1 EFECTO DEL HONGO NEMATICIDA Pochonia chlamydosporium var.

catenulatum EN LA MITIGACIN DE IMPACTOS AMBIENTALES NEGATIVOS EN SUELO Y AGUA, DEL CULTIVO DE Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) EN LA ESTACIN EXPERIMENTAL SAN JOS DEL PROYECTO ESPECIAL CHAVIMOCHIC
FANNY ISELA VARELA RODRIGUEZ (1),(fanny_varela_r@hotmail.com) NTERO CELSO VSQUEZ GARCA (2) ,( anterovasquez@gmail.com).

1. Biloga Microbiloga Maestra en Ciencias mencin Gestin de Riesgos Ambientales y seguridad en las Empresas Proyect Especial CHAVIMOCHIC -Trujillo-Per 2. Doctor en Medio Ambiente Profesor Principal DE, Facultad de Ciencias Biolgicas Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo. Lambayeque-Per. Gerente General de ECO PLANET EIRL Consultores Ambientales, Trujillo Per RESUMEN En este trabajo de investigacin se realiz todo el proceso de control biolgico de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum, sobre nemtodos del genero Meloidogyne sp a nivel de laboratorio y trabajo con clamidias luego de su aplicacin en campo a plantas de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) .El anlisis de control de calidad mostr 15% de humedad, 100% pureza, 97% de germinacin y 3,2 x 108 clam/ml, habindose considerado como factor determinante para el efecto favorable a nivel de campo la concentracin de clamidias, la germinacin igual o mayor que 96%. Se observ que el empleo de ste hongo Entomopatgenos favoreci el crecimiento de la planta y sus frutos, en comparacin con aquellas plantas en las que emple Vidate L- 24 que resultaron ms pequeos, atribuible al efecto hormonal del hongo. La humedad y la presencia de materia orgnica tuvieron rol importante a nivel de campo para el establecimiento del hongo; tambin se observ que este producto biolgico a diferencia del qumico, se estableci en campo de cultivo ms fcilmente que el producto qumico, el que requiere ms aplicaciones. Pochonia chlamydosporium var. catenulatum mostr capacidad de reducir paulatinamente las poblaciones de nematodos por debajo del nivel crtico; la eficiencia fue mayor en el control de huevos y hembras de Meloidogyne sp especialmente durante la aplicacin; la germinacin de las clamidosporas fue mayor a 96% y concentraciones, iguales o mayores de 108 clamidias/g. La concentracin de 120 g del hongo/hoyo favoreci el crecimiento de la planta, la cantidad de fruto cosechado, el peso de semillas y cantidad de races libres de nematodos as como tambin la cantidad de fruto cosechado. El adecuado manejo de Pochonia chlamydosporia var. Catenulatum en el cultivo de Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) evit riesgos de contaminacin en suelo, agua y aire, tambin permiti gestionar la seguridad de los agricultores frente a la exposicin de nematicidas txicos como el Vidate L-24 y una alternativa buena y saludable para las empresas agroindustriales frente al control de nematodos Fito patgenos. Palabras clave: Pochonia, sacha inchi, nemtodes, control biolgico

2 EFFECT OF THE FUNGUS Nematic Pochonia chlamydosporium var. Catenulatum IN MITIGATING NEGATIVE ENVIRONMENTAL IMPACTS IN SOIL AND WATER, ON THE GROWING OF Plukenetia volubilis L. (Sacha inchi) EXPERIMENTAL STATION IN SAN JOSE CHAVIMOCHIC SPECIAL PROJECT
FANNY ISELA VARELA RODRIGUEZ (1),(fanny_varela_r@hotmail.com) NTERO CELSO VSQUEZ GARCA (2) ,( anterovasquez@gmail.com).

