ALCALOIDES GENERALIDADES: Los alcaloides representan el grupo ms grande de metabolitos secundarios encontrados en las plantas, conocindose hasta hoy

aproximadamente 5500. Se han aislado de semillas, races, cortezas y hojas de aproximadamente 40 familias, sobre todo de las Apocinceas, Papaverceas, Ranunculceas, Solanceas, Rutceas y Rubiceas. Pueden encontrarse en forma libre, como glicsidos, o formando sales con cidos orgnicos. DEFINICIN: Aunque no hay un definicin exacta del trmino alcaloides, puede decirse que son sustancias, en su mayora bsicas, que tienen uno o ms tomos de nitrgeno en estado de oxidacin negativo, y han sido biosintetizados a partir de aminocidos. FUNCIN: En las plantas an no se conoce son exactitud. Algunos intervienen como reguladores de su crecimiento, o como repelentes o atractores de insectos. Se cree que no desempean una funcin vital en las plantas, ya que alrededor del 80% de ellas no contienen alcaloides. Sin embargo, es ampliamente conocida la accin farmacolgica que muchos de ellos ejercen. Alcaloide Atropina Cocana Codena Emetina Escopolamina Morfina Quinina Efedrina Papaverina Reserpina Accin fisiolgica Antiespasmdico, estimulante, midritico. Estimulante, anestsico local, sedante. Analgsico, anestsico local, sedante, hipntico. Emtico, expectorante, antipirtico, amebicida. Hipntico, sedante. Narctico, sedante, hipntico, analgsico. Antipirtico, emenagogo (que estimula o favorece la menstruacin), tnico. Broncodilatador, vaso-constrictor, para insuficiencia Circulatoria. Relajante muscular, antiespasmdico. Contra presin sangunea alta.

CLASIFICACIN DE LOS ALCALOIDES Los alcaloides usualmente se clasifican de acuerdo al tipo de estructura qumica de la cual derivan. Ejemplo: Derivados de la piridina: Piridina

Nicotina

Derivados del tropano:

Tropano

Atropina

Escopolamina Derivados de la quinolina: Quinina: Cinchonidina

Derivados del indol: Indol

Psilocibina

Estricnina

Derivados de la Pirrolizidina: Pirrolizidina Retronecina HO CH2OH

BIOSNTESIS: Los alcaloides derivan principalmente de los aminocidos ornitina, lisina, fenilalanina, tirosina, triptfano, as como el cido antranlico y de la piridina, a travs de una serie de reacciones tales como: oxidaciones, reducciones, isomerizaciones, desaminaciones, formacin de bases de Schiff, etc. 1. ALCALOIDES NO HETEROCCLICOS: Comprenden los llamados proto-alcaloides, derivados de la beta-fenil-etil-amina, y cuyo tomo de nitrgeno est fuera del sistema heterocclico. Estn relacionados biogenticamente con los aminocidos fenilalanina y tirosina. Incluyen: 1.1 Efedrina y pseudo-efedrina: Contenidos en la planta Ephedra sinica, conocida en La china como ma-huang. Los dos alcaloides son diasteroismeros iterconvertibles.

Efedrina:

Es la posicin del OH la que vara entre ambos alcaloides y da origen a la rotacin ptica.

La efedrina hace girar el plano de la luz polarizada a la izquierda (-) y la pseudoefedrina a la derecha (+). Ambos alcaloides tienen los mismos usos de la adrenalina: contra la fiebre del heno, asma y congestin nasal. 1.2 Mescalina:

Contenida en el peyote o mescal (Lophophora williamsii, Fam. Cactceas), y Opuntia cilndrica (otro tipo de cacto). Es responsable de la actividad alucingena de stos y otros cactos. Se acostumbra a usar en Mxico y sur de Estados Unidos el cacto desecado y pulverizado (a veces en cpsulas). Se usa ingerido. Efectos: nusea, confusin, distorsin de los sonidos (incremento de la imaginacin auditiva). 1.3 Dopamina: Es un estimulante, vasodilatador, estimula el corazn, se usa en caso de shock. Se encuentra presente en el pericarpio del pltano (Mussa paradisiaca) y del banano (Mussa sapientum), familia Musceas. La dopamina es el precursor biosinttico mejor identificado de la mescalina. Dopamina

La beta- hidroxilacin de la dopamina origina noradrenalina, hormona del reino animal, tambin presente en el banano.

