INTRODUCCIN AL SISTEMA INMUNOLGICO.

VISIN HISTRICA La Inmunologa nace al observar la adquisicin de resistencia ante la enfermedad o Referencia de epidemias: o Gilgamesh y Antiguo Egipto o Epidemia= castigo divino o Observacin de resistentes Tucidides Primeras explicaciones: Rhazes: compara la viruela con fermentacin del vino Avicena y Fracastoro: sangre de la menstruacin o TEORAS DE LA EXPULSIN Generacin provocada de la inmunidad Los chinos introducen la inoculacin deliberada Lady Montagu la introduce en Europa Rpida popularidad. Mortandad cae del 15-20% a 23% Variolizacin (variola) Juan Perdomo Problemas: sfilis, lepra Jenner observa ordeadoras. Contrajeron vacuna Vacunacin. Nombre dado por Pasteur Finales del siglo XIX avances en Microbiologa: Pasteur y Koch Pasteur sienta las bases de la Inmunologa Cultivos viejos de bacilo de clera aviar (Pasteurella sptica) Bacilo del carbunco cultivado a 42C Rabia: mdula espinal seca Agotamiento de nutrientes o TEORA DE LA DISMINUCIN T. Smith con bacilos muertos Roux y Yersin en 1888 demuestran toxina diftrica. Algo en sangre la neutraliza Behring y Kitasato con sobrenadante de C. tetani y C. diphteriae DEMUESTRAN INCORRECCIN TEORA DE LA DISMINUCIN Administracin de sueros anti-toxina diftrica Antitoxina----anticuerpo; toxina----antgeno Anticuerpos frente s sustancias de la leche----respuesta inmunolgica es un fenmeno ms amplio Gruber y Durham (1896): aglutinacin bacteriana especfica Kraus (1897): precipitacin Ag:Ag Ambos avances permiten el estudio cualitativo y cuantitativo de Ag La aglutinacin identifica bacterias (serotipado) Revela contactos previos con una bacteria

Widal (1897): aglutinacin para diagnosticar tifus Bordet (1898): hemlisis Landsteiner (1900): grupos sanguneos Cmo se forman los anticuerpos? Cmo actan? Cul es la razn de su especificidad? o Ehrlich (1897) Cuantifica Dominios funcionales en Ac y Ag----especificidad (llave/cerradura) Valencia del Ac----leyes de la qumica Unin irreversible----controversia o Arrhenius (1903) Inmunoqumica Reaccin no irreversible o Teora de la formacin de anticuerpos Teora selectiva o de la cadena lateral Abandono en aos 30----inmungenos artificiales o Pfeiffer (1894): lisis bacilo del clera por suero no calentado---56C 30 perdida de actividad ltica----suero fresco reactiva la lisis. Alexina= que defiende----complemento o Debate Ehrlich-Bordet sobre modo de accin del complemento Ehrlich----Varios complementos Bordet----un solo complemento Todos estos hallazgos dan lugar a: TEORA HUMORAL DE LA INMUNIDAD Metchnikokff (1884): Estrella de mar----espina de rosal En Daphnia----clulas ingieren levaduras TEORA CELULAR DE LA INMUNIDAD Ataques a esta teora (teora humoral,griegos/teora celular,Virchow) Dificultades experimentales o Wright y Douglas (1903)----opsoninas (que se vuelve comestible) conjugan ambas teoras o Premio Nobel a Metchnikoff (1908) Avances en teora celular mediados siglo XX Medawar----trasplante de tejidos Medawar----tolerancia inmunolgica Burnet----teora de la seleccin clonal Teoras sobre formacin de anticuerpos o Breinl y Horowitz (1930) o Pauling Teora instructiva o Esta teora no explica la produccin de anticuerpos en ausencia de antgeno, ni por qu una segunda dosis resulta en una respuesta mayor y ms rpida o Burnett (1941)----Modificacin enzimas Modificacin permanente----permite respuesta sin antgeno y mayor y ms rpida en segunda dosis

o o o o

Avery en 1944 ADN Burnet y Fenner (1949) cambian a modificacin del genoma Jerne (1955): teora de la seleccin natural Jerne (1955) teora de la red y produccin continua de mutaciones o Burnet (1957) TEORA DE LA SELECCIN CLONAL

