambientales como temperatura y humedad deben de ser registradas y controladas tanto para el correcto desempeo de los IM como para cuidar la integridad de disolventes y muestras. Preferentemente de 18 a 28 oC y de 45 a 65% de Humedad Relativa. - Antes de su uso en una aplicacin particular el laboratorio deber comprobar y documentar, por su propio personal, las pruebas que el proveedor realiza como parte de la instalacin y entrega del IM. Los resultados de dichas pruebas, junto con sus criterios de aceptacin y rechazo se utilizarn para evidenciar peridicamente, durante el uso rutinario del IM, su buen funcionamiento.
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- El personal del laboratorio deber leer y comprender los Manuales de operacin del IM, incluyendo los correspondientes al Software y Hardware proporcionados por el proveedor y evidenciar su entendimiento y aplicacin, previo al anlisis y reporte de MP. - Deber establecerse y dar cumplimiento a un programa de mantenimiento preventivo, tanto interno (reemplazo de consumibles y limpieza bsica) como externo dado por personal calificado y autorizado. - Ya optimizadas las condiciones de operacin del IM deber comprobarse su completo seguimiento con anterioridad a cualquier aplicacin especfica. - En forma programada, cada vez que se reinicie el uso de una aplicacin y por lote analtico, que no contenga ms de 20 MP se deber comprobar contra especificaciones lo siguiente. a) Limpieza del Proceso Analtico. Mediante el uso de blancos. b) Continuidad de la relacin Respuesta contra Concentracin. A travs de Calibracin Continua contra Calibracin Inicial del IM. c) Estabilidad del Proceso Analtico. Mediante el uso de Muestras de Control de Calidad (MCC) sometidas al mismo proceso que las MP. - Deber asegurarse la trazabilidad de las mediciones mediante el uso adecuado de MR MRC, cuidando su integridad fsica/qumica, identificacin, conservacin y caducidad. - Al utilizar sistemas de computo para la recoleccin de resultados de una medicin se deber restringirse adecuadamente el acceso a los mismos por personal no autorizado.
ANEXO 7 INFORMACIN ADICIONAL SOBRE LAS TCNICAS DE CG y CLAR Cromatografa

Los detectores pueden ser clasificados en:
Detectores segn su Grado de Selectividad :

o o
Universales. Responde a la mayora de los solutos que pasan por l. Especficos Selectivos. Exhibe una gran respuesta a un grupo particular de substancias con un mnimo de respuesta a otras.
Detectores Destructivos y No destructivos. Esta clasificacin, se refiere a s la muestra es destruida o no, en el proceso de medicin. Detectores segn su Modo de Respuesta:
o
Dependientes del Flujo Msico. Producen una seal que es proporcional a la cantidad de soluto que pasa a travs de l en la unidad de tiempo pero es independiente del volumen de la fase mvil requerida para la elusin. Dependiente de la Concentracin. Dan una seal proporcional a la cantidad de soluto por unidad de volumen de fase mvil que pasa a travs de l.
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Detectores segn el proceso de deteccin, Ionizacin, ptico-espectroscpico, Electroqumico, etc.

Sensibilidad. Propiedad de un detector para convertir en respuesta la cantidad de muestra en una seal elctrica medible. Lmite de Deteccin. Es la cantidad mnima de una sustancia que produce una seal que es equivalente al doble del nivel de ruido. Ruido. Es cuantificado por el promedio de la amplitud pico-pico de la seal. El significado de conocer el nivel de ruido de un detector es un factor determinante en la determinacin de la cantidad mnima detectable y el lmite inferior del intervalo lineal. Linealidad. Intervalo de masa concentracin de muestra sobre el cual el detector mantiene una sensibilidad constante sin una desviacin arbitraria. El significado prctico de la linealidad del detector es el que le indica al analista la concentracin para la cual el detector es confiable. Hay dos lmites en la curva de linealidad:
o o
Tambin aplican algunas de las siguientes caractersticas

El lmite de concentracin inferior, que es dado por el lmite de deteccin y, El lmite Superior, definido por un porcentaje de desviacin arbitrario de la curva de linealidad, normalmente se toma un 5% de desviacin.
Rango Lineal Dinmico. Intervalo sobre el cual la sensibilidad del detector es constante.
Cromatografa de Gases (CG)

La Cromatografa de Gases es un tipo de cromatografa instrumental aplicable a compuestos orgnicos voltiles y semivoltiles trmicamente estables, en la qu la fase mvil es un gas inerte y la fase estacionaria puede ser: * Un lquido soportado en un slido (Cromatografa Gas/Liquido-CGL) donde el proceso de separacin es mediante un proceso de particin. * Un slido (Cromatografa Gas/Slido-CGS), donde el proceso de separacin es mediante un proceso de adsorcin. En CGL la duracin y eficiencia de un anlisis es funcin de la volatilidad de cada componente de la mezcla a ser separada y analizada y por consiguiente de su presin de vapor y de su solubilidad en la fase lquida estacionaria. La eficiencia de la separacin y duracin del anlisis dependen tanto de las propiedades qumicas de la fase estacionaria (naturaleza, composicin, propiedades fsicas, etc.) como de sus condiciones de contacto fsico (longitud, espesor de capa, velocidad lineal, entre otros.) As como del gas inerte utilizado como fase mvil (helio, nitrgeno e hidrgeno principalmente) y de la temperatura a la cul se lleva a cabo el anlisis (isotrmica programada).
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La configuracin instrumental bsica consiste de un suministro de fase mvil, un puerto de inyeccin, una columna de separacin conteniendo la fase estacionaria, un detector y un sistema de registro y manejo de datos. En caso de muestras problema en estado lquido, la muestra es introducida a la columna por medio de una jeringa y a travs de un sello de hule (septum) situado en el puerto de inyeccin, el cul es mantenido a una temperatura mayor que el punto de ebullicin del componente menos voltil en la mezcla de muestra, con el fin de asegurar la volatilidad de todos sus componentes. Existen diversos sistemas empleados para la introduccin de la muestra al CG, en primera instancia pueden ser manuales automatizados y dependiendo tambin del estado fsico de la muestra ya sea slido en disolucin, en estado lquido, vapor o bien un gas, se debe seleccionar el ms adecuado, para minimizar perdidas, el medio de introduccin de la muestra puede ser una microjeringa; jeringa vlvula de muestreo. La columna de separacin es mantenida bajo control de temperatura con el objeto de considerar la separacin de compuestos con un amplio intervalo de puntos de ebullicin, desde una temperatura inicialmente baja del horno y un incremento posterior de la misma a travs del tiempo con el fin de que eluyan los componentes de mayor punto de ebullicin. El detector se selecciona dependiendo de la naturaleza de los analitos que se desea medir, as como de la sensibilidad y selectividad requerida. Entre los detectores ms comnmente utilizados se encuentran:
Detector de Conductividad Trmica. Mide la diferencia de conductividad trmica del gas portador, ocasionada por la presencia de substancias eludidas. Responde a todo excepto al gas portador y es considerado el detector universal. Detector de Ionizacin de Flama. Basado en la medida de las variaciones de la corriente de ionizacin en una flama oxgeno-hidrgeno debido a la presencia de substancias eludas. Responde a casi todos los compuestos orgnicos y es considerado el detector especfico para compuestos orgnicos. Detector de Captura de Electrones. Basado en la electronegatividad de las substancias eludas, y su habilidad para formar iones negativos por la captura de electrones libres. Responde a un rango limitado de compuestos, principalmente a halocarburos y es utilizado para el anlisis de plaguicidas y herbicidas a nivel de trazas. Detector de fotoionizacin. Basado en la ionizacin selectiva de ciertos compuestos que eluyen de la columna por una lmpara que produce radiacin en el espectro UV (tpicamente a 10.0 eV), los iones producidos son colectados y el flujo de corriente resultante es medido y amplificado. Frecuentemente se emplea para el anlisis de compuestos aromticos (BTEX, Gasolina, Hidrocarburos insaturados, aromticos y poliaromticos).,
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Detector de Nitrgeno-Fsforo. Tambin llamado detector de Ionizacin de Flama Alcalina. Responde a compuestos que tengan nitrgeno fsforo en su molcula y es utilizado en anlisis farmacuticos y ambientales. Detector de Fotometra de Flama. Basada en la medida de la intensidad de la emisin molecular de la fluorescencia de hetero-tomos en las molculas orgnicas. Responde a compuestos con azufre fsforo y es utilizado en anlisis ambientales y bioqumicos.
Detector de Espectrometra de Masas. Es un detector que adems de informacin cuantitativa proporciona informacin cualitativa, basada en la identificacin del compuesto a travs de su espectro caracterstico de fragmentacin msica. Responde a todo excepto al gas portador y es utilizado en casi todo tipo de anlisis. Algunas de las especificaciones de CG se muestran en la siguiente tabla, cabe mencionar que estas variaran de acuerdo al fabricante.
Nombre
Conductividad Trmica Ionizacin de Flama
Ruido
< 0.057 33 unidades (25 uV/unidad)
Lmite de Deteccin
400 pg propano/mL usando He como gas acarreador 5 pg carbn/seg como propano usando N2 como gas acarreador y un quemador con d.i. de 0.29 mm 0.008 pg/seg de lindano 2 pg 0.4 pg N/seg; 0.2 pg/seg con una mezcla de azobenceno/malatin
Rango Lineal Dinmico

105 (+ 5%) 107 (+ 10%) usando N2 como gas acarreador y un quemador con di de 0.29 mm 5 x 104 con lindano 107
Selectividad
< 0.038 2 pA
Captura de electrones Fotoionizacin NitrgenoFsforo
< 0.057 33 unidades (5 Hz/unidad)
10 a 1 g Cinsaturado ./ Csaturado
5
< 0.076 5 pA
10 N; 10 P
25,000 a 1 gN/gC, 75,000 a 1 gP/gC con una mezcla de azobenceno/malation 105 gS/gC, 106 gP/gC
Fotomtrico de Flama
< 5 unidades (150 pA/unidad)
20 pg S/seg, 0.9 pg P/seg con mezcla de dodecanetiol / tributylfosfato Para Ionizacin Electrnica: (IE) Modo Barrido : 1 pg Modo Ion Selectivo: 20 fg de Octafluoronaftaleno inyectado en la columna. (*)
103 S; 106 P con mezcla de dodecanetiol / tributylfosfato
Selectivo de Masas (Espectrmetro de Masas)
106
(*) Sensibilidad en barrido con IE en cudrupolo: La alcuota de 1 L de una disolucin de 1 pg/L de octafluronaftaleno en isooctano con una inyeccin splitless pulsado; en una columna 0.25 mm x 30 m x 0.25 m HP-5MS o equivalente,barrido de 2.9 scans/seg, intervalo de 50-300 amudar una relacin seal/ruido RMS para la seal extrada del in en m/z 272.0 de al menos 20:1
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Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (CLAR)

La Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin es un tipo de cromatografa instrumental aplicable a compuestos orgnicos semivoltiles, no voltiles y a iones inorgnicos en solucin, en la cul la fase mvil (eluente) es un lquido y la fase estacionaria puede ser un lquido (Cromatografa Liquido/Liquido-CLL) en la cul el proceso de separacin es mediante un proceso de particin un slido (Cromatografa Lquido/Slido-CLS), en la cul el proceso de separacin se lleva a cabo por adsorcin, intercambio inico y exclusin por tamao. Hay muchas similitudes entre una configuracin instrumental CLAR y una CG: Primero. La fase estacionaria consiste de pequeas partculas slidas contenidas en un tubo llamado columna; Segundo. Hay un dispositivo de inyeccin a la entrada de la columna a travs del cual la mezcla problema es introducida dentro del flujo de la fase mvil; Tercero. Hay un detector a la salida de la columna que genera una seal cada vez que eluye un analito transportado en la fase mvil. Cuarto. La seal electrnica es enviada a un sistema de manejo de informacin donde cada analito separado genera una respuesta en forma grfica. La configuracin instrumental bsica consiste de (1) Suministro de fase mvil (Eluente), conformado por una bomba de alta presin con recipientes para los disolventes y capacidad para un cambio gradual de composicin de la fase mvil con el tiempo, (2) Sistema de inyeccin para introducir la mezcla problema dentro de la lnea de alta presin; (3) Columna, la cul es un tubo de acero inoxidable conteniendo la fase estacionaria; (4), un detector y (5) un sistema de registro y manejo de datos. Las bombas deben proveer una presin alta, estable, sin pulsaciones y deben ser programables para variar la composicin del disolvente durante el transcurso de la separacin. La muestra lquida es introducida en un dispositivo contenedor de la muestra en el inyector (loop), mediante una jeringa. Cuando el dispositivo es llenado, el inyector introduce la muestra dentro de la corriente del disolvente, la cul pasa a travs de la columna donde la mezcla es separada de acuerdo a los principios de separacin seleccionados (como cromatografa de particin, de adsorcin, de fases estacionarias quirales, de cromatografa inica, entre otros.). Dependiendo de la sensibilidad y selectividad requerida se pueden utilizar varios tipos de detectores. Entre los detectores ms comnmente utilizados se encuentran:
Detector de ndice de Refraccin. Mide el ndice de refraccin del efluente, ocasionada por la presencia de substancias eludidas. Por ser su respuesta diferencial responde a todo excepto al efluente, siendo utilizado para analizar sustancias que no absorben en el UV como carbohidratos, lpidos y polmeros, entre otros.
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Detector de UV-Visible. Es el ms ampliamente utilizado, su respuesta se fundamenta en la absorbancia que presentan la mayora de los compuestos orgnicos a una longitud de onda determinada. Se utiliza para todas aquellas sustancias que tienen uno o ms dobles enlaces y los compuestos con electrones no enlazados y no compartidos, como por ejemplo, todas las olefinas, todos los aromticos y los compuestos que contienen grupos carbonilo, tiocarbonilo, nitroso y azo. Detector de Fluorescencia. Basado en la propiedad que tienen algunos compuestos de excitarse a una longitud de onda caracterstica y emitir radiacin a una longitud de onda diferente. Casi todos los compuestos fluorescentes absorben por encima de los 400 nm. Los compuestos fluorescentes tpicos son sustancias aromticas polinucleares, los esteroides, los pigmentos de las plantas, las vitaminas, los alcaloides, las catecolaminas y los sistemas que usan reactivos reastreadores , tales como la fluorescamina el oftaldialdehido (OPA) para el anlisis de aminocidos. Detector Electroqumico. Incluye tanto detectores amperomtricos como coulomtricos, siendo los ltimos ms sensibles y selectivos ya que reaccionan con el 100% del analito vs el 10% mximo del amperomtrico. Entre los compuestos tpicos que se analizan se incluyen las aminas aromticas y sus derivados (hidroxilaminas, amidas, quinoniminas), acidos ascrbico y rico, cistena, y penicilina, bencidina, cido flico, vitamina b6, y otros.
Algunas de las especificaciones ms importantes para CLAR se muestran en la siguiente tabla, estas variaran de acuerdo al fabricante.
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Nombre
Ruido
Deriva
Lmite de Deteccin
Linealidad
Exactitud de Longitud de Onda
ndice de Refraccin
+ 2.5 x 10 UIR (*), a tiempo de respuesta de 4s, 35oC, 1 mL/min H2O
-9
200 x 10-9 UIR/h (*), a tiempo de respuesta de 4s, 35oC, 1 mL/min H2O 2 x 10 UA/h a 254 nm (**)
-3
UV-Visible Con Arreglo de Diodos
+ 1.0 x 10 UA a 254 nm y a 750 nm (**)
-5
2 UA lmite superior
+ 1 nm autocalibrado con lneas de deuterio y filtro de xido de Holmio. + 1 nm autocalibrado con lneas de deuterio y filtro de xido de Holmio. + 3 nm
UV-Visible Con Longitud de Onda Variable
+ 1.0 x 10 UA a 254 nm y a 750 nm (**)
-5
2 x 10 UA/h a 254 nm (**) 10 fg de antraceno, ex: 250 nm, em: 400 nm
-3
2 UA lmite superior
Fluorescencia 5 pA pico a pico (10 MOhms, 2 uF) [Detector Coulomtrico]
Electroqumico
(*) en acuerdo a ASTM E-1303-95 (**) en acuerdo a ASTM E1657-96
Al igual que en CG, el detector selectivo de masas tambin puede acoplarse a un CLAR para proveer informacin estructural que ayude a la identificacin de algn analito de inters.
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ORGANIZACIN DE LAS NACIONES UNIDAS PARA LA AGRICULTURA Y LA ALIMENTACIN (FAO)
Proyecto TCP/RLA/3013 (A) Desarrollo de un sistema integral de aseguramiento de calidad para laboratorios de anlisis de alimentos en Amrica del Sur
TALLER SUBREGIONAL SOBRE ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIN DE METODOLOGA PARA ANLISIS QUMICOS
Bogot, Colombia
28 de noviembre al 2 de diciembre de 2005
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NDICE I. II.
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INTRODUCCIN............................................................................................................. 4 OBJETIVOS...................................................................................................................... 5
III. PARTICIPANTES............................................................................................................. 6 IV. METODOLOGA Y TEMAS DESARROLLADOS........................................................ 6 A) Definiciones y principios del sistema de aseguramiento de calidad en el laboratorio. Buenas prcticas de laboratorio (BPL) y norma ISO/IEC/17025................... 6 B) Principios de buenas prcticas de laboratorio (BPL) de la OECD............................... 8 C) Norma ISO/ IEC 17025............................................................................................... 13 V. VALIDACIN DE METODOS QUMICOS.................................................................. 18 A) Objetivo......................................................................................................................... 18 B) Validacin del mtodo................................................................................................... 19 C) Criterios.......................................................................................................................... 19 D) Diseo............................................................................................................................ 20 E) Ejecucin........................................................................................................................ 21 F) Informe........................................................................................................................... 21 G) Requisitos a cumplir en el proceso de validacin.......................................................... 22 H) Acreditacin y certificacin........................................................................................... 28 VI. ORGANIZACIONES INTERNACIONALES DE COOPERACIN PARA LA ACREDITACIN............................................................................................................ 28
VII. ASEGURAMIENTO DE CALIDAD y ACREDITACIN DE LOS LABORA TORIOS DE ANLISIS DE ALIMENTOS EN AMRICA DEL SUR........................... 30 A) Estado actual del aseguramiento de calidad y acreditacin de los laboratorios de anlisis de alimentos en Amrica del Sur............................................................... 30 B) Planes de Accin nacionales para fortalecer el sistema del aseguramiento de calidad en los laboratorios de anlisis de alimentos en Amrica del Sur................................. 42 VIII. PLAN DE ACCION SUBREGIONAL............................................................................. 43 IX. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES................................................................... 48 ANEXOS 1. Listado de participantes........................................................................................................ 50 2. Programa.............................................................................................................................. 54 3. Laboratorios participantes.................................................................................................... 58
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4. Estado de implementacin y cumplimiento de los requisitos de gestin y tcnicos de la norma ISO/ IEC 17025 en los 36 laboratorios participantes.............................................. 60 5. Documentos solicitados por la norma ISO/IEC 17025 y estado de avance en la implementacin en los 36 laboratorios participantes.......................................................... 65 6. Listado de documentos entregados..................................................................................... 66 7. Sitios web de inters y bibliografa..................................................................................... 68 8. Evaluacin del taller............................................................................................................ 79
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I.
INTRODUCCIN
En los pases de Amrica Latina y el Caribe la exportacin de productos bsicos y alimentos constituye una de las principales fuentes de divisas. Por lo que es necesario fortalecer los sistemas nacionales de control de alimentos a fin de satisfacer las exigencias de inocuidad y calidad tanto para el consumo interno como para la exportacin. Los desafos externos en materia de exigencias analticas obligan a trabajar con la excelencia y calidad que los mercados nacionales e internacionales exigen. La interconexin de los laboratorios de calidad, a escala regional e interregional, con objeto de efectuar un seguimiento continuo de la inocuidad alimentaria, desempear un importante papel en la prevencin de posibles riesgos para la salud de la poblacin. Por ello los laboratorios de anlisis de alimentos deben cumplir con las normas de gestin de calidad de laboratorios de ensayo, base de los procesos de reconocimiento mutuo en los intercambios comerciales, dado que emiten protocolos de ensayo que son utilizados para respaldar las certificaciones destinadas a la comercializacin de productos en el mercado interno, la importacin y la exportacin. Cuando surge una emergencia relacionada con la inocuidad de los alimentos, y con el fin de disminuir los posibles efectos perjudiciales para la salud pblica, se requiere que dicha comunicacin entre los pases se lleve a cabo al nivel institucional apropiado. Dicha emergencia puede incluir entre otras: contaminacin biolgica/microbiolgica, contaminacin qumica (plaguicidas, medicamentos, substancias qumicas industriales, contaminantes ambientales), y contaminacin fsica (cuerpos extraos). La Administracin de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA), durante el primer semestre de 2004, ha retenido 451 importaciones provenientes de pases de Amrica del Sur, de las cuales 182 han sido rechazadas por motivos de inocuidad. En caso de disparidad, litigio o controversias sobre resultados de ensayos emitidos por los laboratorios tienen prioridad los realizados con mtodos validados y provenientes de laboratorios con ensayos acreditados. Por ello, cada laboratorio debe confirmar que puede aplicar correctamente los mtodos normalizados, previo a su uso en ensayos y cualquier variacin en el mtodo normalizado. Esto contempla la satisfaccin de las necesidades del cliente y la adecuacin para realizar los ensayos previstos. En este contexto, los pases de la regin establecieron en 1997 la Red Interamericana de Laboratorios de Anlisis de Alimentos (RILAA) que tiene como misin promover y asegurar la inocuidad y calidad de los alimentos, a fin de prevenir enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA), proteger la salud del consumidor y facilitar el comercio internacional, promoviendo y fortaleciendo el desarrollo e interaccin de los laboratorios analticos dentro del marco de programas nacionales integrados de proteccin de los alimentos <http://www.panalimentos.org/rilaa/flash/rilaa.asp>. En la actualidad 58 laboratorios pertenecientes a 29 pases de Amrica Latina y el Caribe, Canad y E.E.U.U. son miembros de la RILAA. La FAO y el Instituto Panamericano de Proteccin de Alimentos y Zoonosis (INPPAZ/ OPS) actan como secretara ex oficio de la RILAA. A nivel internacional desde junio de 1997, la Comisin del Codex Alimentarius recomienda que los laboratorios responsables del control de exportacin e importacin de alimentos cumplan
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con los requisitos de la norma ISO/IEC 17025/1999 y sean acreditados por un organismo competente. Por otra parte el Comit del Codex de Mtodos de Anlisis y Muestreo (CX/MAS) slo recomienda mtodos acreditados con la norma ISO/IEC 17025/1999. Desde junio de 1999, la Directiva 93/99 EEC de la Unin Europea establece que los laboratorios centrales de control de alimentos debern acreditarse con normas internacionalmente reconocidas como la ISO/IEC 17025/1999, participar en programas de proficiencia y emplear mtodos validados. La encuesta realizada por la RILAA en el ao 2002 ha evidenciado problemas en la implementacin de programas de aseguramiento de calidad y un escaso nmero de laboratorios acreditados. Esta situacin determina que los pases de Amrica Latina y el Caribe tengan dificultades para que los productos alimentarios cumplan con las normas internacionales que exigen certificacin y resultados de ensayo con reconocimiento internacional. En cuanto a la acreditacin de laboratorio, de los 10 pases participantes en este proyecto y miembros de la RILAA, slo 3 de un total de 23 laboratorios estn acreditados por la norma ISO/ IEC 17025/1999. Por los motivos expuestos, el fortalecimiento de los laboratorios desde el punto de vista de gestin de calidad se ha convertido en una prioridad para los pases de la regin para poder contar con el reconocimiento mutuo. Sobre la base de estos antecedentes la FAO ha aprobado en noviembre de 2004 el proyecto TCP/RLA/3013 (A) con la finalidad, entre otras, de proveer apoyo tcnico en la actualizacin del aseguramiento de la calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos, basado en la norma ISO/ IEC 17025/ 1999 y en las buenas prcticas de laboratorio, a Argentina, Bolivia, Brasil, Chile, Colombia, Ecuador, Paraguay, Per, Uruguay y Venezuela, para optar a la acreditacin de laboratorios de anlisis qumico y as demostrar la capacidad analtica y la validez de los resultados emitidos. En cumplimiento a lo estipulado en el documento de Proyecto TCP/RLA/3013 (A) se ha organizado el taller sobre aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en laboratorios de anlisis de alimentos en Amrica del Sur, con el apoyo del Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos (INVIMA) de Colombia. II. OBJETIVOS
Los objetivos del taller son los siguientes: 1. Actualizar y profundizar los conocimientos en aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en laboratorios de anlisis de alimentos. 2. Analizar el estado actual del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en los laboratorios de anlisis de alimentos, en los pases de Amrica del Sur y las propuestas de los planes nacionales de accin para su optimizacin. 3. Revisar y aprobar el plan de accin subregional para el fortalecimiento del sistema de aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en los laboratorios de alimentos de los pases de Amrica del Sur.
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4. Intercambiar experiencias y compartir conocimientos especializados sobre aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos entre los pases miembros de la Red Interamericana de Laboratorio de Anlisis de Alimentos (RILAA). III. PARTICIPANTES
De acuerdo a lo establecido en el documento del Proyecto TCP/RLA/3013 (A), para cumplir con los objetivos del taller participarn con fondos del proyecto dos participantes por pas con conocimientos y experiencia en aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos. Asisti un un tercer participante de Brasil y ocho participantes de colombia con financiamiento de sus respectivas instituciones y que reunan los requisitos mencionados anteriormente. El listado de participantes se presenta en el anexo N 1. IV. METODOLOGA Y TEMAS DESARROLLADOS
El taller fuer organizado por la FAO con el apoyo del Laboratorio de Alimentos y Bebidas Alcohlicas, del Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos (INVIMA). Instituto Nacional de Salud de Colombia y se realiz en la Ciudad de Bogot, Colombia. del 28 de noviembre al 2 de diciembre del 2005. El taller se desarroll de acuerdo al programa (Anexo N 2) a travs de conferencias, trabajos de grupo y discusiones. En la primera parte se revisaron los requisitos relativos a la gestin y requisitos tcnicos de la Norma ISO/IEC 17025/ 1999 comparndolos con los requerimientos de las buenas prcticas de laboratorio. En la segunda parte se desarrollaron temas de validacin de metodologa analtica teniendo en cuenta si se trabaja con mtodos normalizados, dentro o no de su alcance, mtodos desarrollados en el laboratorio, criterios segn categoras, si se aplican para la cuantificacin de materia prima o anlisis de residuos en alimentos. Adems se presentaron temas relacionados con la capacitacin del personal y competencia analtica, instalaciones y condiciones ambientales, equipos, verificaciones, patrones y materiales de referencia, rastreabilidad de las mediciones, muestreo, registros, aseguramiento de la calidad de los resultados y requisitos de informe. En la tercera parte se present el resumen del documento Estado actual del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para laboratorios de qumica en Amrica del Sur y la Propuesta del plan de accin subregional para el fortalecimiento del aseguramiento de calidad y validacin de la metodologa para anlisis qumicos en los laboratorios de alimentos de Amrica del Sur. La propuesta de plan de accin subregional se revis en trabajo de grupo y se aprob en sesin plenaria. La cuarta parte del taller se destin a elaborar y aprobar las conclusiones y recomendaciones del taller.
A) Definiciones y Principios del Sistema de Aseguramiento de Calidad en el Laboratorio. Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL) y Norma ISO/ IEC 17025 Buenas Prcticas de Laboratorio (GLP o BPL): Las buenas prcticas de laboratorio (BPL) constituyen un sistema de garanta de calidad relativo al modo de organizacin de los estudios de seguridad no clnicos referentes a la salud y al medio ambiente y, asimismo, acerca de las
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condiciones en que estos estudios se planifican, se ejecutan, se controlan, se registran, se archivan y se difunden. Calidad: Son todas las cualidades y caractersticas de un producto o servicio que tienen capacidad para satisfacer los requisitos establecidos. [ISO 8402: 1994]. Aseguramiento de Calidad: Son todas las actividades planificadas y sistemticas puestas en marcha dentro del sistema de calidad, y demostradas como necesarias, para brindar la confianza adecuada de que una entidad cumplir con los requisitos de calidad. [ISO 8402: 1994] Control de Calidad: Tcnicas y actividades operativas que se usan para cumplir con los requisitos de calidad. [ISO 8402: 1994] Control Interno de Calidad: Es una serie de procedimientos que lleva a cabo el personal de un laboratorio para el monitoreo continuo de las operaciones y los resultados de las medidas, a fin de decidir si los resultados son lo suficientemente confiables para ser liberados. [IUPAC Orange Book] Gestin de la Calidad: Actividades coordinadas para dirigir y controlar una organizacin en lo relativo a la calidad. . [ISO 9000/2000] Nota: La direccin y control, en lo relativo a la calidad, generalmente incluye el establecimiento de la poltica de la calidad y los objetivos de la calidad, la planificacin de la calidad, el control de la calidad, el aseguramiento de la calidad y la mejora de la calidad. Gestin de la Calidad en el Laboratorio: La calidad se crea, administra y asegura a travs de un sistema de calidad. Todo sistema de calidad debe estar diseado de acuerdo al tipo de organizacin, a sus objetivos, necesidades, a su produccin y servicios y a la relacin con sus clientes y proveedores. Sistema de Gestin de la Calidad: Sistema de gestin para dirigir y controlar una organizacin con respecto a la calidad. [ISO 9000/2000] Validacin: Confirmar por medio de examen y provisin de evidencia objetiva que se cumplen los requisitos particulares para un uso propuesto especfico. [ISO 8402:1994] Verificacin: Confirmar por medio de examen y aporte de evidencia objetiva que se cumplen los requisitos especficos. [VIM 1993] Evolucin de la Calidad Aos Antes 1930 1930-1950 19501960 19601990 1990-2000 2000-2005 Futuro Responsable Dpto. Control de Calidad Produccin Todos
Inspeccin Mnima Control estadstico de procesos Control de Calidad Aseguramiento de calidad Gestin de la calidad o mejoramiento continuo Prevencin de riesgos y seguridad ?
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En Europa, a mediados de la dcada de los setenta, la Organisation for Economic Co-operation and Development (OECD) u Organizacin para la Cooperacin y el Desarrollo Econmicos y la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) comenzaron a impulsar la aplicacin de las BPL americanas, a raz de las malformaciones congnitas que produjo la talidomida y en paralelo, surgieron otras normas europeas, como las ISO 9000. Los Principios de Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL) fueron adoptados por la OECD en 1981 y revisados en 1997, contienen las normas recomendadas para llevar a cabo pruebas para una amplia variedad de estudios realizados con propsitos reglamentarios y otros fines relacionados con una evaluacin. Se ha logrado el consenso, a nivel mundial, sobre el importante papel que desempea el aseguramiento de la calidad ya sea mediante la aplicacin de las buenas prcticas de laboratorio o la implementacin de la norma ISO 17025. Ambas tienen en cuenta la organizacin, la formacin del personal, las responsabilidades, programa de garanta de calidad, las instalaciones, manejo de muestras, patrones y reactivos, equipos, planificacin, realizacin y registro de los ensayos de acuerdo a los procedimientos escritos, archivo de la documentacin y muestras. A fin de prevenir una diversificacin de programas de aplicacin que pudiera dificultar el comercio internacional de productos biolgicos, se adoptan los Principios de Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL), basndose en las prcticas y la experiencia de gestin y cientficas comunes de diversas fuentes nacionales e internacionales.
B) Principios de Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL) de la OECD Tienen por objeto promover la calidad de los datos de los estudios. La comparacin de la calidad de estos datos constituye la base de su aceptacin mutua entre pases. Si cada pas puede basarse con confianza en datos de estudios desarrollados en otros pases, es posible evitar la duplicacin de estudios, con el consiguiente ahorro de tiempo y recursos. La aplicacin de estos principios debe contribuir a evitar que surjan obstculos tcnicos para el comercio y a continuar mejorando la proteccin de la salud. 1. Organizacin y personal del laboratorio 1.1 Calificacin del Personal: Educacin, entrenamiento y experiencia para la funcin asignada Curriculum vitae de cada persona Cantidad suficiente de personal Requisitos de salud y seguridad 1.2 Responsabilidades: 1.2.1. Responsabilidades de la direccin del laboratorio
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La direccin de cada laboratorio debe asegurar que en el mismo se cumplen los principios de buenas prcticas de laboratorio. Asegurar: la disponibilidad de suficiente personal calificado, locales apropiados, equipos y materiales para la oportuna y adecuada realizacin del estudio el mantenimiento de un registro de los ttulos acadmicos, las capacitaciones, experiencia y descripcin del puesto de trabajo individualizado para cada profesional y tcnico. Que el personal comprende claramente las funciones que debe llevar a cabo y, en caso necesario, proporcionar la formacin necesaria para el ejercicio de las mismas que se establecen y se siguen procedimientos normalizados de trabajo apropiados y tcnicamente vlidos; aprobando todos los procedimientos normalizados de trabajo, tanto originales como revisiones que existe un programa de garanta de calidad con el correspondiente personal asignado y asegurar que la responsabilidad de garanta de calidad se ejerce en conformidad con los principios de buenas prcticas de laboratorio que antes del inicio de cada estudio, el director del laboratorio nombra un director de estudio con el ttulo acadmico, la capacitacin y experiencia apropiadas. La sustitucin de un director de estudio debe hacerse segn procedimientos establecidos y documentarse de forma adecuada el mantenimiento de un archivo histrico de todos los procedimientos normalizados de trabajo, se nombra un responsable para la gestin del archivo el mantenimiento de la lista de estudios programados Establecer procedimientos que aseguren que los sistemas automatizados son los adecuados para el propsito previsto, y estn validados, se utilizan y mantienen de conformidad con los principios de buenas prcticas de laboratorio. 1.2.2. Responsabilidades del director del estudio El director del estudio es el nico punto de control del estudio y a l corresponde la responsabilidad global de la realizacin del estudio y de su informe final aprobar el protocolo del estudio y toda modificacin que se haga al mismo, firmndola y fechndola asegurar que el personal de garanta de calidad disponga a tiempo de una copia del protocolo y de toda modificacin producida, manteniendo durante la realizacin del estudio una comunicacin efectiva con el personal de garanta de calidad en funcin de las necesidades asegurar que el protocolo, modificaciones y procedimientos normalizados de trabajo, estn disponibles para el personal del estudio y que se siguen los procedimientos especificados en el protocolo; evaluar y documentar las repercusiones de las desviaciones del protocolo sobre la calidad e integridad del estudio, tomando, en caso necesario, las acciones correctivas necesarias, y admitir las desviaciones que se produzcan durante la realizacin del estudio respecto a los procedimientos normalizados de trabajo asegurar que todos los datos primarios generados se documentan y registran ntegramente asegurar que se han validado los sistemas automatizados utilizados en el estudio firmar y fechar el informe final, indicando su aceptabilidad sobre la validez de los datos y sealar en qu medida el estudio cumple los principios de buenas prcticas de laboratorio, y asegurar que al finalizar el estudio (incluso en caso de interrupcin) son archivados: el protocolo, el informe final, los datos primarios y el material que respalda al mismo.
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1.2.3. Responsabilidades del personal del estudio Debe tener conocimiento de aquellas partes de los principios de buenas prcticas de laboratorio aplicables a su participacin en el estudio. Debe tener acceso al protocolo y a los correspondientes procedimientos normalizados de trabajo aplicables a su participacin en el estudio. Al personal del estudio le corresponde la responsabilidad de cumplir las instrucciones que figuran en estos documentos. Toda desviacin de estas instrucciones debe documentarse y comunicarse directamente al director del estudio. Debe tomar las debidas precauciones sanitarias para minimizar los riesgos para su salud y asegurar la integridad del estudio. Asimismo, los miembros del personal de estudio deben comunicar a la persona adecuada toda enfermedad o alteracin mdica relevante, a fin de que puedan ser excluidos en caso necesario de las operaciones que pudieran 2. Programa de garanta de calidad El laboratorio debe contar con un programa de garanta de calidad documentado, a fin de asegurar que los estudios realizados cumplen los principios de buenas prcticas de laboratorio. El programa de garanta de calidad debe ser llevado a cabo por una persona o por personas designadas por direccin y directamente responsables ante ella, y estar familiarizados con los procedimientos de trabajo. La persona o personas responsables del programa de garanta de calidad no pueden estar involucradas en la realizacin del estudio que deben asegurar. Responsabilidades del personal de garanta de calidad mantener copia de todos los protocolos aprobados y procedimientos normalizados de trabajo aprobados y en uso en el laboratorio, y tener acceso a una copia actualizada de la lista de estudios programados. verificar que el protocolo del estudio contiene la informacin necesaria para cumplir los principios de buenas prcticas de laboratorio. realizar inspecciones para determinar si todos los estudios se llevan a cabo conforme a los principios de buenas prcticas de laboratorio y llevar un registro de las inspecciones realizadas; auditar los informes finales para comprobar que los mtodos, procedimientos y observaciones estn exacta y completamente descriptos, y que los resultados del informe reflejan exacta y completamente los datos primarios de los estudios. informar rpidamente por escrito de los resultados de cada inspeccin a la direccin y al director del estudio, as como, cuando proceda, a la direccin. elaborar y firmar una declaracin, que debe incluirse en el informe final, en la que se especifiquen los tipos de inspecciones realizadas y sus fechas, incluyendo la fase o fases del estudio inspeccionadas, y las fechas en que los resultados de las inspecciones se informaron a la direccin y al director del estudio. Esta declaracin tambin debe servir para confirmar que el informe final refleja fielmente los datos primarios. 3. Instalaciones
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Deben reunir las condiciones de tamao, construccin y ubicacin adecuadas para satisfacer los requerimientos del estudio y reducir al mnimo las posibles alteraciones que puedan interferir en la validez del estudio. El diseo de las instalaciones debe posibilitar que exista una separacin adecuada entre las diferentes actividades, a fin de asegurar la correcta realizacin de cada estudio. El laboratorio debe disponer de un nmero de salas o reas suficiente para asegurar el aislamiento de sistemas experimentales o proyectos individuales en que se utilicen sustancias u organismos de los que se conozca o se sospeche que puedan comportar peligros biolgicos. La manipulacin y la eliminacin de residuos deben llevarse a cabo de forma que no pongan en peligro la integridad de los estudios. Se debe contar con instalaciones adecuadas de recoleccin, almacenamiento y eliminacin de los residuos, as como de procedimientos de descontaminacin y transporte. 4. Aparatos, materiales y reactivos Los aparatos, incluidos los sistemas automatizados validados, utilizados para la obtencin, almacenamiento y recuperacin de datos y para el control de factores medioambientales relevantes para el estudio deben estar debidamente ubicados y contar con el diseo y la capacidad adecuados. La calibracin debe responder a normas de mediciones nacionales o internacionales. Las sustancias qumicas, los reactivos y las soluciones deben etiquetarse indicando la identidad (sealando, si procede su concentracin), fecha de caducidad y las condiciones especficas de almacenamiento. La informacin referente a la procedencia, fecha de preparacin y estabilidad debe estar disponible. La fecha de caducidad podr retrasarse mediante evaluacin o anlisis debidamente documentados. 5. Sistemas experimentales Los aparatos utilizados para la obtencin de datos fsicos o qumicos deben estar debidamente situados y contar con el diseo y la capacidad apropiados. La integridad de los sistemas experimentales fsicos y qumicos debe estar garantizada. A fin de asegurar la calidad de los datos, deben establecerse y mantenerse condiciones apropiadas para el almacenamiento, el alojamiento, la manipulacin y el cuidado de los sistemas experimentales biolgicos. Deben mantenerse registros de procedencia, fecha y condiciones de llegada de los sistemas experimentales. Los alojamientos y recipientes de los sistemas experimentales deben estar correctamente identificados. En los casos en que sea posible, los sistemas experimentales individuales que deban retirarse de su recipiente durante la realizacin del estudio deben estar convenientemente identificados. Durante su perodo de utilizacin, los alojamientos y los recipientes de los sistemas experimentales deben limpiarse y desinfectarse a intervalos apropiados. Todo el material que entre en contacto con el sistema experimental debe estar libre de cualquier nivel de contaminantes que pudiesen afectar al estudio. Los lechos de los animales deben cambiarse segn requiera la buena prctica del uso, manejo y cra de animales. El uso de agentes antiparasitarios debe documentarse.
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Los sistemas experimentales utilizados en los estudios de campo deben estar situados de forma que se evite que el estudio se vea afectado por aerosoles errticos y el uso previo de plaguicidas. 6. Productos de ensayo y de referencia Recepcin, manipulacin, toma de muestras y almacenamiento Deben mantenerse registros que incluyan la caracterizacin de los productos de ensayo y de referencia, fecha de recepcin, fecha de caducidad, y cantidades recibidas y utilizadas en los estudios y establecer los procedimientos de manipulacin, toma de muestras y almacenamiento, a fin de asegurar el mayor grado posible de homogeneidad y estabilidad, y de evitar la contaminacin o la mezcla. Los recipientes de almacenamiento deben llevar indicados los datos de identificacin, la fecha de caducidad e instrucciones especficas de almacenamiento. 7. Procedimientos normalizados de trabajo Todo laboratorio debe contar con procedimientos normalizados de trabajo escritos y aprobados por la direccin del laboratorio, dirigidos a garantizar la calidad e integridad de los datos obtenidos por el laboratorio. Las revisiones de los procedimientos normalizados de trabajo deben ser aprobadas por la direccin del laboratorio. Productos de ensayo y de referencia: Recepcin, identificacin, etiquetado, manipulacin, muestreo y almacenamiento. Aparatos: Uso, mantenimiento, limpieza y calibracin. Sistemas informatizados: Validacin, funcionamiento, mantenimiento, seguridad, control de modificaciones y copias de seguridad. Materiales, reactivos y soluciones: Preparacin y etiquetado. Mantenimiento de registros, informes, almacenamiento y recuperacin Codificacin de estudios, recopilacin de datos, preparacin de informes, sistemas de indizacin, tratamiento de datos, incluido el uso de sistemas informatizados. Procedimientos de garanta de calidad: Actuacin del personal de garanta de calidad en la planificacin, programacin, realizacin, documentacin y redaccin de informes de auditoria. 8. Realizacin del estudio Protocolo Cada estudio debe contar con un protocolo escrito previo a su iniciacin. El protocolo debe ser aprobado y fechado por el director del estudio. El personal de garanta de calidad debe comprobar que el protocolo cumple las BPL. El protocolo debe ser tambin aprobado por la direccin del laboratorio y el promotor (si corresponde). Las desviaciones del protocolo deben ser descritas, explicadas, reconocidas y fechadas en su momento por el director del estudio y mantenerse en todo momento junto a los datos primarios del estudio.
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Realizacin del estudio Cada estudio debe identificarse de forma nica. Esta identificacin debe aparecer en todos los registros relacionados con el estudio. Los muestras del estudio deben identificarse para confirmar su origen. Esta identificacin debe permitir la rastreabilidad apropiada. El estudio debe ser realizado de acuerdo con el protocolo. Los datos obtenidos como ingresos directos de computadora deben ser identificados con tiempo y fecha de su ingreso por la persona responsable de su registro. Los sistemas computerizados deben disearse para poder posibilitar en todo momento la conservacin de datos que permitan realizar auditorias retrospectivas que muestren todos los cambios de los datos sin ocultar los datos originales. Debe ser posible asociar todos los cambios de datos con las personas que los han realizado, por ejemplo, por medio de firmas electrnicas con hora y fecha. Las modificaciones siempre deben justificarse. 9. Informacin de los resultados del estudio Finalizado un estudio se debe elaborar un informe final que debe ser firmado y fechado por el director del estudio para indicar la aceptacin de la responsabilidad de la validez de los datos. Debe mencionarse la medida en que el estudio cumple los principios de buenas prcticas de laboratorio. Toda correccin o agregado a un informe final debe hacerse en forma de modificacin. Las modificaciones deben especificar claramente la razn de las correcciones o agregado y deben ser firmadas y fechadas por el director del estudio. 10. Archivo y conservacin de documentos y materiales Deben conservarse en los archivos durante el perodo especificado (mnimo seis aos y todo el perodo que se encuentre en el mercado): el protocolo, datos primarios, muestras de elementos de ensayo y de referencia, muestras y el informe final de cada estudio, registros de todas las inspecciones realizadas por el personal del programa de garanta de calidad, la lista de estudios programados, los ttulos acadmicos, la capacitacin, experiencia y descripcin de puestos de trabajo del personal, registros e informes del mantenimiento y calibracin de los aparatos, documentos de validacin de los sistemas informatizados, el archivo histrico de los procedimientos normalizados de trabajo. C) Norma ISO/ IEC 17025 En 1987 se generan normas que son herramientas de apoyo en el desarrollo de sistemas de aseguramiento y gestin de la calidad y que son las normas ISO 9000. En 1982 la Gua ISO 25 para el caso de los laboratorios, actualmente sustituida por la norma ISO/ IEC 17025: Requisitos generales relativos a la competencia de los laboratorios de ensayo y calibracin. La norma ISO vigente en los pases de la regin para acreditar laboratorios es la ISO/ IEC 17025/1999 General requirements for competence of calibration and testing laboratorios. Esta norma se ha elaborado por consenso internacional, opera bajo un sistema de calidad, evala la competencia tcnica del laboratorio, los laboratorios acreditados tienen la capacidad de generar resultados vlidos y hay un reconocimiento mutuo con otros laboratorios del mundo.
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En mayo del 2005 ISO public la versin 2005, dicha versin est siendo revisada por los organismos normativos de la regin para ser homologada y adecuar las acreditaciones a la nueva versin de la norma. El cambio ms importante es el requisito explcito referente al mejoramiento continuo del sistema de gestin y a la comunicacin con el cliente. Ahora la norma indica en forma explcita que esta norma no es para efectuar certificacin. ILAC (Cooperacin Internacional para la Acreditacin de Laboratorios) ha definido un perodo de transicin de dos aos para que los laboratorios cumplan los requisitos de la nueva norma e igual definicin adopt IAAC (Cooperacin Interamericana de Acreditacin), por lo tanto los organismos de acreditacin miembros de estas organizaciones adoptan la misma definicin. En la calidad intervienen factores econmicos, tcnicos y humanos. El motor del sistema de calidad son las personas. Para llevarla a cabo se requiere que las organizaciones no sean rgidas, que los directivos tengan liderazgo y propicien el cambio cultural para que se trabaje en equipo, que todos los integrantes se responsabilicen de sus actividades. La aceptacin de los resultados de ensayo y de calibracin entre pases debera resultar ms fcil si los laboratorios cumplen esta norma y obtienen la acreditacin de organismos que han firmado acuerdos de reconocimiento mutuo con organismos equivalentes que utilizan esta norma en otros pases. El uso de esta norma facilitar la cooperacin entre los laboratorios y otros organismos y ayudar al intercambio de informacin y experiencia, as como a la armonizacin de normas y procedimientos. 1. Requisitos Relativos a la Gestin Independencia de juicio y Sistema de Calidad La direccin del laboratorio debe asegurar que la misma y el personal estn libres de presiones e influencias que puedan perjudicar la calidad de su trabajo y la confidencialidad de la informacin (Punto 4.1.5); y su: compromiso con la buena prctica profesional y calidad de los ensayos, incluyendo la declaracin de poltica de calidad, estableciendo las funciones y responsabilidades para el cumplimiento de la norma. (Punto 4.2). Control de la Documentacin Se debe asegurar el control de la documentacin, la aprobacin y emisin de los documentos, examinar peridicamente, tener procedimientos para realizar y controlar las modificaciones. El Responsable de calidad, es el encargado de la gestin de la documentacin del sistema de calidad, de actualizar y mantener vigente la documentacin. Registrar el estado de los documentos actualizados y vigentes y, la distribucin de las copias controladas de los manuales (Punto 4.3). Compras de servicios y de suministros El laboratorio debe contar con polticas y procedimientos para seleccin y compra de servicios y suministros. Recepcin y almacenamiento de reactivos y materiales; no deben ser utilizados sin inspeccin o verificacin previa. Evaluar a los proveedores; conservar los registros de evaluaciones y elaborar una lista con los proveedores aprobados (Punto 4.6). Control de trabajos de ensayos o de calibraciones no conformes
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Identificar el trabajo no conforme, asignar responsabilidades y autoridades para la gestin del trabajo no conforme, definir y tomar acciones, evaluar la importancia del trabajo no conforme, tomar acciones correctivas inmediatamente, si es necesario notificar al cliente y anular trabajo, designar al responsable para autorizar reanulacin del trabajo (Punto 4.9). El laboratorio debe mejorar continuamente la eficacia de su sistema de gestin mediante el uso de la poltica de la calidad, los objetivos de la calidad, los resultados de las auditorias, el anlisis de los datos, las acciones correctivas y preventivas y la revisin por la direccin. Control de Registros El laboratorio debe establecer y mantener procedimientos para la identificacin, codificacin, acceso, almacenamiento, archivo, conservacin y eliminacin de los registros tcnicos y registros de la calidad, incluyendo auditorias, revisiones, acciones correctivas y preventivas (Punto 4.12). Revisiones por la Direccin Permite la adecuacin de las polticas y los procedimientos; teniendo en cuenta los informes del personal gerencial y la supervisin de los resultados de auditorias internas y externas, de control de calidad, las acciones correctivas y preventivas, interlaboratorios; cambio de volumen y tipo de trabajo, las quejas, los recursos y la capacitacin del personal (Punto 4.14). 2. Requisitos Tcnicos Entre los factores que afectan la exactitud y confiabilidad de los ensayos se encuentran: los factores humanos, las instalaciones y condiciones ambientales, los mtodos de ensayo y su validacin o verificacin, los mtodos de calibracin, equipos, rastreabilidad de las mediciones y muestreo (Punto 5.1). Las personas son el motor de los sistemas de calidad y por lo tanto este es un punto crtico. La direccin debe asegurar la competencia del personal para operar equipos, realizar ensayos o calibraciones, evaluar resultados, firmar informes de ensayo, mediante la aprobacin de planes de capacitacin, manteniendo los perfiles actualizados, y comprobando que el personal tiene los estudios, la capacitacin, la experiencia y las aptitudes para la tarea asignada (Punto 5.2) Instalaciones y condiciones ambientales Deben contar con fuente de energa, iluminacin y condiciones ambientales que faciliten la realizacin de los ensayos. Controlar y registrar temperatura y humedad para las tareas que lo requieran. Disponer la separacin entre reas que realicen actividades incompatibles, establecer el acceso restringido al laboratorio, asegurar el orden y la limpieza del laboratorio (Punto 5.3). Mtodos de ensayo Verificacin o validacin segn sea o no un mtodo normalizado (Punto 5.4). Equipos Los equipos que afecten los resultados deben ser calibrados y verificados antes del uso, se debe contar con un programa de calibracin y procedimiento para el control, la calibracin, la verificacin, el manejo y el mantenimiento; el instructivo de uso debe estar actualizado y el manual del equipo disponible (Punto 5.5). Rastreabilidad de las mediciones
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Es una cadena ininterrumpida de calibraciones o comparaciones que se logra en varios pasos llevados a cabo por diferentes laboratorios que pueden demostrar la rastreabilidad, se utilizan patrones y materiales de referencia (Punto 5.6). Muestreo Si el laboratorio realiza el muestreo debe contar con un plan, con base estadstica, y procedimiento para el mismo (Punto 5.7). Manipuleo de las muestras Procedimiento para el transporte, recepcin, manipuleo, proteccin, almacenamiento, conservacin y disposicin material de ensayo (Punto 5.8). Aseguramiento de la calidad de los ensayos Procedimientos de control de calidad, uso regular de materiales de referencia certificados o secundarios, cartas de control, participacin en interlaboratorios (Punto 5.9). Informe de los resultados Debe contener todos los datos del laboratorio que realiza el anlisis, los del cliente, la muestra, el mtodo, los resultados deben estar expresados en forma exacta, clara, no ambigua y objetiva, incluir la incertidumbre, si el cliente lo solicita (Punto 5.9). Estructura de la Documentacin del Sistema de Gestin de Calidad Manual de calidad Procedimientos de calidad, instructivos de trabajo, planes de calidad. Registros Manual de Calidad; documento que proporciona informacin coherente, interna y externamente, acerca del sistema de gestin de la calidad de la organizacin. Especificaciones: documentos que establecen requisitos. Guas: documentos que establecen recomendaciones o sugerencias. Procedimientos documentados, instrucciones de trabajo y planos: documentos que proporcionan informacin sobre cmo efectuar las actividades y los procesos de manera coherente. Registros: documentos que proporcionan evidencia objetiva de las actividades realizadas o resultados obtenidos. Manual de procedimientos del laboratorio (lista sugerida) Requisitos de Gestin Elaboracin y aprobacin de documentos de SGC Clasificacin y codificacin documentaria Gestin y control de documentos Control de registros Resguardo de la informacin general en medios magnticos Personal Revisin de pedidos ofertas y contratos
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Recepcin y circulacin de muestras Control del equipamiento Informe de resultados Servicios al cliente Tratamiento de los reclamos Auditorias internas Tratamiento de las no conformidades-acciones correctivas desviaciones autorizadas Revisin sistema de calidad Evaluacin de proveedores Compras de servicios y suministros Requisitos Tcnicos para Laboratorios de Anlisis Qumicos Perfiles de puesto Capacitacin del personal que ingresa y existente Validacin de mtodos qumicos Estimacin de la incertidumbre de la medicin Control de datos Manejo de equipos Control, calibracin, verificacin y mantenimiento de equipos Manejo de patrones y material de referencia Muestreo de los tems de ensayo Manipuleo de los tems de ensayo Control de calidad interno y externo, aseguramiento de la calidad de los resultados Informe de resultados Instructivos de Trabajo Son documentos que describen la forma en que se pueden efectuar y registrar las diferentes actividades. Pueden incluir los criterios de aceptacin. Describen detalladamente una actividad especfica y sealan donde, quien y cuando se realiza. Habitualmente utilizan dibujos, esquemas, tablas, etc. Son documentos utilizados a nivel operacional y estn sujetos a las mismas condiciones que los procedimientos en lo que se refiere a edicin, control, modificaciones y distribucin. Lista sugerida de Instructivos Manejo de Cuadernos. Limpieza y seguridad en el laboratorio Lavado de material Control y verificacin de pHmetro. Control y verificacin de termmetros. Control y verificacin de equipos con control de temperatura. Control y verificacin de balanzas. Control y verificacin de material volumtrico Los registros y planillas deben completarse en el momento en que se lleva a cabo cada actividad en forma que puedan seguirse todas las acciones significativas relativas al anlisis o tarea que se realiza. En todos los casos: Escribir lo que se hace. Hacer lo que se ha escrito. Comprobar que lo que se hace es lo adecuado.
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Demostrarlo. El Sistema de Aseguramiento de la Calidad es una herramienta a nuestro servicio para ayudarnos, no para limitarnos. Los procedimientos e instructivos son documentos controlados del Sistema de Calidad por lo cual deben tener un ttulo, una codificacin, nmero de revisin, fecha, nmero de pgina y total de pginas del documento. La mayora de los procedimientos/ instructivos poseen las siguientes secciones: 1. Objetivo: describe las razones para escribir el procedimiento. La mayor parte de las veces, las razones son establecer las exigencias, responsabilidades y los mtodos para realizar una actividad. Las normas ANSI llaman a esta seccin Alcance. 2. Alcance: sirve como calificadora, si el procedimiento se aplica solamente a una parte de una organizacin, o si solo cubre parte del tema, es en esta seccin que se define cual es esa parte. Las normas ANSI llaman a esta seccin Aplicabilidad. 3. Referencias: citas bibliogrficas. 4. Responsabilidades: se indica el/ los responsable/ s de realizar el procedimiento. 5. Relaciones: conexin a otros procedimientos o especificaciones que proporcionan exigencias para la actividad que se describe, o aquellos que entregan instrucciones detalladas sobre alguna parte de la actividad 6. Desarrollo: constituye la instruccin propiamente tal. Se puede incluir una subseccin Generalidades en la cual se describen los prerrequisitos aplicables, instrucciones aplicables a todas las partes involucradas, y calificaciones para las instrucciones que siguen. 7. Definiciones: incluir las definiciones de siglas o smbolos utilizados en el procedimiento. 8. Registros: es donde se define los registros que deben mantenerse, donde sern conservados y por cuanto tiempo. 9. Anexos: pueden estar constituidos por planillas, formularios que sern utilizados. 10. Distribucin: se indica quienes tienen copia del documento.
V.
VALIDACIN DE MTODOS QUMICOS
A) Objetivo El objetivo de la validacin es probar la aptitud de los mtodos, as como la capacidad del personal y el laboratorio. La validacin se apoya en los parmetros estadsticos del procedimiento. El laboratorio debe confirmar que puede aplicar correctamente el mtodo normalizado previo a su uso en ensayos o calibraciones. Cualquier variacin en el mtodo normalizado implica la repeticin de dicha confirmacin. Para el caso de metodologas de ensayo o de calibracin desarrolladas por el laboratorio los mtodos deben ser adecuados y totalmente validados antes de su uso. Los procedimientos y el alcance de la validacin no son siempre los mismos y deben ser establecidos individualmente.
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Nota: cada Organismo de Acreditacin puede tener requisitos particulares, se sugiere consultarlos. B) Validacin del Mtodo Es el proceso para establecer las caractersticas de funcionamiento y limitaciones del mtodo y la identificacin de influencias que pueden cambiar estas caractersticas y hasta que punto; cuando el mtodo se desarrolla sin un problema particular previsto. Que sustancias se pueden determinar en qu matrices en la presencia de qu interferencias? Dentro de esas condiciones qu niveles de precisin y exactitud se pueden lograr? Tambin es el proceso para verificar que un mtodo es apto para ese propsito, es decir, para usarlo para resolver un problema analtico particular; cuando el mtodo se desarrolla con un fin especfico. En qumica analtica el otro uso del trmino de validacin es en el contexto de instrumental. La validacin de instrumental se usa para describir el proceso de establecer que un instrumento en un momento dado se pueda operar de acuerdo con la especificacin de diseo. Este proceso se podra lograr, por ejemplo, por medio de la calibracin o control del funcionamiento. C) Criterios 1. Cuando se utiliza una Norma, una Norma modificada o un Mtodo interno, se debe proceder segn: Modificacin de un mtodo Normalizado Comprobar que el Laboratorio Comprobar que el Laboratorio domina el ensayo y lo utiliza domina el ensayo y lo utiliza correctamente. correctamente. - Exactitud. - Exactitud. - Repetibilidad. - Repetibilidad. - Incertidumbre. - Reproducibilidad Lmite de Deteccin (si la No difieren del mtodo Norma lo indica) original. Mtodo Normalizado Modificacin de un mtodo Normalizado Determinar: Determinar: - Intervalo de trabajo - Intervalo de trabajo - Linealidad - Linealidad - Recuperacin - Recuperacin - Robustez - Robustez - Selectividad - Selectividad Estabilidad - Estabilidad - Reproducibilidad - Reproducibilidad Mtodo Normalizado Mtodo Interno Comprobar que el Laboratorio domina el ensayo y lo utiliza correctamente. - Exactitud. - Repetibilidad. - Reproducibilidad Son suficientes para el objetivo de aplicacin. Mtodo Interno Determinar: - Selectividad - Linealidad - Exactitud - Intervalo de trabajo - Repetibilidad - Reproducibilidad - Estabilidad - Lmite de deteccin - Lmite de cuantificacin
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- Recuperacin - Robustez - Sensibilidad - Incertidumbre Realizar Carta de control con los Realizar Carta de control con Realizar Carta de control con resultados de materiales de los resultados de materiales de los resultados de materiales de referencia. referencia. referencia. Controles Intralaboratorio Controles Intralaboratorio Controles Intralaboratorio Participar en interlaboratorios Participar en interlaboratorios Participar en interlaboratorios 2. Segn Categora de Mtodos Categora I: para la cuantificacin de materia prima o principio activo en producto terminado. Categora II: para determinar impurezas en materia prima o compuestos de degradacin en producto terminado; o para anlisis de residuos en material biolgico o alimentos. Categora III: para determinar las caractersticas de funcionamiento como disolucin o liberacin de droga.
P ARAMETROS METODO CAT. I METODO CAT. II Cuantit ativo Estabilidad Selectividad Linea lidad Rango Exactitud Recuperacin Precisin MND MNC Estudio comparativo Robustez y Si Si Si Si Si Si Si Si Si Si Test Lmite Si Si No * No * Si * * * METODO CAT . III
Si No No Si *
Si Si Si *
* Si Si *
Si * *
Si
Si
Si
Si
D)
Diseo: Definicin de la aplicacin, propsito y alcance del mtodo (considerando compuestos, matrices, tipo de informacin: cualitativa o cuantitativa, lmites de deteccin y cuantificacin, rango lineal, precisin y exactitud, etc.). Definicin de los parmetros de rendimiento y criterio de aceptacin (deber respetarse en el proceso de diseo los criterios que para cada tipo de anlisis se describen en la presente instruccin). Diseo de los experimentos de validacin. Descripcin de las caractersticas relevantes requeridas para el equipamiento. Calificacin de los materiales, estndares y reactivos.
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El protocolo de validacin deber ser evaluado y autorizado para su ejecucin por el Supervisor, Jefe de Departamento o Jefe de Laboratorio segn corresponda a la estructura del organismo y sus misiones y funciones. E) Ejecucin Realizacin de los experimentos de pre-validacin. Ajuste de los parmetros del mtodo y/ o los criterios de aceptacin si fuera necesario. Realizacin de los experimentos de validacin interna en forma completa. Desarrollo los Procedimientos Operativos Estandarizados (POE) para ejecutar el mtodo en la rutina. Definicin del tipo y frecuencia de pruebas adecuadas para el sistema y/ o control de calidad analtico (CCA) para controles de rutina. F) Informe El profesional responsable deber documentar los experimentos y resultados de la validacin en el informe considerando: El objetivo y alcance del mtodo (aplicabilidad, tipo). Tipo de compuestos y de matriz. Detalle de drogas, reactivos, estndares de referencia, y preparacin de muestras de control. Lista de equipos y requisitos de funcionamientos y rendimiento. Procedimientos para los controles de calidad de estndares y drogas usadas. Parmetros del mtodo. Parmetros crticos determinados para la comprobacin de robustez (cuando corresponda). Detalle de las condiciones y de la implementacin de los experimentos incluyendo la preparacin de la muestra. Procedimientos estadsticos y clculos representativos. Procedimientos para el control de calidad en la rutina. Grficos representativos, registros (cromatogramas, espectrogramas, etc.) y curvas de calibracin. Criterios de aceptacin de los datos. Incertidumbre esperada para los resultados de la medida. Criterio para la revalidacin. Consideraciones de seguridad. Persona que desarroll e inicialmente valid el mtodo. Resumen y conclusiones. El Supervisor, Jefe de Departamento o Jefe de Laboratorio, segn corresponda evaluar el informe: Se confrontan los parmetros estadsticos obtenidos, o bien las medidas de validacin (cartas de control, ensayos de intercomparacin) con lo establecido.
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G) Requisitos a cumplir en el proceso de validacin: 1. Linealidad y Sensibilidad con Patrones Antes de la preparacin de los patrones se debe efectuar el control de pureza de los solventes correspondientes, cuando se considere necesario. Se deben analizar todos los patrones convenientemente agrupados. Para estudiar la linealidad y sensibilidad de respuesta se trabajar con distintas concentraciones (entre cuatro y siete), realizando varios replicados (entre cuatro y seis). Se grafica respuesta (rea o relacin de reas en el caso de utilizar patrn interno) en funcin de la masa de la sustancia utilizada y se efecta el tratamiento estadstico de los datos, determinado ordenada al origen, pendiente (sensibilidad), coeficiente de correlacin y coeficiente de variacin porcentual para cada nivel de concentracin. El coeficiente de correlacin, preferentemente, debe ser mayor o igual que 0.995 (auque puede encontrarse entre 0.980 y 0.990 segn el mtodo analtico). 2. Precisin, Repetibilidad, Reproducibilidad y Selectividad con Material de Referencia (MR) o Muestras Fortificadas (en el caso de anlisis de residuos y cuando no se disponga de MR). Se deber analizar, blanco de reactivos, blanco de muestras y MR para todas las sustancias en diferentes niveles de concentracin segn el mtodo analtico que se aplique. Los replicados deben ser distribuidos en das distintos. 3. Selectividad La selectividad da una indicacin de cuan fuertemente un resultado es afectado por otros componentes de la muestra. 4. Exactitud Es el grado de concordancia entre el resultado de ensayo y el valor de referencia. Se obtiene determinando la veracidad y la precisin. 5. Veracidad Es el grado de concordancia entre el valor medio obtenido de una serie de mediciones y el valor de referencia. Se expresa como sesgo. Para la evaluacin de este parmetro se realiza el anlisis de un material de referencia certificado, preferentemente con una matriz semejante a la de la muestra. Slo en el caso de no existir un material adecuado se puede realizar un ensayo de recuperacin. Cuando sea posible, se realizan un mnimo de 10 repeticiones del ensayo tres das consecutivos. Se compara el promedio de los valores obtenidos (X) con el valor de referencia certificado (MRC), teniendo en cuenta la incertidumbre asociada a ese material. El mdulo de la diferencia da como resultado el sesgo del mtodo: s = X - MRC
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6. Precisin Es la proximidad entre resultados de anlisis independientes obtenidos bajo condiciones estipuladas. Depende slo de la distribucin de los errores aleatorios y no se relaciona con el valor verdadero o valor especificado. Se computa como desviacin estndar de los resultados de los anlisis. 7. Repetibilidad Puede determinarse de una manera interna. Para ello es necesario tener en cuenta que: Deben determinarse suficientes resultados Todos los pasos del mtodo (incluidos la toma y preparacin de la muestra, as como la calibracin) deben realizarse n-veces.
8. Reproducibilidad Su determinacin es posible por ensayo de intercomparacin o cuando se cuenta con distintos analistas, distintos equipos, etc., Se determina Recuperacin Porcentual (R%) para cada MR y CV% para cada nivel de concentracin. Se grafica Concentracin Hallada en funcin de la Concentracin de Referencia. Se efecta el tratamiento estadstico de los datos, determinando ordenada al origen pendiente (recuperacin promedio) y coeficiente de correlacin. Determinar Recuperacin % y CV%. 9. Incertidumbre de los resultados Es un parmetro de identificacin central e imprescindible para preparar una acreditacin segn la Norma ISO 17025. Incluye los errores sistemticos y aleatorios. Los laboratorios deben tener y aplicar procedimientos para estimar la incertidumbre de medicin, deben identificar todos los componentes de la incertidumbre, entre ellas pueden encontrarse: definicin incompleta del mensurando definicin imperfecta del mensurando muestreo preparacin de muestras condiciones ambientales desviaciones personales en la lectura de instrumentos analgicos lmites en la discriminacin o resolucin del instrumento valores inexactos de los patrones y materiales de referencia utilizados valores inexactos de constantes y otros parmetros obtenidos de fuentes externas y utilizados en el algoritmo para la obtencin de datos Para su determinacin y especificacin existen varias posibilidades: Indicacin acerca de la repetibilidad. Resultados de las cartas de control.
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Resultado de intercomparaciones. Evaluacin por miembros del personal experimentados, competentes y, por lo tanto, autorizados. 10. Indicacin acerca de la Repetibilidad: Una posibilidad es procesar en total 25 fortificados correspondientes a 5 (cinco) niveles de concentracin por quintuplicado, por lo tanto se dispone de 25 valores de Recuperacin Porcentual (R %). Calcular la desviacin estndar relativa DSR, segn: DS (R %) DSR = R % (Prom.) DS (R %): desvo estndar de las R %. R % (Prom.): recuperacin promedio.
Calcular la Incertidumbre expandida (U) para una medida "c" DSR "k" U = DSR x k x c El valor de k es 2 para un nivel de confianza de 95 %. La Incertidumbre Porcentual tambin puede ser determinada a partir de por lo menos 25 valores experimentales de R % correspondientes a anlisis de rutina, segn el mismo procedimiento. 11. Elaboracin de una carta de control analizando un material de referencia. Es la herramienta de eleccin para el control interno de rutina de mtodos utilizados frecuentemente. Las cartas de control no son adecuadas para mtodos que se utilicen menos de alrededor de tres veces al mes. Para ello se analiza una muestra de control (muestra de retencin de una muestra real o un material de referencia certificado o no) junto con las muestras del anlisis y el resultado se registra en la carta de control. Las variantes ms importantes son: Carta de control de un slo valor Carta de control del blanco Carta de control para recuperacin El procedimiento es en principio el mismo para todos los casos. La diferencia se encuentra en el factor que se controla (contenido de la sustancia, blanco o bien porcentaje de recuperacin). 12. Lmite de Deteccin (LD) Es necesario solamente cuando deben tomarse decisiones cualitativas, es decir, si la sustancia est presente o no. Los procedimientos de determinacin posibles son:
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3 veces la dispersin, expresada como desviacin estndar, a partir de mediciones repetidas del blanco. 2,5 a 5 veces la relacin seal/ ruido del equipo de medida que utiliza. la concentracin CL o la cantidad QL, es la medida ms pequea XL que se puede detectar con seguridad razonableXL = X bl + k S bl X bl: media de las medidas de las muestras blanco (MB) S bl: desviacin estndar de las medidas de la MB K: factor numrico de acuerdo al nivel de Concentracin. Cuando se considere necesario los valores obtenidos para LD deben ser confirmados experimentalmente, fortificando muestras de la misma matriz a los niveles de concentracin respectivos y efectuando su anlisis con el mismo nmero de replicados que en la validacin correspondiente. 13. Lmite de Cuantificacin (LC) Se emplea cuando se realizan determinaciones de sustancias a nivel de residuos. En esencia se encuentran en la literatura dos formas para determinarla: De manera anloga al lmite de deteccin, en el cual el lmite de cuantificacin es como mnimo tres veces el lmite de deteccin, segn cada caso. Como 6 10 veces la DS del blanco3 veces el LDLos lmites de cuantificacin son las caractersticas de realizacin que marcan la capacidad de un proceso de medidas qumico para cuantificar la sustancia adecuadamente La concentracin LQ, es la medida ms pequea que se puede cuantificar adecuadamenteLQ = k Q x SQ, donde LQ es el lmite de cuantificacin SsQ es la desviacin estndar en ese punto kQ es el factor cuya inversa multiplicada por el RSD iguala al cuantificando seleccionado El valor por defecto que expresa para k Q es 10 14. Robustez El objetivo de la prueba de robustez es optimizar el mtodo analtico y describir que bajo las condiciones establecidas (incluidas sus tolerancias) se pueden obtener resultados suficientemente exactos con una alta seguridad, de manera que el procedimiento funcione confiablemente si se utiliza en otros laboratorios o despus de intervalos largos de tiempo. Un mtodo es ms robusto entre menos dependan los resultados del ensayo de una modificacin en las condiciones de ste. Al desarrollar un nuevo mtodo analtico debe determinarse la modificacin de los resultados por el cambio en las condiciones del ensayo. Las condiciones que afectan el mtodo de medicin son por ejemplo: Laboratorio, lugar de la medicin. Personal. Aparatos. Reactivos, disolventes, estndares, etc. Caudal de la fase mvil.
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pH de la fase mvil (por Ej. en HPLC). Gradiente de temperatura (por Ej. en GC).
Modificaciones pequeas a estas condiciones deben afectar muy poco o nada al resultado del anlisis. Pueden modificarse algunas condiciones del anlisis y seguir las afectaciones a los resultados o a los parmetros estadsticos. Un aspecto importante de la robustez es la estabilidad de todas las muestras, estndares y reactivos, tanto en el almacenamiento como durante las condiciones de ensayo. En este caso pueden ser parmetros a probar: Sensibilidad a la temperatura. Sensibilidad a la luz. Hidrlisis. Ej. por la humedad del aire. Facilidad de oxidacin. Descomposicin qumica. Efectos catalticos, Ej. por las paredes del contenedor. Adsorcin, Ej. durante la filtracin de disoluciones con trazas. Precipitacin, Ej. al dejar mucho tiempo una disolucin.
Para determinar la robustez de un procedimiento analtico se utiliza el procedimiento de Youden y Steiner, que permite evaluar siete variables con el anlisis de slo ocho muestras. Las variables deben ser elegidas estratgicamente. Cada variable se estudia mediante un valor (o cualidad cuando esto no es posible) alto (A, B,...G) y otro bajo (a, b,...g) y se disean ocho pruebas segn el ejemplo de la Tabla 1. Los resultados se representan con letras desde s hasta z. A partir de los resultados puede calcularse el efecto de cada una de las variables haciendo la media de los cuatro anlisis que contienen la variable en su valor ms alto (maysculas) y aquellos que corresponden al valor ms bajo (minsculas). As, el efecto de cambio del Factor A a a se mide por la diferencia:
(s+t+u+v)/4 - (w+x+y+z)/4
Es decir, la media de los resultados (s+t+u+v) equivale a A porque las seis variables restantes presentes en estos cuatro resultados se anulan entre s como consecuencia de que existen siempre dos maysculas y dos minsculas de cada variable. Anlogamente, la media de los resultados (w+x+y+z) equivale a a. Se calcula el efecto de cada uno de los factores. Finalmente el efecto de cambio de "G" a "g" se mide por la diferencia (s+v+x+y)/4 - (t+u+w+z)/4. Al comparar los dos valores medios se conoce la influencia de la variable en el estudio. Para cualquier otra variable se puede proceder de manera similar, como muestra la Tabla 1
Tabla 1: Test de Robustez de Youden para un mtodo analtico
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VALOR DE LAS VARIABLES
ANLISIS
1 A B C D E F G s
2 A B c D e f g t
3 A b C d E f g u
4 A B C D E F G V
5 a B C d e F g w
6 a B c d E f G x
7 a b C D e f G y
8 a b c D E F g z
A, a B, b C, c D, d E, e F, f G, g Resultados
Estableciendo las siete comparaciones posibles (A-a,...G-g) puede conocerse el efecto de cada variable; cuanto mayor sea la diferencia, mayor influencia tendr dicha variable en el mtodo analtico. Si cualquiera de estas diferencias entre los promedios de subgrupos de cuatro es mayor que (2)1/2 DS entre los replicados llevados a cabo en las mismas condiciones, es indicacin de que el mtodo es sensible a los cambios del factor involucrado. Estas variables recibirn especial atencin al redactar el mtodo, remarcando la necesidad de un estricto control para obtener resultados de calidad. Nota 1: Los factores a estudiar no deben ser necesariamente siete; puede considerarse un nmero menor de variables. Esto no afectar el balance del diseo del experimento siempre que se lleven a cabo los ocho ensayos indicados. Nota 2: una informacin adicional de este test de Youden es que la desviacin estndar de los resultados s a z constituye una medida excelente de la imprecisin previsible del mtodo cuando se utiliza para el anlisis de rutina, ya que este procedimiento introduce deliberadamente el tipo de variacin en las variables que puede esperarse que ocurra durante el empleo normal del mtodo. 15. Participacin en intercomparaciones Deben tomarse en cuenta los siguientes puntos: Las intercomparaciones dan informacin valiosa solamente cuando las muestras se manejan de la misma manera que las muestras de un anlisis normal. Las intercomparaciones se realizan en intervalos de tiempo largos. De ah que no sean suficientes para el aseguramiento de calidad rutinario, sino que funcionan como complemento de las cartas de control, por ejemplo: Cuanto ms distintas sean las matrices de las muestras de intercomparacin y las del anlisis, menos informacin dan las intercomparaciones para el anlisis rutinario. La interpretacin de los resultados de intercomparaciones debe realizarse con el mayor cuidado, especialmente en el caso de resultados aberrantes o desviaciones, para obtener las mximas posibilidades de mejora. Si no se organizan intercomparaciones oficiales o provenientes de proveedores reconocidos, se pueden realizar en su lugar comparaciones con otros laboratorios 16. Sensibilidad Puede considerarse como el gradiente de la curva de respuesta del instrumento, es decir el cambio en la unidad de respuesta que corresponde a un cambio en la concentracin del analito.
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H) Acreditacin y Certificacin 1. Acreditacin Es el procedimiento por el cual un organismo con autoridad otorga un reconocimiento formal de que un organismo, o una persona, es competente para llevar a cabo tareas especficas (Gua ISO/ IEC 2: 1996). 2. Certificacin Es el procedimiento por el cual una tercera parte asegura por escrito que un producto, proceso o servicio est conforme con los requisitos especificados (Gua ISO/ IEC 2: 1996). 3. Conclusiones La implementacin del Aseguramiento de la calidad y la validacin de metodologa para anlisis qumicos: Ayuda y beneficia la organizacin Mejora la planificacin Seala los aspectos crticos del mtodo Ayuda a prevenir errores y variables Asegura la documentacin y recoleccin de datos Los problemas potenciales pueden ser identificados y eliminados Mejora la eficiencia Brinda satisfaccin al cliente porque le ayuda a resolver un problema y confiar en los resultados Promueve la calidad y validez de los datos de ensayo mediante un sistema por el cual pueden ser auditados y/ o reconstruidoPosibilita la Acreditacin del LaboratorioFacilita la aceptacin internacional de los datos de ensayo y el comercio. VI. ORGANIZACIONES INTERNACIONALES DE COOPERACIN PARA LA ACREDITACIN ISO (International Organization for Standardization). Desarrolla normas internacionales. IEC (International Electrotechnical Commission). Normaliza en el campo electrotcnico. ILAC (International Laboratories Accreditation Cooperation) integra organismos de acreditacin de laboratorios de todo el mundo (47 pases). IAF (International Accreditation Forum) integra organismos de acreditacin de entidades de certificacin de todo el mundo (42 pases). International Organization for Standardization (ISO) ISO es una organizacin privada que se form en el ao 1947 y tiene su sede en Ginebra Suiza. Son miembros de ISO 148 pases y estn divididos en tres categoras: Organismos miembros: Pertenece un organismo por pas. Participan y votan en los Comits Tcnicos y de ISO (100 miembros). Miembros correspondientes: Organizacin en un pas que no tiene completamente desarrollado la actividad de estandarizacin. No tienen una participacin activa en el trabajo de los comits. (37 miembros) Miembros suscriptores: Pases de pequeas economas. (11 miembros)
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International Laboratories Accreditation Cooperation (ILAC) ILAC fue fundada en 1978 y es una organizacin de cooperacin internacional. En 1996, 44 organismos nacionales firmaron el Memorandum de Entendimiento en msterdam. Los miembros de ILAC son 109 y estn clasificados de la siguiente forma: Miembro pleno: Organismos acreditadores que han sido aceptados como firmantes del Acuerdos de reconocimiento mutuo con ILAC (47 miembros). Miembro asociado: Organismos acreditadores que manejan esquemas de acreditacin de laboratorios, pueden aportar pruebas que los laboratorios operan y cumplen lo normado por ISO, IEC e ILAC, cumplen las obligaciones de los acuerdos mutuos, son reconocidos como acreditadores. (17 miembros). Afiliado: Organismos acreditadores que estn desarrollando el sistema de acreditacin, declaran su intencin de cumplir con las exigencias normativas de ISO, IEC e ILAC (21 miembros). International Accreditation Forum (IAF) El Foro de Acreditacin Internacional (IAF) es la Asociacin mundial de organismos de acreditacin de evaluacin de conformidad. Miembros de IAF: 59 Organizaciones Regionales de Cooperacin para la Acreditacin European Cooperation for Accreditation, EA. Creada el 26 de junio del 2000 se uni la European Accreditation of Certification (EAC) con European co-operation for Accreditation of Laboratories (EAL). Asia Pacific Laboratory Accreditation Cooperation, APLAC. Creada en 1992. Inter American Accreditation Co-operation, IAAC. Creada en 1996 en Montevideo y fue incorporada en el 2001 como una organizacin civil de acuerdo a las leyes mexicanas. Pacific Accreditation Cooperation, PAC. Southern African Development Co-operation in Accreditation, SADCA. Creada en julio 2002. Las organizaciones de acreditacin de los pases participantes en este proyecto y que son miembros de IAAC trabajan de acuerdo a los criterios de acreditacin de esta organizacin La misin fundamental de la IAAC es promover la cooperacin entre los organismos de acreditacin de Amrica, y el desarrollo de las estructuras de evaluacin de la conformidad, para alcanzar la mejora de los productos y servicios suministrados al consumidor. Otras organizaciones internacionales importantes EUROLAB Denmark EURACHEM European Organization for Quality (EOQ) European Organization for Testing and Certification (EOTC) Organization for Economic Co-operation and Development (OECD) The International Organization for Standardization (ISO) International Electrotechnical Comission (IEC)
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North American Cooperation in Metrology (NORAMET) AOAC International (AOAC) The American Society for Testing and Materials (ASTM) US National Conference of Standards Laboratories (NCSL) International Organization of Legal Metrology (OIML) The American National Standards Institute (ANSI) Institute of Electrical and Electronics Engineers Standards (IEEE) American Society for Quality-Measurement Quality Division (ASQ-MQD) American Council of Independent Laboratories (ACIL)
VII. ASEGURAMIENTO DE CALIDAD EN LOS LABORATORIOS DE ANLISIS DE ALIMENTOS EN AMRICA DEL SUR A. Estado actual del aseguramiento de calidad en los laboratorios de anlisis de alimentos en Amrica del Sur Los participantes del taller subregional en coordinacin con los laboratorios miembros de la RILAA prepararon los siguientes documentos: Estado actual del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos, en los laboratorios de alimentos del pas y Propuesta de plan de accin nacional para el fortalecimiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en los laboratorios de alimentos, siguiendo la gua del Anexo 1, puntos I y II respectivamentes, de la Nota de Antecedentes Tcnicos del taller subregional. 1. Homologacin de la norma en los pases Todos los pases participantes en el proyecto TCP/RLA/3013 (A) tienen homologada la Norma ISO/IEC 17025 o la tienen como norma nacional. En la Tabla N 1 se detalla la informacin de cada pas. Tabla N 1. Homologacin de la norma en los pases Pas Argentina Bolivia Brasil Colombia Chile Ecuador Paraguay Per Uruguay Venezuela Homologacin de la norma IRAM 301 NB ISO/IEC 17025 NBR/ISO/IEC/17025 NTC-ISO/IEC 17025 NCh-ISO 17025 Of 2001 NTEINEN 150/IEC 17025-2002 NP-COPANT-ISO/IEC 17025 NTP-ISO/IEC 17025 UNIT/ISO IEC 17025 COVENIN 2534:2000 (ISO/IEC 17025)
2. Laboratorios que respondieron encuesta
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De los 10 pases participantes en este proyecto, respondieron la encuesta un total de 36 laboratorios, de los cuales slo 29 son miembros de la RILAA No contestaron la encuesta de los miembros de la RILAA: 3 1 de Ecuador, 2 de Brasil, mientras que la contestaron no miembros de la RILAA: 6- 1 de Argentina y 5 de Ecuador). En el Anexo N 3 se detalla los pases y los laboratorios participantes. 3. Implementacin del sistema de calidad bajo norma ISO/IEC 17025 Organismos de Acreditacin Tabla N 2. Organismos de Acreditacin de Amrica del Sur Pas Argentina Bolivia Brasil Chile Colombia Ecuador Paraguay Per Uruguay Venezuela Organismo Organismo Argentino de Acreditacin (OAA) Organismo Boliviano de Acreditacin (OBA). Instituto Nacional de Metrologa (INMETRO) Instituto Nacional de Normalizacin (INN) Superintendencia de Industria y Comercio (SIC) Organismo de Acreditacin Ecuatoriano (OAE) Organismo Nacional de Acreditacin (ONA) Instituto Nacional de Defensa de la Competencia y de la Proteccin de la Propiedad Intelectual (INDECOPI). Organismo Uruguayo de Acreditacin (OUA). Servicio Autnomo Nacional de Normalizacin, Calidad, Metrologa y Reglamentos Tcnicos (SENCAMER)
En la Tabla N 3 figuran los laboratorios (doce, de los cuales nueve son miembros de la RILAA)) de Amrica del Sur que tienen totalmente implementado el sistema de calidad y se han sometido a acreditaciones por parte de organismos de acreditacin nacionales o internacionales. Tabla N 3. Laboratorios de Amrica del Sur miembros de la RILAA que tienen implementado el sistema de calidad Pas Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Chile Ecuador Ecuador Ecuador Uruguay Nombre del laboratorio Direccin de Laboratorios y Control Tcnico, Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA) Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Concepcin del Uruguay Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Carnes Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Cereales y Oleaginosas Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Lcteos PTM Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Lcteos Rafaela CEPROCOR - Laboratorio de Pesticidas (*) Laboratorio Central Servicio Agrcola y Ganadero (SAG) Instituto Nacional de Higiene- Guayaquil Laboratorio PROTAL ESPOL (*) DECAB (Laboratorio del Departamento de Ciencia de Alimentos y Biotecnologa (*) Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU)
(*) No son miembros de la RILAA
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En la Tabla N 4 se detallan los laboratorios (diecinueve, de los cuales diecisis son miembros de la RILAA) que estn implementando el sistema de calidad y en los cuales la implantacin del sistema se encuentra en diferentes estados de avance. Tabla N 4. Laboratorios de Amrica del Sur pertenecientes a la RILAA que estn implementando el sistema de calidad Pas Bolivia Bolivia Brasil Chile Chile Colombia Colombia Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Paraguay Per Per Uruguay Uruguay Venezuela Venezuela Nombre del laboratorio Laboratorio de Investigacin y Diagnstico Veterinario Cochabamba (LIDIVECO) Laboratorio Referencial del Oriente Boliviano (LABROB) Laboratorio Adolfo Lutz(**) Seccin Qumica de Alimentos y Aguas del Subdepartamento Laboratorios del Ambiente Laboratorio Regional SAG Regional XII Regin: Pta. Arenas: Unidad de Residuos Laboratorio de Anlisis de Alimentos y Bebidas Alcohlicas del Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos- (INVIMA) Laboratorio Nacional de Insumos Pecuarios LANIP del Instituto Colombiano Agropecuario ICA- rea Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios Laboratorio de Alimentos Procesados del Instituto Nacional de Higiene y Medicina Tropical L. Izquieta Prez Quito Laboratorio de Alimentos Procesados de Cuenca Laboratorio de Ensayos Analticos del INEN (*) Universidad Tcnica Particular de LOJA (*) Instituto Nacional-INIAP (*) Instituto Nacional de Pesca Laboratorio Central de SENACSA - Departamento de Control de Residuos Centro Nacional de Alimentacin y Nutricin (CENAN) Direccin de Laboratorio de Control Ambiental (DIGESA) Divisin Laboratorios Veterinarios. (DILAVE) Laboratorio de bromatologa de la Ilustre Municipalidad de Montevideo Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel Fundacin CIEPE
(*) No son miembros de la RILAA (**) NBR 17.025 e ISO 43 02/2003. Auditores de ANVISA, REBLAS - Red Brasilera de Laboratorios de Salud y reconocido por el Ministerio de Agricultura para anlisis de residuos de plaguicidas en alimentos. En la Tabla N 5 se presentan los laboratorios (cuatro) con menor grado de avance en la implementacin del sistema de calidad. Tabla N 5. Laboratorios de Amrica del Sur miembros de la RILAA con menor grado de avance en la implementacin del sistema de calidad Pas Argentina Argentina Paraguay Paraguay Nombre del laboratorio Instituto Nacional de Alimentos (INAL) Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Mar del Plata Laboratorio del Instituto Nacional de Alimentacin y Nutricin (INAN), (Ministerio de Salud y Bienestar Social) Laboratorio Profesor Dr. Francisco Facetti, Municipalidad de Asuncin
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4. Estado Actual de la Acreditacin de los Laboratorios de Anlisis de Alimentos en Amrica del Sur El Anexo N 5 describe el estado de implementacin y cumplimiento de los requisitos de gestin y de los requisitos tcnicos de la Norma ISO/IEC 17025 en los 36 laboratorios (cinco no son miembros de la RILAA), 29 laboratorios son participantes del proyecto. De los laboratorios que contestaron la encuesta 34% estn acreditados, 26% son miembros de la RILAA Los laboratorios acreditados participantes en este proyecto y los organismos que otorgaron la acreditacin constan en la tabla N 6. El alcance de las acreditaciones otorgadas en el rea de qumica se describen en tabla N 7, estn referidas a ensayos fisicoqumicos, contaminantes, residuos de medicamentos veterinarios y micotoxinas en matrices tales como leche y productos lcteos, productos crneos, miel, harina de trigo, aguas, pescados y productos de pesca, granos y productos, grasas y aceites, cereales y productos cereales. Aproximadamente el 54% tiene aprobado e implementado los procedimientos solicitados por dicha norma mientras que el 46 % de los laboratorios tiene los documentos en distinto grado de avance de los cuales un 14% tiene poco desarrollado el sistema de calidad. Algunos laboratorios no tienen procedimientos para el transporte de muestra lo cual es importante para asegurar los resultados. Un laboratorio contest que no tiene clientes, cabe sealar que los clientes pueden ser internos o externos.
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Tabla N 6. Laboratorios acreditados participantes en este proyecto y los organismos que otorgaron la acreditacin Pas Organizacin Laboratorio Organismo de acreditacin Organismo Argentino de Acreditacin (OAA), 12/2004 Norma ISO/IEC 17025
Argentina Direccin de Laboratorios y Control Tcnico, Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA) Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI)
CEPROCOR (*) Chile Servicio Agrcola y Ganadero (SAG) Laboratorio de Alimentos Procesados Guayaquil. Ministerio de Salud Pblica Laboratorio PROTAL ESPOL (*) DECAB (Laboratorio del Departamento de Ciencia de Alimentos y Biotecnologa (*)
INTI-Concepcin del Uruguay INTI - Carnes. INTI Lcteos INTI- Cereales y Oleaginosas INTI Lcteos Rafaela Laboratorio de Pesticidas Laboratorio Central
ENAC 12/04 UKAS, 10/2004 UKAS, 11/2004 UKAS, 02/2005 ENAC, 03/03 OAA 2005 Instituto Nacional de Normalizacin (INN) 11/2004 Organismo de Acreditacin Ecuatoriano (OAE) 09/2004 Organismo de Acreditacin Ecuatoriano (OAE) 09/2004 American Association for laboratory Accreditation (A21.A). 02-04 Organismo de acreditacin Ecuatoriano (OAE) 09-02 y renov.6/05 United Kingdom Accreditation Service (UKAS) 1998
UNE-EN ISO/IEC 17025: 2000 ISO 17025:1999 ISO 17025:1999 ISO 17025:1999 UNE-EN ISO/ IEC 17025: 2000 ISO 17025:1999 NCh-ISO 17025 Of 2001 NTE INEN 150/IEC170252002 NTE INEN 150/IEC170252002 ISO 17025:1999
Ecuador
NTE INEN 150/IEC170252002
Uruguay
Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU)
Laboratorio de Ensayo
ISO 17025:1999
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Tabla N 7. Alcance de la acreditacin de los laboratorios de anlisis de alimentos de Amrica del Sur Laboratorio Ensayos Matriz Argentina Determinacin de Residuos de Tetraciclinas por Msculo HPLC-DAD Determinacin de Residuos de Tetraciclinas por Leche HPLC-DAD SENASA Determinacin de Residuos de Enrofloxacina CGLA Residuos Hgado por HPLC-FLD Qumicos Determinacin de Residuos de Clembuterol y Hgado Mabuterol por GC-MS Determinacin de Residuos de Dietilstilbestrol Orina por GC-MS Determinacin de protenas Determinacin de humedad Alimentos crneos SENASA Determinacin de extracto de etreo APAC Tecnologa de Determinacin de cenizas alimentos Determinacin de protenas Leche en polvo Determinacin de cenizas SENASA Identificacin de especies por Productos crnicos CGLA-APAC enzimoinmunoanlisis cocidos y conservas Evaluacin y Humedad Miel desarrollo SENASA Composicin en cidos grasos Aceites vegetales CGLV-Granos y subproductosAbsorcin de agua y dems propiedades Harina de trigo qumica y reolgicas utilizando faringrafo micotoxinas Leche y productos lcteos Productos de panadera y confitera / conservas / Determinacin del contenido de metales por chocolate / jugos espectrometra de absorcin atmica en llama Aguas de consumo (Ca, Mg, Fe, Zn, Cu, Mn) Aguas naturales Efluentes lquidos y slidos Alimentos balanceados INTI-Concepcin del Yerba mate / t Uruguay Determinacin del contenido de metales por Cereales y productos de espectrometra de absorcin atmica por panificacin atomizacin electrotrmica (As, Ag, Cd, Co, Aguas de consumo Cr, Ni, Se, Pb) Aguas naturales Efluentes lquidos y slidos Alimentos balanceados Almendras / pasas de uva / manzanilla / menta Pescados y mariscos
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Laboratorio Argentina
Ensayos Determinacin del contenido de metales por espectrometra de absorcin atmica por generacin de hidruros (As y Se)
Matriz Productos lcteos Alimentos balanceados Aguas de consumo Aguas naturales Efluentes lquidos y slidos Aguas de consumo Aguas naturales Efluentes lquidos Pescados y mariscos Productos lcteos Productos de panadera y confitera / conservas / chocolate / jugos Aguas de consumo Alimentos balanceados Aguas de consumo Aguas naturales
Determinacin del contenido de metales por espectrometra de absorcin atmica por vapor fro (Hg)
Determinacin del contenido de metales por espectrometra de emisin (Na y K )
INTI- Carnes
Determinacin de aniones por espectrometra molecular (NO2-, NO3-, SO4-2, F-, PO3-3) Humedad Grasa Protenas Cenizas Nitritos Nitratos Deteccin de glucosa comercial Humedad Slidos Soluble
Carnes y Relacionados
Miel Jugos, bebidas no alcohlicas, jalea, dulces, mermeladas y vegetales en conserva Alimentos, productos a base de cereales y cereales en general Alimentos, productos a base de cereales y cereales en general Harina de trigo Harina de trigo Harina de trigo Leche fluida Leche fluida Leche fluida y en polvo
INTI- Cereales y oleaginosas
Cenizas Humedad Falling Number DON(Deoxinivalenol) Gluten Determinacin del contenido de materia grasa por el mtodo de Rose Gottlieb Determinacin del contenido de materia grasa por el mtodo de Gerber Determinacin del contenido de nitrgeno por el mtodo del bloque digestor
INTI- Lcteos PTM
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Laboratorio Argentina
Ensayos Determinacin del punto de congelacin Determinacin de contenido de slidos totales Determinacin de contenido de slidos totales Recuento de clulas somticas por microscopa ptica Recuento de clulas somticas por mtodo fluoro-opto-electrnico Determinacin del contenido de humedad Determinacin de protenas y slidos totales por mtodo infrarrojo Residuos de pesticidas Organoclorados y Organofosforados Composicin de los cidos grasos de la materia grasa Contenido de Materia Grasa Contenido de Materia Grasa Contenido de Materia Grasa Contenido de Protenas Contenido de Slidos Totales Contenido de Cenizas Contenido de Lactosa Contenido de Humedad Contenido de Slidos Totales Residuos de Plaguicidas Leche fluida Leche fluida
Matriz
Dulce de leche Leche fluida Leche fluida Leche en polvo Leche fluida Leche fluida y polvo Grasa Leche fluida Leche en polvo entera y descremada Queso y queso procesado Leche y leche en polvo Leche fluida Leche fluida Leche fluida Leche en polvo Queso y queso procesado Alimentos con contenido graso de origen vegetal y animal
INTI- Lcteos Rafaela
CEPROCOR (*) Laboratorio de Pesticidas Chile Servicio Agrcola y Ganadero (SAG) Lab. Central Ecuador Laboratorio de Alimentos Procesados Guayaquil. Ministerio de Salud Pblica Laboratorio PROTAL ESPOL (*)
Bioensayos toxicidad aguda -Daphnia magna
Aguas
Humedad Grasa o extracto etreo Humedad Humedad Grasa Protena Humedad Humedad pH pH
Crnicos Crnicos Mantequilla Queso Leche en polvo Leche en polvo Cereales y derivados-harinas Quesos Alimentos acidificados Productos del mar ( pescado freso, refrigerado y congelado)
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Laboratorio Ecuador DECAB (Laboratorio del Departamento de Ciencia de Alimentos y Biotecnologa (*)
Ensayos
Matriz Cereales y derivados de cereales
Protenas Extracto Etreo Grasa Humedad Cenizas Fibra Cruda Fsforo Protena DECAB Grasa (Laboratorio del Humedad Departamento de Cenizas Ciencia de Alimentos Fsforo y Biotecnologa (*) pH ndice de refraccin Gravedad especfica Nmero de saponificacin ndice de Yodo (WIJS) ndice de acidez ndice de perxido Humedad y materia voltil Slidos totales y humedad Slidos solubles Grados Brix Acidez titulable cido ascrbico Azcares reductores y sacarosa Cenizas pH Protena Extracto etreo pH Peso drenado Slidos totales y humedad Acidez Cloruro de sodio
Carnes y sus productos
Aceites comestibles
Frutas y sus productos
Vegetales y productos procesados
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Protena Extracto etreo Acido ctrico Humedad y slidos totales Slidos solubles (Grados Brix) Acidez libre Azcares reductores y sacarosa Cenizas Acidez titulable ndice de Yodo ndice de refraccin Prdida de calentamiento ndice de saponificacin Laboratorio Ensayos Ecuador DECAB Fe, Zn, Na, Ca (Laboratorio del Departamento de Ciencia de Alimentos Vitamina A y Biotecnologa (*) Vitamina C Uruguay Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU
Mermeladas y frutas secas
Mantequilla
Matriz Cereales y sus derivados Frutas y vegetales (frescos y procesados) Jugos, alimentos deshidratados y alimentos frescos procesados (previa deshidratacin por liofilizacin)
Alcalinidad total Cloruros Dureza total pH Residuo seco a 180C Slidos disueltos totales Alveograma Cenizas Falling Number Farinograma Gluten Humedad Calidad de Arroz Humedad Materias Extraas cidos Grasos libres Sustancias extrables por un solvente Actividad de agua Humedad Peso Neto Humedad Nitrgeno Humedad
Aguas potables y minerales
Harina de trigo
Arroz
Alimentos Alimentos Productos panificados Productos panificados Cebada Cebada Malta
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Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU
Nitrgeno Acidez Color Lovibond Impurezas Ins. en eter ndice de Iodo Humedad y Materia Voltil Perxidos Materia Insaponificable Punto de Fusin Plomo Cobre Hierro Cinc Manganeso Calcio Sodio Cromo Aflatoxina B1, B2, G1, G2
Malta
Grasas y aceites
Aguas
Aflatoxina M1 Aflatoxina M1 Zearalenona Ocratoxina A Deoxinivalenol Deoxinivalenol Alcaloides del ergot Fumonisina B1 , B2 Acidez Cenizas totales Slidos solubles pH Acidez libre Color Humedad Humedad Protena (nitrgeno total) Cenizas Acidez libre Humedad
Granos, cereales (materia prima, productos derivados y productos terminados), raciones, frutos secos Productos lcteos Leche en polvo Granos, cereales (materia prima, productos derivados y productos terminados), raciones, frutos secos Maz y producto terminado Jugos de fruta, pickles, aceitunas Especies, conservas de tomate, harinas, caldos Dulces, jugos de fruta, fruta en almbar, pulpas de fruta, conservas de tomate Conservas, jugos, dulces, salsas Miel
Productos crnicos
Casena Butteroil
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Acidez oleica Cenizas Humedad Humedad Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU Humedad Cenizas Cloruros Materia grasa Materia grasa Acidez titulable Cenizas Humedad Materia grasa Materia grasa Materia grasa Extracto seco Acidez lctica Materia grasa Humedad Cenizas Protena (Nitrgeno total) pH pH
Manteca, butteroil, grasa lctea Casena y caseinatos Casena caseinatos, productos lcteos en polvo Quesos Leche en polvo, queso en polvo Queso y queso en polvo Quesos, queso en polvo Quesos Crema Leche en polvo Leche en polvo, y otros productos lcteos en polvo. Leche en polvo, queso en polvo Leche en polvo Casena caseinatos, productos lcteos en polvo Leche Leche crema Leche, crema, suero Quesos, queso en polvo, dulce de leche Dulce de leche y leche condensada Leche y otros productos lcteos lquidos y semislidos. Leche y productos lcteos Leches, quesos Casena, caseinatos, productos lcteos en polvo
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B. Planes de accin nacionales para fortalecer el sistema de aseguramiento de calidad en los laboratorios de anlisis de alimentos en Amrica del Sur La forma en que cada pas envi el Plan de Accin se detalla a continuacin en la Tabla N 8. Los planes de accin nacionales se encuentran en los documentos del CD-ROM, distribuidos a los participantes del taller, en el punto Aseguramiento de calidad y Acreditacin. Informes de los pases. Tabla N 8. Planes de Accin Nacionales para Fortalecer el Sistema de Aseguramiento de Calidad en los Laboratorios de Anlisis de Alimentos participantes en el Proyecto TCP/RLA/3013 (A) Pas ARGENTINA LABROB LIDIVECO Instituto Adolfo Lutz INVIMA LANIP SAG Central Instituto de Salud Pblica SAG XII Regin INHMT-Quito, INHMT Guayaquil, INHMT Cuenca Instituto Nacional de Pesca DECAB ESCUELA POLITCNICA INAN SENACSA Municipalidad de Asuncin INAN CENAN LATU DILAVE IMM Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel Fundacin CIEPE Plan de accin nacional Plan de accin por laboratorio SENASA INTI INAL
BOLIVIA BRASIL COLOMBIA CHILE ECUADOR
PARAGUAY PERU URUGUAY
VENEZUELA
VIII. PLAN DE ACCIN SUBREGIONAL En el taller se realizaron trabajos de grupo en donde se analizaron los problemas detectados y se especificaron las estrategias y las acciones a desarrollar para cada problema detectado. En sesin plenaria se discuti y aprob el plan sealado a continuacin, que ser aplicado por los pases segn diversos grados de avance en el tema.
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Plan de Accin subregional para el fortalecimiento del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en laboratorios de alimentos en Amrica del Sur Problema identificado Algunos laboratorios tienen implementado el sistema de gestin Calidad y muy pocos estn acreditados segn la Norma ISO 17025 como respaldo para el reconocimiento de la competencia tcnica, de los sistemas de evaluacin de la conformidad de los pases. Estrategia Sensibilizacin de las autoridades de las instituciones para lograr un mayor compromiso en la implementacin del sistema. Difusin, sensibilizacin e interaccin con las autoridades gubernamentales para la promocin y adopcin de polticas que tiendan a la implantacin del sistema de gestin de calidad en los laboratorios. Fortalecimiento de la estructura de recursos humanos para la operacin eficaz del sistema de gestin de calidad a travs de capacitacin, motivacin y dedicacin exclusiva (cuando la legislacin lo permita). Acciones a desarrollar Distintas actividades de concientizacin, por parte de organismos internacionales, en referencia a la importancia de la implementacin del sistema de gestin de calidad en los laboratorios, para asegurar la salud de la poblacin y el comercio internacional.
Asignacin de personal de dedicacin exclusiva y con adecuada competencia para la implementacin del sistema. Fomentar que las autoridades se comprometan a proveer los recursos financieros para la asignacin de personal y capacitacin, contratacin de consultores, si es necesario. Programar y realizar reuniones Promocin ante las con las autoridades competentes y autoridades competentes del apoyo institucional explcito y sectores pblicos y privados involucrados, para el desarrollo de el compromiso para el desarrollo y la adopcin de polticas institucionales de calidad, y mayor apoyo a las polticas de polticas de calidad. calidad de los laboratorios de Desarrollar en cada pas anlisis de alimentos. Exponer ante las autoridades una estrategia de integracin de todos los sectores pblicos gubernamentales los beneficios y privados involucrados en el para la salud y la economa del control de la inocuidad de los pas, cuando los resultados alimentos con apoyo de la analticos provienen de un laboratorio acreditado de acuerdo RILAA y para el fortalecimiento de los a la Norma ISO 17025. laboratorios de control de alimentos, tanto a nivel de competencia tcnica como de recursos financieros.
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Estrategia Difusin, sensibilizacin y capacitacin de los recursos humanos de las organizaciones con respecto a la importancia de las herramientas de gestin (considerando todos los aspectos y actualizando el concepto sobre clientes y contratos), para el aseguramiento de la calidad de los resultados. La mayora de los Establecer el mecanismo laboratorios no subcontrata de subcontratacin sealando servicios porque los la importancia de la laboratorios a subcontratar implementacin de la Norma no garantizan el ISO 17025 y el logro de cumplimiento de la Norma mayores mercados. ISO 17025.
Problema identificado
Acciones a desarrollar Programar la capacitacin e implementarla, ya sea con financiamiento propio o, si es necesario, con recursos externos. Carta de entendimiento, asesores RILAA. Elaborar proyectos de cooperacin bilateral, multilateral de capacitacin.
Algunos pases no realizan seleccin ni evaluacin de proveedores y hay poca disponibilidad de proveedores acreditados.
Implementar desde el laboratorio el sistema de seleccin de proveedores y realizar tarea de concientizacin para que el sistema de administracin lo incorpore. Difundir entre los proveedores la necesidad que estn acreditados.
Dar difusin y seguimiento a planes de accin relacionados (Proyecto FAO y otros, RILAA, etc.) Talleres de sensibilizacin y difusin de la importancia de la implementacin de la Norma ISO 17025. Difundir y dar seguimiento a las recomendaciones de los talleres subregionales del Proyecto de la FAO TCP/RLA/3013. Realizar reuniones de coordinacin con las autoridades institucionales encargadas de los procedimientos de adquisicin de bienes y servicios, respecto a los requisitos de la Norma ISO 17025. Elaborar procedimientos para la seleccin de proveedores. Contar con un listado de proveedores evaluados, aprobados y rechazados a disposicin de los procedimientos de adquisicin de bienes y servicios. Establecer criterios mnimos para la evaluacin de proveedores, a travs del grupo QA de la RILAA, para que cada laboratorio considere su inclusin en los Procedimientos Operativos Estandarizados.
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Problema identificado Pocos pases mantienen contacto con los clientes y hay dificultad en que los clientes contesten las encuestas.
Estrategia Mantener contacto permanente con los clientes. Ampliar los medios para que los clientes puedan contestar la encuesta de evaluacin de conformidad del cliente.
Se reciben pocas quejas.
Deficiente mantenimiento de los registros de la resolucin de reclamos.
Buscar mecanismos para que los clientes tengan ms posibilidades de presentar quejas. Garantizar el registro, seguimiento y resolucin de las quejas.
Dificultad para completar el formulario de satisfaccin al cliente. Confusin entre los conceptos de correccin y accin correctiva. Es escasa la identificacin de las mejoras y las potenciales fuentes de no conformidades. Se toman pocas acciones preventivas. Escasos procedimientos para proteger registros almacenados electrnicamente. Es deficiente el registro de informes de AI, AC, AP y revisiones de la gerencia. Algunos pases no realizan auditorias internas, tampoco se planifican y no se cuenta con personal calificado. Escasas revisiones de la gerencia o direccin.
Facilitar el tratamiento de las no conformidades realizando actividades de capacitacin.
Acciones a desarrollar Asegurar la disponibilidad del material impreso, divulgativo y de consulta necesario. Visitas peridicas, si es posible, para facilitar la comunicacin y generar informes de inters. Publicar la encuesta en Internet, ubicar encuestadores en los lugares de atencin a los clientes y realizar una encuesta ms accesible. Redisear los formularios de registro de quejas y publicarlos por Internet, realizar la distribucin impresa y habilitar una lnea telefnica, si es posible, para la atencin al cliente. Capacitar al personal que procesa la informacin obtenida. Informar al cliente sobre el estado de su queja. Realizar talleres donde se presenten casos prcticos de no conformidades y se explique y discuta como tratarlas.
Realizar actividades de capacitacin.
Realizar talleres donde se presenten casos prcticos de acciones preventivas (AP) y se analicen posibles AP para implementar. Realizar la proteccin y respaldo de los registros electrnicos. Mantener todos los registros.
Elaborar, aprobar e implementar el procedimiento.
Realizar cursos de capacitacin y establecer programas de Auditorias internas. Concientizar sobre el valor de las mismas para mejorar la gestin.
Gestionar los fondos necesarios para la realizacin de capacitacin en auditorias internas.
Documentar e implementar.
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Problema identificado En pocos pases la infraestructura edilicia no cumple con los requisitos, no hay sistema de tratamiento de desechos ni plan de bioseguridad.
Escaso acceso a la normativa oficial actualizada.
Estrategia Promover la adecuacin de las instalaciones asignando el presupuesto por parte de las autoridades. Promover la implementacin del sistema de tratamiento de desechos y el plan de bioseguridad. Promover la obtencin y difusin de normativa oficial actualizada.
Acciones a desarrollar Difundir la incidencia de las condiciones ambientales en la calidad de los resultados, acondicionar las instalaciones. Implementar el sistema de tratamiento de desechos y el plan de bioseguridad.
No se validan ni verifican los mtodos, no se realiza la estimacin de Incertidumbre.
Escaso control de datos y del software usado por el laboratorio. No se protegen los datos. Escaso acceso a la informacin sobre criterios para verificaciones y calibraciones de equipos Dificultad para contratar laboratorios de calibracin ISO 17025.
El programa de calibracin no es sostenible por falta de recursos.
Gestionar recursos para adquirirla y socializarla. Solicitar a FAO y a los organismos de normalizacin de cada pas, realizar la difusin de la Normativa. Elaborar Guas Terico Capacitar al personal y Prcticas sobre Procedimiento para concientizarlo sobre la validacin de mtodos y importancia de validar mtodos. determinacin de incertidumbre segn reas analticas. A travs de grupos de Gestionar fondos nacionales trabajo interinstitucionales, discutir criterios de validacin para realizar la rplica de cursos Proyecto TCP/ RLA/3013 (A), y/o aplicados a cada laboratorio. a travs de organizaciones de cooperacin tcnica y financiera bilateral o multilateral. Implementar el control de Establecer los sistemas de datos a nivel de laboratorios e control de datos segn software, obtener recursos para este fin. institucional. Recopilar normas y Realizar talleres con expertos. experiencia de expertos en calibracin. Identificar recursos a nivel de organizaciones nacionales e Fortalecer los laboratorios internacionales de cooperacin. oficiales de calibracin y/ o Promover entre los proveedores promover su creacin. el cumplimiento de la norma ISO Contar con proveedores 17025. que tengan equipos trazables. Gestionar ante las autoridades la priorizacin de recursos para la Incluir los recursos calibracin y mantenimiento de financieros en el presupuesto equipos. anual para el Programa de Capacitar al personal para que calibracin. realice calibraciones internas con material trazable. Solicitar al Organismo de Acreditacin el listado de Laboratorios de Calibracin Acreditados, y que incentive a los Laboratorios de Calibracin que logren la acreditacin.
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Problema identificado
No existen proveedores de ensayos de intercomparacin (PT) para todas las matrices y ensayos, y el costo es elevado.
Faltan patrones, materiales de referencia y tienen costo elevado. Dificultad en obtener material de referencia
Problemas en el retiro de las muestras de ensayo de la aduana. No se analiza y ni documentan las tendencias de resultados de ensayos intra e interlaboratorios.
Hay reactivos que no indican toda la informacin requerida.
Acciones a desarrollar Priorizacin de Equipos Crticos del laboratorio para el Programa de Mantenimiento y Calibracin. Difusin de la Gua Tcnica de la RILAA. Gestin ante los Organismos Nacionales de acreditacin sobre los equipos que requieren calibracin. Identificar proveedores de Participar en PT internacionalmente reconocidos patrones y materiales de Produccin regional de PT, referencia. Comprometer a la logstica participar en PT nacionales con laboratorios acreditados y/ o que administrativa. demuestren capacidad tcnica, Aumentar las participacin espordica en PT comparaciones con Internacionales. laboratorios nacionales e internacionales, adquirir Identificar y seleccionar materiales de referencia proveedores MR, gestionar la certificados y promover la adquisicin de patrones y de incorporacin de los analitos materiales de referencia. de inters en las rondas. Compra MR y MRC a NIST, Promover la divulgacin IRMN, LGC, etc. de los ensayos interlaboratorios disponibles. Gestionar fondos para la Aumentar la disponibilidad compra mediante alianzas estratgicas, convenios y de recursos para la proyectos Nacionales y participacin en PT y la Regionales. Convenio con LGC adquisicin de patrones y Inglaterra. materiales de referencia. Coordinar con logstica Crear un Banco de administrativa y agencias de Patrones y Material de cooperacin tcnica. Referencia a travs de la Utilizar anlisis estadsticos RILAA/FAO, para la para evaluar los ensayos Inter e adquisicin a menor precio. intralaboratorios. Establecer los criterios de aceptacin. Coordinar con agencia Registrar los resultados y las cooperantes internacionales acciones correctivas para agilizar el desaduanaje. correspondientes. Implementar el anlisis y documentar las tendencias de Contactar proveedores e indicar dentro de las especificaciones los resultados de los ensayos tcnicas que la informacin intra e interlaboratorios y requerida en los certificados es registrar los resultados. imprescindible. Exigir que todos los reactivos cuenten con toda la informacin requerida.
Estrategia
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Problema identificado Estrategia No se emplean normas Establecer reuniones con para realizar los muestreos. los sectores involucrados para armonizar e implementar los criterios de muestreo. En varios pases, en el Implementar los requisitos informe de resultados no de la Norma ISO 17025. consta nombre ni direccin del laboratorio, mtodo utilizado, nombre ni direccin del cliente, no se informa incertidumbre si el cliente la solicita.
Acciones a desarrollar Documentar, difundir y aplicar las normas de muestreos establecidas. Promover el cumplimiento de la Norma ISO 17025.
IX. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES Conclusiones 1. El presente taller ha servido para actualizar y profundizar el conocimiento sobre aseguramiento de calidad y validacin de mtodos qumicos, as como conocer la situacin en la que se encuentran los laboratorios participantes del proyecto en cuanto al grado de avance del aseguramiento de la calidad de los resultados analticos y validacin de mtodos qumicos en cumplimiento de la Norma ISO/IEC 17025. 2. Se evidencia la heterogeneidad existente entre los laboratorios en cuanto al nivel actual de implementacin del sistema de aseguramiento de la calidad y validacin de mtodos qumicos, no obstante se destaca la importancia y necesidad de los mismos de alcanzar la acreditacin tomando en cuenta la proteccin de la salud de los consumidores y las exigencias de los mercados internacionales para el comercio de alimentos inocuos. 3. El mecanismo de trabajo propuesto por la FAO para la preparacin del presente taller, la informacin aportada por los pases, la consolidacin realizada y el anlisis conjunto de la misma ha permitido establecer y aprobar propuestas de estrategias y plan de accin consensuado con el compromiso de los participantes para su difusin e impulso en los respectivos pases. Recomendaciones A los Directores Nacionales del Proyecto TCP/RLA/3013 (A) y a los participantes del taller subregional 1. Dar difusin y seguimiento a los Planes Nacionales (que figuran en el CD ROM distribuidos a los participantes del taller) y al Plan Subregional para el fortalecimiento de los sistemas aseguramiento de calidad analtica y validacin de mtodos qumicos en los laboratorios de anlisis de alimentos de Amrica del Sur. 2. Dar difusin y seguimiento a los Planes Nacionales (que figuran en el CD ROM) y al Plan Subregional para la validacin de mtodos qumicos, y promover la acreditacin de los laboratorios de anlisis de alimentos de Amrica del Sur.
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3. Promover la inscripcin y participacin institucional de los laboratorios miembros de la RILAA en el grupo tcnico de gestin de la calidad y el grupo tcnico de qumica. 4. Dar cumplimiento al plan de trabajo del proyecto TCP/RLA/3013 que se incluye en el Anexo N 6 de este informe. 5. Distribuir el CD ROM y el informe final del taller subregional a los laboratorios miembros de la RILAA y a aquellos que participaron en la preparacin de los documentos nacionales. 6. Promover la conformacin y/ o el fortalecimiento de las Redes Nacionales de laboratorios de anlisis de alimentos. A los Directores Nacionales del Proyecto TCP/RLA/3013 (A), Laboratorios miembros de la RILAA, FAO e INPPAZ/OPS 7. Gestionar en los niveles de decisin poltico y tcnico, mediante visitas a las autoridades ejecutivas y a los laboratorios de cada institucin miembro de la RILAA, el apoyo necesario para fortalecer el sistema nacional de aseguramiento de calidad y la acreditacin de los laboratorios de anlisis de alimentos, as como implementar los Planes Nacionales, y el Plan Subregional elaborado y aprobado en el taller subregional.
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ANEXO N 1 Lista de participantes
ARGENTINA Laura Andrea De Gracia Coordinadora Unidad Tcnica Fsico Qumico INTI, Instituto Nacional de Tecnologa Industrial Centro Regional Mesopotamia Ruta nacional 14 Km. 124 Concepcin del Uruguay Entre Ros Telfono: (54)3442443645 Fax: (54)3442443676 Correo electrnico: ladg@inti.gov.ar Sitio Web: www.inti.gov.ar Silvana Ruarte Profesional Departamento Control y Desarrollo Instituto Nacional de Alimentos, Ministerio de Salud Estados Unidos 25 Buenos Aires Telfonos: 43400800 Extensiones: 2520 al 2522 Fax: 43400800 Extensin: 3522 Correo electrnico: sruarte@anmat.gov.ar Sitio Web: www.anmat.gov.ar BOLIVIA Jos Pedraza Roca Jefe de Laboratorio Laboratorio Referencial del Oriente Boliviano LABROB ALIMENTOS Calle Venezuela No. 55 Campus Universitario Pabelln 143 Santa Cruz Telfono: 0591-3-3335306 Correo electrnico: labrob@cotas.com.bo Eliana Rocha Responsable tcnico y de calidad Instituto Nacional de Laboratorios de Salud Calle Rafael Zubieta # 1889. La Paz Telfono: 2226048 Fax: 2226670 Correo electrnico: eliana0007@yahoo.com.mx
BRASIL Alice Momoyo Ata Sakuma Jefe de Laboratorio Laboratorio Adolfo Lutz Avenida Dr. Arnaldo 355 Cdigo postal 01246 902 Sao Paulo Telfono: 1130682924 Fax: 30625363 Correo electrnico: alice@ial.sp.gov.br Sitio Web: www.ial.sp.gov.br. Mara Soares Artiaga Coordinadora de laboratorios de Agricultura Ministerio de Agricultura Explanada dos Ministerios Bloco D, Sala 433, Basilia Telfono: (61) 32182277 Correo electrnico: msartiaga@agricultura.gov.br Sitio Web: www.agricultura.gov.br. Celso Roberto Versiani Velloso Fiscal Federal Agropecuario Ministerio de Agricultura Coordenacao Geral de Apoid Laboratorial Esplanada dos Ministerios Bloco D, Anexo, Sala 432-B Brasilia DF Telfono: (61) 3218-2259/2277 Fax: (61) 3218-2697 Correo electrnico: velloso@agricultura.gov.br CHILE Jos Rubn Chamorro Olivares Qumico Servicio Agrcola y Ganadero Ruta 68 Km. 22 Pudahuel Santiago Telfono: 056 2 3451843 Fax: 056 2 3451802 Correo electrnico: jose.chamorro@sag.gob.cl
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Soraya Sandoval Riquelme Jefe de Laboratorio de Aguas Instituto de Salud Pblica de Chile Marathon 1000 uoa Santiago de Chile Telfono: 3507379 Fax: 056 2 3507589 Cooreo electrnico: soraya@ispch.cl Sitio Web: www.ispch.cl COLOMBIA Patricia Botero Arias Coordinadora Laboratorio Fisicoqumico Alimentos Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos INVIMA Avenida calle 26 # 51-60, Bogot Telfono: 3151970 Fax: 3151970 Correo electrnico: pboteroa@invima.gov.co Sitio Web: www.invima.gov.co Ren Alejandro Castro Jimnez Coordinador Laboratorio Nacional de Insumos Agrcolas Instituto Colombiano Agropecuario ICA Km 14 Va Occidente Tibaitat Mosquera Telfono: 4227364 Fax: 4227363 Correo electrnico: lania@ica.gov.co Sitio Web: www.ica.gov.co Gloria Ins Gonzlez Luna Profesional Especializado Instituto Colombiano Agropecuario ICA Km 14 Va Occidente Tibaitat Mosquera Telfono: 4227363 Fax: 4227363 Correo electrnico: chia13es@yahoo.es Sitio Web: www.ica.gov.co
Olga Lucia Lpez Lara Profesional Universitario Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos INVIMA Avenida Calle 26 No. 51-60, Bogot Telfono: 3151970, 2207700 extensin: 328 Fax: 3151970 Correo electrnico: ollopez@yahoo.com Sitio Web: www.invima.gov.co Mara Cristina Malagn Martnez Profesional Universitario Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos INVIMA Avenida Calle 26 No. 51-60, Bogot Telfono: 3151970, 2207700 extensin: 328 Fax: 3151970 Correo electrnico: mmalagonm@invima.gov.co Sitio Web: www.invima.gov.co Jos J. Moreno Profesional Especializado Instituto Colombiano Agropecuario ICA Km 19 Va Facatativ, frente a Ponque Ramo Telfono: 4238730 / Fax: 8275359 Correo electrnico: jose.moreno@ica.gov.co Sitio Web: www.ica.gov.co Consuelo Quinche Crdoba Profesional Universitario Contratista de Laboratorio Alimentos y Bebidas Alcohlicas Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos INVIMA Avenida Calle 26 No. 51-60 Bogot Telfono: 3151970, 2207700 extensin: 328 Fax: 3151970 Correo electrnico: cquinchec@invima.gov.co Sitio Web: www.invima.gov.co Clara Elvira Ramrez Profesional Especializado Instituto Colombiano Agropecuario ICA (LANIP) Km 19 va Occidente va Facatativ, frente a Ponque Ramo Telfono: 2325315 Fax: 4238730 Correo electrnico: clara.ramirez@ica.gov.co Sitio Web: www.ica.gov.co
Elizabeth Jimnez Laverde Profesional Univ- -Laboratorio de Alimentos y Bebidas Alcohlicas Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos INVIMA Avenida Calle 26 No. 51-60, Bogot Telfono: 3151970, 2207700 extensin: 328 Fax: 3151970 Correo electrnico: ejimenezl@invima.gov.co Sitio Web: www.invima.gov.co
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Hugo Andrs Rodrguez Fajardo Profesional Especializado Instituto Colombiano Agropecuario ICA Km 14 Va Occidente Tibaitat Mosquera Telfono: 4227364 Fax: 4227363 Correo electrnico: lania@ica.gov.co hugoquimico@yahoo.com Sitio Web: www.ica.gov.co ECUADOR Susana Espin Responsable Departamento Nutricin y Calidad Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIAP Estacin Experimental Santa Catalina, Panamericana Sur Km 17, Quito Telfono: 593 2 3007134 Fax: 593 2 3007134 Correo electrnico: frrivera@uio.satnet.net Sitio Web: www.iniap.com Rossana Ivonne Gonzlez Guzmn Analista Profesional 1 Instituto Nacional de Higiene y Medicina Tropical Leopoldo Izquieta Prez Julian Coronel y Esmeraldas Guayaquil Telfono: 2282281 Correo electrnico:mmanzo@inh.gov ivonneg@telconet.net PARAGUAY Florentina Bentez Areco Jefe Departamento Laboratorio Profesor Dr Francisco Facetti, Municipalidad Asuncin Avenida Mariscal Lpez y Capitn Bueno Telfono: 663368 Telfono: 663368 Correo electrnico: direccionsalud@mca.gov.py Lucila Margarita Patio Carballo Jefe de Laboratorio de Alimentos Instituto Nacional de Alimentacin y Nutricion (INAN) Avenida Santisima Trinidad E/Itapa, Asuncin Telfono: 206874 / Fax: 206874 Correo electrnico: lucilpat@yahoo.com.ar
PER Marilyn Catherine Castillo Silva Jefe de Laboratorio Bromatologa Direccion General de Salud Ambiental, DIGESA Calle las Amapolas 350 URB San Eugenio Lince, Lima 14 Telfono: 4428353 Correo electrnico: mcastillo@digesa.minsa.gob.pe marilynccs@hotmail.com Sitio Web: www.digesa.sld.pe Silvia Robles Cebrin Analista Qumica (Responsable del rea de espectrofotometra) Instituto Nacional de Salud Centro Nacional de Alimentacin y Nutricin Tizn y Bueno # 276 Jess Mara Telfono: 4639588 Fax: 4639588 Correo electrnico: srobles@ins.gob.pe silvirob262@yahoo.es Sitio Web: www.ins.gob.pe URUGUAY Nancy Machado Asesor MGAP,DILAVE Divisin Proteccin de Alimentos Seccin Residuos Biolgicos Cno Maldonado Km 17500 Montevideo Telfono: 2221063 extensin: Int. 121 Fax: 2221157 Correo electrnico: nmachado@mgap.gob.uy Sitio Web: www.mgap.gob.uy Carmen Ins Villa Directora Laboratorio Qumico Intendencia Municipal de Montevideo Isla de Flores 1323 Montevideo Telfono: 02(900.58.48) Fax: 02(900.20.56) Correo electrnico: vipais@adinet.com.uy bromatolab@correo.imm.gob.uy
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VENEZUELA Maira Gonzlez Investigadora, Division Fisico quimica Fundacin CIEPE, Centro de Investigaciones del Estado para la Produccion Agroindustrial Zona Industrial Agustn Rivero Estado Yaracuy San Felipe Telfono: 0254-2313392 Fax: 0254-2313807 Correo electrnico: mgonzalez@ciepe.gob.ve Sitio Web: www.ciepe.gob.ve Mara Tovar Jefe Farmacutico Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel Ciudad Universitaria Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel Los Chaguaramos, Caracas Telfono: 6932863 Fax: 6932863 Correo electrnico: mimilagros@cantu.net mpolanco@inhrr.gov.ve
FAO Nora Angelini Consultora Internacional de la FAO Borges 2134 5o B (1425), ciudad de Buenos Aires. Telfono: 54-11-4778-1922 Fax: 54-11-4836 0066 Correo electrnico: nangelin@senasa.gov.ar Sitio Web: www.fao.org
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ANEXO 2 PROGRAMA Lunes 28 08.00 - 08.30 08.30 - 09.30 Inscripcin de los participantes Inauguracin Palabras de bienvenida Dr. Daro Fajardo, Subrepresentante de la FAO en Colombia Palabras de inauguracin Dr. Carlos Alberto Robles Cocuyame. Subdirector de Alimentos y Bebidas Alcohlicas INVIMA 09.30 - 10.00 10.00 - 10.30 Receso Presentacin de los participantes y explicacin de los objetivos y logstica del taller Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Ing. Patricia Botero, Directora Nacional del Proyecto TCP/RLA/3013
Primera parte: Revisin de los requisitos relativos a la gestin y tcnicos de la Norma ISO/IEC 17025 1999 y Buenas Prcticas de Laboratorio Coordinador: Patricia Botero Arias INVIMA Relator: Elizabeth Jimnez Laverde INVIMA 10.30 - 11.30 Revisin de los requisitos relativos a la gestin de la Norma ISO/IEC 17025 1999 y Buenas Prcticas de Laboratorio Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Revisin de los requisitos relativos a la gestin de la Norma ISO/IEC 17025 1999 y Buenas Prcticas de Laboratorio (continuacin) Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Discusin Receso Revisin de los requisitos tcnicos de la Norma ISO/IEC 17025 1999 y Buenas Prcticas de Laboratorio Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Discusin
11.30 - 12.30
12.30 - 13.00 13.00 - 14.30 14.30 - 15.30
15.30 - 16.00
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16.00 - 16.30 16.30 18.00 Martes 29 08.30 09.30 09.30-10.00 10.00 11.30
Receso Trabajos de grupo: Elaboracin de procedimientos, instructivos de trabajo y registros
Plenaria: Presentacin y discusin de trabajos de grupo Receso Revisin de los requisitos tcnicos de la Norma ISO/IEC 17025 1999 y Buenas Prcticas de Laboratorio (continuacin) Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Discusin Segunda parte: Validacin de metodologa para anlisis qumicos Coordinador: Olga Lpez Lara, INVIMA Relator: Consuelo Quinche Crdoba INVIMA Validacin de metodologa para anlisis qumicos. Objetivo, definiciones, criterios Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO
10.30 - 11.00 11.00 12.30
12.30 13.00 13.00 14.30 14.30-15.30
Discusin Receso Validacin de metodologa para anlisis qumicos. Diseo, ejecucin e informe Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Discusin Receso Trabajos de grupo: Elaboracin de procedimiento para el diseo de validacin de mtodos Plenaria: Presentacin y discusin de trabajos de grupo
15.30 16.00 16.00 16.30 16.30 - 17.30
17.30 - 18.30
Mircoles 30 08.30 - 09.30 Definicin y evaluacin de parmetros analticos Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Discusin Competencia analtica. Equipos, verificaciones, patrones y materiales de referencia, rastreabilidad de las mediciones, registros Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO
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09.30 - 10.00 10.00 - 11.30
11.30 - 12.00 12.00 - 13.00
Receso Aseguramiento de la calidad de los resultados y requisitos de informe Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Tarde libre
Jueves 1 08.30 - 09.30 Trabajo de grupos Evaluacin de parmetros analticos. Competencia analtica Receso Trabajo de grupos Equipos. Verificaciones, patrones y materiales de referencia, rastreabilidad de las mediciones. Registros Receso Trabajo de grupos Aseguramiento de la calidad de los resultados. Requisitos de informe Receso Plenaria: presentacin y discusin de trabajos de grupo Receso Tercera parte: Estado actual y propuesta de plan de accin subregional para el fortalecimiento del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en laboratorios de alimentos en Amrica del Sur Coordinador: Clara Ramrez LANIP-ICA Relator: Jos Moreno LANIP-ICA Estado actual del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para laboratorios de qumica en Amrica del Sur Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO 17.30 - 18.00 Viernes 2 08.30 - 09.15 Propuesta de plan de accin para el fortalecimiento del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en los laboratorios de alimentos en Amrica del Sur. Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Trabajo de grupos: Anlisis de la propuesta de plan de accin para el fortalecimiento del aseguramiento de calidad y validacin de metodologa para anlisis qumicos en los laboratorios de alimentos de Amrica del Sur
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09.30 - 10.15 10.15 - 11.30
11.30 - 12.00 12.00 - 13.00
13.00 14.30 14.30 - 16.00 16.00 - 16.30 16.30 - 17.30
Discusin
09.15 - 10.45
10.45 - 11.15 11.15 - 11.45
Receso Continuacin trabajo de grupos: plan de accin subregional
11.45 13.00
Plenaria: Resultados de los trabajos de grupo Aprobacin del plan de accin subregional para el fortalecimiento del aseguramiento de la calidad analtica y validacin de metodologa para anlisis qumicos en los laboratorios de alimentos de Amrica del Sur
13.0 14.30
Receso Cuarta parte: Conclusiones y recomendaciones Coordinadora: Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Relator: Elizabeth Jimnez Laverde, INVIMA
14.30 15.30 15.30 16.00 16.00 16.30 16.30 17.00
Elaboracin de las conclusiones y recomendaciones del taller Aprobacin de las conclusiones y recomendaciones del taller Evaluacin del taller Receso Clausura
17.00 17.30
Lectura de conclusiones y recomendaciones Dra. Nora Angelini, Consultora Internacional de la FAO Palabras de clausura Dra. Mara Jos Zimmermann , Representante de la FAO en Colombia Ing. Patricia Botero, Directora Nacional del Proyecto TCP/RLA/3013
17.30 18.00
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ANEXO 3 Laboratorios participantes Pas Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Argentina Bolivia Bolivia Bolivia Brasil Brasil Brasil Chile Chile Chile Colombia Colombia Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Ecuador Paraguay Paraguay Paraguay Per Per Uruguay Uruguay Uruguay Nombre del laboratorio Direccin de Laboratorios y Control Tcnico, Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA) Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Concepcin del Uruguay Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Carnes Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Cereales y Oleaginosas Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Lcteos PTM Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Lcteos Rafaela Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) Mar del Plata Instituto Nacional de Alimentos (INAL) CEPROCOR - Laboratorio de Pesticidas (*) Laboratorio de Investigacin y Diagnstico Veterinario Cochabamba (LIDIVECO) (#) Laboratorio Referencial del Oriente Boliviano (LABROB) Instituto Nacional de Laboratorios de Salud (INLASA) Laboratorio Adolfo Lutz Coordinacin de Laboratorio Animal (#) Laboratorio Regional de Apoyo Animal en Porto Alegre (#) Laboratorio Central Servicio Agrcola y Ganadero (SAG) Seccin Qumica de Alimentos y Aguas del Subdepartamento Laboratorios del Ambiente Laboratorio Regional SAG Regional XII Regin: Pta. Arenas: Unidad de Residuos Laboratorio de Anlisis de Alimentos y Bebidas Alcohlicas del Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos- (INVIMA) Laboratorio Nacional de Insumos Pecuarios LANIP del Instituto Colombiano Agropecuario ICA- rea Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios Laboratorio de Alimentos Procesados del Instituto Nacional de Higiene y Medicina Tropical L. Izquieta Prez Quito Laboratorio de Alimentos Procesados de Cuenca Laboratorio de Ensayos Analticos del INEN (*) Universidad Tcnica Particular de LOJA (*) Instituto Nacional-INIAP (*) Instituto Nacional de Pesca Instituto Nacional de Higiene- Guayaquil Laboratorio PROTAL ESPOL (*) DECAB (Laboratorio del Departamento de Ciencia de Alimentos y Biotecnologa (*) Laboratorio Central de SENACSA - Departamento de Control de Residuos Laboratorio del Instituto Nacional de Alimentacin y Nutricin (INAN), (Ministerio de Salud y Bienestar Social) Laboratorio Profesor Dr. Francisco Facetti, Municipalidad de Asuncin Centro Nacional de Alimentacin y Nutricin (CENAN) Direccin de Laboratorio de Control Ambiental (DIGESA) Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU) Divisin Laboratorios Veterinarios. (DILAVE) Laboratorio de bromatologa de la Ilustre Municipalidad de Montevideo
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Venezuela Venezuela
Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel Fundacin CIEPE