Noradrenalina

2.1 DERIVADOS DE LA PIRIDINA-PIPERIDINA: Piridina Piperidina

2.1.1 Piperina y chavicina: Son ismeros de la pimienta (Piper nigrum), ya sea cuando el fruto est inmaduro (pimienta negra) o maduro y pelado (pimienta blanca). El contenido de piperina es de 5 a 10%. La chavicina es la responsable del sabor picante caracterstico de la pimienta. Piperina Chavicina

2.1.2 Conina: Es el alcaloide ms abundante en la cicuta (Conium maculatum). Es la alfa-propilpiperidina. Es un lquido aceitoso, de olor penetrante, no oxigenado y fuertemente bsico.

2.1.3 Nicotina: Sustancia lquida, voltil, higroscpica, incolora, pero que por exposicin al aire se torna obscura. Est presente en Nicotiana tabacum y otras especies de la familia de las Solanceas.

2.2 DERIVADOS DE LA PIRROLIDINA Y PIRROLIZIDINA: Pirrolidina

NH Pirrolizidina

2.2.1 Alcaloides de la coca (Erythroxylon coca, fam. Erythroxylaceas): Incluyen la higrina, higrolina y cusco-higrina, conocidos comnmente como higrinas. Estas derivan de la pirrolidina: Higrina

N CH2COCH3 CH3 2.2.2 Alcaloides de la Pirrolizidina: Son steres de amino-alcoholes, o di-oles esterificados con diversos cidos, ya sea en uno o ms grupos hidroxilo. Los alcoholes se llaman NECINOS, y los cidos se llaman NCICOS. Se encuentran en varias familias, sobre todo las Compuestas (gnero Senecio, Leguminosas (gnero Crotalaria) y Borraginceas. Ejemplo ms

conocido: retronecina. Retronecina (diol) HO CH2OH

2.3 DERIVADOS DEL TROPANO: Se encuentran en algunas familias tales como las Solanceas, Convolvulceas, Erythroxylceas y Dioscoreceas. Tropano

2.3.1 Atropina e hiosciamina: Son ismeros presentes en los gneros Atropa, Datura e Hyosciamus (fam. Solanceas). La atropina difiere de la hiosciamina en que es ptimamente inactiva.

2.3.2 Escopolamina o hioscina: Est presente, al igual que la atropina en los mismos gneros de plantas. Difiere de la atropina en que contiene un oxgeno ms. 2.3.3 Cocana: Es la metil-benzol-ecgonina.

2.4 DERIVADOS DE LA QUINOLINA De la corteza de quina (gnero Cinchona, fam. Rubiceas se han aislado aproximadamente 30 alcaloides, de los cuales los ms importantes son la quinina, quinidina, cinconina y cinconidina. Estos alcaloides se encuentran en la planta como sales del cido qunico (cido tetrahidroxi-hexahidro-benzoico) y otros cidos. Aislados se presentan como slidos blancos, cristalinos, de sabor amargo, poco solubles en agua, con altos puntos de fusin y con rotacin ptica. Fluorescen en solucin con cido sulfrico diluido. Quinolina

Quinina

2.5 DERIVADOS DE LA ISOQUINOLINA: Isoquinolina

Estos alcaloides han sido aislados de diferentes familias de plantas. Ejemplo: 2.5.1 Papaverina (bencil-isoquinolina):

Alcaloide del opio, ltex exudado por incisin de la cpsula de la adormidera (Papaver somniferum).

2.5.2 Bis-bencil-isoquinolinas: Se han aislado principalmente de las familias Menispermaceae (gnero Chondodendron y Loganiaceae (Strychnos). El curare es una denominacin genrica con la que se designa a una mezca de extractos venenosos preparados con especies de estas dos familias. De los constituyentes aislados del curare el ms conocido es la tubocurarina. Cloruro de tubocurarina:

Posee dos tomos de nitrgeno, cada uno con dos metilos.Accin paralizante de los msculos esquelticos, e inhibidor de la reaccin a los impulsos nerviosos. 2.6 Alcaloides fenantrnicos: 2.6.1 Incluyen los alcaloides del opio: la morfina (el primer alcaloide de origen vegetal aislado) y la codena. Morfina

2.6.2 Alcaloides de la ipecacuana: de Cephaelis ipecacuanha (Fam. Rubiceas) se han aislado cefalina, emetina y psicotrina . Emetina

La psicotrina difiere de la cefalina en que carece de un hidrgeno. La psicotrina se convierte en cefalina mediante reduccin. La cefalina, mediante metilacin, da origen a la emetina. 2.7 Derivados del indol: El indol proviene de la fusin del pirrol con el benceno, formando as el benzo-pirrol.