INMUNOQUMICA o Obermayer y Pick (1906)----antgenos proteicos modificados cambio especificidad serolgica o Landsteiner (1917)----haptenos o Kabat y Tiselius (1938)----anticuerpos = -globulinas o Porter y Edelman (1958,1959)----estructura de las inmunoglobulinas Hemos visto hasta ahora: adquisicin de resistencia; componentes de S.I., teoras y caracterizacin qumica de los anticuerpos INMUNOBIOLOGA Alergia e hipersensibilidad Autoinmunidad Trasplantes Tumores o Koch (1890) hipersensibilidad tarda fenmeno de Koch tuberculina fracaso en vacunacin o Richet y Portier (1902)-----anafilaxia (=contraproteccin) o Smith y Otto (1902)----reaccin contra antgenos suaves o Von Pirket (1905)----alergia (=accin alterada) o Praustnitz y Kstner (1921)----reagina (=reactiva) (Kstner alrgico a cierto pez----suero a Praustnitz ----reaccin local frente a pez o Landsteiner y Wiener (1940)----Rh o Landsteiner y Chase (1942)----transfieren clulas linfticas de alrgicos a sanos----transfieren alergia o Snell (aos 30 a 40) desarrolla ratones congnicos----lleva a descubrimiento de antgeno H de histocompatibilidad o Witebsky (1956)---estudios sobre autoinmunidad o Milstein y Khler (1975)----hibridomas. Anticuerpos monoclonales o Tonegawa (1987)----biologa molecular genes Ig o Doherty y Zinkernagel (Nobel 1996)----MHC I y fenmeno de restriccin linfocitos T por MHC

Introduccin al Sistema Inmunolgico

La Inmunologa como Ciencia. Desarrollo histrico La Inmunologa, que hoy es una ciencia independiente con un cuerpo de doctrina propio, naci como consecuencia del avance en el conocimiento de la naturaleza de la enfermedad infecciosa, y ms concretamente, del conocimiento de la adquisicin de resistencia frente a la enfermedad. Los relatos ms antiguos conocidos, donde se describe la existencia de epidemias, se remontan a 2000 aos a.C. y estn recogidos en el canto pico babilnico del Gilgamesh y tambin en los anales de las ms antiguas dinastas egipcias. Durante milenios estas epidemias fueron consideradas castigos divinos y por tanto nada poda hacerse para remediarlas. Sin embargo, hay descripciones de observadores curiosos, que probablemente eran de dominio pblico, de que aquellos que haban sobrevivido a alguna de aquellas epidemias no sufran dao alguno, o este era muy benigno, en epidemias posteriores. Un ejemplo de esto es la descripcin por el historiador Tucidides en el ao 430 a.C., de una epidemia de peste en Atenas, l escribi: Fue en aquellos que se haban recuperado de la enfermedad, que esta y la mortandad encontraron ms compasin. Conociendo esto de la experiencia ahora no tenan temor por s mismos, porque ningn hombre fue afectado dos veces, al menos nunca de modo fatal Fueron la peste y la viruela las fuentes principales de inspiracin cientfica encaminada a explicar la naturaleza de la adquisicin de resistencia frente a la enfermedad. La primera explicacin que se conoce de la adquisicin de inmunidad es la del mdico rabe del siglo X, Rhazes, el cual, al atribuir la enfermedad a una infeccin de la sangre, compara el desarrollo de la viruela con la fermentacin del vino. Segn l, la sangre de los nios contiene ms humedad, por lo que al igual que el mosto, no puede considerarse madura. Se requiere que fermente, lo que se traduce en una prdida de humedad a medida que el individuo envejece, teniendo ello como consecuencia la adquisicin de resistencia frente a la infeccin. Esta explicacin coincide con el hecho de que la enfermedad es comn en nios, poco frecuente en adultos y rara en ancianos, pero tambin explicaba la aparicin de pstulas, a travs de las cuales el individuo pierde el exceso de humedad y los fermentos. De este modo, al madurar la sangre el individuo adquiere resistencia a la enfermedad. En el siglo XI Avicena propuso otra teora, recogida ms tarde en el siglo XVI por Fracastoro, segn la cual el germen de la viruela tendra afinidad por los restos de sangre provenientes de la menstruacin, los cuales estaran contaminando a todos los individuos al nacer. Esto explica la mayor incidencia de la enfermedad en los primeros aos de vida. Sin embargo, esa contaminacin ira desapareciendo con el tiempo por lo que en adultos o ancianos la enfermedad es rara. El germen de la viruela producira la fermentacin de esos restos, los cuales seran expulsados a travs de las pstulas obtenindose el estado inmune. stas son las denominadas Teoras de la Expulsin de la Inmunidad Adquirida, las cuales fueron consideradas durante siglos como explicacin de la resistencia adquirida por algunos individuos frente a un buen nmero de enfermedades.

