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Uniiversiidad EARTH Un vers dad EARTH

Manejo del cultivo del Helecho (Rumohra adiantiformis) y del Sndrome de Deformacin del en la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A.
Hernn Augusto Salamanca Dussn

Proyecto de Graduacin
para obtener el grado de

Licenciatura en Ciencias Agrcolas


y el ttulo de

Ingeniero Agrnomo

2007 2007
Guciimo,, Liimn,, Costta Riica Guc mo L mn Cos a R ca

La Universidad EARTH certifica que el Proyecto de Graduacin titulado

Manejjo dell cullttiivo dell hellecho ((Rumohrra adiianttiifforrmiis)) y dell Sndrrome Mane o de cu vo de he echo Rumoh a ad an o m s y de S nd ome de Defforrmaciin en lla emprresa IInverrsiiones Verrdes dell Trrpiico S..A.. de De o mac n en a emp esa nve s ones Ve des de T p co S A

Presentado por

Hernn Augusto Salamanca Dussn

Rene las condiciones para obtener el ttulo de Ingeniero agrnomo con el grado acadmico de Licenciatura

Decano de Asuntos Acadmicos

Manuel Cerrato, Ph.D.

Asesor Ana Cristina Tamayo, M.Sc.

Asesor Sara Thornton, M.A.

Diciembre, 2007

iii

Dedicatoria
A mi familia por su apoyo y ayuda incondicional. Por ser el faro que alumbra mi vida.

Agradecimiento
A Dios por permitir cumplir mis objetivos. A mi madre, mi padre y mi hermano por su apoyo y por la fe que siempre han tenido en m. A mi to Manuel por ser mi consejero y m amigo, por su ayuda incondicional durante estos aos. Gracias a las profesoras Ana Cristina Tamayo y Sara Thornton, ya que sin ellas este proyecto no se hubiera hecho realidad. Un agradecimiento muy especial a la profesora Irene Alvarado por ser mi mentora, por su apoyo y consejo en los momentos difciles. A Esteban Cevallos por darme su amistad durante estos aos.

Resumen
El cultivo de helecho de cuero (Rumohra adiantiformis) es una de las actividades agrcolas ms importantes de Costa Rica, ya que el pas es el principal exportador de este follaje a nivel mundial. Actualmente se ve afectado por una enfermedad conocida como el Sndrome de Deformacin del Helecho, la cual ha ocasionado en los ltimos aos grandes perdidas al sector, debido a los graves daos que causa tanto en las hojas del helecho, que es el producto de exportacin, as como en los rizomas, que son usados como unidad reproductiva del cultivo. Es necesario estudiar alternativas viables y exitosas para el manejo de esta enfermedad, ya que en estos momentos es poco lo que se conoce del agente causal de este sndrome y por tal motivo no existen alternativas completamente eficientes para un control preventivo o curativo para plantas enfermas. Conociendo la gravedad de esta enfermedad para el sector, las empresas han enfocado sus esfuerzos en el desarrollo de alternativas de manejo que disminuyan las prdidas ocasionadas por la enfermedad, centrando sus esfuerzos en el manejo de campo; empresas como Inversiones Verdes del Trpico S.A., han trabajado con algunas prcticas agrcolas con una relativa eficiencia en la reduccin de prdidas del material exportable. Sumado a esto, se ha evaluado, como otra alternativa de manejo, la utilizacin de programas de propagacin in vitro para proteger los rizomas como material gentico del cultivo. Palabras claves: Rumohra adiantiformis, Sndrome de Deformacin del Helecho, practicas agrcolas y propagacin in vitro.

Abstract
The leather leaf fern (Rumohra adiantiformis) is one of the most important agricultural activities of Costa Rica, because this country is the principal exporter of this foliage in the world market. Nowadays this crop is affected by a disease named the Fern Deformation Syndrome (FDS). Therefore, it is necessary to study viable and successful alternatives for the managing of this disease. Investigation was undertaken to evaluate the handling of the leather leaf fern in Inversiones Verdes del Tropico S.A., to characterize the symptoms of disease, to describe agricultural practices for controlling infestation, and to evaluate the feasibility of using rhizomes in in-vitro propagation. Inversiones Verdes del Trpico S.A., have used agriculture practices as a relatively efficient mechanisms in the reduction of losses of exportable material. The symptoms of the disease vary wildly within each category but can be generally characterized as having changes in coloration such as yellowing, reduction in size, configuration changes such as curling and spore appearance. Crop rotation and mechanisms to reduce loss caused by FDS were evaluated. Five tests were conducted as means to disinfect contaminated rhizomes. They were evaluated to be unsuccessful. Further investigation is encouraged, especially with rhizomes that are guaranteed to be free of disease at time of trial. Key words: Rumohra adiantiformis, Fern Derformation Syndrome, agricultural practices and in vitro spread.

Lista de contenido
Pgina DEDICATORIA AGRADECIMIENTO RESUMEN ABSTRACT LISTA DE CONTENIDO 1 2 INTRODUCCIN OBJETIVOS V V 1 1 3 5 7

2.1 OBJETIVO GENERAL............................................................................................ 7 2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS................................................................................... 7 3 REVISIN BIBLIOGRFICA 8 3.1 GENERALIDADES DE LA EMPRESA INVERSIONES VERDES DEL TRPICO S.A. ........................................................................................................ 8 3.2 CARACTERSTICAS DEL HELECHO (Rumohra adiantiformis) ......................... 9 3.2.1 Clasificacin Botnica......................................................................... 10 3.2.2 Morfologa........................................................................................... 10 3.3 FISIOLOGA REPRODUCTIVA DEL HELECHO (Rumohra adiantiformis)....................................................................................................... 12 3.3.1 Mecanismos de reproduccin............................................................. 12 3.3.2 Las Esporas........................................................................................ 13 3.3.3 El rizoma............................................................................................. 15 3.4 EL CULTIVO DEL HELECHO (Rumohra adiantiformis) .................................... 16 3.4.1 Requerimientos del cultivo.................................................................. 16 3.4.2 Manejo post cosecha.......................................................................... 20 3.4.3 Comercializacin del helecho ............................................................. 20 3.5 EL EFECTO DEL SNDROME DE DEFORMACIN DEL HELECHO (Rumohra adiantiformis)..................................................................................... 21 3.5.1 Sintomatologa.................................................................................... 21 3.5.2 Alternativas de tratamiento ................................................................. 22 4 MATERIALES Y MTODOS 23 4.1 LOCALIZACIN ................................................................................................... 23 4.2 MANEJO DE CULTIVO DE LA EMPRESA INVERSIONES VERDES DEL TRPICO S.A. ...................................................................................................... 23 4.3 CARACTERIZACIN DE LOS SNTOMAS DEL SNDROME DE DEFORMACIN EN LAS FRONDAS .................................................................. 24

4.4 MANEJO DEL SNDROME DE DEFORMACIN DEL HELECHO EN CAMPO .................................................................................................................24 4.4.1 Diagnostico .........................................................................................24 4.4.2 Control Preventivo ..............................................................................25 4.4.3 Control Curativo ..................................................................................25 4.5 EVALUACIN DE UN PLAN DE PROPAGACIN IN VITRO CON MATERIAL DE INVERSIONES VERDES DEL TRPICO S.A.............................26 4.5.1 Recoleccin de rizomas ......................................................................26 4.5.2 Metodologas de desinfeccin.............................................................26 4.5.3 Prueba de desinfeccin 1 ...................................................................27 4.5.4 Prueba de desinfeccin 2 ...................................................................28 4.5.5 Prueba de desinfeccin 3 ...................................................................28 4.5.6 Prueba de desinfeccin 4 ...................................................................29 4.5.7 Prueba de desinfeccin 5 ...................................................................30 4.5.8 Seleccin de medio de cultivo.............................................................31 5 RESULTADOS Y DISCUSIN 33 5.1 MANEJO DE CULTIVO DE INVERSIONES VERDES DEL TRPICO S.A. .......33 5.1.1 Programa de cultivo de la finca...........................................................33 5.1.2 Manejo del helecho cosechado...........................................................34 5.2 SINTOMATOLOGA DE LAS PALMAS CON EL SNDROME DE DEFORMACIN DEL HELECHO .........................................................................36 5.2.1 Coloracin...........................................................................................37 5.2.2 Tamao...............................................................................................39 5.2.3 Forma .................................................................................................42 5.2.4 Esporas...............................................................................................45 5.3 MANEJO EN CAMPO DEL SNDROME DE DEFORMACIN DEL HELECHO .............................................................................................................46 5.4 EVALUACIN DE LAS PRUEBAS DE DESINFECCIN ..................................48 5.4.1 Prueba de desinfeccin 1 ...................................................................48 5.4.2 Prueba de desinfeccin 2 ...................................................................48 5.4.3 Prueba de desinfeccin 3 ...................................................................49 5.4.4 Prueba de desinfeccin 4 ...................................................................50 5.4.5 Prueba de desinfeccin 5 ...................................................................51 6 CONCLUSIONES..................................................................................................52 7 8 RECOMENDACIONES LISTA DE REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 53 54