1. Biloga Microbiloga Maestra en Ciencias mencin Gestin de Riesgos Ambientales y seguridad en las Empresas Proyecto Especial CHAVIMOCHIC -Trujillo-Per 2. Doctor en Medio Ambiente Profesor Principal DE, Facultad de Ciencias Biolgicas Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo. Lambayeque-Per. Gerente General de ECO PLANET EIRL Consultores Ambientales, Trujillo Per ABSTRACT This research was conducted throughout the process of biological control of Pochonia chlamydosporium var. catenulatum on nematodes of the genus Meloidogyne sp at the laboratory level and work with chlamydia after field application to plants Plukenetia volubilis L. (Sacha inchi). The quality control analysis showed 15% humidity, 100% purity, 97% germination and 3.2 x 108 clam / ml, having considered a determining factor for the favorable effect of the concentration field level chlamydia, germination equal to or greater than 96%. It was noted that the use of this entomopathogenic fungus favored the growth of the plant and its fruit, compared to those plants in which lasted Vidate L-24 that were smaller, attributable to the hormonal effect of the fungus. The presence of moisture and organic matter were important role at field level for the establishment of the fungus, also found that this biological product as opposed to chemical, was established in the field of culture more easily than the chemical, requires more applications. Pochonia chlamydosporium var. catenulatum was gradually able to reduce nematode populations below the critical level, the efficiency was higher in the control of eggs and females of Meloidogyne sp especially during the implementation, the germination of chlamydospores was greater than 96% and concentrations equal or over 108 chlamydia / g. The concentration of 120 g of yeast / well favored the growth of the plant, the quantity of fruit harvested, the seed weight and number of nematode-free roots as well as the quantity of fruit harvested. Proper management of Pochonia Chlamydosporia var. catenulatum in growing Plukenetia volubilis L. (Sacha inchi) avoid risks of contamination in soil, water and air, also allowed to manage the safety of farmers from exposure to toxic nematicides as Vidate L-24 and a good healthy alternative to agribusiness versus control Fitonematode pathogens. Keywords: Pochonia, sacha inchi, nematodes, Biological control

3 Introduccin Plukenetia volubilis L. (sacha inchi) es una euphorbiaceae que comnmente se conoce como man del inca. Geogrficamente se distribuye desde Amrica Central hasta Per. En Per se le encuentra en estado silvestre en diversos lugares de Las regiones San Martn, Ucayali, Huanuco, Madre de Dios y Loreto. Es una planta que se adapta a suelos arcillosos, cidos y se desarrolla mejor en climas clidos(8), actualmente se cultiva en la costa peruana. En sacha inchi se ha observado ataques tempranos de Meloidogyne sp (nematodo del nudo) en suelos cidos, alcalinos, franco arenosos con ms de 70% de arena, arcillosos con ms de 50% de arcilla y contenido medio de materia orgnica (7) . Actualmente, en Per, los daos causados por nemtodos fitoparsitos se incrementan da a da, llegando a constituir una de las plagas que ms ataca a los cultivos agrcolas; se estima que originan prdidas de aproximadamente el 30% del rendimiento de cultivos hortcolas de importancia econmica; para el control de nemtodos, se ha empleado nematicidas, muchos de los cuales son biocidas de marcada influencia negativa sobre los organismos benficos presentes en el suelo(2). En los ltimos aos se ha favorecido el uso de los controladores biolgicos por el bajo impacto en el ambiente. El control biolgico se convierte en una alternativa ambientalmente segura para reducir el uso de nematicidas qumicos en el manejo Integrado de plagas uno se ellos es Pochonia chlamydosporium var. catenulatum, hongo parsito facultativo de huevos de nemtodos, ste ha mostrado ser un agente potencial de control biolgico de nemtodos formadores de agallas (Meloidogyne spp.), en sistemas de cultivos intensivos de hortalizas. Aislamientos autctonos de este hongo se obtuvieron en el Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria en Cuba (CENSA) y dentro de ellos la cepa IMI SD 187 fue seleccionada por sus mejores cualidades como biorregulador para su produccin masiva y formulacin de un producto comercial denominado KlamiC(4). Pochonia chlamydosporium var. catenulatum tiene la capacidad de reducir paulatinamente las poblaciones de nematodos por debajo del nivel crtico. Los objetivos de la presente trabajo son: 1. Medir la eficiencia como controlador biolgico del hongo nematicida Pochonia

chlamydosporium var. catenulatum en cultivares de Plukenetia volubilis (sacha inchi) y .reducir los impactos negativos que genera el uso excesivo de productos qumicos 2. Determinar la eficiencia de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum, en el control biolgico de nematodos en base a la medicin de las caractersticas de la planta, longitud,

4 cantidad de fruto cosechado, peso de las semillas hmedas por planta y la cantidad de races libres de nematodos por planta 3. Comparar la efectividad de dosis de 30, 60, 90 y 120 gramos de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum por hoyo, frente a Vidate L24, nematicida ms usado en este tipo de cultivos en la zona. 4. Promover el empleo de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum en otros cultivares del mbito de influencia del PECH, como una forma de gestionar los riesgos ambientales y generar seguridad en las empresas. Materiales y Mtodos La investigacin se realiz a partir del 11 de Diciembre del 2007 , en el laboratorio de hongos Entomopatgenos de la estacin experimental San Jos, Provincia de Vir perteneciente al Proyecto Especial CHAVIMOCHIC, la parte experimental se desarroll en campo en un rea de 0,21 has, con un total de 255 plantas de Plukenetia volubilis L. (Sacha inchi), se estableci un programa de manejo para garantizar la calidad del experimento, se emple un diseo experimental de bloques aleatorios completos segn Montgomery
(6)

