Tejidos Básicos y Biología Celular Integrada

PARTE I I TEJIDOS BSICOS Y BIOLOGA CELULAR INTEGRADA
1. EPITELIO
Cuadro 1-A | Principales caractersticas de los epitelios Los epitelios provienen del ectodermo, del mesodermo y del endodermo. Los epitelios revisten y recubren todas las supercies corporales, excepto el cartlago articular, el esmalte dental y la supercie anterior del iris. Las funciones bsicas de los epitelios son la proteccin (piel), la absorcin (intestinos delgado y grueso), el transporte de material en la supercie (realizado por los cilios), la secrecin (glndulas), la excrecin (tbulos renales), el intercambio gaseoso (alvolos pulmonares) y el deslizamiento entre las supercies (mesotelio). La mayora de las clulas epiteliales se renuevan continuamente mediante mitosis. Los epitelios carecen de irrigacin sangunea y linftica directa. Obtienen los nutrientes por difusin. Las clulas epiteliales carecen casi por completo de molculas intercelulares libres (a diferencia del tejido conjuntivo). Las molculas de adhesin celular y los complejos de unin mantienen la cohesividad del epitelio. Los epitelios se anclan a la lmina basal. Esta y los componentes del tejido conjuntivo colaboran para formar la membrana basal. Los epitelios presentan polaridad estructural y funcional.
Clasicacin general de los epitelios
El epitelio es una lmina muy cohesiva que recubre o tapiza las super cies corporales (p. ej., piel, intestino, conductos secretores) y congura las unidades funcionales de las glndulas secretoras (p. ej., glndulas salivales, hgado). La clasicacin y la nomenclatura tradicionales de los distintos tipos de epitelios se basan en la morfologa de las clulas que los integran y en su disposicin en una o ms capas (g. 1-1 ). cuadro 1-A resume las principales caractersticas de los distintos tipos El de epitelios. Los epitelios se clasi can en: 1. Epitelios simples (g. 1-2), formados por una sola capa de clulas. S e subdividen en escamoso simple, cbico simple y cilndrico simple segn la altura y la anchura de las clulas. E l trmino espec co endotelio se aplica al epitelio simple que tapiza los v asos sanguneos y linfticos. E l mesotelio es el epitelio simple que reviste todas las cavidades corporales (peritoneo, pericar dio y pleura). 2. Epitelios estraticados (g. 1-3), compuestos por dos o ms capas celular es. Este tipo de epitelios se subdividen en funcin de la mor fologa de las clulas en la capa supercial o externa en escamoso estraticado, cbico estrati cado y cilndrico estraticado. El epitelio escamoso estrati cado es el subtipo ms fr ecuente y se subdivide en moderadamente queratinizado (tambin llamado no queratinizado) y muy queratinizado. Las clulas de la capa externa de un epitelio escamoso moderadamente queratinizado son nucleadas (p. ej., en el esfago o la v agina). Las clulas de la capa externa del epitelio escamoso muy queratinizado car ecen de ncleo (p. ej., epidermis de la piel). Las clulas basales alineadas a lo largo de la lmina basal poseen actividad mittica y sustituy en a las clulas en pr oceso de diferenciacin de las capas superior es.
Figura 1-1. Mapa conceptual: tipos de epitelios
Epitelios
Morfologa de las clulas individuales (vista lateral)
Disposicin de las clulas (una o ms capas)
Categoras especiales
Clula escamosa (aplanada)
Clula cbica (dimensiones equivalentes)
Clula cilndrica (ms alta que ancha)
Epitelio seudoestratificado Una capa Ms de una capa
Epitelio transicional (urotelio)
Epitelio simple Endotelio Epitelio escamoso simple Mesotelio Epitelio cbico simple Epitelio cilndrico simple
Epitelio estratificado Epitelio escamoso estratificado Epitelio cbico estratificado Epitelio cilndrico estratificado
Su designacin obedece a la morfologa de las clulas de la capa superficial
2012. Elsevier Espaa, S.L. Reservados todos los derechos
Figura 1-2. Epitelio simple

Eritrocitos en la luz
Lmina basal
Ncleo aplanado de una clula endotelial
Luz
Epitelio escamoso simple
Epitelio escamoso simple (endotelio) El revestimiento interno de los vasos sanguneos se compone de una sola capa de clulas endoteliales escamosas. La delgadez de las clulas
epiteliales escamosas simples refleja su funcin primaria en el intercambio rpido de molculas entre la sangre y los tejidos. El peritoneo, la pleura y el pericardio estn recubiertos por un epitelio similar (mesotelio).
Luz
Lmina basal
Luz
Luz
Epitelio cbico simple
Epitelio cbico simple (tbulo colector, riones) El revestimiento interno de los tbulos renales y los folculos tiroideos est formado por una sola capa de clulas cilndricas. Estas clulas estn muy
polarizadas e intervienen en la absorcin, la secrecin (glndula tiroidea) y el transporte activo de iones (riones). De manera similar al endotelio, la clula se une al tejido conjuntivo subyacente a travs de la lmina basal.
Borde en cepillo Clula caliciforme
Lmina basal
Lmina propia Luz Clula caliciforme Borde en cepillo
Epitelio cilndrico simple
Epitelio cilndrico simple (intestino delgado) El intestino delgado est revestido por clulas epiteliales cilndricas cuyo ncleo se localiza en la porcin interna de la clula. El dominio apical contiene proyecciones digitiformes denominadas microvellosidades que configuran un borde en cepillo. Las microvellosidades intervienen en la absorcin de protenas, hidratos de carbono y lpidos, los cuales se liberan en el dominio basolateral hacia la sangre para su transporte hasta el hgado.
Las clulas caliciformes se entremezclan con las clulas epiteliales cilndricas. Se distinguen por el citoplasma apical dilatado de forma similar a un cliz que contiene material mucoso de tincin leve. La mucosidad se libera a la luz para recubrir la superficie de las clulas epiteliales. Se indica la localizacin de la lmina propia.
Histologa y biologa celular. Introduccin a la anatoma patolgica
Figura 1-3. Epitelio estraticado

Clulas escamosas superficiales nucleadas Aparecen ncleos en las clulas ms superficiales
Lmina basal Clula basal mittica Lmina basal
Epitelio escamoso estratificado con queratinizacin moderada (esfago) El epitelio se compone de clulas basales indiferenciadas especializadas en la divisin mittica. Las clulas estratificadas que recubren la capa basal son clulas en diferenciacin. Las clulas pertenecientes a la capa
externa estn muy diferenciadas: presentan un contenido mayor en queratina con el fin de proteger el tejido de la accin mecnica de los alimentos ingeridos. Las clulas ms externas conservan los ncleos. Este epitelio se conoce tambin como no queratinizado.
Las clulas muy queratinizadas de la capa superficial carecen de ncleos
No aparecen ncleos en las clulas superficiales
Lmina basal Clula basal Lmina basal Epitelio escamoso estratificado con queratina abundante (epidermis) Este epitelio muy queratinizado est formado por clulas basales indiferenciadas especializadas en la divisin mittica. Las clulas estratificadas que recubren la capa basal son clulas en diferenciacin. Las clulas de la capa superficial contienen gran cantidad de queratina con el objeto de evitar tanto las prdidas hdricas como las agresiones qumicas y fsicas. Las clulas ms externas son anucleadas. Este epitelio tambin recibe el nombre de epitelio queratinizado.
3. D subtipos especiales son el epitelio seudoestraticado y el epitelio tranos sicional (g. 1-4). El primero se compone de clulas basales y cilndricas situadas sobre la lmina basal. No obstante, slo las clulas cilndricas alcanzan la super cie luminal. Los ncleos de ambos tipos celular es se hallan a distintos niv eles, por lo que el epitelio par ece presentar una organizacin estrati cada. A este subtipo pertenecen el epitelio cilndrico seudoestraticado ciliado de la trquea y el epitelio cilndrico seudoestraticado con estereocilios del epiddimo. El epitelio transicional de las vas urinarias se conoce, asimismo, como urotelio. Este epitelio tambin est formado por clulas basales y cilndricas cupuliformes. U caracterstica imporna tante de este epitelio es que su altura v ara en funcin de la distensin y la contraccin del rgano (v. captulo 14, Aparato urinario). La polaridad constituye un rasgo destacado de los epitelios. La may ora de las clulas epiteliales tapizan super ficies y cavidades, y poseen tr es dominios (fig. 1-5 ):
1. EPITELIO
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Figura 1-4. Epitelios seudoestraticado y transicionales

Clula caliciforme Clula caliciforme Clula cilndrica ciliada
Clula cilndrica ciliada
Clula basal Clula basal Epitelio cilndrico seudoestratificado ciliado (trquea) Este epitelio consta de tres tipos principales de clulas: 1) clulas cilndricas con cilios en su dominio apical; 2) clulas basales unidas a la lmina basal, Lmina basal
y 3) clulas caliciformes, unas clulas epiteliales que secretan mucosidad. Las clulas cilndricas ciliadas y las caliciformes se unen a la lmina basal y alcanzan la luz. Las clulas basales no llegan a la luz.
Grupo de estereocilios Clula basal Clula cilndrica con estereocilios
Espermatozoide
Clula cilndrica con estereocilios Regin del aparato de Golgi
Clula basal Espermatozoide
Epitelio cilndrico seudoestratificado con estereocilios (epiddimo) El epitelio del epiddimo contiene dos tipos celulares principales: 1) clulas cilndricas dotadas de estereocilios y un aparato de Golgi prominente (llamadas clulas principales), y 2) clulas basales unidas
a la lmina basal. Las clulas principales y basales se asocian a la lmina basal. Tan slo las clulas principales alcanzan la luz. Se pueden visualizar espermatozoides en la luz.
Clula cilndrica cupuliforme Placas Clula basal
Placas Clula cilndrica cupuliforme
Urotelio de una vejiga urinaria vaca
Clula basal
Urotelio de una vejiga urinaria llena de orina
Placas
Epitelio transicional (vejiga urinaria) El epitelio transicional que tapiza las vas urinarias (tambin llamado urotelio) est integrado por dos tipos celulares: 1) clulas cilndricas cupuliformes, que se extienden desde la lmina basal hasta la luz, y 2) clulas basales, unidas a la lmina basal. En algunas especies, el urotelio corresponde a un epitelio seudoestratificado, mientras que en
otra representa un epitelio escamoso estratificado. El urotelio se caracteriza por la respuesta de las clulas superficiales a las fuerzas de tensin provocadas por la orina mediante cambios de la geometra y de la configuracin cupuliforme de su superficie. En la membrana plasmtica apical de las clulas cilndricas se localizan placas de protenas agregadas.
1. El dominio apical est expuesto a la luz del conducto revestido por el epitelio o al ambiente externo. 2. El dominio lateral est en contacto con las clulas epiteliales adyacentes, las cuales se unen por medio de molculas de adhesin celular y complejos de unin. 3. El dominio basal se asocia a una lmina basal que separa el endotelio del tejido conjuntivo subyacente. La lmina basal se r efuerza mediante elementos de tejido conjuntivo. El complejo formado por la lmina basal y el tejido conjuntiv o recibe el nombre de membrana basal. Las clulas epiteliales se unen entre s por medio de complejos de unin y molculas de adhesin. Estas clulas se especializan para llev ar a cabo funciones impor tantes, como la absorcin y la secr ecin, o bien para actuar como barr era frente al paso de agua o gas. Se tratarn algunas barreras celulares y su relevancia funcional.
POLARIDAD DE LAS CLULAS EPITELIALES
Las clulas epiteliales poseen dos dominios principales ( g. 1-5): 1. Un dominio apical 2. Un dominio basolateral Cada dominio presenta unas caractersticas estr ucturales y funcionales espec cas. Por ejemplo, el dominio apical posee estr ucturas que con eren proteccin a la supercie epitelial (como los cilios de las vas r espiratorias) o inter vienen en la absorcin de molculas (como las microvellosidades del epitelio intestinal). La presencia de complejos de unin y de las molculas de adhesin celular en el dominio basolateral hace posible el anclaje de unas clulas epiteliales a otras y a la membrana basal.
Diferenciaciones apicales
En el dominio apical de algunas clulas epiteliales pueden apar ecer tres tipos de diferenciaciones: 1. Cilios 2. Microvellosidades 3. Estereocilios Los cilios (g. 1-6) son pr oyecciones celulares mviles que pr ovienen de los cuerpos basales anclados por medio de raicillas a la por cin apical del citoplasma. Cada cuerpo basal posee nuev e tripletes de microtbulos en disposicin helicoidal sin microtbulos centrales. Por el contrario, el cilio se compone de una estr uctura denominada axonema, formado por un par central de micr otbulos rodeado de nuevo pares de microtbulos organizados de manera concntrica. Esta disposicin se conoce como disposicin 9+ 2 dobletes de microtbulos. Asimismo, el axonema forma parte de la cola de los espermatoz oides o agelo.
Figura 1-5. Dominios de una clula epitelial polarizada
Unin hermtica Luz
Diferenciaciones del dominio apical (cilios, microvellosidades o estereocilios)
Microvellosidades Dominio apical Luz
Ncleo
Dominio basolateral Membrana basal
1. EPITELIO
Figura 1-6. Diferenciaciones apicales de las clulas epiteliales: cilios y cilio primario
Cilio: un eje con dobletes de microtbulos en una disposicin concntrica 9 + 2 rodeada de la membrana plasmtica
Membrana plasmtica Cilio
Cuerpo basal anclado al citoplasma por las raicillas estriadas
0,25 m Cilio Cuerpo basal Cuerpo basal 0,2 m Raicilla Raicillas estriadas Oviducto Cilio primario Un cilio primario solitario se proyecta desde la superficie celular. Las alteraciones de este cilio, incluido el cuerpo basal, se han asociado a ciliopatas, que engloban trastornos humanos, como los riones qusticos, la obesidad, el retraso mental, la ceguera y diversas anomalas congnitas. Microtbulos
Los centrolos del centrosoma dan lugar a los cuerpos basales; los cuerpos basales pueden formar centrolos
Centro organizador de microtbulos Lmina basal Antergrado Motor de cinesina Protenas IFT Protenas IFT Motor de dinena Retrgrado Cilio
Cuerpo basal Componentes proteicos del BBSoma (sndrome de Bardet-Biedl) Los cilios se forman a partir de los cuerpos basales localizados en el dominio apical del citoplasma. Los cuerpos basales provienen de los centrolos y presentan una subestructura semejante a ellos: nueve tripletes de microtbulos perifricos en disposicin helicoidal. El cuerpo basal se ancla al citoplasma a travs de las raicillas. Los cuerpos basales y los centrolos carecen de microtbulos centrales. Los centrolos, no as los cuerpos basales, estn rodeados por un material denso denominado centro organizador de los microtbulos. El cilio est compuesto por una estructura concntrica con nueve dobletes de microtbulos que rodean un par central de microtbulos (organizacin 9 + 2). Ensamblaje del cilio La formacin y el mantenimiento del cilio dependen del transporte de tubulinas a lo largo del axonema por mediacin de las protenas del sistema de transporte intraflagelar (IFT). Las protenas motoras de cinesina que movilizan los complejos proteicos IFT se encargan del transporte de IFT desde la base del cilio hasta el extremo (transporte antergrado; hacia el extremo positivo del microtbulo). Los motores de dinena intervienen en el transporte retrgrado (hacia el extremo negativo del microtbulo; base del cilio). Las protenas IFT crean una plataforma de transporte de molculas desde la base hacia el extremo del cilio. La alteracin del motor de cinesina o de las protenas IFT impide la formacin de los cilios. Las protenas de los cuerpos basales influyen en el trfico ciliar. Entre ellas se encuentran los componentes del BBSoma, as llamados por su asociacin con el sndrome de Bardet-Biedl (BBS). Las protenas BBSoma pueden ayudar a cargar las molculas a transportar en el axonema del cilio. Las protenas pertenecientes a la va de transmisin de seales hedgehog participan en el transporte intraciliar e intraflagelar (no se muestran).
La trquea y el o viducto estn r evestidos por clulas epiteliales ciliadas. En estos epitelios, la actividad de los cilios desempea un papel importante en la defensa local del aparato respiratorio y en el transpor te del vulo fecundado hasta la cavidad uterina. Algunas clulas presentan un cilio primario, cuya impor tancia ponen de r elieve algunas enfermedades recesivas infrecuentes en el ser humano, las ciliopatas, debidas a anomalas estructurales en los cilios. E n la gura 1-6 se muestran la estr uctura y el mecanismo de ensamblaje de los cilios primarios, los cuales se caracterizan por: 1) la ausencia de mo vilidad; 2) su par ticipacin en las etapas tempranas del desarr ollo embrionario que conducen a la organogenia; 3) la presencia de muchos componentes de la va de transmisin de seales hedgehog, una va clave, al menos, en el desarr ollo inicial, y 4) la posicin del cilio primario, denominado cinetocilio, de la clula ciliada del rgano de Corti en el odo interno determina la polaridad corr ecta de los estereocilios que contienen actina (v. captulo 9, rganos sensoriales: visin y audicin). Las microvellosidades (g. 1-7) son proyecciones digitiformes de la supercie apical de las clulas epiteliales que contienen un ncleo de micr olamentos entrecruzados
6 |
Figura 1-7. Diferenciaciones apicales de las clulas epiteliales: microvellosidades y estereocilios

Microvellosidad Microvellosidad: un eje de microfilamentos que contienen actina Cubierta Eje de filamentos de actina Eje de filamentos de actina Oviducto
0,08 m Unin hermtica y desmosoma en cinturn, puntos finales de la red Microvellosidad terminal de Regin de la actina red terminal Intestino delgado Lmina basal Estereocilio Los estereocilios contienen un eje de microfilamentos de actina Microvellosidades (corte longitudinal) Cola del espermatozoide Microvellosidades Cilios
Microvellosidades y cilios (corte transversal)
Estereocilio ramificado Vesculas de endocitosis
Lmina basal Las microvellosidades y los estereocilios presentan la misma estructura: un eje de microfilamentos de actina y protenas asociadas a la actina. En el epitelio intestinal, la actina se proyecta hacia la red terminal, una red de protenas citoesquelticas en una disposicin similar a un collarn
Epiddimo en el dominio apical del citoplasma. A pesar de que las microvellosidades presentan una longitud similar, los estereocilios son ms largos y se ramifican, y el dominio apical de la clula posee vesculas de endocitosis. Los puentes que conectan distintos estereocilios (flechas rojas) indican sus ramificaciones.
(un polmero de monmer os de actina G). E n el extr emo citoplsmico de la microvellosidad, los haces de actina y otras pr otenas se extienden hacia la red terminal, un conglomerado lamentoso de pr otenas citoesquelticas de disposicin paralela al dominio apical de la clula epitelial. El epitelio intestinal y algunas por ciones de la nefr ona en el rin estn r evestidos por clulas epiteliales con micr ovellosidades que conforman un borde en cepillo. En general, este tipo de bor de indica que se trata de una clula implicada en tar eas de absorcin. Los estereocilios (v. g. 1-7) son pr oyecciones digitiformes largas y ramicadas que aparecen en la super cie apical de las clulas epiteliales. D e manera similar a las microvellosidades, los estereocilios contienen un eje de microlamentos de actina que se entrecruzan con otras pr otenas. Los estereocilios carecen de axonema. Estas diferenciaciones son caractersticas del revestimiento epitelial del epiddimo e inter vienen en el proceso de maduracin de los espermatoz oides que tiene lugar en este rgano .
MOLCULAS DE ADHESIN CELULAR
La estrecha unin de clulas similares entre s y a la lmina basal, un componente de la matriz extracelular, da lugar a una lmina de clulas epiteliales. Las molculas de adhesin celular permiten el contacto entre las clulas epiteliales, el cual se estabiliza a travs de las uniones celulares especializadas. A esta organizacin se debe la polaridad de los dominios apical y basolateral de las lminas de clulas epiteliales.
1. EPITELIO
Figura 1-8. Cadherinas

La secuencia histidina-valina-alanina (HVA) facilita la formacin de dmeros de cadherina cis-homfilos. Los dmeros de cadherina de las membranas celulares opuestas Dmero establecen interacciones cistrans-homfilas o trans-heterfilas. homfilo
Cuatro dominios de la porcin extracelular de la cadherina se unen al calcio. El funcionamiento de las cadherinas depende del Ca2+. Las cateninas , y /placoglobina forman, junto a -actinina, vinculina y formina-1, el complejo de las cateninas. La catenina se une a la cadherina y la catenina /placoglobina; la catenina lo hace directamente a la actina.
Ca2+ Ca2+ Ca2+ Ca2+
Membrana plasmtica
Citoplasma
Interaccin transhomfila
Actina
Vinculina Formina-1 -actinina
Protenas de unin a actina
Las cadherinas constituyen las principales protenas de adhesin que mantienen unidas las clulas epiteliales en una lmina. La desaparicin del calcio altera la cohesividad tisular. La cola citoplsmica interacciona con los filamentos de actina a travs de numerosas protenas intracelulares de unin, como las tres protenas cateninas. La catenina tambin acta como factor de transcripcin.
Cuadro 1-B | Molculas de adhesin celular Las molculas de adhesin celular se clasican como dependientes del Ca2+ e independientes del Ca2+. Las molculas de adhesin celular dependientes de Ca2+ son las cadherinas y las selectinas. Las molculas de adhesin celular independientes de Ca2+ engloban las molculas de adhesin celular (CAM) de la superfamilia de las inmunoglobulinas y las integrinas. Las cadherinas y las CAM realizan interacciones transhomlas en el espacio intercelular. Las integrinas constituyen las nicas molculas de adhesin celular formadas por dos subunidades: y . Las cadherinas y las integrinas interaccionan con la actina F a travs de molculas adaptadoras (cateninas para las cadherinas, y vinculina, talina y -actinina para las integrinas).
A pesar de que las molculas de adhesin celular y las uniones celular es se describen en este texto en el captulo r elativo a los epitelios, las clulas no epiteliales tambin utilizan estas molculas y uniones para establecer contacto con otras clulas. Un ejemplo tpico de la comunicacin de clulas no epiteliales mediante uniones especializadas es el msculo car daco (v. captulo 7, Tejido muscular). Se distinguen dos tipos fundamentales de molculas de adhesin celular (v. cuadro 1-B): 1. Molculas dependientes de Ca2+, como las cadherinas y las selectinas 2. Molculas independientes de Ca2+, las cuales conforman la superfamilia de las inmunoglobulinas y las integrinas Muchas clulas emplean distintas molculas de adhesin celular en sus uniones celulares. Las integrinas par ticipan, fundamentalmente, en las interacciones entr e las clulas y la matriz extracelular. Las integrinas y las cadherinas unen el citoesqueleto interno de una clula con la super cie de otra clula (cadherinas) o la matriz extracelular (integrinas). Las cadherinas (g. 1-8) representan una familia de molculas dependientes de Ca2+ que desempean un papel destacado en la adhesin celular y la mor fogenia. La prdida de cadherinas se asocia a la adquisicin de un compor tamiento invasivo por parte de las clulas tumorales (metstasis) (v. captulo 4, Tejido conjuntivo). Se conocen ms de 40 cadherinas difer entes. La E-cadherina es una cadherina epitelial que se encuentra en las super cies laterales de las clulas y se ocupa del mantenimiento de la mayor parte de las capas epiteliales. La eliminacin del calcio o la utilizacin de anticuerpos contra esta cadherina en cultivos de clulas epiteliales provocan la rotura de las uniones celulares y alteran el establecimiento de las uniones estabilizadoras. Las molculas de E-cadherina forman dmeros cis-homlos (igual a igual) que se unen a los dmer os de la misma o distinta clase de cadher inas en la membrana celular opuesta (interaccin trans-homla o heter la [igual a diferente]). Estos tipos de unin dependen de la pr esencia de calcio y dan lugar a un patrn de adhesin inter celular semejante a una cr emallera. La N-cadherina aparece en el sistema nervioso central, el cristalino del ojo, y en los msculos esqueltico y car daco. La P-cadherina se encuentra en la placenta (trofoblasto).
Figura 1-9. Selectinas

Dominio de reconocimiento de hidratos de carbono (CRD) El calcio asociado a los laterales del CRD regula la conformacin del dominio y su capacidad de unin a los hidratos de carbono.
Ca2+
Ca2+
Dominio similar al factor de crecimiento epidrmico (similar al EGF) Repeticiones de secuencias consenso cortas
Membrana plasmtica
Las selectinas presentan tres dominios extracelulares: 1. Un dominio de reconocimiento de hidratos de carbono (CRD) especfico de un glcido determinado (galactosa, manosa, N-acetilglucosamina y otros). 2. Un dominio homlogo para una repeticin presente en el factor de crecimiento epidrmico (similar al EGF). 3. Muchas repeticiones de secuencias consenso que aparecen en las protenas reguladoras del complemento. Se distinguen tres tipos principales de selectinas: 1. L-selectina, presente en los linfocitos y con afinidad de unin a los hidratos de carbono sulfatados. 2. E-selectina, expresada por las clulas endoteliales activadas. 3. P-selectina, expresada por las plaquetas y las clulas endoteliales activadas. Las selectinas, junto a las integrinas y las molculas de adhesin celular intercelular (ICAM), desempean una funcin destacada en la inflamacin y la migracin peridica de los linfocitos desde el torrente circulatorio hacia los rganos linfoides (homing).
Cola citoplsmica
El dominio citoplsmico de las cadherinas se une a la actina a travs de protenas intermedias cuyo conjunto recibe el nombre de complejo de las cateninas (del latn catena, cadena). El complejo comprende cateninas ( , y ) y protenas de unin a actina, como -actinina, vinculina y formina-1, entr e otras. El complejo de las cateninas in uye en el funcionamiento de las cadherinas, al menos, a tres niveles: 1) las cateninas establecen enlaces dir ectos con los lamentos de actina; 2) interaccionan con molculas r eguladoras del citoesqueleto de actina, y 3) controlan el estado de adhesin del dominio extracelular de las cadherinas. La asociacin de la actina con el complejo cadherina-catenina es clav e para la mor fogenia celular, los cambios de la mor fologa celular y el establecimiento de la polaridad celular. Las molculas que per tenecen a la familia de las cadherinas se localizan, asimismo, entre las placas citoplsmicas de la znula y la mcula adher ente. Las -cateninas desempean una funcin destacada en la carcinogenia colorrectal (v. captulo 16, Segmento digestivo inferior). Las selectinas (g. 1-9), similares a las cadherinas, son molculas de adhesin celular dependientes de Ca2+. A diferencia de estas, las selectinas se unen a los hidratos de carbono y se engloban en el gr upo de las lectinas (del latn lectum, seleccionar). Cada selectina posee un dominio de r econocimiento de hidratos de carbono (CRD) con anidad por un oligosacrido especco unido a una pr otena (glucoprotena) o un lpido (glucolpido). E l calcio determina la con guracin molecular del CRD. Las selectinas inter vienen en la migracin de los leucocitos (del griego leukos, blanco, kytos, clula) desde el torr ente circulatorio (neutrlos, monocitos, linfocitos B y T) hacia los tejidos mediante la extravasacin. Este proceso se basa en el mecanismo de homing, el cual permite la salida de los leucocitos del torr ente circulatorio y su migracin hasta los focos de in amacin (v. g. 1-12 ).Asimismo, posibilita que los linfocitos de origen tmico se alojen en los ganglios linfticos perifricos (v. captulo 10, Sistema inmunitario-linftico). Las tres clases principales de selectinas de super cie celular son las siguientes: 1. P-selectina, presente en las plaquetas y las clulas endoteliales activ adas que revisten los vasos sanguneos 2. E-selectina, presente en las clulas endoteliales activ adas 3. L-selectina, presente en los leucocitos La P-selectina se almacena en v esculas citoplsmicas de las clulas endoteliales. La activacin de las mismas mediante seales de la r espuesta inamatoria induce la
1. EPITELIO
Figura 1-10. Superfamilia de las inmunoglobulinas