Introduccin

Uno de los productos agrcolas de exportacin, de gran importancia para Costa Rica, es el helecho de cuero (Rumohra adiantiformis), es cultivado como follaje para exportacin en Estados Unidos, Guatemala, Nicaragua, Colombia y Chile, entre otros. Este helecho se caracteriza por su alta demanda, debido a su durabilidad y resistencia, esto lo respalda una cifra de 69 millones de dlares en exportaciones durante el 2006, hacia los mercados de Europa, Estados Unidos y Japn, lo cual hace de Costa Rica el productor nmero uno a nivel mundial1. Debido a la alta necesidad de humedad en el ambiente, como uno de los requerimientos ms importante de este helecho, hace que el cultivo sea susceptible a daos en las palmas o fondas (hojas de helecho), las cuales son el producto de exportacin. Estos daos se deben, comnmente, al ataque de hongos y bacterias, que generan perdidas por decoloracin y quemaduras del follaje. Actualmente estas prdidas son eficientemente manejadas con programas de control tanto qumico como biolgico. En los ltimos aos se ha desarrollado una enfermedad, conocida como el Sndrome de Deformacin del Helecho, que produce daos irreversibles en los cultivos de este follaje a nivel mundial. Cabe destacar, que en la actualidad no hay informacin accesible, o un dictamen pblico acerca del patgeno que la causa, por lo tanto, tampoco existen tratamientos preventivos ni curativos especficos para el tratamiento del follaje enfermo2. La enfermedad causa daos totales al follaje de las plantas afectadas, ya que como su nombre lo indica, genera deformaciones en las palmas, provocando perdidas completas de material exportable, adems afecta los rizomas, que son tejidos de crecimiento subterrneo seleccionados para la renovacin del cultivo ya que por reproduccin asexual generan un clon con las mismas caractersticas productivas de la planta madre. De ah el peligro que genera esta enfermedad para los cultivos actuales y para los futuros, porque aunque se puede eliminar material de los

PROCOMER. Exportaciones segn los principales productos. Modulo 3. Costa Rica: Estadsticas de exportacin del 2006. p.6 SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada mayo 2007. Cartago (CR).

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

almcigos una vez la enfermedad se manifiesta, no hay seguridad de que el sndrome no se presente en los rizomas a sembrar en el proceso de renovacin. Debido a las grandes prdidas generadas por esta enfermedad, algunas empresas han evaluado alternativas de manejo en campo y laboratorio, la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A. ha evaluado alternativas en campo, como la utilizacin de prcticas agronmicas en las reas contaminadas, medidas con resultados aceptables en la disminucin de las perdidas. En cuanto al manejo de laboratorio, surge la posibilidad de trabajar en un programa de propagacin in vitro3 como una herramienta til en la produccin de plntulas en forma masiva, con la capacidad de generar

material vegetal con ciertas caractersticas de limpieza en cuanto a patgenos se refiere, pudiendo usar este tipo de programa con el fin de proteger el material gentico proveniente de los rizomas. El objetivo de este trabajo fue evaluar el manejo de cultivo enfocado en las alternativas actuales para el control del Sndrome de Deformacin del Helecho.

KRIKORIAN, A. Medios de cultivo: generalidades, composicin y preparacin. p.40

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

2
2.1

Objetivos
Objetivo General

Evaluar el manejo de cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis), con nfasis en prcticas agrcolas que junto a la propagacin in vitro sirvan como alternativas para el control del Sndrome de Deformacin del Helecho.

2.2
1. 2. 3. 4.

Objetivos Especficos
Conocer el manejo del cultivo de helecho (Rumohra adiantiformis) en la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A. Caracterizar los sntomas del Sndrome de Deformacin del Helecho en las palmas para exportacin. Describir algunas prcticas agrcolas como alternativas de control para el Sndrome de Deformacin del Helecho. Evaluar por medio de protocolos de desinfeccin, la viabilidad del uso de rizomas provenientes de campo, para la implementacin de un programa de propagacin in vitro.

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3.1

Revisin Bibliogrfica
Generalidades de la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A.

Las visitas y las evaluaciones fueron realizadas en la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A., dedicada a la produccin de helecho de cuero (Rumohra adiantiformis) como follaje de exportacin para los mercados de Colombia, Europa, Estados Unidos y Japn. La empresa inici sus actividades a principios de los aos 90, cabe destacar que antes de iniciar operaciones los predios que la misma posee, eran dedicados a la siembra de caf y hortalizas. La empresa es de capital colombiano por lo cual mantiene una estrecha relacin comercial con empresas productoras de flores en ese pas, cuyos destinos de exportacin son Estados Unidos, Europa y Japn. La empresa se encuentra localizada en el cantn de Barrancas del Guarco, provincia de Cartago, Costa Rica4. Es una finca de produccin mediana con 20 hectreas en total, de las cuales hay sembradas 15,5 ha, en las restantes se encuentran las oficinas, la sala de clasificacin, 3 baos, una bodega, un rea para los tanques de fertilizacin y dos casas de habitacin. De las hectreas sembradas, 10 ha se encuentran bajo poli sombra de 80 % de sombra, en un sistema convencional de produccin y 5,5 ha se encuentras bajo sombra natural5. La finca tiene una divisin espacial, que comprende 139 eras por hectrea, donde 1 era (cama) tiene 36,5 m de largo y 1,40 m de ancho. En el cultivo, la densidad que maneja la finca, es de 100 a 150 rizomas por m, eso equivale a 1500000 rizomas por hectrea (con 125 rizomas en promedio por m).

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5

SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada mayo 2007. Cartago (CR) . SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada mayo 2007. Cartago (CR).

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La presencia de la enfermedad del Sndrome de Deformacin del Helecho se detect en la finca en el ao 2000, se identific como una anomala diferente a las enfermedades comunes del helecho como las causadas por Antracnosis sp. y Roselinia sp. La recomendacin era que en las zonas donde se presentara la

enfermedad, se deba erradicar todo el helecho y darle otro uso a la tierra, diferente al de este cultivo.

3.2

Caractersticas del helecho (Rumohra adiantiformis)

El helecho de cuero, como se le conoce comnmente, es originario de zonas tropicales de Amrica, especficamente en el centro y sur del continente6. Aunque tambin se puede ubicar en zonas templadas, o subtropicales como Oceana y frica7. Es una planta perenne y de coloracin siempre verde, criptgama, por lo cual no posee ni flores, ni frutos, de carcter terrestre, epifita y erecta8. Esta especie de helecho es cultivada como follaje de exportacin en pases de Norte, Centro y Sur Amrica. Se destaca como uno de los follajes de mayor preferencia en los mercados internacionales debido a su color, su textura y especialmente su durabilidad, la cual es de 4 semanas, dependiendo del estado fisiolgico de la planta al momento de la cosecha9. Costa Rica es reconocido como el primer productor a nivel mundial, siendo un cultivo de mucha importancia para el pas. La produccin de helecho de cuero se exporta a Estados Unidos, Europa y Japn10.

6
7

ALVARENGA, S. Establecimiento in vitro del helecho tipo hoja de cuero (Rumohra adiantiformis). p. 29. GIL, Gino Jos. Sistema integral para el manejo de nutricin para el manejo en las plantaciones de helecho de cuero (Rumohra adiantiformis) en Costa Rica. 2003.102 p

MONGE, M. Aspectos morfolgicos y nutricionales del helecho hoja de cuero (Rumohra adiantiformis). 103 p.
9 10

GIL, G. Ref. 7. p. 11. SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada mayo 2007. Cartago (CR).

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3.2.1

Clasificacin Botnica

Conocido anteriormente como Polystichum adiantiformis, se le ubica en el genero Arachniodes, pero es referenciado en la literatura como Rumohra adiantiformis11; es una planta perteneciente a la divisin Thracheophyta, familia Pteridofita, clase

Filicopsida. Al pertenecer a dicha familia, este helecho se caracteriza por reproducirse de forma natural por esporas, las cuales son diploides. Cabe destacar que posee lo que se conoce como alternancia de generaciones, lo cual significa que en su reproduccin natural, posee una fase asexual y una sexual. Primero, la fase asexual se caracteriza por la generacin de gametofitos haploides, tanto masculinos como femeninos, de forma separada, aunque en la misma fronda. En la segunda fase, la sexual, hay una fertilizacin, donde se forma la espora, que a su vez genera una planta diploide12.

3.2.2

Morfologa
es una planta terrestre, de sistema vascular inferior

El Rumohra adiantiformis

completo, de carcter primario, lo cual evidencia sus orgenes prehistricos, ya que se encuentra evolutivamente catalogada entre musgos y plantas con semilla13. Este helecho se caracteriza por tener rizomas con una escamacin parcial o completa,

rodeado por una gran cantidad de vellosidades en la zona radicular, cuyo sistema se caracteriza por ser muy disperso y difuso, con races acomodadas de forma irregular cubriendo casi todo el rizoma y la parte inferior de los tallos. Se destacan las races laterales, por su ramificacin y tamao, ya que pueden ser ms delgadas y largas. Dos tercios de las races crecen a los lados y en la parte baja del tallo, as como alrededor del mismo14.

