Introduo O processo de determinao da qualidade da gua de reservatrios, rios e lagos, usado amplamente hoje nos rgos responsveis pela

distribuio de gua nas cidades problemtico e requer um tempo demasiadamente elevado. Uma parte deste processo se baseia em uma contagem de algas. As algas tm um importante papel na determinao da qualidade da gua em lagos de gua doce, reservatrios e rios. a existncia de organismos que fornece informao sobre a qualidade da gua em longo prazo. Assim, amostras de algas so observadas no microscpio, podendo um tcnico do laboratrio ficar horas ocupado somente com uma amostra realizando a contagem de algas ao microscpio. Este processo muito cansativo e exige bastante da viso da pessoa, pois todo o trabalho realizado no microscpio.

Morfologia e estrutura Interna das Algas As algas microscpicas e unicelulares Euglenophyta, Chrysophyta e Pyrrophyta so objeto de estudo da Microbiologia, assim como as formas unicelulares das Chlorophyta. As algas marrons (Phaeophyta) e as vermelhas (Rhodophyta) so estudadas na Botnica.
As algas possuem clorofila a como seu pigmento fotossinttico primrio, assim como

pigmentos carotenides acessrios. Membros de Euglenophyta e Pyrrophyta no possuem parede celular. Outras algas possuem parede celular composta por slica, celulose, outros polissacardeos ou cidos orgnicos.

Euglenofitas

Auttrofos por fotossntese. Presena de cloroplastos. Maioria de gua doce. Componente importante do fitoplncton. Vacolo pulstil para controle osmtico. Estigma para percepo de luz. Paramilo como reserva. Locomoo por um flagelo. Reproduo assexuada por cissiparidade.

Morfologia e estrutura Interna das Cianobactrias A diversidade morfolgica das Cianobactrias muito impressionante. So conhecidas as formas unicelulares como filamentosas. Dividem-se em cinco grupos morfolgicos: unicelulares que se dividem por fisso binria;
unicelulares que se dividem por fisso mltipla (colonial); filamentosas com clulas especiais fixadoras de Nitrognio ou heterocistos;

filamentosas mas sem heterocistos e filamentosas ramificadas

EUTROFIZAO DE MANANCIAIS E SUAS CONSEQUNCIAS A eutrofizao o crescimento excessivo das plantas aquticas, tanto planctnicas quanto aderidas, em nveis tais que sejam considerados como causadores de interferncias com os usos desejveis do copo dgua (VON SPERLING, 2005). Chapra (1997) define a eutrofizao como o fenmeno do crescimento excessivo de plantas aquticas atravs de uma super fertilizao. A qualidade da gua bruta de um manancial depende das caractersticas da bacia hidrogrfica, incluindo clima, hidrologia, geologia, pedologia, morfologia, usos e ocupao da terra. Os lagos naturalmente recebem os sedimentos onde a decomposio do material produz nutrientes ainda em concentraes baixas, dentro de um ciclo natural. A partir do momento que a agricultura ocupa a bacia, os processos de fertilizao para maximizar o rendimento das culturas acabam implicando em aportes significativos de fsforo e nitrognio, nutrientes limitantes para as populaes algais (VON SPERLING, 2005). No caso da ocupao urbana da bacia, podem ocorrer casos de assoreamento em funo da implantao de empreendimentos. Os sedimentos so ento carregados para o manancial, juntamente com a drenagem pluvial urbana. Por fim, o lanamento de esgotos o factor de maior significncia na eutrofizao de corpos dgua (VON SPERLING, 2005).

