Prof.

Augusto Dinis

Biologia Celular

Trfego vesicular entre o Retculo Endoplasmtico e o Complexo de Golgi

Depois de correctamente processadas, as protenas no residentes do RE so despachadas em vesculas para o complexo de Golgi: Transporte antergrado ou dianteiro As protenas residentes do RE que so erradamente despachadas ou que necessitam de concluir o seu processamento no complexo de Golgi so reenviadas para o RE: Transporte retrgrado ou de retorno O transporte retrgrado serve tambm para reciclar os componentes das vesculas que tm de intervir em novo transporte antergrado.

Biologia Celular

Transporte antergrado Retculo Endoplasmtico - Complexo de Golgi

O transporte antergrado a partir do RE efectuado por vesculas COPII. Neste transporte, as protenas cargo apresentam Sinais de Sada (exportao) que so reconhecidos, directa ou indirectamente, por componentes da cobertura COPII.

Lodish et al., 2008

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Biologia Celular

Transporte retrgrado Complexo de Golgi-Retculo Endoplasmtico

O transporte retrgrado para o RE feito por vesculas COPI. Neste transporte, as protenas cargo apresentam Sinais de Retorno no terminal C: Protenas solveis (do lmen): Sinal KDEL (Lys-Asp-Glu-Leu) Protenas transmembranares (Tipo 1) Sinal Dilisina (Lys-X-Lys ou Lys-Lys-X) ou no terminal N: Protenas transmembranares (Tipo 2) Sinal Diarginina (Arg-X-Arg ou Arg-Arg-X)
Lodish et al., 2008

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Transporte retrgrado de protenas solveis para o Retculo Endoplasmtico

Alberts et al., 2008

O reconhecimento e ligao do sinal KDEL ao seu receptor ocorre em ambiente acdico enquanto a dissociao ocorre em ambiente com pH neutro

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Biologia Celular

Biologia Celular

Microfotografia TEM de um dictiossoma ( esquerda) e respectiva interpretao tridimensional ( direita)

BIOLOGIA CELULAR

Nveis de organizao estrutural

Complexo de Golgi
Dictiossomas
Cisternas e vesculas associadas

Cistern

Complexo de Golgi
Polaridade dictiossmica Eixo Cis-Trans
(Heterogeneidade estrutural e funcional das cisternas)

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Complexo de Golgi

Alberts et al., 2008

Compartimentao do Complexo de Golgi

Rede cis-Golgiana Centro de chegada e seleco Cisternas Golgianas Cisternas cis, mediais e trans Rede trans-Golgiana Centro de distribuio

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Complexo de Golgi
O Complexo de Golgi o principal local de sntese e processamento de hidratos de carbonos:
- Pectina e hemicelulose da parede celular - Glucosaminaglicanas da matriz extracelular - Cadeias de oligossacardeos de muitas protenas e lpidos

e de processamento de lpidos e protenas:

- Glicosilao, sulfatao e fosforilao
Manosidil-transferases Fucosil-transferases

Exemplos de glicosil-transferases
(principais enzimas dos dictiossomas)

Sialil-transferases Galactosil-transferases N-acetilglucosaminil-transferases

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Complexo de Golgi
Processamento de oligossacardeos N-linked

Alberts et al., 2008

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Complexo de Golgi
Ao transitarem nos dictiossomas, as molculas de secreo sofrem uma srie ordenada de modificaes catalisadas pelas enzimas processadoras presentes nas sucessivas cisternas

Compartimentao funcional

Alberts et al., 2008

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Biologia Celular

Complexo de Golgi
Modelos hipotticos do trfego de molculas atravs das cisternas golgianas

Modelo do transporte vesicular

- O complexo de Golgi um componente relativamente esttico. - As enzimas encontram-se fixas em cada cisterna. - Os produtos de secreo movem-se de uma cisterna para a seguinte atravs de vesculas transportadoras. - Um fluxo vesicular retrgrado recicla as membranas e as molculas necessrias para um novo transporte antergrado.
Alberts et al., 2008