11

NAUR, K. Efecto de la desinfeccin de esporas, intensidad de luz y cloracin de agua de riego, sobre el desarrollo de protalos de helechos exticos nativos de Chile. 78 p. MONGE, M. Ref. 8. p. 3

12

. MONGE, M. Ref. 8. p. 3 NAUR, K. Ref. 11. p. 2 MONGE, M. Ref. 8. p. 4.

13 14

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Fronda Foliolo Pinna

Figura 1. Partes de la hoja del helecho

Las hojas del helecho conocidas como frondas o palmas, poseen dos divisiones, una de carcter primario, llamada pinna, y otra de carcter secundario, conocida como foliolo. El pecolo en su fase inicial de desarrollo se le conoce como bastn, o cabeza de violn15. Las frondas son coriceas completas e incompletas (subcoriaceas), del tipo deltoidar separadas a la misma altura, con una forma ovalada o circular. Dichas frondas se dividen en raquis y lamina, presentando un pecolo escamoso, de base ancha y larga16.

La fronda posee 7 estados de clasificacin segn su desarrollo biolgico, las cuales, a su vez, estn agrupadas en dos etapas; la de bastn, en la que se presentan los
15

LEIVA, Ral.. Determinacin del efecto de la luz artificial, dos hormonas y un nutriente foliar, sobre el desarrollo del follaje en el cultivo del helecho de cuero (Rumohra adiantiformis). 145 p. GIL, G. Ref 7. p. 8.

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estados de

contraccin y de extensin, la otra etapa es la fronda, en la que se

encuentran los estados de palma inmadura, madura, sobre madura y muerta. Entre la fase de madurez y sobre madurez, se encuentra el sptimo estado, correspondiente a la fase de corte, que es el momento en que se realiza la cosecha17. Es de resaltar que el Rumohra adiantiformis presenta una desarrollada capacidad de supervivencia, la cual se debe a la generacin constante de yemas latentes, en los rizomas, las cuales estn directamente relacionadas en su aparicin y desarrollo, con las frondas que se remueven o mueren. Las yemas debajo de los tallos de frondas cosechadas o muertas, sufren una estimulacin, que a la vez tambin genera un efecto de estimulacin de crecimiento en las races que rodean el rizoma18.

3.3

Fisiologa reproductiva del helecho (Rumohra adiantiformis)

3.3.1

Mecanismos de reproduccin

Como se refiri anteriormente, este helecho es una planta criptgama, que se reproduce de forma natural por esporas, las cuales necesitan de una alta humedad ambiental para completar su ciclo biolgico. Una vez la planta de helecho se encuentra madura en condiciones reproductivas adecuadas, se desarrollan los cuerpos reproductores, denominados soros, donde se encuentran los receptculos de esporas, llamados esporangios, los que una vez fecundados dan origen a una nueva plntula19. Para fines agronmicos, debido a la necesidad de mantener las caractersticas de produccin en una plantacin, se usan unidades clnales (asexuales), que para esta especie son los rizomas20. Debido a la necesidad de mantener una uniformidad de produccin que permita contar con las caractersticas que exige el mercado, en los

17
18 19

MONGE, M. Ref. 8. p. 12 MONGE, M. Ref. 8. p. 8 DIETZ, M. Plant propagation in pictures. 34 p KAUR, S y KHARE, PB. Genetic resourses of ferns. In BHATTACCHARJE, SK. y CHADNA, KL. Advances in horticulture: ornamental plants.. p. 224.

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12

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cultivos comerciales el helecho de cuero se trabaja evitando al mximo la reproduccin sexual del mismo, ya que al producirse los soros se generan condiciones en la planta y en la palma que producen daos estticos en el follaje a exportar. Es importante

aclarar que dependiendo del mercado y la temporada, se permite la entrada a los destinos de exportacin de palmas con esporas maduras o inmaduras en los ramos de exportacin21.

3.3.2

Las Esporas

Las esporas se encuentran en el envs de las frondas (hojas del helecho), las cuales, dependiendo de la especie, cambian de tamao. Como se refiri anteriormente, primero hay una fase gametoftica (asexual-n)22, en la que la planta genera sus unidades reproductivas, que contienen los rganos sexuales. En el caso de las unidades masculinas, se producen los arquegonios, que son cpsulas que contienen a los anterozoides, rganos reproductivos del mismo sexo. En el caso de las unidades femeninas, las anteridias contienen la oosfera, rgano reproductivo femenino. Una vez maduros inicia la fase esporfitica (sexual-2n), la cual da paso a una fecundacin, en presencia de agua, que facilita el movimiento flagelado de los anterozoides a la hora de fertilizar la oosfera23. Finalmente, ocurre un proceso de segmentacin en la oosfera, cuando es fertilizada, y se convierte en una clula huevo, que desarrolla tejido vascular y races. Es importante destacar que aunque es posible la propagacin del helecho por medio de esporas podra no transmitir las caractersticas ms importantes de la planta, especialmente las que se requieren comercialmente24. El proceso reproductivo anteriormente descrito, se puede observar con claridad en la figura 2, que describe el ciclo de vida de las plantas Pteridofitas.

21 22 23

SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada mayo 2007. Cartago (CR) . ALVARENGA, S. Ref. 6. p. 6. NAUR, K. Ref 11. p. 5 CAMPBELL, C. Plant systematics: A phylogenetic approach. . p.186.

24

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Figura 2. Ciclo de vida de las plantas Pteridofitas Tomada de NAUR, Karim. Efecto de la desinfeccin de esporas, intensidad de luz y cloracin de agua de riego. Tesis. 2004

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3.3.3

El rizoma
el rizoma es un tallo subterrneo de desarrollo

Como se muestra en la figura 3,

horizontal, en donde se almacenan los compuestos esenciales para el crecimiento y desarrollo de la planta, posee una cutcula gruesa para evitar la perdida de agua por desecacin, adems puede presentar escamaciones totales o parciales, especialmente en el meristemo apical. Las races se sitan alrededor del rizoma, a partir del cual se generan lateralmente los tallos y hojas.25. El rizoma es un rgano de mucha plasticidad, pues su distribucin espacial en el suelo, depende del clima, del tipo de suelo y de la vegetacin que lo rodea. Cabe resaltar que a nivel de suelo, cualquier obstculo puede variar el desarrollo del rizoma, aunque es importante mencionar que posee una gran capacidad de acoplamiento a las condiciones anteriormente descritas26.

Figura 3. Rizoma de una planta sana en produccin

25
26

MONGE, M. Ref. 8. p. 5. GIL, Gi. Ref. 7. p. 7.

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Una planta de helecho posee sistema radicular de 9 a 12 cm, el cual tiene de tres a cuatro rizomas27. La reproduccin del helecho de cuero se realiza por secciones del rizoma, las cuales se desarrollan cerca del suelo. Los rizomas se anclan al suelo por medio de races fibrosas, que crecen alrededor del mismo. Los rebrotes de hojas

nuevas se desarrollan cerca de pice del rizoma, al generarse estos rebrotes, el rizoma avanza, necrosando el tejido maduro que deja de ser funcional. Adems genera tejidos de reserva para la supervivencia de la planta, que son tallos que permanecen latentes durante un periodo de tiempo indefinido, de varios aos28. Del rizoma se origina una yema, la cual tarda tres meses en llegar a producir una planta, y otros cuatro meses para ser apta para produccin. Dicha yema es una unidad de reproduccin asexual que genera un clon con las mismas caractersticas productivas de la planta madre29. El desarrollo fronda del helecho de cuero se da, una vez que la yema apical (yema terminal) cesa su crecimiento, generando segmentos de yemas laterales unidos por sus extremos, por donde crece la fronda, lo que demuestra una avanzada integracin fisiolgica. simpodial .
30

Al proceso anteriormente descrito se le conoce como crecimiento

3.4
3.4.1

El cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis)


Requerimientos del cultivo

El cultivo de follajes presenta su mayor xito con el control de las condiciones de acidez del suelo,
31

adicin de materia orgnica y aserrn, manejo de temperatura, luz y

aireacin . El helecho Rumohra adiantiformis requiere de ciertas condiciones ambientales para su desarrollo natural. Este follaje es muy sensible a la luz, en

27
28

LEIVA, R. Ref. 15. p. 29. MONGE, M. Ref. 8. p. 25 ALVARENGA, S. Ref. 6. p. 28. MONGE, M. Ref. 8. p. 6. KAUR, S. Ref. 20. p. 237.