O planeamento e a operao racional de sistemas de abastecimento de gua requerem o conhecimento das relaes causa-efeito que influem na qualidade da gua, especialmente aquelas relacionadas ao desenvolvimento de algas, visando a proteco do manancial. O florescimento algal decorrente do aumento da concentrao de nutrientes no manancial pode ter os seguintes efeitos directos na qualidade da gua (DI BERNARDO, 1995): a) Aumento da matria orgnica particulada (fitoplncton, zooplncton, bactrias, protozorios, fungos e detritos); b) Aumento de substncias orgnicas dissolvidas que podem conferir sabor e odor gua, ser precursores da formao de compostos organo-clorados, produzir ou aumentar a cor na gua, servir de substrato para o crescimento de bactrias na estao de tratamento e no sistema de distribuio e contribuir para o aumento da corroso; c) Aumento do pH e das suas flutuaes dirias; d) Diminuio do teor de oxignio prximo ao sedimento podendo ocorrer a liberao de sulfeto de hidrognio (toxicidade), amnia, ferro, mangans, fsforo, etc. Pode ocorrer a anaerbios e no manancial provocando a mortalidade de peixes; e) Problemas estticos, recreacionais e at de reduo na navegao e capacidade de transporte, uma vez que o crescimento excessivo de macrfitas enraizadas interfere com a navegao; f) Desaparecimento gradual do lago como um todo: em decorrncia da eutrofizao e do assoreamento, aumenta a acumulao de matrias e de vegetao, e o lago se torna cada vez mais raso, at vir a desaparecer (VON SPERLING, 2005). Essas alteraes de qualidade de gua podem apresentar efeitos directos ou indirectos na operao da estao de tratamento, dos sistemas de reserva e distribuio, e nos custos com produtos qumicos, tais como: a) Os efeitos na coagulao incluem aumento de coagulante e alcalinizante para ajuste do pH de coagulao; b) Os flocos formados resultam leves, tendo-se que empregar polmero como auxiliar de floculao para evitar a flotao dos mesmos; c) Diminuio da eficincia da remoo de flocos na decantao, com aumento da turbidez e do nmero de partculas na gua decantada; d) Obstruo do meio filtrante, reduo da durao da carreira de filtrao e aumento do consumo de gua para lavagem;

e) Aumento do consumo de cloro devido presena de matria orgnica e amnia, diminuio da eficincia da desinfeco e potencialidade de formao de compostos organo-clorados prejudiciais ao ser humano; f) Possibilidade do crescimento de bactrias no sistema de distribuio devido ao aumento de matria orgnica que serve de substrato, ocorrncia de problemas com sabor e odor e aumento da deposio de ferro e mangans nas tubulaes, diminuindo a seco til (tuberculizao). Os custos aumentam pela necessidade de monitoramento da qualidade da gua em diversos pontos do sistema de abastecimento, aplicao de algicidas no manancial e tratamentos especficos para remoo de ferro e mangans. Finalmente, os efeitos nos consumidores esto associados presena de compostos potencialmente txicos e carcinognicos, de sabor e odor, danos a roupas e aparelhos sanitrios, problemas de corroso nas tubulaes, alm de custos adicionais em tratamentos especficos. Em muitos estudos tem sido observada uma relao entre a concentrao de fsforo e alguns indicadores de crescimento algal em lagos, incluindo a clorofila a, transparncia e taxa de reduo de oxignio no hipolmnio.

METABLITOS E SUBSTNCIAS TXICAS PRODUZIDAS POR ALGAS Algumas cianofceas presentes em guas doces so txicas, especialmente as do gnero Microcystis, Nodularia, Anabaena, Aphanizomenon e Oscillatoria. Dentre os organismos aquticos que podem ser afectados pelas toxinas produzidas por essas algas figuram outras algas, invertebrados planctnicos e peixes, e algumas aves e mamferos, quando utilizam gua na qual proliferam tais algas. As toxinas podem ser polipeptdeos de baixa massa molecular, que actuam lentamente e causam danos hepticos, ou alcalides que causam bloqueio neuro-muscular e cuja aco se inicia em poucos minutos. Algumas espcies de algas azuis, tais como Microcystis aeruginosa, Anabaena flosaquae e Aphanizomenon flosaquae produzem toxinas que podem causar distrbios gastrointestinais, respiratrios, neurolgicos e alergias ao ser humano. As hepatotoxinas das cianobactrias podem produzir intoxicaes agudas ou crnicas e considera-se que a dosagem passvel de causar risco ao ser humano seja de 1g/L. De acordo com a espcie de alga, as hepatotoxinas so denominadas microcisitnas (mais de quarenta tipos) e nodularinas. A actuao no fgado humano atingida por absoro no intestino delgado, seguindo o mecanismo do cido biliar; os peptdeos das hepatotoxinas provocam retraco dos hepatcitos, com consequente separao das clulas e dos sinusides capilares e causando hemorragia heptica (Di Bernardo, 1995). As Figuras 6 a 9 apresentam algumas espcies de algas azuis. Dentre as neurotxicas produzidas principalmente pelos gneros Anabaena, Aphanizomenon e Oscillatoria, destacam-se a anatoxina-a, anatoxina-a (s), saxitoxina e neosaxitoxina. Estas substncias actuam por bloqueio dos canais de sdio inibindo a transmisso neuro-muscular e geralmente causam a morte de cobaias por parada respiratria. A contaminao do ser humano pode ocorrer por contacto directo com gua contendo florescimentos de cianobactrias txicas, em