Simultneamente con la elaboracin de estas explicaciones, en algunos lugares del planeta fueron desarrollndose prcticas conducentes a la generacin intencionada de inmunidad. Probablemente fueron los chinos quienes introdujeron, como mtodo de proporcionar inmunidad, la prctica de la inoculacin deliberada de personas sanas, con costras secas obtenidas a partir de personas recuperadas de la viruela. Se sabe que introducan polvo de costras en la nariz de la persona sana soplndole a travs de un tubo de plata. A los hombres les era introducido a travs del orificio izquierdo y a las mujeres a travs del derecho. Lo cierto es que esta prctica fue extendindose, siendo encontrado su uso en pueblos de Asia, frica y Europa. Pero la introduccin documentada de esta prctica en el continente europeo tuvo lugar en 1721 y es atribuida a la esposa del embajador britnico en Turqua, Lady Montagu, la cual en 1717 haba descrito el proceso por carta a una amiga suya. Deca as La viruela, tan mortal y comn entre nosotros, es aqu inofensiva del todo...La gente se enva recados para saber si alguien de otra familia desea recibir la viruela: para tal efecto celebran fiestas y una vez reunidos (15 16 persona), una anciana saca una cscara de nuez en la cual guarda la mejor viruela que ha podido conseguir y te pregunta cul vena deseas que te abra. En cuanto se la muestras rasga de inmediato la vena sealada, para lo cual emplea una gruesa aguja (el dolor es como el de un araazo cualquiera), y deposita en la herida la cantidad de viruela que cabe en la punta de su aguja...Hasta ahora no se sabe de nadie que haya muerto por recibir este tratamiento. Puedes creer que estoy perfectamente satisfecha en cuanto a la seguridad de este experimento pues estoy dispuesta a probarlo en mi hijito. Me considero lo bastante patriota para afrontar cualquier pena con tal de poner de moda en Inglaterra este til invento. Pronto comenz a popularizarse como consecuencia de los magnficos resultados obtenidos, la mortandad, que alcanzaba del 15 al 20% de los afectados se vea disminuida al 2 al 3%, eliminndose tambin el efecto de desfiguracin facial. La tcnica fue popularmente conocida como variolizacin debido a que en aquel entonces la viruela era conocida como variola. La introduccin de la prctica de la variolizacin en Venezuela fue llevada a cabo por un mdico, D. Juan Perdomo, natural de Garachico. Hay que sealar sin embargo, que en ocasiones se presentaron problemas como los de la transmisin de enfermedades como la sfilis o la lepra. En el siglo XVIII, Jenner, un mdico rural ingls, haba observado la adquisicin de resistencia a la viruela por las ordeadoras de vacas que previamente haban desarrollado pstulas en las manos, similares a las existentes en los pezones del animal. Cuando desarrollaban esas pstulas, de estas personas se deca que haban contrado la vacuna. En 1796 Jenner transfiri pus de una pstula de vacuna al brazo de un nio y seis semanas ms tarde lo hizo con pus tomado de una pstula de viruela, el resultado fue que el muchacho no enferm. En 1798 public un libro con sus observaciones y en pocos aos ese proceso, denominado posteriormente por Pasteur vacunacin en honor a Jenner, comenz a ser aceptado. Hacia finales del siglo XIX, y gracias a los trabajos de Pasteur y Koch, ya haban sido aislados los agentes etiolgicos de algunas enfermedades, quedando plenamente establecido el papel de los grmenes como agentes causales de las mismas. Fue en esta poca cuando Pasteur llev a cabo