NCAM-1 VCAM-1 (molcula de adhesin (molcula de adhesin celular neural 1) celular vascular 1) El segmento extracelular de una Dominio similar a las molcula de adhesin celular o inmunoglobulinas CAM se pliega en dos a seis dominios similares a las inmunoglobulinas. Debido a esta caracterstica de las CAM, estas pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas (Ig) de protenas. Las molculas de la superfamilia de las Ig de una clula poseen la capacidad de unirse a molculas idnticas de otras clulas (unin trans-homfila) o a otros miembros de la superfamilia (unin trans-heterfila). Las molculas ICAM y VCAM desempean papeles importantes en las interacciones de los linfocitos T y en la unin de los ICAM-1 leucocitos a clulas endoteliales (molcula de adhesin activadas o en reposo. celular intercelular 1)
Membrana plasmtica Citoplasma ICAM-2 (molcula de adhesin celular intercelular 2)
aparicin de la P-selectina en la super celular. Los leucocitos presentan el antgeno cie sialil-Lewis X, un oligosacrido espec co que acta como ligando de la P-selectina, en su super cie celular. La unin de la P-selectina a este antgeno ralentiza el desplazamiento de estas clulas en el torr ente circulatorio y comienzan a r odar sobre la supercie de las clulas endoteliales. D iversos miembros de la super familia de las inmunoglobulinas (Ig) y las integrinas ayudan a estabilizar la unin de la P-selectina a los leucocitos, lo que da lugar a su extrav asacin (v. g. 1-12). N-CAM (molcula de adhesin de las clulas neurales) per tenece a la superfamilia de las Ig e inter viene en las interacciones hom las y heter las. A diferencia de las cadherinas y las selectinas, las molculas incluidas en la super familia de las I g son molculas de adhesin celular independientes de Ca2+ codicadas por un solo gen. Los componentes de estas superfamilia se forman mediante el proceso de corte y empalme alternativo del ARN mensajero (ARNm) y se difer encian por su glucosilacin. Una caracterstica que compar ten todos los miembr os de la super familia de las Ig es la pr esencia de un segmento extracelular con uno o ms dominios plegados tpicos de las inmunoglobulinas (g. 1-10). Cabe destacar la molcula CD4, miembro de esta superfamilia que acta como receptor del virus de la inmunodeciencia humana tipo 1 (VIH-1) en una subclase de linfocitos denominados linfocitos T o clulas colaboradoras. En el captulo 10, S istema inmunitario-linftico, describiremos la funcin de v arios miembros de la super familia de las Ig. Otros miembros de esta superfamilia desempean papeles destacados en el pr oceso de homing durante las reacciones inamatorias, como las molculas de adhesin intercelular 1 y 2 (ICAM-1 e ICAM-2) localizadas en la supercie de las clulas endoteliales. La expresin de ICAM-1 durante una r eaccin inamatoria facilita la migracin transendotelial de los leucocitos (v. captulo 6, Sangre y hematopoyesis). Las integrinas (g. 1-11) se difer encian de las cadherinas, las selectinas y las molculas pertenecientes a la superfamilia de las Ig en su estructura heterodimrica formada por dos subunidades y asociadas, las cuales son codi cadas por genes diferentes. Se conocen unos 22 heterodmeros de integrinas formados por 17 variantes de la subunidad y 8 formas de la . Casi todas las clulas expr esan una o ms integrinas. D e manera similar a las cadherinas, el dominio citoplsmico de las -integrinas se une a lamentos de actina a travs de protenas de conexin (talina, vinculina y -actinina). El dominio extracelular de las integrinas se une a la secuencia tripptido RGD (Arg-Gly-Asp) presente en la laminina y la bronectina, dos componentes destacados
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Figura 1-11. Integrinas

Actina Talina -actinina Las integrinas se diferencian de otras protenas de adhesin celular: 1. Constan de dos subunidades. 2. Desempean una funcin doble: se unen a la matriz extracelular y al citoesqueleto interno. La subunidad de una integrina presenta dos cadenas ligadas por un enlace disulfuro y una cabeza globular con sitios de unin para cationes divalentes. La subunidad se distingue por dos rasgos destacados: 1) la cadena extracelular presenta secuencias repetidas ricas en cistena, y 2) la porcin intracelular interacciona con los filamentos de actina a travs de tres protenas conectoras: talina, vinculina y -actinina.
Vinculina
Citoplasma Membrana plasmtica
Slo se une la subunidad al citoesqueleto Dominios ricos en cistena
S S
Espacio extracelular Enlace disulfuro Subunidad Sitios de unin para cationes divalentes
Subunidad
S S S S
Fibronectina
RGD (arginina-glicina-cido asprtico) Laminina
de la membrana basal, un tipo espec co de matriz extracelular. La laminina y la bronectina interaccionan con div ersos tipos de colgeno (como el colgeno de tipo IV), proteoglucano perlecano de tipo heparano sulfato y entactina (tambin conocida como nidgeno). La relacin entre las integrinas y la matriz extracelular r eviste una enorme importancia para la migracin celular a z onas determinadas durante la embriognesis y es susceptible de r egulacin cuando la motilidad celular es necesaria. A dems de intervenir en las interacciones entre clulas y matriz, las integrinas tambin par ticipan en la interaccin inter celular. Aquellas con subunidades 2 se expr esan en la supercie de los leucocitos y estn implicadas en la unin inter celular. Un ejemplo de estas molculas es el heterodmero 1 2 de integrina que se une a ligandos de las supercies de las clulas endoteliales en el transcurso de la fase de homing en la que participan las integrinas ( g. 1-12). Las integrinas responden a episodios intercelulares mediante la modi cacin de su conformacin adhesiva en relacin con otras molculas de la matriz extracelular . Esta respuesta se conoce como transmisin de seales de dentr o afuera. Por otra parte, las integrinas estn implicadas en una compleja cascada que se activ a como consecuencia de acontecimientos extracelulares.
Protenas ADAM
Unas protenas llamadas ADAM (un a desintegrina y un a metaloproteinasa) pueden invertir la unin de la clula a la matriz celular mediada por las integrinas. Las ADAM desempean funciones clave en la fecundacin, la angiogenia, la neur genia, el desarrollo o cardaco, el cncer y la enfermedad de Alzheimer (v . captulo 8, Tejido nervioso). Una protena ADAM tpica ( g. 1-13) contiene un dominio extracelular y un dominio intracelular. El primero se compone de v arias porciones, entre las que guran un dominio desintegrina y un dominio metaloproteinasa. 1. Un dominio desintegrina se une a integrinas e impide competitiv amente la unin mediada por estas a la laminina, bronectina y otras pr otenas de la matriz extracelular.
1. EPITELIO
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Figura 1-12. Homing, un proceso en el que participan las selectinas y las integrinas
1 Los leucocitos (neutrfilos) circulantes resisten a las fuerzas de cizallamiento para circular a una velocidad menor en el endotelio vascular.
Endotelio
Pared del msculo liso
Fase de las selectinas Rodamiento

Neutrfilo
1
Fase de las integrinas
Integrinas 1 y 2
VCAM-1 ICAM-1
Adhesin 3
Migracin transendotelial
Fuerzas de cizallamiento Ligando con hidrato de carbono
Selectinas
2 La adhesin laxa al endotelio en condiciones de flujo lento provoca el rodamiento de los leucocitos. Las selectinas presentes en la superficie de las clulas endoteliales se asocian a los ligandos de hidratos de carbono de la superficie de los leucocitos.
Espacio extravascular
4 4 Las integrinas intervienen en la migracin transendotelial al interaccionar con ligandos presentes en la superficie de las clulas endoteliales. La actina F participa en este proceso.
3 Los receptores de las integrinas para los ligandos ICAM-1 endotelial e ICAM-1 se activan con rapidez en la superficie de los leucocitos durante el rodamiento. Los mediadores qumicos en los focos de inflamacin estimulan la activacin de las integrinas 1 y 2. Las integrinas refuerzan la unin de los leucocitos a la superficie de las clulas endoteliales.
La mayora de los leucocitos circulan en la sangre sin interaccionar con ninguna otra clula sangunea ni con las clulas endoteliales que revisten los vasos sanguneos. No obstante, una subpoblacin de linfocitos participa en un proceso de recirculacin continua a travs de los tejidos linfticos. Este proceso de homing precisa de la intervencin de numerosas molculas de adhesin que facilitan el direccionamiento de los linfocitos a los distintos compartimentos linfoides del organismo.
La interaccin de los linfocitos y las clulas endoteliales depende de dos tipos de protenas de adhesin celular: las selectinas y las integrinas. Los neutrfilos emplean un mecanismo similar para abandonar los vasos sanguneos, fundamentalmente las vnulas poscapilares, hacia los focos de inflamacin. La migracin de los leucocitos desde el torrente circulatorio hacia los tejidos se desarrolla a lo largo de varias etapas, como se observa en este esquema.
2. Un dominio metaloproteinasa degrada componentes de la matriz para permitir la migracin celular. Una funcin destacada de las ADAM es la liberacin de ectodominios de pr otenas, un proceso a travs del cual se pr oduce la liberacin proteoltica del ectodominio de una protena de membrana escindida en la zona adyacente a la membrana plasmtica. Las protenas ADAM pertenecen a la familia de las shedasas. La liberacin de ectodominios acta sobr e la citocina pr oinamatoria factor de necr osis tumoral (TNF- ) y todos los ligandos del r eceptor del factor de cr ecimiento epidrmico. Un ectodominio soluble liberado de una citocina o factor de cr ecimiento puede actuar a distancia del lugar de la escisin (transmisin de seales paracrina). El ectodominio escindido de un r eceptor puede inactivarlo al funcionar como seuelo para secuestrar ligandos solubles del receptor libre asociado a la membrana plasmtica. Una anomala en la escisin del receptor 1 de TNF (TNFR1) debida a una mutacin en el sitio de escisin del receptor da lugar a un sndrome febril peridico como consecuencia de la disponibilidad continua de TNFR1 para la unin de TNF- .
UNIONES CELULARES
A pesar de que las molculas de adhesin celular son r esponsables de la adhesin de una clula con otra, las uniones celulares son necesarias para potenciar la estabilidad. Por otra parte, el movimiento de solutos, iones y agua a travs de una capa epitelial
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Figura 1-13. La protena ADAM, una shedasa

Dominio intracelular Dominio citoplsmico (sitios de fosforilacin o ricos en prolina que se unen a dominios con homologa Src [SH3]) Dominio transmembrana Liberacin Plaqueta El dominio desintegrina presenta una notable homologa de secuencia con las desintegrinas presentes en el veneno de serpiente. Al liberarse, el dominio desintegrina, que contiene el tripptido RGD (Arg-Gly-Asp), se une a la glucoprotena GpIIb/IIIa de las plaquetas, lo que impide su agregacin. Las protenas ADAM (una desintegrina y una metaloproteinasa) son metaloproteinasas de membrana. La actividad proteoltica de las metaloproteinasas depende de un in metlico (Zn2+). Una protena ADAM posee un dominio extracelular que contiene un dominio metaloproteinasa N-terminal y un dominio desintegrina.
Dominio extracelular Dominio similar a EGF Dominio rico en cistena Dominio desintegrina Dominio metaloproteinasa Dominio Pro (chaperona intramolecular)
Glucoprotena GpIIb/IIIa
RGD
El dominio metaloproteinasa degrada componentes de la matriz extracelular durante el proceso de migracin celular. Asimismo, interviene en la escisin de una protena de membrana en la membrana plasmtica, que da lugar a la liberacin de su ectodominio soluble. Este proceso recibe el nombre de liberacin del ectodominio. La liberacin del ectodominio acta sobre diversas molculas, entre las que se incluye la citocina proinflamatoria factor de necrosis tumoral y todos los ligandos del receptor del factor de crecimiento epidrmico.
Liberacin del ectodominio
Liberacin del ectodominio Ectodominio soluble La liberacin del ectodominio hace posible la participacin de factores de crecimiento anclados a la membrana en las vas de transmisin de seales paracrina (a distancia del lugar en el que tiene lugar la escisin) o bien su paso al torrente circulatorio. De igual modo, la liberacin puede dar lugar a un receptor de tipo seuelo soluble que podra secuestrar un ligando.
Membrana plasmtica
Protena transmembrana
tiene lugar a travs de y entre los componentes de la clula. U n gran nmer o de canales y molculas transportadoras controla la va de transporte transcelular. La va paracelular est controlada por un contacto intercelular continuo o uniones celulares. La alteracin de estas uniones origina enfermedades adquiridas y hereditarias debidas a unas barreras epiteliales ine cientes. Las uniones celulares son estr ucturas simtricas formadas entr e dos clulas adyacentes. Se distinguen tr es clases principales de uniones celular es simtricas (g. 1-14 ;v. cuadro 1-C). 1. Uniones hermticas 2. Uniones de anclaje 3. Uniones comunicantes Las uniones hermticas (conocidas tambin como uniones oclusivas) (g. 1-15 ) llevan a cabo dos funciones principales: 1. Denen la polaridad de las clulas epiteliales al separar el dominio apical del basolateral y evitar la difusin libr e de lpidos y pr otenas entre ellos. 2. Impiden el paso libre de molculas a travs de una capa epitelial (barrera de la va paracelular) . Las membranas celulares de dos clulas adyacentes entran en contacto a inter valos regulares para sellar el espacio intercelular apical. Estas reas de contacto estrecho se distribuyen en la supercie celular de manera similar a un cinturn y forman tiras anastomosadas de las protenas transmembrana ocludina y claudina. Estas protenas pertenecen a la familia de las tetraespaninas y poseen cuatr o dominios transmembrana, dos asas externas y dos colas citoplsmicas cor tas.
1. EPITELIO
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Figura 1-14. Uniones de anclaje y comunicantes

Uniones hermticas Definen la polaridad celular y controlan el transporte de sustancias entre clulas adyacentes. Las uniones estrellas presentan una distribucin en cinturn semejante a un lazo que rodeara el permetro interno de las clulas y se asocian a filamentos de actina. Znula adherente o desmosoma en cinturn Esta unin de anclaje presenta una distribucin en cinturn y se asocia a filamentos de actina. Obsrvese que las uniones comunicantes no se asocian a elementos del citoesqueleto. Unin hermtica
Znula adherente
Mcula adherente o desmosoma puntual Esta unin de anclaje se distingue por una distribucin puntual y se asocia a filamentos intermedios.
Mcula adherente
Hemidesmosoma Los hemidesmosomas vinculan el dominio basal de una clula epitelial con la lmina basal. Los filamentos intermedios se unen a una placa.
Lmina basal Uniones comunicantes Estas uniones conectan a dos clulas adyacentes. La unin comunicante se compone de conexones, unas estructuras semejantes a canales que permiten el paso de molculas de pequeo tamao (1,2 kDa) entre las clulas.
La ocludina interacciona con cuatr o protenas clave ocludina de la znula (ZO): ZO-1, ZO-2, ZO-3 y afadina. La claudina (del latn claudere, cerrar), una familia de 16 protenas que forman brillas lineales en las uniones hermticas, con ere propiedades de barrera a la va paracelular. Una mutacin del gen que codi ca la claudina 16 da lugar a una enfermedad humana muy infr ecuente, el sndrome de prdida renal de magnesio, el cual se caracteriza por hipomagnesemia y convulsiones. En las uniones hermticas apar ecen dos miembros de la super familia de las I g, las nectinas y las molculas de adhesin de las uniones ( JAM). Ambas forman heterodmeros (homodmeros cis) y posteriormente homodmeros trans en el espacio intercelular. Las nectinas se conectan a los lamentos de actina a travs de la pr otena afadina. La delecin dirigida del gen que codi ca esta protena en el ratn provoca la muerte del embrin. U na mutacin del gen nectina-1 produce el sndrome del paladar leporino/labio leporino y displasia ectodrmica (CLEPD1) que afecta a la piel, al pelo, a las uas y a los dientes en el ser humano . Los ratones macho con deciencia de nectina-2 son estriles. Las uniones hermticas se pueden visualizar mediante criofractura como una red de hebras de sellado ramicadas y anastomosadas. El procedimiento de criofractura de estudio de las membranas celular es se describe en el captulo 2, G lndulas epiteliales. Las uniones de anclaje se disponen por debajo de las uniones hermticas, por lo general en las pr oximidades de la super cie apical del epitelio . Se han identi cado tres clases de uniones de anclaje (v. gs. 1-14, 1-16, 1-18 y 1-19 ): 1. La znula adherente o desmosoma en cinturn 2. La mcula adherente o desmosoma puntual 3. El hemidesmosoma De forma similar a las uniones hermticas, la znula adherente presenta una morfologa de cinturn. La znula adherente (v. g. 1-16) se asocia a microlamentos de actina, asociacin que se sustenta en la interaccin de las cadherinas (desmocolinas y desmoglena) con las cateninas ( , y ). Las principales desmoglenas que se expresan en la epidermis de la piel son las desmoglenas 1 y 3 ( g. 1-17 ). La mcula adherente (tambin llamada desmosoma) es una unin puntual asociada a lamentos intermedios de queratina (tambin llamados tonolamentos) que se extienden desde un punto a otr o de las super cies lateral y basal de las clulas epiteliales (g. 1-18). Los desmosomas puntuales con eren resistencia y rigidez a la capa de clulas epiteliales. Asimismo, apar ecen en los discos inter calados que unen
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Figura 1-15. Organizacin molecular de las uniones hermticas

Las uniones hermticas son cinturones perimetrales que se localizan en el dominio apical de las clulas epiteliales y unen clulas endoteliales. Sellan el espacio entre las clulas epiteliales, y regulan el paso de agua y el flujo inico entre las clulas epiteliales adyacentes (va paracelular). Las molculas que atraviesan la clula siguen una va transcelular. El complejo afadina-nectina se ancla a ZO-1. Las nectinas forman cis-homodmeros que interaccionan entre s (interaccin trans-homo) a travs de la regin extracelular. Las molculas de adhesin de las uniones (JAM) se asocian a afadina y ZO-1. Los cis -homodmeros JAM interaccionan entre s (interaccin trans-homo) para definir la polaridad celular.
Afadina Nectina
JAM Las protenas de la znula oclusiva (ZO-1, ZO-2 y ZO-3) facilitan la interaccin recproca de la ocludina, las claudinas y las JAM con la actina F.
Actina F
ZO-1 ZO-2 ZO-3 La ocludina y las claudinas representan la base molecular de la formacin de hileras de uniones hermticas en las preparaciones de criofractura. Ocludina Claudina Va transcelular Las nectinas y las JAM pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas. Su estructura contiene asas de inmunoglobulinas, cada una de las cuales se estabiliza por medio de enlaces disulfuro. Las nectinas y los cis-homodmeros JAM intervienen en la adhesin intercelular trans -homo. La ocludina y las claudinas pertenecen a la familia de las tetraespaninas de protenas, que poseen cuatro dominios transmembrana, dos asas y dos colas citoplsmicas. Va paracelular
Luz
Microfilamentos de actina
Znula adherente
Membrana plasmtica
1 En las preparaciones de criofractura, las uniones hermticas se visualizan como crestas selladoras ramificadas e interconectadas que conforman una red en las proximidades del dominio apical de la clula. Las crestas representan a las protenas transmembrana ocludina y claudinas asociadas a la vertiente protoplsmica fracturada.
2 En los cortes finos, el espacio intercelular est ocluido por la ocludina, las claudinas, las JAM y las nectinas. La znula adherente, o desmosomas en cinturn, suele localizarse por debajo de las uniones hermticas.
miocardiocitos adyacentes en el corazn (v . captulo 7, T ejido muscular) y las meninges que tapizan las super cies externas del encfalo y la mdula espinal. A diferencia de las uniones oclusivas, las membranas de clulas adyacentes unidas por znulas y mculas adher entes se separan por un espacio inter celular relativamente amplio. Este espacio est ocupado por la por cin glucosilada de unas protenas pertenecientes a la familia de lascadherinas, las desmoglenas y las desmocolinas, que se anclan a placas citoplsmicas que contienen desmoplaquina, placoglobina ( -catenina) y placolina. Las placas citoplsmicas se unen a la cara interna de la membrana plasmtica. El entrecruzamiento de cadherinas similares supone la aproximacin de las clulas a travs de una interaccin hom o heterla dependiente la
1. EPITELIO
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Cuadro 1-C | Uniones celulares Las uniones celulares se dividen en simtricas y asimtricas. Entre las primeras se encuentran las uniones hermticas, los desmosomas en cinturn (znula adherente) y las uniones comunicantes. El hemidesmosoma representa una unin asimtrica. Las uniones hermticas contienen ocludina y claudina, las cuales pertenecen a la familia proteica de las tetraespaninas, ya que cuatro segmentos de cada protena atraviesan la membrana plasmtica. Otro componente es el complejo proteico afadina-nectina. Otros elementos proteicos son las molculas de adhesin de las uniones (JAM), las protenas de la znula oclusiva (ZO) ZO-1, ZO-2 y ZO-3 y la actina F. Las uniones hermticas forman una junta perimetral que controla la va paracelular de transporte de molculas. La znula adherente (desmosomas en cinturn) se compone de una placa con desmoplaquina, placoglobina ( -catenina) y placolina. Las cadherinas, principalmente las desmocolinas y los dmeros de desmoglenas, y el complejo afadina-nectina se extienden desde la placa hacia el espacio extracelular. Un complejo de cateninas une los lamentos de actina a la placa. De manera similar a las uniones hermticas, los desmosomas en cinturn crean una junta perimetral en la regin apical de las clulas epiteliales. La mcula adherente (desmosoma puntual) es semejante a la znula adherente desde el punto de vista estructural, si bien carece de complejos afadina-nectina y de cateninas y posee lamentos intermedios (tonolamentos), en lugar de lamento de actina, que se unen a la placa. Los hemidesmosomas se componen de una lmina de membrana interna, a la que se asocian los tonolamentos, y una placa de membrana externa, la cual se une a la lmina basal por medio de la integrina 6 4 y la laminina 5. Las uniones hermticas, los desmosomas en cinturn y los hemidesmosomas son uniones de anclaje. Las uniones comunicantes no actan como uniones de anclaje, sino que representan conexiones de comunicacin entre clulas adyacentes. La unidad bsica de la unin comunicante es el conexn, formado por seis molculas de conexinas dispuestas alrededor de un canal central.
Figura 1-16. Znula adherente (desmosoma en cinturn)

Afadina Filamento de actina Complejo afadina-nectina
Nectina
Unin hermtica Placa
Complejo de catenina
Cadherinas (desmocolinas y desmoglenas)
Membrana Filamentos plasmtica de actina
Placa: desmoplaquina, placoglobina y placofilina
del Ca2+, como se ha descrito anteriormente. La gura 1-18 recoge algunos trastornos hereditarios de algunos de los componentes que integran el desmosoma. Los genes correspondientes a las cadherinas desmosmicas humanas codi can cuatro desmoglenas y tres desmocolinas, cuyos dominios citoplsmicos interaccionan con la placoglobina y la placo lina. La desmoplaquina interacciona con lamentos intermedios de queratina en la epidermis, la desmina en los discos intercalados y la vimentina en las meninges. La desmoglena 1 y la desmoglena 3 mantienen la capacidad de cohesin de la epidermis, un epitelio escamoso estraticado. La sntesis de autoanticuerpos contra la desmoglena 1 pr oduce una enfermedad ampollosa (alteracin de la adhesin celular) de la piel denominada pngo foliceo (v. g. 1-17). Los hemidesmosomas son estructuras asimtricas que anclan el dominio basal de una clula epitelial con la lmina basal sub yacente (v. g. 1-19). La organizacin de los hemidesmosomas di ere respecto a las de la mcula adherente o el desmosoma. E l hemidesmosoma se compone de: 1. U placa citoplsmica interna asociada a lamentos intermedios (tambin na conocidos como queratinas o tonolamentos) 2. U placa de membrana externa que une el hemidesmosoma a la lmina basal na por medio de lamentos de anclaje (formados por laminina 5) e integrina 6 4 A pesar de que los hemidesmosomas presentan el aspecto de medio desmosoma, ninguno de los componentes bioqumicos del desmosoma est pr esente en los primeros. Los hemidesmosomas incrementan la estabilidad global de los tejidos epiteliales a travs de la unin de los lamentos intermedios del citoesqueleto a los elementos que forman parte de la lmina basal. Se abordarn otros detalles de los hemidesmosomas y su papel en las enfermedades autoinmunitarias de la piel al tratar la estructura de los lamentos intermedios en el apar tado Citoesqueleto. Las uniones comunicantes son simtr icas y estn formadas por unas pr otenas integrales de membrana denominadas conexinas. La asociacin de seis monmeros
Figura 1-17. Desmoglenas en los trastornos cutneos: pngo foliceo

La desmoglena 1 predomina por encima de la capa espinosa. La desmoglena 3 predomina en las capas basal y espinosa. Capas de la epidermis Capa crnea Capa granulosa Capa espinosa Capa basal Dermis Lmina basal El pnfigo foliceo es una Depsitos intercelulares de enfermedad ampollosa mediada por Lmina basal inmunoglobulinas en las capas autoanticuerpos en la que los anticuerpos superficiales de la epidermis en contra la desmoglena 1 provocan la contraposicin a las capas basales. prdida de adhesin de los queratinocitos en las capas superficiales de la epidermis. Imagen de inmunofluorescencia tomada de Weedon D: Skin
Pathology. 2nd edition. London, Churchill Livingstone, 2002.
Ampolla
Capas superficiales de la epidermis
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Figura 1-18. Mcula adherente (desmosoma puntual)

Lnea media densa Placas densas citoplsmicas con las protenas desmoplaquina, placoglobina y placofilina Cadherinas (desmocolinas y desmoglenas) Los filamentos intermedios de queratina se anclan a la desmoplaquina Trastornos hereditarios que afectan a la piel y al corazn Desmoglenas (Dsg 1-4). Cadherinas. Mutaciones en los genes de las desmoglenas: queratodermia palmoplantar estriada. Hipotricosis localizada. Desmocolinas (Dsc 1-3). Cadherinas. No se ha definido ninguna enfermedad. Queratina Placa externa Placa interna Vimentina densa densa Desmina
Membrana plasmtica Membrana plasmtica Filamentos intermedios de queratina (tonofilamentos) Membrana plasmtica Placa externa densa Placa interna densa Lnea media densa
Placoglobina (-catenina) y placofilinas (1-4). La placoglobina interacciona directamente con la regin intracelular de las cadherinas y se une, asimismo, a la desmoplaquina y a las placofilinas. Estas ltimas intervienen en el reclutamiento de protenas a la membrana plasmtica. Mutacin en el gen de la placoglobina: enfermedad de Naxos (miocardiopata arritmgena del ventrculo derecho [MAVD], pelo lanudo y queratodermia palmoplantar). Los adipocitos sustituyen a los miocardiocitos.
Desmoplaquinas (I-II). Las desmoplaquinas unen la regin intracelular de las cadherinas a los filamentos intermedios de queratina, vimentina o desmina). Mutacin en el gen de la desmoplaquina: MAVD. Pelo lanudo.
de conexina da lugar a un conexn, una estructura cilndrica hueca que atraviesa la membrana plasmtica. La disposicin terminoterminal de los conex ones en clulas adyacentes origina un canal directo de comunicacin (1,5-2 nm de dimetro) entre el citoplasma de dichas clulas ( g. 1-20). Los conexones presentan una tendencia a agregarse y pueden formar placas de unos 0,3 mm de dimetro. Estas uniones facilitan el mo vimiento de molculas de 1,2 nm de dimetr o (p. ej., Ca2+ y monofosfato de adenosina cclico [cAMP]) entr e las clulas. Los canales axiales de conexin se cierran cuando la concentracin de Ca 2+ es alta. Esta unin es responsable del acoplamiento qumico y elctrico de clulas adyacentes. Un ejemplo tpico son las clulas del msculo cardaco, que se conectan por medio de uniones comunicantes para la transmisin de seales elctricas.
Figura 1-19. Hemidesmosoma
Filamentos de queratina
Epidermis Filamentos intermedios de queratina (tonofilamentos) Lmina Lmina Placa Membrana plasmtica Placa
Lmina basal
Filamentos de anclaje (laminina 5)
Integrina 6 4
Filamentos de anclaje (laminina 5) Lmina basal
1. EPITELIO
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Figura 1-20. Uniones comunicantes