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Complexo de Golgi
Modelos hipotticos do trfego de molculas atravs das cisternas golgianas

Modelo da maturao cisternal

- O complexo de Golgi um componente altamente dinmico. - Cada cisterna amadurece e transformase na cisterna imediatamente a seguir. - Os produtos de secreo so movidos no interior das cisternas conjuntamente com as enzimas processadoras. - Um fluxo vesicular retrgrado repe a distribuio caracterstica das enzimas de cada cisterna.
Alberts et al., 2008

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Transporte da rede Trans-Golgiana para os Lisossomas

Cooper & Hausman, 2009

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Lisossomas
Organelos ricos em enzimas hidrolticas (hidrolases) Digesto intracelular

Enzima marcadora dos lisossomas

Lisossomas isolados do fgado de rato por centrifugao diferencial

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Lisossomas
Caractersticas dos Lisossomas

Microfotografias TEM de um Lisossoma Primrio (em cima) e Lisossomas Secundrios (em baixo)

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Lisossomas
As enzimas lisossmicas possuem um sinal especfico M6P ou Man6P (manose-6-fosfato). Este resduo de acar adicionado exclusivamente aos oligossacardeos N-linked das enzimas lisossmicas (protenas altamente glicosiladas). O sinal Man6P vai evitar que as enzimas lisossmicas sofram o processamento caracterstico das outras protenas de secreo quando estas atravessam as cisternas Golgianas.

Na rede trans golgiana, protenas transmembranares receptoras do Man6P reconhecem os grupos Man6P das glicoprotenas lisossmicas e ligam-se a elas inserindo-as em vesculas de clatrina.

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Lisossomas
O sinal manose-6-fosfato (M6P) formado na rede cis-Golgiana atravs de uma reaco de duas etapas catalisada por duas enzimas:
Primeira etapa a enzima N-acetil glucosamina fosfotransferase catalisa a transferncia de uma N-acetil glucosamina-fosfato para uma manose terminal de um oligossacardeo N-linked.

Alberts et al., 2008

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Lisossomas
O sinal manose-6-fosfato (Man6P) formado na rede cis-Golgiana atravs de uma reaco de duas etapas catalisada por duas enzimas:
Segunda etapa a enzima N-acetil glucosamina fosfodiesterase cliva o resduo N-acetil glucosamina expondo a manose fosforilada.

Lodish et al., 2008

Aps a formao do sinal Man6P, as enzimas lisossmicas so transportadas at rede trans-Golgiana sem sofrerem posteriores alteraes.

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Lisossomas
Transporte das enzimas lisossmicas para o Endossoma Tardio (compartimento pr-lisossmico)

Alberts et al., 2008

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Trfego das Enzimas Lisossmicas

Lodish et al., 2008

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Endocitose mediada por receptores

Lodish et al., 2008

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Lisossomas e Digesto intracelular

Lodish et al., 2008

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Lisossomas e Digesto intracelular

(Azevedo, 2005)

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LISOSSOMAS

Lisossomas primrios Lisossomas secundrios

- vacolos autofgicos ou citolisossomas - vacolos digestivos ou heterolisossomas - corpos residuais

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SECREO CONSTITUTIVA E SECREO REGULADA

A via da secreo constitutiva existe em todas as clulas eucariticas e destina-se a integrar molculas na membrana plasmtica, ou na matriz extracelular ou parede celular, medida que estas vo sendo fabricadas (Ciclo Secretor Contnuo)

Alberts et al., 2008

A via da secreo regulada existe em clulas secretoras especializadas (p. ex. do pncreas) e destina-se a exportar grandes quantidades de produtos de secreo quando a clula recebe um estmulo adequado (Ciclo Secretor Descontnuo)

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SECREO CONSTITUTIVA E SECREO REGULADA

Alberts et al., 2008

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SECREO REGULADA

Alberts et al., 2008

Formao das vesculas secretoras (grnulos de zimognio)

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EXOCITOSE

De Robertis & De Robertis, 1996

Microfotografia TEM da exocitose de grnulos de zimognio ( esquerda) e respectiva interpretao esquemtica ( direita)

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