actividades de recreio, ou por sua ingesto. Do contacto podem resultar rinite, conjuntivite, dispneia, dermatites, etc, enquanto da ingesto tm sido descritos quadros de gastroenterite com diarreia, nuseas, vmitos, diarreias, clicas abdominais e febre, ou hepatite com anorexia, astenia, vmitos e hepatomegalia. ALTERNATIVAS PARA CONTROLE DE ALGAS EM RESERVATRIOS A melhor medida para evitar problemas com florescimentos de cianobactrias o gerenciamento da bacia hidrogrfica onde se encontra o manancial. A preveno deve sempre ser a primeira alternativa, evitando-se o acesso directo do escoamento superficial de reas fertilizadas no manancial, a ocorrncia de eroso decorrente do desmatamento e lanamento de guas residuais de qualquer natureza no curso de gua principal ou em seus contribuintes. A tomada de gua, especialmente em lagos, deve ser objecto de preocupao durante o projecto de estaes de tratamento de gua. No caso de torres, podem ser construdas tomadas em diferentes profundidades, providas de vlvulas ou comportas de fechamento e, por meio de anlise do fitoplncton por ocasio de floraes, pode-se decidir por captar a gua na profundidade que resulte em menos problemas na qualidade biolgica da gua a ser tratada. Aerao/Mistura A estratificao do reservatrio estimula o crescimento de algas nas camadas mais quentes e prximas superfcie alm de provocar outros problemas decorrentes dos baixos nveis de oxignio dissolvido nas camadas anteriores. A Aerao, alm de provocar a mistura das guas nas diversas camadas do reservatrio evitando a presena de zonas anaerbias, acelera o processo de remoo do fsforo e da amnia, envolvidos directamente na florao de algas. Os hidrocarbonetos de pequena massa molecular podem ser extrados por air stripping, que consiste na injeco de ar comprimido na coluna d gua. Para definir a quantidade de ar a ser injectado utiliza-se a Lei de Henry, uma vez que a que melhor expressa o equilbrio do hidrocarboneto entre o ar e a gua. Lalezary et al (1984) descobriram que quanto maior a concentrao dos metablitos na gua, maior a remoo por air stripping. O principal inconveniente dessa tcnica que somente se justifica para vazes baixas, uma vez que o custo e a operacionalidade da injeco de ar podem tornar o processo invivel. Tratamento qumico Diversos produtos qumicos como o sulfato de cobre e algicidas podem ser utilizados no controle do florescimento algal. Esta a alternativa menos interessante face aos custos da aplicao e manejo destes produtos, segurana de uso eficincia em longo prazo. O sulfato de cobre tem sido utilizado no reservatrio da Guarapiranga, na cidade de So Paulo, todavia a sua eficincia tem diminudo ao longo dos anos. Como consequncia negativa h o acmulo de cobre no lodo e a resistncia das algas sua aplicao. Uma alternativa para minimizar a concentrao de cobre a definio de pontos estratgicos para a dosagem do algicida. Um outro inconveniente a liberao das toxinas para o meio aqutico. Quando utilizados frequentemente, os algicidas acabam por