2.7.1 Psilocibina: se encuentra presente en un 0.3% en los hongos del gnero Psilocybe. Compuesto indlico que contiene fsforo.

2.7.2 Bufotenina: extrada del gnero Piptadenia (familia Leguminoseae), y en las secreciones del sapo comn (Bufo vulgaris).

TCNICAS PARA ALCALOIDES:

EXTRACCIN,

ANLISIS

CARACTERIZACIN

DE

DETECCIN DE ALCALOIDES: Debido a que gran parte de los alcaloides se encuentran en los tejidos vegetales como sales acuosolubles, pueden extraerse fcilmente con agua en medio cido. Sin embargo, si se hace solamente as, se corre el riesgo de que el extracto contenga tambin protenas, bases cuaternarias, amino-oxidasas, colina, purinas, taninos, algunos carbohidratos y glicsidos que podran dar un resultado falso positivo al adicionar reactivos precipitantes de alcaloides. Es por ello que dichos reactivos se usan solo como prueba presuntiva. Para evitar este problema debe purificarse previamente: se aade lcali al vegetal pulverizado, y luego se extrae con algn sovente orgnico. Este puede purificarse, extrayendo con agua en

medio cido, o puede ensayarse directamente. Para ello se empapa un trozo de papel filtro con el extracto, se seca, y se roca con algn reactivo general para alcaloides (Dragendorff, por ejemplo). REACTIVOS ALCALOIDALES: Pueden dividirse en reactivos de precipitacin y de coloracin. Debido a su distinto grado de sensibilidad y a que no son exclusivos para detectar alcaloides, muchos investigadores emplean hasta cinco reactivos distintos para ensayar cada muestra, y slo reportan como positivo en caso de que se obtenga precipitado o coloracin con todos. La mayora de estos reactivos precipitantes detectan alcaloides solo en solucin cida, e incluyen: 1. Reactivo de Mayers: yoduro de potasio y mercurio. 2. Reactivo de Dragendorff: yoduro de potasio y bismuto. Ambos forman productos de adicin insolubles a travs del nitrgeno. 3. Acido silicotngstico, cido fosfotngstico y cido fosfomolbdico: forman sales insolubles con compuestos bsicos. 4. Reactivos de Wagner y Bouchardat: ambos contienen yodo y yoduro de potasio. Forman complejos coloreados con los alcaloides, precipitndolos. En general todos estos reactivos podran reaccionar con un gran nmero de constituyentes vegetales. EXTRACCIN GENERAL DE ALCALOIDES: La extraccin de alcaloides totales puede seguir un procedimiento general basado en la naturaleza alcalina de la mayora de estos compuestos, y su habilidad para formar sales con cidos. Si el material es rico en grasas, stas deben removerse previamente mediante extraccin con ter de petrleo. PROBLEMAS EN CUANTO A LOS MTODOS GENERALES DE EXTRACCIN: 1. Los alcaloides pueden sufrir modificacin en su estructura al encontrarse en medio cido. 2. Muchas bases nitrogenadas que no tienen nitrgeno heterocclico (PROTOALCALOIDES) no reaccionan con los reactivos precipitantes. De igual manera, se corre el riesgo de no poder detectar alcaloides cuaternarios (aquellos en los que el tomo de nitrgeno tiene cuatro valencias llenas). 3. Debe seleccionarse adecuadamente los rganos de la planta a ensayar. Ejemplo: en las Compuestas los alcaloides se encuentran principalmente cerca de las terminaciones florales, en las Apocinceas generalmente se concentran en la raz y corteza del tallo. 4. Algunas plantas pierden gran porcentaje de sus alcaloides luego de haber sido almacenadas por largo tiempo, o stos se descomponen por la molienda.