tambin los descubrimientos que sentaron las bases del desarrollo como ciencia de la Inmunologa. Pasteur descubri que cultivos viejos del bacilo del clera aviar (Pasteurella sptica) no solo no provocaban la enfermedad en los animales, sino que adems los protegan del efecto mortal de inoculaciones posteriores con cultivos frescos. Pasteur observ tambin que la inoculacin de ovejas con el bacilo del carbunco (Bacillus anthracis) cultivado a 42C en lugar de a 37C, volva a los animales inmunes frente a inoculaciones posteriores con cultivos crecidos a 37C. Sin embargo, la inmunizacin ms trascendental realizada por Pasteur fue la que llev a cabo frente a la rabia. l haba descubierto que la inyeccin de extractos de mdula espinal de perros o conejos infectados de rabia, en animales sanos, le permita perpetuar la enfermedad; sin embargo, la inoculacin de extractos desecados de mdula no eran capaces de hacerlo. Apoyado en sus trabajos sobre el clera aviar y el carbunco, procedi en 1885 a inocular doce dosis gradualmente mayores de extracto desecado de mdula espinal a un nio mordido gravemente por un perro rabioso; el nio sobrevivi a las mordeduras e incluso a inyecciones de mdula espinal fresca. Este tratamiento fue aplicado al ao siguiente a 350 personas sin que se produjera un solo fallecimiento. Todos los trabajos de inmunizacin, de los cuales los de Pasteur fueron el punto culminante, llevaron a formular una explicacin de la inmunidad que se ha denominado Teora de la Disminucin de la Inmunidad Adquirida, la cual fue formulada por el propio Pasteur basndose tanto en sus conocimientos sobre el crecimiento bacteriano in vitro, como en sus trabajos con grmenes atenuados para provocar la inmunidad. l saba que los microorganismos terminan su crecimiento in vitro cuando agotan algn nutriente, por ello pens que la inmunizacin deba de consistir en el agotamiento por parte de la bacteria de alguna sustancia esencial para el crecimiento en el organismo afectado, lo cual impedira el establecimiento de una nueva infeccin por ese organismo. Sin embargo, la demostracin por Theobald Smith de que organismos muertos tambin sirven como vacuna y por Behring y Kitasato de que el sobrenadante de cultivos de los agentes causales del ttanos y la difteria tambin confieren inmunidad, rpidamente demostraron la incorreccin de la Teora de la Disminucin. El trabajo de Behring y Kitasato en realidad fue un paso adelante con respecto al realizado por Roux y Yersin, quienes en 1888 haban demostrado que una toxina soluble poda ser aislada de los sobrenadantes de cultivos del organismo de la difteria, la cual por s sola produca todos los sntomas de la enfermedad en animales de experimentacin. Este trabajo fue importante, no solamente porque contribuy a demostrar la falsedad de la Teora de la Disminucin, sin tambin porque puso de manifiesto la existencia de algo en la sangre de los animales inmunizados que neutralizaba la toxina evitando que se produjera la enfermedad. Sueros antitoxina de animales inmunizados fueron ensayados en nios con difteria, pudindose ver la rpida aparicin de curaciones, especialmente si se suministraba el suero en las fases tempranas de la enfermedad. La sustancia de la sangre responsable de ese efecto (por supuesto que no identificada en ese entonces) fue denominada antitoxina, aunque pronto comenz a utilizarse el nombre ms general de anticuerpo y al material responsable de la formacin de esos anticuerpos se le denomin antgeno.

Con el descubrimiento de que sustancias suaves como la leche y protenas no txicas podan tambin desencadenar la formacin de anticuerpos, se puso de manifiesto que la respuesta inmunolgica era un fenmeno de carcter mucho ms amplio que la mera defensa del organismo frente a toxinas y bacterias. En 1896, Gruber y Durham descubrieron la aglutinacin bacteriana especfica por sueros de individuos inmunes y en 1897 Kraus describe la reaccin de precipitacin antgeno-anticuerpo. Estos descubrimientos permitieron estudiar a los anticuerpos tanto cualitativa como cuantitativamente en el tubo de ensayo. Ambos descubrimientos tuvieron adems una enorme importancia prctica, la aglutinacin especfica permiti identificar y diferenciar bacterias utilizando el anticuerpo adecuado, as como conocer la existencia en un individuo de contactos previos con una bacteria, ensayando la capacidad aglutinante del suero de ese individuo sobre esa bacteria. En 1897 Widal describi la prueba de aglutinacin como recurso para diagnosticar la fiebre tifoidea, y poco despus Bordet aplic la aglutinacin a los eritrocitos, pudiendo demostrar la existencia de hemlisis mediada por anticuerpos. El uso de los hemates como antgeno permiti a Landsteiner en 1900 establecer la existencia de los grupos sanguneos, avance esencial que posibilit la realizacin de transfusiones sanguneas. Pronto comenzaron a surgir preguntas, cmo pueden formarse los anticuerpos?, cmo actan?, cul es la razn de su especificidad?. A estas preguntas de evidente trascendencia dio respuesta por primera vez Ehrlich nada menos que en 1897, en un trabajo sobre la cuantificacin de la toxina y antitoxina diftrica. Este fue un trabajo clave en el desarrollo de la Inmunologa por varias razones. En primer lugar, proporcion las bases de la Inmunoqumica al establecer como llevar a cabo los estudios cuantitativos de la reaccin antgeno-anticuerpo. En segundo lugar, estableci que la especificidad y las interacciones de los anticuerpos con los antgenos obedecen a las leyes de la Qumica. Ehrlich propuso que los anticuerpos son molculas discretas y reconoci la existencia de dominios funcionales, tanto en el antgeno como en el anticuerpo, que permitiran la interaccin especfica entre ambos segn el modelo de la llave y la cerradura. Tambin estableci la existencia de valencia en la molcula de anticuerpo y propuso la existencia de una unin irreversible entre ambas molculas, propuesta que no fue aceptada por otros investigadores quienes, como Landsteiner, propugnaban la existencia de interacciones fsicas ms que qumicas. Pero fue Arrhenius, quien en 1903 acu el trmino Inmunoqumica y en 1907 public una monografa con el mismo ttulo, el que demostr de forma inequvoca la naturaleza qumica de la reaccin y el carcter reversible de la unin entre ambas molculas. En tercer lugar, el trabajo de Ehrlich llev a la formulacin de una teora sobre la formacin de anticuerpos, denominada Teora Selectiva o de la Cadena Lateral. Segn esta teora (Figura 1), las clulas se encontraran recubiertas de receptores semejantes a los anticuerpos, de modo que cuando un antgeno interacta con el receptor adecuado, la clula resulta estimulada comenzando a sintetizar anticuerpos y esparcirlos por el torrente circulatorio. Esta teora se mantuvo como vlida hasta los aos 30 del siglo XX, cuando se descubrieron un nmero creciente de compuestos inmungenos de tipo artificial, lo cual sugiri una diversidad de antgenos casi ilimitada, por lo que