seleccionar espcies ou cepas de cianofceas cada vez mais resistentes, exigindo a aplicao de concentraes maiores e contaminando cada vez mais o meio aqutico (ZAGATTO, 1997). O uso de algicidas ainda muito controverso em funo da elevada toxicidade destes produtos a animais e plantas. Limitao da incidncia de luz solar A luz solar utilizada no processo de fotossntese algal. Reduzir a incidncia de luz no reservatrio uma maneira eficaz de controlar a proliferao de algas sem recorrer ao uso de produtos qumicos. Infelizmente esta opo torna-se invivel em reservatrios com elevada rea superficial. Dentre as alternativas encontradas na literatura permitiram um controle eficiente da populao de algas em reservatrios esto: a) Utilizao de corantes, geralmente de cor azul, reduz a disponibilidade de determinados comprimentos de onda necessrios participantes da fotossntese. b) Cobertura da superfcie dos reservatrios atravs de plantas, telas ou sombreamento com rvores. Biomanipulao Constituintes do zooplncton como Daphnias e Corbiculas so predadores naturais de algas, capazes de reduzir a populao das mesmas sem consequncias negativas. A biomanipulao trata de um conjunto de tcnicas utilizadas para favorecer o crescimento desta fauna consumidora de algas Dentre estas tcnicas esto, o uso de plantas macrfitas, mistura do reservatrio e oxigenao. A manuteno do zooplncton no uma tarefa fcil em virtude da sensibilidade destes organismos a baixos teores de oxignio e compostos txicos, caracterstica comum em reservatrios altamente eutrofizados e/ou poludos. O controlo do florescimento algal ainda pode ser realizado utilizando-se peixes planctvoros, dando-se nfase a espcies da bacia hidrogrfica. No entanto, espcies exticas como carpa e tilpia parecem no ser afectadas pelo consumo de algumas algas txicas e consomem grandes quantidades de colnias de Microcystis (ZAGATTO, 1997).

REMOO DE ALGAS E DE PRODUTOS METABLICOS NAS ESTAES DE TRATAMENTO DE GUA Com o intuito de ilustrar algumas medidas mais comuns utilizadas no controle e remoo de algas nas estaes de tratamento de gua, optamos por utilizar a diviso adoptada por Di Bernardo em que as solues so apresentadas por processo.

 Oxidao A oxidao um processo de desinfeco que consiste na aplicao de um composto qumico (Cloro - Cl2, Dixido de cloro - ClO2, Permanganato de potssio - KMnO4, Oznio - O3) ou no qumico (como o caso do ultravioleta) que inactive os mecanismos de sobrevivncia de micro organismos, inclusive algas. O oxidante mais utilizado em estaes de tratamento de gua o cloro, que pode ser encontrado em diversas formas (gasoso, hipoclorito, dixido, etc.). A sua comprovada eficincia na inactivao de patgenos, o baixo custo e a familiaridade que os projectistas e operadores tem em recomendar a sua utilizao justifica a fama do produto. O processo de oxidao utilizado em duas etapas do processo de tratamento convencional de guas. A chamada pr-clorao tem o objectivo de minimizar problemas operacionais associados ao crescimento de bactrias e algas nas unidades da ETA. Quando utilizado em pequenas doses possvel reduzir odor e sabor do produto final alm de evitar a proliferao de algas e bactrias nos filtros. A ps-clorao utilizada com a finalidade de remover agentes patognicos da gua. Embora os processos oxidativos sejam importantes para garantir a adequao aos padres de qualidade de gua, podem causar problemas. A maioria das tcnicas de desinfeco, inclusive o cloro, responsvel pela liberao de subprodutos txicos que comprometem a qualidade da gua tratada. No faz parte do escopo deste trabalho a descrio de todos os subprodutos que podem decorrer da oxidao de matria orgnica todavia, importante mencionar que as algas, alm de propiciar a formao de Trihalometanos, cancergenos, podem, dependendo da espcie, liberar toxinas como o caso das cianotoxinas, que comprometem a qualidade da gua. A melhor forma de controlar a formao de subprodutos durante as etapas de oxidao remoo de seus precursores atravs de tcnicas de Aerao e adsoro em carvo activado descritas a seguir. Uma vez liberadas as toxinas, seu controle torna-se mais difcil. Coagulao/Floculao A presena de algas implica em maior estabilidade das partculas em suspenso aumentado a dosagem de produtos qumicos e no custo do metro cbico de gua tratada. Durante a floculao, o peso especfico menor das algas leva pode levar flotao dos flocos causando problemas nos filtros. Filtros Lentos De acordo com Di-Bernardo, 2001, um dos mais eficientes sistemas para o controle de alga sem a lise das clulas a filtrao lenta. Todavia, a presena de algas causa a obstruo rpida dos filtros de areia em virtude do reduzido tamanho dos gros de areia. A soluo comummente adoptada tem sido a utilizao de micro peneiradores ou de uma etapa de pr-filtrao em pedregulho.