5. Los solventes orgnicos no son completamente insolubles en agua. Ejemplo: el ter. Es por eso que se recomienda extraer varias veces con varias pequeas porciones de solvente, y no solo con una porcin total. 6. Al agitar las dos fases inmiscibles pueden formarse emulsiones. Estas pueden romperse mediante: - Agitacin suave con un agitador. - Adicin de gotas de alcohol, miligramos de cloruro de sodio, o sulfato de sodio anhidro, cido si la mezcla es alcalina, o lcali si la mezcla es cida. ESTIMACIN CUANTITATIVA DE ALCALOIDES: 1. VOLUMETRA: Generalmente se cuantifican los alcaloides mediante titulacin acidimtrica. Para ello se aade un exceso de cido clorhdrico o cido sulfrico titulado (generalmente 0.1 N), al residuo que contiene los alcaloides. Luego se determina mediante retrovaloracin con lcali la cantidad de cido que no reaccion con el alcaloide. Comnmente se usa rojo de metilo como indicador, y para efectuar los clculos se usa un coeficiente que depende del peso molecular del alcaloide principal. 2. GRAVIMETRA: El residuo de alcaloides totales obtenido, puede ser pesado. Sin embargo, este mtodo no se recomienda cuando el contenido de alcaloides es bajo. Por otro lado, a pesar de las sucesivas purificaciones que se hacen en el transcurso de la extraccin, se obtienen valores altos, debido a las impurezas arrastradas. Para evitar este problema pueden tambin formarse derivados de peso molecular elevado, como por ejemplo slico-tungstatos. 3. ESPECTROFOTOMETRA: Este mtodo es ms sensible, por lo que se prefiere cuando el contenido alcaloidal es escaso. Sin embargo, no puede aplicarse a todos los alcaloides, ya que algunos de ellos carecen de grupos cromforos. Ejemplo: los alcaloides de la pirrolidina y los del grupo de la piperidina, porque no absorben dentro del rango de 200 a 800 nm. Por el contrario, grupos aromticos cromforos presentes en algunos alcaloides hacen que stos absorban a longitudes de onda selectivas. Ejemplo: atropina, cocana, nicotina. Puesto que la mayora de alcaloides y sus sales son incoloros, para su cuantificacin se pueden preparar sales complejas coloreadas, que permiten leer en la regin visible. Mediante estos mtodos generales se cuantifican globalmente los alcaloides totales, que pueden tener entre s muy diferente actividad farmacolgica. Es por eso necesario a veces cuantificar el alcaloide ms activo. Para esto pueden aislarse los distintos alcaloides mediante cromatografa o electroforesis, y luego se cuantifica cada alcaloide mediante algn mtodo muy sensible, como la espectrofotometra.

Tambin puede hacerse cromatografa en capa fina y evaluarse la concentracin de las manchas por medio de DENSITMETRO. Para establecer el contenido de morfina en el opio se aprovecha su solubilidad en agua de cal, y la insolubilidad del resto de alcaloides en estas condiciones. Luego la morfina se precipita con amonaco. ERRORES COMUNES AL REALIZAR UNA VALORACIN TOTAL: Extraccin incompleta de los alcaloides de la muestra. Prdida de solvente y sustancias extradas. Imperfecta separacin de las fases inmiscibles. Descomposicin de los alcaloides. Uso de indicador no adecuado. Inadecuada manipulacin a travs del proceso. Deficiente limpieza de la cristalera.

USO DE INFRARROJO, RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR Y ESPECTROMETRA DE MASAS PARA LA IDENTIFICACIN DE ALCALOIDES INFRARROJO: Los alcaloides carecen de absorciones que permitan identificarlos, pero proporciona informacin sobre la presencia o ausencia de ciertos grupos sustituyentes. RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR: La presencia de protones 1H en ciertos grupos funcionales como aminas, grupos hidroxilo, metoxilo, dobles enlaces y anillos aromticos brinda valiosa informacin. Los desplazamientos de los diferentes carbonos de los alcaloides tambin son tiles. ESPECTROMETRA DE MASAS: La interpretacin de los espectros de masa de los alcaloides puede resultar dificultosa si no se conoce el grupo funcional presente, ya que los procesos de fragmentacin, as como el tipo de fragmentos moleculares pueden ser muy variados. ACTIVIDAD PTICA: La mayora de los alcaloides tienen uno o varios centros quirales, o la molcula es asimtrica, por lo que tienen actividad ptica, y por lo general son levgiros.