Figura1

pereca un sin sentido que preexistieran correspondientes. Pero no olvidemos esta teora!.

todos

los

anticuerpos

Otro hallazgo de gran importancia en esos aos fue el realizado en 1894 por Pfeiffer. l encontr que el bacilo del clera era lisado por suero anticlera de cobaya, sin embargo, el calentamiento de este suero a 56C durante 30 minutos eliminaba esta actividad ltica pero no la de los anticuerpos contra el bacilo, ahora bien, la adicin de suero normal, sin actividad ltica y no calentado, de cobaya no inmunizada restauraba dicha actividad. l concluy que anticuerpos contra el bacilo ms un componente termolbil complementario eran necesarios para la lsis in vitro de V. cholerae. Ese factor fue denominado inicialmente alexina (del griego, alexein, que defiende), nombre que fue cambiado posteriormente por el de complemento con el que actualmente es conocido. En cuanto a la interpretacin del modo de accin del complemento, sta tambin fue motivo de debate, esta vez entre Ehrlich y Bordet. El primero mantena que del mismo modo que diferentes antgenos pueden unirse especficamente al lugar apropiado de su molcula de anticuerpo, diferentes

complementos se uniran a su propio anticuerpo. Bordet sin embargo propugnaba que la unin del antgeno al anticuerpo deba de producir un cambio conformacional que permitira la unin inespecfica de un solo complemento. Esta vez fue la idea de Bordet de un solo complemento la que result correcta. Todos estos descubrimientos, junto con otros que veremos, permitieron la formulacin de la denominada Teora Humoral de la Inmunidad. En este momento se hace necesario detenernos y retroceder en el tiempo, porque conscientemente hemos ido dejando de lado otro hallazgo de gran importancia en el desarrollo como Ciencia, con cuerpo de doctrina propio, de la Inmunologa. Se trata del descubrimiento en 1884 de la fagocitosis por Metchnikoff. Un da, mientras estudiaba las clulas mviles presentes en las larvas transparentes de estrellas de mar, se le ocurri pensar que esas clulas tal vez podan tener alguna funcin digestiva, similar a la que parecan desempear las clulas fagocticas que se concentran en los puntos de la piel humana donde hay una infeccin. Para comprobarlo clav algunas espinas de rosal en las larvas y al da siguiente observ que se encontraban rodeadas por esas clulas ameboides. Poco despus observ que en la llamada pulga de agua (Daphnia), clulas de ese tipo eran capaces de ingerir y destruir levaduras patgenas para la pulga. A la vista de estos resultados, sugiri que las clulas fagocticas llevan a cabo una funcin protectora y que deban desempear un papel importante en el desarrollo de la inmunidad, formulando la que se denomin Teora Celular de la Inmunidad. Si observamos el desarrollo de los acontecimientos, esta teora propuesta por Metchnikoff nace antes que la Teora Humoral, sin embargo, no por ello qued exenta de discusin, discusin que se volvi ms virulenta cuando se formul la teora contraria. La razn de este debate inicial estuvo en que se vio envuelta en la revolucin conceptual que estaba teniendo lugar entonces, sobre la naturaleza de los procesos fisiolgicos normales y anormales. En efecto, durante 2000 aos haba prevalecido la visin griega de un equilibrio o desequilibrio en los humores del cuerpo como causa de la enfermedad. Sin embargo, en el siglo XIX Virchow introdujo el concepto de patologa de carcter celular (propuso que la enfermedad estaba basada en una mal funcin celular) que contradeca la teora humoral. Por ello, cuando se encontraron los factores humorales de la reapuesta Inmunolgica, los ataques contra la teora celular se volvieron ms virulentos. Si a esto aadimos que los trabajos que requeran de la manipulacin de clulas resultaban mucho ms complejos de realizacin que aquellos que manipulaban lquidos humorales, es comprensible el menor desarrollo que durante muchos aos tuvo la base celular de la inmunidad. Un hallazgo que permiti establecer por primera vez un vnculo entre ambas teoras fue llevado a cabo en 1903 por Wright y Douglas. Estos autores encontraron que en el suero existan sustancias que promovan la fagocitosis de bacterias, a las cuales denominaron opsoninas (del griego opsonein, que se vuelve comestible). Aunque Metchnikoff recibi el premio Nobel en 1908, lo cual supuso un importante espaldarazo para su teora, el inters por la inmunidad celular no se ve renovado hasta bien avanzado el siglo XX, cuando Medawar estudia el trasplante de tejidos; Billingham, Brent y Medawar describen la tolerancia inmunolgica y Burnet establece la teora de la seleccin clonal para la formacin de anticuerpos.