29

30 31

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Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

condiciones naturales se desarrolla adecuadamente bajo la sombra de los rboles, para una buena produccin, la cantidad y la calidad de la luz es un factor determinante. Este helecho es una planta que crece en lugares parcialmente sombreados, por lo cual para que sea comercialmente productiva requiere ambiente de 32,28 klux a 53,8 klux32. Que son unidades de luz, equivalentes a 3000 pies y 5000 pies candela, la cual es una unidad de medida equivalente a luz que alumbra un pie cuadrado. El material usado para proveer de sombra al helecho en las plantaciones comerciales, es conocido como poli sombra, el cual es una malla de plstico negro, con especificaciones de filtracin, para este cultivo se utiliza de un rango de 50 % a 80 %, de sombra dependiendo de la altitud donde se encuentre el cultivo, entre ms alto est menor porcentaje de filtracin es necesario33. Por otro lado, como se mencion anteriormente, uno de los factores ambientales decisivos en el desarrollo del helecho, es la temperatura, la cual es vital en las fases de desarrollo de las frondas. Es importante considerar que cualquier extremo es perjudicial para el helecho. En el caso de bajas temperaturas, se pueden generar daos en las hojas y en los rizomas. Mientras que a muy altas temperaturas, hay una disminucin en el desarrollo y problemas de desgaste acelerado en el proceso de crecimiento34. Es necesario mantener un ambiente hmedo, con el fin de que la planta tenga un desarrollo normal. Largos periodos en ausencia de agua, generan perdidas de tamao y problemas de desarrollo en los rizomas35. Se recomienda una irrigacin con aspersores distribuidos de tal forma que la aspersin de agua pueda cubrir toda la plantacin. Se debe mantener un ambiente hmedo, sin llegar a la saturacin, ya que ms de 24 horas, bajo esta condicin, produce serios daos en la planta. Como se muestra en la figura 4, un ambiente de humedad concentrada, favorece la reproduccin de enfermedades, por lo cual es importante incrementar el control de patgenos36.

32
33 34 35 36

LEIVA, R. Ref. 15. p. 2. LEIVA, R. Ref. 15. p. 34. MONGE, M. Ref. 8. p. 15. MONGE, M. Ref. 8. p. 23. LEIVA, R. Ref. 15. p. 31.

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Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

Figura 4. Sistema de siembra por eras, que evidencia problemas de acumulacin de agua En lo concerniente al suelo, se recomiendan suelos arenosos bien drenados37. Se prefiere que estos suelos sean profundos y con bastante materia orgnica, con el fin de propiciar un ambiente adecuado para el enraizamiento de manera profusa, buen crecimiento del rizoma y buena disponibilidad de nutrientes. Suelos con abundante materia orgnica proveen un excelente drenaje interno38. El helecho crece bien en suelos con un rango de pH entre 5,5 y 6, aunque tolera rangos de 5 a 6, es aconsejable hacer anlisis de suelos para considerar un ajuste de pH39. El suelo debe estar libre de malezas para realizar el trabajo de mecanizacin de

suelos, que comprende las labores de arado, rastreado y encamado. Es necesaria la construccin de camas de siembra, llamadas eras, cuyas dimensiones son de 1,20 m con surcos de 0,60 m, a una profundidad de 0,50 m, con el fin de manejar con comodidad la plantacin. Una vez conformadas las eras (camas), se procede a

37
38 39

LEIVA, R. Ref. 15. p.29. MONGE, M. Ref. 8. p. 14. GONZALEZ, C. Estudio Factibilidad de exportacin del follaje helecho de cuero (Rumohra adiantiformis) para ramos o adornos frescos. p. 8.

18

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

depositar de 10 a 15 cm de aserrn, para formar el sustrato en el que estarn depositados los rizomas de helecho. Si el sustrato no es el adecuado, los rizomas tienden a desarrollarse en forma superficial, especialmente si el suelo es de textura arcillosa. El aserrn ayuda al control de malas hierbas, antes de agregarlo, conveniente colocar en el suelo algn material orgnico en dosis adecuadas40. Una vez realizada toda la preparacin del terreno, realizar una labor de inmersin de los rizomas en un fungicida, con el fin de prevenir enfermedades, luego de la cual, se procede a la siembra, teniendo en cuenta que los rizomas no sean mayores de 7,5 cm., con hojas de tres yemas41. Las densidades varan teniendo en cuenta la competencia por luz, con el fin de buscar un desarrollo adecuado de palmas con las especificaciones necesarias del mercado. Las mayores densidades son hectrea, haciendo a la de 120.000 rizomas por es

plantacin mas rpida en produccin, las distancias de 0,30 cm de ancho, entre plantas. La

siembra pueden ser de 30 cm de largo por

experiencia ha demostrado que la mejor densidad de siembra para la produccin es de 70000 plantas por ha, ya que el rizoma se va extendiendo sobre las hojas42. En aspectos nutricionales es conveniente tener anlisis de suelo y foliar para proporcionar la cantidad de nutrientes que demandan las plantas. La fertilizacin debe hacerse con base en el anlisis foliar, ya sea con formulas slidas o liquidas43. Con el fin de obtener altas producciones a lo largo del ao, se debe mantener una fertilizacin adecuada y balanceada. Se requiere de bastante nitrgeno y potasio. Mientras que el fsforo se aplica en cantidades reducidas. Comnmente se trabaja con formulaciones de 2:1:2 4:1:1 de N:P2O5:K2O44.

40
41 42 43 44

LEIVA, R. Ref. 15. p. 30. LEIVA, R. Ref. 15. p. 31. LEIVA, R. Ref. 15. p. 29. GONZALES, C. Ref. 39. p. 10. MONGE, M. Ref. 8. p. 15.

19

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

3.4.2

Manejo post cosecha

En el caso de la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A., se tienen en cuenta cuatro tamaos de palma para exportacin; los cuales se dividen en cuatro tipos: el largo, con un tamao de 59 a 60 cm por palma, con un peso de 400 a 450 g por ramo; el medio, con un tamao de 54 a 55 cm por ramo, con un peso de 300 a 350 g por ramo; el mini, con un tamao de 49 a 50 cm por ramo, con peso de 200 a 250 g por ramo; el cuarto tamao es el junior, que es un ramo arreglado, que proviene de la mezcla de los anteriores que no califican como primera calidad, en especial de medio y de mini, con un tamao de 44 a 45 cm con un peso de 100 a 150 g por ramo. La distribucin para la exportacin se realiza en ramos, de los cuales caben 24 por caja, teniendo en promedio 4 ramos de largo, 6 ramos de medio, 11 ramos de mini y 2,5 ramos de junior45. Hay que considerar que estas palmas no presenten daos fisiolgicos como: deformaciones (enrollamientos), amarillamiento o marchites y daos mecnicos, que causen perdida de la pinna con sus respectivos foliolos. Una vez cortados, se sumergen en agua, para su rehidratacin, junto con productos qumicos para el control de Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp., para luego ser clasificados por los tamaos anteriormente mencionados, y finalmente empacados y puestos en refrigeracin46.

3.4.3

Comercializacin del helecho

Costa Rica es el primer productor de helecho a nivel mundial, seguido por los Estados Unidos. Gozando de un aumento en las exportaciones de un 14 %, entre el 2003 y el 2006. Esta actividad agrcola tiene en el pas 81 empresas con exportaciones mayores a 12.000 dlares anuales47, entre las cuales se ubica Inversiones Verdes del Trpico

45 46 47

SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada mayo 2007. Cartago (CR). GIL, G. Ref. 7. p. 12 PROCOMER. Ref. 1. p. 6.

20

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

S.A.. Aunque cabe resaltar que existe una variacin de precios de venta en el transcurso del ao, ya que las fechas de mayor demanda son del da de San Valentn que se celebra el 14 de febrero en Estados Unidos y Europa, el da de accin de gracias que se celebra el 26 de noviembre en Estados Unidos; para el mercado colombiano las fechas de mayor inters adems de las mencionadas anteriormente, son el 3 de mayo que es el da de la madre y el 29 de septiembre que es el da del amor y la amistad. Las plantas, flores y follajes representaron para el ao 2006, un 11 % de las exportaciones agrcolas de Costa Rica, de las cuales los follajes, encabezados por el helecho de cuero, representaron un 4 % de las exportaciones del mismo ao. Con una ganancia de 69,2 millones de dlares, correspondiente a 37683,9 toneladas exportadas a 33 destinos, principalmente Estados Unidos, Europa y Japn, ubicndose en el sexto puesto de los productos agrcolas ms importantes de exportacin para Costa Rica48.

3.5
3.5.1

El efecto del Sndrome de Deformacin del Helecho (Rumohra adiantiformis)


Sintomatologa

El Sndrome de Deformacin del Helecho se caracteriza por generar deformaciones en las frondas, principalmente en el color, el tamao y la forma, causando variaciones de coloracin con tonalidades amarillas y marrones. En el tamao genera enanismo tanto en la pinna como en lo foliolo, esta deformacin puede ser general o parcial. La enfermedad atrofia la apertura de la palma, causando una perdida de simetra en las palmas. Adems de esto algunos productores han detectado desordenes hormonales, asociados a la produccin excesiva de esporas, la cual tambin produce perdidas de follaje por no cumplir con la calidad de exportacin. Este sndrome se caracteriza por avanzar de forma agresiva, causando una reduccin acelerada de produccin de palmas por metro cuadrado49.