 Estaes compactas com Filtrao Directa Descendente

A presena de algas em sistemas de filtrao descendente influencia alm do tempo de ciclo entre lavagens, no consumo de coagulantes. A aplicao de sulfato de alumnio na gua de lavagem tem apresentado bons resultados na eficincia da limpeza dos meios filtrantes. Flotao Estudos em estaes de tratamento de gua nos EUA (Edzwald e Wingler) apontam como a melhor forma de optimizar a remoo de algas neste processo, a utilizao de coagulao com sulfato de alumnio seguida de neutralizao das cargas na superfcie das algas com policloreto de alumnio. interessante lembrar que em muitos casos de mananciais com elevada presena de algas, a flotao passa a ser a alternativa mais interessante para tratamento fsico-qumico da gua uma vez que a densidade das algas menor. Sistemas baseados em membranas A presena de algas em sistemas baseados em membranas (ultra filtrao e micro filtrao) diminui o intervalo entre as limpezas e reduz a recuperao de permeado, todavia no compromete a qualidade do efluente do sistema. A soluo comummente adoptada tem sido o controle do florescimento de algas em reservatrios. Adsoro qumica em carvo activado A adsoro em carvo activado tem sido a alternativa mais utilizada em casos extremos, aonde a concentrao de algas e seus subprodutos provam significativas alteraes no sabor, odor e toxicidade da gua produzida. A utilizao de carvo activado pode ser realizada de trs formas. 1) Aplicao de carvo activado em p antes do incio do tratamento. Esta alternativa utilizada em estaes de tratamento de grande porte. Permite remover as algas e seus metablicos com grande eficincia porm no permite a recuperao do carvo. 2) Aplicao de carvo activado granular. Esta alternativa, apesar de menos eficiente que o carvo em p, permite a recuperao e reutilizao do carvo atravs da colecta nos decantadores. 3) Utilizao de leitos de filtrao multimdia ou de carvo activado. Esta opo convencionalmente adoptada em instalaes compactas. O carvo, ao invs de ser dosado na gua, utilizado como carga de um filtro que periodicamente lavado. O uso de carvo activado em p (CAP), visando a adsoro de compostos orgnicos que conferem odor e sabor gua, pode ser adicionado antes ou aps a pr-oxidao. No caso da pr-clorao, o CAP pode ser adicionado na cmara de chegada da gua bruta, antes da aplicao do cloro e do coagulante se houver unidade de pr-sedimentao em seguida. H casos em que a aplicao do cloro feita na captao, de forma que o CAP pode ser aplicado na cmara de chegada da gua, e ir adsorver o residual de cloro. Quando usado o oznio, o CAP pode ser aplicado aps a cmara de ozonizao.

Remoo de cianobactrias no tratamento de gua As algas e cianobactrias podem ter um importante papel como precursores de trihalometanos, especialmente em eventos de florao (FUNASA, 2003). Nesse sentido, os sistemas de tratamento de gua devem monitorar a formao de trihalometanos quando for registado um aumento na densidade de organismos do fito plncton, especialmente quando o agente oxidante empregado no tratamento o cloro. As cianotoxinas podem ser encontradas tanto dentro, quanto fora das clulas.

