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Bioqumica prtica

Lipdeos

ROTEIRO DE AULA PRTICA AULA 3 CARACTERIZAO DE TRIACILGLICERIS


OBJETIVOS Geral: - caracterizar lipdios de acordo com suas caractersticas fsico-qumicas, enfatizando a importncia biolgica destas molculas Especficos: - identificar triacilgliceris atravs de reao de hidrlise alcalina (reao de saponificao) - evidenciar a formao dos produtos de hidrlise (sabes) pelas suas propriedades - identificar a presena de cidos graxos insaturados por reao de halogenao EXPERIMENTOS REAGENTES - soluo alcolica de hidrxido de potssio: 1 volume de hidrxido de potssio a 40% e 1 volume de etanol a 99,5% - leo vegetal - soluo de cloreto de clcio a 10% - soluo saturada de cloreto de sdio - soluo de lugol fraco: iodo 1g, iodeto de potssio 5g, gua destilada para completar 100mL PROCEDIMENTOS A. REAO DE SAPONIFICAO 1. Em um tubo de ensaio grande colocar: - 30 gotas de leo vegetal - 10mL de soluo alcolica de hidrxido de potssio - pedaos de porcelana porosa para evitar ebulio tumultuosa 2. Aquecer em banho-maria fervente durante 20 min. Nestas condies, o leo saponificado obtendo-se uma soluo opalescente de sais de potssio de cidos graxos (sabes) e glicerol. B. PROPRIEDADES DOS SABES A partir da soluo de sabes realizar os seguintes testes: ABAIXAMENTO DA TENSO SUPERFICIAL BQUER: adicionar 2mL de sabo a um bquer pequeno e adicionar gua destilada (at ~5mL). Agitar a soluo de sabes e verificar a formao de espuma. PRECIPITAO DE SABES DE CLCIO TUBO 1: ao segundo tubo de ensaio adicionar 1mL de sabo e depois adicionar cloreto de clcio a 10% gota a gota at notar o aparecimento de um precipitado de sabes de clcio. PRECIPITAO POR EXCESSO DE ELETRLITOS TUBO 2: ao terceiro tubo de ensaio adicionar 1mL de sabo e igual volume de soluo saturada de cloreto de sdio. Observar a formao de um precipitado de sabo por excesso de sais neutros, sendo explicada pelo efeito do on comum, que reprime a dissociao dos sabes fazendo que as micelas percam a carga e precipitem.

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C. TESTE DO IODO TUBO 3: Colocar num tubo de ensaio ~1mL de leo e adicionar 2 gotas de lugol. Aquecer em banho-maria fervente por 10 minutos. Observe e analise, descrevendo as alteraes do meio reacional abaixo: Colorao ANTES do banho-maria Colorao DEPOIS do banho-maria

ASPECTOS TERICOS TESTE DE SAPONIFICAO O teste da saponificao identifica a presena de cido graxo. Para isso coloca-se a amostra na presena de uma base: KOH (hidrxido de potssio) ou NaOH (hidrxido de sdio). Os compostos resultantes, sais de cido graxo (fig. 1), so molculas anfipticas, com uma "cabea" polar (COO- Na+) e uma cauda apolar formada pelo radical "R". Quando em meio aquoso, molculas anfipticas tendem a se agrupar formando estruturas esferides, as micelas. Este o princpio da limpeza de gorduras produzida pelo sabo.

Fig. 1 Reao de Saponificao

TESTE DO IODO Este teste identifica a presena de cido graxo insaturado. Ocorre uma reao de halogenao, em que o iodo reage com as duplas ligaes do cido graxo insaturado.

Fig. 2 Reao de Halogenao

Se houver dupla ligao, o iodo ser consumido e a colorao caracterstica da soluo de iodo diminuir de intensidade.
OBS.: O relatrio deve conter as informaes do roteiro de prtica e deve seguir o modelo de relatrio que se encontra na Internet (www.wix.com/francolodi/francolodinarede), com Introduo, Objetivos, Material e Mtodo, Resultados e Discusso, Concluso, Referncias. 2

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