48.
49

PROCOMER. Ref.1. p. 6. SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada Agosto 2007. Cartago (CR).

21

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

3.5.2

Alternativas de tratamiento

Con una enfermedad tan agresiva y perjudicial, los productores de helecho se ven enfrentados a un serio problema, para el cual no existe un diagnostico especfico ni mecanismo de control preventivo ni curativo. Para enfrentar dicha enfermedad, en las plantaciones comerciales se han evaluado diferentes alternativas, han desarrollado algunos procedimientos propios, segn las necesidades y capacidades econmicas de cada empresa. Debido a la gravedad del Sndrome de Deformacin del Helecho, las prcticas ms comnmente realizadas van dirigidas a la eliminacin total de helecho en las reas donde se presenta la enfermedad; algunas empresas prefieren destinar los suelos de los sectores afectados, a otras actividades agrcolas o industriales; otras prefieren darle un periodo de descanso a aquellos espacios enfermos50. En el caso de Inversiones Verdes del Trpico S.A. se han venido trabajando varias opciones, entre las que se cuentan la rotacin de cultivos, especialmente en las sectores bajo sombra natural y una prctica agrcola, que se identific con el cdigo IVT-1, con la cual se han logrado reducir significativamente las prdidas de follaje. Otra preocupacin que genera la enfermedad, se ve asociada a la reproduccin de material para renovacin, ya que se realiza por medio de la seleccin de rizomas, los cuales una vez separados de la planta madre, puede generar, cada uno, una planta con las mismas caractersticos genticas de su predecesora. Este proceso de seleccin y posterior cuidado en almcigo, dura tres meses en llegar a producir una planta, y otros cuatro meses para ser apta en produccin. Es importante resaltar que esta enfermedad puede afectar directamente el proceso de renovacin del follaje, debido a que puede permanecer en los rizomas, con los que se realiza la renovacin, sirviendo de vehculo transmisor en reas sanas del cultivo
50

. Por tal motivo la propagacin in vitro ofrece

una alternativa viable para la conservacin de rizomas libres de patgenos.

50

SALAMANCA, M. Comunicacin personal. Entrevista realizada Agosto 2007. Cartago (CR).

22

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

4
4.1

Materiales y Mtodos
Localizacin

La recoleccin de material vegetal (rizomas de helecho) y la compilacin de informacin se realiz en la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A., ubicada en Barrancas del Guarco, Cartago, Costa Rica, con una precipitacin promedio de 116,9 mm. al ao, una temperatura promedio de 18 C y una humedad relativa del 50 al 70 % anual. Mientras que la evaluacin de las metodologas de desinfeccin se llevaron a cabo en las instalaciones del Laboratorio de Ciencias Naturales de EARTH, incluyendo las reas de invernadero y el espacio destinado para la propagacin in vitro, en el cual se encuentran la cmara de flujo laminar y un cuarto de crecimiento. Estas reas estn localizadas en el campus de la Universidad EARTH en Mercedes de Guacimo, Limn, con una precipitacin promedio de 3000 milmetros al ao, una temperatura promedio de 22 C y una humedad relativa del 80 % al anual.

4.2

Manejo de cultivo de la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A.

Con el fin de conocer ms a fondo el cultivo del Rumohra adiantiformis, la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A. permiti la revisin de su plan de manejo de cultivo, en el cual se encuentran las prcticas agrcolas que se llevan acabo para el mantenimiento de este cultivo bajo las condiciones que posee la finca, sobre todo las que se realizan con algn grado de xito en el control del Sndrome de Deformacin del Helecho. Para recolectar la informacin pertinente, se realizaron diferentes visitas a la empresa con el fin de conocer la realizacin de dichas prcticas. La informacin fue recolectada a travs de entrevistas y de la observacin del manejo de la finca de Inversiones Verdes del Trpico S.A.. Dentro de la compilacin de informacin tambin se encuentran las caractersticas de la empresa y el manejo post cosecha de las palmas. 23

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

4.3

Caracterizacin de los sntomas del Sndrome de Deformacin en las frondas

Para la caracterizacin de los sntomas del Sndrome de Deformacin en las frondas para el mercado de exportacin, se realiz una caracterizacin visual de los diferentes tipos de anomalas que se presentan. Para la cual se hizo un estudio fotogrfico de palmas provenientes de los sectores ms impactados por la enfermedad. Se seleccionaron las palmas que presentaran de forma ms clara cada uno de los sntomas, los cuales se agruparon en cuatro grandes tipos que abarcan, el color, el tamao, la forma y la aparicin de esporas.

4.4

Manejo del Sndrome de Deformacin del Helecho campo

En el caso de la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A., la estrategia de manejo del Sndrome de Deformacin del Helecho est dividida en tres mecanismos de accin, con el fin de obtener los mejores resultados posibles en la carrera contra la reduccin de prdidas que produce la enfermedad.

4.4.1

Diagnostico

Para la realizacin del diagnstico se debe tener al personal capacitado para reconocer los sntomas en los programas de monitoreo con el fin de identificar las reas afectadas, para ponerlas en cuarentena y definir las medidas a tomar para evitar el avance de la enfermedad hacia partes sanas de la finca. Cabe destacar que en la actualidad no hay un diagnstico totalmente acertado y claro sobre el agente causal, por lo cual no hay tratamientos definidos para la recuperacin de plantas enfermas o de las reas afectadas.

24

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

4.4.2

Control Preventivo

Una vez ubicadas las reas contaminadas, es importante mantener una continua vigilancia para evitar la transmisin de la enfermedad por la plantacin. Es muy importante capacitar al personal, principalmente al que esta continuamente en campo y a los que pertenecen a las cuadrillas de aplicacin y de corte, la capacitacin debe enfocarse en la importancia el compromiso con medidas preventivas como la desinfeccin de herramientas y uniformes que se usen en los lugares contaminados, as como la restriccin del acceso no autorizado a dichas reas.

4.4.3

Control Curativo

Cada empresa toma medidas y manejo agronmico de acuerdo con sus capacidades tcnicas y econmicas. En la actualidad algunas empresas como Inversiones Verdes del Trpico S.A. se encuentran desarrollando alternativas agronmicas de manejo en campo de la enfermedad. De ah la importancia de poder evaluar los resultados de los mecanismos usados por los productores para el manejo de la enfermedad, ya que la nica opcin clara que hay para los sectores contaminados, es la completa eliminacin del helecho, enfermedad. Actualmente se emplean dos tipos de prcticas agrcolas, la IVT-1 y la de rotacin de cultivos. En la IVT-1 se realiza una eliminacin total del helecho, esta labor en gran parte es manual, una vez se asegura que no quedan rizomas sobre las eras, se procede a realizar una labor de aireacin de suelo, acompaada de una incorporacin de material orgnico como aserrn o cascarilla de arroz, para luego aplicar algunas enmiendas enfocadas a la recuperacin del suelo enfermo, por ltimo se utiliza un biocida de alto espectro y se protegen las reas tratadas durante un tiempo prudencial de varias semanas; una vez terminado dicho periodo de tiempo, se procede a resembrar las reas tratadas con semilla limpia, proveniente de otras empresas que pueden garantizar cierta inocuidad de origen. y la adopcin de otros usos para los suelos donde se presenta la

25

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

4.5

Evaluacin de un plan de propagacin in vitro con material de inversiones verdes del trpico S.A.

4.5.1

Recoleccin de rizomas

Por medio de la ayuda de la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A., se recolect el material a evaluar que comprendi tanto rizomas como plantas. Se seleccionaron rizomas sanos, tanto de cultivo como del material de renovacin con capacidad de producir plantas de exportacin. Tambin se obtuvieron rizomas provenientes de las reas que presentan la enfermedad en la empresa. Se realizaron 5 recolecciones de material, de las cuales la ltima se trabaj con plantas sanas y enfermas provenientes del almcigo para renovacin. Se usaron rizomas como material base para la evaluacin de los protocolos de desinfeccin, por su valor como unidad gentica clonal para la renovacin de cultivos.

4.5.2

Metodologas de desinfeccin

Para la evaluacin de metodologas de desinfeccin con miras a un programa in vitro como otra alternativa para el manejo del Sndrome de Deformacin del helecho, se usaron como base dos metodologas, presentadas en los cuadros 1 y 2 a continuacin:

Cuadro 1. Metodologa de desinfeccin A


Pasos 1 2 3 Sustancia Agri-mycin Hipoclorito de sodio Hipoclorito de sodio Dosis 1g/L 60 % 40 h% 8 minutos 4 minutos Tiempo

Tomado de ALVARENGA, S. Laboratorio cultivo de tejidos

26

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

Cuadro 2. Metodologa de desinfeccin B


Pasos 1 2 3 4 5 6 7 8 8 9 Sustancia Agua y jabn Agua destilada Acido Ascrbico Agua destilada Agri-mycin Agua destilada Etanol 95 Hipoclorito de sodio Tween Agua destilada 100 % 100 mg/L 100 % 2mg/L 100 % 100 % 100 % 2 gotas 3 enjuagues Dosis Tiempo 5 minutos 5 minutos 12 minutos 5 minutos 20 minutos 5 minutos 1 minuto 20 minutos 20 minutos

Tomado de ALVARENGA, S. Establecimiento in vitro del helecho tipo hoja de cuero (Rumohra adiantiformis).

