RESULTADOS SOBRE INHIBIDORES EN MUESTRAS DE LECHE DE TANQUE DE PRODUCTORES DE GANADO CAPRINO

MARCO, J.C1; EXTRAMIANA, A.B.1; SNCHEZ LPEZ, A.2; GARCA ROBLES, I.1 Y CONTRERAS, A.3;
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: Laboratorio Normativo de Salud Pblica. Gobierno Vasco. concalbi-san@ej-gv.es : Divisin de Produccin Animal. Escuela Politcnica Superior de Orihuela. Universidad Miguel Hernndez 3 : Facultad de Veterinaria. Universidad de Murcia. Campus Espinardo 30071 (Murcia). acontrer@um.es

RESUMEN La seguridad alimentaria es un criterio bsico que debe presidir la produccin de alimentos. En este sentido, las mamitis constituyen es una de las causas principales de la contaminacin de la leche con residuos de sustancias antimicrobianas utilizadas de modo teraputico. En consecuencia los productos lcteos de origen caprino pueden verse alterados en sus caractersticas tecnolgicas y toxicolgicas. Las consecuencias de la presencia de inhibidores plantean riesgos para la salud pblica., interferencia en los procesos industriales de fermentacin de la leche, y de imagen de la leche y productos lcteos, alimentos que gozan de una buena confianza entre los consumidores. El estudio llevado a cabo en 79 muestras leche de tanque, de 46 explotaciones caprinas revel la contaminacin de la leche por residuos inhibidores en el 12,7% de las muestras analizadas. La combinacin de varias pruebas microbiolgicas de cribado, parece una necesidad para mejorar la posible presencia de antimicrobianos en la leche. La presencia de inhibidores en la leche de ganado caprino, parece indicar un uso indebido de los antimicrobianos en esta especie, si bien es preciso realizar la confirmacin qumica de las muestras positivas, para verificar si los niveles de antibiticos superan los LMRs permitidos. Palabras clave: ganado caprino, leche de tanque, inhibidores. Mtodos de cribado, postcribado. Mtodo de las 4/5 placas. INTRODUCCIN La seguridad alimentaria es un criterio bsico que debe presidir la produccin de alimentos. En este sentido, la presencia de residuos de sustancias antimicrobianas utilizadas de modo teraputico en la produccin animal, y en especial para el tratamiento de las mamitis, es una de las causas principales de la contaminacin de la leche (Luthman, 1993) y productos lcteos de origen caprino. Las consecuencias acontecen y son incuestionables en varias direcciones: riesgos para la salud pblica (Comit Mixto FAO/OMS, 1995; Heeschen, 1997, Honkanen-Buzalski, 1997)., interferencia en los procesos industriales de fermentacin de la leche, y de imagen de la leche y productos lcteos, que en la actualidad gozan de una buena confianza entre los consumidores.

La presencia de residuos inhibidores en leche de tanque, es uno de los anlisis clave realizados por los laboratorios interprofesionales, como criterio para el pago por calidad. En el ganado vacuno, se realizan de modo sistemtico desde hace varios aos, por el inters de las industrias lcteas en prevenir sus efectos tecnolgicos indeseables. En la actualidad, al menos se realizan 4 anlisis/mes mediante tcnicas de cribado (BRT? y Delvotest? ); sin embargo en el caprino no est generalizada la deteccin de inhibidores. Por otra parte, la sensibilidad de estas pruebas de cribado es muy elevada en general para la deteccin de residuos de la mayora de antibiticos ? -lactmicos, pero muestra graves limitaciones para la discriminacin de otras familias de antimicrobianos y en particular de las quinolonas y sulfamidas. El mtodo de cribado de 4-5 placas (Curie et al., 1998) permite una adecuada deteccin de todas las familias de antibiticos empleados, con la limitacin de las sulfamidas, si bien este grupo representa un porcentaje inferior al 5% de los antibiticos empleados en medicina veterinaria. Los estudios publicados sobre la presencia de inhibidores en leche de cabra son muy escasos (Barbosa, 1997), as como la aplicacin del rendimiento de varias tcnicas de cribado (Zeng et al., 1995). En ambos casos en la bibliografa espaola consultada, no han sido informados trabajos realizados sobre inhibidores en leche de cabra; por lo tanto nuestro objetivo fue realizar una primera aproximacin a la situacin actual en un rea relevante de la produccin caprina de Espaa. MATERIAL Y MTODOS Las muestras de leche de tanque fueron seleccionadas al azar entre ganaderos que entregan la leche en una quesera de la zona de Jumilla (Murcia). En total se analizaron 79 muestras de leche de tanque de 46 explotaciones caprinas, tomadas por duplicado en 31 ganaderos con un intervalo de una semana entre los muestreos, mientras que las 15 restantes corresponden a ganaderos que slo disponen de un nico muestreo. Las muestras fueron analizadas para la presencia de inhibidores, mediante una tcnica microbiolgica de cribado consistente en la combinacin del mtodo de 4-5 placas [(B. subtilis: pH 6, 7,2 y 8; E. coli (pH 7,2) y M. luteus (pH 8)] y un mtodo comercial basado en la inhibicin de B. stearotermophilus (BRT? ), utilizado como anlisis para la deteccin de inhibidores en la inmensa mayora de los laboratorios interprofesionales espaoles, garantes de la calidad de la leche. Asimismo se realiz una tcnica microbiolgica de postcribado (bioensayo mltiple) destinada a la discriminacin preliminar de la posible familia de antibiticos implicada en la inhibicin (Caldern et al., 1996).