El canal intercelular es un canal axial que permite el paso directo de pequeas molculas de transmisin de seales entre clulas adyacentes con el fin de coordinar la respuesta celular. cAMP Ca2+ Membrana plasmtica 1 Los agregados de canales intercelulares reciben el nombre de uniones comunicantes debido al angosto espacio extracelular que separa las membranas plasmticas adyacentes.
Ca2+ cAMP
Conexn Hendidura
Membrana plasmtica 2
Conexina Seis monmeros de conexina se ensamblan para originar un conexn hexamrico, un cilindro con un canal abierto central. Los conexones de la membrana plasmtica de una clula se alinean con los de otra adyacente para formar un canal intercelular hidrfilo entre los citoplasmas de ambas clulas.
Importancia clnica: mutaciones de las conexinas en la enfermedad humana
La mutacin de los genes que codi las conexinas produce diversas enfermedades. can Las mutaciones del gen conexina 26 (Cx26), cuyo nivel de expresin es elevado en las clulas de la cclea, se asocia a hipoacusia. Las mutaciones del gen conexina 32 (Cx32) se obser van en la neuropata desmielinizante de Char cot-Marie-Tooth ligada al cr omosoma X, la cual cursa con una degeneracin progresiva de los nervios perifricos, y se distingue por la debilidad y la atroa musculares distales, as como por la alteracin de los r eejos tendinosos profundos. La protena conexina 32 se expresa en las clulas de Schwann, las cuales intervienen en la pr oduccin de las v ainas de mielina que r odean los ax ones del sistema nervioso perifrico (v. captulo 8, Tejido nervioso). Las uniones comunicantes conectan diferentes porciones de las v ainas de mielina de una misma clula de Schwann en lugar de clulas distintas. La desaparicin de los conductos axiales funcionales en la mielina da lugar a la alteracin de la mielinizacin. Las mutaciones del gen conexina 50 (Cx50) se asocian a cataratas congnitas que originan ceguera. Las clulas seas (osteoblastos/osteocitos) se conectan entre s a travs de uniones comunicantes y expresan las conexina 43 (Cx43) y 45 (Cx45). La delecin del gen Cx43 condiciona anomalas esquelticas y r etraso en la mineralizacin sea.
MEMBRANA BASAL
Las integrinas intervienen en las interacciones entre las clulas y la matriz extracelular a travs de la unin al dominio RGD de la laminina y la bronectina (v. g. 1-11). La laminina y la bronectina son protenas peculiares de la matriz extracelular que se asocian a colgenos, pr oteoglucanos y otras pr otenas para formar la membrana basal, la lmina que sustenta a la may ora de los epitelios. La membrana basal consta de dos componentes ( g. 1-21 ): 1. Lalmina basal, una matriz extracelular similar a una sbana que se encuentra en contacto directo con las super cies de las clulas epiteliales. E l autoensamblaje de molculas de laminina con colgeno de tipo IV , entactina y pr oteoglucanos origina la lmina basal. 2. La lmina reticular, integrada por bras de colgeno, sostiene a la lmina basal y se contina con el tejido conjuntiv o.
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Figura 1-21. Membrana basal

Clula epitelial Rin (corteza) La membrana basal, un elemento extracelular que se encuentra en contacto directo con el dominio basal de las clulas epiteliales, puede visualizarse con el microscopio ptico en muestras teidas con el colorante de cido perydico de Schiff (PAS). En el microscopio electrnico, la membrana basal se divide en dos capas o lminas: 1. Una lmina basal, que contiene laminina, fibronectina, colgeno de tipo IV, proteoglucanos de tipo heparano sulfato y nidgeno (tambin llamado entactina). 2. Una lmina reticular, formada por fibras de colgeno de tipo III (fibras reticulares) Ambas capas se componen de glucoprotenas. Son positivas para la tincin de PAS.
Ncleo
Dominio basal
Lmina basal Lmina reticular
En el microscopio electrnico, ambas lminas se visualizan como una membrana basal nica en muestras teidas con el colorante PAS.
El microscopio electrnico permite observar cada lmina como una entidad individual. .
Lmina basal
Lmina reticular
Ncleo de un fibroblasto que sintetiza componentes de la lmina reticular
Clula epitelial
Cuadro 1-D | Reaccin de cido perydico de Schiff (PAS) El mtodo de PAS es una tcnica histoqumica muy utilizada para detectar grupos 1,2-glicol o 1,2-aminoalcohol, como los presentes en el glucgeno, el moco y las glucoprotenas. El cido perydico, un oxidante, convierte estos grupos en aldehdos. El reactivo de Schiff, una fucsina incolora, reacciona con los aldehdos para dar lugar a un producto de color rojo-violeta (magenta) caracterstico. Algunas estructuras destacadas que se revelan mediante esta tcnica son la membrana basal, el glucocliz, la mucosidad fabricada por las clulas caliciformes, las hormonas glucoproteicas almacenadas en clulas de la hipsis y los colgenos.
Las lminas basal y r eticular pueden distinguirse en la micr oscopia electrnica. En el micr oscopio ptico, el conjunto de las lminas basal y r eticular recibe el nombre de membrana basal, la cual se r econoce mediante la tincin de cido perydico de Schiff (PAS) (v. g. 1-21; v. cuadro 1-D). La lmina basal se ocupa de funciones espec cas en los distintos tejidos. La lmina basal doble del corpsculo r enal representa el elemento ms impor tante de la barrera de ltracin glomerular a lo largo del paso inicial de formacin de la orina (v. captulo 14, Aparato urinario). En el msculo esqueltico, la lmina basal mantiene la integridad tisular y su alteracin condiciona la aparicin de distroas musculares (v. captulo 7, Tejido muscular). Los componentes de la lmina basal orientan a las clulas migratorias hacia la cresta gonadal en preparacin para el desarrollo de las gnadas durante la migracin de las clulas germinales. La lmina basal no se limita a sustentar a los epitelios, sino que tambin desempea otras funciones en clulas no epiteliales. La laminina (g. 1-22) es una pr otena en forma de cr uz formada por tr es cadenas: la cadena , la cadena y la cadena . Las molculas de laminina se asocian entre s para formar un polmero similar a una red. La laminina y el colgeno de tipo IV son los dos componentes fundamentales de la lmina basal de cuya sntesis se encargan algunas clulas epiteliales que descansan sobr e dicha lmina.
1. EPITELIO
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Figura 1-22. Laminina y bronectina

Cadena Cadena Sitio de unin para colgeno Colgeno Cadena Nidgeno (entactina) Sitio de unin celular (RGD) para integrinas Sitio de unin para heparina/ heparano sulfato y -distroglucano Laminina La laminina es el componente principal de la lmina basal. Se compone de tres cadenas de polipptidos unidas por enlaces disulfuro, las cadenas , y . Las variantes de cada cadena dan lugar a varias isoformas de la laminina con estructuras y funciones diferentes. Las lamininas poseen sitios de unin para los receptores de la superficie celular (integrinas), colgeno de tipo IV y otras protenas de adhesin (como nidgeno, tambin llamado entactina). Los monmeros de laminina se asocian entre s para dar lugar a una red que forma parte de la lmina basal. Fibronectina Fibrina C-terminal Colgeno La fibronectina es una glucoprotena formada por dos cadenas idnticas unidas por enlaces disulfuro prximos al extremo C. Se conocen dos formas de fibronectina: 1. Fibronectina plasmtica, sintetizada por los hepatocitos y secretada al torrente circulatorio. 2. Fibronectina celular, producida por los fibroblastos, que forma parte de la matriz extracelular. La fibronectina posee sitios de unin para integrinas, colgeno, heparano sulfato y fibrina.
Integrina 61
Proteoglucano
S S S S
Proteoglucanos (heparano sulfato)
Sitios de unin para integrina (51)
La laminina posee sitios de unin para el nidgeno (tambin llamado entactina), proteoglucanos (en particular, perlecano heparano sulfato), el -distroglucano (v. captulo 7, Tejido muscular) y las integrinas. La bronectina (v. g. 1-22) consta de dos cadenas proteicas unidas por enlaces disulfuro. Se trata de la molcula de adhesin ms impor tante de la matriz extracelular del tejido conjuntiv o y es sintetizada por los broblastos. La bronectina muestra sitios de unin para la heparina presente en los proteoglucanos, varios tipos de colgeno (tipos I, II, III y IV) y brina (generada a partir del bringeno durante el proceso de coagulacin sangunea). Los hepatocitos sintetizan la bronectina circulante en el seno del hgado . Esta bronectina se diferencia de la producida por los broblastos por la ausencia de una o dos repeticiones (denominadas EDA y EDB por dominio extra A y B, r espectivamente) como consecuencia de un pr oceso alternativo de cor te y empalme del ARNm. La bronectina circulante se une a la brina, un elemento de los cogulos sanguneos formados en z onas daadas de los v asos sanguneos. El dominio RGD de la bronectina ja se asocia a la integrina expr esada en la super cie de las plaquetas activadas y el cogulo aumenta de tamao . Retomaremos la cuestin de la coagulacin sangunea o hemostasia en el captulo 6, S angre y hematopoyesis.
Interacciones de las clulas entre s y con la lmina basal
En la gura 1-23 se r esumen los datos ms destacados sobr e las molculas de adhesin celular y las uniones celular es. Un epitelio es una lmina continua de clulas polarizadas sustentada por una membrana basal. La polaridad del epitelio depende de las uniones hermticas que dividen las clulas polarizadas en r egiones apical y basolateral. Las uniones hermticas contr olan la va paracelular de transporte de solutos, iones y agua, y forman un cinturn alr ededor del permetro de cada clula. Las clulas endoteliales, que integran el epitelio escamoso simple, se unen por medio de uniones hermticas y desmosomas puntuales sometidos a una estr echa regulacin
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Figura 1-23. Resumen de las uniones celulares y las molculas de adhesin celular
Znula adherente (desmosomas en cinturn) Se compone de una placa densa asociada al complejo de las cateninas (-catenina, - catenina y -catenina), -actinina, vinculina y formina-1. Los filamentos de actina se asocian al complejo de las cateninas. Las cadherinas atraviesan el espacio intercelular y el complejo afadina-nectina conecta las placas densas adyacentes.
Superfamilia de las inmunoglobulinas Las molculas de adhesin celular pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas debido a que poseen dominios semejantes a los de estas molculas. Las CAM no dependen del Ca2+ para mantener interacciones homfilas adhesivas.
Uniones hermticas (uniones oclusivas) Estn formadas por protenas transmembrana ocludina y claudinas, asociadas a ZO-1, ZO-2, ZO-3 y el complejo afadina-nectina en el lado intracelular. La ocludina y las claudinas sellan el espacio intercelular. Complejo Claudina de cateninas Ocludina Complejo afadina-nectina ZO-1, ZO-2 y ZO-3
Actina
Complejo afadina-nectina Cadherinas Selectina Las selectinas son molculas dependientes de Ca2+ con afinidad de unin por los hidratos de carbono. Desempean una funcin destacada en el proceso de homing.
Mcula adherente (desmosoma puntual) Los desmosomas son estructuras simtricas formadas por: 1) placas con desmoplaquina; 2) cadherinas de unin (principalmente desmocolinas y desmoglenas), y 3) filamentos de queratina asociados a dichas placas.
Hemidesmosomas Los hemidesmosomas se componen de una lmina interna, el sitio de anclaje del filamento intermedio queratina, y una lmina externa, asociada a la basal a travs de dos elementos destacados: filamentos de anclaje (laminina 5) e integrina 64.
Integrinas En la superficie extracelular, las integrinas interaccionan directamente con la fibronectina y la laminina. En el lado intracelular, las subunidades de las integrina interaccionan con la actina a travs de protenas intermedias (-actinina, vinculina y talina).
S S S S
Perlecano Laminina La laminina consta de tres cadenas de polipptidos (, y ) con sitios de unin para el colgeno de tipo IV, el proteoglucano perlecano, las integrinas y el nidgeno.
Fibronectina Proteoglucanos Los proteoglucanos (principalmente, heparano sulfato perlecano) interaccionan directamente con la fibronectina y la laminina. Colgenos Colgeno de tipo IV Nidgeno (entactina)
encaminada a mantener la integridad del endotelio y a proteger los vasos de la permeabilidad incontrolada, la in amacin y las r eacciones que conducen a la coagulacin sangunea en la luz (v. captulo 12, Aparato cardiovascular). Los leucocitos se unen a las supercies de las clulas endoteliales y migran a travs del endotelio hacia los tejidos subyacentes para acceder al foco de infeccin mediante un mecanismo conocido como diapdesis. Los leucocitos avanzan entre las uniones entre estas clulas al anclarse a las endoteliales activadas o en r eposo por medio de las molculas de adhesin de dichas clulas ICAM-1 y VCAM-1 (v. g. 1-10). ICAM-1 e VCAM-1 se asocian a las subunidades 2 y 1 de las integrinas de los leucocitos (v . g. 1-12). La cohesividad del epitelio depende de tres factores: las uniones celulares, las molculas de adhesin celular en general y la interaccin de las integrinas con la matriz extracelular , la mayor parte de la cual es pr oducida por los broblastos. La lmina basal r eviste una importancia clave en la diferenciacin de las clulas epiteliales durante la embriognesis. En la gura 1-23 se puede apreciar lo siguiente: 1. El dominio basal de las clulas epiteliales interacciona con la lmina basal a travs de los hemidesmosomas y las integrinas. Los hemidesmosomas, as llamados por su aspecto de medio desmosoma en las micr ofotografas electrnicas, se anclan a la lmina basal fuera de la clula y a una ed de lamentos intermedios de queratina r
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Figura 1-24. Inmunocitoqumica

Generalmente se utilizan dos tcnicas: la inmunocitoqumica directa e indirecta. Las clulas que se estudian mediante tcnicas de inmunocitoqumica deben ser permeables, lo que suele conseguirse por medio de un detergente, de tal modo que las molculas de anticuerpo (inmunoglobulinas) puedan entrar en la clula para unirse a un antgeno. Inmunofluorescencia directa La molcula de inmunoglobulina no puede pasar al citoplasma de una clula intacta.
Antgeno
Tras el tratamiento con detergentes, la inmunoglobulina pasa al interior celular y se une al antgeno.
dentro de ella mediante un complejo lmina-placa. Las mutaciones en los elementos del hemidesmosoma dan lugar a ampollas grav es en el seno de la piel debido a la desaparicin de la integridad de las molculas de anclaje. 2. Las integrinas interaccionan dir ectamente con la laminina y la bronectina, en especial el dominio RGD al que se unen aquellas. E n el interior de la clula, las integrinas interaccionan con microlamentos de actina y conectan el entorno extracelular con el espacio intracelular . Como sabemos, algunas pr otenas ADAM emplean su dominio desintegrina para evitar la unin de las integrinas a div ersos ligandos presentes en la matriz extracelular. 3. Los colgenos y los proteoglucanos no interaccionan de forma dir ecta con el dominio basal de las clulas epiteliales, sino que lo hacen a travs de la laminina y la bronectina, las cuales poseen sitios espec cos de unin para los colgenos, el proteoglucano perlecano y el nidgeno . 4. Los dominios laterales de las clulas epiteliales adyacentes se comunican por medio de uniones comunicantes (que no apar ecen en la gura 1-23). A diferencia de las uniones hermticas y los desmosomas en cinturn y puntuales, las uniones comunicantes no constituyen sistemas de anclaje. Se componen de canales intercelulares que conectan el citoplasma de clulas adyacentes y actan como uniones comunicantes. 5. Las cadherinas y el complejo afadina-nectina estn pr esentes en las uniones hermticas y la znula adher ente, a las que se asocian los micr olamentos de actina.
CITOESQUELETO
El tratamiento con detergentes convierte a la membrana plasmtica en permeable ante el anticuerpo. La inmunocitoqumica directa engloba la aplicacin deun anticuerpo especfico o alguna molcula con afinidad de unin especfica para un antgeno asociado a un marcador visible. Los marcadores visibles unidos a la molcula de la inmunoglobulina pueden ser un colorante fluorescente, como una fluorescena (fluorescencia verde) o rodamina (fluorescencia roja). Al examinar la muestra con el microscopio de fluorescencia, los componentes marcados aparecen como estructuras fluorescentes brillantes. La inmunofluorescencia directa requiere un paso nico de incubacin y representa un sencillo sistema de deteccin. Las partculas de oro (electrodensas) unidas a las molculas de inmunoglobulina son consideradas unos marcadores cmodos para el estudio inmunocitoqumico en el microscopio electrnico. Inmunofluorescencia indirecta Antgeno Segundo anticuerpo con un marcador fluorescente
Primer anticuerpo sin marcador fluorescente unido al antgeno
El citoesqueleto es una red tridimensional de protenas distribuidas en el citoplasma de las clulas eucariotas. El citoesqueleto interviene en: 1. El movimiento celular (deslizamiento de clulas sanguneas a lo largo de las paredes de los vasos, migracin de broblastos durante la cicatrizacin y movimiento de clulas durante el desarr ollo embrionario). 2. El soporte y el refuerzo de las clulas 3. La fagocitosis 4. La citocinesis 5. La adherencia de una clula con otras y con la matr iz extracelular 6. La modicacin de la mor fologa celular Inicialmente, los componentes del citoesqueleto se identi caron en estudios de microscopia electrnica. En los primer os trabajos se describa un sistema de cablescitoplsmicos que se clasi caron en tres grupos segn su tamao: 1. Microlamentos (7 nmde grosor) 2. Filamentos intermedios (10 nmde grosor) 3. Microtbulos (25 nmde dimetro) Los estudios bioqumicos, consistentes en la extraccin de pr otenas citoesquelticas de la clula por medio de detergentes y sales y en la traduccin in vitro de molculas especcas de ARNm, pusieron de maniesto que cada tipo de lamento posee una organizacin proteica exclusiva. Tras ser puri cadas, las protenas citoesquelticas se emplearon como antgenos para la pr oduccin de anticuerpos. Estos se utilizan como herramientas para la localizacin de div ersas protenas citoesquelticas en la clula. La localizacin inmunocitoqumica de protenas citoesquelticas (g. 1-24) y el tratamiento de la clula con distintas sustancias qumicasque alteran la organizacin normal del citoesqueleto han sido de enorme utilidad para comprender la organizacin y la funcin del citoesqueleto .
Microlamentos
La inmunocitoqumica indirecta precisa de la utilizacin de un segundo anticuerpo unido a un marcador visible. Este segundo anticuerpo se une al primero no marcado y especfico para un antgeno determinado. El mtodo directo implica dos incubaciones (una para el primer anticuerpo y otra para el segundo) y posee una sensibilidad mayor en la identificacin de antgenos.
La actina representa el principal componente de los microlamentos. Los lamentos de actina estn formados por monmer os globulares (actina G, 42 kD a) que se polimerizan para originar lamentos helicoidales asimtricos (actina F). La actina es un componente citoesqueltico v erstil y abundante que forma haces estticos y contrctiles, as como r edes lamentosas determinadas por pr otenas de unin a actina y por su localizacin y su funcin especiales en la clula. Los haces de actina F aparecen en las microvellosidades de las clulas epiteliales intestinales (g. 1-25 ) y renales (borde en cepillo) y los ester eocilios de las clulas ciliadas del odo interno . Hemos comentado que la por cin intracelular de las molculas de adhesin celular cadherinas e integrina 1 interaccionan con la actina F mediante pr otenas
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Figura 1-25. Haces de actina F del eje de una microvellosidad intestinal

Borde en cepillo formado por una capa compacta de microvellosidades en el dominio apical de las clulas epiteliales cilndricas intestinales. El borde en cepillo aparece, igualmente, en las clulas epiteliales cbicas del tbulo contorneado proximal (nefrona).
Microvellosidad intestinal Glucocliz Caperuza La formina una protena de la caperuza que interacciona con los extremos romo en crecimiento rpido de la actina F favorece el alargamiento de la actina F no ramificada. Protenas de ligamiento de membrana Miosina I Calmodulina Raicillas de los filamentos de actina Red terminal Isoforma de espectrina que conecta las fibrillas Filamentos intermedios (queratina) Actina F Clula caliciforme Formina Glucocliz
Haz de actina
Protenas de entrecruzamiento de actina Villina Fimbrina
de unin (v. gs. 1-8 y 1-11 ). Como se abor d en el captulo 6, S angre y hematopoyesis, la actina, junto a la espectrina, forma una r ed lamentosa en la cara interna de la membrana de los eritr ocitos que desempea un papel esencial para el mantenimiento de la mor fologa y de la integridad de estas clulas. La espectrina es un tetrmero que consta de dos cadenas polipeptdicas difer entes ( y ). El crecimiento de los lamentos de actina tiene lugar en ambos extremos, si bien uno de ellos ( extremo romo o extremo positivo) aumenta de tamao con may or rapidez que el otr o (extremo puntiagudo o extremo negativo). Los nombres se deben al aspecto de punta de echa de la cabeza de la miosina unida en ngulo a la actina. Los lamentos de actina se rami can en el margen adelantado (lamelipodio) de las clulas que inter viene en la motilidad celular y en la interaccin con otros tipos celulares. La actina F comienza a rami carse a partir de la cara lateral de un lamento de actina preexistente por accin de Arp2/3 (protena relacionada con actina), un complejo nucleador de actina compuesto por siete pr otenas (g. 1-26 ). La formina regula el ensamblaje de la actina no rami cada en las pr oyecciones celulares, como las microvellosidades intestinales (v. g. 1-25). Los monmeros de actina poseen un sitio de unin para trifosfato de adenosina (ATP), el cual se hidroliza a difosfato de adenosina (ADP) conforme avanza el proceso de polimerizacin. La polimerizacin de la actina depende del A TP (v. cuadro 1-E). La cintica de la polimerizacin de actina implica un mecanismo denominadocinta continua: los monmeros de actina G ensamblados en un extr emo del lamento se separan simultneamente del otr o extremo (v. g. 1-26). Cuatro tipos de pr otena controlan la cinta continua (v. g. 1-26), como se detalla a continuacin: 1. Latimosina secuestra agregados de monmeros de actina en el interior de las clulas.
1. EPITELIO
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Figura 1-26. Papel de las protenas de unin a actina en el ensamblaje y desensamblaje de la actina F
Timosina La actina G transporta una molcula de ATP (una por monmero)
Extremo romo
Profilina Protenas secuestradoras/reguladoras La timosina secuestra la actina G en un depsito de reserva; la profilina se une a la actina G y regula el ensamblaje de los filamentos. Extremo romo Polimerizacin Se forma una caperuza de ATP que facilita la adicin de nuevos monmeros de actina G. Extremo romo El extremo en crecimiento de un filamento de actina en proceso de polimerizacin Las citocalasinas se unen al extremo en crecimiento rpido (extremo positivo), lo que impide la incorporacin de nuevos monmeros de actina G. Se forma una caperuza de citocalasina. Las citocalasinas son alcaloides sintetizados por hongos.
Se hidroliza ATP. La actina G porta molculas de ADP unidas.
La gelsolina corta los filamentos de actina y se une al extremo positivo recin formado para impedir su ulterior polimerizacin (cobertura).
7 nm de espesor
Arp2/3 un complejo formado por siete protenas inicia la polimerizacin de la actina F desde los laterales de un filamento preexistente.
Filamento de actina cortado Extremo romo con caperuza
La faloidina se une a los filamentos de actina para impedir su despolimerizacin. La faloidina unida a un colorante fluorescente se utiliza para teir los filamentos de actina en las clulas. Se trata de un alcaloide producido por el hongo Amanita phalloides.
Extremo puntiagudo Despolimerizacin La profilina regula el ensamblaje de los filamentos al catalizar el intercambio del ADP unido a la actina G por ATP y propicia la transferencia de monmeros de actina desde la timosina hacia el extremo romo del filamento de actina. Actina G con ADP unido
Gelsolina, una protena con funciones de escisin y cobertura Extremo puntiagudo Extremo en despolimerizacin de un filamento de actina en crecimiento La cofilina, un factor de despolimerizacin de la actina, estimula la disociacin de la actina y el ADP unido a ella.
Extremo puntiagudo
Las latrunculinas alteran los filamentos de actina al unirse a la actina G e inducen de forma directa la despolimerizacin de la actina F. Provienen de la esponja Latrunculla magnifica, que coloniza el mar Rojo.
ATP
ADP
El concepto de cinta continua se refiere al equilibrio dinmico existente entre los extremos de polimerizacin y despolimerizacin para mantener la longitud de los filamentos de actina.
Un filamento de actina tipo cinta continua est formado por monmeros de actina G unidos a ATP en el extremo romo, mientras que los situados en el puntiagudo estn asociados a molculas de ADP.
Cuadro 1-E | Microlamentos Los microlamentos se componen de actina G, monmeros globulares que se polimerizan en presencia de ATP para dar lugar a un polmero lamentoso largo, la actina F, de 7 nm de espesor. La actina F presenta una polaridad denida: un extremo romo o de polimerizacin y un extremo puntiagudo o de despolimerizacin. La prolina lleva a cabo dos funciones: corta la actina F y regula su ensamblaje al catalizar el intercambio del ADP unido a la actina G por ATP. La colina es un factor de despolimerizacin. El complejo Arp2/3 pone en marcha la ramicacin de la actina F. La cinta continua, el equilibrio dinmico entre los extremos en polimerizacin y despolimerizacin de la actina F.
2. La prolina impide la enucleacin de la actina G y fav orece el alargamiento de la actina F en el extr emo romo. La pr olina potencia el ensamblaje de los monmeros de actina G en lamentos al facilitar el inter cambio de ADP asociado por ATP. Tan slo los monmer os de actina unidos a A TP se ensamblan para formar lamentos. 3. Lacolina (tambin llamada factor despolimerizador de actina) pone en mar cha la despolimerizacin de la actina asociada a ADP en el extr emo puntiagudo. De forma semejante a las dos anterior es, la colina forma un complejo dimrico con la actina G. 4. Lagelsolina lleva a cabo una doble funcin: acta como protena de cubierta y evita la prdida y la adicin de monmer os de actina, que tambin lo hace como protena de cor te. En presencia de Ca 2+, la gelsolina fragmenta los lamentos de actina y se mantiene unida al extremo romo, de modo que forma una caperuza que impide el crecimiento de los lamentos. El ensamblaje de los monmeros de actina G en lamentos y la organizacin de estos en haces gr uesos est sometida al contr ol de div ersos tipos de protenas de unin a actina o r elacionadas con actina. Unas protenas semejantes a la actina, la villina y la mbrina, mantienen unido un haz de lamentos paralelos no ramicados de actina que conforman el eje de la microvellosidad. El haz se ancla a la membrana
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Cuadro 1-F | Sndrome de Wiskott-Aldrich El complejo Arp2/3 es necesario para la enucleacin del ensamblaje de los entramados de lamentos de actina. La funcin de las clulas fagocticas y las plaquetas depende de la presencia de un esqueleto funcional de actina. Un gran nmero de protenas activa el complejo Arp2/3. En ausencia de las mismas, este complejo es inactivo. Dos protenas clave que se unen al complejo Arp2/3 para activarlo son la familia de protenas del sndrome de Wiskott-Aldrich, (WASP) integrada por varios componentes (WASP, WASP neuronal [nWASP] y SCAR/WAVE 1-3 [supresor del receptor de cAMP/protena homloga de verprolina de la familia WASP 1-3]). Otros miembros pertenecen a la familia de la cortactina, a la que pertenecen esta y la protena especca hematopoytica. Las mutaciones del gen WASP, localizado en el cromosoma X, se asocian a infecciones respiratorias recidivantes (funcin defectuosa de los linfocitos T y B), la disminucin del nmero de plaquetas (trombocitopenia), que incrementa la tendencia a la hemorragia, y el eccema cutneo. El sndrome de Wiskott-Aldrich afecta a los hombres pero no a las mujeres.
plasmtica a travs de los braz os laterales de la miosina I y la protena quelante de Ca2+ calmodulina (v. g. 1-25). Arp2/3 y otras pr otenas reguladoras forman un complejo de enucleacin para el ensamblaje de los lamentos ramicados de actina. Estos lamentos se ensamblan en el margen adelantado de la clula en mo vimiento. En la micr ovellosidad, las forminas (unas protenas con unos dominios muy conser vados de homologa con formina, FH1 y FH2), en lugar del complejo ARp2/3, par ecen controlar el alargamiento de los lamentos no rami cados de actina mientras permanecen unidas al extremo romo (v. cuadro 1-E). Las forminas se localizan en el extr emo de la microvellosidad, la regin de la caper uza (v. g. 1-25). Los hombres portadores de anomalas en pr otenas activadoras del complejo Arp2/3 y, especialmente, en una pr otena de la familia de protenas del sndrome de Wiskott-Aldrich (WASP), presentan infecciones respiratorias recidivantes como consecuencia de la inmunode ciencia hereditaria que cursa con tr ombocitopenia (nmero bajo de plaquetas) desde su nacimiento y el eccema cutneo a par tir del primer mes de vida (v. cuadro 1-F). La mutacin se her eda de la madre, portadora sana de la mutacin gnica. Las microvellosidades y los ester eocilios son estr ucturas comparables, aunque se diferencian por su longitud y por el nmer o de lamentos de actina: las microvellosidades intestinales presentan una longitud de 1-2 m, tienen un gr osor de 0,1 m y se componen de 20 a 30 haces de lamentos de actina; los estereocilios de las clulas ciliadas del odo interno muestran una morfologa alada en su base y una longitud comprendida entre 1,5 y 5,5 m, y cada haz de actina contiene hasta 900 lamentos de esta molcula. Las clulas ciliadas son muy sensibles a los desplazamientos mecnicos y cualquier mo vimiento leve de uno de ellos se ampli ca en cambios del potencial elctrico que se transmiten hacia el encfalo . Las clulas ciliadas del odo interno se tratan en el captulo 9, rganos sensoriales: visin y audicin.
Microtbulos
Los microtbulos estn formados por dmeros de tubulina (g. 1-27 v. cuadro 1-G). ; Cada uno de estos dmer os se compone de dos molculas de tubulina unidas de forma estrecha: -tubulina y -tubulina. Las subunidades de tubulina se disponen en unas hileras longitudinales llamadas protolamentos. La asociacin de 13 pr otolamentos uno al lado del otr o da lugar a un cilindr o de microtbulos con un eje central hueco. El dimetro del microtbulos es de 25 nm. De forma similar a los lamentos de actina, la estr uctura de los micr otbulos est polarizada. Poseen un extremo positivo, que se alarga con may or rapidez que el extremo negativo (v. g. 1-27). A diferencia de dichos lamentos, casi todos los micr otbulos individuales sufren etapas alternas de crecimiento lento y despolimerizacin rpida. Este proceso, conocido como inestabilidad dinmica, engloba tr es pasos fundamentales: 1) una fase de polimerizacin, en la que se aaden subunidades de GTP-tubulina al extremo positivo del microtbulos y se une una caperuza de GTP que facilita el alargamiento posterior; 2) liberacin de fosfato hidr olizado (Pi) del GTP unido a la tubulina, y 3) una fase de despolimerizacin, en la que se escinden subunidades de GTP-tubulina del extremo negativo a una v elocidad alta. La fr ecuencia transicional de la polimerizacin a la despolimerizacin recibe el nombre de catstrofe, mientras que la frecuencia transicional de la despolimerizacin a la polimerizacin se denomina rescate. Las protenas asociadas a los micr otbulos (MAP) modican la estabilidad de estas estructuras. Las MAP se dividen en dos gr upos: 1) MAP clsicas, como MAP1A, MAP1B, MAP2 y tau, y 2) MAP no clsicas, como miembr os de las familias Lis1 y DCX. Las MAP estabilizan a los micr otbulos mediante la fosforilacin/desfosforilacin. En el captulo 7, Tejido muscular, se abor dar la importancia de la fosforilacin y la desfosforilacin mediada por tau en la enfermedad de Alzheimer. La ausencia de expr esin de Lis1 da lugar a una grav e enfermedad congnita del encfalo conocida como lisencefalia.
Centrosoma: un centro organizador de microtbulos
El centrosoma desempea tres funciones principales: 1) nuclea la polimerizacin de las subunidades de tubulina para formar microtbulos; 2) organiza los microtbulos en unidades funcionales, y 3) se duplica una v ez en cada ciclo celular.
1. EPITELIO
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Cuadro 1-G | Microtbulos Los microtbulos estn formados por dmeros de tubulina, y , que se polimerizan en presencia de GTP para originar hileras longitudinales de protolamentos. La asociacin de 13 de estos protolamentos da lugar a un cilindro o microtbulo de 25 nm de dimetro. Los microtbulos presentan una polaridad denida: un extremo positivo o de polimerizacin y un extremo negativo o de despolimerizacin. Los microtbulos sufren fases alternas de crecimiento y despolimerizacin rpidos, un proceso llamado inestabilidad dinmica. Los centrolos, los cuerpos basales y los axonemas de los cilios y los agelos contienen microtbulos en una disposicin determinada. La cinesina y la dinena citoplsmica, dos protenas motoras moleculares, utilizan los microtbulos como vas para el transporte de mercancas, contenidas o no en vesculas.
Figura 1-27. Ensamblaje de un microtbulo