(#) No contestan la encuesta.
(*) No pertenecen a la RILAA
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ANEXO 4 Estado de implementacin y cumplimiento de los requisitos de gestin y tcnicos de la Norma ISO/IEC 17025 en los 36 laboratorios participantes Punto de la Norma ISO/IEC 17025 Punto 4.1 Organizacin N de labs que cumplen requisitos 31 N de labs que no cumplen requisitos 5 Problemas detectados en encuesta
Punto 4.2 Sistema de calidad
31
Punto 4.3 Control de documentos Punto 4.4 Revisin de solicitudes, Propuestas y contratos Punto 4.5 Subcontrataciones de ensayo Punto 4.6 Adquisicin de servicios y suministros
29 30
8 6
La Organizacin no realiza planificacin estratgica en todas sus reas No se existe en la estructura responsable de calidad No est designado el responsable de calidad Recursos financieros para la acreditacin Sistema de calidad no est implementado a nivel institucional Problemas de comunicacin de la documentacin No todos los laboratorios cuentan con MC y poltica de calidad firmada Documentos del sistema de calidad implementados Anexo 3 Los laboratorios seleccionan los mtodos para satisfacer las necesidades de los clientes pero no est documentado No es prioridad se tiene poca atencin a terceros (1 laboratorio) La mayora de los laboratorios no subcontrata ensayos Los laboratorios inspeccionan y verifican si los suministros que afectan a la calidad cumplen especificaciones pero no registran No se realiza seleccin ni evaluacin de proveedores No se mantienen registros de las evaluaciones de proveedores No se mantiene contacto con los clientes Dificultad en que los clientes contesten las encuestas.
29
Punto 4. Servicio al cliente
29
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Continuacin Anexo N 4 Punto de la Norma ISO/IEC 17025 Punto 4.8 Reclamos
N de labs que cumplen requisitos 28
N de labs que no cumplen requisitos 8
Problemas detectados en encuesta No hay poltica institucional No se mantienen registros de la resolucin del reclamo Se reciben pocas quejas Se controla pero no se documenta No est elaborado el procedimiento Problema de seguimiento de las acciones correctivas
Punto 4.9 Control de trabajo no conforme Punto 4.10 Acciones correctivas Punto 4.11 Acciones preventivas Punto 4.12 Control de registros Punto 4.13 Auditorias internas
30 30 30 30
6 6 6 6
29
Punto 4.14 Revisiones de gerencia Punto 5.2 Personal
30 28
6 8
No se identifican las mejoras y potenciales fuentes de no conformidades No se tienen registros de informes de auditorias internas, revisiones de gerencia, acciones correctivas, acciones preventivas No est definido el tiempo de retencin de los registros No se realizan auditorias internas No se auditan todos los puntos de la norma No se planifican las auditorias No se cuenta con personal calificado No se cuenta con el procedimiento No se realizan anualmente revisiones de gerencia No se cuenta con procedimiento Programa capacitacin se realiza pero no documenta Programa capacitacin no se cumple El programa de entrenamiento no est orientado a las tareas presentes y futuras del laboratorio El laboratorio no tiene los perfiles de puesto No se cuenta con registros de entrenamiento y competencia del personal El personal que efecta muestreo, ensayo y/o calibracin no est autorizado y no se mantiene dicho registro
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Continuacin Anexo N 4 Punto de la Norma ISO/IEC 17025 Punto 5.3 Planta fsica y condiciones ambientales
Problemas detectados en encuesta
Punto 5.4 Mtodos de ensayo y validacin de mtodos
22
14
Punto 5.5.Equipos
29
No se registra el monitoreo y control de las condiciones ambientales del laboratorio Infraestructura edilicia no cumple con requisitos No cuenta con un sistema de energa elctrica ininterrumpida No hay procedimiento para manipulacin muestras No hay procedimiento transporte muestras al laboratorio No cuenta con bibliografa actualizada No se realiza validacin de los mtodos desarrollados por el laboratorio, ni los utilizados fuera del alcance, ni los no normalizados No se realiza verificacin de los mtodos normalizados No se mantienen registros de las validaciones No se ha estimado la incertidumbre de los mtodos de ensayo No se tiene en cuenta la incertidumbre en el clculo del rango de aceptacin de los termmetros No se someten a revisin las transferencias de datos y los clculos de resultados Faltan criterios para las verificaciones y calibraciones de equipos Proceso calibracin no es sostenible por falta de recursos No se cuenta con procedimientos e instructivos Dificultad para contratar laboratorios de calibracin ISO 17025 No hay programa para la calibracin y/o verificacin, mantenimiento y reparacin de los equipos. No se realizan verificaciones intermedias No hay un procedimiento para asegurar la transferencia de los factores de correccin No existe un estudio comparativo cuando se emplea equipos y materiales alternativos
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Continuacin Anexo N 4 Punto de la Norma ISO/IEC 17025 Punto 5.6 Rastreabilidad (Trazabilidad)
Problemas detectados en encuesta No hay procedimientos de verificaciones intermedias a los patrones de referencia, trabajo y materiales No cuenta con programa de calibracin Poca disponibilidad de Patrones de Referencia Falta de compra a tiempo de los reactivos No existen proveedores de ensayos de intercomparacin para todas las matrices y ensayos Costo alto Falta de patrones de referencia. Costo alto Hay reactivos que no traen toda la informacin requerida No hay procedimiento No se emplean normas para realizar los muestreos No se mantienen registros de anomalas o desviaciones a especificaciones del mtodo de ensayo No se mantienen registros de almacenamiento tems de ensayo condiciones especficas Dificultades en implementar diferentes esquemas de control de calidad Disponibilidad insuficiente de matrices para interlaboratorios. Materiales de referencia Falta de recursos No analiza y documenta las tendencias resultados ensayos intralaboratorios e interlaboratorios Problemas en el retiro de las muestras de ensayo de la aduana
Punto 5.7 Muestreo Slo 10 laboratorios realizan Punto 5.8 Manipulacin de las muestras
10 29
2 7
5.9Aseguramiento de la calidad de los resultados de ensayo
27
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Continuacin Anexo N 4 Punto de la Norma N de labs que ISO/IEC 17025 cumplen requisitos Punto 5.10. Informes 19 de Ensayo
Problemas detectados en encuesta No consta nombre y direccin del laboratorio No identifica el mtodo utilizado No consta nombre y direccin del cliente No consta fecha y lugar de muestreo No se informa incertidumbre si el cliente lo solicita No se informa condiciones ambientales y declaracin de conformidad (si corresponde)
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ANEXO 5 Documentos solicitados por la norma ISO/IEC 17025 y estado de avance en la implementacin en los 36 laboratorios participantes No Elabora Implemen elabora do tado do 33 28 3 32 31 28 30 32 32 32 33 28 30 32 28 22 21 21 28 28 20 8 29 26 34 25 26 28 28 27 30 31 28 28 30 30 30 30 28 29 30 28 22 21 21 28 28 20 8 29 26 34 25 26 28 28 27 4 5 8 6 4 4 4 3 8 6 4 8 14 15 15 8 8 16 2 7 10 2 11 10 8 8 9
Documentos solicitados por la Norma ISO/IEC 17025 POE para controlar los documentos. POE para revisin de solicitudes, propuestas y contratos. POE para la seleccin y adquisicin de los servicios y suministros que afectan la calidad de los ensayos. POE para evaluacin de proveedores POE para la resolucin de reclamos. POE de control de trabajo no conforme. POE de acciones correctivas. POE de acciones preventivas. POE de control de registros. POE para proteger y respaldar los registros almacenados electrnicamente. POE de auditorias internas. POE de revisiones de gerencia. POE para identificar las necesidades de capacitacin y realizar capacitacin. POE para diseo validacin de mtodos. POE para estimar la incertidumbre de medicin. POE para proteger la integridad de los datos. POE para la manipulacin, transporte, almacenamiento, uso y mantenimiento planificado del equipo. POE para calibrar equipos. POE para la calibracin de los patrones de referencia. POE de muestreo (cuando lo realice el laboratorio) 10 laboratorios realizan muestreos. POE de transporte, recepcin, manipulacin, proteccin, almacenamiento, retencin y/o disposicin de muestras. POE de control de calidad para monitorear la validez de los ensayos. Instructivos de uso del equipo. Instructivos de controles ambientales especficos. POE tratamiento de solventes y materiales contaminantes. Registro del personal autorizado para cada ensayo. Plan mantenimiento preventivo y correctivo de equipos. Analiza y documenta tendencias resultados ensayos intra e interlaboratorios.
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ANEXO N 6 Listado de documentos entregados 3.1 MANUAL DE CALIDAD 3.2 REQUISITOS DE GESTION Punto de la norma 4.3 Control de Documentacin: Requisitos de la Norma 17025 3.2.1 Control de documentos Punto de la norma 4.6 Adquisicin de servicios y suministros: Requisitos de la Norma 17025 3.2.2 Adquisiciones. 3.2.3 Evaluacin de proveedores Punto de la norma 4.8 Reclamos: Requisitos de la Norma 17025 3.2.4 Resolucin de reclamos Punto de la norma 4.9 Control de trabajo no conforme: Requisitos de la Norma 17025 3.2.5 Control de trabajo no conforme Punto de la norma 4.10 Acciones correctivas: Requisitos de la Norma 17025 3.2.6 Acciones correctivas Punto de la norma 4.11 Acciones preventivas: Requisitos de la Norma 17025 3.2.7 Acciones preventivas Punto de la norma 4.12 Control de Registros: Requisitos de la Norma 17025 3.2.8 Control de Registro Punto de la norma 4.13 Auditoria interna: Requisitos de la Norma 17025 3.2.9 Auditorias internas Punto de la norma 4.14 14 Revisiones de gerencia/ direccin: Requisitos de la Norma 17025 3.2.10 Revisin de gerencia
3.3 REQUISITOS TCNICOS PARA LABORATORIOS DE ANLISIS QUIMICOS Punto de la norma 4.12 Control de Registros: Requisitos de la Norma 17025 3.3.1 INST 1 Instructivo Manejo de Cuadernos. Punto de la norma 5.2 Personal: Requisitos de la Norma 17025 3.3.2 POE 1 Procedimiento Perfiles de Puesto 3.3.3 POE 2 Procedimiento Capacitacin del Personal que Ingresa y Existente. 3.3.4 PL 1 Lista de Personal y Responsabilidades. 3.3.5 PL 2 Plan de Capacitacin Interna y Externa. 3.3.6 PL 3 Planilla de Asistencia a Cursos. 3.3.7 R1 Registros. Asistencia a Cursos. 3.3.8 R2 Registros. Entrenamiento y Competencia Analtica del Personal. Punto de la norma 5.3 Instalaciones y condiciones ambientales: Requisitos de la Norma 17025
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3.3.9 PL 4 Croquis Laboratorio Anlisis Qumicos. 3.3.10 INST 2 Instructivo Limpieza y Seguridad en el Laboratorio. Punto de la norma 5.4 Mtodos de Ensayo: Requisitos de la Norma 17025 3.3.11 POE 3 Procedimiento Validacin de Mtodos Qumicos Desarrollados en el Laboratorio. 3.3.12 POE 4 Procedimiento Validacin de Mtodos Qumicos no Normalizados. 3.3.13 POE 5 Procedimiento Verificacin de Mtodos Qumicos Normalizados. 3.3.14 POE 6 Procedimiento Validacin de Mtodos Qumicos Requerido por el Cliente. 3.3.15 POE 7 Procedimiento Estimacin de la Incertidumbre de la Medicin. 3.3.16 POE 8 Procedimiento Control de Datos. 3.3.17 Procedimiento Mtodo de Ensayo. Ejemplo: Mtodo para el Anlisis de Residuos de Tetraciclinas en Tejido Animal. 3.3.18 INST 3 Instructivo Lavado de Material. Punto de la norma 5.5 Equipos: Requisitos de la Norma 17025. 3.3.19 POE 9 Procedimiento Manejo de equipos. 3.3.20 POE 10 Procedimiento Control, Calibracin, Verificacin y Mantenimiento de Equipos. 3.3.21 PL 5 Plan de Calibracin de Equipos. 3.3.22 PL 6 Plan de Mantenimiento de Equipos. 3.3.23 PL 7 Lista de Equipos. 3.3.24 INST 4 Control y Verificacin de pHmetro. 3.3.25 INST 5 Control y Verificacin de Termmetros. 3.3.26 INST 6 Control y Verificacin de Equipos con Control de Temperatura. 3.3.27 INST 7 Control y Verificacin de Balanzas. 3.328 INST 8 Control y Verificacin de Material Volumtrico Punto de la norma 5. 6 Rastreabilidad (Trazabilidad) de las mediciones: Requisitos de la Norma 17025 3.3.29 POE 11 Procedimiento Manejo de Patrones y Material de Referencia. Punto de la norma 5.7 Muestreo: Requisitos de la Norma 17025. 3.3.30 POE 12 Procedimiento Muestreo de los tems de Ensayo. Punto de la norma 5.8 Manipuleo de los tems de ensayo: Requisitos de la Norma 17025. 3.3.31 POE 13 Procedimiento Manipuleo de los tems de Ensayo. Punto de la norma 5.9 Aseguramiento de la calidad de los ensayos: Requisitos de la Norma 17025. 3.3.32 POE 14 Procedimiento Control de Calidad Interno y Externo, Aseguramiento de la Calidad de los Resultados Punto de la norma 5.10 Informe de resultados: Requisitos de la Norma 17025. 3.3.33 POE 15 Procedimiento Informe de resultados
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ANEXO N 7 Sitios web y Bibliografa 1. Gestin de la Calidad General http://www.fao.org/index_es.htm http://www.panalimentos.org/rilaa/e/index.asp http://www.oecd.org/about/0,2337,en_2649_201185,00.html http://www.fda.gov http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfcfr/CFRSearch.cfm?CFRPart=58&showFR=1 http://www.eurachem.ul.pt/guides/valid.pdf http://www.scc.ca/Asset/iu_files/1510d_e.pdf 2- Gestin de Calidad Qumica http://www.anvisa.gov.br/divulga/public/series/laboratorios.pdf http://www.eurachem.ul.pt/guides/CITAC%20EURACHEM%20GUIDE.pdf http://www.enac.es/admin/iframes/documentos//NT_19%20Rev1.pdf http://www.eurachem.ul.pt/guides/recovery.pdf http://www.fao.org/docrep/T0845S/t0845s00.htm#Contents http://www.scc.ca/Asset/iu_files/1588.pdf http://europa.eu.int/eur-lex/pri/es/oj/dat/2002/l_221/l_22120020817es00080036.pdf http://veterinaria.unex.es/sem/ISOIndic.htm http://veterinaria.unex.es/sem/grupoali.htm http://www.who.it/ www.who.int/topics/nutrition/en/ http://www.euro.who.int/eprise/main/who/progs/FOS/Home http://perso.wanadoo.es/acis http://www.foodhaccp.com/index3.html http://www.epa.gov/ http://www.mli.kvl.dk/meat/special/nnms/index.htm 3- Equipos www.bipm.fr www.science.oas.org/sim/ http://www.oiml.org/publications/D/D020-e88.pdf http://www.iupac.org/publications/pac/2002/pdf/7411x2169.pdf 4- Acreditacin http://www.iaf.nu/default.htm http://www.ilac.org/ http://www.eoq.org
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http://www.telarc.govt.nz/aplac/aplac.html http://www.ibpinetsp.com.br/iaac/ http://www.nrc.ca/inms/int_coop/noramet.html http://www.vtt.fi/ket/eurachem/ http://www.iec.ch/ http://www.ee.tut.fi/mit/imeko/Welcome.html http://www.oiml.org/ http://www.aoac.org/ IAF Members International Accreditation Forum Accreditation Body Members Associate Members Special Recognition Regional Groups Partner members Accreditation Body Members ANAB: American National Standards Institute - American Society for Quality National Accreditation Board LLC BAS: Bureau of Product Standards Accreditation Scheme (BAS) (Philippines) BELCERT: BELCERT (Belgium) BMWA: Federal Ministry for Economic Affairs and Labor (Austria) CAI: Czech Accreditation Institute, (Cesk Institut pro Akreditaci, o.p.s.) CNAB: China National Accreditation Board for Certifiers COFRAC: Comite Francais d'Accreditation (France) DANAK: Danish Accreditation DAR: German Accreditation Council (DAR)(on behalf of TGA, DAP and DATech) DSM: Department of Standards Malaysia EMA: Mexican Accreditation Entity, (Entidad Mexicana de Acreditacin) ENAC: Entidad Nacional de Acreditacin (Spain) FINAS: Finnish Accreditation Service HKAS: Hong Kong Accreditation Service IAS: Iran Accreditation System INAB: Irish National Accreditation Board INMETRO: National Institute of Metrology, Standardization and Industrial Quality (Brazil) INN: Instituto Nacional de Normalizacin (Chile) JAB: Japan Accreditation Board for Conformity Assessment JAS-ANZ: Joint Accreditation System of Australia and New Zealand JASC: Japan Accreditation System for Product Certification Bodies of JIS Mark KAB: Korea Accreditation Board KAN: Accreditiation Body of Indonesia (Komite Akreditasi Nasional) KAS: Korea Accreditation System MAURITAS: Mauritias Accreditation Service NA: Norwegian Accreditation NAA: National Accreditation Association of DPR of Korea NABCB: National Accreditation Board for Certification Bodies (India) NAC: National Accreditation Council of Thailand, The Office of OAA: Organismo Argentino de Acreditacin (Argentina) PCA: Polish Centre for Accreditation PNAC: Pakistan National Accreditation Council RENAR: Romanian Accreditation Association (Asociatia de Acreditare din Romania) RvA: Dutch Accreditation Council (Raad Voor Accreditatie)
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SA: Slovenska Akreditacija (Slovenia) SAC: Singapore Accreditation Council SANAS: South African National Accreditation System SAS: Swiss Federal Office of Metrology and Accreditation, Swiss Accreditation Service SCC: Standards Council of Canada SINCERT: Sistema Nazionale per lAccreditamento degli Organsimi di Certificazione e Ispezione (Italy) SNAS: Slovak National Accreditation Service (Slovakia) SWEDAC: Swedish Board for Accreditation and Conformity Assessment TAF: Taiwan Accreditation Foundation TUNAC: Tunisian Accreditation Council (Conseil National d'Accrditation, CNA) UKAS: United Kingdom Accreditation Service Associate Members AIOICI: Association of Independent Certification and Inspection Bodies, Associazione Italiana Organismi Indipendenti di Certificazione e Ispezione ALPI: Association of Independent Test Laboratories and Certification Bodies (Associazione Laboratori di Prova e Organismi di Certificazione Indipendenti) APEDA: Agricultural and Processed Food Products Export Development Authority BDI: Bundesverband der Deutschen Industrie e.V. (Federation of German Industries) CEA: Canadian Electricity Association CIES: CIES - The Food Business Forum EFAC: European Federation of Associations of Certification Bodies IAAR: Independent Association of Accredited Registrars IFIA: International Federation of Inspection Agencies Limited IIOC: Independent International Organisation for Certification IQNet: The International Certification Network IQNet Association JACB: Japan Association of Certification Bodies PEFCS: Programme for the Endorsement of Forest Certification Schemes Special Recognition Regional Groups EA: European Cooperation for Accreditation IAAC: Interamerican Accreditation Cooperation PAC: Pacific Accreditation Cooperation SADCA: Southern African Development Community in Accreditation Partner Members International Organisation for Standardization ISO Switzerland The QUEST Forum, Inc. United States of America
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4.1 Informacin adicional Organismos de Acreditacin de Amrica SIGLA NOMBRE S I N N Instituto Nacional de Normalizaci n I A A C IAAC MLA Signatory PAIS Chile NOMBRE EN INGLES National Standardization Institute American Association for Laboratory Accreditation Assured Calibration Laboratory Accreditation Select Services ANSI-ASQ National Accreditation Board American National Standards Institute Standards Council of Canada LOGO WEB www.inn.cl TELEFONO +56-2-441 04 24 / 441 03 30 EMAIL anamaria.coro@inn.cl
USA
www.iaacaccreditation.o rg/ www.aclsscor p.com
+52-55-55 91 05 secretariat@iaac32 accreditation.org
ACLASS Scope: Testing and Calibration Laboratories ANAB
USA
703-351-9139 877-344-3044
info@aclasscorp.com
www.anab.org
800-606-5394 414-347-9858
anab@anab.org.
ANSI
USA
www.ansi.org +1-202-293 92 87
lhallenb@ansi.org
SCC OAE
Canada Organismo de Ecuador Acreditacin del Ecuador
www.scc.ca
+1-613-569 78 08 +593-2- 255 16 12
ppaladino@scc.ca bviera@micip.gov.ec
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SIGLAS SGCA
NOMBRE Secretara General de la Comunidad Andina
PAIS Bolivia, Colombia, Ecuador, Per, Venezuela USA
NOMBRE EN INGLES
LOGO
WEB www.comunid adandina.org
TELEFONO +51-1-411 14 67
EMAIL fnunez@comunidadandina.org
IAS
International Accreditation Service
www.iasonlin e.org www.cohcit.g ob.hn
+562-699 05 41
pmccullen@iasonline.org
COHCIT Consejo Hondureo de Ciencia y Tecnologa COPANT Comisin Panamericana de Normas Tcnicas INEN Instituto Ecuatoriano de Normalizacin SENCA Servicio MER Autnomo Nacional de Normalizacin, Calidad, Metrologa y Reglamentos Tcnicos ONA Organismo Nacional de Acreditacin
Honduras
+504-291 03 43 /44/46
cristina@cohcit.gob.hn
Americas
www.copant.o +58-2-574 29 41 / rg 575 41 11 ext. 214, 215, 275 Ecuadorian Standardizatio n Institute National Autonomous Service of Standardizatio n, Quality, Metrology and Technical Regulations National Accreditation Body www.inen.gov +593-2-250 18 85 .ec / 250 18 90 +58 (212) 7032042
copant@cantv.net
Ecuador
inenfu@andinanet.net, maltamirano@inen.gov.ec trina.guillen@sencamer.gov.v e
Venezuela
Paraguay
www.conacyt. +595-21-28 04 65 / 86 org.py/ona.ht m
seona@conacyt.org.py
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SIGLAS
NOMBRE
PAIS Cuba
ONARC rgano Nacional de Acreditacin de la Repblica de Cuba OUA Organismo Uruguayo de Acreditacin OBA Organismo Boliviano de Acreditacin OAA Organismo Argentino de Acreditacin INDECO Instituto PI Nacional de Defensa de la Competencia y Proteccin de la Propiedad Intelectual INMETR Instituto O Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade Industrial Coordenao Geral de Credenciament o
NOMBRE EN INGLES National Accreditation Body of the Republic of Cuba Uruguayan Accreditation Body Bolivian Accreditation Body Argentine Accreditation Body National Institute for the Defense of Competitionand Protection of Intellectual Property National Institute of Metrology, Standardization and Industrial Quality - General Registration Coordination
LOGO
WEB
TELEFONO
EMAIL acre@ceniai.inf.cu
www.onarc.cu + 53-7-30 08 32 / 25 / 35 baindustria.cu
Uruguay
hermes.ort.ed u.uy/oua www.obabolivia.org www.oaa.org. ar
+598-2-916 42 51 /916 24 11 +591-2-237 20 46
ouasuanc@adinet.com.uy
Bolivia
nmolina@oba-bolivia.org
Argentina
+54-11-43 49 39 62 /63 /64
info@oaa.org.ar adcasa@secind.mecon.gov.ar amello@indecopi.gov.pe
Peru
www.indecopi +51-1-224 78 00, .gov.pe ext. 1261
Brazil
www.inmetro. gov.br
+55-21-25 63 28 35 / 36 / 37 +55-21-26 79 90 35
cgcre@inmetro.gov.br
masoares@inmetro.gov.br
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SIGLAS RELAT
TTBS
MBC
NOMBRE EN INGLES Red de Argentina, Technological Laboratorios Brasil, Laboratories Tecnolgicos Uruguay, Network Paraguay Trinidad and Trinidad and Tobago Bureau Tobago of Standards Movimento Brazil Competitive Brazil Brasil Movement Competitivo Consejo Panama Nacional de Acreditacin Oficina Guatemala Guatemalteca de Acreditacin Consejo El Salvador Nacional de Ciencia y Tecnologa Entidad Mxico Mexicana de Acreditacin Ente Costa Rica Costarricense de Acreditacin Oficina Nicaragua Nacional de Acreditacin National Council of Science and Technology
NOMBRE
PAIS
LOGO
WEB
TELEFONO +55-41-316 30 70 / 316 32 68
EMAIL jfelix@tecpar.br
www.ttbs.org. +1-868-662 88 27 tt / 662 42 41 www.mbc.org .br +52-55 - 61 326 0121 +507-360 07 15
Giselle.Guevara@ttbs.org.tt
CNA
dinade@mici.gob.pa
OGA
CONAC YT
www.mineco. +502-238 33 30, x gob.gt/mineco 3975 /calidad/acredi tacion/oga.php www.conacyt. +503-226 28 00 / gob.sv 225 62 22
ppineda@mail.mineco.gob.gt
evanegas@conacyt.gob.sv
EMA
www.ema.org. mx www.eca.go.c r
+52-55-55 91 05 32 +506-2901790 x 236
maribel@ema.org.mx vsolorzano@ema.org.mx mmadriz@micit.go.cr bpaniagua@lacomet.go.cr adela.miranda@mific.gob.ni
ECA
ONA
http://www.mi +505-267 01 61/ fic.gob.ni/dirT 02 00, Ext. 1032 y ransparencia/t 1134 ecNormalizaci
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A2LA
USA
American Association for Laboratory Accreditation
on/acreditacio n.asp www.a2la.org +1-301-644 32 48
punger@a2la.com
5 Interlaboratorios EPTIS - European Proficiciency Tests Information System www.eptis.bam.de Proveedores Designacin del PT Pharmaceutical Quality Control (External Audit) Analytical Quality Assurance (AQA) Study - Pesticide Formulations Quality Counts Drugs in feed ring tests. Laser Diffraction Proficiency Testing Scheme (LDPTS) Interlaboratory Control of Microbiological Methods for Analysis of Residues of Antibiotics and Sulfonamides in Slaughter Animals CSCQ Drug quantitation in blood (NORDQUANT) Rsidus de mdicaments dans les aliments ACILA AG Deutsche Gesellschaft fr Technische Zusammenarbeit GTZ GmbH - OE 4556 QVA Don Whitley Scientific Ltd Istituto Zooprofilattico Sperimentale della Lombardia e dell'Emilia. Sezione di Bologna. Laboratorio chimico merceologico. Beckman Coulter UK Ltd National Food Administration Swiss Center for Quality Control CSCQ c/o HUG National Institute of Forensic Toxicology AFSSA Fougres Proveedor
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Antibiotiques dans le lait Contrle externe de qualit - Mdicaments psychotropes dans le sang HIV-1 Genotyping Proficiency Testing Program Designacin del PT Intercomparison Exercise On Organic Elemental Analysis Safety-technical tests of chemical products (clean materials, mixtures, firm, liquid, gaseous materials) NARL approval from National Association of Testing Authorities (NATA) conduct chemical PTS The Swedish National Food Administration NFA, (Livsmedelsverket) PT-programme is carried out by the Microbiology Division and the Chemistry FAPAS, CSL, Sand Hutton, York YO41 1LZ UK Fax: +44 (0) 1904 462 111
AFSSA Fougres SFTA - Socit Franaise de Toxicologie Analytique, Institut de Mdecine Lgale VIRCO Proveedor Universitat de Barcelona. Facultat de Quimica. Dep. Qumica Analtica Verband der chemischen Industrie, "Arbeitsgruppe Tests und Kriterien" Australia chrn@slv.se
fapas@csl.gov.uk
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6. Patrones y Materiales de Referencia Proveedores RIVM European Union Reference Laboratory. P.O. Box 1, NL 3720 BA Bilthoven , The Netherlands. TEL +31 302742613, fax +31 302744403 www.rivm.nl/crl/residues RADIAN INTERNATIONAL P.O. Box 201088. Austin Texas 78720-1088 TEL (800) 848-7837 HOESCHT-ROUSSEL Agri-Vet Rhingaustrasse 190, D-6503, Wiesbadm. TEL 49-6119627887, FAX 49-611-9629832. e-mail: info@hrvet.com USDA-FSIS Midwestern Lab. Standards Repository P.O. Box 5080 St. Louis MO 63115. Attn. Carolyn Henry, Clc. EU Reference Laboratory for Residues of Veterinary Drugs. BgVV Diedersdorfer Weg 1 D12277 BERLIN. Fax: 49 1888 412-2955, e-mail: crlvetdrug@bgvv.de Dr. EHRENSTORFER Gm bH Bgm.-Schlosser-Str. 6 A (86199) Augsburg. Fed. Rep. Of Germany. Tel +49 821 906080, Fax +49 821 9060888, e-mail: info@analytical-standards.com SIGMAALDRICH 3050 Spruce Street, St. Louis, MO 63103, USA. Tel: (1-314) 301-2084, Fax: (1-314) 625-0000, e-mail: aceballos@sial.com STERALOIDS INC PO BOX 689 NEWPORT, RI 02840-0600 USA e-maill. sales@steraloids.com BCR Reference Materials http://www.irmm.jrc.be/mrm.html). IRMM Institute for Reference Materials and Measurements. Retieseweg, B/2440 Geel, Belgium Tel:+32-(0)14-571705 FAX: +32-(0)14-590 406, e-mail: bcr.sales@irmm.jrc.be Web: www.irmm.jrc.be/ m.r.m.html NIST National Institute of Standards and Technology - http://www.nist.gov/ SIGMAALDRICH de Argentina TEL (54-11) 4556-1472, FAX (54-11) 4552-1698, e-mail: cservice-argentina@sial.com MERCK Qumica Argentina S.A.I.C. Artilleros 2436 (1428) Bs. As TEL. (54-11) 4787-8100, FAX (54-11) 4783-7369, e-mail: merck@merck.com.ar ANEDRA Sarmiento 1803 (1646) San Fernando, Bs. As. TEL (54-11) 4746-9200, FAX: (54-11) 4746-2637 ICN Teodoro Vilardebo 2855-65 (1417) Cap. Fed., Tel/Fax (54-11) 4502-7788 PIERCE Charlone 144 Buenos Aires, Tel (54-11) 4555-0010, Fax (54-11) 4553-3331
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7. Bibliografa 1.1 Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL) 1.1.1 OECD BPL N 1 rev 1997 1.1.2 OECD BPL ASEGURAMIENTO CALIDAD N 4 rev 1993 1.1.3 OECD BPL INFORMATICA N 10 rev 1995 1.1.4 USA BPL Code of Federal Regulations CFR 21 part 58-FDA 1.1.5 UE 2004 Directiva 9 BPL 1.1.6 UE 2004 Directiva 10 BPL 1.2 Acreditacin 1.2.1 ISO-IEC 17025 espaol 1.2.2 GUIDE EURACHEM CITAC CHEMISTRY 1.2.3 ILAC-g18 alcance acreditacin mtodos 1.2.4 Norma ISO 19011 AUDITORIA 1.3 Autoevaluacin 1.3.1 ENAC autoevaluacin jul 2002 1.4 VALIDACION 1.4.1 CODEX AL 97_23 CCMAS 1.4.2 CODEX AL 01_23s CCMAS 1.4.3 FAO OMS Cuestionario sobre Garanta calidad mtodos 1.4.4 IAEA validacin gua 1.4.5 IAEA validacin plaguicidas anexo 1 1.4.6 IAEA validacin residuos medicamentos veterinarios anexo 2 1.4.7 IAEA validacin ejemplo multirresiduo plaguicida anexo 3 1.4.8 IAEA validacin curva calibracin anexo 3 1.4.9 IAEA validacin estadstico anexo 4 1.4.10 IAEA validacin glosario trminos anexo 5 1.4.11 IAEA validacin confiabilidad de resultados anexo 6 1.4.12 IAEA validacin visin general y estabilidad analito 1.4.13 ILAC-g8 cumplimiento especificaciones 1.4.14 ILAC-g17 incertidumbre 1.4.15 EMEA Requisitos validacin mtodos Medicamentos Veterinarios 1.4.16 UE 2002 Decisin 657 mtodos analticos 1.4.17 UE 2004 Decisin 657 mtodos analticos en ingls 1.4.18 MERCOSUR RC 300 99 Y RC 825 99 glosario 1.4.19 MERCOSUR RM 604 99 Muestreo 1.4.20 OAA DC-LE-05 Validacin 09 03 1.4.21 AOACI Peer Verified Methods 1999 1.4.22 NORMA IRAM 32: Metrologa. Vocabulario VIM: 1997 1.4.23 Norma ISO 9000: 2000 1.4.24 IUPAC, Limit of Detection, Spectrochim . Acta 33 B, 242, 1978. 1.4.25 Statistical Manual of the AOAC. W.J. Youden and E.H Steiner. 1975 (1990). 1.4.26 DC-LE-03: Expresin de la Incertidumbre de Medida en las Calibraciones / Ensayos.
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ANEXO N 8 Evaluacin del taller Favor de responder a los diferentes tipos de preguntas, con fines de evaluar el Taller y ayudar a verificar lo que puede ser mejorado en los futuros talleres. Resultados de la evaluacin del taller: Responden la evaluacin 28 participantes. I. 1. 2. 3. 4. Instalaciones y preparacin del taller Local confortable Las sillas estaban dispuestas de forma satisfactoria Ud. ha podido ver y or en forma satisfactoria La distribucin de las sesiones de la maana y la tarde fueron adecuadas Pregunta 1 2 3 4 Si % 100 89,2 92,8 100 No % 0 3,6 7,2 0 No contestan % 0 7,2 0 0
5. Qu sugiere para los prximos talleres? Entregar a los participantes las guas impresas del taller para poder seguir la secuencia diaria del mismo. (2 participantes) El tiempo se considera poco, se propone 2 semanas. (2 participantes) Hacer por lo menos un ejercicio completo para validacin pero con datos y realizar, en la prctica, los participantes todos los clculos inclusive la incertidumbre (aplicando todos los pasos para linealidad, etc) Trabajo manual. Taller de validacin parte II con ejercicios analticos, aumentar la cantidad de ejemplos que lleven a anlisis de resultados (linealidad, robustez, etc.). En temas de validacin qumica y biolgica e incertidumbre mayores ejercicios. Ms ejercicios demostrativos (prcticos). (2 participantes) Ms trabajos en grupos. Que cada pas presente en forma abreviada su experiencia en validacin en una matriz con su respectivo diseo experimental. Visitar laboratorios acreditados. Las sillas laterales no eran tan cmodas. Las sillas ubicadas en los vrtices a un mismo nivel hacen un poco difcil observar las proyecciones. Pude ver y escucghar sin problemas, sin embargo quienes estaban ubicados en la parte de atrs debieron tener alguna dificultad Locales con luz natural y ventilacin Organizacin
II.
6. Programa Mal organizado 12345 Bien organizado
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7. Materiales de referencia Mal organizados 8. Sesiones plenarias Mal organizados 9. Trabajo en grupos Mal organizado 10. Presentacin de los participantes Mal organizado 11. Grado de organizacin de todo el Taller Mal organizado Mal organizado 1 (%) 2 (%) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 12345 Bien organizado Bien organizado 4 (%) 5 (%) 25,0 32,1 28,6 14,3 35,7 17,9 71,4 64,3 67,8 82,1 64,3 82,1 12345 Bien organizado 12345 Bien organizado 12345 Bien organizados 12345 Bien organizados
Pregunta 6 7 8 9 10 11
3 (%) 3,6 0 3,6 3,6 0 0
No contestan 0 3,6
III. Objetivos personales 12. Hasta qu punto el Taller ha cumplido con sus objetivos? Pregunta 12 Ninguno 1 (%) 0 Todos 2 (%) 3,6 3 (%) 10,7 4 (%) 35,7 5 (%) 50,0
13. Hasta qu nivel el Taller ha mantenido su inters? No interesante Pregunta 1 (%) 13 0 14. Cunto ha aprendido? Muy poco Pregunta 1 (%) 14 0 IV. Programa 15. El contenido del Taller es adecuado para los temas del programa? Sin valor Pregunta 1 (%) 15 0 2 (%) 0 3 (%) 3,6 4 (%) 21,4 Muy valioso 5 (%) No contestan (%) 75,0 0 2 (%) 3,6 3 (%) 10,7 4 (%) 25,0 Mucho 5 (%) 60,7 2 (%) 3,6 3 (%) 10,7 4 (%) 14,3 Muy interesante 5 (%) 71,4
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16. Cunto del material presentado fue de utilidad para usted? Pregunta 16 100 (%) 67,9 75 (%) 21,4 50 (%) 3,6 25 (%) 3,6 No contestan (%) 3,6
17. Los temas fueron expuestos con los detalles necesarios? Indique los que no fueron. Pregunta 17 Si: No: Todos los temas que se expusieron, falt ms ejercicios prcticos de validacin y tiempo (3 participante). Falt detallar pasos para determinacin prctica de los lmites de control, deteccin, robustez, sensibilidad (1 participante) Ms clculo de incertidumbre (1 participante) Slo que se presupone una base estadstica que creo no todos poseemos (1 participante) Sera interesante otro mtodo alternativo para validacin, LC y LD (1 participante) Si (%) 50,0 No (%) 14,3 No contestan (%) 35,7
Herramientas de aseguramiento y calificacin de los analistas (1 participante) Robustez, CCalfa y CCbeta. (1 participante) Aseguramiento de calidad de resultados debera ilustrarse con ms ejercicios (1 participante)
18. Qu temas agregara para talleres futuros? Polticas de RILAA para Amrica Latina en forma ms enftica (que genere resultados prcticos a corto plazo) (1 participante) Ensayos interlaboratorios (1 participante) Mas ejercicios prcticos (4 participantes) Slo validacin y ejercicios o slo calidad, POEs, registros (1 participante) Herramientas de control de calidad, manejo de planillas excel, estadstica para control de calidad, determinacin de incertidumbre, seguridad, manejo y control de residuos (1 participante) Metodologa qumica y estadstica aplicada al tema (1 participante) Estadstica aplicada (1 participante) Estadstica para la evaluacin de parmetros de validacin (1 participante) Presentacin de ejemplos prcticos para apoyar los temas presentados (1 participante) Detallar ms incertidumbre y validacin en cuanto a la prctica (1 participante) Intercambio experiencia de cada pas en validacin e incertidumbre (3 participante) Volumetra, masas y termometra (1 participante) Diferenciacin de tipos de ensayos (residuos, macronutrientes, fisicoquimicos) (1 participante) Aplicacin de validacin con datos tericos (1 participante) Conocer software de validacin comerciales (1 participante) Calificacin de equipos (1 participante)
19. Qu temas sugiere retirar en talleres futuros? Ninguno (23 participantes) Interferencia de matriz en diferentes analitos y estabilidad de la muestra (1 participante) BPL e ISO 17025 (1 participante) Quizs BPL y orientarse directamente a la ISO 17025 (1 participante)
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Quizs no retirar pero s tomar menos tiempo a la parte de aseguramiento de calidad (1 participante) Profundizar un poco ms en el clculo de parmetros a validar (1 participante) BPM (1 participante)
V. Exposiciones (Presentaciones) 20. El nivel del material presentado del Taller fue: Bajo Pregunta 20 1 (%) 0 2 (%) 0 3 (%) 3,6 Avanzado 4 (%) 5 (%) 35,7 60,7 No contestan (%) 0
21. Qu aspectos de las sesiones le fueron ms eficientes para ayudarlo? Presentaciones (exposiciones) (17 participantes) Discusin durante las sesiones (22 participantes) Actividades de trabajo de grupo (21 participantes) Ayudas audiovisuales (7 participantes) Discusin fuera de las sesiones (recesos, almuerzo) (5 participantes) Todas (6 participantes) Otras
22. Alguna sesin (presentacin) le ha dejado confuso o inseguro? Identifique cules. Pregunta 22 Si (%) 21,4 No (%) 50,0 No contestan (%) 28,6
Actividades de grupo (1 participante) Clculos de la validacin del mtodo (1 participante) No por la presentacin, me falta preparacin en incertidumbre, porcentaje de recuperacin (1 participante) No confuso, pero creo que falt un ejercicio ms desarrollado sobre incertidumbre (1 participante) La parte referente a incertidumbre, los clcuos de excel que se espera recibir en el corto plazo (1 participante) Quizs un poco inseguro en incertidumbre, debo hacerlo en la prctica para reforzar ms (1 participante) No en general, pero en relacin a calificacin de analistas y herramientas de aseguramiento de calidad necesitaba mayores propuestas (1 participante) Un poco la parte estadstica (1 participante)
23. Cree que los instructores deberan haber hecho un mayor esfuerzo para sus presentaciones? En caso de que su respuesta sea positiva, diga a su criterio qu deberan haber hecho. Pregunta 23 Si (%) 3,6 No (%) 67,9 No contestan (%) 28,5
Reforzar la validacin. En general todo fue de mucho provecho. La expositora tiene gran experiencia (1 participante) El taller ha sido presentado con buen conocimiento (2 participantes) Esfuerzo realizado por la expositora es muy importante previo al taller, durante y post taller (1 participante)
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Siempre hubo gran disposicin de los organizadores. Excelente! (1 participante) Estuvieron muy bien (1 participante) El esfuerzo del instructor fue mximo, se recomienda que disponga de ms tiempo (1 participante) Debera haber dos instructores (1 participante)
24. El tiempo para el Taller fue suficiente? Pregunta 24 Suficiente (%) 67,9 Muy largo (%) 0 Muy Corto (%) 32,1 No contestan (%) 0
25. El tiempo para discusiones, formal e informal, fue suficiente? Definitivamente s Pregunta 1 (%) 2 (%) 25 28,6 14,2 3 (%) 28,6 Definitivamente no 4 (%) 5 (%) 25,0 3,6 No contestan (%) 0
26. Hay temas que fueron presentados pero no desarrollados en nivel suficiente? Identifique cules. D) Pregunta 26 Si (%) 28,6 No (%) 64,8 No contestan (%) 3,6
Los diferentes parmetros para la realizacin de la validacin (2 participantes) Profundizar tcnicas estadsticas, ANOVA (1 participante) Robustez, CC y CC (1 participante) Incertidumbre, los clculos fueron mostrados en forma genrica y rpida (1 participante) Presentaciones muy rpidas (1 participante) Repetibilidad y reproducibilidad en ejercicios ms claros (1 participante) Elaboracin de procedimientos y aseguramiento de la calidad de datos analticos, patrones y materiales de referencia (1 participante) Tiempo programado de acuerdo a la temtica abordada (1 participante)
27. Hay temas que fueron desarrollados pero que el desarrollo no era relevante o necesario? Identifique cules. Pregunta 27 Si (%) 7,2 No (%) 89,2 No contestan (%) 3,6
BPL e ISO 17025 (1 participante) BPL (1 participante) No, me gustara ms ejemplos y ejercicios con residuos de M.V. (1 participante) No, Todos eran necesarios (2 participantes) No, Todos aportaron algo (1 participante)
VI. Evaluacin total del taller 28. Hay aspectos que fueron sobrevalorados en el Taller? En caso de que su respuesta sea positiva, indique cules. Pregunta 28 Si (%) 0 No (%) 67,9
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No contestan (%) 32,1
Todos eran necesarios (1 participante) Siempre fueron presentados con la importancia que requiere el tema (1 participante) No, existi un equilibrio entre los temas desarrollados (1 participante).
29. Hay aspectos que fueron subvalorados en el Taller? En caso de que su respuesta sea positiva, indique cules. Pregunta 29 Si (%) 7.2 No (%) 67,8 No contestan (%) 25,0
No todos los asistentes conocen las pruebas F, t student, Chi cuadrado, se debi haber dado un barniz, aunque entiendo que por tiempo no era posible (1 participante) Ejercicio prctico manual con caso particular para reforzar (1 participante) 30. Cules aspectos del Taller fueron ms difciles para su aprendizaje? Exposiciones pobres Ayudas audiovisuales pobres Mucha interferencia (distracciones) Falta de inters por los temas Exposiciones y discusiones muy rpidas Estar mucho tiempo sentado Ninguna de las anteriores Otras Pregunta Contestan (%) 93,4 No contestan (%) 7,6
30 -
Exposiciones pobres (0 participante) Ayudas audiovisuales pobres (0 participante) Mucha interferencia (distracciones) (0 participante) Falta de inters por los temas (0 participante) Exposiciones y discusiones muy rpidas (4 participantes y 1 participante debido a amplia temtica que se deb cubrir) Estar mucho tiempo sentado (7 participantes) Ninguna de las anteriores ( 14 participantes) No tener el material impreso (2 participantes) El ruido del lavamanos del sanitario (1 participante)
31. Cmo considera el Taller en trminos globales? Pregunta 31 Pobre 1 (%) 0 2 (%) 0 3 (%) 3,6 Excelente 4 (%) 5 (%) 35,7 60,7 No contestan (%) 0
32. Qu comentarios generales o sugerencias tiene para mejorar el Taller? Pregunta 32 Contestan (%) 64,3 No contestan (%) 35,7
Comentarios generales o sugerencias para mejorar el taller
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Ms uniformidad en los conocimientos de los participantes o por lo menos no mucha diferencia (1 participante) La expositora tiene amplio conocimiento el cual fue muy bien transmitido. Sin embargo siempre reforzara una evaluacin de un caso particular con calculadora en mano (1 participante) Mayor tiempo de duracin del evento. Incluir otros temas (metrologa, estadstica). Ms ejercicios aplicados (1 participante) Mayor tiempo (2 semanas) para evitar agotamiento mental y fsico (1 participante) Material de apoyo impreso (2 participante) Mayor nfasis en el clculo de parmetros a validar (2 participantes) Mayor nfasis en el diseo de validacin (1 participante) Sera interesante realizar todo un ejemplo prctico (incluyendo rechazo de datos) (1 participante) En trminos generales estuvo excelente, claro que siempre se aspira a ms tiempo para asentar los conocimientos (1 participante) Ms ejercicios prcticos. Incluir estadstica (2 participantes) Los temas fueron desarrollados de manera adecuada y hubo una buena organizacin del taller (1 participante) Incluir visitas a laboratorios donde el sistema est implantado (2 participantes) Intercambio de experiencias de los pases que estn ms adelantados y que sean como ejemplo a seguir para los menos adelantados (1 participante) Taller slo validacin mtodos fisicoqumicos, instrumentales, en forma detallada (1 participante) Los temas tratados son muy complejos, aumentar prctica en estadstica (1 participante) Para los objetivos propuestos me parece bien, insisto en efectuar a futuro talleres sobre validacin con mayor ejercicio prctico (1 participante) Quizs 2 expositores de manera que pueda haber un mayor apoyo en los diversos grupos durante el taller y trabajo de grupo (1 participante) Intercambio de experiencias como tema adicional en soluciones de casos de controversias (1 participante)
33. Otros comentarios. Pregunta 33 Con comentario (%) 28,6 Sin comentario (%) 0 No contestan (%) 71,4
Sugerira que se realizara una encuesta al participante para saber el nivel de sus conocimientos para la distribucin del personal en los diferentes talleres (1 participante) La organizacin fue muy buena, el nivel tcnico tambin, no se me ocurre como mejorarlo! (1 participante) Ninguno (1 participante) Felicitar a la expositora por su valioso aporte, resultado de un buen trabajo y gran experiencia. Muchas gracias. (1 participante) Agradecimiento a la consultora por compartir sus conocimientos .(1 participante) Agradecimientos por el conocimiento compartido, y la asimilacin del trabajo que se debe realizar a nivel de la institucin donde presto un contingente (1 participante) La organizacin y el esfuerzo de la expositora por transmitirnos todos los conocimientos es digno de una felicitacin (1 participante) Agradezco el compromiso y disposicin del conferencista y el organizador, eso asegur el xito del taller (1 participante) Felicitaciones, excelente organizacin (1 participante)
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VALIDACIN DE MTODOS ANALTICOS CUALITATIVOS