Ya se coment que quien propuso por primera vez una teora de la formacin de anticuerpos fue Ehrlich en 1897. Esta teora permaneci como teora central hasta los aos 30 y 40 del siglo XX, cuando la aparicin de un nmero creciente de inmungenos gener la duda de que pudieran preexistir todos los anticuerpos correspondientes a antgenos, incluso a recin creados. Esta duda llev al enunciado de una teora alternativa, primero por Breinl y Haurowitz en 1930 y un poco ms tarde por Pauling, a la que se denomin Teora Instructiva o Teora del Molde de la formacin de anticuerpos (Figura 2). Esta teora propona una funcin de molde para el antgeno, en torno al cual la molcula de protena del anticuerpo se ira plegando adquiriendo una configuracin complementaria especfica. Sin embargo, esta teora de carcter qumico no poda explicar a satisfaccin del Bilogo, como es posible que la produccin de anticuerpos poda continuar cuando el antgeno ya haba sido eliminado, ni por qu una segunda exposicin al antgeno resultaba en una produccin ms rpida y aumentada de anticuerpos.

Figura 2. Teora instructiva de la formacin de anticuerpos Una primera teora alternativa a esta Instructiva fue sugerida por Burnet en 1941. l sugiri que la funcin del antgeno poda ser la de estimular una modificacin adaptativa de las enzimas necesarias para la sntesis de anticuerpos, de tal modo que resultara una molcula con la especificidad requerida. Con este modelo resultaba explicable la produccin de anticuerpos en ausencia de antgenos, puesto que la clula productora presentara la enzima modificada permanentemente y adems, al aumentar el nmero de clulas productoras de este anticuerpo, una segunda administracin del antgeno dara lugar a una respuesta mayor y ms rpida. Ahora bien, al descubrirse en 1944 por Avery, McLeod y McCarthy que eran los cidos nucleicos los portadores de la herencia, esa explicacin fue abandonada y en 1949 Burnet y Fenner introdujeron una variacin del modelo terico, proponiendo que la modificacin producida por el antgeno tendra lugar sobre el genoma de la clula. En 1955 Jerne formul la denominada Teora de la Seleccin Natural, la cual retoma perfeccionndola la teora de Ehrlich. Segn Jerne, el hospedador estara sintetizando pequeas cantidades de mltiples tipos de anticuerpo, los cuales estaran en la sangre constituyendo los denominados anticuerpos naturales. La funcin de estos anticuerpos sera interactuar con su antgeno y transportarlo a donde proceda en el cuerpo para que acte como seal en la sntesis de ms anticuerpos. En 1957 Burnet tom esta teora y propuso que cada clulas debe producir un solo tipo de anticuerpo, pudindose generar un clon de clulas adecuadas para la sntesis de ese anticuerpo, como consecuencia de la llegada del antgeno correspondiente.