Ambas metodologas han sido desarrolladas en los laboratorios del Instituto Tecnolgico de Costa Rica, entidad educativa de gran trayectoria en el manejo de programas de propagacin in vitro. La metodologa B se escogi por la utilizacin de una maquina de vaco, la cual es muy eficiente para la desinfeccin de especies como la Gloxinia ssp, planta que se caracteriza por poseer una vellosidad profusa, al igual que el rizoma del helecho51. La metodologa B ha sido probada con xito utilizando rizomas con un medio MS (Murashige y Skoog 1962).

4.5.3

Prueba de desinfeccin 1

Para la primera prueba de desinfeccin se distribuyeron 5 tratamientos, para los cuales se usaron 4 metodologas, la A y B referidas anteriormente, junto con otras 2 metodologas producto de pequeas variaciones. En estas variaciones se elimin la aplicacin del Tween y se cambi el tiempo en la aplicacin del hipoclorito de sodio,

51

ALVARENGA, S. Cultivo in vitro de Gloxinia spp. Laboratorio de Cultivo de Tejidos.31p

27

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

disminuyendo en 10 minutos el tiempo de la metodologa B. En la metodologa A se agreg una aplicacin de acido ascrbico en 10 minutos. Para esta prueba se recolectaron 25 rizomas de plantas sanas, repartiendo 5 por cada tratamiento. Se usaron para esta prueba viales, con un tiempo de observacin de 5 das.

4.5.4

Prueba de desinfeccin 2

En esta prueba, se utilizaron las mismas metodologas que en la primera, excluyendo el testigo. Se aumentaron la cantidad de rizomas, se seleccionaron 108 entre rizomas sanos y enfermos. Tambin se realiz una observacin de 5 das de observacin, con la diferencia del uso de recipientes ms amplios en vez de viales.

4.5.5

Prueba de desinfeccin 3

Cuadro 3. Metodologa de desinfeccin C


Pasos 1 2 3 4 5 5 6 7 Sustancia Agua y jabn Agua destilada Agri-mycin Etanol 70 Hipoclorito de sodio Tween Agua destilada Acido Ascrbico 100 % 2mg/L 100% 100 % 2 gotas 3 enjuagues 100 mg/L 10 minutos Dosis Tiempo 5 minutos 5 minutos 15 minutos 1 minutos 10 minutos 10 minutos

28

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

Cuadro 4. Metodologa de desinfeccin D


Pasos 1 2 3 4 Sustancia Agri-mycin Hipoclorito de sodio Hipoclorito de sodio Agua destilada Dosis 1g/L 60 % 40 % 3 enjuagues Tiempo 15 minutos 8 minutos 4 minutos

En la tercera prueba se usaron las metodologas descritas en los cuadros 3 y 4, que difieren de las anteriores en el orden de los pasos, en algunas dosis y en los tiempos de inmersin de los rizomas. Se utilizaron 30 rizomas, divididos en 2 tratamientos, correspondientes a las dos metodologas.

4.5.6

Prueba de desinfeccin 4

Cuadro 5. Metodologa de desinfeccin E.


Pasos 1 2 3 4 5 5 6 7 Sustancia Agua y jabn Agua destilada Agri-mycin Etanol 70 Hipoclorito de sodio Tween Agua destilada Acido Ascrbico 100 % 2mg/L 100 % 100 % 2 gotas 3 enjuagues 100 mg/L 12 minutos Dosis Tiempo 5 minutos 5 minutos 10 minutos 1 minutos 10 minutos 10 minutos

29

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

Para esta prueba se disearon otras dos metodologas, como se puede ver en los cuadros 5 y 6, usando 15 rizomas para cada una de ellas.

Cuadro 6. Metodologa de desinfeccin F


Pasos 1 2 3 4 Sustancia Agri-mycin Hipoclorito de sodio Agua destilada Acido Ascrbico Dosis 1g/L 60 % 3 enjuagues 100 mg/L 12 minutos Tiempo 15 minutos 8 minutos

4.5.7

Prueba de desinfeccin 5

En la ltima prueba se realiz una seleccin de plantas, tanto enfermas como sanas, las cuales se distribuyeron en 3 tratamientos, que constaban de un testigo, un

tratamiento de abundancia de humedad y otro bajo estrs hdrico, tanto para plantas enfermas como sanas. Las plantas estuvieron en observacin con los 3 tratamientos durante 10 das, con el fin de evaluar los rizomas de estas plantas bajo las metodologas de desinfeccin A, B, D y F. Como se puede ver en la figura 5.

30

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

Figura 5. Esquema de funcionamiento de la prueba de desinfeccin 5

4.5.8

Seleccin de medio de cultivo

Se escogi como medio de cultivo para realizar la evaluacin de metodologa de desinfeccin, el MS (Murashige y Skoog de 1962), ya que es el ms utilizado para propagacin vegetal in vitro. Adems, los reactivos que lo componen son de fcil adquisicin y el manejo de las soluciones madres es simple52. En el cuadro 7 se

52

KRIKORIAN, A. Ref. 3. p. 40

31

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

presentan los componentes del medio de cultivo; de este medio se prepararon 7 litros para las 5 pruebas.

Cuadro 7.Ingredientes y dosis para un litro de MS


Soluciones Madre Macro elementos Micro elementos Solucin ferrosa Vitaminas Sacarosa Phytagel Dosis 50 ml 5 ml 5 ml 5 ml 30 g 1,75 g

32

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

5
5.1

Resultados y Discusin
Manejo de cultivo de Inversiones Verdes del Trpico S.A.

5.1.1

Programa de cultivo de la finca

El manejo del cultivo de la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A. se distribuye de la siguiente forma: En el caso de control de luz se trabaja con poli sombra de 80%, la cual se consigue comercialmente para el cultivo. Aunque actualmente, debido a las intensas lluvias en la regin, se han afectando los procesos de fotosntesis, haciendo lento el desarrollo de las palmas, debido a la disminucin de las horas luz por la abundante nubosidad. En cuanto a temperatura, el lugar donde se encuentra la empresa tiene un promedio de 20 C en el da, y de 17 a 18 C en la noche. Cabe destacar que las temperaturas tambin se han visto modificadas por los fenmenos climticos, durante este ao. El exceso de humedad se controla con el sistema de drenajes que posee la empresa, aunque la humedad relativa de la regin esta entre el 50 y 70 %, en ocasiones el ambiente se satura consecuencia del aumento de la pluviosidad que satura los suelos franco arcillosos y arcillosos de la finca propiedad de la empresa. El manejo nutricional del helecho es uno de los aspectos ms importante para este cultivo, con adecuada fertilizacin hay un desarrollo y una produccin acorde con las necesidades que el mercado requiere. En Inversiones Verdes del Trpico S.A., se maneja tanto una formulacin slida como una liquida; en caso de la slida (granulada), se trabaja con fosfato monoamnico (MAP), a una formulacin de 10-50-0,

acompaado de sulfato de potasio, magnesio y azufre. Tambin se fertiliza con nitrato de calcio, urea y azufre.

33

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

En el caso de los fertilizantes lquidos, se usan acido fosfrico, sulfato de magnesio, nitrato de calcio y urea. Al igual que la fertilizacin slida, se aplican durante todo el ao segn el programa de la finca.

Para el control de malezas se controlan generalmente con glifosato y 2-4 D. Pero en los ltimos aos la empresa ha regulado ms la aplicacin de herbicidas y ha optado por la erradicacin manual.

Debido a las necesidades de humedad del helecho, es importante un adecuado control de enfermedades de origen fungoso y bacterial, por lo que la empresa maneja la aplicacin de diferentes fungicidas y bactericidas, en las dosis que se requieran, segn el grado de dao que causen al cultivo. Adems del control qumico, se realiza peridicamente una labor de limpieza, en la cual se eliminan de las eras las palmas que presenten sntomas de dao por hongos o bacterias.

El personal que realiza las labores de corte, fertilizacin y limpieza de camas es diferente y esta capacitado para tales fines, el uso de materiales limpios, uniformes y desinfeccin de herramientas es imprescindible para estos operarios.