Itziar Ruisnchez, Esther Trullols y F. Xavier Rius . Grupo de Quimiometra y Cualimetra. Departament de Qumica Analtica i Qumica Orgnica. Universitat Rovira i Virgili. Pl. Imperial Trraco, 1, 43005 Tarragona.
Es bien conocida la necesidad de validar los mtodos de anlisis y en concreto en este artculo se aborda la validacin de los mtodos de anlisis cualitativos. Si bien el concepto de validacin no depende de que ste sea cuantitativo o cualitativo, en la prctica los parmetros de calidad que caracterizan a los mtodos cualitativos son distintos. As, adems de describir las caractersticas de los mtodos cualitativos, se definen los principales parmetros de calidad como son: falsos positivos y negativos, sensibilidad, especificidad, regin de incertidumbre, lmite de corte, etc. Finalmente, se describen muy brevemente cuatro vas para establecer dichos parmetros.
Introduccin a los sistemas de medida cualitativos En los laboratorios de anlisis es cada vez ms frecuente la introduccin de sistemas de medida de respuesta rpida que generan respuestas ms de tipo cualitativo que cuantitativo. La repuesta cualitativa suele ser binaria del tipo SI/NO y puede responder a distintas situaciones: presencia/ausencia de un determinado analito en una muestra, presencia/ausencia determinado concentracin) nivel que por encima de un de viene (normalmente habitualmente
Estos sistemas se denominan habitualmente sistemas de screening o de cribado. Desde el punto de vista prctico, el principal inters en el desarrollo de estos sistemas radica en que se utilizan como una etapa previa de cribado de las muestras (figura 1), de manera que se evita as que todas las muestras sean sometidas a todo el proceso de medida qumico. nicamente seguirn el proceso de anlisis cuantitativo aquellas muestras cuya respuesta sea un SI (positivo), aquellas en las que se detecte la presencia de un analito o se detecte que est por encima del nivel permitido.
fijado por la legislacin o el cliente, etc.
Hay analito por encima de un determinado valor, XSL?
> XSL < XSL
de una reaccin qumica, bioqumica o inmunolgica. En este tipo de sistemas, la respuesta binaria
MUESTRAS SISTEMA DE SCREENING ANLISIS CUANTITATIVO
SI
NO
SI/NO se obtiene de forma directa, sin ningn tratamiento de los datos. Generalmente, la presencia de un analito se determina por comparacin respecto a un blanco (muestra sin el analito), por ejemplo si se obtiene un determinado color hay analito, mientras que si no se obtiene (color del blanco) no lo hay. Dentro de este grupo de sistemas cualitativos se encuentran los denominados tests kits. Son dispositivos comerciales diseados para una aplicacin concreta que contienen todos los reactivos necesarios y en algunos casos
NO SE ANALIZA
Figura 1. Sistemas de cribado (screening).
Tipos de sistemas de medida cualitativos. Hacer clasificaciones siempre resulta difcil ya que depende de los criterios que se utilicen. Si atendemos al tipo de sistema utilizado para la obtencin de la respuesta (deteccin) podemos diferenciar dos grandes grupos: anlisis cualitativo clsico o sensorial y anlisis cualitativo instrumental (Tabla 1).
Deteccin sensorial Color: cambio, aparicin, etc. Olor ELISA Deteccin instrumental UV-Vis, Fluorescencia, Potenciometra, etc. Sensores: qumicos, bioqumicos, etc. ELISA
incluyen un sistema instrumental sencillo necesario para la obtencin de la respuesta. El otro gran grupo es el que hemos denominado anlisis cualitativo instrumental. En este caso, la deteccin se realiza en base a una medida instrumental (colorimetra, fluorescencia, voltamperometra, etc.). La presencia o no de un determinado analito depende del nivel al que interese detectarlo. Bien puede ser al nivel del lmite de deteccin o a un nivel superior que
Tabla 1. Tipos de sistemas de utilizados en el cribado
En el anlisis cualitativo clsico la deteccin es de tipo sensorial y se realiza en base a los sentidos humanos como pueden ser la vista, olfato, etc. El ms utilizado es la vista y la mayora de sistemas se basan en la aparicin o no de un determinado color como resultado
generalmente corresponde al fijado por la legislacin. En este tipo de sistemas de medida, la respuesta instrumental que se obtiene debe transformarse en respuesta binaria del tipo SI/NO y por lo tanto implica un tratamiento de datos. Primero hay que establecer la respuesta instrumental, por ejemplo un valor de absorbancia para la concentracin correspondiente al valor al que se quiere cribar (nivel de concentracin establecido por la legislacin) y debe compararse con la respuesta instrumental obtenida para cada muestra. Si es superior, hay analito por lo que la respuesta binaria es SI, y si el valor es inferior la respuesta binaria es NO. Otro grupo de sistemas cualitativos que podemos considerar aparte son los que utilizan el mtodo ELISA. Estn basados en una reaccin inmunolgica y al igual que los test kits, la deteccin puede ser tanto sensorial como instrumental. Validacin de los sistemas de medida cualitativos Al igual que los mtodos de medida cuantitativos, los mtodos cualitativos tambin deben validarse. La validacin de un mtodo no depende de que ste sea
cuantitativo o cualitativo, ya que validar consiste en verificar y documentar su validez, su adecuacin a unos requisitos previamente establecidos. Esta es la idea que queda recogida en la definicin proporcionada por la norma ISO 8402 (ver cuadro 1) y que implica el concepto de adecuacin a la finalidad o propsito perseguido, fit-for-purpose.
Validacin
Validacin es la confirmacin mediante la examen y la provisin de una evidencia objetiva de que se han satisfecho unos requisitos particulares para un uso pretendido y especfico.
Cuadro 1, Definicin de validacin segn la norma ISO 8402
Por lo tanto, ante cada problema concreto, la validacin implica como paso previo la definicin de los requisitos analticos, o parmetros de calidad (en ingls, performance characteristics), que se precisan y, una vez definidos, el siguiente paso consiste en determinarlos. La primera gran diferencia que encontramos entre el anlisis cuantitativo y el anlisis cualitativo es la forma de expresar el resultado (figura 2). Es bien conocido que la expresin de un resultado cuantitativo se
caracteriza por dos valores numricos, el primero es la estimacin del valor verdadero y el segundo corresponde a la incertidumbre que est asociada a la dispersin del resultado o intervalo dentro del cual tenemos cierta fiabilidad de que se encuentra el valor verdadero.
vista
matemtico-estadstico,
tanto
cuantitativos como cualitativos. Algunos de los parmetros de tipo cualitativo, han sido definidos recientemente por la AOAC 1995 [Feldsine 2000], mientras que en otros se est actualmente trabajando en su definicin.
Cuantitativo
Binario/Cualitativo
Probabilidad de falso positivo y negativo Sensibilidad, Especificidad Selectividad: Interferencias Lmite de deteccin Lmite de corte (cut-off) Incertidumbre o regin de error Robustez .
ANLISIS CUANTITATIVO
ANLISIS CUALITATIVO / SCREENING
Sensibilidad, Especificidad Selectividad: Interferencias Lmite de deteccin Rango y Linealidad Incertidumbre
VALOR ESTIMADO INCERTIDUMBRE
S I / NO CON PROBABILIDAD DE IL EROR
Exactitud: veracidad, precisin Robustez
Figura 2, Expresin del resultado analtico.
Tabla 2. Parmetros de calidad.
El resultado de un anlisis cualitativo tambin se caracteriza por dos valores, el primero es binario SI/NO, y el segundo es la probabilidad de error asociada a la decisin tomada. Parmetros de calidad Los sistemas de screening tienen unas connotaciones especiales que conllevan una cuidadosa adaptacin de los parmetros de calidad que estn bien definidos y estudiados en los procesos de medida con finalidad cuantitativa, bien sean de tipo fsico como qumico. En la tabla 2 se muestran los parmetros ms relevantes desde el punto de
Cabe resaltar que algunos son especficos del anlisis cualitativo, como son la proporcin de falsos positivos y negativos y el lmite de corte o cut-off. Otros, como especificidad, sensibilidad y lmite de deteccin, pueden tener un significado ligeramente diferente aunque mantienen el mismo nombre que en el cuantitativo. Finalmente, decir que la mayora de los parmetros cualitativos, al ser de naturaleza binaria SI/NO, se expresan en trminos probabilsticos. De forma genrica podramos decir que la validacin de cualquier mtodo de anlisis implica el establecimiento de los parmetros
de calidad considerados bsicos: trazabilidad, exactitud, representatividad, etc. De los parmetros caractersticos podemos de del destacar calidad anlisis aquellos propios que y cualitativo hacen
En este tipo de test kits lo ideal es que el lmite real al que criba el test kit, denominado lmite de corte o cut-off, coincida con el lmite legislativo, pero as como el legislativo es un lmite terico, el de corte es un lmite experimental (figura 3).
referencia o estn relacionados con niveles de concentracin; as podemos distinguir el lmite de deteccin, el lmite de corte o cutoff y el lmite legislativo. La situacin habitual que nos solemos encontrar es que la legislacin indica el contenido mximo o mnimo de un
Respuesta Negativa
Respuesta Positiva c= 2ng/g Concentracin
Figura 3, Respuesta terica de un test kit
Pero desde el punto de vista experimental hay que tener en cuenta que si representamos la respuesta del kit en funcin de la concentracin se pueden distinguir 3 zonas (figura 4): a) zona donde se obtiene siempre una respuesta negativa (correctos negativos), b) zona donde para una misma concentracin se pueden obtener tanto respuestas positivas como negativas, corresponde a la zona de falsos positivos y negativos, y c) zona donde se obtiene siempre una respuesta positiva (correctos positivos).
determinado analito en una muestra. Si tomamos como referencia la presencia de un contaminante, la legislacin fija el contenido mximo, por ejemplo el contenido mximo de Aflatoxina B1 en fruto seco es de 2 ng/g [EC No. 257/2002]. Centrmonos en los mtodos cualitativos sensoriales, concretamente en los test kit que hoy en da son ampliamente utilizados. Un caso concreto sera aquel en que cuando la muestra contiene menos de 2 ng/g de Aflatoxina B1 se obtiene una repuesta negativa (aparece color), mientras que si la concentracin es superior la respuesta es positiva (no aparece color) [Aflacard B1 2002].
Regin de no fiabilidad o error Zona de correctos negativos Zona de falsos positivo Zona de falsos negativo Zona de correctos positivos Concentracin
c= 2ng/g
Figura 4, Respuesta experimental de un test kit
En el ejemplo concreto de un contaminante como puede ser la Aflatoxina B1, est claro que interesa no dar ningn falso negativo (decir que no hay analito cuando en realidad si lo hay), mientras que s podemos aceptar falsos positivos puesto que en ningn caso implicara un riesgo para la salud ya que toda muestra que de una respuesta positiva se puesta analiza posteriormente mediante el mtodo confirmatorio. En este caso concreto, interesa que la zona 2) est por debajo del lmite legislativo para asegurar la ausencia de falsos negativos y adems que est lo ms prximo prximo posible al lmite legislativo, para reducir el nmero de falsos positivos, (figura 5).
Regin de no fiabilidad o error Zona de correctos negativos Zona de falsos positivos Zona de correctos positivos Concentracin
un sistema de screening y se definen como [Massart 1997]: Falsos negativos. Corresponden a aquellas muestras que contienen uno o ms analitos por encima del valor lmite permitido (lmite legislativo) y que al aplicar el test de screening dan una respuesta negativa. Es decir, como resultado del test de screening se concluye que la muestra no contiene analito por encima del nivel mximo fijado cuando en realidad s que contiene. Falsos positivos. Corresponden a aquellas muestras que realmente no contienen analito por encima del nivel mximo permitido y que sin embargo el test de screening indica que estn por encima de dicho nivel. Hay dos parmetros que estn relacionados con los lmites inferior y superior de concentracin que definen la zona de no fiabilidad que son la sensibilidad y la especificidad. Hay que resaltar que, como ya se ha comentado anteriormente, ambos se expresan como probabilidades. La sensibilidad est relacionada con el valor superior de la regin de no fiabilidad, mientras que la especificidad lo est con el valor inferior de dicha regin.
Lmite de corte = c c= 2ng/g
Fig. 5, Lmite de corte en el caso de un contaminante
Como queda reflejado en las figuras, alrededor del lmite de corte se sita una zona o regin de error o falta de fiabilidad (que en la literatura inglesa se denomina, unreliability). Esta zona corresponde al intervalo de concentraciones donde se obtienen los falsos positivos y negativos, por lo que est definida por un valor superior e inferior de concentracin de analito en muestra. Estos dos tipos de errores son dos parmetros bsicos en la caracterizacin de
6
La sensibilidad se define como la capacidad o habilidad del sistema de screening de detectar muestras positivas cuando realmente son positivas. De se forma define similar, capacidad la o especificidad detectar
caractersticas
de
funcionamiento
[EURACHEM 1999], y finalmente, se describe un mtodo basado en la aplicacin de los tests de hiptesis [Pulido 2002]. Este ltimo es similar al que se utiliza para el establecimiento de los parmetros de calidad en el anlisis cuantitativo. A continuacin presentamos los rasgos
habilidad del sistema de screening de muestras negativas cuando realmente son negativas. Finalmente, al igual que en los sistemas de medida cuantitativos, debe comprobarse que el mtodo que se utiliza para cribar tenga un lmite de deteccin inferior o igual al lmite de corte.
generales de cada una de los mtodos sin pretender desarrollarlos, sino dar una idea general de cuando sera ms adecuado adoptar cada una de ellos. Tablas de Contingencia
Mtodos para caracterizar un sistema de screening Se han desarrollado varios mtodos que permiten grado de caracterizar adaptacin un a sistema las de screening. Cada uno de ellos tiene distinto diferentes situaciones y problemticas que pueden encontrarse, atendiendo al tipo de medida o resultado obtenido. Dos de ellos se fundamentan en el concepto de probabilidad y en dicho sentido asocian una probabilidad al resultado de la medida: las tablas de contingencia y el teorema de Bayes [McFall 1999]. Un tercer mtodo se basa en el establecimiento de las curvas
Las ms sencillas son las que diferencian las muestras en dos categoras, positivo/negativo segn el mtodo de screening, y establece una tabla de comparacin respecto al resultado obtenido mediante un mtodo de referencia o confirmatorio (tabla 3). A partir de la tabla, se calculan los cuatro parmetros bsicos, definidos en la seccin anterior: falsos positivos, falsos negativos, sensibilidad y especificidad.
MUESTRA
Situacin real (mtodo cuantitativo)
analizarse por los dos mtodos, el de cribado