Se realizaron dos alcuotas, una correspondiente a la muestra fresca, y otra despus de someterla a tratamiento trmico (80C durante 10 minutos), con el propsito de inactivar ciertos posibles inhibidores naturales. Todas los muestras fueron realizadas por duplicado, impregnando dos discos de papel con 100 ? l de la leche problema. RESULTADOS Y DISCUSIN La relacin de muestras positivas a cada una de las tcnicas se adjunta a continuacin (Tabla 1): Sobre la base de estos resultados, la contaminacin de la leche por residuos inhibidores sera elevada (12,7%) y superior a la informacin oficiosa correspondiente a la leche de tanque de los ganaderos de vacuno y ovino lechero.

Tabla 1. Resultados de la presencia de inhibidores en leche de tanque de ganado caprino. Muestras frescas
Cribado 4/5 pos. Cribado 4/5 neg. BRT? pos. BRT
?

Muestras calentadas (80C/10)

Bioensayo positivo No realizado Cribado 4/5 pos. Cribado 4/5 neg. BRT? pos. BRT? neg. Bioensayo Positivo

neg.

9/79 11,4%
?

70/79 88,6%

6/71 8,5%

65/71 91,5%

2/71 2,8%

69/71 97,2%

2/79 2,5%

77/79 97,5%

5/38 13,2%

BRT : Bacillus stearotermophilus

El tratamiento trmico sera uno de los factores que interferira en la deteccin de residuos inhibidores en la leche de ganado caprino. La combinacin de varias pruebas de cribado y postcribado, que en definitiva incluyen ms microorganismos, medios y pH de los mismos, ofrecen la oportunidad de una deteccin ms eficiente de los posibles inhibidores presentes. En cualquier caso, las tcnicas microbiolgicas de cribado ofrecen una posibilidad econmicamente factible para discriminar las muestras contaminadas con residuos de inhibidores; sin embargo, su sensibilidad en muchos casos es superior, y en menos casos inferior al LMR fijado por la legislacin, por lo que indefectiblemente deben de confirmarse todos los positivos, para identificar y cuantificar en su caso la molcula implicada. Por otra parte, sera deseable la realizacin de estudios encaminados a la relacin de las estrategias de tratamiento antibitico de las explotaciones y la presencia de residuos inhibidores, tal y como se ha realizado en ganado vacuno (McEwen et al., 1991) con el

propsito de instaurar sistemas de garanta de calidad en origen de las explotaciones caprinas con especial atencin a la prevencin de la contaminacin con antibiticos. CONCLUSIONES ? ? La combinacin de varias pruebas microbiolgicas de cribado, parece una necesidad para mejorar la posible presencia de antimicrobianos en la leche. La presencia de inhibidores en la leche de ganado caprino del rea estudiada, parece indicar un uso indebido de los antimicrobianos en esta especie, si bien es preciso realizar la confirmacin qumica de las muestras positivas, para verificar si los niveles de antibiticos superan los LMRs permitidos. AGRADECIMIENTOS El presente trabajo ha sido realizado bajo la financiacin del proyecto FEDER 1FD971010-CO2-01 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS Barbosa M., 1997. Occurance of antibiotics in ewe and goat milk-application and suitability of various test kits. Simposium Non-destructive testing, pasteurization requirements and antibiotics in Dairy products. FIL-IDF, Lisboa. Curie, D.; Lynas, L.; Kennedy, G.; McCaughey, J. (1998). Evaluation of a modified EC Four Plate to detect antimicrobial drugs. Food Additives and Contaminants.15: 651-660 Caldern, V.; Gonzlez, J.; Dez, P.; Berenguer, J.A. (1996) Evaluation of a multiple technique for deerminatio of antibiotic residues in meat with standard solutions af antimicrobials Food Additives and Contaminants.13: 13-19 Comit Mixto FAO/OMS de expertos en Aditivos Alimentarios (1995). Evaluacin de residuos de ciertos frmacos de uso veterinario en los alimentos. 71 pp Federacin Internacional de Lechera (FIL-IDF). 1991. Detection and confirmation of inhibitors in milk and milk products. FIL-IDF Bull 258: 99. Heeschen W., 1997. Factores determinantes de calidad e higiene de la leche. XIV Jornadas del grupo de tcnicos especialistas en mamitis y calidad de leche. Palma de Mallorca, 30 de Octubre 1997. Honkanen-Buzalski T., Reybroeck W., 1997. Residues and contaminants in milk and milk products. International Dairy Federation . Special Issue 9701. IDF: 26-33. Luthman J., 1993.Chapter 15. Mastitis therapy in relation to antibiotic residues in milk. Bolletin of the IDF 283: 69- 70. McEwen S.A., Meek A.H., Black W.D., 1991. A dairy farm survey of antibiotic treatment practices, residue control methods and associations with inhibitors in milk. Journal of Food protection.Vol. 54 (6): 454- 459. Zeng., S.S:; Escobar, E.N.; Brown-Crowder, I. (1995). Evaluation of screenig tests for detection of antibiotic residues in goat milk. Small Ruminant Research. 21: 155-160 RESULTS OF THE PRESENCE OF INHIBITORS IN GOAT BULK TANK MILK SAMPLES

SUMMARY Until this moment there is no reference about the study of antibiotical residues in goat milk in Spain. The presence of this residues is one of the main concerns in public health. In this study we found 12,7% of inhibitors positive of goat milk samples. This percentage is higher compared to those described fro dairy cattle an ewes. Nowadays the most efficient and advisible metthods to detect antibiotical drugs in milk is the combination of differents screenig methods like BRT? and a modified EC Four plates. The final confirmation by chemical analysis is neccesary to determine if the level of residues is higher than the LMR defined for each antibiotic. Key words: milk residues, goat milk tank inhibitors, antibiotic residues in goat milk, residues and contaminants in milk.