Esta diversidad de anticuerpos solo podra generarse de ocurrir mutaciones continuamente en los genes que codifican para los anticuerpos. Esto es algo que tambin fue propuesto por Jerne, pero tuvo que esperar a la llegada de la moderna Biologa Molecular para ser demostrado. Jerne tambin propuso una teora llamada de la Red Inmunolgica, segn la cual el sistema inmunolgico posee en s mismo todos los antgenos y todos los anticuerpos como consecuencia del establecimiento de una red de anticuerpos contra anticuerpos. ( vase artculo en Saber). Independientemente de aquellos dedicados a la elaboracin de teoras capaces de explicar el funcionamiento del sistema inmunolgico, dado que como demostr Ehrlich los anticuerpos se comportan en concordancia con las leyes de la Qumica, fueron muchos los investigadores que a lo largo del siglo XX realizaron trabajos en esa direccin, desarrollando una rama de la Inmunologa denominada Inmunoqumica. Uno de los primeros hallazgos realizados en este campo, con posterioridad a los de Ehrlich y Arrhenius, fue el de Obermayer y Pick en 1906. Ellos descubrieron que la nitrificacin o iodacin de las protenas produce cambios en cuanto a la especificidad serolgica, de modo que sueros que antes reaccionaban con ellas dejan de hacerlo. En 1917 Landsteiner se percat de que esos compuestos de bajo peso molecular unidos a protenas, podan reaccionar con anticuerpos desarrollados contra la protena qumicamente modificada, aunque por s solos no eran capaces de inducir la sntesis de anticuerpos. Estas molculas pequeas, incapaces de inducir por si solas la produccin de anticuerpos, pero frente a las cuales si se producen cuando estn unidas a una molcula de mayor tamao recibieron el nombre de haptenos. En 1938 Kabat y Tiselius encontraron que los anticuerpos formaban parte de la fraccin -globulina del suero, por lo que a partir de entonces comenzaron a recibir tambin la denominacin de inmunoglobulinas. Ellos observaron (Figura 3) que de las tres clases de globulinas que podan ser separadas electroforticamente en el suero de vertebrados, las fracciones , y , las de tipo se encontraban a concentraciones ms altas en animales inmunizados con ovoalbmina. Adems, los anticuerpos dirigidos contra varios antgenos, una vez aislados, eran indistinguibles de las globulinas.

Figura 3. Identificacin de los anticuerpos como globulinas

En 1958 y 1959 Porter y Edelman, actuando por separado, llevaron a cabo trabajos que permitieron esclarecer la estructura de una estas inmunoglobulinas, la denominada IgG (Figura 4). Porter, empleando tratamientos con papana o pepsina rompi en diferentes partes la molcula de anticuerpo. Cuando rompa con papana obtena dos fracciones que resultaron idnticas en cantidad, portadoras de la actividad anticuerpo y de carcter monovalente a las que se denomin fracciones Fab y otra que cristalizaba y careca de actividad anticuerpo, aunque poda unirse a clulas linfoides, a la que se denomin fraccin Fc. El tratamiento con pepsina generaba un solo fragmento con actividad anticuerpo y de carcter divalente, que recibi el nombre de F(ab)2. Por su parte Edelman rompi a las inmunoglobulinas usando reactivos capaces de romper puentes disulfuro, en esas condiciones se generaban dos tipos de pptidos, uno de menor peso molecular que recibi la denominacin de cadena L y otro mayor que recibi la denominacin de cadena H. Cuando los resultados de Porter y Edelman fueron considerados conjuntamente, pudo verse que las molculas de IgG estn constituidas por cuatro cadenas polipeptdicas iguales dos a dos y unidas entre s por puentes disulfuro. Estos estudios les valieron el Premio Nobel.