Igual o superior Positivo
Resultado screening
Inferior fp tn fp+tn
Total tp+fp fn+tn N
y el confirmatorio. Teorema de Bayes El teorema de Bayes se basa en la teora de probabilidades por lo que, desde el punto de vista analtico, la terminologa utilizada es compleja y presenta la dificultad del clculo de las distintas probabilidades intermedias. En concreto se calcula la probabilidad de dar como vlido (positivo o negativo) un resultado cuando en realidad es vlido, P(a/p). Esta probabilidad se denomina condicional. Cabe destacar que una buena estima de la incertidumbre o probabilidad de error mediante este procedimiento implica un nmero elevado de muestras. Si se compara con las tablas de contingencia, el teorema de Bayes s permite una estima individual (para cada muestra analizada) de la incertidumbre asociada o probabilidad de dar un resultado errneo. Curvas caractersticas Consiste en representar la probabilidad de obtener resultados positivos a distintos niveles de concentracin. Esta representacin es sigmoidal, y la posicin y amplitud de la
tp fn tp+fn
Negativo Total
Tabla 3, Tabla de contingencia con 2 categoras. Fp: falsos positivos, fn: falsos negativos, tp: total positivos, tn: total negativos, N: nmero total de ensayos realizados
Una de las ventajas ms importantes es su fcil aplicacin a mltiples tipos de bioensayos, campo en el que aparecen la mayora de las aplicaciones [Neil 1975, Hawass 1997]. Cabe resaltar que estos parmetros dan una medida global de la capacidad del mtodo de screening. Esto significa que se supone que la muestra problema a examinar de se comportar estadsticamente forma
semejante a las ya analizadas, con lo cual no se calcula una probabilidad de error para cada muestra en particular. Otro de los grandes inconvenientes es que la capacidad de la tabla depende del nmero de muestras analizadas y el diseo experimental utilizado para elaborar la tabla, y que para el clculo de los parmetros de calidad mencionados, todas las muestras deben
curva es caracterstica de cada sistema de screening (figura 6) [Ashley 2001 y 2002].
concentracin al que se quiere cribar (normalmente con un patrn) y para decidir si una muestra problema es positiva o negativa, se compara el valor de respuesta
Regin de Incertidumbre
100 90 80
Sensibilidad=P(X) =1-FN=100-
100 -
instrumental de la muestra problema con el valor previamente establecido (del patrn). Esta comparacin se realiza mediante tests de hiptesis [Pulido 2002].
N(x)
probabilidad
70 60 50 40 30 20 10 0
1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2
p r o b a b il it
P (X )
P(x)
2,4
A F B 1 c o n c e n t r a t io n ( p p b )
Especificidad= N(X)= =FP=
Cut-off Lmite de deteccin
Como ventajas cabe resaltar la familiaridad que desde un punto de vista analtico se tiene de trabajar con los tests de hiptesis. Si bien la probabilidad de error (probabilidad de cometer falsos positivos) es mayoritariamente conocida y utilizada en los laboratorios de anlisis, no ocurre lo mismo con la probabilidad (probabilidad de cometer falsos negativos). Adems, es un mtodo rpido y sencillo, fcilmente automatizable, que permite la asignacin de una incertidumbre o probabilidad de equivocarnos utilizando como tcnica de screening una tcnica instrumental. Como principal desventaja resaltar que no es directamente aplicable cuando la tcnica de screening aplicada es un kit no instrumental o se basa en una observacin visual no cuantificable por parte del analista.
Figura 6, Curva caracterstica de funcionamiento.
El principal inconveniente de este mtodo, al igual que se ha mencionado en el mtodo de Bayes, es la elevada carga experimental ya que hay que realizar un nmero elevado de anlisis a distintos niveles de concentracin. Como ventaja, tal y como se refleja en la figura 6, resaltar que adems de los cuatro parmetros bsicos (falsos positivos, falsos negativos, sensibilidad y especificidad), se obtiene mucha informacin adicional sobre las caractersticas del mtodo de screening: el lmite de corte, lmite de deteccin, regin de incertidumbre, etc. Aplicacin de los tests de hiptesis En este caso, se establece el valor de respuesta instrumental al nivel de
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Los autores agradecen todos los comentarios relacionados con los contenidos de este artculo. Pueden dirigirse, mediante mensaje electrnico, a la direccin: quimio@quimica.urv.es. Una versin en soporte electrnico de este artculo e informacin adicional pueden encontrarse en http://www.quimica.urv.es/quimio
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GUIDANCE SERIES
ILAC-G24
Edition 2007 (E)
INTERNATIONAL DOCUMENT
OIML D 10
Edition 2007 (E)
Guidelines for the determination of calibration intervals of measuring instruments
Guide pour la dtermination des intervalles de calibration des instruments de mesure
INTERNATIONAL LABORATORY ACCREDITATION COOPERATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE METROLOGIE LEGALE
INTERNATIONAL ORGANIZATION OF LEGAL METROLOGY
ILAC-G24:2007 / OIML D 10:2007 (E)
CONTENTS
Copyright ILAC .................................................................................................................................. 3 Foreword OIML .................................................................................................................................. 4 Preamble ................................................................................................................................................. 5 Purpose ................................................................................................................................................... 5 Authorship .............................................................................................................................................. 5 1. Introduction ............................................................................................................................... 5 2. Initial choice of calibration intervals ......................................................................................... 7 3. Methods of reviewing calibration intervals .............................................................................. 7 Method 1: Automatic adjustment or staircase (calendar-time) ...............................................8 Method 2: Control chart (calendar-time) ................................................................................... 8 Method 3: In-use time ............................................................................................................ 9 Method 4: In service checking, or black-box testing ............................................................. 9 Method 5: Other statistical approaches ..................................................................................... 9 Bibliography ......................................................................................................................................... 11
ILAC-G24:2007 / OIML D 10:2007 (E)
Copyright (ILAC) ILAC-G24:2007

Copyright ILAC 2007
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Foreword (OIML)
The International Organization of Legal Metrology (OIML) is a worldwide, intergovernmental organization whose primary aim is to harmonize the regulations and metrological controls applied by the national metrological services, or related organizations, of its Member States. The main categories of OIML publications are: International Recommendations (OIML R), which are model regulations that establish the metrological characteristics required of certain measuring instruments and which specify methods and equipment for checking their conformity. OIML Member States shall implement these Recommendations to the greatest possible extent; International Documents (OIML D), which are informative in nature and which are intended to harmonize and improve work in the field of legal metrology; International Guides (OIML G), which are also informative in nature and which are intended to give guidelines for the application of certain requirements to legal metrology; and International Basic Publications (OIML B), which define the operating rules of the various OIML structures and systems. OIML Draft Recommendations, Documents and Guides are developed by Technical Committees or Subcommittees which comprise representatives from the Member States. Certain international and regional institutions also participate on a consultation basis. Cooperative agreements have been established between the OIML and certain institutions, such as ISO and the IEC, with the objective of avoiding contradictory requirements. Consequently, manufacturers and users of measuring instruments, test laboratories, etc. may simultaneously apply OIML publications and those of other institutions. International Recommendations, Documents, Guides and Basic Publications are published in English (E) and translated into French (F) and are subject to periodic revision. Additionally, the OIML publishes or participates in the publication of Vocabularies (OIML V) and periodically commissions legal metrology experts to write Expert Reports (OIML E). Expert Reports are intended to provide information and advice, and are written solely from the viewpoint of their author, without the involvement of a Technical Committee or Subcommittee, nor that of the CIML. Thus, they do not necessarily represent the views of the OIML. This publication - reference ILAC-G24 / OIML D 10, Edition 2007 - was developed by the ILAC Accreditation Committee and by OIML TC 4 Measurement standards and calibration and verification devices. This version supersedes OIML D 10 (Edition 1984). It was approved for final publication by ILAC in November 2005 and by the International Committee of Legal Metrology in 2002. OIML Publications may be downloaded from the OIML web site in the form of PDF files. Additional information on OIML Publications may be obtained from the Organizations headquarters: Bureau International de Mtrologie Lgale 11, rue Turgot - 75009 Paris - France Telephone: 33 (0)1 48 78 12 82 Fax: 33 (0)1 42 82 17 27 E-mail: biml@oiml.org Internet: www.oiml.org
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Guidelines for the determination of calibration intervals of measuring instruments Preamble

This Guidance Document is a revision of OIML D 10. It was drafted by ILAC (International Laboratory Accreditation Cooperation) and the OIML (International Organization of Legal Metrology) as a joint venture and is published as such. It is important to point out that: It is not the responsibility of accreditation bodies to teach laboratories how to run their business. It is the responsibility of each individual laboratory to choose to implement any or none of the methods described in this Document based on its individual needs and its individual assessment of risks. It is also the responsibility of the laboratory to evaluate the effectiveness of the method it chooses to implement and take responsibility for the consequences of the decisions taken as a result of the method chosen.
Purpose
The purpose of this Document is to give laboratories, particularly while setting up their calibration system, guidance on how to determine calibration intervals. This Document identifies and describes the methods that are available and known for the evaluation of calibration intervals.
Authorship
This publication was developed by the OIML and ILAC as a joint venture and as a revision of OIML D 10. Within ILAC the focal point has been the Accreditation Committee.
1.
Introduction
An important aspect for maintaining the capability of a laboratory to produce traceable and reliable measurement results is a determination of the maximum period that should be permitted between successive calibrations (recalibrations) of the reference or working standards and measuring instruments used. Various international standards take this aspect into account, e.g.: ISO/IEC 17025:2005 [1] contains the following requirements: Clause 5.5.2: Clause 5.5.8: Calibration programs shall be established for key quantities or values of the instruments where these properties have a significant effect on the results. "Whenever practicable, all equipment under the control of the laboratory and requiring calibration shall be labeled, coded, or otherwise identified to indicate the status of calibration, including the data when last calibrated and the date or expiration criteria when recalibration is due. All equipment used for tests and/or calibrations, including equipment for subsidiary measurements (e.g. for environmental conditions) having a significant effect on the accuracy or validity of the result of the test, calibration or sampling shall be calibrated before being put into service. The
Clause 5.6.1
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laboratory shall have an established program and procedure for the calibration of its equipment. Note: Such a program should include a system for selecting, using, calibrating, checking, controlling and maintaining measurement standards, reference materials used as measurement standards, and measuring and test equipment used to perform tests and calibrations.
ISO 9001:2000 [10] contains the requirement: Clause 7.6: Where necessary to ensure valid results, measuring equipment shall: a) be calibrated or verified at specified intervals, or prior to use, against measurement standards traceable to international or national measurement standards; where no such standards exist, the basis used for calibration or verification shall be recorded.
Note:
This Document focuses on the determination of calibration intervals of measuring instruments. The methods described can also be used in an appropriate manner for reference standards, working standards, etc., which are under the control of the laboratory.
In line with the terminology of the VIM [11], the term measuring instrument is used instead of measuring equipment in this Document. The general purpose of a periodic calibration is: to improve the estimation of the deviation between a reference value and the value obtained using a measuring instrument, and the uncertainty in this deviation, at the time the instrument is actually used; to reassure the uncertainty that can be achieved with the measuring instrument; and to confirm whether or not there has been any alteration of the measuring instrument which could introduce doubt about the results delivered in the elapsed period. One of the most significant decisions regarding the calibration is When to do it and How often to do it. A large number of factors influence the time interval that should be allowed between calibrations and should be taken into account by the laboratory. The most important factors are: uncertainty of measurement required or declared by the laboratory; risk of a measuring instrument exceeding the limits of the maximum permissible error when in use; cost of necessary correction measures when it is found that the instrument was not appropriate over a long period of time; type of instrument; tendency to wear and drift; manufacturers recommendation; extent and severity of use; environmental conditions (climatic conditions, vibration, ionizing radiation, etc.); trend data obtained from previous calibration records; recorded history of maintenance and servicing; frequency of cross-checking against other reference standards or measuring devices; frequency and quality of intermediate checks in the meantime; transportation arrangements and risk; and degree to which the serving personnel are trained.
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Although the cost of calibration cannot normally be ignored in determining the calibration intervals, the increased measurement uncertainties or a higher risk in terms of measurement quality and services arising from longer intervals may mitigate against the apparently high cost of a calibration. The process of determining calibration intervals is a complex mathematical and statistical process requiring accurate and sufficient data taken during the calibration process. There appears to be no universally applicable single best practice for establishing and adjusting the calibration intervals. This has created a need for better understanding of the calibration interval determination. As no single method is ideally suited for the whole range of measuring instruments, some of the simpler methods of assigning and reviewing the calibration interval and their suitability for different types of instruments are covered in this Document. The methods have been published in more detail in certain standards (e.g. [2]), or by reputable technical organizations (e.g. [5], [6], [7]), or in relevant scientific journals. The methods can be used for the initial selection of calibration intervals and the readjustment of these intervals on the basis of experience. Laboratory-developed methods or methods adopted by the laboratory may also be used if they are appropriate and if they are validated. The laboratory should select appropriate methods and should document those used. Calibration results should be collected as historical data, in order to base future decisions for calibration intervals of the instruments. Independently from the determined calibration intervals, the laboratory should have an appropriate system to ensure the proper functioning and calibration status of the standards and measuring instruments used between calibrations (see Clauses 5.5.10 and 5.6.3.3 of ISO/IEC 17025:2005).
2.