-tubulina -tubulina GTP GTP Ensamblaje Extremo positivo Extremo en polimerizacin rpida -tubulina La mayora de los microtbulos individuales pasan por fases alternas de crecimiento lento y despolimerizacin, un proceso llamado inestabilidad dinmica. La inestabilidad dinmica se debe a la hidrlisis de los dmeros de tubulina unidos a GTP, la liberacin del fosfato hidrolizado y la posterior liberacin de las subunidades de GDP-tubulina. Cada protofilamento presenta una polaridad estructural definida: la -tubulina est expuesta en un extremo (el extremo positivo), mientras que la -tubulina lo hace en el extremo contrario (el extremo negativo). La polaridad es un aspecto clave de la dinmica de la polimerizacin de microtbulos y el movimiento direccional de los orgnulos a lo largo de los microtbulos y la separacin de los cromosomas durante la divisin celular. -tubulina Un protofilamento es una hilera lineal vertical de unidades de tubulina y que se alternan a lo largo de l. Una caperuza de GTP hace posible la incorporacin de nuevos dmeros de tubulina
Dmero de tubulina
Extremo negativo Extremo de polimerizacin lenta
25 nm de dimetro
Los microtbulos son cilindros huecos formados por 13 molculas de tubulina en disposicin concntrica que rodean a un canal central o luz.
Cuadro 1-H | Diferencias entre los centrmeros y los cinetocoros A menudo, los trminos centrmero y cinetocoro se aplican como si de sinnimos se tratara, aunque no tienen el mismo signicado. El centrmero (no el centrosoma) es el sitio cromosmico asociado a los microtbulos del huso mittico. Los centrmeros se reconocen citolgicamente como una regin angosta de cromatina en los cromosomas metafsicos, llamada constriccin primaria, que contiene ADN centromrico. El cinetocoro se compone de protenas asociadas a la cromatina centromrica de las cromtidas hermanas. El ensamblaje del cinetocoro depende exclusivamente de la presencia de secuencias de ADN centromrico. El centrmero y el cinetocoro intervienen en la unin de los microtbulos cinetocricos al huso.
Los centrosomas se componen de un par de centrolos rodeados de material pericentriolar, una sustancia amor fa electrodensa en la que abundan div ersas protenas, como la pericentrina y la -tubulina. Los centrosomas pertenecen al centro mittico, el cual conforma el aparato mittico (o meitico) junto al huso mittico (g. 1-28 ). centrolo es un cilindro El de pequeo tamao (0,2 m de ancho y 0,4 m de largo) formado por nuev e tripletes de microtbulos en una disposicin helicoidal. A diferencia de la mayora de los microtbulos citoplsmicos, caracterizados por la inestabilidad dinmica, los del centrolo destacan por su gran estabilidad. Los centrolos se disponen formando ngulos r ectos entre s a lo largo de la interfase. Se replican con anterioridad a la mitosis y forman dos pares. En el transcurso de la mitosis, los par es se localizan en extr emos opuestos de la clula, en los que dirigen la formacin del huso mittico o meitico. Se distinguen tres tipos de microtbulos que parten de los centrosomas: microtbulos radiados o astrales, encargados de anclar cada centr osoma a la membrana plasmtica; microtbulos cinetocricos, que unen el cinetocoro cromosmico a los centrosomas; y los microtbulos polares, que se extienden desde ambos polos del huso en el que se encuentran los centr osomas opuestos (v. g. 1-28). Los cromosomas no se pueden separar de forma corr ecta cuando los cinetocor os no se han ensamblado (v. cuadro 1-H). El material pericentriolar contiene el complejo anular de -tubulina y un gran nmero de pr otenas, como la pericentrina. Cada complejo anular de -tubulina
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Figura 1-28. Aparato mittico

Microtbulos radiados Centro organizador de microtbulos El aparato mittico (o meitico) consta de dos componentes: 1. El centro mittico 2. El huso mittico Los tres componentes del centro mittico son el centro organizador de microtbulos que rodea un par de centrolos y microtbulos radiados (tambin conocidos como microtbulos astrales) que anclan el centro mittico a la membrana plasmtica. El huso mittico est formado por dos clases principales de microtbulos que parten del centro mittico: los microtbulos cinetocricos, anclados a los centrmeros de los cromosomas metafsicos, y los microtbulos polares, que se solapan entre s en el centro de la clula y no se asocian a los cromosomas. Centrolos Centro mittico Cromosoma Centrmero Cinetocoro Microtbulos cinetocricos Microtbulos polares Huso mittico La protenas motoras (dinena/ dinactina) desplazan los cromosomas a lo largo de los microtbulos cinetocricos a medida que estos se acortan en la direccin de la flecha en el cinetocoro como consecuencia de la prdida de tubulina-GDP Microtbulo cinetocrico Dinena/dinactina
Los cinetocoros estn formados por varias protenas ensambladas en el ADN centromrico en el transcurso de la mitosis y la meiosis. La regin del cromosoma en la que tiene lugar el ensamblaje del cinetocoro es el centrmero.
Cinetocoro
Tubulina-GDP
Cromosoma
ADN centromrico
representa el lugar de enucleacin o el molde para el ensamblaje y el alargamiento de un microtbulo. Los centrolos no inter vienen directamente en la enucleacin de microtbulos en el centrosoma. Los dmeros de tubulina se asocian al anillo de -tubulina a travs de la subunidad de -tubulina. Por tanto, el extremo negativo de cada microtbulo se orienta hacia el centrosoma, y el positivo, en proceso de alargamiento, hacia fuera y queda libr e en el citoplasma.
Microtbulos en cilios y agelos
displasia renal, anomalas del aparato reproductor y dicultades de aprendizaje. El BBS se debe a una alteracin de los cuerpos basales y los cilios por una disfuncin del transporte basado en los microtbulos (transporte intraciliar), el cual es necesario para el ensamblaje, el mantenimiento y el funcionamiento de los cuerpos basales, los cilios y los agelos (transporte intraagelar). Se han identicado ocho genes BBS (BBS1-8). No se conoce bien el origen del grado de variabilidad clnica de la BBS.
Los centrolos dan lugar a los cuerpos basales, de estructura similar, a partir de los cuales se forman los cilios (v . g. 1-5) y los agelos. El sndrome de Bardet-Biedl se debe a una alteracin del ensamblaje de los cuerpos basales y los cilios debida al transporte anmalo de protenas liares (v. cuadro 1-I). Los cilios y los agelos son proyecciones citoplsmicas mviles que contienen un eje de micr otbulos denominado axonema (g. 1-29). Este consta de nueve dobletes de microtbulos perifricos que se disponen alrededor de un par central de micr otbulos. Esta organizacin se conoce como con guracin 9 + 2 (v. cuadro 1-J). Cada doblete perifrico se compone de un micr otbulo completo (denominado tbulo A, con 13 protolamentos) que comparte su pared con un segundo microtbulo parcialmente completo (tbulo B, con 10-11 protolamentos). Los espolones radiales parten del tbulo A hacia la v aina interna amorfa que rodea el par central de micr otbulos. Los dobletes perifricos adyacentes se unen a travs de la pr otena nexina. Desde ambos laterales de tbulo A se pr oyectan dos conjuntos de braz os proteicos: Cuadro 1-I | Sndrome de Bardet-Biedl los brazos interno y externo de dinena, una adenosina trifosfatasa (ATPasa) asociada a , El sndrome de Bardet-Biedl (BBS) es un trastorno los microtbulos. En presencia de ATP los cilios y agelos se inclinan como consecuencia pleiotrpico (multisistmico) que se maniesta con dis- del deslizamiento de los dobletes perifricos en r elacin con los dems. El deslizamiento troa retiniana asociada a la edad, obesidad, polidactilia, y la exin de los microtbulos son los mecanismos bsicos de su mo vimiento.
Importancia clnica: frmacos contra los microtbulos y esterilidad
Se dispone de dos gr upos de frmacos antimitticos que actan sobr e los microtbulos: compuestos desestabilizadores de los micr otbulos, los cuales inhiben su polimerizacin, y compuestos estabilizadores de los microtbulos, que inuyen en su funcin al eliminar la inestabilidad dinmica. El primer gr upo engloba la colchicina, la colcemida, la vincristina y la vinblastina, que se unen a la tubulina para inhibir la polimerizacin de los micr otbulos, lo que supone la parada de la mitosis. La colchicina forma pardel tratamiento te clnico de la gota. La vincristina y la vinblastina, deriv ados de alcaloides Vinca
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27
Figura 1-29. Axonema

Una de las principales funciones de la vaina interna y de los espolones radiales es la estabilizacin de la inclinacin del axonema. Las tectinas son protenas filamentosas que se extienden a lo largo de los microtbulos. Junto a los enlaces de nexina, las tectinas crean un andamiaje para los microtbulos o bien intervienen en el ensamblaje de las estructuras asociadas al axonema. Espoln radial Vaina interna
Tbulo A (13 protofilamentos) Tbulo B (10-11 protofilamentos) Enlace de nexina
9 8
1 2 3
Brazo externo de dinena Tbulo A
Tbulo B Espoln radial
7
Tectina Brazo externo de dinena
4 6 5
Membrana plasmtica Par central de microtbulos (cada uno con 13 protofilamentos) Cilios (corte transversal)
Brazo interno de dinena
La posicin relativa de los tbulos A y B y de sus brazos laterales de dinena confiere una polaridad definida y una orientacin en el sentido de las agujas del reloj al corte transversal del axonema (direccin 1 a 9).
Cuadro 1-J | Componentes principales de los axonemas ciliar y agelar Microtbulos: principal componente del axonema. Las protenas motoras emplean los microtbulos del axonema como vas para el transporte intraciliar o intraagelar de mercancas. De igual modo, el transporte axnico basado en los microtbulos depende de las protenas motoras. Tectinas: protenas semejantes a los lamentos intermedios que se extienden a lo largo de los microtbulos del axonema y parecen conferir resistencia mecnica adicional a este. Brazos de dinena: ATPasa responsable del movimiento ciliar y agelar. Las cabezas se encuentran en contacto con los microtbulos externos adyacentes a una distancia peridica y se desplazan a lo largo de ellos. Enlaces de nexina: una organizacin semejante a un cinturn que estabiliza a los nueve pares concntricos externos de los microtbulos. Espolones radiales: se proyectan desde cada uno de los nueve dobletes externos de los microtbulos hacia la vaina interna que rodea al par central. Vaina interna: una estructura que rodea el par central de microtbulos y se encuentra en contacto con el extremo globular de los espolones radiales.
aislados de las hojas de la planta vincaper vinca, son e caces frente a neoplasias hematolgicas infantiles (leucemias). La neur otoxicidad, debida a la alteracin del ujo axnico dependiente de micr otbulos desaparicin de los micr otbulos y de la unin de pr otenas motoras a micr otbulos y la mielodepr esin son dos efectos secundarios de los frmacos fr ente a los microtbulos. En el segundo gr upo gura el paclitaxel (procedente de la cor teza del tejo) y su efecto es el contrario: estabiliza los micr otbulos en lugar de inhibir su ensamblaje (g. 1-30). El paclitaxel se ha utilizado de forma fr cuente como tratamiento del cncer e de mama y o vrico. De manera similar a los alcaloides de la vinca, sus principales efectos secundarios son la neur otoxicidad y la supresin de la hematopoyesis. El sndrome de Kartagener es un trastorno autosmico recesivo que suele cursar con bronquiectasias (dilatacin permanente de br onquios y bronquolos) y esterilidad en el hombre. Este sndrome se debe a la existencia de anomalas estr ucturales en el ax onema (dinena defectuosa o ausente) que impiden el aclaramiento mucociliar en las vas r espiratorias (lo que origina infecciones persistentes) y reduce la movilidad de los espermatozoides y el transporte del vulo en el o viducto (lo que da lugar a esterilidad).
Microtbulos: vas del citoesqueleto para el transporte de mercancas por accin de las protenas motoras
El transporte de mercancas mediante vesculas u otros medios tiene lugar a lo largo de los microtbulos y la actina F Algunos motores moleculares especcos se asocian . a los microtbulos y la actina F para movilizar mercancas hacia determinados sitios intracelulares. Los motores moleculares basados en los microtbulos para el transporte a larga distancia de mercanca son la cinesina y la dinena citoplsmica. Los motores basados en la actina F son las miosinas no conv encionales Va y VIIa, encargadas del transporte a corta distancia. En el captulo 11, S istema tegumentario, se comentan otr os aspectos del mecanismo de transpor te de mer cancas basado en la actina F en r elacin con el transpor te de los melanosomas. A continuacin, se describen tr es ejemplos de transpor te de mercancas basado en los microtbulos en mamferos (v. cuadro 1-K):
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Figura 1-30. Compuestos que bloquean la funcin de los microtbulos

La unin de la colchicina a dmeros de tubulina impide su ensamblaje para formar microtbulos. Igualmente, la vinblastina y la vincristina, que forman parte de tratamientos antitumorales, inhiben la polimerizacin de la tubulina. El nocodazol es otra protena inhibidora de la polimerizacin de tubulina. Extremo positivo
-tubulina -tubulina
Complejo tubulina-colchicina
El paclitaxel se une a los microtbulos para impedir su polimerizacin. Esta molcula interrumpe la mitosis al alterar el ensamblaje y el desensamblaje dinmicos del huso mittico necesario para la segregacin de los cromosomas a las clulas hijas.
Los frmacos antimitticos son unos potentes inhibidores de la polimerizacin y la despolimerizacin de los microtbulos del huso mittico. Estos compuestos se unen a distintos sitios de la molcula de la tubulina y su combinacin puede ser ms eficaz desde el punto de vista teraputico.
Extremo negativo
Cuadro 1-K | Transporte de mercancas basado en los microtbulos por los motores moleculares Los microtbulos participan en el trco intracelular de material o mercancas incluidos o no en vesculas. Las protenas motoras moleculares, como la cinesina y la dinena citoplsmica, se encargan del transporte de mercancas a larga distancia, mientras que el transporte a corta distancia se da en los lamentos de actina. Se conocen tres sistemas de transporte principales basados en los microtbulos: 1) transporte axonmico, el cual incluye el transporte intraciliar y el transporte intraagelar; 2) transporte axnico, y 3) transporte intramanguito. El transporte axonmico es un mecanismo clave para el suministro de dmeros de tubulina y otras molculas al extremo distal de poli de los microtbulos de cilios y agelos. Los axonemas provienen de los cuerpos basales, unas estructuras derivadas de los centrolos que contienen microtbulos. El transporte axnico reviste una enorme importancia para el trco de vesculas cargadas con neurotransmisores en las sinapsis neuronales. El transporte intramanguito es necesario en los episodios morfogenticos durante el desarrollo de los espermatozoides. El manguito es una estructura temporal que contiene microtbulos asociada a un anillo perinuclear que se ensambla durante el alargamiento de la cabeza de la espermtida y, posteriormente, se desorganiza.
1. Transporte axonmico, el cual engloba los agelos (transporte intraagelar) y los cilios (transporte intraciliar) (g. 1-31). En el transporte axonmico, la cinesina y la dinena citoplsmica mo vilizan las partculas a lo largo de los dobletes de micr otbulos del axonema. El transporte axonmico defectuoso se traduce en el ensamblaje anmalo de los cilios y de los agelos, lo que se asocia a enfermedad renal poliqustica, degeneracin retiniana, disfuncin ciliar respiratoria y agenesia de la cola del espermatozoide. Como se ha apuntado anteriormente (v . cuadro 1-H), el sndrome de Bardet-Biedl es un trastorno debido a la disfuncin de los cuerpos basales/cilios como consecuencia de la producida en el transporte basado en los micr otbulos. 2. Transporte axnico, a lo largo del axn de las neur onas (v. g. 1-31). 3. Transporte intramanguito, a lo largo de los micr otbulos de una estr uctura temporal formada por micr otbulos, el manguito, que se organiza en el transcurso del alargamiento de la cabeza de la espermtida (v . captulo 20, Espermatogenia).
Transporte axnico
Los axones son las pr oyecciones citoplsmicas de las neur onas encargadas de la conduccin de los impulsos ner viosos. Las v esculas rodeadas de membrana que contienen neurotransmisores sintetizados en el soma de la neur ona viajan hacia la porcin terminal del axn, en el que v aca su contenido en la sinapsis. Los haces de microtbulos forman vas en el seno del axn para el transpor te de estas vesculas, el cual tiene lugar a travs de dos pr otenas motoras (v. g. 1-31): 1. Cinesina 2. Dinena citoplsmica Las cinesinas y las dinenas citoplsmicas intervienen en dos tipos de mo vimiento de transporte intracelular: 1. Movimiento saltatorio, denido por el movimiento continuo y aleatorio de las mitocondrias y las v esculas. 2. Transporte axnico, un movimiento intracelular ms dir ecto de estructuras limitadas por membranas. Las cinesinas y las dinenas citoplsmicas poseen dos cabezas de unin al A TP y una cola. La hidrlisis continua del ATP por accin de las ATPasas presentes en las
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Figura 1-31. Transporte intraciliar y axnico de mercancas

Transporte intraciliar
1 El transporte antergrado de mercancas a lo largo de un microtbulo corre a cargo de la cinesina.
Dmero de tubulina
Extremo negativo Cinesina Cuerpo basal Protenas balsa

3 1
Microtbulo
Extremo positivo
Sitio de ensamblaje de la tubulina Regreso de las protenas balsa, protenas del axonema ciliar o cualquier otro material al cuerpo celular.
Dinena citoplsmica Desensamblaje de la maquinaria motora molecular-mercanca complejo de protenas balsa.

3
2 El transporte retrgrado de mercancas a lo largo de un microtbulo depende de la dinena citoplsmica.
El mecanismo de transporte de mercancas mltiples podra basarse en un complejo de protenas balsa.
Transporte axnico Neurona Extremo negativo Cinesina

1 El transporte antergrado de una vescula a lo largo de los microtbulos depende de la cinesina.
Microtbulo
Axn
1
Extremo positivo
Sinapsis
Vescula sinptica reciclada Neurotransmisor Receptor del neurotransmisor liberado en la sinapsis
2 La dinena citoplsmica se ocupa del transporte
retrgrado de una vescula a lo largo de un microtbulo. Aparato de Golgi
Dinena citoplsmica
cabezas da lugar a energa. Los dominios de las cabezas interaccionan con los microtbulos, mientras que la cola se asocia a sitios de unin de r eceptores especcos localizados en la super cie de vesculas y orgnulos. La cinesina aprovecha la energa generada mediante la hidrlisis del A TP para transportar vesculas desde el soma de la neurona hacia la porcin terminal del axn (transporte antergrado). De igual modo, la dinena citoplsmica utiliza A como TP fuente de energa para desplazar v esculas en sentido contrario (transporte retrgrado).
La familia de la miosina se asocia a la actina F para formar las estructuras contrctiles
Las protenas pertenecientes a la familia de la miosina se unen al A TP, al que hidrolizan, con el n de obtener energa para desplazarse a lo largo de los lamentos de actina desde el extr emo puntiagudo (negativ o) hacia el r omo (positivo). La miosina I y la miosina II representan los dos miembros principales de la familia de la miosina ( g. 1-32 ;v. cuadro 1-L). La miosina I, la cual es considerada una miosina no convencional, est presente en todos los tipos celulares, y consta de una cabeza y una cola. La cabeza se asocia a una nica cabeza ligera, interacciona con los lamentos de actina y posee una ATPasa que permite el movimiento de la miosina I a lo largo de los lamentos mediante su asociacin, separacin y nueva unin. La cola se une a v esculas u orgnulos. El desplazamiento de la miosina I a lo largo de un lamento de actina supone el transporte de la vescula o el orgnulo. Las molculas de miosina I presentan un tamao menor que el de las miosina II, car ecen de cola larga y no forman dmer os.
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Figura 1-32. Clases de molculas de miosina y su funcionamiento

Miosina II Actina F Dominios de unin a actina y ATPasa. La cabeza de miosina II aporta la fuerza motriz para el movimiento. El ATP impulsa el movimiento de las cabezas de miosina a lo largo de los filamentos de actina. Escisin proteoltica de la miosina II en sitios especficos Subfragmento S1 Bisagra proteoltica cabeza-cola
Cadenas ligeras Meromiosina pesada (HMM)
La miosina II posee una cola larga (150 nm), -helicoidal enrollada, que permite el autoensamblaje de varias molculas para formar un agregado bipolar o filamento. Regin de autoensamblaje Monmero Dmero Tetrmero
Bisagra proteoltica colaboracin Meromiosina ligera (LMM)
Agregado bipolar de molculas de miosina II Actina F
La base de la contraccin muscular
Extremo puntiagudo (negativo) Actina F
Extremo romo (positivo)
Extremo puntiagudo (negativo)
Actina F
1 La miosina II se desplaza a lo largo de la actina F hacia el extremo romo. Obsrvese que las cabezas apuntan en sentidos opuestos.
Extremo puntiagudo (negativo)
2 La unin de dos filamentos adyacentes de actina F en cualquiera de los extremos de un agregado bipolar provoca el movimiento de la actina F en sentidos contrarios (contraccin).
Miosina I Actina F Cabeza Dominio de unin a actina y ATPasa