N o tratamento de gua para abastecimento pblico, a remoo das toxinas deve considerar a fraco solvel e a particulada. Portanto, os processos que promovem a remoo de clulas intactas removem tambm as cianotoxinas intracelulares. Quando a clula da cianobactrias se rompe (lise), as toxinas so liberadas. A lise pode ocorrer naturalmente ou causada por produtos qumicos ou por aco mecnica, como, por exemplo, turbulncia e bombeamento que ocorrem nas etapas de tratamento da gua. Dessa forma, sistemas de tratamento que promovam o rompimento das clulas apresentam um risco aumentado de liberao de cianotoxinas. Para a remoo da fraco extra celular, os sistemas de tratamento podem dispor de mtodos de adsoro e/ou de oxidao. Para a adsoro usualmente utilizado carvo activado (em p ou granulado). J para a oxidao, so empregados cloro, oznio, permanganato de potssio, etc. No entanto, em ambos os casos, as condies de operao so crticas para a eficincia da remoo. N essas situaes, o monitoramento da toxina importante para avaliar a qualidade da gua para consumo humano.

MTODOS DE COLECTA E ANLISES DE CIANOBACTRIAS A metodologia de colecta a ser utilizada em estudos da comunidade de cianobactrias deve atender aos objectivos do programa de monitoramento, de acordo com os usos especficos do corpo hdrico, considerando as caractersticas do manancial (lntico ou ltico), assim como os demais aspectos do ambiente que podem interferir na distribuio dos organismos planctnicos. No caso de floraes, para que a amostra seja colectada em local representativo do sistema, deve-se considerar sua distribuio espacial (horizontal e vertical) e a aco dos ventos, em especial para as cianobactrias que formam escumas superficiais, pela sua deposio junto s margens. A seguir, sero detalhados alguns dos procedimentos utilizados na colecta e anlise de cianobactrias, empregados com maior frequncia no monitoramento de mananciais de abastecimento pblico pelas companhias de saneamento. Esses procedimentos variam de acordo com o tipo de anlise a ser realizada, qualitativa ou quantitativa. 3.1. Colecta para anlise qualitativa A colecta para anlise qualitativa empregada em estudos que buscam, primordialmente, identificar as espcies fitoplanctnicas que caracterizem esse ambiente aqutico. No entanto, em monitoramento de mananciais para abastecimento pblico este tipo de colecta no utilizado de forma rotineira. A amostragem para anlise qualitativa utiliza rede de plncton de nylon, com 20m de abertura de malha, com o objectivo de concentrar o material e obter melhor caracterizao especfica do fitoplncton encontrado no local. No entanto, deve-se ter em mente que a utilizao da rede selecciona os organismos colectados, uma vez que os menores de 20m, como algumas espcies de cianobactrias, teoricamente no ficam retidos. A colecta pode ser realizada atravs de arraste horizontal da rede de plncton com o auxlio de embarcao, ou passando manualmente vrias vezes a rede na subsuperfcie da gua (20cm abaixo da superfcie), ou ainda atravs de arraste vertical, onde a rede mergulhada at uma profundidade previamente estabelecida, puxando-a em seguida at a superfcie. 3.2. Colecta para anlise quantitativa A colecta para anlise quantitativa usualmente empregada para estudos que relacionam no s a diversidade de espcies fitoplanctnicas, mas tambm as densidades em que esses organismos ocorrem no ambiente. A colecta de amostra para anlise quantitativa pode ser realizada manualmente ou com o auxlio de amostradores especiais, como as garrafas de amostragem e bombas de suco. A colecta manual realizada com frasco de colecta (polietileno ou vidro neutro), a uma profundidade de 20cm, aproximadamente. Em casos de floraes superficiais, a colecta realizada atravs da passagem do frasco directamente nos pontos onde existe maior concentrao de organismos (escuma). Para colectas em diferentes profundidades so utilizadas as garrafas dos tipos Kemmerer evan Dorn. Esses equipamentos consistem basicamente de um tubo cilndrico aberto em ambas as extremidades, preso a uma corda (cabo) graduada, que mergulhado at a profundidade desejada, quando, ento, accionado um mensageiro (peso) que dispara um