Initial choice of calibration intervals

the instrument manufacturers recommendation; expected extent and severity of use; the influence of the environment; the required uncertainty in measurement; maximum permissible errors (e.g. by legal metrology authorities); adjustment of (or change in) the individual instrument; influence of the measured quantity (e.g. high temperature effect on thermocouples); and pooled or published data about the same or similar devices.
The initial decision in determining the calibration interval is based on the following factors:
The decision should be made by a person or by persons with general experience of measurements, or of the particular instruments to be calibrated, and preferably also with knowledge of the intervals used by other laboratories. An estimate should be made for each instrument or group of instruments as to the length of time the instrument is likely to remain within the maximum permissible error after calibration.
3.
Methods of reviewing calibration intervals
Once calibration on a routine basis has been established, adjustment of the calibration intervals should be possible in order to optimize the balance of risks and costs as stated in the introduction. It will probably be found that the intervals initially selected do not give the desired optimum results due to a number of reasons, for example: instruments may be less reliable than expected; the usage may not be as anticipated; it may be sufficient to carry out a limited calibration of certain instruments instead of a full calibration; and
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the drift determined by the recalibration of the instruments may show that longer calibration intervals may be possible without increasing risks, etc.
A range of methods is available for reviewing the calibration intervals. The method chosen differs according to whether: instruments are treated individually or as groups (e.g. by manufacturers model or by type); instruments exceed the calibration by drift over time or by usage; instruments show different types of instabilities; instruments undergo adjustments; and data are available and importance is attached to the history of calibration of the instruments.
The so-called engineering intuition which fixed the initial calibration intervals, and a system which maintains fixed intervals without review, are not considered as being sufficiently reliable and are therefore not recommended.
Method 1: Automatic adjustment or staircase (calendar-time)

Each time an instrument is calibrated on a routine basis, the subsequent interval is extended if it is found to be within e.g. 80 % of the maximum permissible error that is required for measurement, or reduced if it is found to be outside this maximum permissible error. This staircase response may produce a rapid adjustment of intervals and is easily carried out without clerical effort. When records are maintained and used, possible trouble with a group of instruments indicating the need for a technical modification, or preventive maintenance, will be known. A disadvantage of systems treating instruments individually may be that it is difficult to keep the calibration workload smooth and balanced, and that it requires detailed advanced planning. It would be inappropriate to take an interval to extremes using this method. The risk associated with withdrawing large numbers of certificates issued, or redoing large numbers of jobs may ultimately be unacceptable.
Method 2: Control chart (calendar-time)

Control charting is one of the most important tools of Statistical Quality Control (SQC) and welldescribed in publications (e.g. [3], [4]). In principle, it works as follows: Significant calibration points are chosen and the results are plotted against time. From these plots, both dispersion of results and drift are calculated, the drift being either the mean drift over one calibration interval, or in the case of very stable instruments, the drift over several intervals. From these figures, the optimum interval may be calculated. This method is difficult to apply (in fact it is very difficult to apply in the case of complex instruments) and can virtually only be used with automatic data processing. Before calculations can commence, considerable knowledge of the law of variability of the instrument, or similar instruments, is required. Again, it is difficult to achieve a balanced workload. However, a considerable variation of the calibration intervals from those prescribed is permissible without invalidating the calculations; reliability can be calculated and in theory at least gives the efficient calibration interval. Furthermore, the calculation of the dispersion of results will indicate whether the manufacturers specification limits are reasonable and the analysis of drift found may help in indicating the cause of drift.
Method 3: In-use time

This is a variation on the foregoing methods. The basic method remains unchanged but the calibration interval is expressed in hours of use, rather than calendar months. The instrument is fitted with an elapsed time indicator and is returned for calibration when the indicator reaches a specified value. Examples of instruments are thermocouples, used at extreme temperatures, dead weight tester for gas
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pressure, length gauges (i.e. instruments that may be subject to mechanical wear). The important theoretical advantage of this method is that the number of calibrations performed and therefore the cost of calibration varies directly with the length of time that the instrument is used. Furthermore, there is an automatic check on instrument utilization. However, there are many practical disadvantages in using an automatic check, including: it cannot be used with passive instruments (e.g. attenuators) or standards (resistance, capacitance, etc.); it should not be used when an instrument is known to drift or deteriorate when on the shelf, or when handled, or when subjected to a number of short on-off cycles; the initial cost of the provision and installation of suitable timers is high, and since users may interfere with them, supervision may be required which again will increase costs; it is even more difficult to achieve a smooth flow of work than with the methods mentioned above, since the (calibration) laboratory has no knowledge of the date on which the calibration interval will terminate.
Method 4: In service checking, or black-box testing

This is a variation on methods 1 and 2 and is particularly suitable for complex instruments or test consoles. Critical parameters are checked frequently (once a day or even more often) by portable calibration gear, or preferably, by a black box made up specifically to check the selected parameters. If the instrument is found to be outside the maximum permissible error by the black box, it is returned for a full calibration. The major advantage of this method is that it provides maximum availability for the instrument user. It is very suitable for instruments geographically separated from the calibration laboratory, since a complete calibration is only done when it is known to be required. The difficulty is in deciding on the critical parameters and designing the black box. Although theoretically the method is very reliable, this is slightly ambiguous, since the instrument may be failing on some parameter not measured by the black box. In addition, the characteristics of the black box itself may not remain constant. Examples of instruments suitable for this method are density meters (resonance type); Pt-resistance thermometers (in combination with calendar-time methods); dosimeters (source included); and sound level meters (source included).
Method 5: Other statistical approaches

Methods based on statistical analysis of an individual instrument or instrument type can also be a possible approach. These methods are gaining more and more interest, especially when used in combination with adequate software tools. An example of such a software tool and its mathematical background is described by A. Lepek [9]. When large numbers of identical instruments (i.e. groups of instruments) are to be calibrated, the calibration intervals can be reviewed with the help of statistical methods. Detailed examples can be found for example in the work of L.F. Pau [7].
Method comparison
No one method is ideally suited for the full range of instruments encountered (see Table 1). Furthermore, it should be noted that the method chosen will be affected by whether the laboratory intends to introduce planned maintenance. There may be other factors which will affect the laboratorys choice of method. The method chosen will, in turn, affect the form of records to be kept.
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Method 1 staircase
Method 2 control chart high high medium low medium
Method 3 in-use time
Method 4 black box high low medium high high
Method 5 1) other statistical approaches medium high bad low medium
Reliability Effort of application Work-load balanced Applicability with respect to particular devices Availability of instruments
medium low medium medium medium
medium medium bad high medium
1) Better grading is achieved when an appropriate software tool is used.
Table 1: Comparison of methods reviewing calibration intervals
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Bibliography
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G309 CAPACITACIN EN TCNICAS ESPECFICAS DE LABORATORIO. PARTE 2: CURSO BSICO DE VALIDACIN DE MTODOS ANALTICOS
INDICE
1 INTRODUCCIN ...................................................................................................................... 2 2. CMO EMPEZAR?................................................................................................................ 2 2.1 Requisitos Metrolgicos ......................................................................................................... 2 2.2 Parmetros de validacin ....................................................................................................... 4 2.2 Variables Controladas ............................................................................................................ 3 2.4 Mtodos Cualitativos .............................................................................................................. 5 2.4.1 Verificacin de Mtodos Normalizados ............................................................................... 5 2.4.2 Validacin de mtodos ........................................................................................................ 5 3. INTERVALO DE TRABAJO ..................................................................................................... 6 3.1 Intervalo Lineal ....................................................................................................................... 6 3.1.1 Diseo experimental Intervalo de trabajo ............................................................................ 7 3.1.2 Evaluacin de Resultados ................................................................................................... 8 3.2 Limite de Deteccin y Cuantificacin ................................................................................... 11 3.2.1 Diseo experimental Limite de Deteccin y Cuantificacin............................................... 12 3.3 Resultados Obtenidos .......................................................................................................... 13 3.4 Casos Prcticos Intervalo de trabajo.................................................................................... 14 4. PRECISIN ........................................................................................................................... 17 4.1 Condiciones de los estudios de Precisin ............................................................................ 18 4.1.1 Diseo experimental Repetibilidad, Precisin Intermedia y Reproducibilidad .................. 18 4.1.2 Evaluacin de Resultados ................................................................................................. 18 4.3 Resultados Obtenidos .......................................................................................................... 20 5. EXACTITUD ........................................................................................................................... 26 5.1 Veracidad ............................................................................................................................. 26 5.2 Valor de referencia ............................................................................................................... 27 5.2.2 Evaluacin de la Exactitud ................................................................................................ 28 5.3 Resultados Obtenidos .......................................................................................................... 29 5.3.1 Diseo Experimental Exactitud ......................................................................................... 28 5.4 Casos Prcticos ................................................................................................................... 29 6 Especificidad ........................................................................................................................... 33 7. ROBUSTEZ ............................................................................................................................ 35 7.1 Caso Practico ....................................................................................................................... 36 8. INCERTIDUMBRE ................................................................................................................. 37 8.1 Estimacin de la Incertidumbre en base a datos de validacin ........................................... 37 8.1.1 Incertidumbre solo en base al componente aleatorio........................................................ 37 8.1.2 Incertidumbre en base al componente sistemtico y aleatorio ......................................... 37 9. Informe de Validacin ............................................................................................................ 39 10. ANEXOS .............................................................................................................................. 40
En consorcio con: AGRICONSULTING, ICON INSTITUTE, INYPSA Y PTB Fortalecimiento de la Competitividad del Sector Exportador Paraguayo EuropeAid/120503/C/SV/PY
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VALIDACIN DE MTODOS
1 INTRODUCCIN La validacin de un mtodo es un requisito importante en la prctica del ensayo qumico. Sin embargo, la percepcin de su importancia, porqu debe hacerse y cundo, y exactamente que necesita hacerse, parece ser deficiente entre los qumicos analticos. En la literatura tcnica existe mucha informacin relacionada a la validacin de mtodos, especialmente en lo que concierne a mtodos especficos, pero muy frecuentemente es subutilizada. Algunos ensayistas ven la validacin de mtodos como algo que slo puede hacerse en colaboracin con otros laboratorios y por consiguiente no la realizan. El curso est dirigido a los laboratorios que necesitan validar mtodos pero que trabajan aislados y no tienen la posibilidad inmediata de participar en ensayos de colaboracin. 2. CMO EMPEZAR? 2.1 Requisitos Metrolgicos En principio se debe establecer lo Requisitos Metrolgicos del Cliente, que nos permitir seleccionar el mtodo o principio de medicin a utilizar lastimosamente no se tienen mtodos universales capaces de aplicarse para todas las matrices y rangos.
Electrogravimetra Emisin ptica FRX Gravimetra Titulacin Absorcin Atmica con flama ICP emisin-radial Cromatografa de gases y lquidos ICP emisin-axial Absorcin Atmica Generacin de hidruros ICP-MS
100 % 10 % 1% 1000000 100000 10000 1 000 mg/L 1000 1 mg/L 100 10 1 0.1 0.01 0.001 0.0001
Absorcin atmica Horno de grafito
Lmites de deteccin en g/L
Fig. 1 Intervalo til del ensayo qumico cuantitativo Cuando no se tenga bien definido el rango este tambin podr basarse en: Variabilidad de las muestras a ensayar Requisitos legales o normativos Especificaciones de producto o produccin Economa del laboratorio Rango de trabajo de los equipos con los que se cuenta
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2.2 Variables Controladas Ya que el proceso de validacin es prcticamente el mismo proceso de ensayo las variables a considerar sern:
Condiciones para Validacin

Instalaciones y Condiciones Ambientales (Separacin de Ambientes, Orden y Limpieza) Equipos (Matenimiento, Especificacines) Trazabilidad (Calibracin, Calificacin, Material de Referencia)
Servicios y Suministros (Reactivos, Insumos y Proveedores)
Fig. 2 Condiciones para Validacin Servicios y Suministros (Reactivos, Insumos y Proveedores) se debe garantizar la provisin de reactivos e insumos con la calidad exigida por el mtodo todo esto deber ser adquirido de proveedores calificados. Instalaciones y Condiciones Ambientales (Separacin de Ambientes, Orden y Limpieza) se debe contar con las instalaciones exigidas por el mtodo, se deben tener monitoreadas y controladas las condiciones ambientales que especifique el mtodo. Cuando el mtodo no establezca requisitos de condiciones ambientales se debe optar por las especificaciones de los equipos ya que si estas no se cumplen el equipo no operara de acuerdo a exigencias del mtodo. Caso contrario se deber demostrar que el incumplimiento de dicha especificacin no afecta al desempeo del equipo. Mtodo de Ensayo (Documentado) como mnimo se debe tener documentado el mtodo sujeto a validacin, el contenido del mismo deber basarse en el punto 5.10.2 de la Norma ISO/IEC 17025:2005. Si se trata de un mtodo normalizado este debe contener datos sobre Repetibilidad, Reproducibilidad y Exactitud si no los tuviera se debe planificar su determinacin durante la validacin. Equipos (Mantenimiento, Especificaciones) el laboratorio debe contar con todos los equipos para el desarrollo del mtodo, estos deben estar mantenidos y en pleno funcionamiento, cuando el mtodo indique especificaciones de equipo se debe comparar con las de los equipos del laboratorio. Trazabilidad (Calibracin, Calificacin, Material de referencia) todo equipo, material que realice medicin debe ser calibrado o en su caso calificado. Se debe contar con material de referencia certificado en la matriz y concentracin de los analitos de inters dependiendo del alcance del mtodo se podr requerir mayor nmero de materiales y matrices.
Mtodo de Ensayo (Documentado)
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2.2 Parmetros de validacin El laboratorio tiene que decidir cules de los parmetros de desempeo del mtodo necesitan caracterizarse con el fin de validar el mtodo. La caracterizacin del desempeo del mtodo es un proceso costoso pero puede restringirse inevitablemente por consideraciones de tiempo y costo. Al empezar con una especificacin analtica considerada cuidadosamente, se tiene una buena base sobre la cual planear el proceso de validacin. Algunos de los parmetros pudieron haber sido determinados aproximadamente durante la etapa de desarrollo del mtodo. A menudo una serie especfica de experimentos proporcionar informacin sobre varios parmetros, as que, con una planeacin cuidadosa puede minimizarse el esfuerzo requerido para obtener la informacin necesaria. Segn la siguiente tabla1 Mtodo Normalizado Comprobar que el Laboratorio domina el ensayo y lo utiliza correctamente. Exactitud. Repetibilidad. Incertidumbre. Lmite de Deteccin (si la Norma lo indica) Mtodo Normalizado Determinar: Intervalo de trabajo Linealidad Recuperacin Robustez Selectividad Estabilidad Reproducibilidad Modificacin de un mtodo Normalizado Comprobar que el Laboratorio domina el ensayo y lo utiliza correctamente. Exactitud. Repetibilidad. Reproducibilidad No difieren del mtodo original. Modificacin de un mtodo Normalizado Determinar: Intervalo de trabajo Linealidad Recuperacin Robustez Selectividad Estabilidad Reproducibilidad Mtodo Interno Comprobar que el Laboratorio domina el ensayo y lo utiliza correctamente. Exactitud. Repetibilidad. Reproducibilidad Son suficientes para el objetivo de aplicacin. Mtodo Interno Determinar: Selectividad Linealidad Exactitud Intervalo de trabajo Repetibilidad Reproducibilidad Estabilidad Lmite de deteccin Lmite de cuantificacin Recuperacin Robustez Sensibilidad Incertidumbre Realizar Carta de control con los resultados de materiales de referencia. Controles Intralaboratorio Participar en interlaboratorios
Realizar Carta de control con los resultados de materiales de referencia. Controles Intralaboratorio Participar en interlaboratorios
Realizar Carta de control con los resultados de materiales de referencia. Controles Intralaboratorio Participar en interlaboratorios
ORGANIZACIN DE LAS NACIONES UNIDAS PARA LA AGRICULTURA Y LA ALIMENTACIN (FAO) Proyecto TCP/RLA/3013 (A) Desarrollo de un sistema integral de aseguramiento de calidad para laboratorios de anlisis de alimentos en Amrica del Sur
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2.3 Mtodos Cualitativos 2.3.1 Verificacin de Mtodos Normalizados Cuando el laboratorio utiliza mtodos cualitativos debe, ms que en cualquier otro caso, tratar de utilizar mtodos normalizados, ya que la disponibilidad de muestras del analito de concentracin conocida es escasa. La verificacin de mtodos de ensayos normalizados cualitativos se basa en la confiabilidad, principalmente de: El sistema de control interno de calidad de las variables de control: personal, equipos, materiales, reactivos, instalaciones, condiciones ambintales y medios de control (se recomienda ver 4.11). La participacin en comparaciones interlaboratorios y programas de ensayos de aptitud acordes con el criterio de trazabilidad. 2.3.2 Validacin de mtodos Si el laboratorio utiliza mtodos no normalizados se debe comprobar la robustez del mtodo determinando su especificidad, lmite de deteccin (sensibilidad) y tasa de falsos negativos y positivos. Las caractersticas a determinar en un mtodo de ensayo cualitativo son las siguientes: Especificidad, Lmite de deteccin (sensibilidad), Falsos positivos, Falsos negativos, Exactitud relativa (si fuera necesario). Se debe determinar las caractersticas del mtodo y la forma en que se utiliza en el laboratorio para comprobar, si fuera necesario, que estas caractersticas son compatibles con las que establece el mtodo, las definidas previamente por el responsable del laboratorio o el cliente. Los laboratorios pueden contar con una referencia que, de ser posible, debera ser independiente del equipo y reactivo que entrega el proveedor, y deben hacer todo lo posible por experimentar sobre muestras reales y medios de control. Para garantizar el desempeo del mtodo ya sea cuantitativo o cualitativo a lo largo del tiempo, es necesario: Implantar un sistema de control interno de calidad de los resultados Participar en comparaciones inter laboratorios y programas de ensayos de aptitud (en los casos que existan)
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3. INTERVALO DE TRABAJO
Para cualquier mtodo cuantitativo es necesario determinar el intervalo de concentraciones del analito o los valores de la propiedad relacionada, sobre los cuales el mtodo puede aplicarse. Note que esto se refiere al intervalo de concentraciones o a los valores de la propiedad relacionada, de las disoluciones medidas realmente ms que de las muestras originales. En el extremo inferior del intervalo de concentracin, los factores limitantes son los valores del lmite de deteccin y/o cuantificacin. En el extremo superior del intervalo de concentracin, las limitaciones sern impuestas por varios efectos que dependen del sistema de respuesta del instrumento.
INTERVALO DETRABAJO
RESPUESTA
LIMITE DE DETECCIN
LIMITE DE CUANTIFICACIN
INTERVALO LINEAL CONCENTRACIN
FIG 3 Intervalo de Trabajo
3.1 Intervalo Lineal Dentro del intervalo de trabajo puede existir un intervalo de respuesta lineal. Dentro del intervalo lineal la seal de respuesta tendr una relacin lineal con la concentracin del analito o del valor de la propiedad relacionada. La extensin de este intervalo puede establecerse durante la evaluacin del intervalo de trabajo. Note que los clculos de regresin por ellos mismos, son insuficientes para establecer la linealidad. Para hacer esto, puede ser suficiente una inspeccin visual de la lnea y de los residuales. Existen pruebas objetivas tales como las pruebas de bondad de ajuste que continan siendo las mejores.
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VALOR MEDIDO
* * * * * * * * * b *
yq
}a
y
MATERIAL DEREFERENCIA
FIG 4 Intervalo Lineal
3.1.1 Diseo experimental Intervalo de trabajo Para determinar el intervalo lineal de un mtodo se recomienda lo siguiente: Se recomienda realizar mediciones al menos en 5 niveles distintos de concentracin dentro del intervalo de trabajo. Realizar mediciones en Material de Referencia Certificado en cada punto, caso contrario se podr trabajar con muestras enriquecidas no superando el 20% de la concentracin original para no alterar la matriz. Realizar al menos 10 mediciones en cada nivel de concentracin.
Para realizar la toma de datos se podr utilizar las siguientes tablas. Ensayista 1 2 .. .. .. .. i .. .. .. p Nivel j
..
..
..
..
q-1
.. .. yijk .. ..
Tabla 1 Formulario de datos originales (Formulario A)
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Ensayista 1 2 .. .. I .. P
Nivel 1
..
..
..
..
q-1
y ij
Tabla 2 Formulario de promedios (Formulario B) Ensayista 1 2 .. .. i .. P Nivel 1
..
..
..
..
q-1
Sij
Tabla 3 Formulario de Desviaciones Estndar (Formulario C) 3.1.2 Evaluacin de Resultados La evaluacin de los resultados consiste en: 3.1.2.1 Verificar que los resultados pertenecen a la misma poblacin estadstica Calcular los promedios en cada celda con un decimal ms que los datos originales:
y ij =
1 nij
y
k =1
nij
ijk
Ec(1)
Calcular la desviacin estndar en cada celda:

ij 1 S ij = y ijk y ij nij 1 k =1
Ec(2)
Evaluar los resultados y eliminar los valores anmalos 3.1.2.2 Tcnica grafica Consiste en calcular y graficar el estadstico h y k de Mandell
hij =
y ij y j
j 1 (p j 1) y ij y j i =1
Ec(3)
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k ij =
Sij p j
S
i =1
pj
Ec(4)
ij
Y graficar para cada ensayista y comparar con los lmites Tabulados (Anexos) del 95% y 99% de confianza dependiendo del nmero de ensayistas y el nmero de repeticiones por celda. El h nos muestra cun preciso es ensayista aquellos que superen el indicar para 99% estos valores deben ser eliminados pero si estn entre los dos limites ser decisin del laboratorio su eliminacin o no. k indica la exactitud de la medicin y puede ser analizada de igual forma que h. 3.1.2.3 Tcnica numrica Test de Cochrans Consiste en calcular el estadstico C
C=
2 Sij max
S
i =1
Ec(5)
2 ij
y compararlo con el valor tabulado (Anexos) en caso de incumplimiento se puede pensar en eliminar esos datos. Test de Grubbs Primera evaluacin Consiste en calcular el estadstico Gij
Gij =
y ij y j
j 1 y ij y j (p j 1) i =1
Ec(6)
Y se debe comparar con el valor tabulado (Anexos) tanto para 95% y 99% de confianza. En caso de superar el 99% se considera el valor como outlier pero si est entre 95% y 99% se considera sospechoso. Si la primera evaluacin no reporta ningn valor outlier o sospechoso se debe realizar la segunda prueba. Segunda Prueba Consiste en calcular el estadstico Gmax y Gmin
G= S2 = 0
2 S p 1 , p
(y
p i =1
S2 0
ij
yj
ij
Ec(7)
2 S p 1 , p =
p2 i =1
(y
y i2
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Se debe calcular 2 en realidad. En el primer caso Gmax se elimina los 2 valores ms altos y para el segundo Gmin se elimina los 2 valores mas bajos. 3.1.2.4 Relacin entre el valor de referencia y la respuesta obtenida por el mtodo Con los datos ya evaluados se debe realizar una correlacin lineal entre el valor medido con los valores de referencia. Ensayista 1 .. .. .. q Tabla 4 Valores para la correlacin 1. Establecer un modelo lineal Abscisa y j Ordenada j y
y j = a + b j y
2. Calcular la pendiente y el intercepto
q q
Ec(8)
b=
y j y j
j =1
y y
j =1 j j =1
q
2
q j y q j =1 y 2j q j =1 y yj b j
j =1 j =1 q q
Ec(9)
a=
q
q q
Ec(10)
3. Calcular el coeficiente de correlacin
r=
y
j =1
y j
y j yj
j =1 j =1
2 2 q q j y q 2 y j q j =1 y j =1 yj 2 j q q j =1 j =1
Ec(11)
4. Calcular la covarianza
COV j , y j = y
1 q y y j yj y q j =1
)(
Ec(12)
10-50
5. Calcular la varianza residual
Sy / x =
y (y (a + b ))
q j =1 j j
q2
Ec(13)
3.1.2.5 Comprobar la linealidad Quattrocchi et al, considera que la mejor forma de evaluar la linealidad del mtodo estudiado es realizar una prueba estadstica de t (t de Student): 1. Calcular la correlacin lineal significativa (tr). a. t r =
(1 r )
2
(q 2)
Ec(14)
2. Comparar tr con el valor tabulado ttab con un grado de significacin del 95% y (p-2) grados de libertad. a. Si tr ttab existe correlacin entre los valores de referencia y la respuesta del mtodo, y el intervalo estudiado es lineal b. Si tr < ttab no existe correlacin entre los valores de referencia y la respuesta del mtodo, y el intervalo estudiado no es lineal. 3. Tambin se puede comprobar la covarianza a. Si COV = 0, el sistema esta incorrelacionado b. COV < 0, el sistema tiene una proporcionalidad indirecta c. COV > 0, el sistema tiene una proporcionalidad directa 3.2 Limite de Deteccin y Cuantificacin Cuando se realizan mediciones a niveles bajos del analito o de la propiedad relacionada, como en el ensayo de trazas, es importante saber cul es la concentracin ms baja del analito o el valor de su propiedad relacionada, que puede detectarse confiablemente por el mtodo. La importancia de determinar esto y los problemas implcitos, surgen del hecho que la probabilidad de deteccin no cambia repentinamente de cero a la unidad cuando se cruza un umbral. Los problemas han sido investigados estadsticamente con detalle y se ha propuesto una gama de criterios de decisin. Surgen confusiones adicionales debido a que no existe actualmente un acuerdo universal sobre la terminologa aplicada. El trmino lmite de deteccin no es aceptado ampliamente aunque se usa en varios documentos sectoriales. La ISO utiliza como un trmino general valor mnimo detectable de la variable de estado definida el cual en qumica se traduce como la concentracin neta mnima detectable. La IUPAC es cautelosa en el uso de lmite de deteccin prefiriendo valor (verdadero) mnimo detectable.
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YB
Limitede decisin
Limitede deteccin
SB 3SB
Fig 5 Lmite de Deteccin Se puede definir: Lmite de deteccin de un analito como aquella concentracin que proporciona una seal en el instrumento significativamente diferente de la seal del blanco o seal de fondo. Lmite de Cuantificacin es la cantidad mnima que puede cuantificarse con un nivel aceptable de exactitud. En la prctica no hay acuerdo entre los profesionales en la manera de calcularlo, ya que esta definicin no es concreta, a continuacin se dan algunas alternativas de calcularlo. 3.2.1 Diseo experimental Limite de Deteccin y Cuantificacin Para determinar el Lmite de deteccin y cuantificacin se recomienda lo siguiente: Mediciones en blancos, se recomienda realizar 10 mediciones mnimo por duplicado Tomar los datos del estudio de Intervalo lineal Resolucin del equipo de medicin
Mediciones en blancos se debe realizar la toma de datos se podr usar el Formulario A y se podr realizar los clculos en el Formulario B y C. Despus se realizaran las mismas pruebas estadsticas anteriores. Ya con los valores estudiados se calculara la desviacin estndar del blanco y se podr calcular el lmite de deteccin y cuantificacin.
y d = y B + 3 SB
Ec(15) Ec(16)
y c = y B + 10 SB
Cabe resaltar que el hecho de medir cero en el blanco no significa que este sea limite, si esto ocurriera se debe repetir esta medicin con blancos fortificados o material de referencia adecuado. Datos del Intervalo Lineal con la varianza residual y el intercepto se podr aplicar las siguientes frmulas:
12-50
y d = a + 3S y / x y d = a + 10S y / x
Siendo:
Ec(17) Ec(18)
a = El termino independiente de la recta de regresin Sy/x = Varianza residual Resolucin del equipo de medicin, aunque no es aconsejable consiste en calcular la concentracin medida suponiendo una divisin de escala como respuesta del equipo de medicin. 3.3 Resultados Obtenidos Luego de determinar estos parmetros lo que se espera es tener definido las siguientes zonas:
yB
Ld
Zona deDeteccin
Lc
Zona deCuantificacin
ConcentracinenlasMuestras
Fig 6 Zona de deteccin y cuantificacin
13-50
3.4 Casos Prcticos Intervalo de trabajo Caso 1 Rango Lineal Cloruros [mg/l] en Agua 9,3 1 8,8 8,9 8,6 9,4 8,8 9,6 9,5 9,0 8,7 8,9 9,3 9,2 8,7 8,7 8,9 8,9 40,8 41,1 41,0 39,8 40,7 40,5 40,3 41,8 40,1 2 40,7 40,6 40,8 40,9 40,8 39,9 40,0 39,7 79,1 76,0 76,2 77,0 VR 77,7 Nivel 3 79,1 79,4 76,6 76,6 76,7 77,5 76,7 79,5 Ensayista 100,0 4 80,1 101,0 98,6 100,5 100,0 78,3 103,1 101,1 99,5 100,0 81,3 100,8 100,2 98,5 100,1 76,0 99,0 101,8 100,0 102,0 253,0 5
258,4 256,0 253,5 254,5 254,3 259,1 251,6 256,7 252,6 246,3 251,5 249,3 252,0 251,1 238,2 248,3
1 2 3 4 Calcular:
Pruebas Estadsticas Intervalo Lineal (T de Student, Covarianza, Regresin) Varianza Residual Limite de Deteccin Limite de Cuantificacin Caso 2 Determinacin de AFTOSA [--] en Suero Bovino por ELISA Ensayista VR 0 1 0,012 -0,016 0,012 0,014 0,014 -0,012 0,012 0,039 0,004 0,016 0,012 -0,014 1,46 1,101 1,423 0,828 0,832 0,830 1 2 1,629 1,237 1,622 0,826 0,836 0,836 2,706 2,276 2,768 1,929 1,931 1,930 2 Nivel 3 2,819 2,140 2,878 1,925 1,929 1,928 5,121 5,179 5,454 5,101 5,106 5,100 4 5,056 5,383 5,230 5,103 5,108 5,102 5,952 6,065 5,939 5,428 5,430 5,431 5 6,004 6,364 6,155 5,430 5,432 5,429 5 6
AO
2007
1 2 3 4 5 6
2008
14-50
Calcular: Pruebas Estadsticas Intervalo Lineal (T de Student, Covarianza, Regresin) Varianza Residual Limite de Deteccin Limite de Cuantificacin
Caso 3 Determinacin de blanco en determinacin de Protena [%] Ensayista N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 V1 0,66 0,66 0,68 0,65 0,68 0,69 0,67 0,66 0,68 0,69 V2 0,66 0,67 0,68 0,66 0,67 0,69 0,67 0,66 0,68 0,68 V3 0,65 0,66 0,68 0,66 0,67 0,69 0,68 0,66 0,66 0,69
3 Calcular: Pruebas Estadsticas Limite de Deteccin Limite de Cuantificacin
15-50
Caso 4 Determinacin de blanco en determinacin de Aftosa por ELISA Ao 2007 Ensayista 1 2 3 4 5 V1 0,012 -0,020 0,144 -0,035 -0,020 V2 -0,020 -0,036 0,144 -0,033 -0,020 V3 -0,006 0,003 0,147 -0,035 -0,020 V4 -0,003 -0,003 0,145 -0,040 -0,018 V5 0,008 -0,029 0,151 -0,033 -0,018 V6 -0,020 -0,041 0,153 -0,031 -0,014
Calcular: Pruebas Estadsticas Limite de Deteccin Limite de Cuantificacin
2008
16-50
4. PRECISIN
Normalmente, la precisin se determina para circunstancias especficas las cuales en la prctica pueden ser muy variadas. Las medidas de precisin ms comunes son la repetibilidad y la reproducibilidad. stas representan las dos medidas extremas de precisin que pueden obtenerse. La repetibilidad (la precisin ms pequea esperada) dar una idea de la clase de variabilidad esperada cuando un mtodo se ejecuta por un solo ensayista, con un equipo en un perodo corto de tiempo, es decir, es la clase de variabilidad que se espera entre resultados cuando una muestra se analiza por duplicado. Si la muestra se analiza por varios laboratorios para fines comparativos, entonces una medida de precisin ms significativa a usarse es la reproducibilidad (sta es la medida de precisin ms grande normalmente encontrada, a pesar de que formalmente se excluye la variacin con respecto del tiempo). Puede ser que para algunos casos particulares sea ms til una medida intermedia de la precisin, por ejemplo la precisin medida entre diferentes ensayistas, en perodos de tiempo prolongados dentro de un solo laboratorio. Esto algunas veces se conoce como precisin intermedia, pero las condiciones exactas debern ser especificadas. La precisin se determina por lo general en trminos de la desviacin estndar o la desviacin estndar relativa. Tanto la reproducibilidad como la repetibilidad dependen generalmente de la concentracin del analito y deben determinarse a varias concentraciones y de ser pertinente, deber establecerse la relacin entre la precisin y la concentracin del analito. La desviacin estndar relativa puede ser ms til en este caso puesto que la desviacin estndar dividida por la concentracin es prcticamente constante dentro del intervalo de inters, a condicin de que ste no sea demasiado grande.
Dispersin (Errores Aleatorios)
Valor convencionalmente verdadero FIG 6 Dispersin y posicin de los Resultados
17-50
4.1 Condiciones de los estudios de Precisin
Estudios de Precisin
Variables
Repetibilidad
Precisin Intermedia
Reproducibilidad
Muestra Mtodo Equipos Reactivos MR/MRC Instalaciones Cond.Amb. Tiempo Personal
Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo
Mismo Mismo Diferente Diferente Diferente Mismo Diferente Diferente Diferente
Mismo Mismo Diferente Diferente Diferente Diferente Diferente Diferente Diferente
Fig 7 Condiciones de Repetibilidad (Sr), Precisin Intermedia (Sw), Reproducibilidad (SR) 4.1.1 Diseo experimental Repetibilidad, Precisin Intermedia y Reproducibilidad Para determinar la repetibilidad y precisin intermedia se recomienda lo siguiente: Se recomienda realizar mediciones dentro del intervalo lineal en distintas concentraciones. Realizar mediciones en muestras naturales en condiciones de repetibilidad y precisin intermedia. Realizar al menos 10 mediciones al menos por duplicado para cada nivel de concentracin Para realizar la toma de datos se podr usar el Formulario A (Tabla 1) 4.1.2 Evaluacin de Resultados La evaluacin consiste en: Verificar que los resultados pertenecen a la misma poblacin estadstica Esto podr hacerse siguiendo los pasos ya descritos para el intervalo de trabajo. Calculo de la Repetibilidad y Precisin Intermedia Con los datos ya depurados
18-50
Calcular los promedios de cada nivel
mj = y j =
n
i =1 p i =1
ij
y ij
Ec(19)
ij
n
ij
Calcular la repetibilidad y precisin intermedia

2 S rj =
(n
i=1 p i=!
p
2 1)S ij
(n
ij
1)
2 1)S ij
Ec(20)
S2 = wj
(n
i=1 p i=!
ij
(n
ij
1)
Ec(21)
Calcular la dispersin entre ensayistas
S =
2 Lj
2 2 S dj S rj
Ec(22)
nj
2 S dj =
1 p nij y ij y j p 1 i =1
1 p = nij y ij p 1 i =1
( )
yj
( )
nij i =1
p
Ec(23)
p nij2 p 1 nij i =1 nj = p p 1 i =1 nij i =1
Ec(24)
Calcular la reproducibilidad
2 2 2 S Rj = S rj + S Lj
Ec(25)
Calcular los lmites de repetibilidad, precisin intermedia y reproducibilidad
r = t 2 S r
rw = t 2 S w
Ec(26) Ec(27) Ec(28)
R = t 2 S R
Relacin entre la concentracin y la precisin intermedia y la reproducibilidad Nivel 1 j p

yj
Sw
SR
19-50
T1 = T3 = T5 = S r2 =
2 L
n
i=1 p i=1 p
ij
y ij ; T2 = ; T4 =
2 1)S ij
n
i=1 p
ij
y ij
( )
nij (n
i=1 ij
n
i=1
2 ij
Ec(29)
T2 T3 T12 T (p 1) S = S r2 32 T3 T3 T4
4.3 Resultados Obtenidos Luego de determinar estos parmetros lo que se espera es tener definido los lmites de dispersin del mtodo en estudio.
T5 T3 p
rw r
FIG 8 Lmites de Precisin
20-50
Caso 5 Estudio de Precisin en la Determinacin de Cloruros [mg/l] en Agua embotellada Nivel 1

Laboratorio N 48,16 44,00 40,91 55,98 46,65 45,66 50,38 45,80 44,02 45,00 45,66 51,06 43,12 47,64 45,53 40,45 46,47 53,23 46,18 47,00 48,66 43,00 34,09 54,98 46,67 45,66 50,40 46,00 43,05 45,00 45,66 48,90 46,30 47,64 46,03 40,45 46,47 50,10 45,38 46,50 46,67 44,00 40,91 54,98 46,10 46,65 43,50 45,80 43,05 45,00 45,16 47,50 43,12 47,64 45,04 40,45 45,98 47,66 45,38 46,40 43,05 45,00 46,16 46,80 45,82 47,64 45,04 42,41 45,98 47,66 43,78 46,80 45,68 43,00 40,91 49,98 48,92 46,65 43,51 Laboratorio n Laboratorio n Laboratorio n
12A 13A 14A 15A 16A 17A 19A 20A 22A 23A 24A 26A 29A 2A 32A 33A 35A 36A 38A 39A
41A 42B 43A 44A 45A 48A 49A 51A 53A 55A 56A 58A 59A 61A 62A 63A 65A 66A 67A 68A
50,01 46,29 48,00 47,69 46,79 44,00 53,34 53,51 46,40 41,2 46,00 43,40 40 41,57 49,63 45,00 44,93 46,39 47,71 54,50
51,76 46,29 50,00 48,21 47,77 44,00 53,84 54,07 46,36 42,4 45,00 43,40 43 42,95 49,63 44,00 46,39 46,88 48,21 53,00
50,49 52,26 48,00 47,69 46,31 44,00 52,34 56,11 46,12 38,4 47,00 43,64 47,00 41,91 49,63 45,00 45,63 45,89 47,21 51,00 50,00 47,69 46,79 44,00 52,34 57,25 46,05 39,6 48,00 43,64 47,00 42,95 49,63 44,30 47,09 45,89 47,71 49,00
69A 6A 70A 73A 74A 75A 78A 7A 81B 82A 84A 86A 89A 90B 91A 92A 94A 95A 96A 97A
44,17 41,09 45,16 47,98 45,66 43,61 47,15 43,69 48,00 45,77 44,53 41,23 42,75 45,06 46,37 45,05 44,00 39,59 44,59 43,00
46,63 41,57 45,16 47,49
44,17 44,92 45,16 45,99 45,16 43,96 43,61 47,15 49,81 43,89 43,99 45,00 45,77 45,77 44,57 43,85 43,84 42,77 44,33 46,37 45,66 45,20 45,05 44,00 44,00 39,59 39,59 44,93 46,28 43,00 43,00
46,63 44,44 45,16 45,99 43,61 50,34 43,99 45,77 43,97
44,96 45,56 44,00 39,59 45,95 43,00
99A 103A 104A 109A 10A 110A 111A 113A 114A 115A 116A 117A 118A 11A 120A 122A 123A 124A 125A 126A
46,45 45,62 42 43,07 43 45,57 44,47 42,28 46,82 43,73 44,60 46,09 44,40 46,53 45,23 46,12 40,09 45,22 40,56 44,87
46,25 45,82 44 42,58 42,7 45,57 44,42 42,28 46,84 44,48 44,60 42,54 44,40 44,73 46,03 40,19 45,22 39,92 44,87
46,25 45,01 44,00 42,09 43,80 45,57 44,97 46,31 46,77 45,23 45,12 46,09 44,70 46,03 44,63 45,67 39,99 45,27 41,62 44,38
46,55 45,04 44,00 42,09 43,50 46,63 44,47 45,81 46,77 44,98 45,12 44,31 44,70 44,73 45,78 39,99 45,30 40,56 44,38
Calcular: Pruebas Estadsticas Repetibilidad Reproducibilidad Limites de Repetibilidad y Reproducibilidad
21-50
Caso 6 Estudio de Precisin en la determinacin de Protena en Alimentos [%]

