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SIGNIFICADO CLINICO
La ADA es una enzima polimrfica del catabolismo de las purinas que cataliza la desaminacin de adenosina y deoxyadenosina para producir inosina y deoxyinosina, respectivamente, liberando amonaco en el proceso. Esta enzima se distribuye ampliamente en el organismo humano, encontrndose actividad de ADA en prcticamente todos los tejidos. Sin embargo, su mayor actividad se encuentra en el tejido linfoide, principalmente en los linfocitos T y vara durante la diferenciacin de stos y en la maduracin de los macrfagos. La aplicacin ms til de esta tcnica es en el diagnstico de la meningitis tuberculosa y en el diagnstico diferencial entre pleuresas tuberculosas y neoplsicas, ya que aunque la ADA tambin est elevada en el lquido pleural de los empiemas, artritis reumatoidea y algunos linfomas, estas ltimas condiciones son ms fciles de diferenciar clnicamente. 5.- ESTANDAR 50 U/I. Contiene, solucin de sulfato de amonio en medio tamponado y estabilizado. Refrigerar de 2 - 8C.
ESTABILIDAD DE LA MUESTRA
Estndar ----250 L 10 uL Muestra 10 uL 250 L ----Las muestras de los pacientes deben procesarse inmediatamente de lo contrario puede conservarse refrigerado de 2 8C durante 4 horas o congelada a -20C durante 15 das. Las muestras con ms de 4 horas sufren degradacin proteica generando amoniaco, y dando resultado falsamente elevado.
CONTROL DE CALIDAD
El reactivo para Test de ADA ha sido evaluado con 50 sueros de pacientes clnicamente normales, encontrndose los resultados dentro de los lmites de referencias y 20 sueros de pacientes con tuberculosis siendo encontrados patolgicos el 99% : del mismo modo para lquidos biolgicos (Lquido Cefalorraqudeo y Pleural). Grado de Confiabilidad ndice de Correlacin ndice de Determinacin Coeficiente de Variacin : : : : 99% 0.99 0.98 0.03%
Mezclar, tapar los tubos e incube a 37C durante 60 minutos. Luego agregue: Color 1 Muestra Color 2 500 L --500 L 500 L --500 L 500 L 10 uL 500 L 500 L --500 L
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Inosina + NH3
Homogenizar e incubar 30 minutos a 37C. Retire los tubos y lea a 560 nm llevando a cero con agua destilada.
Los iones de amonio formado se miden mediante el mtodo de Berthelot, modificado, en presencia de fenol en medio alcalino, producindose Azul de indofenol.
CONTENIDO
1.- Buffer pH 6.5. Buffer pbs. 0.1 mol/L con estabilizantes y preservantes. 2.- Adenosina. Contiene Adenosina y Nitruro de Sodio en solucin tamponada, preservada y estabilizada. Si hubiera precipitado llevar el reactivo a bao mara a 50C homogenice hasta disolver el precipitado. La aparicin de precipitado no indica deterioro del reactivo. Conservar a T ambiente. 3.- Color 1. Contiene Acido Carblico, Cloramina y Catalizador, estabilizada y preservada. Refrigerar de 2 8C. 4.- Color 2. Contiene Solucin de NaOH e Hipoclorito de Sodio con catalizador y preservantes y estabilizantes. Refrigerar de 2 8C.
VALORES DE REFERENCIA
ADA: Suero Lquido Pleural Lquido Cefalorraqudeo Lquido Asptico Lquido Pericardio Lquido Articular Relacin Liquido Pleural/Suero 11 22 U/L 0 35 U/L 0 9 U/L 0 40 U/L 0 40 U/L 0 40 U/L Hasta 1.3