Papaina Pepsina

Pepsina Papaina

1 fragmento F(ab)2

fragmentos de bajo peso molecular

Rotura de puentes disulfuro

2 fragmentos Fab

1 fragmento Fc

Cadena ligera

Figura 4
Cadena pesada

De lo visto hasta ahora podemos concluir que la Inmunologa naci cuando se ide un procedimiento para conferir resistencia frente a la enfermedad infecciosa; podemos ver tambin como el desarrollo inicial tiene que ver con el descubrimiento de algunos componentes del Sistema Inmunolgico y su modo de accin; podemos ver como fueron formulndose teoras, fundamentalmente sobre la formacin de anticuerpos y vemos por ltimo como estas molculas fueron caracterizadas qumicamente. Sin embargo, hay otros aspectos que no hemos tratado, como son los fenmenos de alergia e hipersensibilidad; las enfermedades autoinmunes; la inmunologa de los tumores; etc., es decir, una variedad de aspectos entre los que se encuentran de modo destacado enfermedades de la cules el propio Sistema Inmunolgico es el agente causal, lo cual es totalmente contradictorio con el papel protector que hasta ahora hemos visto. Evidentemente la comprensin de estos fenmenos ha desempeado un papel fundamental en el logro del actual nivel de desarrollo de la Inmunologa como ciencia biolgica, razn por la cual vamos a hablar ahora de un aspecto al que se ha denominado Inmunobiologa, tal vez con no mucha fortuna, puesto que no hay aspecto ms profundamente biolgico que los mecanismos moleculares subyacentes en el desarrollo de una respuesta Inmunolgica normal. El nacimiento de esta rama de la Inmunologa puede situarse en el descubrimiento por Koch en 1890 del fenmeno de hipersensibilidad retardada. Koch pensaba que bacilos de la tuberculosis muertos, o productos del sobrenadante de los cultivos, a los que denomin tuberculina, podran inyectarse en enfermos tuberculosos para curarlos, aunque lo intent nunca lo logr. Sin embargo, en el curso de sus investigaciones observ que los conejillos de Indias eran muy sensibles a la tuberculosis, de modo que al inocularlos con el bacilo se produca una reaccin local pasajera, muriendo entre cuatro y ocho semanas ms tarde. Sin embargo, si a los conejillos tuberculosos se les inyectaba una segunda dosis subcutnea de bacilos, el sitio de la segunda inyeccin se enrojeca y posteriormente se produca una necrosis que ocasionaba una lcera. Este efecto fue conocido como fenmeno de Koch y l nunca pudo interpretarlo correctamente. El siguiente descubrimiento en importancia en este campo lo realizaron Richet y Portier en 1902, durante sus estudios sobre anmonas y fragatas portuguesas (Physalia), ambos animales con toxinas muy potentes. Mientras trataban de inmunizar a un perro contra la toxina de las anmonas, descubrieron que la inyeccin de pequeas dosis subletales en un perro previamente inoculado, le provocaba convulsiones, colapso y finalmente la muerte. Ellos denominaron al fenmeno anafilaxia (del griego, contra proteccin) para indicar que en lugar de aumentar la proteccin, esta segunda inyeccin aumentaba la sensibilidad a la toxina. Este fue un descubrimiento que tuvo un impacto enorme en la prctica mdica de aquel entonces, ilusionada con el formidable futuro que el uso de la inmunizacin les prometa. Casi simultneamente, Smith en USA y Otto en Alemania observaron respuestas similares en cobaya, frente a sustancias ms suaves como el suero de caballo. Otro autor, von Pirquet, propuso el trmino alergia (del griego, accin alterada) para referirse a cualquier respuesta

inmunolgica anmala contra una sustancia frente a la cual ya se ha estado expuesto. En 1921 Prausnitz y Kstner descubrieron la existencia de una sustancia de tipo anticuerpo presente en el suero, asociada con este tipo de respuesta anmala, a la que denominaron reagina (del griego, reactiva). Ellos encontraron que cuando Prausnitz era inoculado subcutneamente con suero de Kstner, quien era alrgico a cierto tipo de pez, una inyeccin posterior de extracto de pez en la regin donde haba recibido la inyeccin le provocaba una rpida reaccin local que antes no ocurra. En 1940 Landsteiner y Wiener descubrieron que los humanos pueden compartir un factor sanguneo con el mono Rhesus al que denominaron Rh. En 1942 Landsteiner y Chase descubrieron que ciertos tipos de alergia podan transferirse de individuos alrgicos a individuos que no lo eran mediante la transferencia de clulas obtenidas de los ganglios linfticos. Este hallazgo dio un nuevo impulso a la teora celular enunciada por Metchnikoff. En los aos 30 y 40 del siglo XX Snell desarroll en ratones las denominadas cepas congnicas, es decir, cepas de ratones que solo se diferencian en un locus. Gracias a estos animales se descubri la existencia de genes que codifican para un determinado antgeno celular al que se denomin entonces H2, por histocompatibilidad, de los cuales depende el xito o fracaso de los injertos entre ratones, por lo dems genticamente idnticos. En 1975 Milstein y Khler lograron la obtencin de un tipo de clula, denominada hibridoma, mediante la fusin de una clula productora de anticuerpos con otra denominada mieloma, la cual consiste en una clula plasmtica neoplsica. La fusin de ambas clulas se traduca en un hbrido inmortal capaz de producir grandes cantidades de un anticuerpo concreto al que se denomin anticuerpo monoclonal. Los ltimos trabajos de gran relevancia realizados en el campo de la Inmunologa fueron, en primer lugar, los que permitieron otorgar el Premio Nobel de 1987 a Tonegawa, los cuales se basaron en el estudio de la Biologa Molecular de los genes de las Inmunoglobulinas, permitiendo entender como se genera el enorme repertorio de anticuerpos existentes en un individuo y finalmente, los que dieron el Premio Nobel a Doherty y Zinkernagel en 1996, basados en el descubrimiento de como el Sistema Inmunolgico es capaz de diferenciar las clulas sanas de las infectadas por virus o bacterias intracelulares.