Laboratorio
2A 3A 4A 6A 7A 8A 6,62 8,04 7,87 6,68 8,08 8,35 6,62 7,97 7,78 6,53 8,07 8,27
Nivel 1
6,08 7,82 8,75 6,44 8,18 8,04 6,04 7,88 8,12 6,17 7,83 7,96
Laboratorio
2A 3A 4A 5A 7A 8A 9A 10A 11A 12A 16A 17A 13,47 12,35 13,49 11,58 13,36 12,64 12,08 12,00 12,30 12,49 13,50 12,34 13,79 12,36 13,67 11,33 13,47 12,54 12,09 12,00 12,58 13,29 13,54 12,31
Nivel 2
13,69 12,35 13,74 11,57 13,12 12,54 12,10 12,20 12,36 13,01 12,04 13,98 12,25 13,58 11,43 13,17 12,53 12,00 11,60 12,42 13,19 12,97 12,05
Laboratorio
1A 2A 3A 4A 5A 6A 7A 8A 10A 11A 12A 13A 14A 25,72 26,90 25,55 26,02 25,35 24,74 28,40 25,30 24,95 25,86 26,26 25,14 25,39 25,95 26,72 25,43 25,90 25,57 24,80 28,40 25,30 24,92 25,71 26,24 25,70 25,30
Nivel 3
25,96 27,43 25,46 25,91 25,80 24,80 28,41 24,10 24,95 25,76 26,54 **** 25,48 25,72 27,10 25,87 26,01 25,46 24,85 28,41 24,00 25,31 25,80 26,38 25,64 25,41
Laboratorio 1A 2A 3A 4A 6A 7A 8A 10A 11A 12A 13A 14A 47,15 44,36 46,47 46,75 47,45 46,81 47,80 46,75 46,34 46,77 46,72 46,91 46,94 44,27 46,39 47,45 47,05 46,74 48,10 46,77 46,31 46,77 46,80 47,10
Nivel 4 46,89 45,62 46,26 47,22 48,14 46,86 47,90 46,73 45,79 46,52 46,75 47,00 47,14 45,59 46,65 47,18 47,82 46,86 47,70 46,75 46,71 46,64 46,80 47,05
Calcular:
Pruebas Estadsticas Repetibilidad Reproducibilidad Limites de Repetibilidad y Reproducibilidad Relacin Concentracin vs Niveles de Precisin
22-50
Caso 7 Estudio de Precisin en la determinacin de Aftosa en muestras de Suero Bovino por Elisa [--] Ensayista Nivel
AO
1 0,012 -0,016 0,012 0,014 0,014 -0,012 0,012 0,039 0,004 0,016 0,012 -0,014 1,46 1,101 1,423 0,828 0,832 0,830
2 1,629 1,237 1,622 0,826 0,836 0,836 2,706 2,276 2,768 1,929 1,931 1,930
3 2,819 2,140 2,878 1,925 1,929 1,928 5,121 5,179 5,454 5,101 5,106 5,100
4 5,056 5,383 5,230 5,103 5,108 5,102 5,952 6,065 5,939 5,428 5,430 5,431
5 6,004 6,364 6,155 5,430 5,432 5,429
2007
1 2 3 4 5 6
Calcular: Pruebas Estadsticas Repetibilidad Reproducibilidad Limites de Repetibilidad
2008
23-50
Caso 8 Estudio de Precisin en la determinacin de Cenizas [%] en Alimentos Laboratorio 1A 2A 3A 4A 5A 6A 7A 8A 9A 10A 11A 12A 13A 14A 15A 16A 17A Calcular: Pruebas Estadsticas Repetibilidad Reproducibilidad Limites de Repetibilidad y Reproducibilidad Relacin Concentracin vs Niveles de Precisin 0,73 0,72 0,77 0,72 0,70 0,74 0,76 0,80 0,79 0,74 0,72 0,75 0,74 0,76 0,67 0,84 0,77 0,74 0,74 0,77 0,75 0,71 0,76 0,75 0,79 0,76 0,76 0,72 0,74 0,74 0,74 0,64 0,84 0,75 Nivel 1 0,73 0,72 0,77 0,73 0,71 0,75 0,76 0,80 0,78 0,72 0,74 0,72 0,73 0,75 0,64 0,84 0,75 Nivel 2 5,95 5,94 5,75 5,67 5,91 5,91 5,91 5,99 5,74 5,80 6,01 5,98 6,10 6,02 5,94 5,93 5,96 5,97 5,84 5,80 5,84 5,95 5,99 6,00 6,01 6,03 5,96 6,01 Nivel 3 6,39 6,39 6,38 6,6356 6,6404 6,6475 6,69 6,73 6,69 6,97 6,92 6,97 7,07 7,21 7,09 6,50 6,55 6,61 7,15 7,11 7,09 6,66 6,64 6,57 7,42 7,39 7,41 7,13 7,14 7,10 7,46 7,38 7,37 6,44 6,47 6,48 7,31 7,88 7,51 6,96 6,99 6,90
0,73 0,72 0,77 0,72 0,71 0,72 0,76 0,79 0,79 0,71 0,73 0,72 0,72 0,72 0,63 0,84 0,74
5,92 5,74 5,92 5,89 5,78 5,99 6,09 5,89 5,98 5,84 5,89 5,99 6,01 5,97
5,97 5,68 5,92 6,01 5,82 5,98 6,06 5,88 5,95 5,76 5,89 5,96 6,03 6,00
6,41 6,6490 6,65 6,86 7,44 6,60 7,08 6,63 7,57 7,08 7,47 6,45 7,63 6,91
24-50
5. EXACTITUD
La exactitud expresa la cercana de un resultado al valor verdadero (La definicin en ISO 3534-1 se ha adoptado en este documento). La validacin de un mtodo busca cuantificar la exactitud probable de los resultados evaluando tanto los efectos sistemticos como los aleatorios sobre los resultados. Normalmente la exactitud se estudia en dos componentes: la veracidad y la precisin. La veracidad (de un mtodo) es una expresin de que tan cercana se encuentra la media de un conjunto de resultados (producidos por el mtodo) respecto del valor real. Normalmente, la veracidad se expresa en trminos de sesgo. La precisin es una medida de que tan cercanos estn los resultados unos con respecto a los otros y por lo general se expresa mediante medidas tal como la desviacin estndar la cual describe la dispersin de los resultados. Adicionalmente, una expresin cada ves ms comn de exactitud es la incertidumbre de medicin, la cual proporciona una figura nica de expresin de la exactitud. Estos tres diferentes parmetros sern discutidos en su momento.
Exactitud
Presicin - Repetibilidad Sr - Presicin Intermedia Sw - Reproducibilidad SR Veracidad - Sesgo
FIG 9 Componentes de la Exactitud 5.1 Veracidad La evaluacin prctica de la veracidad se fundamenta en la comparacin de la media de los resultados de un mtodo con relacin a valores conocidos, es decir, la veracidad se determina contra un valor de referencia (o sea, un valor verdadero o un valor verdadero convencional). Se dispone de dos tcnicas bsicas: la verificacin con respecto a los valores de referencia de un material caracterizado o de otro mtodo caracterizado. Los valores de referencia son idealmente trazables a patrones internacionales. Los materiales de referencia certificados por lo general se aceptan como medio de proveer valores trazables y por lo tanto, el valor de referencia es el valor certificado del MRC. Observe que los valores de referencia, certificados u otros pueden ser absolutos (trazables al SI) o convencionales, es decir, que son acordados para un propsito en particular. Claramente la disponibilidad de estos materiales es limitada. Los materiales de referencia para una validacin pueden ser por consiguiente: Preparados por adicin de materiales tpicos con materiales de referencia de pureza certificada u otros materiales de pureza y estabilidad adecuadas.
25-50
Materiales tpicos bien caracterizados, de estabilidad verificada internamente y conservados para control de calidad interno.
La validacin requiere la adecuacin a un propsito, por lo tanto, la seleccin de un material de referencia puede depender del uso pretendido. El material de referencia debe ser apropiado para su uso. Para trabajos de normalizacin debe usarse un material de referencia certificado adecuado e idealmente de la misma matriz. Interpretando las mediciones de sesgo
Valor Medido (Media del Laboratorio) Valor Verdadero
Sesgo Total Media Interlaboratorio
Sesgo del Laboratorio
Sesgo del Mtodo
FIG 10 Componentes del sesgo La figura muestra los dos componentes del sesgo referidos aqu como los componentes debidos al mtodo y al laboratorio. El sesgo del mtodo surge de los errores sistemticos inherentes al mtodo cualquiera que sea el laboratorio que lo usa. El sesgo del laboratorio surge de errores sistemticos adicionales caractersticos del laboratorio y de la interpretacin que ste hace del mtodo. En forma aislada, un laboratorio puede estimar solamente el sesgo combinado. Sin embargo, en la verificacin del sesgo, es importante estar al tanto de las convenciones correspondientes al propsito que se tiene en mente. Por ejemplo en muchas normas para alimentos, los lmites normativos se establecen en trminos de los resultados obtenidos por el mtodo de referencia. El sesgo que surge nicamente del mtodo especfico se compensa y la comparabilidad con otros laboratorios que utilizan el mismo mtodo es la principal preocupacin. El sesgo total determinado por un laboratorio particular durante la validacin debe entonces compararse con cualquier sesgo reportado para el mtodo normalizado. Sin embargo, para la mayora de los propsitos, la aceptacin del sesgo debe decidirse sobre la base del sesgo total medido contra materiales o mtodos de referencia apropiados, tomando en cuenta la precisin del mtodo, la incertidumbre en los valores de los materiales de referencia y la exactitud requerida para el uso pretendido. 5.2 Valor de referencia Existen las siguientes posibilidades para obtener los valores de referencia: 1. Referencia Externa La referencia puede consistir en: Material de Referencia Certificado (MRC)
26-50
2.
Material de Referencia (MR) Patrn Qumico Muestra Obtenida a partir de un ensayo de aptitud
Comparacin de Mtodos Comparacin Interna: Determinaciones de un analito con distintos mtodos en el mismo laboratorio. Comparacin Externa: Mediante los ensayos de aptitud.
3.
Mtodo de Adicin Consiste en aadir una cantidad conocida de MR y evaluar el grado de recuperacin de las mismas y de esta determinar el valor de referencia de la muestra:
5.2.1 Diseo Experimental Exactitud Para la determinacin de la exactitud se puede aplicar la siguiente sistemtica: Se recomienda realizar mediciones dentro del intervalo lineal en diferentes concentraciones. Realizar ensayos en material de referencia (mejor si es certificado). Realizar al menos 10 mediciones al menos por duplicado Para realizar la toma de datos se puede usar el Formulario A (Tabla 1) 5.2.2 Evaluacin de la Exactitud La evaluacin consiste en: Verificar que los resultados pertenecen a la misma poblacin estadstica Esto podr hacerse siguiendo los pasos ya descritos para el intervalo de trabajo. Calculo de la exactitud Con los datos ya depurados 1. Calcular los promedio de cada nivel
mj = y j =
2. Calcular el sesgo
n
i =1 p i =1
ij
y ij
Ec(30)
ij
j =y jyj
3. Calcular la dispersin de los resultados
Ec(31)
Sj =
p 1 y ij y j p j 1 i=1
Ec(32)
4. Calcular el error cuadrtico medio relativo
27-50
ECMR =
j2 + S 2 j
yj
100
Ec(33)
5. Calcular la desviacin del sesgo
DESR =
i=1
pj
2 ij
pj
Ec(34)
Verificacin de la exactitud Para realizar la verificacin de la exactitud se aplica la siguiente sistemtica: 1. Calcular t experimental
texp =
( )
j
pj
2 j
Ec(35)
2. Contrastar con el t Tabulado si: Si texpttab se puede afirmar que ambos valores no difieren significativamente para el nivel de confianza seleccionado y por lo tanto concluimos que el mtodo satisface la condicin de exactitud. Si texp>ttab se puede afirmar que ambos valores difieren significativamente para el nivel de confianza seleccionado y por lo tanto concluimos que el mtodo no satisface la condicin de exactitud. 5.3 Resultados Obtenidos Lo que se obtienen son los lmites de control de la exactitud del mtodo de control. 5.4 Casos Prcticos
28-50
Caso 9 Exactitud en la determinacin de Aftosa [ ] en Suero Bovino por ELISA Ensayista VR 0 1 0,012 -0,016 0,012 0,014 0,014 -0,012 0,012 0,039 0,004 0,016 0,012 -0,014 1,46 1,101 1,423 0,828 0,832 0,830 1 2 1,629 1,237 1,622 0,826 0,836 0,836 2,706 2,276 2,768 1,929 1,931 1,930 2 Nivel 3 2,819 2,140 2,878 1,925 1,929 1,928 5,121 5,179 5,454 5,101 5,106 5,100 4 5,056 5,383 5,230 5,103 5,108 5,102 5,952 6,065 5,939 5,428 5,430 5,431 5 6,004 6,364 6,155 5,430 5,432 5,429 5 6
AO
2007
1 2 3 4 5 6
Calcular: Prueba estadstica ECMR Prueba t
Caso 10 Exactitud en la Determinacin de Protena en Alimentos [%] 2,60 1 1 2 3 4 5 2,59 2,59 2,53 2,55 2,57 2,60 2,60 2,59 2,61 2,65 10,62 10,70 10,57 10,65 10,70 10,70 2 10,71 10,98 10,80 10,68 10,98 20,20 20,60 20,88 20,70 20,40 VR 20,60 Nivel 3 20,70 20,60 20,88 20,66 20,33 25,85 4 25,81 25,80 25,90 25,99 25,45 24,85 26,08 25,00 26,02 26,15 40,52 40,58 40,6 40,55 40,10 40,50 5 40,63 40,50 40,35 40,60 40,40
2008
Ensayista
29-50
Calcular: Prueba estadstica ECMR Prueba t Desviacin del Sesgo
Caso 11 Exactitud en la determinacin de Zinc en muestras de Agua [mg/l] Ensayista 0,500 1 0,508 0,500 0,508 0,500 VR 1,000 Nivel 2 1,000 1,004 1,000 1,004 1,500 3 1,520 1,500 1,510 1,500
1 2 3 4 Calcular:
0,502 0,504 0,504 0,504
0,504 0,500 0,502 0,504
1,000 1,008 1,002 1,002
1,004 1,002 1,008 1,004
1,530 1,490 1,480 1,480
1,510 1,480 1,500 1,510
Prueba estadstica ECMR Prueba t Desviacin del Sesgo
Caso 12 Exactitud en la determinacin de Ceniza en alimentos [%]

Ensayista 1 2 3 4
6,93
0,14
5,95
VR Nivel 2 6,01 6,10 5,84 5,99
0,02
0,74
0,01
6,97 7,13 7,46 6,96
6,92 7,14 7,38 6,99
6,97 7,10 7,37 6,90
6,86 7,08 7,47 6,91
5,99 6,09 5,89 5,99
5,98 6,02 5,95 6,00
5,98 6,06 5,89 5,96
0,80 0,79 0,74 0,72
0,79 0,76 0,76 0,72
0,80 0,78 0,72 0,74
0,79 0,79 0,71 0,73
Calcular:
30-50
Prueba estadstica ECMR Prueba t Desviacin del Sesgo
31-50
6 Especificidad
En general, se dice que los mtodos analticos consisten de una etapa de medicin la cual puede o no ser precedida de una etapa de separacin. Es necesario establecer que la seal producida en la etapa de medicin o alguna otra propiedad medida, la cual se atribuye al analito, se debe nicamente al analito y no a la presencia de algo qumica o fsicamente similar o que surja como una coincidencia. Esta es la confirmacin de la identidad. La interferencia de otros compuestos en la medicin del analito, depender de la efectividad de la etapa de separacin y de la selectividad/especificidad de la etapa de medicin. La selectividad y la especificidad son medidas que garantizan la confiabilidad de las mediciones en presencia de interferencias. La especificidad se considera generalmente que es el 100 % de la selectividad pero el acuerdo no es universal. Si la etapa de medicin no es especfica, es posible declarar que ciertos analitos no interfieren, habiendo primero verificado que ste es el caso. Es bastante difcil establecer que nada interfiere ya que siempre existe la posibilidad de encontrar alguna interferencia no reconocida hasta el momento. Habr casos en que ciertas interferencias qumicas podran ser identificadas por un mtodo en particular pero que la oportunidad de encontrarlas en la vida real sea improbable. El analista debe decidir en qu punto es razonable terminar de buscar interferencias. Estos parmetros se aplican a los ensayos tanto cualitativos como cuantitativos. Si hay interferencias presentes y no pueden separarse del analito de inters o si el analista no est consciente de su presencia, entonces esas interferencias tendrn varios efectos. Dependiendo de como se establece la identidad del analito, las interferencias pueden inhibir la confirmacin, por ejemplo, al distorsionar la seal que surge del analito. Las interferencias tambin pueden tener el efecto de incrementar aparentemente la concentracin del analito al contribuir a la seal atribuida a l, (o contrariamente, disminuir la concentracin del analito s contribuyen con una seal negativa). Por lo general, las interferencias afectarn la pendiente de la curva de calibracin de una forma diferente a la que lo hara el analito de inters, as, la pendiente de la curva de calibracin en el mtodo de adiciones puede afectar la linealidad de la curva. Este efecto tiene el potencial para indicar la posible presencia de una interferencia oculta, pero no es til si la curva de recuperacin es inherentemente no lineal. Usualmente, la selectividad de un mtodo se investiga mediante el estudio de su capacidad para medir el analito de inters en porciones de prueba a las cuales deliberadamente se han introducido interferencias especficas (aqullas que se cree probable estn presentes en las muestras). Si no se est seguro de que las interferencias estn presentes, la selectividad de un mtodo se puede investigar estudiando su capacidad de medir el analito comparado con otros mtodos o tcnicas independientes. Las pruebas a realizar para asegurar la selectividad o especificidad del mtodo podrn ser diferentes en funcin del tipo de muestra a ensayar, la tcnica utilizada, la informacin bibliogrfica disponible, etc. Entre las pruebas ms utilizadas se encuentran las siguientes: Mtodo de adiciones, comparando los resultados (o la respuesta) de la muestra que contiene las posibles interferencias con el resultado de otra muestra sin dichas interferencias. En este caso los valores de exactitud y precisin evaluados y verificados nos deben llevar a emitir una conclusin sobre la selectividad/especificidad del mtodo. Comparacin de los resultados obtenidos por un mtodo, con los resultados obtenidos por otro mtodo (mtodo de confirmacin). Es importante que el mtodo de confirmacin sea un mtodo normalizado, en este caso tambin los niveles de exactitud y precisin y los procesos de verificacin son elementos importantes para establecer la selectividad/especificidad de un mtodo de ensayo.
32-50
Trabajar con los datos del proceso de verificacin del modelo lineal, en este caso si el modelo es lineal la pendiente debe ser constante en todo el rango de trabajo, esto muestra que el mtodo es selectivo/especfico en dicho rango. Test mediante adicin de un estndar ("Spiking").
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7. ROBUSTEZ
Una medida de la efectividad del mtodo analtico es qu tan buen desempeo se mantiene aun sin una implementacin perfecta. En cualquier mtodo habr ciertas etapas las cuales, si no se llevan al cabo con suficiente cuidado, tendrn un efecto severo sobre el desempeo del mtodo y pueden dar como resultado que definitivamente, el mtodo no funcione. Estas etapas deben identificarse como parte del desarrollo del mtodo y si es posible, debe evaluarse su influencia sobre el desempeo del mismo por medio de pruebas de robustez. Esto incluye aplicar variaciones deliberadas al mtodo y estudiar el efecto resultante en el desempeo. De esta manera es posible identificar las variables que tiene el efecto ms significativo y en base a ello, controlarlas cuidadosamente cuando se aplica el mtodo. Cuando se requiere mejorar el mtodo, las mejoras se pueden realizar sobre aquellas partes que se sabe, son crticas. La robustez por lo general se evala durante el desarrollo del mtodo, comnmente por el laboratorio que lo ha propuesto y antes de la colaboracin con otros laboratorios. La AOAC [21] describe una tcnica establecida para pruebas de robustez. Las pruebas de robustez se aplican normalmente para investigar su efecto sobre la precisin y la exactitud del mtodo. El objetivo de la prueba de robustez es optimizar el Mtodo de Ensayo y describir que bajo las condiciones establecidas (incluidas sus tolerancias) se pueden obtener resultados suficientemente exactos con una alta seguridad, de manera que el procedimiento funcione confiablemente si se utiliza en otros laboratorios o despus de largos intervalos de tiempo. Un mtodo es ms robusto entre menos dependan los resultados del ensayo de una modificacin en las condiciones de ste. Al desarrollar una nuevo Mtodo de Ensayo debe determinarse la modificacin de los resultados por el cambio en la condiciones del ensayo. La sistemtica para la evaluacin de la robustez de un mtodo de ensayo es: a) b) c) d) e) f) Conocer las condiciones de medicin Definir las condiciones que afectan al mtodo de ensayo Seleccionar el objeto de evaluacin de la conformidad a ser utilizado (MRC, MSC, Muestra) Realizar mediciones bajo las condiciones modificadas Calcular la exactitud Establecer niveles de influencia para cada una de las variables modificadas.
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7.1 Caso Practico Caso 13 Robustez en la Determinacin de Protena en Alimentos [%] CONDICIN CONDICIN N FECHA VR PTIMA MODIFICADA 1 09-Abr-03 Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 90 Tiempo de digestin 100 Tiempo de digestin 110 Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 130 min Tiempo de digestin 140 min Tiempo de digestin 150 Tiempo de digestin 90 Tiempo de digestin 100 Tiempo de digestin 110 Tiempo de digestin 120 min Tiempo de digestin 130 min Tiempo de digestin 140 min Tiempo de digestin 150 10,700
MEDICIONES (%) X1 (%) X2 (%) 10,650 10,500
09-Abr-03
10,700
10,680
10,300
21-Abr-03
10,700
10,600
10,300
21-Abr-03
10,700
10,700
10,980
05-May-03
10,700
10,600
10,700
05-May-03
10,700
10,680
10,660
06-Jun-03
10,700
10,705
10,800
06-Jun-03
20,600
20,100
20,700
02-Jul-03
20,600
20,500
20,400
10
02-Jul-03
20,600
20,200
20,700
11
02-Jul-03
20,600
20,600
20,600
12
03-Jul-03
20,600
20,880
20,880
13
04-Jul-03
20,600
20,500
20,300
14
05-Jul-03
20,600
20,700
20,600
35-50
8. INCERTIDUMBRE
Parmetro asociado al resultado de una medicin que caracteriza la dispersin de los valores que podran atribuirse razonablemente al mensurando. Nota: El parmetro puede ser, por ejemplo, una desviacin estndar (o un mltiplo dado de ella), o la mitad de un intervalo de confianza. La incertidumbre de la medicin comprende en general muchos componentes. Algunos de estos componentes pueden evaluarse a partir de la distribucin estadstica de los resultados de una serie de mediciones y pueden caracterizarse por medio de desviaciones estndar experimentales. Los otros componentes, que tambin pueden ser caracterizados por desviaciones estndar, son evaluados a partir de distribuciones de probabilidad supuestas basadas en la experiencia u otra informacin. Se entiende que el resultado de la medicin es la mejor estimacin del valor del mensurando y que todos los componentes de la incertidumbre, incluyendo aqullos provenientes de efectos sistemticos, tales como los componentes asociados con correcciones y patrones de referencia, contribuyen a la dispersin. 8.1 Estimacin de la Incertidumbre en base a datos de validacin Al contar con dos fuentes de incertidumbre se asume, como un todo a cada mtodo de ensayo y a esto se conoce como incertidumbre global, y este es el enfoque valido para su estimacin (DTA-CRI-011).
urel =
(u
rel( sistemtic o )
) + (u
2
rel (aleatorio )
Ec(36)
8.1.1 Incertidumbre solo en base al componente aleatorio Esto valido si se supone que el mayor aporte de incertidumbre se debe al componente aleatorio en condiciones de reproducibilidad. Para realizar esto se pueden seguir los siguientes pasos: 1. Calcular la SRj 2. Calcular la Incertidumbre relativa
urel =
SRj yj
100%
Ec(37)
3. Estimar la incertidumbre
uc =
urel y ijk 100
Ec(38)
4. Expandirla para poder expresarla
U = k uc = 2 uc
Especificando el factor de cobertura y el porcentaje de confianza.
Ec(39)
36-50
8.1.2 Incertidumbre en base al componente sistemtico y aleatorio En este caso la incertidumbre es la combinacin de ambos componentes. La sistemtica para estimacin es: 1. Calcular la precisin intermedia Sw 2. Calcular la desviacin del sesgo DESR 3. Combinar ambos componentes en trminos relativos
urel =
(u
rel( sistemtico )
) + (u
2
rel (aleatorio ) 2
urel( sistemtico )
DESR S = 100 + wMR 100 y MR y MR
Ec(40)
uc =
urel y ijk 100
Ec(41)
U = k uc = 2 uc
Especificando el factor de cobertura y el porcentaje de confianza.
Ec(42)
37-50
9. Informe de Validacin En la realizacin del informe de validacin debern considerarse los siguientes puntos, cuando corresponda: Objetivo y Alcance del proceso de acreditacin Procedimiento de ensayo Procedimiento de Validacin Evaluacin del proceso de validacin Pruebas y frecuencia de control Detalle de insumos, reactivos, materiales de referencia y acondicionamiento de las muestras Lista de equipos, instrumentos y dispositivos Procedimiento de calificacin de los profesionales involucrados en el proceso de validacin Registros de la evaluacin de cada parmetro de validacin Documentacin de las revisiones bibliogrficas de respaldo Otros
Culminado el proceso de validacin se monitoreara peridicamente al mtodo, para esto se debe definir los parmetros que se realizar el seguimiento. Normalmente estos parmetros son: Precisin Exactitud Incertidumbre
Otro aspecto importante son los aspectos para definir el monitoreo, para esto es recomendable trabajar con: Tiempo Frecuencia de realizacin de los ensayos Nmero de objetos de evaluacin de conformidad ensayados
38-50
10. ANEXOS VALORES TABULADOS DE t A 95,46% Y 99,73% DE PROBABILIDAD Grados de libertad 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 95,46% Una Dos Cola Colas 6,964 3,088 2,461 2,218 2,091 2,013 1,960 1,922 1,894 1,871 1,854 1,839 1,827 1,816 1,807 1,800 1,793 1,787 1,782 1,777 1,773 1,769 1,765 1,762 1,759 99,73% Una Dos Cola Colas Grados de libertad 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 95,46% Una Dos Cola Colas 1,756 1,754 1,752 1,749 1,747 1,746 1,744 1,742 1,741 1,739 1,738 1,736 1,735 1,734 1,733 1,732 1,731 1,730 1,729 1,728 1,727 1,727 1,726 1,725 1,724 2,102 2,098 2,094 2,091 2,088 2,085 2,082 2,080 2,077 2,075 2,073 2,071 2,069 2,067 2,065 2,064 2,062 2,061 2,059 2,058 2,057 2,056 2,054 2,053 2,052 99,73% Una Dos Cola Colas 3,035 3,025 3,016 3,007 2,999 2,992 2,985 2,978 2,972 2,966 2,961 2,956 2,951 2,946 2,942 2,938 2,934 2,930 2,927 2,924 2,920 2,917 2,914 2,912 2,909 3,316 3,303 3,291 3,280 3,270 3,261 3,252 3,244 3,236 3,229 3,222 3,216 3,210 3,204 3,199 3,194 3,189 3,184 3,180 3,175 3,171 3,168 3,164 3,160 3,157
13,999 117,890 235,784 4,532 3,310 2,871 2,650 2,518 2,430 2,368 2,321 2,285 2,256 2,233 2,213 2,196 2,182 2,170 2,159 2,150 2,142 2,134 2,127 2,121 2,116 2,111 2,106 13,553 7,256 5,480 4,687 4,247 3,969 3,778 3,640 3,535 3,453 3,387 3,332 3,287 3,248 3,215 3,187 3,162 3,139 3,120 3,102 3,086 3,071 3,058 3,046 19,206 9,219 6,620 5,507 4,904 4,530 4,277 4,094 3,957 3,850 3,764 3,694 3,636 3,586 3,544 3,507 3,475 3,447 3,422 3,400 3,380 3,361 3,345 3,330
39-50
VALORES TABULADOS DE CHI CUADRADO A 95,46% Y 99,73%

2 n 1;1

2 n 1;
2
2 n 1;1
G. L.
2 n 1;
2
99,73% 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
2,863E-06 2,702E-03 2,971E-02 1,058E-01 2,380E-01 4,234E-01 6,562E-01 9,306E-01 1,241 1,584 1,954 2,350 2,768 3,206 3,662 4,135 4,624 5,126 5,641 6,169 6,707 7,256 7,814 8,382 8,959 10,273 13,215 15,630 17,800 19,821 21,739 23,580 25,361 27,093 28,785 30,442 32,070 33,671 35,250 36,808 38,347 39,870 41,377 42,871 44,352 45,820 47,278 48,725 50,163 51,591
95,46%
8,096E-04 4,592E-02 2,018E-01 4,597E-01 7,958E-01 1,192 1,634 2,114 2,626 3,164 3,724 4,304 4,901 5,514 6,140 6,778 7,428 8,088 8,757 9,435 10,121 10,814 11,514 12,221 12,934 5,191 7,571 9,560 11,371 13,073 14,703 16,277 17,810 19,308 20,777 22,223 23,648 25,055 26,447 27,824 29,188 30,541 31,883 33,215 34,539 35,855 37,163 38,464 39,758 41,047
G. L.
26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50
2 n 1;1
2 n 1;
2
2 n 1;1
2 n 1;
2
99,73%
9,543 10,135 10,735 11,341 11,954 12,573 13,198 13,829 14,466 15,107 15,753 16,405 17,061 17,721 18,385 19,054 19,727 20,403 21,083 21,767 22,454 23,144 23,838 24,535 25,235 53,011 54,423 55,828 57,225 58,615 59,999 61,377 62,749 64,116 65,477 66,832 68,183 69,530 70,871 72,209 73,542 74,871 76,196 77,518 78,835 80,150 81,461 82,768 84,073 85,374
95,46%
13,653 14,377 15,106 15,839 16,578 17,321 18,068 18,819 19,573 20,331 21,093 21,858 22,626 23,398 24,172 24,949 25,728 26,511 27,296 28,083 28,872 29,664 30,459 31,255 32,053 42,329 43,606 44,878 46,145 47,407 48,665 49,918 51,168 52,414 53,656 54,895 56,130 57,363 58,592 59,818 61,042 62,262 63,480 64,696 65,909 67,119 68,328 69,534 70,738 71,940
40-50
VALORES TABULADOS DE F F DE SNEDECOR A 95,46% DE PROBABILIDAD
f1 f 2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
10
195,963 242,082 261,728 272,488 279,251 283,887 287,260 289,823 291,836 293,459
20,538 21,026 21,191 21,274 21,323 21,356 21,380 21,398 21,412 21,423 10,955 10,287 9,974 8,246 7,025 6,341 5,906 5,607 5,388 5,221 5,090 4,984 4,897 4,824 4,763 4,709 4,663 4,622 4,586 4,554 7,386 6,112 5,409 4,968 4,666 4,446 4,280 4,150 4,046 3,960 3,888 3,827 3,775 3,730 3,690 3,655 3,624 6,996 5,700 4,989 4,544 4,241 4,021 3,855 3,725 3,621 3,535 3,464 3,404 3,352 3,307 3,267 3,233 3,202 9,794 6,772 5,463 4,747 4,300 3,995 3,775 3,608 3,478 3,374 3,288 3,217 3,156 3,104 3,059 3,020 2,985 2,954 9,678 6,627 5,309 4,589 4,140 3,834 3,613 3,446 3,315 3,211 3,125 3,053 2,992 2,940 2,895 2,856 2,821 2,790 9,596 6,526 5,201 4,478 4,026 3,719 3,498 3,330 3,199 3,094 3,008 2,936 2,875 2,822 2,777 2,737 2,702 2,671 9,536 6,450 5,120 4,394 3,942 3,634 3,411 3,243 3,111 3,006 2,919 2,847 2,786 2,733 2,688 2,648 2,613 2,581 9,490 6,392 5,058 4,330 3,876 3,567 3,344 3,175 3,043 2,937 2,850 2,778 2,716 2,663 2,618 2,578 2,542 2,511 9,453 6,346 5,008 4,279 3,824 3,514 3,290 3,120 2,988 2,882 2,795 2,722 2,660 2,607 2,561 2,521 2,485 2,454 9,423 6,309 4,968 4,237 3,781 3,470 3,246 3,076 2,943 2,836 2,749 2,676 2,614 2,560 2,514 2,474 2,438 2,406
41-50
VALORES TABULADOS DE F F DE SNEDECOR A 99,73% DE PROBABILIDAD
f1 f 2
1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
55593,9 47 368,871
2
68586,6 06 369,370
3
74125,7 07 369,537
4
77160,0 77 369,620
5
79067,4 95 369,670
6
80375,1 26 369,704
7
81326,5 97 369,727
8
82049,6 29 369,745
9
82617,5 12 369,759
10
83075,2 63 369,770
84,984 75,860 72,192 70,197 68,941 68,076 67,445 66,963 66,584 66,277 43,825 36,490 33,577 31,995 30,997 30,310 29,807 29,423 29,120 28,874 30,327 24,131 21,688 20,360 19,523 18,944 18,520 18,196 17,940 17,733 24,049 18,544 16,382 15,207 14,464 13,951 13,574 13,286 13,058 12,873 20,520 15,465 13,485 12,409 11,728 11,256 10,909 10,644 10,433 10,263 18,289 13,548 11,693 10,685 10,046 16,763 12,250 10,488 15,657 11,319 14,822 10,621 14,169 10,079 13,647 13,219 12,862 12,561 12,302 12,079 11,883 11,711 9,647 9,295 9,002 8,756 8,546 8,364 8,205 8,066 9,627 8,983 8,485 8,089 7,767 7,500 7,276 7,085 6,920 6,776 6,649 9,529 8,705 8,091 7,617 7,240 6,935 6,681 6,469 6,287 6,131 5,995 5,876 8,921 8,121 7,525 7,065 6,700 6,405 6,160 5,954 5,779 5,629 5,498 5,382 9,603 8,499 7,715 7,131 6,681 6,324 6,035 5,796 5,596 5,425 5,278 5,150 5,038 9,278 8,188 7,415 6,840 6,397 6,047 5,762 5,527 5,330 5,162 5,018 4,892 4,782 9,028 7,950 7,185 6,617 6,179 5,832 5,552 5,320 5,125 4,959 4,817 4,693 4,584 8,829 7,760 7,002 6,439 6,005 5,662 5,384 5,154 4,961 4,797 4,656 4,534 4,426 8,668 7,606 6,853 6,294 5,864 5,523 5,247 5,019 4,828 4,665 4,525 4,403 4,297
42-50
VALORES TABULADOS DE C PARA EL TEST DE COCHRANS A 1% Y 5% DE PROBABILIDAD n=2 p 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 1% --0,993 0,968 0,928 0,883 0,838 0,794 0,754 0,718 0,684 0,653 0,624 0,599 0,575 0,553 0,532 0,514 0,496 0,480 0,465 0,450 0,437 0,425 0,413 0,402 0,391 0,382 0,372 0,363 0,355 0,347 0,339 0,332 0,325 0,318 0,312 0,306 0,300 0,294 5% --0,967 0,906 0,841 0,781 0,727 0,680 0,638 0,602 0,570 0,541 0,515 0,492 0,471 0,452 0,434 0,418 0,403 0,389 0,377 0,365 0,354 0,343 0,334 0,325 0,316 0,308 0,300 0,293 0,286 0,280 0,273 0,267 0,262 0,256 0,251 0,246 0,242 0,237 1% 0,995 0,942 0,864 0,788 0,722 0,664 0,615 0,573 0,536 0,504 0,475 0,450 0,427 0,407 0,388 0,372 0,356 0,343 0,330 0,318 0,307 0,297 0,287 0,278 0,270 0,262 0,255 0,248 0,241 0,235 0,229 0,224 0,218 0,213 0,208 0,204 0,200 0,196 0,192 n=3 5% 0,975 0,871 0,768 0,684 0,616 0,561 0,516 0,478 0,445 0,417 0,392 0,371 0,352 0,335 0,319 0,305 0,293 0,281 0,270 0,261 0,252 0,243 0,235 0,228 0,221 0,215 0,209 0,203 0,198 0,193 0,188 0,184 0,179 0,175 0,172 0,168 0,164 0,161 0,158 1% 0,979 0,883 0,781 0,696 0,626 0,568 0,521 0,481 0,447 0,418 0,392 0,369 0,349 0,332 0,316 0,301 0,288 0,276 0,625 0,255 0,246 0,238 0,230 0,222 0,215 0,209 0,202 0,196 0,191 0,186 0,181 0,177 0,172 0,168 0,165 0,161 0,157 0,154 0,151 n=4 5% 0,939 0,798 0,684 0,598 0,532 0,480 0,438 0,403 0,373 0,348 0,326 0,307 0,291 0,276 0,262 0,250 0,240 0,230 0,220 0,212 0,204 0,197 0,191 0,185 0,179 0,173 0,168 0,164 0,159 0,155 0,151 0,147 0,144 0,140 0,137 0,134 0,131 0,129 0,126 1% 0,959 0,834 0,721 0,633 0,564 0,508 0,463 0,425 0,393 0,366 0,343 0,322 0,304 0,288 0,274 0,261 0,249 0,238 0,229 0,220 0,212 0,204 0,197 0,190 0,184 0,179 0,173 0,168 0,164 0,159 0,155 0,151 0,147 0,144 0,140 0,137 0,134 0,131 0,128 n=5 5% 0,906 0,746 0,629 0,544 0,480 0,431 0,391 0,358 0,331 0,308 0,288 0,271 0,255 0,242 0,230 0,219 0,209 0,200 0,192 0,185 0,178 0,172 0,166 0,160 0,155 0,150 0,146 0,142 0,138 0,134 0,131 0,127 0,124 0,121 0,118 0,116 0,113 0,111 0,108 1% 0,937 0,793 0,676 0,588 0,520 0,466 0,423 0,387 0,357 0,332 0,310 0,291 0,274 0,259 0,246 0,234 0,223 0,214 0,205 0,197 0,189 0,182 0,176 0,170 0,164 0,159 0,154 0,150 0,145 0,141 0,138 0,134 0,131 0,127 0,124 0,121 0,119 0,116 0,114 n=6 5% 0,877 0,707 0,590 0,506 0,445 0,397 0,360 0,329 0,303 0,281 0,262 0,243 0,232 0,220 0,208 0,198 0,189 0,181 0,174 0,167 0,160 0,155 0,149 0,144 0,140 0,135 0,131 0,127 0,124 0,120 0,117 0,114 0,111 0,108 0,106 0,103 0,101 0,099 0,097
43-50
VALORES TABULADOS DE G PARA ELTEST DE GRUBBS A 1% Y 5% DE PROBABILIDAD Prueba simple de un solo valor alejado Arriba de 1% Arriba de 5% 1,155 1,154 1,496 1,481 1,764 1,715 1,973 1,887 2,139 2,020 2,274 2,127 2,387 2,215 2,482 2,290 2,564 2,355 2,636 2,412 2,699 2,462 2,755 2,507 2,806 2,548 2,852 2,586 2,894 2,620 2,932 2,652 2,968 2,681 3,001 2,708 3,031 2,734 3,060 2,758 3,087 2,780 3,112 2,802 3,135 2,822 3,158 2,841 3,179 2,859 3,199 2,876 3,218 2,893 3,236 2,908 3,253 2,924 3,270 2,938 3,286 2,952 3,301 2,965 3,316 2,978 3,330 2,991 3,343 3,003 3,356 3,014 3,369 3,025 3,381 3,036 Prueba doble de dos valores alejados Bajo 1% Bajo 5% ----0,0000 0,0002 0,0018 0,0090 0,0116 0,0349 0,0308 0,0708 0,0563 0,1101 0,0851 0,1492 0,1150 0,1864 0,1448 0,2213 0,1738 0,2537 0,2016 0,2836 0,2280 0,3112 0,2530 0,3367 0,2767 0,3603 0,2990 0,3822 0,3200 0,4025 0,3398 0,4214 0,3585 0,4391 0,3761 0,4556 0,3927 0,4711 0,4019 0,4857 0,4234 0,4994 0,4376 0,5123 0,4510 0,5245 0,4638 0,5360 0,4759 0,5470 0,4875 0,5574 0,4985 0,5672 0,5091 0,5766 0,5192 0,5856 0,5288 0,5941 0,5381 0,6023 0,5469 0,6101 0,5554 0,6175 0,5636 0,6247 0,5714 0,6316 0,5789 0,6382 0,5862 0,6445
p 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40
44-50
VALORES TABULADOS DE h y k PARA EL TEST DE MANDEL A 1% DE PROBABILIDAD
p 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
h 1,15 1,49 1,72 1,87 1,98 2,06 2,13 2,18 2,22 2,25 2,27 2,30 2,32 2,33 2,35 2,36 2,37 2,39 2,39 2,40 2,41 2,42 2,42 2,43 2,44 2,44 2,45 2,45 2 1,71 1,91 2,05 2,14 2,20 2,25 2,29 2,32 2,34 2,36 2,38 2,39 2,41 2,42 2,44 2,44 2,44 2,45 2,46 2,46 2,47 2,47 2,47 2,48 2,48 2,49 2,49 2,49 3 1,64 1,77 1,85 1,90 1,94 1,97 1,99 2,00 2,01 2,02 2,03 2,04 2,05 2,05 2,06 2,06 2,07 2,07 2,07 2,08 2,08 2,08 2,08 2,09 2,09 2,09 2,09 2,10 4 1,58 1,67 1,73 1,77 1,79 1,81 1,82 1,84 1,85 1,85 1,86 1,87 1,87 1,88 1,88 1,88 1,89 1,89 1,89 1,90 1,90 1,90 1,90 1,90 1,90 1,91 1,91 1,91
K N 5 6 7 8 9 10 1,53 1,49 1,46 1,43 1,41 1,39 1,60 1,55 1,51 1,48 1,45 1,43 1,65 1,59 1,55 1,51 1,48 1,46 1,68 1,62 1,57 1,53 1,50 1,47 1,70 1,63 1,58 1,54 1,51 1,48 1,71 1,65 1,59 1,55 1,52 1,49 1,73 1,66 1,60 1,56 1,53 1,50 1,74 1,66 1,61 1,57 1,53 1,50 1,74 1,67 1,62 1,57 1,54 1,51 1,75 1,68 1,62 1,58 1,54 1,51 1,76 1,68 1,63 1,58 1,55 1,52 1,76 1,69 1,63 1,58 1,55 1,52 1,76 1,69 1,63 1,59 1,55 1,52 1,77 1,69 1,63 1,59 1,55 1,52 1,77 1,69 1,64 1,59 1,55 1,52 1,77 1,70 1,64 1,59 1,56 1,52 1,78 1,70 1,64 1,59 1,56 1,53 1,78 1,70 1,64 1,60 1,56 1,53 1,78 1,70 1,64 1,60 1,56 1,53 1,78 1,70 1,65 1,60 1,56 1,53 1,78 1,71 1,65 1,60 1,56 1,53 1,79 1,71 1,65 1,60 1,56 1,53 1,79 1,71 1,65 1,60 1,56 1,53 1,79 1,71 1,65 1,60 1,56 1,53 1,79 1,71 1,65 1,60 1,56 1,53 1,79 1,71 1,65 1,60 1,57 1,53 1,79 1,71 1,65 1,60 1,57 1,53 1,79 1,71 1,65 1,61 1,57 1,53
45-50
VALORES TABULADOS DE h y k PARA EL TEST DE MANDEL A 5% DE PROBABILIDAD K N 6 1,37 1,40 1,42 1,43 1,44 1,45 1,45 1,46 1,46 1,46 1,46 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,48 1,48 1,48 1,48 1,48 1,48 1,48
p 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
h 1,15 1,42 1,57 1,66 1,71 1,75 1,78 1,80 1,82 1,83 1,84 1,85 1,86 1,86 1,87 1,88 1,88 1,89 1,89 1,89 1,90 1,90 1,90 1,90 1,91 1,91 1,91 1,91 2 1,65 1,76 1,81 1,85 1,87 1,88 1,90 1,90 1,91 1,92 1,92 1,92 1,93 1,93 1,93 1,93 1,93 1,94 1,94 1,94 1,94 1,94 1,94 1,94 1,94 1,94 1,94 1,94 3 1,53 1,59 1,62 1,64 1,66 1,67 1,68 1,68 1,69 1,69 1,69 1,70 1,70 1,70 1,70 1,71 1,71 1,71 1,71 1,71 1,71 1,71 1,71 1,71 1,71 1,71 1,72 1,72 4 1,45 1,50 1,53 1,54 1,55 1,56 1,57 1,57 1,58 1,58 1,58 1,59 1,59 1,59 1,59 1,59 1,59 1,59 1,60 1,60 1,60 1,60 1,60 1,60 1,60 1,60 1,60 1,60 5 1,40 1,44 1,46 1,48 1,49 1,50 1,50 1,50 1,51 1,51 1,51 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,53 1,53 1,53 1,53 1,53 1,53 1,53 1,53
7 1,34 1,37 1,39 1,40 1,41 1,41 1,42 1,42 1,42 1,42 1,43 1,43 1,43 1,43 1,43 1,43 1,43 1,43 1,44 1,44 1,44 1,44 1,44 1,44 1,44 1,44 1,44 1,44
8 1,32 1,35 1,36 1,37 1,38 1,38 1,39 1,39 1,39 1,40 1,40 1,40 1,40 1,40 1,40 1,40 1,40 1,40 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41
9 1,30 1,33 1,34 1,35 1,36 1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38
10 1,29 1,31 1,32 1,33 1,34 1,34 1,35 1,35 1,35 1,35 1,35 1,35 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36
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GLOSARIO
1. CALIBRACIN Conjunto de operaciones que permiten establecer, en condiciones especficas, la relacin existente entre valores indicados por un instrumento de medida o un sistema de medida o los valores representados por una medida material o un material de referencia, los valores correspondientes a una magnitud obtenidos mediante un patrn de referencia (ISO/IEC 17025:2005). 2. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD Serie de procesos que lleva a cabo el personal de un laboratorio para el monitoreo continuo de las operaciones y los resultados de las medidas, a fin de decidir si los resultados son lo suficientemente confiables para ser liberados (IUPAC/TR 78:2006). 3. CONTROL DE CALIDAD Parte de la gestin de la calidad orientada al cumplimiento de los requisitos de la calidad (ISO 9000:2000). 4. CONTROL ESTADSITICO DE PROCESOS Aplicacin de tcnicas estadsticas para medir y anlisis las variaciones de los indicadores de los procesos (W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert: 1995). 5. COMPARACIONES INTERLABORATORIOS Organizacin, realizacin y evaluacin de ensayos sobre el mismo tem de ensayo o sobre tems de ensayos similares, por dos o ms laboratorios, de acuerdo con condiciones predeterminadas (Gua ISO/IEC 43). 6. DESVIACIN, ERROR Un error es la diferencia entre el valor caracterstico (resultado analtico) y el valor de referencia (W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert: 1995). 7. DESVIACIN TOTAL, ERROR TOTAL La diferencia entre el valor esperado y el valor actual. La desviacin total es la combinacin de errores sistemticos y aleatorios (W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert: 1995). 8. ENSAYO/PRUEBA Determinacin de una o ms caractersticas de un Objeto de Evaluacin de la Conformidad de acuerdo con un procedimientos (ISO/IEC 17000:2004). 9. ENSAYO DE APTITUD Determinacin del desempeo de un laboratorio en la realizacin de ensayos por medio de comparaciones interlaboratorios (Gua ISO/IEC 43). 10. EXACTITUD DE MEDIDA Grado de concordancia entre el resultado de una medicin y el valor de referencia aceptado. 11. INCERTIDUMBRE DE MEDIDA Estimacin que caracteriza el intervalo de valores en el que se sita, generalmente con una alta probabilidad dada, el valor verdadero de la magnitud de medida (UNE-EN 30012-1). 12. INTERVALO DE TRABAJO El intervalo de trabajo de un mtodo es el intervalo de concentracin en el que puede obtenerse un sesgo y precisin adecuados al objetivo del mtodo (G-CSQ-01). 13. INSTRUMENTO DE MEDICIN Conjunto de operaciones que tiene por objeto determinar el valor de una magnitud dispositivo destinado a ser utilizado para hacer mediciones slo o en conjunto con dispositivos complementarios (VIM: 1997). 14. LMITE DE CUANTIFICACIN
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Es la concentracin mnima que puede determinarse con un nivel aceptable de exactitud y precisin. Se establece examinando una muestra o material de referencia aceptado (GCSQ-02). 15. LMITE DE DETECCIN La menor magnitud que puede examinarse de un analito en una muestra que puede ser detectada pero no necesariamente cuantificada con un valor exacto (AFNOR V031110). 16. LMITES DE ADVERTENCIA Incluye un rango de dispersin de 95,46% y en este rango el proceso es correcto al superar estos lmites todava no se interviene el proceso, pero se le presta mayor atencin (Jordi R.: 2005). 17. LMITES DE CONTROL Incluye un rango de dispersin de 99,73%. Cuanto se superan estos lmites el proceso se encuentra fuera de control (Jordi R.: 2005). 18. LINEALIDAD/FUNCIN RESPUESTA Es la relacin entre la concentracin de un analito y a respuesta del mtodo. Esta relacin, denominada comnmente curva de patrn o curva de calibracin, no tiene por qu ser lineal para que el mtodo sea eficaz. Cuando no sea posible la linealidad para un mtodo, se deber encontrar un algoritmo adecuado (G-CSQ-01). 19. LABORATORIO DE REFERENCIA Laboratorio que provee valores de referencia sobre un tem de ensayo (Gua ISO/IEC 43). 20. MUESTREO Obtencin de una muestra representativa del Objeto de Evaluacin de la Conformidad, de acuerdo con un procedimiento (ISO/IEC 17000:2004). 21. MEDICIN Conjunto de operaciones que tiene por objeto determinar el valor de una magnitud (VIM: 1997). 22. MATERIAL DE REFERENCIA Materia o sustancia en la cual uno o ms valores de sus propiedades son suficientemente homogneos y estn bien definidos para permitir utilizarlos para la calibracin de un instrumentos, la evaluacin de un mtodo de medicin, o la asignacin de valores a los materiales (VIM; ISO 10012; Gua ISO 30 ). 23. MATERIAL DE REFERENCIA CERTIFICADO Material de referencia acompaado de un certificado, en la cual uno o ms valores de sus propiedades estn certificados por un procedimiento que establece su trazabilidad con una realizacin exacta de la unidad en la que se expresan los valores, de la propiedad y para la cual cada valor certificado se acompaa de una incertidumbre con la indicacin de un nivel de confianza (VIM; Gua ISO 30). 24. OUTLIER El miembro de un conjunto de resultados que es inconsistente con otros miembros de dicho conjunto (ISO 5725-1). Nota: La Norma ISO 5725-2 especifica las pruebas estadsticas y el nivel de significacin que deben ser usados para identificar outliers en pruebas de sesgo y precisin. 25. PATRN DE REFERENCIA Medida materializada, instrumento de medida, material de referencia o un sistema de medida destinado a definir, realizar, conservar o reproducir una unidad o uno o varios valores de una magnitud para que sirvan de referencia (VIM; ISO 10012). 26. PRINCIPIO DE MEDICIN Base cientfica de una medicin (VIM: 1997).
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27. PROCESO Conjunto de actividades mutuamente relacionadas o que interactan las cuales transforman elementos de entrada en resultados (ISO 9000:2000). 28. PROCESO DE MEDICIN Conjunto de operaciones que permiten determinar el valor de una magnitud (ISO 9000:2000). 29. PROCEDIMIENTO Forma especificada para llevar a cabo una actividad o un proceso (ISO 9000:2000). 30. PRECISIN DE MEDIDA Grado de concordancia entre resultados de mediciones obtenidas independientemente bajo condiciones establecidas (ISO 5725-1; ISO 30). La precisin depende slo de la distribucin de errores aleatorios y no tiene ninguna relacin con el valor verdadero o el valor especificado. 31. REPETIBILIDAD Precisin bajo condiciones en las que los resultados de una medicin se obtienen con el mismo mtodo, con el mismo operador, utilizando el mismo instrumento de medida y durante un corto intervalo de tiempo (ISO 5725-1; ISO 3534-1). 32. REPRODUCIBILIDAD Precisin bajo condiciones en las que los resultados de una medicin se obtienen con el mismo mtodo, sobre el mismo mesurando, con diferentes operadores, diferentes equipos de medida, en diferentes laboratorios (ISO 5725-1; ISO 3534-1). 33. SISTEMA DE MEDICIN Juego completo de instrumentos de medicin y otros equipos acoplados para realizar mediciones especficas (VIM: 1997) Ejemplos Aparatos para medir la conductividad de materiales semiconductores; Aparatos para la calibracin de termmetros clnicos, Notas 1 El sistema puede incluir medidas materializadas y reactivos qumicos. 2 Un sistema de medicin que est permanentemente instalado se le llama una instalacin de medicin. 34. SELECTIVIDAD/ESPECIFICIDAD El grado por el cual un mtodo puede determinar un analito particular dentro de una mezcla compleja, sin ser interferido por otros componentes de la mezcla (WELA/EURACHEM). 35. SESGO Diferencia entre la esperanza matemtica de los resultados de una medicin y el valor de referencia aceptado (ISO 5725-1). Nota: El Sesgo es el error sistemtico total en contraste con el error aleatorio. Puede haber uno o ms componentes de error sistemtico que contribuyan al sesgo. Una diferencia sistemtica mayor respecto del valor de referencia aceptado refleja en un valor mayor de sesgo. 36. SESGO DE LABORATORIO La diferencia entre el valor promedio obtenido en un laboratorio particular y el valor de referencia aceptado (ISO 5725-1). 37. SESGO DEL MTODO DE MEDICIN La diferencia entre el valor promedio (Gran Media) obtenido por todos los laboratorios usando dicho mtodo y el valor de referencia aceptado (ISO 5725-1). 38. COMPONENTE DE SESGO DE LABORATORIO La diferencia ente el sesgo del laboratorio y el sesgo del mtodo de medicin (ISO 5725-1).
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Nota 1: El componente de sesgo del laboratorio es especfico de dicho laboratorio y tambin su valor puede ser diferente a diferentes niveles (concentraciones) de la muestra Nota 2: El componente de sesgo del laboratorio es un valor relativo al resultado promedio global (de un conjunto de laboratorios participantes) y no respecto del valor de referencia aceptado. 39. TRAZABILIDAD Propiedad del resultado de una medicin o del valor de un patrn por la que se lo pudo relacionar con referencias declaradas, generalmente patrones nacionales o internacionales a travs de una cadena ininterrumpida de comparaciones, todas con incertidumbres declaradas (Gua ISO/IEC 43). 40. VERACIDAD El grado de cercana o acuerdo entre valor promedio obtenido a partir de un gran nmero de resultados y el valor de referencia aceptado (ISO 5725-1) Nota: La estimacin de trueness es expresada usualmente en trmino de sesgo. 41. VALIDACIN La validacin es la confirmacin por examen y provisin de evidencias objetivas de que los requisitos particulares son cumplidos para una utilizacin especfica previa (ISO 9000:2000). 42. VALIDACIN DE UN MTODO DE ENSAYO La validacin de un mtodo de ensayo establece, mediante estudios sistemticos de laboratorio, que las caractersticas tcnicas de dicho mtodo cumplen con las especificaciones relativas al uso previsto de los resultados de las mediciones (G-CSQ02). 43. VALOR ASIGNADO Valor atribuido a una magnitud particular y que se acepta, a veces por convencin, con una incertidumbre apropiada para un propsito dado (Gua ISO/IEC 43). 44. VERIFICACIN Confirmacin mediante la aportacin de evidencia objetiva de que se han cumplido los requisitos especificados (VIM: 1997). 45. VALOR VERDADERO Valor real caracterstico (terico) bajo condiciones preestablecidas durante la medicin (W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert: 1995). 46. VALOR CONVENSIONALMENTE VERDADERO Valor atribuido a una magnitud especfica aceptado, algunas veces por convencin que tiene una incertidumbre apropiada para un propsito dado y que puede sustituir al valor verdadero en esas condiciones (W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert: 1995). 47. VALOR ESPERADO La media experimental resultado obtenido usando repetida y continuamente un proceso experimental bajo condiciones establecidas (W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert: 1995). 48. VALOR ACTUAL Resultado analtico obtenido momentneamente, generalmente diferenciado por la presencia sistemtica y/o errores coincidentes (W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert: 1995).
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ESTADISTICA BSICA
CONCEPTOS BASICOS
ACREDITACION
ACREDITACION
ACREDITACION
ACREDITACION
ACREDITACION
IDA
Clculo del IDA para parmetros caractersticos de posicin