dispositivo fechando hermeticamente ambas as extremidades da garrafa. Tambm se podem utilizar bombas de suco, principalmente quando houver a necessidade de colectar grande nmero de estaes de amostragem em menor tempo. As bombas peristlticas e de diafragma so menos prejudiciais aos organismos do que as bombas centrfugas (APHA, 1998). 3.3. Transporte e preservao da amostra A amostra viva deve ser transportada em caixas de isopor com gelo e ocupar no mximo dois teros do volume do frasco, para garantir quantidade de oxignio suficiente at o momento da anlise. Normalmente, para a anlise qualitativa no necessria a preservao da amostra, desde que alguns cuidados sejam tomados, como evitar exposio ao excesso de luz, manter a amostra refrigerada e realizar a anlise no prazo mximo de 24 horas aps a colecta. Caso isso no ocorra, a amostra deve ser preservada com soluo de formol, numa concentrao de cerca de 4%. Em casos de floraes, recomenda-se que a amostra seja preservada com formol, visando oportunizar outros estudos que complementem as anlises j realizadas e permitam manter um registo das espcies formadoras de floraes em mananciais de abastecimento pblico. Para a anlise quantitativa, a amostra usualmente preservada com soluo de Lugol, em concentraes de 0,3% a 0,5% para ambientes oligotrficos e de 0,5 a 1,0% para ambientes eutrficos. O material deve ser mantido em frascos de vidro mbar e acondicionado em ambiente protegido da luz. A soluo de Lugol facilita a sedimentao dos organismos, por outro lado, pode dificultar a identificao, alm de ser muito voltil. Para o preparo da soluo de Lugol so utilizados: l 10 g de iodo puro; l 20 g de iodeto de potssio; l 20 ml de cido actico glacial; l Completar at 200 ml de gua destilada. Esta soluo deve, tambm, ser mantida em vidro mbar e em ambiente protegido da luz. 3.4. Anlise de cianobactrias Para realizar a identificao e contagem de cianobactrias, necessria a utilizao de microscpios equipados com oculares de 10 X ou 15 X e objectivas de 10, 20, 40 e 100 X. Em uma das oculares deve ser colocado o retculo de Whipple, utilizado para a contagem e na outra, uma rgua micromtrica calibrada, para obter as dimenses dos espcimes analisados.

3.4.1. Anlise qualitativa A identificao dos organismos presentes em uma amostra requer experincia e qualificao do analista e utilizao de bibliografia especializada. O nvel de identificao depende dos objectivos do estudo, da experincia do analista, do tipo de equipamentos e materiais disponveis. Nas empresas de abastecimento pblico deve-se empenhar todo esforo para identificar , pelo menos o organismo dominante, at o nvel de gnero. Isto possibilitar a tomada de medidas necessrias na operao do sistema de tratamento da gua e providenciar a realizao de anlises complementares, nos casos de cianobactrias potencialmente txicas. Quando a amostra proveniente de floraes no necessrio concentr-la. No entanto, quando a densidade de cianobactrias baixa, a amostra deve ser concentrada, atravs de procedimentos de sedimentao, filtrao ou centrifugao. Sempre que possvel, deve-se observar a amostra viva, principalmente quando da ocorrncia de cianobactrias filamentosas, pois a observao da presena e do tipo de movimento do tricoma importante na identificao. Para anlise qualitativa coloca-se uma gota da amostra em lmina de vidro coberta com lamnula. A observao ao microscpio tico pode ser realizada com diferentes aumentos, com objectiva de 10 at 100 X (usar leo de imerso), o que facilita a visualizao de detalhes morfolgicos importantes para a identificao das cianobactrias. Os caracteres mais utilizados na identificao de cianobactrias so os seguintes (Werner, 2002): l morfologia externa; l plano de diviso celular; l tipo de colnia; l disposio das clulas na colnia; l presena ou ausncia de envelope mucilaginoso ou bainha mucilaginosa; l forma e dimenses das clulas vegetativas; l relao celular entre comprimento e largura ou largura e comprimento; l relao entre o dimetro e a distncia das espiras; l estrutura dos tricomas; l forma do pice dos tricomas; l presena ou ausncia de grnulos e de aertopos; l forma e tamanho dos heterocitos; l origem dos acinetos;