Miosina V Actina F La miosina I (miosina no convencional) posee una cabeza nica y una cola corta. La cola impulsa el movimiento de mercancas, como vesculas secretoras. La miosina V (miosina no convencional) posee una cabeza doble con dominios ATPasa y de unin a actina F. Las colas terminan en un dominio globular que se une a vesculas por medio de una protena adaptadora unida a Rab27a, el receptor de vesculas.
Cabeza
Dominio de unin a actina y ATPasa
Cadena ligera Protena adaptadora Vescula
Dominio de cola globular
Vescula Cola
Dominio de unin a mercancas
Rab27a
La miosina II, una miosina convencional, aparece tanto en las clulas musculares como en las no muscular es. La miosina II se compone de un par de molculas idnticas. Cada una de ellas posee una cabeza con una A TPasa y una cola larga similar a un bastn. Las colas del dmero estn en contacto en toda su longitud para formar un bastn enr oscado formado por dos hebras. La cola de la miosina II se autoensambla para crear dmeros, tetrmeros y un lamento bipolar en los que las cabezas se separan de la lnea media.
1. EPITELIO
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Cuadro 1-L | Tipos de miosinas Las miosinas pertenecen a una gran familia de protenas motoras que producen movimiento a lo largo de los lamentos de actina a partir de energa obtenida por hidrlisis de ATP. Se distinguen dos grupos de miosinas: la miosina convencional, la miosina II, que impulsa la contraccin muscular y los procesos contrctiles en clulas no musculares, y las miosinas no convencionales (no musculares) las miosinas I y V, entre otras, que intervienen en el movimiento de mercancas contenidas en vesculas en el seno de la clula. La miosina II se compone de dos polipptidos, cada uno de los cuales presenta una cabeza globular unida a una cola enroscada alrededor de la cola del polipptido pareja. Las colas se autoensamblan para dar lugar a lamentos bipolares. Cada cabeza, que contiene tambin una cadena ligera, posee un sitio de unin a actina con actividad ATPasa, que es estimulada por la unin de actina y regulada por la cadena ligera. La miosina I posee una cabeza solitaria y una cola ms corta que la miosina II. No interviene en el transporte de vesculas a lo largo de los lamentos de actina F. La miosina V cuenta con dos cabezas y dos colas enroscadas una a otra. Las cabezas contienen sitios de unin para el ATP y la actina. El extremo distal de las colas se recluta por medio de vesculas en un proceso en el que interviene el receptor de vesculas Rab27a. La interaccin de la miosina V con Rab27a participa en la transferencia de melanosomas desde los melanocitos a los queratinocitos. La transferencia defectuosa de melanosomas desde los melanocitos a los queratinocitos del tallo del cabello debido a una mutacin de los genes Rab27a o miosina Va da lugar al sndrome de Griscelli de tipos I y II. Los sujetos aquejados de este sndrome presentan pelo canoso, albinismo parcial, alteraciones neurolgicas ocasionales e inmunodeciencia.
Las dos cabezas estn unidas aunque apuntan en sentidos opuestos se unen a los lamentos de actina adyacentes de polaridad opuesta. Cada cabeza de miosina asociada a la actina F se muev e hacia el extr emo romo (positivo). Por tanto, cada uno de los dos lamentos de actina se desplaza en relacin con el otro y se produce la contraccin (v. g. 1-32). Las cabezas y las colas de la miosina II se escinden por accin de div ersas enzimas (tripsina o papana) para dar lugar a la meromiosina ligera (LMM) y la meromiosina pesada (HMM). La LMM forma lamentos, si bien car ece de actividad ATPasa y no se asocia a la actina. La HMM se une a la actina, puede hidr olizar molculas de ATP y no forma lamentos. Genera fuerza en el transcurso de la contraccin muscular y puede escindirse en dos subfragmentos denominados S1, cada uno de los cuales contienen una porcin ATPasa y cadenas ligeras, y puede asociarse a lamentos de actina. La miosina V, una miosina no convencional, posee una cabeza doble y una cola doble enroscada. La regin de la cabeza se une a la actina F; los extremos globulares distales de las colas se unen a Rab27a, un receptor presente en las membranas de vesculas. La miosina Va interviene en el transpor te vesicular a lo largo de los trayectos de actina. E l transporte de melanosomas desde los melanocitos a los queratinocitos, el cual se realiza en primer lugar a lo largo de los microtbulos y ms tarde de la actina F, constituye un ejemplo espec co. Las mutaciones en los genes Rab27a y miosina Va dan lugar a alteraciones del transporte en la actina F. Un ejemplo de las mismas en el ser humano es el sndrome de Griscelli, un trastorno autosmico r ecesivo infrecuente caracterizado por la dilucin del pigmento del pelo debido a anomalas en el transpor te de los melanosomas y asociado a anomalas de la actividad citotxica de los linfocitos T y complicaciones de naturaleza neurolgica. En la gura 1-33 se resumen las propiedades estructurales y funcionales de las protenas motoras.
Fosforilacin de las cadenas ligeras por la cinasa de las cadenas ligeras de la miosina
El autoensamblaje de la miosina II y su interaccin con los lamentos de actina en las clulas no musculares tienen lugar en lugar es especcos denidos por las necesidades funcionales. Estos acontecimientos estn sometidos al contr ol de la enzima cinasa de las cadenas ligeras de la miosina (MLCK), la cual fosforila una de las cadenas ligeras de la miosina (denominada cadena ligera reguladora) presentes en la cabeza de la miosina. La pr otena quelante de Ca 2+, la calmodulina, regula la actividad de la MLCK (g. 1-34 ). La MLCK presenta un dominio cataltico y un dominio regulador. La actividad 2+ cinasa se libera como consecuencia de la unin de la calmodulina y el Ca . El 2+ complejo MLCK-calmodulina-Ca cataliza la transferencia de un grupo fosfato del ATP a la cadena ligera de la miosina y esta se desplaza de forma cclica a lo largo de la actina F para generar fuer za y contraccin muscular. La fosforilacin de una de las cadenas ligeras de la miosina pr oduce dos efectos: 1. Exposicin del sitio de unin a actina de la cabeza de la miosina. Este paso reviste una importancia clave en la interaccin de la cabeza de la miosina con el haz de actina F.
Figura 1-33. Comparacin de las protenas motoras
Miosina I Nmero de cabezas La cola se une a Una Membrana plasmtica Actina Extremo romo (positivo) Miosina II Dos Cinesina Dos Dinena citoplsmica Dos
Miosina II Actina Extremo romo (positivo)
Vescula Microtbulo Extremo positivo
Vescula Microtbulo Extremo positivo
La cabeza se une a Direccin del movimiento de la cabeza hacia
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Figura 1-34. Fosforilacin de las cadenas ligeras de miosina II en clulas no musculares

En el msculo esqueltico, la regulacin de la interaccin entre la actina y la miosina se basa en la unin de Ca2+ a la troponina. En el msculo liso y las clulas no musculares, la contraccin est controlada por la fosforilacin de una de las cadenas ligeras de la miosina.
1 La actividad de la cinasa de las cadenas ligeras de la miosina est bajo el control del complejo calmodulina-Ca2+. El aumento de las concentraciones citoslicas de Ca2+ induce la unin de la calmodulina al dominio regulador de la cinasa de las cadenas ligeras de la miosina.
La unin de calmodulina y Ca2+ al dominio regulador de MLCK activa esta cinasa
2 El complejo calmodulina Ca2+-cinasa de las cadenas ligeras de miosina activa fosforila la cadena ligera en presencia de ATP. La miosina inactiva se convierte en miosina activa, la cual se une a la actina F.
P
Cadena ligera de la miosina Fosforilacin de la cadena ligera de la miosina Miosina inactiva
P
Cinasa de las cadenas ligeras de miosina (inactiva)
Dominio regulador
Calmodulina Ca 2+
Actina F
1 P
Dominio cataltico
Ca2+
AD
2
Las miosinas II inactivas tienen sus regiones de cola replegadas y estn muy prximas a la cabeza de la miosina. Las miosinas II activas presentan colas extendidas.
Miosina activa
Complejo calmodulina-Ca2+ cinasa de las cadenas ligeras de miosina activa
ATP
Miosina activa
2. Liberacin de la cola de la miosina de su sitio de inser cin pegajoso prximo a la cabeza de la miosina. S e trata de otro paso esencial, ya que tan slo las colas de miosina extendidas pueden autoensamblarse para formar lamentos bipolares, un requisito para la contraccin muscular (v . g. 1-33). En las clulas del msculo liso, una fosfatasa elimina el grupo fosfato de las cadenas ligeras de la miosina. La contraccin del msculo esqueltico no depende de la fosforilacin de dichas cadenas. La contraccin muscular se abordar con mayor detalle en la seccin en la que se describe el tejido muscular (v . captulo 7, Tejido muscular).
Filamentos intermedios
Los lamentos intermedios ( g. 1-35) conforman un gr upo heterogneo de estructuras que reciben ese nombre debido a que su dimetro (10 nm) se encuentra a mitad de camino entre el de los micr otbulos (25 nm) y el de los micr olamentos (7 nm). Los lamentos intermedios son los elementos citoesquelticos ms estables. Los tratamientos con detergentes y sales extraen los componentes de los micr otbulos y los microlamentos, mientras que los lamentos intermedios se mantienen insolubles. Todos los lamentos intermedios contienen un monmero formado por un bastn -helicoidal acompaado de dominios de cabeza y cola ( g. 1-36 ). La estructura del lamento intermedio no vara de un estado ensamblado a otro no ensamblado, como en el caso de los micr otbulos y los micr olamentos. A diferencia de la actina y la tubulina, el ensamblaje y el desensamblaje de los lamentos intermedios estn controlados por su fosforilacin. Los monmeros proteicos de los lamentos intermedios se componen de tr es dominios (v. g. 1-36): un dominio en forma de bastn -helicoidal central anqueado por un dominio en bastn N-terminal no helicoidal y un dominio de cola C-terminal. A lo largo del proceso de ensamblaje, se asocian pares de dmeros, creados mediante la alineacin paralela de monmer os, para formar tetrmeros en orientacin laterolateral antiparalela. La alineacin terminoterminal de alr ededor de ocho tetrmeros da lugar a un protolamento. Los par es de pr otolamentos se unen lateralmente para originar una protobrilla, y cuatro de ellas formadas por ocho protolamentos se pliegan para cr ear un lamento intermedio semejante a una cuerda (v. g. 1-36). Los lamentos intermedios carecen de polaridad estr uctural, a
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Cuadro 1-M | Tipos de protenas de los lamentos intermedios Tipos I (cidas) y II (bsicas) Queratinas (40-70 kDa): las queratinas se organizan en forma de heteropolmeros de tipos I y II. Los distintos tipos de queratinas se coexpresan en las clulas epiteliales, el pelo y las uas. En diversos trastornos cutneos (enfermedades ampollosas y epidermlisis) aparecen mutaciones en los genes que codican queratinas. Tipo III (pueden autoensamblarse para formar homopolmeros) Vimentina (54 kDa): presente en clulas de origen mesenquimatoso. Desmina (53 kDa): componente de los discos Z del msculo estriado y las clulas del msculo liso. Protena brilar glial cida (GFAP 51 kDa): presente en los astrocitos. Periferina (57 kDa): forma parte de los axones del sistema nervioso perifrico. Tipo IV Neurolamentos (NF): en las neuronas se coexpresan tres formas que se organizan en heteropolmeros: NF-L (ligera, 60 a 70 kDa), NF-M (mediana, 105 a 110 kDa) y NF-H (pesada, 135 a 150 kDa). -internexina (66 kDa): componente de las neuronas en desarrollo. Tipo V Laminas A y B (60-70 y 63-68 kDa, respectivamente): presentes en la lmina nuclear asociada a la capa interna de la envoltura nuclear. Mantienen la integridad de esta ltima. Un grupo de trastornos humanos laminopatas se asocian a mutaciones en el gen lamina A (LMNA) (v. cuadro 1-N).
Figura 1-35. Estructura na de los principales componentes del citoesqueleto
Filamentos intermedios (10 nm de espesor)
Microtbulos (25 nm de espesor)
Haz formado por filamentos de actina (7 nm de espesor)
diferencia de la actina F y los micr otbulos. Los extremos de un lamento intermedio no pueden distinguirse entr e s. Los motor es moleculares asociados a un lamento intermedio tendran di cultades para discernir entre una direccin y otra. La funcin fundamental de los lamentos intermedios es aportar soporte mecnico a la clula. Se han identi cado cinco tipos principales de pr otenas en estos lamentos con arr eglo a la homologa de secuencia del dominio de bastn. S e dividen en los tipos I a V (v. cuadro 1-M). Hasta ahora se han descrito alr ededor de 50 protenas de los lamentos intermedios. Tipo I (queratinas cidas) y tipo II (queratinas neutras a bsicas). Esta clase de protenas aparece en los lamentos intermedios del citoesqueleto de las clulas epiteliales (conocidas como citoqueratinas para difer enciarlas de las queratinas del pelo y de las uas). Este tipo de lamento intermedio se compone de cantidades iguales de citoqueratinas cidas (40-60 kD a) y neutras-bsicas (50-70 kD a). Las queratinas de los tipos I y II forman tono lamentos asociados a distintas molculas presentes en las placas citoplsmicas de los desmosomas y los hemidesmosomas (v. gs. 1-18 y 1-19 ). Retomaremos las protenas de unin a los lamentos intermedios, como las lagrinas, en la seccin r elativa a la difer enciacin de los queratinocitos en la epidermis de la piel (v . captulo 11, S istema tegumentario), y la plectina, en la corr espondiente a la r ed citoesqueltica protectora presente en las clulas del msculo esqueltico (v . captulo 7, Tejido muscular). En la epidermis de la piel, las clulas basales expr esan las queratinas K5 y K14. Las clulas superiores en fase de difer enciacin expresan las queratinas K1 y K10. La K9 se localiza en algunas z onas de la epidermis, como en el r ea palmoplantar. Las mutaciones en K5 y K14 dan lugar a trastornos cutneos ampollosos her editarios pertenecientes al gr upo de la epidermlisis ampollosa simple (v. ms adelante, Importancia clnica: lamentos intermedios y enfermedades ampollosas). Tipo III. Este grupo engloba las siguientes pr otenas de los lamentos intermedios: Generalmente, la vimentina (54 kDa) aparece en clulas de origen mesenquimatoso. En algunas clulas, esta pr otena crea una conexin estr uctural entre la membrana plasmtica y las lminas nuclear es. La desmina (53 kDa) forma parte de las clulas del msculo esqueltico y se localiza en el disco K del sarcmero (v. captulo 7, Tejido muscular). Esta pr otena de los lamentos intermedios mantiene unidos los componentes contrctiles individuales de los sarcmeros al disco Z e interviene en la coordinacin de la contraccin de las clulas musculares. De igual modo, se localiza en las clulas del msculo liso. La protena gliobrilar cida (GFAP) (51 kDa) est presente en los astrocitos y algunas clulas de Schwann (v. captulo 8, Tejido nervioso).
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Figura 1-36. Ensamblaje de un lamento intermedio

1 Dos monmeros forman un dmero paralelo. 2 Dos dmeros (en disposicin antiparalela laterolateral) forman un tetrmero. La polaridad desaparece como consecuencia de la adopcin de una alineacin antiparalela.
Los tetrmeros adoptan una alineacin terminoterminal para dar lugar a un protofilamento.
4 Los pares de protofilamentos se asocian lateralmente para crear una protofibrilla. 5 Cuatro protofibrillas se enroscan para originar un filamento intermedio similar a una cuerda de 10 nm de espesor.
10 nm
Monmero bsico de un filamento intermedio Cabeza N-terminal Bastn Cola C-terminal
46 nm
La periferina (57 kDa) forma parte de las neuronas del sistema nervioso perifrico y se coexpresa junto a las protenas de los neurolamentos (v. captulo 8, Tejido nervioso). Tipo IV. Los elementos ms impor tantes son los neurolamentos. Los neurolamentos (NF) se encuentran en los ax ones y las dendritas de las neuronas. Un neurolamento se compone de tr es tipos de pr otenas: NF-L (60 a 70 kDa), NF-M (105 a 110 kD a), y NF-H (135 a 150 kD a), que constituy en neurolamentos de peso molecular bajo, intermedio y alto, r espectivamente. La -internexina (66 kD a) aparece fundamentalmente en el sistema ner vioso central (en especial, en la mdula sea y el ner vio ptico). Tipo V. Tres genes codi can las protenas pertenecientes a este gr upo, las laminas nucleares: LMNA, LMNB1 y LMNB2. Las laminas A y C se forman como consecuencia del corte y empalme alternativ o de los transcritos codi cados por el gen LMNA. El gen LMNB1 codica la lamina B1, la cual se expresa en todas las clulas somticas. El gen LMNB2 codica la lamina B2, que tambin se expr esa en todas las clulas somticas, y la lamina B3, una protena exclusiva de las clulas espermatognicas. Las laminas nucleares (60-70 kDa) se diferencian de otras pr otenas de los lamentos intermedios por su organizacin en una r ed ortogonal, la lmina nuclear, que se asocia a la membrana interna de la env oltura nuclear. Las laminas apor tan soporte mecnico a la env oltura nuclear y se asocian a la cr omatina. Por su importancia clnica, r etomaremos a las laminas nuclear es y las pr otenas asociadas al abordar la organizacin de la env oltura nuclear. Un grupo de enfermedades humanas, que r eciben el nombr e de laminopatas, son secundarias a anomalas en las protenas de la envoltura nuclear, como las laminas (v. cuadro 1-N). Muchas laminopatas afectan a los msculos cardaco y esqueltico, el tejido adiposo (lipodistroas), y los ner vios perifricos motores y sensitivos. Se han propuesto dos hiptesis sobre el mecanismo patognico de las laminopatas: 1. S egn la hiptesis de la expresin gnica, las laminas A y C son dos protenas clave para la expresin correcta especca de tejido de algunos genes. 2. La hiptesis del estrs mecnico sostiene que las anomalas en las laminas A y C debilitan la integridad estr uctural de la envoltura nuclear. Durante la mitosis, la fosforilacin de los residuos de serina de las laminas da lugar a un desensamblaje de la r ed, debido a que sucede la degradacin de la envoltura nuclear en pequeos fragmentos. Al nal de la mitosis, se desfosforilan las laminas y se organizan de nuev o la red de laminas y la env oltura nuclear. En la
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Cuadro 1-N | Caractersticas clnicas de las laminopatas Se dividen en tres grupos: distroa muscular, lipodistroa parcial y neuropata. Debidas a mutaciones en los genes que codican la lamina A o C y afectan a los msculos esqueltico y cardaco, y a la distribucin del tejido adiposo. La distroa muscular de Emery-Dreifuss (fenotipo hereditario mediante mecanismo autosmico dominante y recesivo, y ligado al cromosoma X, este ltimo debido a mutaciones en el gen emerina): contracturas en el tendn de Aquiles, debilidad muscular y caquexia graduales lentas, miocardiopata con anomalas de la conduccin. Distroa muscular de la cintura de las extremidades: debilidad muscular progresiva de la cintura plvica, de la porcin proximal del brazo y de los msculos de las extremidades inferiores. Miocardiopata dilatada. Enfermedad de Charcot-Marie-Tooth de tipo 2B1: neuropata motora y sensitiva distal de las extremidades superiores, y proximal y distal de las inferiores. Nota: La enfermedad de Charcot-Marie-Tooth de tipo 1 ligada al cromosoma X se caracteriza, asimismo, por las neuropatas motoras y sensitivas en el sistema nervioso perifrico, si bien se deben a una mutacin en el gen conexina32 (Cx32) expresado en las clulas de Schwann. Afecta a la mielina. Lipodistroa parcial familiar de tipo Dunnigan: se maniesta en la pubertad con prdida de tejido adiposo subcutneo del tronco y de las extremidades, y acumulacin de tejido adiposo en la cara y el cuello.
seccin relativa al ncleo celular se describe el mecanismo de fosforilacin y desfosforilacin de las laminas durante el ciclo celular .
Hemidesmosomas y lamentos intermedios
Los hemidesmosomas constituy en uniones especializadas que apar ecen en las clulas basales del epitelio escamoso estrati cado adosado a la membrana basal (g. 1-37 ).En el inter ior de la clula, las pr otenas BPAG1 (antgeno 1 del pengoide ampolloso) y plectina (pertenecientes a la familia de la plaquinas de protenas de entr ecruzamiento) se asocian a lamentos intermedios (tambin llamados tonolamentos). La plectina conecta estos lamentos con la subunidad 4 de las integrinas. En la cara extracelular , la integrina 6 4, BPAG2 (antgeno 2 del pen goide ampolloso) y la laminina 5, una protena presente en unas estructuras especializadas denominadas lamentos de anclaje, conectan los hemidesmosomas a la lmina basal. La pr otena relacionada con la plaquina BP AG1 se asocia a BP AG2, una protena transmembrana portadora de un dominio colgeno extracelular . Es decir, BPAG1 acta como puente entre la protena transmembrana BPAG2 y los lamentos intermedios. La alteracin de este puente, como en el caso del pen goide ampolloso, provoca la separacin de la epidermis de los sitios de anclaje en la lmina basal. BPAG1 y BPAG2 fueron identicados en sujetos con pen goide ampolloso, una enfermedad autoinmunitaria.
Importancia clnica: lamentos intermedios y enfermedades ampollosas
El pengoide ampolloso es una enfermedad ampollosa autoinmunitaria semejante al pngo vulgar (llamado pen goide). En la zona de unin de la epidermis y la dermis aparecen ampollas o bullas como consecuencia de las reacciones cruzadas de la inmunoglobulina G (IgG) circulante con el antgeno 1 o 2 del pen goide ampolloso. Los complejos I gG-antgeno as formados estimulan la pr oduccin de complejos del complemento (C3, C5b y C9), los cuales daan las uniones de los hemidesmosomas y alteran la sntesis de las pr otenas de anclaje por las clulas basales (g. 1-38 ). La produccin de toxinas locales induce la desgranulacin de los mastocitos y la liberacin de factores quimiotcticos para los eosin los Las enzimas liberadas por estos ltimos dan lugar a ampollas o bullas. Los lamentos intermedios r efuerzan el citoesqueleto celular . La expr esin de genes mutados de queratinas origina el ensamblaje anmalo de los lamentos de queratina, los cuales debilitan la r esistencia mecnica de la clula y dan lugar a afecciones cutneas hereditarias, como indica la gura 1-39 : 1. Epidermlisis ampollosa simple, caracterizada por la formacin de ampollas cutneas debido a traumatismos leves. Se desarrolla como consecuencia de la expresin de los genes mutados de las queratinas 5 y 14. 2. Hiperqueratosis epidermoltica, en la cual se pr oduce una queratinizacin excesiva de la epidermis debido a la pr esencia de mutaciones en los genes de las queratinas 1 y 10. 3. Queratodermia palmoplantar epidermoltica, una enfermedad cutnea que se distingue por la fragmentacin de la epidermis de las palmas de las manos y de las plantas de los pies, y se r elaciona con una mutacin del gen de la queratina 9.
NCLEO CELULAR Envoltura nuclear y complejo del poro nuclear
El ncleo de las clulas de los mamfer os se compone de tres elementos principales: 1) la envoltura nuclear; 2) la cromatina, y 3) el nuclolo. La envoltura nuclear est formada por dos membranas concntricas separadas por el espacio perinuclear . La membrana nuclear interna se asocia a la lmina nuclear (v. cuadro 1-O ), cromala tina y las ribonucleoprotenas. La membrana nuclear externa se contina con las del retculo endoplsmico y puede asociarse a ribosomas. El complejo del poro nuclear presenta una estructura tripartita formada por un cuerpo cilndrico central situado entr e los anillos octagonales interno y externo, cada uno de los cuales consta de ocho par tculas proteicas. El cilindro central se compone de un tapn central y ocho espolones radiales ( g. 1-40 ).Se desconoce
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Figura 1-37. Estructura y composicin de un hemidesmosoma

Filamentos de queratina (tonofilamentos) Filamentos intermedios de queratina (tonofilamentos) Lmina Placa Membrana plasmtica
Lmina basal Plectina BPAG1 (antgeno 1 del penfigoide ampolloso) 230 kDa BPAG2 (antgeno 2 del penfigoide ampolloso) 180 kDa Subunidad 4 de integrina Filamento de anclaje (laminina 5)
Placa
Lmina Lmina basal
Filamentos de anclaje
BPAG1 (un miembro de la familia de las plaquinas) y BPAG2 (una protena transmembrana con un dominio colagenoso extracelular) conectan la lmina basal a los filamentos intermedios. La plectina (un miembro de la familia de las plaquinas) y la subunidad 4 de la integrina (que forma un complejo con la subunidad 6) conectan la lmina basal con los filamentos intermedios.
Hemidesmosomas
cul es la funcin exacta de cada protena del complejo del poro nuclear en el trco nucleocitoplsmico. Los complejos del poro nuclear embebidos en la env oltura nuclear establecen vas de comunicacin para el tr co de macr omolculas entre el compar timento citoplsmico y el ncleo. Las molculas de pequeo tamao molecular (menores de 40-60 kDa) atraviesan por difusin el complejo de por o nuclear. Las protenas de cualquier tamao molecular que contienen la secuencia de aminocidos de localizacin nuclear (NLS, Pro-Lis-Lis-Lis-Arg-Lis-Val) son importadas al ncleo a travs de un mecanismo con gasto de energa (que pr ecisa de ATP y GTP).
Figura 1-38. Origen del pengoide ampolloso, un trastorno autoinmunitario
1 Un anticuerpo circulante contra el antgeno del penfigoide ampolloso (BPAG1 o BPAG2) estimula una respuesta local que induce la liberacin del factor quimiotctico de eosinfilos (ECF) por parte de los mastocitos para atraer a los eosinfilos.
2 Los eosinfilos secretan proteasas que degradan los filamentos de anclaje que unen la lmina de unin del hemidesmosoma a la lmina basal. Se forma una ampolla.
2 1
IgG
Mastocito
Factor quimiottico de eosinfilos
Eosinfilos
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Figura 1-39. Enfermedades cutneas producidas por mutaciones en las queratinas de los lamentos intermedios
Queratodermia palmoplantar epidermoltica Hiperqueratosis epidermoltica Epidermlisis ampollosa simple
Queratina B (epidermis palmoplantar) Queratinas 1 y 10
Capa crnea Capa granulosa Epidermis Capa espinosa Capa basal Dermis Lmina basal
Queratinas 5 y 14
Fotografas tomadas de Callen JP, et al.: Color Atlas of Dermatology. Philadelphia, WB Saunders, 1993.
Epidermlisis ampollosa simple Mutacin de queratinas 5 y 14. Se forman ampollas poco despus del nacimiento en lugares sometidos a presin o friccin. Las ampollas se localizan en los dedos del lactante.
Hiperqueratosis epidermoltica Mutacin de queratinas 1 y 10. La queratinizacin excesiva provoca la degradacin de la epidermis.
Queratodermia palmoplantar epidermoltica Mutacin de la queratina 9. Este trastorno se limita a la epidermis de las palmas de las manos y de las plantas de los pies.
Transporte nucleocitoplsmico: Ran-GTPasa
Ran (GTPasa nuclear similar a Ras), una pequea GTPasa de la super familia de Ras que determina la direccionalidad del transporte nucleocitoplsmico, controla la importacin/exportacin nuclear de protenas. Ran atraviesa los poros nucleares para acumularse en el compar timento nuclear a travs de un mecanismo de transpor te activo (g. 1-41 ). 1. En el ncleo, se mantiene una concentracin alta de Ran-GTP por accin de RCC1, una protena de intercambio de GDP-GTP unida a la cr omatina. RanGTP determina la disociacin de las pr otenas importadas portadoras de NLS al unirse a la importina , la protena receptora del transportador. 2. En el sentido contrario, del ncleo hacia el citoplasma, la unin de Ran-GTP a la protena transportadora exportina/Crm 1 propicia el ensamblaje de complejos que contienen protenas con la secuencia de exportacin nuclear (NES). 3. En el citoplasma, Ran-GTP se convierte en Ran-GDP por accin de la RanGTPasa, activada por dos pr otenas colaboradoras: Ran-GAP (protena activadora de Ran-GTPasa) y RanBP (protena de unin a Ran-GTP). P or tanto, la pr otena exportada se separa de la r eceptora del transportador exportina/Crm1 y Ran-GTP. Las importinas y las exportinas se reciclan al ser transportadas de nuevo a travs del complejo del poro nuclear. Por otra parte, Ran-GTPasa interviene en el ensamblaje del huso mittico .
Cromatina
La cromatina se de ne como partculas o cuentas (llamadas nucleosomas) sobre una cadena de ADN bicatenario ( g. 1-42). Cada nucleosoma se compone de un ncleo de octmeros de histonas rodeado por alrededor de dos vueltas de ADN. E l octmero de histonas contiene dos molculas de cada una de las histonas H2A, H2B, H3 y H4. La histona H1 establece enlaces cr uzados en la molcula de ADN que envuelve el octmero. La cromatina est condensada en cromosomas separados que pueden visualizarse en el transcurso de la mitosis (o la meiosis). Los cr mosomas individuales no pueden o identicarse durante la interfase (fases G1, S y G2 del ciclo celular), si bien se encuentran en un estado difuso o no condensado .
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Figura 1-40. Envoltura nuclear y complejo de poro nuclear