5.1.2

Manejo del helecho cosechado

Debido a que la empresa posee varios tipos de mercados, se debe acomodar a las necesidades que tiene cada cliente, que son en ocasiones diferentes para cada pas, teniendo en cuenta la temporada. Por ejemplo en el transcurso del ao el mercado de los Estados Unidos y el de Europa son ms permisivos en cuanto a la presencia de esporas y al estado de las mismas, ya que a veces permiten esporas inmadura (verdes), o solamente maduras (cafs), dependiendo de la temporada. Actualmente Japn compra un ramo mixto que es el estndar de tamaos para la clasificacin y se le conoce como junior, el cual no se acepta con esporas. 34

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

Figura 6. Ramos de helecho de tipo largo para exportacin con destino a Colombia

Se manejan cajas de 24 a 35 ramos dependiendo del destino de exportacin que tengan. Para una caja de 24 ramos, hay en promedio 4 ramos de tamao largo, 6 ramos de medio, 11 ramos de mini y 2,5 ramos de tamao junior (mixto). La cantidad de ramos por tipo se acomoda segn la temporada y el pedido del cliente. En campo las palmas son cortadas teniendo en cuenta el color y la angularidad (forma triangular sin espacios), para luego ser clasificados en la empacadora segn los tipos de tamao, ya sea largo, mediano, mini o junior. Adems se hace una separacin de palmas por sobre maduracin (vejez), palmas inmaduras y por presencia de esporas Inversiones Verdes del Trpico S.A. produjo para el 2006 cerca de 45000 ramos por hectrea para San Valentn, que es la temporada mas importante del ao, esto equivale a 1286 cajas por hectrea, teniendo en cuenta que cada caja debe tener 35 ramos. Los ramos se observan en la figura 6. Los tamaos estn asociados a los pesos, los cuales varan en la mayora de los casos en 50 gramos por ramo, lo cual se asocia a la presencia de agua y de productos

35

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

preservantes que acompaan a las palmas, para evitar los daos en el transcurso del viaje.

Antes del empaque hay un ltimo proceso de seleccin en el cual se eliminan las palmas de acuerdo con los siguientes parmetros: vejez, inmadurez, presencia de espacios en las frondas y daos mecnicos. En esta clasificacin se desechan aproximadamente 9 palmas por caja empacada.

5.2

Sintomatologa de las palmas con el Sndrome de Deformacin del Helecho

Como resultado de la evaluacin de la sintomatologa de la enfermedad en campo, especialmente en el follaje se seleccionaron 4 tipos de sntomas, tomando en cuenta los requerimientos que el mercado pide para el follaje, los cuales fueron referidos anteriormente. Estos 4 tipos son: la coloracin, el tamao, la forma la angularidad de la palma, y por ultimo la aparicin de esporas. En la figura 7 se puede ver un ejemplo de una palma de exportacin en perfecto estado de calidad, sobresale una coloracin verde intensa, brillante, homognea, sin manchas ni decoraciones, con un tamao que cumple los requerimientos del mercado, para esta palma en especial del tipo larga, y tiene un tamao de 59 a 60 cm. En cuanto a la forma, respeta una buena angularidad, por lo que se entiende un triangulo perfecto, sin ventanas (espacios generados por perdidas de hojas), no hay deformidades ni daos, adems de una adecuada apertura de foliolos. En la mayora de los casos se presentan varios tipos de daos en una sola palma, siendo los ms comunes el amarillamiento acompaado de problemas de tamao o forma. Los 4 tipos de dao son considerados mutaciones que sufre la planta.

36

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

Figura 7. Follaje perfecto en calidad y sanidad

5.2.1

Coloracin

Hay diversos daos en la coloracin de las palmas, como se puede apreciar en las figura 8, donde hay un amarillamiento, que va desde las punta de la pinna hasta llegar a presentarse en todos los foliolos.

Figura 8. Follaje con problemas de coloracin

37

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

En la figura 9, se aprecia con claridad las diferentes tonalidades que se pueden presentar, desde manchas con un verde claro, pasando por un amarillo encendido, hasta una coloracin marrn en las puntas de los foliolos.

Figura 9. Palmas con daos por coloracin Las palmas que presentan estos problemas de coloracin representan una perdida ya que aunque no manifiesten ninguno de los otros tipos de daos, mencionados anteriormente, no califican dentro de las especificaciones para la calidad de exportacin. En la figura 10, se encuentra una coloracin marrn presente en una palma madura.

Figura 10. Follaje con manchas marrn 38

Evaluacin del cultivo del helecho (Rumohra adiantiformis) y el manejo del Sndrome del Helecho

En la figura 11, que es una palma sele (inmadura), hay una gama de colores que van desde diferentes tonalidades de verde, manchas amarillas y pequeos crculos marrones. Sin importar la madurez de la palma pueda tener, se pueden presentar cualquiera de las diferentes tonalidades mostradas en las figuras 8, 9 y 10.

Figura 11. Formacin de manchas amarillas y marrones

5.2.2

Tamao

Las mutaciones de tamao son las ms comunes y variadas. Se pueden observar en la palma como unidad, en la pinna y en el foliolo de forma individual. En la figura 12 se puede notar la diferencia entre dos tipos de problemas de tamao. En primer lugar al extremo derecho, una palma que presenta un desarrollo excesivo de la pinna, adems de una clara anormalidad en la forma piramidal que contrasta con la que se ve en la figura 7. Por otro lado, la palma de la izquierda muestra lo opuesto, una disminucin de tamao en los foliolos, que a se vez se manifiesta en cada pinna, dando la sensacin de que la palma se encogi.

39

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Figura 12. Palmas con deformacin de tamao En el caso de la figura 13 es un ejemplo de enanismos en la palma completa junto con un problema de apertura de la pinna, lo que hace notar las esporas presentes en el envs de los foliolos con gran facilidad. Es muy comn ver anormalidades de tamao y forma en una misma palma.

Figura 13. Follaje diferencias de tamaos en la pinna Se pueden encontrar en una misma palma diferentes tamaos de foliolos, como en la figura 14, donde hay un tamao disparejo entre los mismos, afectando la angularidad. Esto se puede notar en la parte superior, en la punta de la palma, donde hay un 40

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desarrollo exagerado, frente al tamao que poseen los foliolos de parte inferior, que deberan ser los ms grandes y largos como en la figura 7 de la palma perfecta. Por otro lado, presenta en mismo tallo dos frondas, lo cual impide el correcto desarrollo de ambas.

Figura 14. Follaje con dos frondas En la figura 15 hay un caso de encogimiento de la pinna, en un estado inmaduro, adems de la presencia de espacio (ventana) en la parte superior derecha, originado por la ausencia de alguna pinna.

Figura 15. Follaje que presenta encogimiento de las pinnas

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5.2.3

Forma

En lo referente a la forma, como se discuti anteriormente, el punto ms importante es la angularidad de la palma, que se forme correctamente un triangulo, del cual cada pinna inferior posee un tamao mas largo, disminuyendo conforme se vayan desarrollando hacia la parte superior de la fronda. La apertura de la palma debe ser completa, no se acepta que la pinna este doblada o mal formada, cada foliolo debe ser de buen tamao, bien distribuido en el espacio. En la figura 16 se encuentran tres palmas de un buen tamao, del tipo largo (59 a 60 cm), pero con diferentes problemas de forma. En el caso de la que esta en el extremo izquierdo, los foliolos tienen secciones con encogimiento y falta de desarrollo, dando una apariencia dbil, sin una apertura adecuada de la pinna. La palma de en medio no desarrollo la pinna, como unidad, en varios sectores, adems los foliolos son de poco tamao. Por ltimo la palma del extremo derecho tiene un buen desarrollo de foliolos pero en la base no hay una apertura adecuadamente a diferencia de la parte superior de la fronda.

Figura 16. Diferentes tipos de problemas de forma en las palmas

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La deformacin del tallo es otro problema que se presenta en las plantas enfermas, haciendo perder la rigidez de la angularidad de la palma, un ejemplo de esto es la palma que se muestra en figura 17.

Figura 17. Follaje con problemas de angularidad y apertura de pinnas

En las figura 18 y 19 se muestran deficiencias en el desarrollo tanto de la pinna y de varios de los foliolos. La figura 18 muestra los problemas de simetra en ambas partes, ya que no hay un desarrollo completo, adems de un enanismo generalizado en toda la palma.

Figura 18. Follaje con problemas de forma en las pinnas 43

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En la figura 19 hay problemas con el tamao y la apertura de los foliolos en un estado inmaduro, as como un gran espacio (ventana), generado por la ausencia en la formacin de foliolo y pinna, como conjunto, en sector derecho de esta palma.

Figura 19. Follaje con problemas de forma en los foliolos

Figura 20. Follaje afectado en un estado temprano de desarrollo En la figura 20 hay un caso de deterioro en las funciones de en el crecimiento y apertura, en un estado de temprano de desarrollo de la palma. Fenmeno que se conoce como arrepollamiento, debido a la forma que toma la palma muy similar a la de un repollo.

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5.2.4

Esporas

En la figura 21 se aprecia la cantidad normal de esporas que posee, en el envs una pinna y un foliolo de una palma sana. En este caso el color marrn oscuro indica que estas esporas se encuentran maduras y en algunos casos ya estn abiertas.

Figura 21. Aparicin normal de esporas en una palma

Figura 22. Follaje con sobre produccin de esporas Cuando se presenta la enfermedad se puede notar que la cantidad de esporas aumenta de manera considerable, si se compara la figura 21 y 22 respectivamente, el desarrollo de esporas en ambas es exagerado, ntese en la figura 20, que el envs de los folios esta prcticamente lleno de esporas. Lo anterior no slo genera un desgaste excesivo

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para la planta debido al mantenimiento de una gran cantidad de unidades reproductivas que retrasa la salida de nuevas frondas, sino que tambin representa una prdida por los daos visuales de la palma.