l disposio, nmero, forma e tamanho dos acinetos. A visualizao das paredes transversais de tricomas de cianobactrias facilitada pela adio, no momento da anlise, de uma gota de cloreto de zinco iodado e uma de iodeto de potssio , misturando com a amostra colocada na lmina. Para evidenciar a mucilagem, utiliza-se tinta nanquim. 3.4.2. Anlise quantitativa Para anlise quantitativa a amostra deve estar preservada, sendo recomendado realizar a identificao prvia dos organismos. Deve-se observar se h necessidade de concentrar a amostra antes de realizar a contagem dos organismos. Quanto menor a quantidade de organismos na amostra, maior deve ser o volume a ser concentrado. J em casos em que ocorram elevadas densidades, pode-se diluir a amostra com gua destilada. Em APHA (1998) esto descritas trs tcnicas utilizadas para concentrar a amostra: sedimentao, filtrao por membrana e centrifugao. Dentre essas, as mais utilizadas so as de sedimentao e centrifugao. A sedimentao o mtodo de concentrao mais recomendado, no selectivo (ao contrrio da filtrao) e no causa o rompimento das clulas (ao contrrio da filtrao e centrifugao). Utilizando-se microscpio invertido, a sedimentao realizada directamente nas cmaras de sedimentao, de diferentes volumes (2 a 100 ml), dependendo da quantidade de organismos presentes na amostra. Amostra concentrada por sedimentao tambm pode ser analisada em microscpio ptico. Neste caso, coloca-se a amostra em uma proveta graduada, deixando-a sedimentar. O sobrenadante sifonado e o volume restante, registado. Desse volume, 1ml colocado em cmara de Sedgwick-Rafter para a contagem dos organismos. O tempo para que ocorra a sedimentao dos organismos de uma hora por milmetro de coluna (APHA, 1998) ou de trs horas por centmetro (Margalef, 1983). A centrifugao pode ser utilizada em casos de amostras com pouca quantidade de organismos, ou quando existe urgncia na realizao da anlise. Segundo APHA (1998), a centrifugao deve ser por 20 minutos a 1.000 g. Para anlise quantitativa utiliza-se o retculo de Whipple acoplado ocular, que delimita a rea a ser contada. Recomenda-se, para contagem, utilizar os maiores aumentos disponveis no equipamento, usualmente de 200X ou 400 X. A contagem pode ser realizada em campos aleatrios (um campo corresponde rea de um retculo de Whipple) ou em faixa de campos contnuos. Esta faixa delimitada pela largura do retculo e pelo comprimento total da cmara, de uma borda a outra. O nmero de campos ou faixas a serem contados depende da quantidade de organismos na amostra. A definio do nmero de organismos que necessita ser contado em cada amostra, depende da sua distribuio. Se a distribuio dos organismos ocorre ao acaso e a populao segue a distribuio de Poisson (APHA, 1998), pode-se estimar o erro na contagem. Para atingir um limite de confiana de 95% e variao estimada em 20%, recomendada a contagem de 100 organismos da espcie predominante (Jardim et al., 2002). Ao aumentarmos o nmero de organismos contados para 400, a variao reduz-se para 10%, conforme a expresso a seguir: onde: N = nmero de organismos contados da espcie predominante. A unidade utilizada na contagem de cianobactrias depende dos objectivos a serem alcanados. No atendimento Portaria MS n 518 (Brasil, 2004) e ao

CONAMA 357 (Brasil, 2005b), onde a preocupao o risco potencial de produo de cianotoxinas pelas clulas, a expres-