El conjunto de las protenas del complejo del poro nuclear recibe el nombre de nucleoporinas Las nucleoporinas filamentosas Phe-Gly del canal central contienen sitios de anclaje para protenas de mercanca-factor de transporte nuclear que pasan a travs del canal desde el citoplasma o el ncleo. Nucleoporina Phe-Gly Fibrilla proteica asociada a cada partcula proteica Partcula proteica del anillo citoplsmico octagonal Espoln radiado Membrana nuclear externa Espacio perinuclear Membrana nuclear interna Poros nucleares Canal central Citoplasma Factor de transporte nuclear Mercanca Espaciador Poro central
Partcula proteica del anillo nuclear octagonal
Laminas A, B y C Cestillo nuclear Ncleo
Mitocondria
Actina F
Protena de filamentos intermedios
Actina F
Nesprina-1/2 Membrana nuclear externa
Plectina
Nesprina-3 Nesprina-1/2
Las laminas se unen a varias protenas de la membrana nuclea interna: el receptor de lamina B (LBR), la emerina, los polipptidos asociados a laminas 1C (LAP1C) y 2 (LAP2). El dmero proteico Sun1 une las laminas a las nesprinas insertadas en la membrana nuclear externa. La nesprina 1/2 se asocia a la actina F y la nesprina 3 se une a la plectina, la cual se asocia, a su vez, a las protenas de los filamentos intermedios. Las mutaciones de la emerina que se une a las laminas A y B y el receptor de la lamina B que se une a la lamina B dan lugar a la distrofia muscular de Emery- Dreifuss y la anomala de Pelger-Huet en los granulocitos sanguneos (diferenciacin incompleta). La mutacin homocigtica en el gen que codifica el receptor de lamina B origina la displasia esqueltica de Greenberg, una condrodistrofia embrionaria mortal.
Receptor de lamina B (LBR) Membrana nuclear interna
Dmero Sun1
Espacio perinuclear Emerina
Lamina B1/B2 Lamina A/C Cromatina Polipptido asociado a Polipptido asociado lamina 1C (LAP1C) a lamina 2 (LAP2)
La cromatina difusa, denominada eucromatina (cromatina verdadera), es activa desde el punto de vista de la transcripcin (sntesis de ARN) y r epresenta alrededor del 10% de la cr omatina total. La eucr omatina es el lugar de sntesis de los precursores de los ARN no ribosmicos, como el ARNm y el ARN de transferencia (ARNt). La cromatina condensada, conocida como heterocromatina (cromatina diferente) no es activ a desde el punto de vista de la transcripcin y corresponde aproximadamente al 90% de la cr omatina total ( g. 1-43 ).
Compensacin de la dosis: inactivacin de uno de los cromosomas X
La inactivacin al azar de uno de los dos cr mosomas X en todas las clulas somticas o femeninas recibe el nombre de compensacin de la dosis. Ambos cr omosomas X permanecen activos en los o vocitos. La inactivacin tiene lugar al azar , ya que se
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Figura 1-41. La Ran-GTPasa dirige el transporte nucleocitoplsmico

Ran aparece en dos formas que pueden unirse a GTP y GDP e interaccionan de forma diferente con las protenas. Un gradiente de concentracin de RanGTP/Ran-GDP a travs de la envoltura nuclear controla el transporte direccional de muchas protenas por los poros nucleares. La conversin entre ambas formas y el ensamblaje/desensamblaje de los complejos proteicos depende de protenas reguladoras. Citoplasma Protena con secuencia de localizacin nuclear (NLS) Ran-GDP Ran-GDP
1 En el citoplasma, Ran-GDP se asocia a las importinas y . Esta ltima reconoce la NLS de las protenas de importacin nuclear. La importina se une a Ran-GDP.
GDP
GDP
Ran-GDP Complejo importina / Envoltura nuclear

GDP
Pi Ran-GBP1 Ran-GAP
GTP
4 En el citoplasma, la protena exportada que contiene NES se separa de Ran GTP al interaccionar con Ran-GBP1, seguida de la hidrlisis del GTP inducida por Ran-GAP. Ran-GDP libera su mercanca y se prepara para la translocacin de protenas portadoras de NLS hacia el ncleo, como se muestra en 1 .
Importina Importina
1 4
Complejo del poro nuclear Ncleo Protena-NLS Exportina/Crm1 Importina Ran-GDP

GTP
Importina RCC1 (intercambiador GDP-GTP)

GDP
Ran-GTP
GTP
Protena con secuencia de exportacin nuclear (NES) Ran-GTP
Cromatina
2
GTP
2 En el ncleo, tras la translocacin del complejo proteico Ran-GDPimportina- /NLS, se libera la importina de Ran y la importina se separa de la protena con NLS, la cual queda libre. RCC1, una protena intercambiadora de nucletidos de guanina unida a la cromatina produce Ran-GTP.
3 En el ncleo, Ran-GTP se asocia a exportinas (p. ej., exportina Crm1) necesarias para la exportacin al citoplasma de las protenas portadoras de NES.
Cuadro 1-O | Lmina nuclear Las laminas, protenas de los lamentos intermedios de tipo V, son los principales componentes de la lmina nuclear. Las laminas se unen a protenas de la membrana nuclear interna, como emerina (con ocho dominios transmembrana), receptor de lamina B, polipptidos asociados a laminas 1 y 2 , y nesprina-1 , una protena con varias repeticiones similares a espectrina que se une a lamina A y emerina (v. g. 1-40). Las laminas y las protenas asociadas intervienen en la organizacin de la cromatina, el espaciamiento de los complejos del poro nuclear y el reensamblaje del ncleo tras la divisin celular. Las mutaciones en los genes que codican las laminas y las protenas de unin a laminas dan lugar a diversas enfermedades (conocidas como laminopatas) (v. cuadro 1-L). El sndrome de progeria de Hutchinson-Gilford (envejecimiento prematuro) se debe a una mutacin en el gen de la lamina A.
inactiva el cromosoma X paterno o materno . La eleccin deja de ser aleatoria en la descendencia de estas clulas. La inactiv acin de la transcripcin de uno de los dos cromosomas X tiene lugar el da 12 posterior a la fecundacin en el tr ofoblasto y el da 16 en el embrin. En el ser humano, el cr omosoma X inactivado se reconoce por la pr esencia del corpsculo de Barr, una masa de heter ocromatina prxima a la env oltura nuclear o un elemento en forma de palillo de tambor en los leucocitos polimor fonucleares (v. g. 1-43). Si una clula posee ms de dos cr omosomas X, los extranumerarios se inactivan y se visualiza ms de un corpsculo de B arr.
Nuclolo
El nuclolo representa el lugar de sntesis del ARN ribosmico (ARNr) y del ensamblaje de las subunidades r ibosmicas. Contiene diversas protenas necesarias para el procesamiento del pre-ARNr, como la brilarina y la nucleolina. Contiene, adems, la protena nucleoestemina, relacionada con la biogenia del ribosoma. La nucleolina y la nucleoestemina son pr otenas transportadoras que viajan desde el nuclolo hacia el nucleoplasma para interaccionar con la protena p53, la cual con ere proteccin frente a las lesiones en el ADN al impedir la r eplicacin del ADN en condiciones de estrs genmico. Esta protena se analiza en una seccin posterior (v . g. 1-54 ). En esencia, el nuclolo es una estr uctura nuclear multifuncional formada por protenas estables que par ticipan en la sntesis ribosmica y en el transpor te de
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Figura 1-42. Estructura de la bra de cromatina: el nucleosoma

El ADN se enrolla 1,65 veces alrededor del ncleo de octmeros de histonas H1, una histona de unin, se une al ADN enrollado alrededor del ncleo de octmeros de histonas El ncleo de octmeros de histonas se compone de dos molculas de cada una de las histonas H2A, H2B, H3 y H4 Fibra de cromatina formada por la disposicin linear de los nucleosomas
Un nucleosoma (10 nm de dimetro) es la unidad estructural bsica de la cromatina
Figura 1-43. Inactivacin del cromosoma X

Corpsculos de Barr en clulas de un frotis del epitelio bucal Palillo de tambor en un neutrfilo
Compensacin de la dosis
El cromosoma X inactivo contina condensado durante la mayor parte de la interfase del ciclo celular. Aparece como una mancha de cromatina teida intensamente (corpsculo de Barr o cromatina X) en un nmero variable de ncleos (30-80%) de una mujer normal. Se observa un pequeo palillo de tambor en el 1-10% de los neutrfilos en las clulas femeninas. La inactivacin de uno de los cromosomas X se produce de forma aleatoria (cromosoma X paterno o materno). Si la clula presenta ms de dos cromosomas X, los cromosomas adicionales se inactivan y el nmero mximo de corpsculos de Barr de cada ncleo ser uno menos del nmero total de cromosomas X del cariotipo.
molculas entre el nuclolo y el nucleoplasma para desempear funciones no nucleolares. Desde el punto de vista estr uctural, el ncleo consta de tr es componentes principales (g. 1-44 ;v. cuadro 1-P). 1. Un centro brilar (que corresponde a la cromatina que contiene genes repetidos para ARNr, ARN polimerasa I y ARN de la partcula de reconocimiento de seales [SRP]). 2. Un componente brilar denso (que contiene ARNr naciente, el cual est sometido a algunas etapas de pr ocesamiento). Aparecen, adems, la brilarina y la nucleolina. 3. Un componente granular (en el que concluye el ensamblaje de las subunidades ribosmicas, que contienen ARNr 18S [subunidad pequea] y ARNr 28S [subunidad grande]). La nucleoestemina, una protena sin relacin con la biogenia de los ribosomas, coexiste con los componentes granular es. El nuclolo se disocia en el transcurso de la mitosis y eaparece de nuevo al comienzo r de la fase G 1. En el ncleo puede aparecer ms de una masa nucleolar, cada una de las cuales representa el pr oducto de un cr omosoma con una regin organizadora del nuclolo (NOR). En algunas clulas con inter fase prolongada, como las neur onas, la fusin de varias masas nucleolares da lugar a un nuclolo solitario de gran tamao . El proceso activo de sntesis de ARN se visualiza mediante micr oscopia electrnica (g. 1-45) al extender el contenido nuclear de clulas con cientos de nuclolos (p. ej., ovocitos de anbio). Los genes que codican el ARNr aparecen en forma de unidades gnicas repetidas en el hilo de la cromatina, de manera similar a rboles de Navidad que apuntan en la misma dir eccin y estn separados por secuencias espaciadoras no transcritas. Ms de 100 molculas de ARN polimerasa I que sintetizan un nmero equivalente de brillas, cada una de ellas dotada de un grnulo terminal, recubren la regin correspondiente al ARNr. Cada brilla representa una molcula ribonucleoproteica precursora del ARNr (45S) con una orientacin perpendicular al eje de cr omatina, de forma similar a las ramas de un rbol. E l precursor de ARNr de 45S se separa del eje de cr omatina y se escinde en ARNr de 28S, 18S y 5,8S. El ARNr de 18S y las pr otenas asociadas forman la subunidad pequea del ribosoma. Los ARNr de 28S y 5,8S, junto al ARNr de 5S sintetizado fuera del nuclolo, dan lugar a la subunidad grande del ribosoma. La ARN polimerasa II transcribe el precursor del ARNm y la ARN polimerasa III se ocupa de transcribir el ARNt.
Localizacin de los cidos nucleicos
Las tcnicas de citoqumica y autorradiografa (g. 1-46) aportan informacin acerca de la distribucin celular y de la sntesis de los cidos nucleicos. La reaccin de Feulgen se utiliza para localizar el ADN (v. cuadro 1-Q ).Los colorantes bsicos,
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Figura 1-44. Componentes del ncleo y el nuclolo

El ncleo de las clulas eucariotas se separa del citoplasma por medio de la envoltura nuclear, una membrana concntrica doble procedente del retculo endoplsmico. La envoltura nuclear se interrumpe a intervalos aleatorios por los complejos del poro nuclear, unas estructuras con nucleoporinas que controlan el flujo de molculas entre los compartimentos nuclear y citoplsmico. Las protenas nucleolares nucleolina y fibrilarina se localizan en el componente fibrilar denso. La nucleoestemina se halla en el componente granular. La ARN polimerasa I se encuentra en el centro fibrilar. Envoltura nuclear Heterocromatina (inactiva desde el punto de vista de la transcripcin) Eucromatina (activa desde el punto de vista de la transcripcin; ARNm y ARNt)
Envoltura nuclear
Nuclolo Eucromatina NOR
Heterocromatina Retculo endoplsmico rugoso
Nuclolo Componente fibrilar denso Ncleo de clula pancretica Nuclolo NOR NOR
Componente granular Centro fibrilar
Lmina nuclear
Poro nuclear
Cromatina asociada al nuclolo (regin organizadora del nuclolo, NOR) Nucleoestemina p53 ADN
Nuclolo
Nucleolina
Protena A de replicacin (RPA)
Nucleoplasma
Como respuesta al estrs celular, la unin de nucleoestemina y nucleolina a p53 y su posterior inactivacin (de modo que no puede ser reclutada hacia el ADN) inhibe el paso de la clula a la fase S (sntesis de ADN). La nucleolina crea un complejo con RPA (necesario para el comienzo de la sntesis del ADN) que se asocia a p53.
Componente fibrilar denso
Componente granular
Centro fibrilar
como el azul de toluidina, con eren coloracin al ADN y al ARN (v . cuadro 1-R). El pretratamiento con deso xirribonucleasa (ADNasa) y la ribonucleasa (ARN asa) permite denir la distribucin del ADN y del ARN a travs de la eliminacin selectiv a de uno de los cidos nucleicos. La autorradiografa y los precursores marcados con radioactividad de uno de los cidos nucleicos permiten determinar el momento de su sntesis. En esta tcnica, las clulas vivas se exponen a un pr ecursor radioactivo del ADN ([ 3H]timidina) o ARN ([3H]uridina). Como consecuencia de esta exposicin, el ADN o el ARN sintetizados incorporan el precursor radioactivo. La radiactividad se detecta al recubrir a las clulas de una na capa de emulsin fotogr ca. Los cristales con plata de la emulsin se exponen a las estr ucturas celulares que contienen ADN o ARN. Los granos de plata indican la localizacin de las estr ucturas marcadas al r evelar la emulsin. Este abordaje se ha aplicado de manera frecuente con el n de determinar la duracin de las distintas fases del ciclo celular .
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Figura 1-45. Procesamiento del ARN ribosmico

Molcula precursora de ARNr maduro (45S)
ARN polimerasa
ARN polimerasa
Fibra de cromatina
Direccin de sntesis de ARN (extremo 5 a 3)
Fibra de cromatina Molcula precursora de ARNr naciente
Direccin de sntesis de ARN (extremo 5 a 3)
Molcula precursora de ARNr naciente
Microfotografa electrnica tomada de Franke WW et al.: Morphology of transcriptional units of rDNA. Exp Cell Res 100:233-244, 1976.
18S pre-ARNr 18S
5,8S
28S El precursor de ARNr se compone de tres elementos: 18S, 28S y 5,8S. El componente adicional 5S procede de otro gen.
5,8S
28S
Procesamiento de pre-ARNr
18S
5,8S
28S
5S Alrededor de 30 protenas se asocian a la molcula 18S para originar la subunidad ribosmica pequea (40S). Complejo del poro nuclear Ncleo Envoltura nuclear Aproximadamente 45 protenas se ensamblan con las molculas 28S, 5,8S y 5S para formar la subunidad ribosmica grande (60S).
Citoplasma
Polirribosoma
Polirribosoma
ARNm
25 nm
Ribosoma ensamblado
CICLO CELULAR
El ciclo celular se dene como el intervalo existente entre dos divisiones mitticas sucesivas que dan lugar a la formacin de dos clulas hijas (g. 1-47 ). Tradicionalmente, el ciclo celular se ha dividido en dos fases principales: 1)interfase y 2) mitosis (tambin conocida como fase M).
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Figura 1-46. Localizacin de los cidos nucleicos

Reaccin de Feulgen
1 La hidrlisis con cido clorhdrico da lugar a la formacin de grupos aldehdo en la desoxirribosa (glcido del ADN) pero no en la ribosa (glcido del ARN). 2 La cromatina con ADN adquiere color prpura debido a que la reaccin de los grupos aldehdo con el reactivo de Schiff incoloro origina un producto de color prpura.
Autorradiografa
HCl
Citoplasma Ncleo Nuclolo
El nuclolo no se tie (los centros fibrilares intranucleolares que contienen ADN no pueden visualizarse con el microscopio ptico). Basofilia
1 El azul de toluidina, un colorante bsico, se une a los grupos fosfato con carga negativa del ADN y el ARN. La cromatina (ADN), el nuclolo (ARN) y los ribosomas adosados al retculo endoplsmico (ARN) se tien de color azul. Estas estructuras son basfilas.
Retculo endoplsmico rugoso Nuclolo

2 Pretratamiento con ADNasa seguido de tincin con azul de toluidina para identificar las reas que contienen ARN.
ADNasa
Retculo endoplsmico rugoso Ncleo Nuclolo
ARNasa
Ncleo Reaccin de Feulgen Reaccin de PAS
3 Pretratamiento con ARNasa seguido de tincin con azul de toluidina para identificar las reas que contienen ADN.
En esta autorradiografa se muestra la captacin de [3H]timidina por los ncleos de las clulas epiteliales del intestino (duodeno). El precursor radiomarcado se inyect en un animal de experimentacin, que se sacrific 24 h despus. Los cortes histolgicos fueron recubiertos por una emulsin fotogrfica y expuestos a la oscuridad durante 48 h. El revelado de la emulsin fotogrfica seguido de la tincin del corte puso de manifiesto la localizacin de los granos de plata (puntos negros) en algunos ncleos que se encontraban en la fase S (sntesis de ADN) del ciclo celular.
Basofilia
Basofilia tras digestin con ARNasa
Retculo endoplsmico rugoso Nuclolo negativo para Feulgen Ncleo no teido
Nuclolos no teidos
Cromatina positiva para Feulgen
Nuclolo
Cromatina teida
Glucgeno teido Hgado Pncreas El ADN se tie de prpura. Las El glucgeno del citoplasma protenas del nuclolo se tien de de los hepatocitos se tie de prpura. verde con un colorante de contraste. El ncleo no se tie.
Cromatina teida Pncreas Los cidos nucleicos (ADN en la cromatina y ARN en el nuclolo y el retculo endoplsmico rugoso) se tien. Pncreas Tras el tratamiento con ARNasa slo se tie la cromatina. Los nuclolos y el retculo endoplsmico rugoso no se tien.
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Cuadro 1-P | Nuclolo El nuclolo es el lugar de sntesis, procesamiento y modicacin del pre-ARNr y del ensamblaje inicial del prerribosoma. Asimismo, contiene protenas que carecen de relacin con la sntesis del ribosoma y el transporte entre el nuclolo y el nucleoplasma para desempear funciones especcas. El nuclolo consta de tres componentes: 1) centros brilares; 2) un componente brilar denso que rodea a los centros brilares, y 3) un componente granular. La sntesis del pre-ARNr tiene lugar en la interfaz entre los centros brilares y el componente brilar denso que lo rodea. Los transcritos nacientes del pre-ARNr se extienden hacia el componente brilar denso y migran hacia el componente granular, en el que se produce el procesamiento, la modicacin y el ensamblaje de los prerribosomas. Los centros brilares contienen cromatina y factores de transcripcin, as como la ARN polimerasa I. El componente brilar denso, el lugar de procesamiento inicial del pre-ARNr, consta de pequeas ribonucleoprotenas que intervienen en la modicacin del ARN. El componente granular representa alrededor del 75% de la masa nucleolar; los grnulos corresponden a prerribosomas. El nuclolo desaparece durante la profase mittica y se reorganiza de nuevo hacia el nal de la telofase en unas regiones cromosmicas especcas denominadas regiones organizadoras del nuclolo (NOR).
Cuadro 1-Q | Reacciones de PAS y Feulgen Ambas reacciones se basan en el reactivo de Schiff. En la reaccin de PAS, el cido perydico forma grupos aldehdo en glcidos de las glucoprotenas a travs de un proceso de oxidacin. En la reaccin de Feulgen, el cido clorhdrico genera grupos aldehdo en la desoxirribosa mediante hidrlisis.
La etapa ms r elevante de la inter fase es la fase S, en el transcurso de la cual se replica el ADN nuclear. La fase S se ve precedida por un intervalo o gap denominado fase G1. Con anterioridad al comienz o de la mitosis tiene lugar la fase G2, durante la cual se v erica que la r eplicacin del ADN haya nalizado antes de ponerse en marcha la fase M. E n esencia, las fases G 1 y G 2 crean un marco temporal para el crecimiento celular antes y despus de la sntesis del ADN. E l crecimiento celular es clave para la duplicacin de la masa celular como pr eparacin para la divisin celular. Las clulas situadas en la fase G 1 pueden comprometerse con la r eplicacin del ADN y pasar a la fase S o bien detener el avance hacia la siguiente fase S. Las clulas que no ingresan en la fase S se encuentran en un estado de reposo conocido como fase G0, una fase en la que la clula puede permanecer varis das, meses o aos antes de entrar de nuevo en el ciclo celular. La nocin ms moderna del ciclo celular sostiene que es un pr oceso progresivo coordinado encaminado a la complecin de tr es ciclos diferentes: 1. Un ciclo citoplsmico, que corresponde a la activacin secuencial de protena cinasas dependientes de ciclinas en presencia de ciclinas. 2. Un ciclo nuclear, en el que se replica el ADN y se condensan los cromosomas de cara a la divisin celular . 3. Un ciclo centrosmico, el cual consiste en la duplicacin de los dos centrolos, llamados centrolos madre e hija, y en el ensamblaje de las protenas pericentriolares en preparacin para la organizacin del huso mittico durante la mitosis o la meiosis (v. g. 1-47). Cabe r ecordar de nuestra exposicin pr evia acerca del centr osoma como centro organizador de microtbulos que los complejos anulares de tubulina son complejos nucleador es de micr otbulos que interaccionan con la pr otena pericentrina en el material pericentriolar . La alteracin de esta interaccin supone la interrupcin del ciclo celular durante la transicin entr las fases G2 y M, de modo e que la clula sufre una muerte celular programada o apoptosis. Los cuerpos basales, el lugar de origen de los cilios y los agelos, provienen de los centrolos. Las actividades de los complejos formados entr e las pr otena cinasas dependientes de ciclinas y las ciclinas reglan la progresin temporal de los ciclos nuclear y centrosmico (v. cuadro 1-S ).En la gura 1-48 se ofr ece informacin ms detallada.
Autorradiografa y FACS: anlisis de la dinmica del ciclo celular
Cuadro 1-R | Basolia y acidolia En muchas tcnicas de tincin citolgica se utilizan colorantes cidos y bsicos. Los colorantes bsicos o catinicos presentan radicales coloreados con carga positiva que establecen uniones electrostticas con los grupos cidos (p. ej., grupos fosfato en los cidos nucleicos). El azul de toluidina es un colorante catinico que se une a grupos fosfato del ADN y del ARN para conferir una coloracin azulada. El ADN y el ARN son baslos (presentan anidad de unin por colorantes bsicos). Los colorantes cidos o aninicos presentan radicales coloreados con carga negativa que forman enlaces electrostticos con grupos bsicos. La eosina es un colorante aninico que tie a muchas protenas. Se considera que las protenas bsicas son acidlas (con anidad por colorantes cidos).
Se pueden estudiar las distintas fases del ciclo celular por medio de la autorradiografa. Las clulas de la fase S se r econocen mediante la deteccin de la sntesis de ADN con [ 3H]timidina como precursor radiomarcado. Las clulas se pueden teir a travs de la emulsin revelada con el n de identi car la localizacin exacta de los granos de plata solapados. Es posible estimar la progresin temporal de las clulas a lo largo de las div ersas fases del ciclo celular mediante pulsos br eves y pr olongados de [ 3H]timidina. El nmero de clulas radiomarcadas durante la interfase (habitualmente, alrededor del 30%) representa el ndice de marcaje de la fase S. La fraccin de clulas radiomarcadas que se encuentran en mitosis (ndice mittico) seala que el precursor radiomarcado que ingres en la clula a lo largo de la fase S ha pasado de la fase G 2 a la fase M. Una tcnica alternativa a la autorradiografa es la determinacin del contenido de ADN (valor C 1,5 pg por clula haploide) mediante un selector celular activado por uorescencia (FACS). Las clulas se tien con un colorante uorescente que se une al ADN. La cantidad de uorescencia detectada por el FACS equivale a la cantidad de ADN de cada clula (p . ej., 2C en G 1; 4C al nal de la fase S; 4C en G 2).
Degradacin y reorganizacin de la envoltura nuclear
La envoltura nuclear se desorganiza hacia el nal de la profase mittica y meitica. Supone la fragmentacin de la envoltura nuclear, la disociacin de los complejos del poro nuclear y la despolimerizacin de la lmina nuclear ( g. 1-49 ). La lmina nuclear est formada por protenas de lamentos intermedios de tipo V, las laminas A, B y C, las cuales se asocian entre s para congurar la lmina nuclear.
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Figura 1-47. Fases del ciclo celular

Al final de la fase G2 concluye la duplicacin de los centrosomas y cada centrolo est ensamblado En la mitosis, los centrosomas poseen un complemento completo de protenas pericentriolares Huso mittico Mitosis El punto de restriccin del final de la fase G1 controla el paso a la fase S. La ausencia de molculas de transmisin de seales obliga a la clula a entrar en una fase de reposo G0.
G2
Citocinesis
Durante la transicin entre las fases G1 y S, los centrosomas se duplican. Los centrolos hijos provienen de cada centrolo
G1 G0
Material pericentriolar
Centrolo madre
Centrolo hijo
Durante G1, la clula presenta un centrosoma ormado por dos centrolos (un centrolo madre y un centrolo hijo) rodeados de material pericentriolar
Divisin celular en las clulas eucariotas: el ciclo nuclear y el ciclo centrosmico El ciclo celular se divide en cuatro fases: G1 (gap 1), S, G2 (gap 2) y mitosis. La mitosis se sigue de la citocinesis en la mayora de los casos. La replicacin del ADN tiene lugar a lo largo de la fase S y se detecta mediante autorradiografa utilizando [3H]+ timidina como precursor. La duracin de las fases del ciclo celular es variable. La mittica es la ms breve (alrededor de 1 h para una duracin total del ciclo celular de 24 h). La fase G1 es la ms larga (aproximadamente 11 h). La S concluye en el plazo de 8 h, mientras que G2 dura unas 4 h. En algunas clulas se interrumpe la divisin celular o se dividen de manera ocasional para sustituir a otras destruidas por lesiones o apoptosis. Estas clulas abandonan la fase G1 del ciclo celular y pasan a un estado de latencia, conocido como fase G0. A pesar de que las clulas G0 son activas desde el punto de vista metablico, han perdido su capacidad proliferativa a no ser que alguna seal extracelular adecuada estimule su reincorporacin al ciclo celular.
La fosforilacin de las laminas, catalizada inicialmente por la protena cinasa C y ms tarde por la cinasa Cdk1 activada por la ciclina A, da lugar a la desorganizacin de la lmina nuclear. Por otra parte, se dispersan los componentes del complejo del poro nuclear, las nucleoporinas, y las cisternas membranosas del r etculo endoplsmico, el cual constituy e el reservorio de la membrana nuclear para la ulterior reorganizacin de la envoltura nuclear. A lo largo de la anafase, las nucleoporinas y tr es componentes proteicos transmembrana de la membrana nuclear interna: el polipptido asociado a la lmina 2 , receptor de lamina B y la emerina se unen a la super cie de los cr omosomas (cromatina). A continuacin, las nucleoporinas y las pr otenas de la membrana nuclear interna reclutan cisternas del retculo endoplsmico y se reorganiza la envoltura nuclear hacia el nal de la telofase. La desfosforilacin de la lamina B por accin de laprotena fosfatasa 1 constituye el paso nal de la reconstruccin de la envoltura nuclear. La lamina B desfosforilada se asocia a las laminas A y C para formar la lmina nuclear antes de que se inicie la citocinesis. Esta secuencia de episodios pone de r elieve la importancia de las mutaciones que afectan a la expr esin de las pr otenas lamina A o de unin a laminas (v. cuadro 1-M) como origen de las laminopatas.
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Figura 1-48. Control del ciclo celular