5.3

Manejo en campo del Sndrome de Deformacin del Helecho

En el ltimo ao, la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A. se ha dedicado a evaluar e investigar alternativas de manejo para esta enfermedad, encontrando en la prctica IVT-1 y en la rotacin de cultivos, mecanismos para la reduccin de perdidas que causa el Sndrome de Deformacin del Helecho. .

Figura 23. Mapa de la empresa Inversiones Verdes del Trpico S.A. 46

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En la figura 23 se puede observar el mapa de la finca de la empresa con las sectorizaciones que tiene y la ubicacin de los tratamientos de manejo del Sndrome de Deformacin del Helecho. La finca esta divida en dos secciones, la remarcada en azul, corresponde a las reas del cultivo cubiertas por poli sombra y la remarcada en rojo es la que se encuentra bajo sombra natural, con rboles de pino. Los sectores remarcados en verde y con rayas negras, son los sectores de la finca que presentan la enfermedad que son 4,5 ha, que equivalen al 30 % del rea cultivada. Los crculos amarillos corresponden a los sectores tratados con la prctica IVT-1 para el tratamiento del Sndrome de Deformacin del Helecho. Y finalmente los crculos verdes, son reas en las cuales se elimin el helecho y se sembr tomate, con el fin de rotar cultivos. Los resultados del uso de estas dos practicas han sido positivos, en el caso de la practica IVT-1, las primeras reas tratadas, se encuentran actualmente en produccin, aunque no se erradic completamente la enfermedad, y se presentan pequeos sectores contaminados, se ha podido cortar frondas de buena calidad para la exportacin, pasando de ser sectores improductivos y con altos costos de mantenimiento a sectores productores de una excelente calidad de frondas. La contaminacin de pequeos sectores de las reas tratadas se debe principalmente a la alta cantidad de humedad del ambiente, generada por el aumento de la precipitacin y la disminucin de horas luz, debidas a la continua nubosidad durante este ao, lo que mejora las condiciones bajo las cuales la enfermedad se desarrolla. Cabe destacar que esta prctica IVT- 1 es costosa, ya que implica una cantidad de mano de obra durante todo el proceso de tratamiento, sumado al costo de los productos qumicos usadas y de la semilla que se usa para la resiembra. Aun as ha representado para la empresa una inversin que hasta el momento deja buenos resultados.

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5.4

Evaluacin de las pruebas de desinfeccin

5.4.1

Prueba de desinfeccin 1

En esta prueba los 5 tratamientos resultaron contaminados tanto con bacterias como por hongos. El de mayor contaminacin fue el testigo, con 3 rizomas con bacterias presentes en el rizoma, 1 rizoma con presencia de hongos en el medio, y un ltimo con bacterias y hongos en el medio. Aunque en las dems metodologas tambin hubo una contaminacin total, ninguna fue tan agresiva como la del testigo, como se ve en la figura 25, por ejemplo; en la metodologa B present contaminacin por hongos en todos los medios. Las dos metodologas modificadas presentaron hongos en todos los rizomas, En el caso de la metodologa A, aunque se present contaminacin de ambos tipos de patgenos, fue la contaminacin mas leve de todas.

Figura 24. Contaminacin por hongos en la prueba 1

5.4.2

Prueba de desinfeccin 2

En la segunda prueba se aument la cantidad de rizomas, divididos en 54 sanos y 54 enfermos. Los cuales a su vez se ordenaron en cuatro tratamientos, correspondiente a

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los evaluados en la prueba 1. El resultado tambin arrojo una perdida total de los 108 rizomas evaluados. La evaluacin de esta prueba dio 98 frascos contaminados con hongos, de los cuales en 58, los hongos estaban presentes en todo el medio, cubriendo el rizoma, como lo muestra la figura 27, en los restantes 40 el patgeno se presentaba en lugares aislados del rizoma. Adems se perdieron 6 rizomas por contaminacin de bacterias y 4 sin contaminacin en el medio, pero con los rizomas muertos, lo cual indica que los tiempos de inmersin o las dosis necesitaban una modificacin.

5.4.3

Prueba de desinfeccin 3

Para esta prueba se evaluaron otras dos metodologas diferentes a las usadas anteriormente, sobre todo en los tiempos de tratamiento de los rizomas. Las metodologas a evaluar fueron las C y D. Para las cuales se utilizaron 30 rizomas, divididos a la mitad para ser evaluados con cada metodologa. La revisin de los frascos revel una contaminacin de 25 de los 30 frascos, donde los 5 restantes presentaron rizomas muertos, con medios sin contaminar, esto en la metodologa D. En general, la mayor presencia como agente contaminante fue de bacterias, con 12 frascos, 7 en la metodologa C y 5 en la D. En cuanto a hongos, se presentaron en total 7 frascos contaminados, 4 en la metodologa D y 3 en la C, como se puede apreciar en la figura 29. En este ltimo caso slo 6 frascos tuvieron una contaminacin por bacterias y hongos al mismo tiempo.

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Figura 29. Contaminacin por hongos y bacterias en la prueba 3

5.4.4

Prueba de desinfeccin 4

La evaluacin de la metodologa E arrojo un total de 15 rizomas contaminados, de los cuales slo uno tenia hongos en el rizoma y cubra todo el frasco, como lo muestra la figura 25; adems, 8 frascos presentaron el medio limpio, pero los rizomas muertos. Mientras que solo haban 6 frascos con contaminacin por bacterias, de los cuales 2 presentaban el patgeno en el medio de cultivo.

Figura 25. Contaminacin con hongos en la prueba 4 50

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En el caso de la metodologa F, el conteo en la evaluacin de contaminacin arroj 10 frascos con bacteria, de los cuales la mitad estaba completamente contaminado, del resto 3 tenan hongos muy desarrollados y solo dos presentaban rizomas muertos con el medio sin contaminar.

5.4.5

Prueba de desinfeccin 5

En la ltima prueba, que evaluaba las metodologas A, B, D y F, el resultado fue igual al de las 4 anteriores. En el caso de los rizomas enfermos, los que estaban bajo estrs hdrico presentaron contaminacin, 6 frascos con bacterias, 3 tenan bacterias y hongos al mismo tiempo y 3 frascos solo hongos. Mientras que los que haban estado en el tratamiento de humedad en la evaluacin se presentaron 5 frascos slo con bacteria, y los 7 restantes con hongos. Cabe resaltar que la contaminacin en este grupo de rizomas era mucho mas desarrollada que la de los rizomas sanos. En el caso de las plantas sanas, los rizomas que estuvieron bajo estrs hdrico fueron los ms contaminados 5 frascos con hongos y 7 con hongos. No hubo mucho diferencia con los que estuvieron en tratamiento de humedad, ya que se contaminaron 4 frascos con bacterias, 5 con hongos y 3 con rizomas muertos.

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Conclusiones
La falta de informacin acerca del Sndrome de Deformacin del Helecho ha generado que las empresas de este sector destinen gran cantidad de recursos a la bsqueda de alternativas para un control parcial o completo de la enfermedad. Aunque la enfermedad es generalizada en el sector, tiene un comportamiento diferente de acuerdo a las caractersticas de cada plantacin, por eso es importante que empresas como Inversiones Verdes del Trpico S.A. continen trabajando con prcticas eficientes que se amolden a la situacin particular de cada empresa. Las actuales condiciones climticas de exceso de lluvia estn haciendo aun ms difcil el manejo de la enfermedad, causando brotes en reas tratadas con prcticas relativamente efectivas. Aunque la prctica IVT-1 sea costosa y relativamente eficiente, le ha permitido a la empresa recuperar la productividad de una buena parte de las reas contaminadas con la enfermedad. Los resultados negativos en las evaluaciones de las diferentes metodologas de desinfeccin estn relacionados con la extraccin de rizomas de reas de produccin, las cuales estn propensas al contagio de hongos y bacterias por el ambiente altamente hmedo del cultivo. Es difcil saber si los rizomas que se catalogaron como sanos, realmente lo fueran, ya que se seleccionaron por no presentar sntomas del Sndrome de Deformacin del Helecho. Las exportaciones reportaron un aumento del 11% entre el ao 2005 y 2006. Lo que indica que el sector va desarrollando lentamente soluciones efectivas para manejar la enfermedad o para hacer ms productivas las reas contaminadas. Ninguna de las pruebas de desinfeccin en laboratorio fue exitosa, una de las causas pudo ser el manejo tcnico de las mismas. no

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Recomendaciones
Es necesario desarrollar una amplia destreza en el manejo de los procedimientos de trabajo dentro del laboratorio. Las pruebas de desinfeccin requieren de un manejo de alta rigurosidad cientfica. El manejo de los rizomas y de los reactivos para los protocolos de desinfeccin debe realizarse con suma rigurosidad para evitar la contaminacin. Se recomienda hacer seguimiento de las plantas en campo a mediano y largo plazo para corroborar los resultados de laboratorio.

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