Tema 5.- Protena C reactiva.

1.

Introduccin. La PCR es una protena anormal que aparece en sangre durante la fase aguda de los procesos inflamatorios. Debe su nombre a que, aunque no sea un Ac, se descubri que esa protena formaba un precipitado con el polisacrido C del neumococo (por lo que se consider, errneamente, un Ac -protena especfica- frente a l). Pero la PCR no es un Ac, sino una alfaglobulina o protena de la fase aguda, que resulta ser un indicador por comn, lo que inespecfico su elevacin pero es vlido, sinnimo de de inflamacin, el cual desaparece cuando cesa la actividad inflamatoria, enfermedad aguda o de agudizacin o agravamiento de un proceso crnico.

2.

Importancia

clnica

de

la

protena

reactiva .

Su

significacin clnica es inconcreta, ya que la inflamacin acompaa a diversas situaciones patolgicas de significacin muy desigual. Se sabe que: 1) Durante una infeccin activa su valor se eleva varias veces (hasta 100) sobre el normal. 2) Se enlaza a la pared bacteriana actuando como opsonina. Esto es, como una partcula facilitadora y/o intensificadora de fagocitosis. 3) Es un importante activador del sistema del

complemento. 4) Se eleva en pacientes afectos de cncer, tuberculosis, artritis reumatoide, fiebre reumtica y LES (lupus eritematoso sistmico). 5) Actualmente, la PCR-us (PCR ultrasensible, que detecta valores superiores a 1 mg/L, en lugar de los habituales 6 mg/L) se hace relevante como indicador de lesin miocrdica, pulmonar y
Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Microbiolgico. Tema 5 Protena C reactiva 1

pleural. Se eleva en procesos aterosclerticos, significativamente en la angina de pecho y en el infarto agudo de miocardio. Tambin en afecciones infecciosa. 6) Su elevacin indica inflamacin, no necesariamente de ndole infecciosa, ya que se eleva en las afecciones traumticas e intervenciones quirrgicas, y en cualquier reaccin tisular de ndole inflamatoria (como las fases agudizacin de fiebre reumtica y artritis reumatoidea) o necrtica (infarto). 7) Resulta de ms eficaz y que de la VSG como de en indicador y particular pulmonares, diversas, en especial las de etiologa

diagnstico, tratamiento

pronstico diversos

control

evolucin

procesos

infecciosos,

previamente diagnosticados. 8) Es un buen indicador de actividad reagudizacin o mejora- en procesos como fiebre reumtica aguda y artritis reumatoide, ya que se eleva dentro de las primeras 24 h de la agresin y desaparece al iniciarse la convalecencia, reflejando el estado actual de la enfermedad y no el de das anteriores. PCR COMPLEMENTO

OPSONIZACIN 3. Mtodos de determinacin. El mtodo usualmente utilizado para determinar la PCR es la aglutinacin de partculas de ltex (poliestireno) recubiertas de antisuero antiprotena C, que se pone en contacto con el suero del paciente. Se trata de un mtodo rpido que permite cuantificar la positividad de la prueba. Consiste en ver la reaccin de aglutinacin producida entre partculas de ltex recubiertas de antisuero antiprotena C y el suero del paciente.

Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Microbiolgico. Tema 5 Protena C reactiva

En general, en todas las pruebas de aglutinacin contaremos con un kit comercial y habremos de disponer de un suero problema (reciente, congelado o refrigerado un mximo de 48 h), siendo convenientes Dispondremos tambin de sueros control, positivo con y negativo. reactivas tarjetas visualizadoras zonas

redondeadas o cuadrangulares (que en este caso de color negro, ya que la aglutinacin del ltex nos aparecer como grumos blancos). As, pues, para la prueba cualitativa, contaremos con: -

Reactivo (poliestireno marcado con anticuerpos antiprotena C) Suero problema (del paciente) Suero control + Suero control Tarjetas visualizadoras de la reaccin (fondo negro, en este caso, ya que el ltex es de color blanco)

En cada caso hay que seguir precisamente las indicaciones del fabricante (cantidad de suero, reactivos, tiempo de mezcla y lectura, etc.), siendo esencial que el alumno extreme las precauciones y sepa dar el resultado del modo que la prueba requiera. Para la prueba semicuantitativa, precisaremos los mismos reactivos y diluciones seriadas del suero problema. En suma, cuando la PCR resulta negativa, se informa de este modo, lo que significa que su concentracin es normal e inferior al punto de sensibilidad (6 mg/L en nuestro caso, 1 mg/L en el de la PCR-us). En el caso de que la prueba salga positiva, es conveniente (imprescindible en casos de que se solicite como prueba de control de fiebre reumtica, artritis reumatoide, infarto de miocardio, o procesos infecciosos o tumorales) informar de su concentracin en mg/L, lo que requiere realizar diluciones seriadas del suero problema con suero fisiolgico (solucin salina estril al 09 %), segn indique el fabricante del reactivo.

Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Microbiolgico. Tema 5 Protena C reactiva

Realizar la prctica leyendo detenidamente las instrucciones del fabricante.

Observa si se produce aglutinacin de las partculas de ltex con antisuero al contactar con el suero del paciente.
o

Si se produce, ello indicara que la prueba cualitativa es positiva (PCR +), lo que significa que su valor excede al del dintel de sensibilidad (6 mg/L, en el ejemplo anterior).

En

este

caso,

procede el cual

conocer exige

su

valor

semicuantitativo, prospecto).

diluciones

seriadas del suero problema (segn indique el

Para la determinacin semicuantitativa de la PCR (necesaria en caso de positividad, pues suele realizarse para seguimiento de un proceso previamente diagnosticado: cuyo tratamiento y evolucin se controla) emplearemos diluciones seriadas (con suero salino al 0,9%) y realizaremos la prueba con cada una de ellas. Una vez determinado el mnimo valor positivo, debemos multiplicar el factor de dilucin srica por el valor de sensibilidad de la prueba. PCR (mg/L) = Mxima dilucin sensibilidad (6 mg/L). Las limitaciones del mtodo se han reducido mucho con reaccin positiva x

recientemente. Descartar: lecturas tardas (despus de 4 minutos), sueros lipmicos hemolizados y plasma. Los 250 U.I./ml. Pueden aumentar la PCR los anticonceptivos orales y el DIU. Tb el estrs. factores reumatoideos pueden dar falsos positivos

(aglutinar el suero), pero slo si estn a concentraciones superiores a

Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Microbiolgico. Tema 5 Protena C reactiva

 Falsos -: Pueden disminuir sus valores la aspirina y otros AINEs o AIE (antiinflamatorios, esteroideos o no esteroideos). Los fenmenos de zona (prozona) aparecen a concentraciones de PCR superiores a 400 mg/L.

Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Microbiolgico. Tema 5 Protena C reactiva