4 Transicin G2/mitosis: el comienzo de la profase depende de la actividad ciclina A/Cdk1. La delecin del gen que codifica Cdk1 se asocia a mortalidad embrionaria temprana. 3 Inicio de la fase S: la ciclina A 3 se une a Cdk2 y fosforila a protenas que participan en la replicacin del ADN. G2 4 5 Mitosis: los complejos ciclina B/Cdk1 participan activamente y completan la mitosis
Cdk1
Ciclina A
Cdk1
Mitosis
5
Ciclina B
Punto de restriccin 2
2 G1 tarda: Cdk2 se activa como consecuencia de su unin a la ciclina E. La fosforilacin de la protena Rb concluye, lo que estimula de nuevo la activacin de la transcripcin mediada por E2F. Cdk2 y su regulacin son esenciales en la meiosis.
Punto de restriccin 1
3 2 G1
Ciclina D
Cdk2 Ciclina A
Cdk4/Cdk6
La regulacin de los acontecimientos del ciclo celular se basa en combinaciones complejas de cinasas dependientes de ciclinas (Cdk) y ciclinas en las distintas fases del ciclo celular, las cuales ejercen un control adicional de la maquinaria que interviene en el mismo.
1 G1 temprana: Cdk4 y/o Cdk6 son activadas por la ciclina D y ponen en marcha la fosforilacin de la protena del retinoblastoma (Rb). Este acontecimiento determina la liberacin de factores de transcripcin E2F que activan los genes de la ciclina E y la ciclina A.
Ciclina E
Cdk2
Ciclina E Ciclina A
Protena Rb fosforilada Liberacin de factores de transcripcin E2F
Genes supresores de tumores
Cuadro 1-S | Ciclo celular La divisin celular depende de la progresin coordinada de tres ciclos: el ciclo citoplsmico, el ciclo nuclear y el ciclo del centrosoma. Este ltimo interviene en la regulacin de los otros dos. El ciclo citoplsmico depende de la disponibilidad de las ciclinas activadas y desactivadas por cinasas dependientes de ciclinas (Cdk). Los inhibidores de Cdk inactivan los complejos Cdk-ciclina. Estos inhibidores estn sometidos a regulacin por un aumento en la transcripcin para interrumpir, en caso necesario, los ciclos citoplsmico y nuclear. El ciclo nuclear implica la duplicacin del ADN y la condensacin cromosmica. La fosforilacin de un complejo proteico unido a la secuencia de inicio de la replicacin del ADN por accin de Cdk2 supone el reclutamiento de la ADN polimerasa para comenzar y completar la sntesis de ADN en la fase S. La fosforilacin mediada por Cdk1 induce la condensacin cromosmica (mediada por la fosforilacin de la histona H3) y la degradacin de la envoltura nuclear (determinada por la fosforilacin de la lmina nuclear). En el ciclo del centrosoma tiene lugar la duplicacin de los dos centrolos que integran el centrosoma durante la fase S tras la fosforilacin de los sustratos centrosmicos por Cdk2. Los centrolos hijos provienen de cada centrolo. Las Cdk participan en la coordinacin de los ciclos citoplsmico, nuclear y centrosmico. El inicio de la replicacin del ADN y la duplicacin de los centrolos requiere la actividad de la Cdk2.
El control de la pr ogresin y de la nalizacin del ciclo celular no depende ex clusivamente de los complejos Cdk-ciclina. Los tejidos adoptan dos estrategias para limitar la proliferacin celular: 1. Limitacin de los factores mitgenos, como el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) y el factor de cr ecimiento broblstico (FGF), los cuales favorecen la proliferacin celular. 2. U tilizacin de genes reguladores que inhiben la pr oliferacin activamente. Estos genes, llamados genes supresores de tumores, regulan la proliferacin celular normal. El modelo del retinoblastoma ofrece datos de inters acerca del funcionamiento de los genes supresores de tumores (g. 1-50). Cada clula posee dos copias del gen del retinoblastoma (Rb) como mecanismo de seguridad. Cuando las dos copias del gen Rb estn mutadas, la protena Rb anmala induce la pr oliferacin neoplsica de las clulas retinianas. Cuando la mutacin afecta a una de las copias del gen Rb, la otra acta con normalidad e inhibe la pr oliferacin celular no r egulada, a no ser que se pr oduzca una segunda mutacin. Todas las clulas embrionarias de los nios con una sola copia intacta del gen Rb crecen del modo normal. E n una fase ms av anzada del embarazo, las clulas r etinianas pueden perder la copia normal del gen Rb, lo que hace posible el desarrollo del retinoblastoma. El gen Rb codica una pr otena nuclear que par ticipa en la r egulacin de la actividad de un grupo de protenas factores de transcripcin implicados en la sntesis del ADN y en la pr ogresin del ciclo celular . La protena Rb se une a los factores de transcripcin al ser desfosforilada. El complejo formado por la protena Rb y el factor de transcripcin se puede unir a los genes diana, si bien la actividad del factor de transcripcin se encuentra inhibida. La fosforilacin de la pr otena Rb por accin del complejo Cdk4-ciclina D implica su disociacin del complejo con el factor de transcripcin, lo cual activ a la expresin de genes espec cos (g. 1-51). La pr otena Rb fosforilada modi ca la accin inhibidora de los factores de transcripcin a una accin activ adora necesaria para la sntesis de ADN y el av ance del ciclo celular.
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Figura 1-49. Ensamblaje y desensamblaje de la envoltura nuclear

1 Durante la interfase, la lmina nuclear, una red de laminas A, B y C, se une a la cromatina y a la membrana interna de la envoltura nuclear.
Membrana nuclear interna
Lmina nuclear
Cromatina
2 En la mitosis, la protena cinasa C y, despus, la Cdk1 cinasa activada por la ciclina A fosforilan las laminas, lo que provoca la disociacin de los filamentos para dar lugar a dmeros libres de lamina.
Cabeza Dmeros de lamina Bastn Cola Sitio de fosforilacin
3 La envoltura nuclear se degrada a medida que la lmina nuclear se desintegra. Las laminas A, B y C continan estando fosforiladas y se dispersan. Los componentes del complejo del poro nuclear se desorganizan y se dispersan. Las cisternas del retculo endoplsmico actan como depsito de la futura envoltura nuclear.
Cisternas del retculo endoplsmico Telofase Cromosoma Cisternas del retculo endoplsmico asociadas a la cromatina Cisternas fragmentadas del retculo endoplsmico Laminas A, B y C fosforiladas
Complejo del poro nuclear desorganizado
Acontecimientos secuenciales durante el reensamblaje de la envoltura nuclear
4 Durante la anafase, las protenas solubles del complejo del poro nuclear (nucleoporinas) se unen a la superficie de la cromatina. 5 Durante el final de la anafase, el polipptido asociado a laminas 2 (LAP2), el receptor de lamina B (LBR) y la emerina protenas transmembrana de la membrana nuclear interna aparecen en la superficie de la cromatina. 6 Durante el final de la telofase, las cisternas del retculo endoplsmico se anclan a LAP2, LBR y emerina, y se inicia la reorganizacin de la envoltura nuclear. 7 Antes de la citocinesis, la lamina B se desfosforila por accin de la protena fosfatasa 1 y, junto a las laminas C y A, pone en marcha la formacin de la lmina nuclear. La formacin de esta estructura comienza una vez finalizada la reconstruccin de la envoltura nuclear.
Protena fosfatasa 1
Nucleoporinas Cromatina LBR Emerina LAP2 Cisterna del retculo endoplsmico
6
Ensamblaje del poro nuclear
Ensamblaje de la lmina nuclear
Lamina B fosforilada
Lamina B desfosforilada
Importancia clnica: gen del retinoblastoma y otros genes supresores
El retinoblastoma es un tumor que aparece en una etapa temprana de la vida y rara vez se desarr olla con posterioridad a los 5-6 aos. A menudo, se obser van varios casos en el seno de una misma familia. E n estos grupos familiares, el tumor puede afectar al 50% de la descendencia. Los nios con la forma familiar del retinoblastoma suelen presentar varios tumores en ambos ojos. Una segunda variante del retinoblastoma, la forma espordica, se observa en nios cuyos padres carecen de antecedentes de la entidad. Despus de curarse, estos pacientes
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Figura 1-50. Protena Rb, un inhibidor del avance del ciclo celular
G2 Mitosis Los factores de crecimiento estimulan el paso de la fase G1 a la fase S S G1
Cdk4
Ciclina D La protena Rb fosforilada por accin del complejo ciclina D-Cdk4 facilita el paso a travs del punto de restriccin. La protena Rb fosforilada est inactiva.
Punto de restriccin
La protena Rb no fosforilada impide el avance del ciclo celular ms all del punto de restriccin de G1
no transmiten la enfermedad a su descendencia al llegar a la vida adulta. Los nios aquejados de la forma espordica son normales desde el punto de vista gentico en el momento de la fecundacin, per o a lo largo de la embriognesis se pr oducen dos mutaciones en una estirpe celular que dar lugar a los fotorr eceptores retinianos: los bastones y los conos. Los genes Rb portadores de una doble mutacin as creados inducen la proliferacin celular que conducir al desarr ollo del retinoblastoma. En el retinoblastoma familiar, el vulo fecundado contiene una copia mutada del gen Rb procedente del espermatozoide o el ovocito. Todas las clulas derivadas del cigoto portan esta mutacin, incluidas las que integran la r etina. La copia normal del gen Rb habr de sufrir una mutacin para alcanzar el estado de mutacin doble necesario para la aparicin del tumor. Cada una de las clulas retinianas es susceptible de carcinogenia y un solo episodio pondr en mar cha el proceso de desarrollo tumoral. El retinoblastoma representa uno de los distintos tumor es que aparecen como consecuencia de la prdida o la inactivacin de genes clave. El tumor de Wilms del rin se forma como consecuencia de la desaparicin de un gen r egulador de la proliferacin, llamado WT-1. De manera similar al gen Rb, ambas copias deben estar mutadas para que la clula pr olifere sin control. Un gen supresor de tumores que no encaja claramente en este modelo es p53, el gen mutado ms a menudo en los tumor es humanos (leucemias, linfomas, tumores cerebrales y cncer de mama, entr e otros). El gen p53 codica la protena p53, un tetrmero que se une a una secuencia espec ca del ADN implicado en el control de la transcripcin de algunos genes. La presencia de una mutacin que afecte a una de las cuatro subunidades de p53 puede repercutir en el funcionamiento de las otras tr es. A diferencia de las mutaciones que afectan a muchos otr os genes supr esores de tumor es a travs de la supresin total de la funcin gnica, las mutaciones en p53 pueden dar lugar a una proliferacin leve o invasiva. En el captulo 16, Segmento digestivo inferior, nos ocuparemos del gen supresor de tumor es poliposis adenomatosa del colon (APC), el cual est implicado en una variante hereditaria del cncer de colon (poliposis adenomatosa familiar) secundaria a la transformacin maligna de algunos de los muchos plipos (tumores benignos) observados en los sujetos aquejados de este trastorno .
MITOSIS
La duplicacin del par de centrolos, cada uno de los cuales migra hacia posiciones opuestas del ncleo para organizar un centrosoma, precede a la mitosis. La funcin primaria del centr osoma es la formacin y el mantenimiento del huso mittico,
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Figura 1-51. La protena Rb desfosforilada, un gen supresor

1
Protena Rb desfosforilada Factores de transcripcin
ADN
La actividad gnica est inhibida. No se sintetiza ADN ni avanza el ciclo celular NCLEO
Factores de transcripcin
Disociacin de Rb de los factores de transcripcin
Fosforilacin de Rb por el complejo Cdk4-ciclina D Protena Rb fosforilada
ADN
3 Unin a la diana gnica de los factores de transcripcin disociados
Activacin gnica; sntesis de ADN y avance del ciclo celular
Cdk4 Ciclina D
NCLEO
1 La forma desfosforilada de la protena Rb se une a un grupo de factores de transcripcin y suprime la transcripcin gnica de dianas gnicas activadas normalmente. 2 La fosforilacin de Rb por accin del complejo Cdk4-ciclina D induce la disociacin de los factores de transcripcin de la protena Rb a lo largo de la fase G1 tarda. 3 Los factores de transcripcin libres estimulan la expresin de los genes necesarios para la sntesis de ADN y el avance del ciclo celular.
integrado por microtbulos. El centrosoma se conoce tambin como centro organizador de los micr otbulos (COM) debido a esta funcin. Cada centr osoma puede organizar alrededor de 1.000 micr otbulos nuevos por minuto a par tir de dmeros de tubulina procedentes del desensamblaje de los micr otbulos citoplsmicos. La mitosis se divide en cuatr o subetapas: profase, metafase, anafase y telofase. En la gura 1-53 se resumen los aspectos ms destacados de la mitosis.
Telomerasa, senescencia y cncer
Las clulas somticas pueden someterse a un nmer o determinado de divisiones celulares antes de pasar a un estado de senescencia. Por el contrario, las clulas tumorales tienen una vida ilimitada, lo que es necesario para el desarr ollo de un tumor. Los estudios in vitro con cultivos celulares representan un modelo para el estudio del reloj biolgico de las clulas somticas normales. Los telmeros son los extremos de los cromosomas y se componen de un tramo de secuencias de nucletidos r epetidas (g. 1-52). Los telmer os se ocupan de mantener la integridad cromosmica y representan el reloj biolgico de la clula. Su tamao va disminuyendo en cada divisin celular cuando las ADN polimerasas no copian los extremos de los cr omosomas. La senescencia celular tiene lugar cuando el acortamiento de los telmeros impide mantener la integridad cr omosmica. El mantenimiento de la longitud de los telmer os en las clulas germinales masculinas y femeninas corr e a cargo de la enzima telomerasa, una ribonucleoprotena con actividad transcriptasa inv ersa que emplea ARN como molde para mantener dicha longitud. La telomerasa no apar ece en las clulas somticas. La expresin de la telomerasa es elev ada en la may or parte de las clulas tumorales. El complejo de la telomerasa (v. g. 1-52) engloba la transcriptasa inversa de la telomerasa (TERT), el ARN patrn de la subunidad de ARN de la telomerasa (TR), que aporta el molde para la sntesis r epetida de los extr emos cromosmicos, y la disquerina (DKC1), una pr otena auxiliar. Este complejo se organiza en los cuerpos de Cajal en el compar timento nuclear y se transpor ta hasta los telmer os
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Figura 1-52. El complejo de la telomerasa

Los telmeros humanos se componen de muchas kilobases de repeticiones TTAGGG con una hebra adelantada y otra retrasada ricas, respectivamente, en G y en C. La hebra rica en G se extiende en direccin 3, lo que da lugar a un solapamiento en G.
Cromosoma Hebra retrasada rica en C Hebra adelantada rica en G 1 Cuerpo de Cajal
Telmero
ATC-5
Solapamiento en G
GGGTTAG-3 AUC
Reptina
Pontina
Disquerina (DKC1) Protena 1 de los cuerpos de Cajal de la telomerasa (TCAB1)
Molde de ARN del telomerasa (TR) Transcriptasa inversa de la telomerasa (TERT)
Ncleo Citoplasma
1 El complejo de la telomerasa se ensambla en los cuerpos de Cajal en el cleo y es transportado a los telmeros por la accin de la protena auxiliar TCAB1. 2 Las ATPasas pontina y reptina activan el complejo telomrico en los extremos cromosmicos y ponen en marcha la incorporacin de nucletidos. A travs de este mecanismo, el complejo telomrico compensa el acortamiento de los telmeros para conservar su longitud y estabilidad. Esta ltima es muy importante en las clulas madre en proliferacin rpida. Un complejo integrado por seis protenas, llamado shelterina, regula la longitud del telmero (no se muestra).
por accin de una pr otena auxiliar, la protena 1 de los cuerpos de C ajal de la telomerasa (TCAB1). Dos ATPasas, la pontina y la reptina, activan el complejo de la telomerasa en el extremo del cromosoma y ponen en marcha la incorporacin de nucletidos. La disfuncin de los telmeros se ha relacionado directamente con dos trastornos: la disqueratosis congnita y la brosis pulmonar idioptica. La primera se distingue por la mielodepr esin, las anomalas en la pigmentacin cutnea, la distroa ungueal y la leucoplaquia (placas queratsicas en la lengua y en la cara interna de las mejillas). La brosis pulmonar idioptica da lugar a una destr uccin gradual del parnquima pulmonar, la cual que conduce a la muerte. Los pacientes afectados por ambas enfermedades por tan telmeros acortados.
Importancia clnica: funcin de la protena p53 en la quimioterapia
La quimioterapia y la radioterapia son dos tratamientos ecaces frente a los tumores metastsicos. Los frmacos quimioterpicos pueden: 1. Propiciar el establecimiento de enlaces cr uzados en el ADN (compuestos alquilantes). 2. Inhibir las enzimas necesarias para la sntesis del ADN (anlogos de nucletidos). 3. Alterar los micr otbulos del huso mittico (paclitax el, vinblastina). Estos frmacos suelen administrarse en combinacin durante perodos br eves o bien de forma continuada, con arr eglo a la susceptibilidad del tipo tumoral y tratando de evitar la to xicidad en rganos muy sensibles, como la mdula sea, el epitelio intestinal, los riones y el sistema ner vioso.
1. EPITELIO
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Figura 1-53. Fases de la mitosis

Envoltura nuclear Centrmero (regin cinetocrica) Cromtida Cohesina Condensina Centrosoma Profase 1. Un centrosoma inicia la organizacin del huso mittico. 2. La envoltura nuclear se desintegra como consecuencia de la fosforilacin de las laminas. 3. Los cromosomas replicados se condensan. Cada cromosoma consta de dos cromtidas idnticas (denominadas cromtidas hermanas) que se mantienen unidas en el centrmero o por constriccin primaria del cromosoma. Una protena de unin a la cromatina, llamada cohesina, une a las cromtidas hermanas entre s. La condensina de la periferia de las cromtidas compacta la cromatina. Microtbulo cinetocrico Microtbulo radial Microtbulo polar Metafase Placa ecuatorial Complejo promotor de la anafase (APC) Topoisomerasa 1. El cinetocoro aparece en la regin centromrica. Se trata de una especializacin estructural de la superficie del cromosoma en la que se insertan los microtbulos. Los que se extienden desde el centrosoma hasta el cinetocoro reciben el nombre de microtbulos cinetocricos. 2. Los cromosomas se alinean en la placa ecuatorial (tambin conocida como placa metafsica). 3. Los microtbulos que se extienden desde un polo de la clula hasta el opuesto son los microtbulos polares. Los microtbulos radiales parten del centrosoma. No se insertan en el cinetocoro. 4. Durante la metafase, los cromosomas se mantienen en la placa ecuatorial debido a la accin de dos fuerzas contrarias equilibradas entre s. Los microtbulos cinetocricos empujan a los cromosomas hacia uno de los polos, mientras que los microtbulos radiales estabilizan el centrosoma al anclarse a la membrana plasmtica. 5. El complejo promotor de la anafase, APC, se desensambla cuando la unin de los microtbulos cinetocricos al cinetocoro es correcta. Cuando el cinetocoro no est unido a los microtbulos, el APC detiene el ciclo mittico en la metafase mediante el retraso de la actividad de las ciclinas. Anafase 1. Las cromtidas hermanas se separan debido a que, de forma simultnea, tambin lo hacen los centrmeros. 2. La topoisomerasa, una enzima localizada en la regin cinetocrica, libera las fibras enrolladas de cromatina para propiciar la separacin de las cromtidas hermanas. 3. Dos procesos independientes, aunque simultneos, provocan la separacin de las cromtidas hermanas a los polos opuestos: 1) los microtbulos cinetocricos se acortan y las cromtidas se separan del plano ecuatorial hacia sus polos respectivos. Este paso se denomina, generalmente, anafase A. 2) Los polos celulares se separan debido al alargamiento de los microtbulos polares. Este paso recibe el nombre de anafase B. 4. La aneuploida (nmero anmalo de cromosomas) puede deberse a la separacin incorrecta de las dos cromtidas de un cromosoma a las dos clulas hijas. La ausencia de unin de los microtbulos cinetocricos al cinetocoro puede inhibir el comienzo de la anafase. Existe un mecanismo de verificacin en el cinetocoro que evita la aneuploida. Telofase 1. La envoltura nuclear se reorganiza gradualmente; las laminas se desfosforilan y la lmina nuclear se ensambla. 2. Los cromosomas se descondensan. 3. En el transcurso de la citocinesis, aparece un anillo contrctil transitorio,formado por actina y miosina, alrededor de la regin ecuatorial, el cual se contrae para separar ambas clulas hijas por medio de un proceso llamado abscisin (del latn abscindo, separar de). 4. En el ncleo del anillo contrctil pueden quedar microtbulos residuales. Forman una estructura conocida como cuerpo medio. 5. Los microtbulos radiales, cinetocricos y polares desaparecen.
Los microtbulos polares se alargan
Los microtbulos cinetocricos se acortan
Anillo contrctil
Cuerpo medio
Se han de nido dos tipos de r esistencia tumoral a los frmacos quimioterpicos: 1. Resistencia intrnseca (tumores habitualmente resistentes a muchos frmacos melanoma, hepatocarcinoma, carcinoma de clulas renales). 2. Resistencia adquirida (tumores que adquieren resistencia a la quimioterapia tras un perodo inicial de sensibilidad). Una forma de r esistencia adquirida se debe a los genes de la familia gnica de la resistencia a mltiples frmacos (mdr) (g. 1-54). Estos genes codi can bombas dependientes de ATP que participan en el transporte de molculas orgnicas de gran
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tamao. La familia gnica mdr se estudiar, de nuevo, en el captulo 17, Glndulas digestivas, al abordar el mecanismo de secr ecin biliar de los hepatocitos. El gen implicado en la r esistencia a la quimioterapia antitumoral que se ha estudiado con may or detalle es mdr-1. La exposicin r epetida a algunos frmacos quimioterpicos se ha relacionado con la sobreexpresin de este gen y con el aumento de la expulsin de estos compuestos cuando entran en una clula tumoral. Los daos al ADN ocasionados por la quimioterapia y la radioterapia estrs genotxico inducen la activacin de p53, un factor de transcripcin tetramrico que destruye las clulas con lesiones terminales a travs de la activ acin de un programa de muer te celular o apoptosis (v. cuadro 1-T). En las clulas normales, el estrs genotxico estimula la inhibicin de Mdm2 (del ingls mouse double minute 2), lo que posibilita la activacin de p53, as como la continuacin del cr cimiento e y del desarrollo normales (v. g. 1-54). Mdm2 es una ubicuitina ligasa que se une a p53 y facilita su degradacin dependiente de la ubicuitina en el citoplasma por accin del proteasoma 26S (v. g. 3-14 en el captulo 3, T ransmisin de seales celular es). La inhibicin de Mdm2 (p. ej., por ARF del ingls alternate reading frame, una pr otena de 14 kDa) permite la activacin de las funciones supresoras de tumores de p53. Mdm2 ejerce un efecto inhibitorio similar en la pr otena supresora del r etinoblastoma (protena Rb). Las concentraciones de ARF , Mdm2 y p53 no son tan altas en las clulas no sometidas a estrs genotxico . La semivida de p53 slo es de 10-15 min. Las clulas tumorales utilizan tres posibles mecanismos para evitar la destruccin de las clulas por apoptosis inducida por estrs genotxico: 1. Incapacidad de Mdm2 de inhibir la funcin supr esora de tumores de p53. 2. Afectacin de la funcin de p53 por una mutacin inactiv adora. 3. Alteracin de la cascada apoptsica (p . ej., pr dida de la activ acin de la caspasa 9). En el 50% de los tumor es humanos se detectan mutaciones del gen TP53, el cual codica la pr otena p53. La desaparicin de la expr esin de TP53 por una
Figura 1-54. Quimioterapia antitumoral y actividad de p53
Funcionamiento de la actividad supresora de tumores de p53 Estrs genotxico Clulas normales Mdm2 (ubicuitina ligasa) inactivada p53 estable y activa Supresin de tumores por apoptosis
Cuadro 1-T | p53, una protena supresora de tumores La protena supresora de tumores p53 salvaguarda la integridad del ADN frente a estrs nocivo, denominado estrs genotxico. La funcin protectora de p53 depende de su capacidad de induccin de la muerte celular programada o apoptosis o detencin de los acontecimientos del ciclo celular cuando una clula est sometida a estrs genotxico. Cmo funciona p53? Como factor de transcripcin, p53 controla la activacin de la transcripcin de genes proapoptsicos y la inactivacin de los antiapoptsicos. A travs de este mecanismo son destruidas aquellas clulas afectadas por estrs genotxico. Qu puede ocurrir de forma anmala? La prdida de la funcin de p53 puede deberse a una mutacin del gen TP53, que codica p53, o bien a una alteracin de la va de transmisin de seales que controla la funcin de esta protena (v. g. 1-54). En qu radica la importancia de p53? Las clulas tumorales son muy sensibles a las seales proapoptsicas, pero pueden sobrevivir en ausencia de la funcin de p53.
Clulas tumorales
Mdm2 (ubicuitina ligasa) activa
Inactivacin de p53
Ausencia de supresin de tumores
2 Aumento de la exportacin de frmacos quimioterpicos a travs de mdr-1 1 La inactivacin de p53 inhibe la respuesta protectora frente a daos al ADN (muerte celular).
Mecanismos de resistencia de tumores a frmacos quimioterpicos
mdr-1
1 La resistencia adquirida por una mutacin en el gen TP53 impide la muerte celular como respuesta a frmacos inductores de daos al ADN. 2 El aumento de la exportacin de un frmaco por una protena asociada a la resistencia a mltiples frmacos (mdr) impide la accin intracelular.
p53
ADN
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Figura 1-55. Nomenclatura de los cromosomas humanos: cariotipos normales y anmalos

Satlite Brazo corto (p de pequeo) Tallo Acrocntrico Submetacntrico Brazo largo (q)
46,XX
Mujer normal (46 cromosomas, incluido el par XX)
46,XY
Hombre normal (46 cromosomas, incluido el par XY)
Metacntrico
Constriccin primaria o regin centromrica
47,XX,+21
Mujer con un cromosoma 21 extra (sndrome de Down)
47,XXY
47,XY,+17p+
Hombre con un cromosoma Hombre con un cromosoma X extra (sndrome 17 extra y aumento de Klinefelter) de la longitud del brazo corto
mutacin autosmica dominante origina el fenotipo de tumor es mltiples llamado sndrome de Li-Fraumeni (v. cuadro 1-U ). es un gen supresor de tumores. La p53 inactivacin de la actividad de p53 est alterada en las clulas tumorales r esistentes a frmacos (v. g. 1-54). La prdida de expresin de p53 en las clulas tumorales humanas y en algunos estudios clnicos se ha propuesto la existencia de una relacin entre la inactiv acin de la expr esin de p53 y la r esistencia a compuestos quimioterpicos. Los frmacos quimioterpicos capaces de unirse a M dm2 podran conferir estabilidad y aumentar las concentraciones de p53 en las clulas tumorales para ejer cer una accin supresora de tumores basada en la induccin de la apoptosis. E l mecanismo que sustenta la muer te celular pr ogramada o apoptosis se comenta en el captulo 3, Transmisin de seales celulares.
Cariotipicacin
Cuadro 1-U | Sndrome de Li-Fraumeni El sndrome de Li-Fraumeni (LFS) es un trastorno autosmico dominante que se distingue por la predisposicin al desarrollo de tumores. En un sujeto joven (menor de 45 aos) pueden desarrollarse distintos tipos de neoplasias malignas: tumores cerebrales, tumores mamarios (40% de los casos en mujeres), leucemia aguda y sarcomas de partes blandas y seos. El sndrome LFS se debe a una mutacin del gen supresor de tumores p53, un factor de transcripcin que desempea una funcin reguladora en el ciclo celular. La incidencia del LFS es baja. A pesar de que la neoplasia inicial suele tratarse con resultados satisfactorios en los nios afectados, tienen un riesgo elevado de presentar un segundo tumor maligno primario.
En el ser humano existen 22 pares de autosomas y un par de cromosomas sexuales (XX o XY). En la clasi cacin de los cr omosomas segn la longitud y la posicin del centrmero existen siete gr upos designados con las letras A a G. En la terminologa de la citogentica humana, el nmer o total de cr omosomas (46) se sigue del nmer o total de cr omosomas sexuales ( g. 1-55 ).Un hombre normal se identi ca como 46,XY (46 cromosomas, incluido el par de cromosomas XY), y una mujer , como 46,XX (46 cromosomas, incluido el par de cromosomas XX). Los cromosomas adicionales se indican al expr esar el nmero del cromosoma extra despus de los cromosomas sexuales precedido por el signo ms (+). De este modo, el cariotipo de una mujer afectada por la trisoma del cr omosoma 21 (sndrome de Down) es 47,XX + 21. Un hombre con un cr omosoma X adicional se designa como 47,XXY. Se aade el signo de ms o menos tras el smbolo del cr omosoma para sealar el aumento o la disminucin de la longitud de uno de sus braz os. La letra p se utiliza para el brazo corto, y la q, para el brazo largo. Por tanto, 47,XY, + 17p+ corresponde a un hombre con 47 cromosomas por la presencia de un cr omosoma 17 adicional, con un aumento de la longitud de su braz o corto.
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Conceptos esenciales | Epitelio