IDA de dos colas IDA de una cola
x u(1 ) x + u(1 )
Valor individual
x = u
1 2
n
cn
Media
x = u
1 2
x u(1 )
x + u(1 )
Mediana Ejemplo: para el valor individual se lee:
~ x = u
1 2
x u(1 )
cn
x + u(1 )
cn
1 2
x + u
1 2
Los valores conocidos inferior y superior establecen los valores lmites del IDA.
El valor cn en la mediana depende del nmero de valores de medicin tabulados.

ACREDITACION ACREDITACION
IDA
Aplicacin
IDA de frmulas Resumen

Valor caracterstico
Valor individual
El IDA se aplica, por ejemplo, cuando se realiza:

cumplimiento con valores lmites permisibles o valores nominales,pruebas de valores de garanta o elaboracin de diagramas de control de calidad para control de procesos Los valores ms comunes para la probabilidad de error son: Nivel de confianza 1 90,0% 95,0% 99,0% 99,9% 0,1 0,05 0,01 0,001 IDA 1 cola u() -1,2816 -1,6449 -2,3263 -3,0902 1 0,9 0,95 0,99 0,999 u(1 ) 1,2816 1,6449 2,3263 3,0902
dos colas
x = u
1 2
una cola
x + u(1 )
x u(1 )
x + u (1 ) x u (1 )
Media
x = u
1 2
IDA 2 colas /2 u(/2) 1 /

2
Mediana u(1 /2) 1,6449 1,9600 2,5758 3,2905
~ x = u
1 2
cn
x u (1 ) x + u(1 )

n n
cn cn
0,05 0,025 0,005 0,0005
-1,6449 0,95 -1,9600 0,975 -2,5758 0,995 -3,2905 0,9995
Desviacin estndar
f; 2
2
s
f ;1 2
2 (f ; )
f
ACREDITACION
(2f ;1 )
f
ACREDITACION
g(t); g(u)
IC
Distribucin t
La distribucin t es muy semejante a la distribucin normal N(0;1).
0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 0.20 0.15 0.10
Distribucin t
Valores caractersticose
Grados de libertad (gl)
El nmero de grados de libertad (gl) de una cantidad aleatoria se define mediante el nmero de observaciones libres disponibles, de los datos muestrales n menos la cantidad a de parmetros muestrales calculados (estimado).
Es continua, simtrica, con forma de campana y tiene un rea de variacin de - s +.
f =na
Ejemplo:
-6.0 f=2 -4.0 -2.0 0.0 f=5 f = 10 2.0 4.0 6.0 N(0,1) t; u 8.0
0.05 0.00 -8.0 f=1
Dada la suma de 3 cantidades, se puede disponer libremente de 2 cantidades; la tercera se comprometi en la suma..
La forma de la distribucin t es independiente de und y se determina solamente a travs de los grados de libertad (gl)
f = n 1
i =n
Para n valores de medicin cuya suma es conocida, se eligen libremente n - 1.
Cuanto menores son los gl, son mayores las desviaciones respecto a N(0;1). Para gl mayores, la distribucin t se convierte en la distribucin normal N(0;1).
ACREDITACION
v=
(x x )
i i =1
n 1
n - 1 es el grado de libertad de la varianza

ACREDITACION
g(t); g(u)
IC
Distribucin t
La distribucin t tiene, junto con una menor altura, una extensin claramente mayor respecto a la distribucin normal.
0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 0.20 0.15 0.10 0.05 0.00 -8.0 f=1 -6.0 f=2 -4.0 -2.0 0.0 f=5 f = 10 2.0 4.0 6.0 N(0,1) t; u 8.0
Distribucin t
IC
Con ayuda de los valores t puede determinarse los ICs. 2. es desconocida.
IC de la media
Para un IC de dos colas , la media : = x t Para un IC de una cola: inferior
x t (f ; 1 ) s n
f ; 1 2
lmites 2 colas 95,0% 99,0% 99,9%
DN
N(0;1) 1,960 2,576 3,291 f=2 4,303 9,925 31,599
Distribucin t
f=5 2,570 4,032 6,869 f = 150 1,976 2,609 3,357
s n
superior
Para gl 150 los valores de la distribucin t se aproximan a la distribucin normal.
x + t (f ; 1 )
Los valores para el rea bajo la campana estn tabulados.

ACREDITACION
s n
ACREDITACION
IC
IC de la desviacin estndar
El IC de dos colas es igual a:
s f s f
IC
IC de la desviacin estndar
Para el IC de la desviacin estndar se tiene:
f ; 2
2
s
f ;1 2
f ;1 2
f ; 2
Por tanto, se obtienen las siguientes ecuaciones:

2
f ; 2
Para un IC con lmite inferior (una cola):
Para un IC con lmite superior (una cola):
f; 2
y anlogamente
s
lmite superior
(2f ;1 )
0 < s
f ; 2
f ;1 2
lmite inferior
(2f ; )
Con esto se definen los valores lmite del intervalo que contiene a con la probabilidad definida. Esto es el IC de la desviacin estndar .
ACREDITACION
ACREDITACION
IC
Resumen de las frmulas
dos colas
Media
IC
Ejemplos
una cola
La concentracin de una solucin debe ser de 1,50% con de 0,01%. La solucin es medida 5 veces, con 1,48%; 1,47%; 1,50%; 1,48% y 1,49%. Se cumple con la norma ( = 5%)?
conocida
x u
1 2
x + u
1 2
x + u(1 ) x u (1 )
Solucin: Calcular el IC de la media y de la desviacin estndar y comparar con los valores nominales (Sollwerten).
n
s n s n
IC de la media :
desconocida x t
f ;1 2
s s x + t f ;1 n n 2
x + t (f ; 1 ) x t (f ; 1 )
= x t
f ; 1 2
s n
1,484 t
4;1
0 ,05 2
0 ,011 0 ,011 1,484 + t 0 ,05 4;1 5 5 2 0 ,011 0 ,011 1,484 + 2 ,7765 5 5
Datos iniciales:
Mediciones: Requerimientos: = 1,50% 0,01%
x = 1,484% s = 0,011%
1,484 2 ,7765
Desviacin estndar
f ;1 2
f ; 2
(2f ;1 )
1,484 0 ,0137 1,484 + 0 ,0137
0 < s
n=5 = 5%
1,470 1,498
(2f ; )
La concentracin es demasiado baja.

ACREDITACION
ACREDITACION
IC
Ejemplo
IC de la desviacin estndar:
f f
Poblacin, Muestra
IDA, IC
0 ,011 4
Poblacin ,
f ;1 2
f ; 2
0 ,011
0 ,05 4;1 2
4;
0 ,05 2
IDA
IC
Datos iniciales:
Mediciones:
x = 1,484% s = 0,011%
0 ,011
4 4 0 ,011 11,1433 0 ,4844
Requerimientos: = 1,50% 0,01%
0 ,0066 0 ,0316
x
Distribucin u
s
distribucin 2
x
conocida
distribucin u
s
distribucin 2
n=5 = 5%
Muestra
La dispersin es correcta.
desconocida
distribucin t
ACREDITACION
ACREDITACION
Cuantiles de la distribucin t
G 0,80 0,85 0,95 0,95 0,975 0,990 0,995 0,999 0,9995 0,9999 G 0,80 0,85 0,95 0,95 0,975 0,990 0,995 0,999 0,9995 0,9999 f 1 1,3764 1,9626 6,3137 6,3137 12,7062 31,8210 63,6559 318,2888 636,5776 3185,2722 2 1,0607 1,3862 2,9200 2,9200 4,3027 6,9645 9,9250 22,3285 31,5998 70,7060 3 0,9785 1,2498 2,3534 2,3534 3,1824 4,5407 5,8408 10,2143 12,9244 22,2027 4 0,9410 1,1896 2,1318 2,1318 2,7765 3,7469 4,6041 7,1729 8,6101 13,0385 5 0,9195 1,1558 2,0150 2,0150 2,5706 3,3649 4,0321 5,8935 6,8685 9,6764 f 11 0,8755 1,0877 1,7959 1,7959 2,2010 2,7181 3,1058 4,0248 4,4369 5,4529 12 0,8726 1,0832 1,7823 1,7823 2,1788 2,6810 3,0545 3,9296 4,3178 5,2631 13 0,8702 1,0795 1,7709 1,7709 2,1604 2,6503 3,0123 3,8520 4,2209 5,1106 14 0,8681 1,0763 1,7613 1,7613 2,1448 2,6245 2,9768 3,7874 4,1403 4,9849 15 0,8662 1,0735 1,7531 1,7531 2,1315 2,6025 2,9467 3,7329 4,0728 4,8801 16 0,8647 1,0711 1,7459 1,7459 2,1199 2,5835 2,9208 3,6861 4,0149 4,7905 17 0,8633 1,0690 1,7396 1,7396 2,1098 2,5669 2,8982 3,6458 3,9651 4,7148 18 0,8620 1,0672 1,7341 1,7341 2,1009 2,5524 2,8784 3,6105 3,9217 4,6485 19 0,8610 1,0655 1,7291 1,7291 2,0930 2,5395 2,8609 3,5793 3,8833 4,5903 20 0,8600 1,0640 1,7247 1,7247 2,0860 2,5280 2,8453 3,5518 3,8496 4,5390 6 0,9057 1,1342 1,9432 1,9432 2,4469 3,1427 3,7074 5,2075 5,9587 8,0233 7 0,8960 1,1192 1,8946 1,8946 2,3646 2,9979 3,4995 4,7853 5,4081 7,0641 8 0,8889 1,1081 1,8595 1,8595 2,3060 2,8965 3,3554 4,5008 5,0414 6,4424 9 0,8834 1,0997 1,8331 1,8331 2,2622 2,8214 3,2498 4,2969 4,7809 6,0094 10 0,8791 1,0931 1,8125 1,8125 2,2281 2,7638 3,1693 4,1437 4,5868 5,6939
Los cuantiles para 0 < G < 0,5 se obtienen con:
t f ;1 G = t f ;1 G
ACREDITACION
Cmo empezar? Requisitos Metrolgicos

VALIDACIN Y VERIFICACIN DE MTODOS
INTRODUCCIN
100 % 10 % 1% 1000000 100000 10000 1 000 mg/L 1000 1 mg/L 100 10 1 0.1
Documentar los requisitos metrolgicos del cliente.

Electrogravimetra Emisin ptica FRX Gravimetra Titulacin Absorcin Atmica con flama ICP emisin-radial Cromatografa de gases y lquidos ICP emisin-axial Absorcin Atmica Generacin de hidruros ICP-MS
0.01 0.001 0.0001
Absorcin atmica Horno de grafito
Lmites de deteccin en g/L
ACREDITACION
Variables Controladas
Condiciones para Validacin
(Separacin de Ambientes, Orden O nes) (Matenimiento, Especificaci M (Calibracin, Calificacin, Material Instalaciones y Condicion nes
Requisitos Normativos Mtodos Cuantitativos

Mtodo Normalizado Determinar: Intervalo de trabajo Linealidad Recuperacin Robustez Selectividad Estabilidad Reproducibilidad Modificacin de un mtodo Normalizado Determinar: Intervalo de trabajo Linealidad Recuperacin Robustez Selectividad Estabilidad Reproducibilidad Mtodo Interno Determinar: Selectividad Linealidad Exactitud Intervalo de trabajo Repetibilidad Reproducibilidad Estabilidad Lmite de deteccin Lmite de cuantificacin Recuperacin Robustez Sensibilidad Incertidumbre
ACREDITACION
Servicios y Suministros s
(Reactivos, Insumos y
Mtodo de Ensayo
(Documentado)
Proveedores)
de Referencia)
ACREDITACION
Ambientales
y Limpieza)
Trazabilidad
Equipos
Mtodos Cualitativos
Verificacin de Mtodos Normalizados
La verificacin de mtodos de ensayos normalizados cualitativos se basa en la confiabilidad, principalmente de: El sistema de control interno de calidad de las variables de control: personal, equipos, materiales, reactivos, instalaciones, condiciones ambintales y medios de control (se recomienda ver 4.11). La participacin en comparaciones interlaboratorios y programas de ensayos de aptitud acordes con las politicas.
Validacin de mtodos
Las caractersticas a determinar en un mtodo de ensayo cualitativo son las siguientes: Especificidad, Lmite de deteccin (sensibilidad), Falsos positivos, Falsos negativos, Exactitud relativa (si fuera necesario).
5
ACREDITACION
INTERVALO DE TRABAJO
INTERVALO DE TRABAJO
INTERVALO DETRABAJO
RESPUES STA
LIMITE DE DETECCIN
LIMITE DE CUANTI IFICACIN

INTERVALO LINEAL CONCENTRACIN
ACREDITACION
INTERVALO LINEAL
Diseo experimental Intervalo de trabajo

* *
* * * b
Se recomienda realizar mediciones al menos en 5 niveles distintos de concentracin dentro del intervalo de trabajo. Realizar mediciones en Material de Referencia Certificado en cada punto, caso contrario se podr trabajar con muestras enriquecidas no superando el 20% de la concentracin original para no alterar la matriz. Realizar al menos 10 mediciones en cada nivel de concentracin.
Ensayista 1 2 .. .. .. .. i .. .. .. p 1 2 .. .. Nivel j .. .. q-1 q
VALOR MEDIDO
yq
* * *
}a
MATERIAL DEREFERENCIA
.. .. yijk .. ..
1 2 .. .. n

Evaluacin de Resultados
Calcular los promedios en cada celda con un decimal ms que los datos originales:
TECNICA NUMERICA
Test de Cochrans Consiste en calcular el estadstico C
y ij =
1 nij
y
k =1
nij
ijk
Ec(1)
C=
2 Sij max
S
i =1
Ec(5)
2 ij
Calcular la desviacin estndar en cada celda:
y compararlo con el valor tabulado (Anexos) en caso de incumplimiento se puede pensar en eliminar esos datos.
S ij =
1 y ijk y ij nij 1 k =1
nij
Ec(2)
Test de Grubbs Primera evaluacin Consiste en calcular el estadstico Gij
Evaluar los resultados y eliminar los valores anmalos

Gij = y ij y j
j 1 (p j 1) y ij y j i =1
Ec(6)
ACREDITACION
ACREDITACION
Relacin entre el valor de referencia y la respuesta obtenida

Ensayista 1 .. .. .. q Tabla 4 Valores para la correlacin Establecer un modelo lineal Abscisa y j
Calcular el coeficiente de correlacin
y Ordenada j
r=
y j y j
j =1
y y
j =1 j j =1
2 2 q q j y q 2 y j q j =1 j =1 y 2 yj j q q j =1 j =1
Ec(11)
y j = a + b j y
Calcular la pendiente y el intercepto
q q
Ec(8)
Calcular la covarianza
b=
y j y j
j =1
y y
j =1 j j =1
COV j , y j = y
j
1 q y y j yj y q j =1
)(
Ec(12)
q
2
Calcular la varianza residual

Ec(9)
q y j q j =1 y 2j q j =1
a=
y
j =1
y b j
j =1
Sy / x =
Ec(10)
ACREDITACION
y (y (a + b ))
q j =1 j j
q2
Ec(13)
ACREDITACION
Comprobar la linealidad
Calcular la correlacin lineal significativa (tr).
Limite de Deteccin y Cuantificacin

0 yB Ld
ZonadeDeteccin
Lc
Zona deCuantificacin
tr =
(1 r )
2
(q 2)
ConcentracinenlasMuestras
Ec(14)
Limitede decisin Limitede deteccin
Comparar tr con el valor tabulado ttab con un grado de significacin del 95% y (p-2) grados de libertad. Si tr ttab existe correlacin entre los valores de referencia y la respuesta del mtodo, y el intervalo estudiado es lineal Si tr < ttab no existe correlacin entre los valores de referencia y la respuesta del mtodo, y el intervalo estudiado no es lineal. Tambin se puede comprobar la covarianza Si COV = 0, el sistema esta incorrelacionado COV < 0, el sistema tiene una proporcionalidad indirecta COV > 0, el sistema tiene una proporcionalidad directa
ACREDITACION
YB
SB 3SB
ACREDITACION
10
Diseo experimental Limite de Deteccin y Cuantificacin

Mediciones en blancos, se recomienda realizar 10 mediciones mnimo por duplicado Tomar los datos del estudio de Intervalo lineal Resolucin del equipo de medicin
Mediciones en blancos Datos del Intervalo Lineal

y d = a + 3S y / x
Ec(17) Ec(18)
y d = y B + 3 SB y c = y B + 10 SB
Ec(15) Ec(16)
y d = a + 10S y / x
Siendo:
a = El termino independiente de la recta de regresin Sy/x = Varianza residual
Resolucin del equipo de medicin,
11
ACREDITACION
12
ACREDITACION
Precisin
Dispersin (Errores Aleatorios)
PRECISIN
Valor convencionalmente verdadero
ACREDITACION
Condiciones de los estudios de Precisin

Estudios de Precisin

Se recomienda realizar mediciones dentro del intervalo lineal en distintas concentraciones. Realizar mediciones en muestras naturales en condiciones de repetibilidad y precisin intermedia. Realizar al menos 10 mediciones al menos por duplicado para cada nivel de concentracin.
Ensayista 1 2 .. .. .. .. i .. .. .. p 1 2 .. .. Nivel j .. .. q-1 q
Variables
Repetibilidad
Precisin Intermedia
Reproducibilidad
Muestra Mtodo Equipos Reactivos MR/MRC Instalaciones Cond.Amb. Tiempo Personal
Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo Mismo
Mismo Mismo Diferente Diferente Diferente Mismo Diferente Diferente Diferente
Mismo Mismo Diferente Diferente Diferente Diferente Diferente Diferente Diferente
.. .. yijk .. ..
1 2 .. .. n

Calcular los promedio de cada nivel
mj = y j =
n
i =1 p i =1
ij
y ij
ij
n
ij
Ec(19)
Calcular la dispersin entre ensayistas 2 2 S dj S rj 2 S Lj = nj 2 1 p 2 S dj = nij y ij y j p 1 i =1
Ec(22)
1 nij y ij p 1 i =1
p
( )
yj
( ) n
2 p i =1 ij
Ec(23)
Calcular la repetibilidad y precisin intermedia

2 S rj =
(n
i=1 p i=! p
2 1)S ij
(n
ij
1)
2 1)S ij
Ec(20)
p nij2 1 p nij i =1 p p 1 i =1 nij i =1 Calcular la reproducibilidad
nj =
Ec(24)
S2 = wj
(n
i=1 p i=!
ij
(n
ij
1)
Ec(21)
2 2 2 S Rj = S rj + S Lj
Ec(25)
Calcular los limites de repetibilidad, precisin intermedia y reproducibilidad
r = t 2 S r
Ec(26) Ec(27) Ec(28)

ACREDITACION
rw = t 2 S w
5
ACREDITACION
R = t 2 S R
Relacin entre reproducibilidad
la
concentracin
la
precisin
intermedia
la
Resultados Obtenidos
Nivel 1 j p
yj
Sw
SR
T1 =
n
i=1 p i=1 p
ij
y ij ; T2 = ; T4 =
n
i=1 p i=1
ij
y ij
( )
rw r
T3 = nij
nij2
Ec(29)
2 T5 = (nij 1)S ij i=1
T T3 T12 T (p 1) 2 S r2 32 SL = 2 T3 T3 T4
7
ACREDITACION
T5 S = T3 p
2 r
ACREDITACION
Componentes de la Exactitud
VALIDACIN Y VERIFICACIN DE MTODOS EXACTITUD
Exactitud
Presicin - Repetibilidad Sr - Presicin Intermedia Sw - Reproducibilidad SR Veracidad - Sesgo
ACREDITACION
Componentes del sesgo

Valor Medido (Media del Laboratorio) Valor Verdadero

Se recomienda realizar mediciones dentro del intervalo lineal en diferentes concentraciones. Realizar ensayos en material de referencia (mejor si es certificado). Realizar al menos 10 mediciones al menos por duplicado
Sesgo Total Media Interlaboratorio
Ensayista 1 2 .. .. .. .. i .. .. .. p
..
..
Nivel j
..
..
q-1
Sesgo del Laboratorio
Sesgo del Mtodo
.. .. yijk .. ..
1 2 .. .. n

La evaluacin consiste en: Verificar que los resultados pertenecen a la misma poblacin estadstica Esto podr hacerse siguiendo los pasos ya descritos para el intervalo de trabajo. Calculo de la exactitud y p Con los datos ya depurados 1. Calcular los promedio de cada nivel
1. Calcular la dispersin de los resultados
Sj =
p 1 y ij y j p j 1 i =1
Ec(32)
2. Calcular el error cuadrtico medio relativo
ECMR =
j2 + S 2 j
yj
100
Ec(33)
3. Calcular la desviacin del sesgo

Ec(30)
mj = y j =
2. Calcular el sesgo
n
i =1 p i =1
ij
y ij
ij
DESR =
i=1
pj
2 ij
pj
Ec(34)
j =y j yj
Ec(31)
ACREDITACION
ACREDITACION
Para realizar la verificacin de la exactitud se aplica la siguiente sistemtica: 1. Calcular t experimental
texp =
( )
j
pj
S2 j
Ec(35)
2. Contrastar con el t Tabulado si: Si texpttab se puede afirmar que ambos valores no difieren significativamente para el nivel de confianza seleccionado y por lo tanto concluimos que el mtodo satisface la condicin de exactitud. Si texp>ttab se puede afirmar que ambos valores difieren significativamente para el nivel de confianza seleccionado y por lo tanto concluimos que el mtodo no satisface la condicin de exactitud.
ACREDITACION
Definiciones
Especificidad/Selectividad
La selectividad y la especificidad son medidas que garantizan la confiabilidad de las mediciones en presencia de interferencias. La especificidad se considera generalmente que es el 100 % de la selectividad pero el acuerdo no es universal.
?
2
ACREDITACION
Sistemtica a seguir
Mtodo de adiciones, comparando los resultados (o la respuesta) de la muestra que contiene las posibles interferencias con el resultado de otra muestra sin dichas interferencias. Comparacin de los resultados obtenidos por un mtodo, con los resultados obtenidos por otro t d l lt d bt id t mtodo (mtodo de confirmacin). Es importante que el mtodo de confirmacin sea un mtodo normalizado, en este caso tambin los niveles de exactitud y precisin
Trabajar con los datos del proceso de verificacin del modelo lineal, en este caso si el modelo es lineal la pendiente debe ser constante en todo el rango de trabajo, esto muestra que el mtodo es selectivo/especfico en dicho rango. Test mediante adicin de un estndar ("Spiking").
ACREDITACION
ACREDITACION
Definiciones
Consiste en aplicar variaciones deliberadas al mtodo y estudiar el efecto resultante en el desempeo. El objetivo de la prueba de robustez es optimizar el Mtodo de Ensayo y describir que bajo las condiciones establecidas (incluidas sus tolerancias) se pueden obtener resultados suficientemente exactos con una alta seguridad, de manera que el procedimiento funcione confiablemente si se utiliza en otros laboratorios o despus de largos intervalos de tiempo tiempo.
Robustez
ACREDITACION
Sistemtica a seguir
Conocer las condiciones de medicin Definir las condiciones que afectan al mtodo de ensayo Seleccionar el objeto de evaluacin de la conformidad a ser utilizado (MRC, MSC, Muestra) Realizar mediciones bajo las condiciones modificadas Calcular la exactitud Establecer niveles de influencia para cada una de las variables modificadas.
3
ACREDITACION
Definiciones
Parmetro asociado al resultado de una medicin que caracteriza la dispersin de los valores que podran atribuirse razonablemente al mensurando.
urel =
(u
rel ( sistemtic o )
) + (u
2
rel (aleatorio )
INCERTIDUMBRE
ACREDITACION
Incertidumbre solo en base al componente aleatorio Esto valido si se supone que el mayor aporte de incertidumbre se debe al componente aleatorio en condiciones de reproducibilidad. Para realizar esto se pueden seguir los siguientes pasos: 1. Calcular la SRj 2. Calcular la Incertidumbre relativa
Incertidumbre en base al componente sistemtico y aleatorio En este caso la incertidumbre es la combinacin de ambos componentes. La sistemtica para estimacin es: 1. Calcular la precisin intermedia Sw 2. Calcular la desviacin del sesgo DESR 3. Combinar ambos componentes en trminos relativos
urel =
SRj yj
100%
urel =
Ec(37)
(u
rel( sistemtic o )
) + (u
2
rel (aleatorio ) 2
DESR S urel( sistemtico ) = 100 + wMR 100 y y MR MR

Ec(40)
uc =
urel y ijk 100
Ec(38)
uc =
Ec(39)
urel y ijk 100
Ec(41)
U = k u c = 2 uc
U = k uc = 2 uc
ACREDITACION
Ec(42)
ACREDITACION
Definiciones
VALIDACIN Y VERIFICACIN DE MTODOS METODOS CUALITATIVOS
Falsos negativos. Corresponden a aquellas muestras que contienen uno o ms analitos por encima del valor lmite permitido (lmite legislativo) y que al aplicar el test de screening dan una respuesta negativa. Es decir, como resultado del test de screening se concluye que la muestra no contiene analito por encima del nivel mximo cuando si contiene.
Falsos positivos. Corresponden a aquellas muestras que realmente no contienen analito por encima del nivel mximo permitido y que sin embargo el test de screening indica que esta por encima del nivel
ACREDITACION
La sensibilidad se define como la capacidad o habilidad del sistema de screening de detectar muestras positivas cuando realmente son positivas. De forma similar, la especificidad se define capacidad o habilidad del sistema de screening de detectar muestras negativas cuando en realmente son negativas.
ACREDITACION
ACREDITACION
Como queda en las figuras, alrededor del lmite de corte se sita una zona o regin de error o falta de fiabilidad (que en la literatura inglesa se denomina, unreliability). Esta zona corresponde al intervalo de concentraciones donde se obtienen los falsos positivos y negativos, por lo que est definida por un valor superior e inferior de concentracin de analito en muestra. ACREDITACION
ACREDITACION
VALIDACIN Y VERIFICACIN DE MTODOS INFORME DE VALIDACIN
Objetivo y Alcance del proceso de acreditacin Procedimiento de ensayo Procedimiento de Validacin Evaluacin del proceso de validacin Pruebas y frecuencia de control Detalle de insumos, reactivos, materiales de referencia y acondicionamiento de las muestras Lista de equipos, instrumentos y dispositivos Procedimiento de calificacin de los profesionales involucrados en el proceso de validacin Registros de la evaluacin de cada parmetro de validacin Documentacin de las revisiones bibliogrficas de respaldo Otros
ACREDITACION
Nota de respuesta
De: A: Diego Moya Asistencia Tcnica Internacional del proyecto FoCoSEP
Ref: Respuesta a la nota del SENACSA, DIGELAB No. 287/2009 del 24.07.2009.
Estimados Seores: En relacin con la nota de referencia sobre mi informe relativo a la actividad G309(2) desempeada por m el pasado mes de julio, ruego se sirvan a notar lo que sigue: El primer da me dedique a recolectar informacin de los procesos de control de la calidad implantados en el laboratorio del SENACSA. Se me indic que no realizaban repeticin de ensayos usando el mismo mtodo, y que tampoco ensayaban material de referencia. Lo que si tenan eran resultados de participacin en comparaciones interlaboratorio organizadas por el Centro Panamericano de Fiebre Aftosa. Se obtuvieron datos de dos comparaciones sucesivas (2007 y 2008). El mtodo mide densidad ptica (Absorbancia/Absorbancia) y si el valor es igual o superior a uno se concluye que el animal estudiado estara enfermo. Los datos que se recabaron fueron:
Ensayista VR 0,00 1 0,012 -0,016 0,012 0,014 0,014 -0,012 0,012 0,039 0,004 0,016 0,012 -0,014 1,46 1,101 1,423 0,828 0,832 0,830 1,00 2 1,629 1,237 1,622 0,826 0,836 0,836 2,706 2,276 2,768 1,929 1,931 1,930 2,00 Nivel 3 2,819 2,140 2,878 1,925 1,929 1,928 4 5,121 5,056 5,952 5,179 5,383 6,065 5,454 5,230 5,939 5,101 5,103 5,428 5,106 5,108 5,430 5,100 5,102 5,431 5 6,004 6,364 6,155 5,430 5,432 5,429 5,00 6,00
AO 2007 2008
1 2 3 4 5 6
Los datos resaltados en amarillo fueron estimados de graficas que envi el organizador del ensayo interlaboratorio y se indic en ese momento que sera lo mejor escribir a ste para disponer de los valores de referencia con todos los decimales, ya que al aplicar esta frmula:
t exp =
(y
VR p j S2 j
y j = Promedio de las mediciones en un nivel
VR = Valor de referencia pj = Numero de resultados (6) 1
Sj = Desviacin estndar de los resultados en el numerador se debe restar el promedio de las mediciones menos el Valor de Referencia. En los niveles 1 y 2 los valores eran altos, ya que cambia mucho si VR es 1 o 1,100 cosa que no se pudo estimar por el tamao de la grfica. Cuando se estaban ordenando los datos, se indico a la responsable de laboratorio esta situacin, y suger que lo mejor sera solicitar al organizador de la intercomparacin estos valores. En el informe no se pone en duda el mtodo desarrollado por PANAFTOSA. Una cosa es tener el mtodo escrito y otra muy diferente demostrar que lo aplicamos correctamente. Esto ltimo se hace en base a la validacin o confirmacin de los mtodos. La tabla que presento es la recomendada por la norma ISO 5725, parte 2, es llamada como el formulario A. Como el laboratorio tiene la hoja de clculo, basta con cambiar los valores resaltados en amarillo por valores con todos los decimales para que se recalcule la evaluacin. Los datos en la tabla son para distintos aos, ensayado por distintos analistas y con distintos lotes de reactivos. De estos datos lo que se puede obtener es la precisin intermedia. Lo que se recomienda en el informe es hacer mediciones en muestras naturales usando el mismo ensayista, mismo equipo y mismo lote de reactivos en un periodo corto de tiempo (condiciones de repetibilidad), para poder implantar un control de precisin adecuado
rw r
Es decir, se habra calculado del rw para precisin faltara el r que es un clculo idntico pero en otras condiciones de ensayo. Con respecto a la pre evaluacin de Jos Maria Ruiz Martn, la verdad es que no se me provey de ninguna informacin al respecto ni de los resultados de la misma. Los comentarios y sugerencias fueron hechos durante el curso, y se esperaba que el laboratorio las considerara como oportunidades de mejora. Otra opcin era desarrollar el curso con datos provistos en el material pero que eran para otros parmetros, lo que considero no hubiese sido de mucha utilidad. Atentos saludos.

AGRUP G309 (2) Info Moya - Anexos r2

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Proyecto de Fortalecimiento de la Competitividad del Sector Exportador Paraguayo

PERIODO: DEL 20 DE JUNIO AL 11 DE JULIO DE 2009

En consorcio con Agriconsulting, Icon Institut, Inypsa y PTB

CENTRO NACIONAL DE METROLOGA

Mxico, Julio 2004

CENTRO NACIONAL DE METROLOGA

CENTRO NACIONAL DE METROLOGA

Dr. Hctor O. Nava Jaimes Director General Centro Nacional de Metrologa

Mara Isabel Lpez Martnez Directora Ejecutiva

CENTRO NACIONAL DE METROLOGA

Grupo de Trabajo que particip en la elaboracin de esta Gua:

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4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN...

5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS

7. INCERTIDUMBRE DE MEDICIN 8. VALIDACIN DE MTODOS. 9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO. 10. BIBLIOGRAFA

CENTRO NACIONAL DE METROLOGA

11. AGRADECIMIENTOS................................................................................... 12. ANEXOS ..

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1. PROPSITO DE LA GUA TCNICA

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2. ALCANCE DE LA GUA TCNICA

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4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN

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5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS

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El evaluador debe solicitar:

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Carta de trazabilidad para la medicin de metanol por CG/DIF

CENAM u otro Laboratorio Nacional de Metrologa

Tcnica de medicin: CG-DIF y CG-EM

Mtodo NOM-142-SSA1-1995: B.5 para medicin de metanol por CG en bebidas alcohlicas A Am b A EI m C Am = C EI m fd m

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Volumen y/o masa, concentracin de masa del MRC Concentracin de masa

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9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO

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No. NOMBRE DE LA PRUEBA (1)

TCNICA DE MEDICION TCNICA ANALTICA (10)

Medicin de hexaclorobenceno en suelo

Ambiente Laboral, Residuos y Fuentes Fijas

Mtodo EPA 8270C

(1) (2) (3) (4)

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INSTRUMENTO Y/O SISTEMA DE MEDICIN MATERIAL VOLUMTRICO CALIBRADO

VALIDACIN DE METODO DE MEDICIN

Cromatografo Gases con Detector selectivo de masa (CG/EM),

La medicin se lleva a cabo con curva de calibracin y con un estndar interno

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Mtodo de ensayo (prueba)

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