El epitelio constituye uno de los cuatro tejidos bsicos. Los otros tres tejidos bsicos son el conjuntivo, el muscular y el nervioso. Los epitelios se dividen en tres grupos principales en funcin: 1) del nmero de capas celulares (una capa: epitelio simple; ms de una capa: epitelio estraticado); 2) de la morfologa de las clulas (epitelio escamoso, epitelio cbico y epitelio cilndrico), y 3) de la morfologa de las clulas en la capa ms supercial (epitelio escamoso estraticado, epitelio cbico estraticado y epitelio cilndrico estraticado). El epitelio escamoso estraticado se subdivide en moderadamente queratinizado (con frecuencia denominado no queratinizado) y muy queratinizado. El trmino endotelio se aplica al epitelio escamoso simple que tapiza los vasos sanguneos y linfticos. El vocablo mesotelio se reere al revestimiento cbico o escamoso simple de la serosa (peritoneo, pleura y pericardio). Los tumores que provienen del mesotelio reciben el nombre de mesoteliomas. Un componente citoesqueltico destacado de las clulas epiteliales son las protenas queratinas (citoqueratinas). Los anatomopatlogos tratan de detectar la presencia de queratinas para denir el origen epitelial de un tumor (llamado carcinomas, a diferencia de los de origen conjuntivo, conocidos como sarcomas). El epitelio seudoestraticado representa un tipo intermedio en el que todas las clulas se encuentran en contacto con la lmina basal, pero no todas alcanzan la luz. Se considera que el epitelio transicional, o urotelio, el cual reviste las vas urinarias, es seudoestraticado, aunque su aspecto corresponde a uno escamoso estraticado. Las clulas ms externas del urotelio de la vejiga urinaria son capaces de modicar su geometra y su conguracin como respuesta a las fuerzas de tensin que ejerce la orina. Algunos epitelios pueden subdividirse en funcin de la presencia de diferenciaciones apicales, como cilios, microvellosidades y estereocilios. El epitelio seudoestraticado ciliado aparece en el rbol respiratorio y el oviducto. El epitelio cbico simple de ciertos segmentos de la neurona y el epitelio cilndrico simple del intestino delgado poseen microvellosidades que forman un borde en cepillo a lo largo del dominio apical. Los estereocilios se localizan en el revestimiento epitelial del epiddimo y en las clulas ciliadas del odo interno. Las clulas epiteliales se organizan en capas celulares en estrecho contacto a travs de estructuras especializadas, como uniones hermticas, uniones de anclaje (desmosomas en cinturn y puntuales y hemidesmosomas) y uniones comunicantes. Las clulas epiteliales son muy polarizadas. Poseen un dominio apical y un dominio basolateral. La disposicin de las uniones y sus componentes, la distribucin polarizada del citoesqueleto de actina y la presencia de la membrana basal en la supercie basal denen los lmites de cada dominio. El dominio apical de algunas clulas epiteliales presenta diferenciaciones que se proyectan hacia la luz. Estas diferenciaciones apicales pueden ser mviles (cilios) o inmviles (microvellosidades y estereocilios). Los cilios mviles contienen un axonema, formado por una disposicin concntrica de nueve dobletes de microtbulos que rodean un par central. Los cilios parten de un cuerpo basal una estructura derivada del centrolo, que se inserta en la regin apical de la membrana plasmtica. A diferencia del axonema, el cuerpo basal y el centrolo estn compuestos por nueve tripletes de microtbulos en disposicin helicoidal. No aparecen microtbulos centrales en los cuerpos basales ni los centrolos. Las microvellosidades y los estereocilios inmviles contienen un eje central de microlamentos de actina. Las microvellosidades presentan una longitud uniforme. Los estereocilios son ms largos, tienen una longitud variable y tienden a ramicarse en el epitelio del epiddimo. Las molculas de adhesin celular y las uniones celulares mantienen la posicin y la estabilidad de las capas de clulas epiteliales. Las molculas de adhesin celular se dividen en dependientes de Ca2+ e independientes de Ca2+. Las cadherinas y las selectinas son dependientes de Ca2+. Las molculas de adhesin celular (CAM) de la familia semejante a las inmunoglobulinas y las integrinas son independientes de este in. A diferencia de las cadherinas, las selectinas y las CAM, las integrinas constan de dos subunidades, y , que dan lugar a un heterodmero. Las cadherinas forman cis-homodmeros homlos (entre iguales) que interaccionan a travs del dominio extracelular con dmeros semejantes o diferentes en las clulas epiteliales adyacentes (para originar trans-homodmeros o transheterodmeros [entre desiguales]). El dominio intracelular de las cadherinas interacciona con el complejo de las cateninas formado por las cateninas , y . Este complejo interacciona con la actina lamentosa mediante protenas adaptadoras ( -actinina, vinculina y formina-1). Las selectinas se unen a ligandos de naturaleza glucdica a travs de su dominio de reconocimiento de hidratos de carbono. Estas protenas desempean una funcin destacada en el proceso de homing, en la migracin transendotelial de los neutrlos, los linfocitos y los macrfagos en las reacciones inamatorias, y en la formacin de estras grasas en el espacio subendotelial de los vasos sanguneos en las etapas iniciales del desarrollo de las lesiones ateroesclerticas. El dominio extracelular semejante a las inmunoglobulinas de las CAM se asocia a molculas idnticas (unin homotpica) o diferentes (unin heterotpica) de otra clula adyacente. La molcula CAM CD4 constituye el receptor para el VIH-1 en los linfocitos T (linfocitos colaboradores). Las integrinas son heterodmeros formados por dos subunidades asociadas, y . El dominio extracelular de la subunidad de las integrinas se une a laminina y bronectina, dos componentes de la lmina basal. Los proteoglucanos y el colgeno se asocian a la laminina y la bronectina para dar lugar a la lmina reticular. El dominio intracelular se une a la actina lamentosa a travs de las protenas adaptadoras -actinina, vinculina y talina. Las integrinas vinculan la matriz extracelular con el citoesqueleto interno. La membrana basal es una estructura positiva para PAS que aparece en el dominio basal de las clulas epiteliales. Se compone de una lmina basal y otra reticular, que pueden visualizarse con microscopia electrnica. El anatomopatlogo evala la integridad de la lmina basal con el n de determinar si las clulas epiteliales malignas en proliferacin se localizan slo en la capa epitelial (carcinoma in situ) o bien han invadido el tejido conjuntivo suprayacente dotada de vasos sanguneos y linfticos.
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Las protenas ADAM presentan una relacin funcional con las integrinas. El dominio desintegrina de algunas protenas ADAM puede inhibir las anidades de unin por las integrinas. El dominio metaloproteinasa de las ADAM interviene en la liberacin del dominio extracelular de los factores de crecimiento, las citocinas y los receptores anclados a la membrana plasmtica. Las protenas ADAM lo hacen en la angiogenia, la fecundacin, la neurogenia y el cncer. Las uniones celulares no se limitan a mantener la integridad mecnica del epitelio, sino que tambin actan como estructuras de transmisin de seales que comunican la posicin celular y pueden modular la proliferacin de clulas o la muerte celular programada (apoptosis). Estas uniones pueden ser simtricas, como las uniones hermticas, los desmosomas en cinturn (znula adherente), los desmosomas puntuales (mcula adherente) y las uniones comunicantes, y asimtricas, como los hemidesmosomas. Las uniones hermticas se componen de dos protenas transmembrana, las tetraespaninas ocludina y claudina, y dos protenas similares a las inmunoglobulinas, las molculas de adhesin de las uniones (JAM) y las nectinas. Estas ltimas se asocian a la protena afadina para crear el complejo afadina-nectina. Las JAM y las nectinas forman dmeros (denominados dmeros cis) y los dmeros localizados en las membranas plasmticas enfrentadas interaccionan entre s (dmeros trans). Las protenas adaptadoras znula oclusiva ZO-1, ZO-2 y ZO-3 vinculan las ocludinas, las claudinas, las JAM y el complejo afadina-nectina con los microlamentos de actina. Las claudinas conforman el esqueleto de las hebras de las uniones hermticas, que pueden visualizarse en las microfotografas electrnicas de criofractura. Las uniones hermticas forman una barrera perimetral que separa el dominio apical del basolateral. Las molculas pueden atravesar las lminas de clulas epiteliales y endoteliales por medio de dos vas diferentes: la va transcelular y la va paracelular. Estas uniones regulan el transporte paracelular de iones y molculas de forma dependiente de la carga y el tamao. De manera similar a las uniones hermticas, la znula adherente (desmosomas en cinturn) muestra una distribucin perimetral e interacciona con la actina lamentosa. Un rasgo distintivo de estas uniones es la presencia de una placa que contiene desmoplaquina, placoglobina ( -catenina) y placolina. Las cadherinas (desmocolinas y desmoglenas) y el complejo afadina-nectina actan como vnculo de las membranas plasmticas de las clulas epiteliales adyacentes. La regin intracelular de las cadherinas interacciona con la actina a travs del complejo de las cateninas. La mcula adherente (desmosoma puntual) conere fuerza y rigidez a la capa de clulas epiteliales, en especial en el epitelio escamoso estraticado, y une los miocardiocitos adyacentes como componente de los discos intercalados. A diferencia de los desmosomas en cinturn, los puntuales son similares a un punto. La placa (formada por desmoplaquina, placoglobina y placolina) constituye el sitio de insercin de los lamentos intermedios de queratina (llamados tonolamentos) o desmina (disco intercalado). La desmoplaquina acta como protena de unin a los lamentos intermedios en la placa. No aparece el complejo de la catenina. Las cadherinas ms abundantes son las desmocolinas y las desmoglenas. Los hemidesmosomas son uniones de anclaje asimtricas localizadas en la regin basal de las clulas epiteliales. Los hemidesmosomas constan de dos componentes: una placa interna, asociada a los lamentos intermedios, y
una placa externa, que une el hemidesmosoma a la lmina basal a travs de los lamentos de anclaje (laminina 5). Las uniones comunicantes son conexiones de comunicacin simtricas (en lugar de uniones de anclaje). Estas uniones se componen de conjuntos de canales intercelulares que conectan el citoplasma de clulas adyacentes. Se distinguen ms de 20 monmeros de conexinas, cada uno de los cuales se identica por su masa molecular asignada. Seis monmeros de conexina forman un conexn, que se inserta en la membrana plasmtica. Los conexones se aparean con sus homlogos en la membrana plasmtica de la clula adyacente y forman un canal intercelular axial que permite la difusin de iones y pequeas molculas de una clula a otra. Una mutacin del gen conexina32 (Cx32) de las clulas de Schwann que sintetizan mielina da lugar al sndrome de Charcot-Marie-Tooth ligado al cromosoma X, una enfermedad desmielinizante que afecta al sistema nervioso perifrico. La membrana basal est formada por dos elementos: una lmina basal, en contacto directo con la supercie de las clulas epiteliales basales, y una lmina reticular, compuesta por bronectina y bras de colgeno, y que se contina con el tejido conjuntivo. La lmina basal contiene laminina, colgeno de tipo IV, entactina y proteoglucanos. Es un componente destacado de la barrera de ltracin glomerular de los riones. La supercie de las clulas musculares est recubierta por una lmina basal que favorece el mantenimiento de la integridad de las bras del msculo esqueltico durante la contraccin. La alteracin de la relacin existente entre la lmina basal y las clulas musculares da lugar a las distroas musculares. La membrana basal se reconoce en muestras teidas con PAS en la microscopia ptica. El citoesqueleto se compone de microlamentos (7 nm de espesor), microtbulos (25 nm de dimetro) y lamentos intermedios (10 nm de dimetro). La unidad bsica de un microlamento es el monmero de actina G. La polimerizacin dependiente de ATP de los monmeros da lugar a un lamento de actina F de 7 nm de espesor. Los monmeros que se aaden al extremo romo del lamento se desplazan, o se mueven como en una cinta continua, a lo largo del lamento hasta desprenderse por despolimerizacin en el extremo puntiagudo. Las protenas motoras, como la miosina Va, transportan vesculas con mercanca a lo largo de la actina F. La miosina Va defectuosa origina el sndrome de Griscelli, una alteracin del transporte de los melanosomas a los queratinocitos en la epidermis. Los sujetos afectados por esta entidad presentan cabello plateado, albinismo parcial, anomalas neurolgicas ocasionales e inmunodeciencias. La actina F asociada a miosina II forma las estructuras contrctiles de las clulas de los msculos esqueltico y cardaco. Representan los componentes de miolamentos de las miobrillas. Estas se componen de una cadena lineal de sarcmeros y constituyen la unidad contrctil bsica presente en el citoplasma de las clulas del msculo estriado. Los microtbulos estn formados por dmeros de y tubulina. Los dmeros de tubulina se organizan longitudinalmente para dar lugar a protolamentos. La asociacin laterolateral de 13 protolamentos origina un microtbulo. Los microtbulos sufren fases alternas de polimerizacin lenta y despolimerizacin rpida, un proceso conocido como inestabilidad dinmica. La polimerizacin de las subunidades de tubulina depende del GTP. Los microtbulos organizan el centrosoma, una estructura formada por un par de centrolos rodeados de matriz
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pericentriolar. Cada centrolo se compone de nueve tripletes de microtbulos en disposicin helicoidal. Los centrolos se duplican a lo largo del ciclo celular con anterioridad al ensamblaje del huso mittico durante la divisin celular. Los centrolos originan los cuerpos basales, de los que provienen los cilios. El aparato mittico se compone de un centro mittico, representado por el centrosoma, y el huso mittico, formado por tres tipos de microtbulos: 1) microtbulos radiales; 2) microtbulos cinetocricos, y 3) microtbulos polares. Los microtbulos cinetocricos se unen al cinetocoro, un agregado proteico asociado al centrmero, la constriccin primaria del cromosoma. Centrosoma y centrmero son trminos similares, si bien representan dos estructuras distintas. La quimioterapia antitumoral acta frente a los microtbulos con el n de inhibir la divisin de las clulas tumorales a travs de la desestabilizacin o la estabilizacin de la inestabilidad dinmica. Se han utilizado de manera frecuente los derivados de los alcaloides de la vinca y el paclitaxel. El axonema consta de nueve dobletes de microtbulos en disposicin concntrica, rodeados por un par central de microtbulos. Cada doblete se compone de un tbulo A, formado por 13 protolamentos, y se une estrechamente a un tbulo B, integrado por 10-11 protolamentos. Los cilios y los agelos de la cola del espermatozoide contienen axonemas. Los brazos de dinena, una ATPasa, se unen al tbulo A. La ATPasa hidroliza ATP para obtener la energa necesaria para el desplazamiento de los microtbulos, el fundamento del movimiento ciliar y agelar. Los microtbulos constituyen las vas para el transporte de mercancas, contenidas o no en vesculas, mediado por protenas motoras en el seno de la clula. Los motores moleculares, como la cinesina y la dinena citoplsmica, intervienen en el transporte de mercancas. Se conocen tres sistemas principales de transporte basados en microtbulos: transporte axonmico, que engloba los transportes intraciliar e intraagelar; el transporte axnico; y el transporte intramanguito. El manguito es una estructura temporal que participa en el desarrollo de los espermatozoides. El sndrome de Bardet-Biedl, una alteracin de los cuerpos basales y de los cilios que deriva de anomalas del transporte intraciliar, cursa con distroa retiniana, obesidad, polidactilia, displasia renal, anomalas del aparato reproductor y dicultades de aprendizaje. El sndrome de Kartagener, un trastorno de los axonemas por afectacin o ausencia de los brazos de dinena, se asocia a bronquiectasias e infertilidad (disminucin de la movilidad de los espermatozoides y del transporte de los vulos en el oviducto). Los lamentos intermedios se componen de monmeros que presentan un eje enrollado central anqueado por regiones globulares. A diferencia de la actina F y de los microtbulos, el ensamblaje de los lamentos intermedios est controlado por la fosforilacin-desfosforilacin. Se distinguen varios tipos de lamentos intermedios, como las queratinas de tipos I y II (marcadores de las clulas epiteliales), la vimentina (presente en las clulas de origen mesenquimatoso), la desmina (abundante en las clulas musculares), la protena gliobrilar cida (marcadora de las clulas gliales), los neurolamentos (presentes en la neuronas) y las laminas (que integran la lmina nuclear asociada a la capa interna de la envoltura nuclear). Las alteraciones de las queratinas dan lugar a enfermedades ampollosas de la piel. La expresin gnica anmala de las laminas origina un grupo de trastornos conocidos como laminopatas, las cuales afectan al tejido muscular (p. ej., distroa muscular de Emery-Dreifuss), al nervioso
(enfermedad de Charcot-Marie-Tooth de tipo 2B1) y al adiposo (lipodistroa familiar de tipo Dunnigan). El ncleo celular se compone de la envoltura nuclear, la cromatina y el nuclolo. La envoltura nuclear presenta poros nucleares, una estructura triple formada por anillos octagonales interno y externo, y un cuerpo cilndrico central. Los poros nucleares contienen varias protenas, las nucleoporinas. La Ran-GTPasa regula el transporte nucleocitoplsmico a travs de los poros nucleares al permitir el paso de protenas con una secuencia de importacin nuclear unida a un complejo proteico de importinas y y RanGDP. En el ncleo, Ran-GDP se convierte en Ran-GTP por accin de RCCI, una protena intercambiadora de GDP por GTP, lo que induce la disociacin del complejo importina-protena importada. Ran-GTP se asocia a las exportinas y las protenas portadoras de una secuencia de exportacin nuclear son transferidas al citoplasma. Ran-GTP interacciona con Ran-GBP1 y se convierte en Ran-GDP por hidrlisis, estimulada por Ran-GAP. Se libera la protena transportada y Ran-GDP puede comenzar un nuevo ciclo de transporte. Se han descrito dos formas de cromatina: heterocromatina (inactiva desde el punto de vista de la transcripcin) y eucromatina (activa). Uno de los dos cromosomas X de cada clula somtica femenina se mantiene condensado, lo que recibe el nombre de compensacin de la dosis. El cromosoma X condensado se visualiza como una masa de heterocromatina prxima a la envoltura nuclear (llamado corpsculo de Barr) o como un palillo de tambor en los leucocitos polimorfonucleares. El nuclolo se compone de un centro brilar (cromatina con genes repetidos para el ARNr, ARN polimerasa I y SRP); un componente brilar denso (con las protenas brilarina y nucleolina); y un componente granular (lugar de ensamblaje de las subunidades ribosmicas). Las tcnicas de tincin y autorradiografa permiten identicar la localizacin de los cidos nucleicos en las clulas. La reaccin de Feulgen detecta la presencia de ADN. Los colorantes bsicos indican la localizacin del ADN y el ARN. El pretratamiento con ARNasa y ADNasa se utiliza para denir la identidad de las estructuras baslos. La autorradiografa se basa en la administracin de un precursor radiomarcado en clulas vivas. Se pueden visualizar los puntos radioactivos por medio de una emulsin fotogrca, cuyo revelado y jacin ponen de maniesto la presencia de granos plateados en los sitios en los que se localiza el precursor radiomarcado. Esta tcnica permite estudiar el ciclo celular y la localizacin de las estructuras implicadas en la sntesis de protenas, en la glucosilacin y en el transporte. La seleccin de clulas activadas por uorescencia hace posible la identicacin y la separacin de distintos tipos celulares por medio de marcadores de supercie celular, as como la investigacin del ciclo celular basada en el contenido de ADN. El ciclo celular se dene como el intervalo comprendido entre dos divisiones celulares sucesivas (mittica y meitica) que da lugar a la produccin de dos clulas hijas. Desde el punto de vista tradicional, el ciclo celular se ha dividido en dos fases principales: 1) interfase, y 2) mitosis (o meiosis). La interfase incluye la fase S (sntesis de ADN), la cual se ve precedida por la G1 y se sigue de la G2. Las fases de la mitosis son las siguientes: 1. Profase (los centrosomas organizan el huso mittico; las laminas se fosforilan; cada cromosoma se compone de cromtidas hermanas unidas en el centrmero; la protena cohesina mantiene la asociacin entre las regiones no centromricas; la condensina compacta la cromatina).
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2. Metafase (los microtbulos cinetocricos se asocian al cinetocoro presente en cada cromosoma; los cromosomas se alinean en la placa ecuatorial; el complejo promotor de la anafase se desensambla cuando la unin de los microtbulos cinetocricos es correcta). 3. La anafase (la topoisomerasa libera las bras enmaraadas de cromatina; las cromtidas se separan unas de otras y se aproximan a los polos correspondientes anafase A y los polos celulares separados por accin de los microtbulos polares anafase B). 4. Telofase (las lminas se desfoforilan y la envoltura nuclear se reorganiza; los cromosomas se descondensan; se forma un anillo contrctil [actina-miosina] durante la citocinesis; los microtbulos del huso desaparecen). La nocin contempornea del ciclo celular lo divide en tres ciclos diferentes: 1) ciclo citoplsmico (activacin secuencial de las protena cinasas dependientes de ciclinas); 2) ciclo nuclear (replicacin del ADN y condensacin de los cromosomas), y 3) ciclo centrosmico (duplicacin de los dos centrolos centrolos madre e hijo para la preparacin del ensamblaje del aparato mittico). La cariotipicacin es el anlisis estructural y numrico de los cromosomas metafsicos. Un hombre normal posee un complemento cromosmico 46,XY (46 cromosomas, incluido el par XY). Una mujer normal cuenta con 46,XX (46 cromosomas, incluido el par XX). Los cromosomas se clasican como metacntricos, submetacntricos o acrocntricos en funcin de la posicin del centrmero o de la constriccin primaria. Las protena cinasas dependientes de ciclinas controlan el avance y la nalizacin del ciclo celular, y las protenas supresoras de tumores, el avance de dicho ciclo. La protena Rb desfosforilada, una protena supresora de tumores, se asocia a ciertos factores de transcripcin para inhibir la
actividad gnica. Los factores de transcripcin se separan de la protena Rb fosforilada y estimulan el avance del ciclo celular. El retinoblastoma, un tumor ocular maligno, se desarrolla en sujetos portadores de una mutacin en el gen Rb. Otra protena supresora de tumores es p53, un factor de transcripcin que interviene en la regulacin del ciclo celular. En los pacientes con leucemia, linfoma y tumores cerebrales se observan mutaciones del gen p53. p53 conere proteccin a la clula: puede inducir apoptosis o detencin del ciclo celular cuando la clula est sometida a estrs nocivo (denominado estrs genotxico). Las mutaciones del gen p53 anulan esta funcin protectora. El sndrome de Li-Fraumeni se debe a una mutacin del gen p53. Los pacientes jvenes presentan predisposicin al desarrollo tumoral (tumores cerebrales y mamarios, leucemia aguda, y sarcomas seos y de partes blandas). La desorganizacin de la envoltura nuclear tiene lugar hacia el nal de la profase. Implica la fragmentacin de la envoltura nuclear, la disociacin de los complejos del poro nuclear y la fosforilacin de las laminas (despolimerizacin). La reorganizacin de la envoltura nuclear depende de la desfosforilacin de las lminas por accin de una protena fosfatasa. Los telmeros son las regiones terminales de los cromosomas formados por una hilera de secuencias de nucletidos repetidas. La longitud de los telmeros disminuye en cada divisin celular hasta que resulta imposible mantener la integridad del cromosoma cuando la ADN polimerasa es incapaz de copiar los extremos del mismo. Las clulas germinales masculinas y femeninas protegen a los telmeros a travs de la enzima telomerasa, la cual no aparece en las clulas somticas. Casi todas las clulas tumorales expresan la telomerasa.
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Tejidos Básicos y Biología Celular Integrada

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PARTE I I TEJIDOS BSICOS Y BIOLOGA CELULAR INTEGRADA

Clasicacin general de los epitelios

Figura 1-1. Mapa conceptual: tipos de epitelios

Morfologa de las clulas individuales (vista lateral)

Disposicin de las clulas (una o ms capas)

Clula escamosa (aplanada)

Clula cbica (dimensiones equivalentes)

Clula cilndrica (ms alta que ancha)

Epitelio seudoestratificado Una capa Ms de una capa

Epitelio transicional (urotelio)

Su designacin obedece a la morfologa de las clulas de la capa superficial

2012. Elsevier Espaa, S.L. Reservados todos los derechos

Figura 1-2. Epitelio simple

Ncleo aplanado de una clula endotelial

Epitelio escamoso simple

Epitelio cbico simple

Borde en cepillo Clula caliciforme

Lmina propia Luz Clula caliciforme Borde en cepillo

Epitelio cilndrico simple

Histologa y biologa celular. Introduccin a la anatoma patolgica

Figura 1-3. Epitelio estraticado

Lmina basal Clula basal mittica Lmina basal

Las clulas muy queratinizadas de la capa superficial carecen de ncleos

No aparecen ncleos en las clulas superficiales

Elsevier. Fotocopiar sin autorizacin es un delito .

Figura 1-4. Epitelios seudoestraticado y transicionales

Clula cilndrica ciliada

Grupo de estereocilios Clula basal Clula cilndrica con estereocilios

Clula cilndrica con estereocilios Regin del aparato de Golgi

Clula basal Espermatozoide

Clula cilndrica cupuliforme Placas Clula basal

Placas Clula cilndrica cupuliforme

Urotelio de una vejiga urinaria vaca

Urotelio de una vejiga urinaria llena de orina

Histologa y biologa celular. Introduccin a la anatoma patolgica

Diferenciaciones del dominio apical (cilios, microvellosidades o estereocilios)

Elsevier. Fotocopiar sin autorizacin es un delito .

Microvellosidades Dominio apical Luz

Dominio basolateral Membrana basal

Membrana plasmtica Cilio

Cuerpo basal anclado al citoplasma por las raicillas estriadas

Figura 1-7. Diferenciaciones apicales de las clulas epiteliales: microvellosidades y estereocilios

Microvellosidades y cilios (corte transversal)

Estereocilio ramificado Vesculas de endocitosis

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Figura 1-8. Cadherinas

Ca2+ Ca2+ Ca2+ Ca2+

Vinculina Formina-1 -actinina

Protenas de unin a actina

Histologa y biologa celular. Introduccin a la anatoma patolgica

Figura 1-9. Selectinas

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Figura 1-10. Superfamilia de las inmunoglobulinas

Membrana plasmtica Citoplasma ICAM-2 (molcula de adhesin celular intercelular 2)

Figura 1-11. Integrinas

Citoplasma Membrana plasmtica

Slo se une la subunidad al citoesqueleto Dominios ricos en cistena

RGD (arginina-glicina-cido asprtico) Laminina

Elsevier. Fotocopiar sin autorizacin es un delito .

Pared del msculo liso

Fase de las selectinas Rodamiento

Fase de las integrinas