, Se sembraron 18 plantas por surco con

seis tratamientos y seis repeticiones cada una: (A) Biolgico Pochonia chlamydosporium var catenulatum. Con los siguientes tratamientos por surco Tratamiento 4 -30g/planta; Tratamiento 360g/planta, Tratamiento 2- 90g/planta y Tratamiento 1 -120 g /planta (B) Qumico Vidate L-24 preparacin de 1,2 ml/L de agua (C), Testigo- Ninguna aplicacin. Se evalu la longitud de las plantas a los 113 das de instalado el cultivo, y a los 7 meses despus se evalu: el nmero de frutos cosechados, el peso de las semillas hmedas por planta y la cantidad de races libres de nematodos por planta (Figuras 1 y 2)

5 FIGURA 1: PROCESO A NIVEL DE LABORATORIO

Recolectar muestras de campo

Medios de multiplicacin

Aislamiento y caracterizacin

Formar banco de cepas

P.clamydosporium

Meloidogyne sp.

FIGURA 2: INTEGRACIN DE PROCESO LABORATORIO - CAMPO Resultados Pruebas de Campo Pruebas controladas (Control de calidad) A nivel de laboratorio

Control de Calidad de Cepa de P.chlamydosporium : Virulencia Patogenicidad Germinacin Concentracin de clamidias/gr. Alternativa sostenible y sustentable Control de nematodos y contaminacin Ningn tratamiento Resultados Biolgicas Qumicas Control de Temperatuta Contol de Humedad ambiental Enfrentamientos de P.chlamydosporium con Meloidogyne sp.

Testigo

Tratamiento Qumico

Tratamiento Biolgico

7 Resultados A los 80 das se inici la floracin en las plantas que se sometieron a tratamiento biolgico con Pochonia chlamydosporium var. catenulatum y a los 90 das se inici la floracin en las plantas expuestas a tratamiento qumico con Vidate L24; en las plantas Testigo, se observ que la floracin se inici a los 100 das. La aplicacin de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum influy en la longitud de la planta desde 1.3 hasta 5,0 m a los 113 das de cultivo; en las plantas Tratadas con Vidate L24 la longitud vari desde 1,3 hasta 2,5 m y en el testigo vario desde 1.5 hasta 2.7 m.(Cuadro N01) el tratamiento estadstico permiti determinar que existi diferencia significativa en la aplicacin de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum a una concentracin de 120 g (Tabla N 01) . En las pantas en las que se aplic Pochonia chlamydosporium var. catenulatum, se obtuvieron desde 10 hasta 37 frutos por planta; en las que se utiliz Vidate L 24 la cantidad de frutos vari desde 16 hasta 45 mientras que en las plantas testigo la cantidad de frutos vario desde 18 hasta 31; sin embargo en las plantas tratadas con el agroqumico los frutos fueron de menor tamao y menor peso. El Anlisis de varianza para un diseo aleatorizado por bloques completos permiti determinar que no existi diferencia estadstica significativa entre las plantas tratados con Pochonia chlamydosporium var. Catenulatum; pero si lo hubo respecto al tratamiento qumico y al testigo. El peso de las semillas en los frutos de las plantas tratadas con Pochonia chlamydosporium var. catenulatum vari desde 145 hasta 535 g; en plantas tratadas con Vidate L24 vari desde 226 hasta 439 g y en las plantas del testigo, esta cantidad vario desde 101 hasta 266 g Este resultado se atribuye a la accin del hongo que al eliminar hembras y huevos de Meloidogyne sp, mejora las condiciones fisiolgicas de la planta logrndose un mejor desarrollo y productividad. Para una mejor comprensin se explicita que el nematodo para obtener alimentos de la clula vegetal la

hembra introduce su estilete a travs de la pared celular mediante secrecin de enzimas lticas como celulasas y peptinasas; posteriormente genera alteraciones celulares en el citoplasma, divisin del ncleo celular originando clulas multinucleadas y deformes con lo que forma las agallas tal como lo afirman Gmez y Montes (3) Con la aplicacin de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum se apreci que el nmero de races vari desde 7 hasta 20; con Vidate L24 vari desde 17 hasta 23 y de 1 a 5 en las plantas del grupo el testigo; sin embargo consideramos pertinente referir que las races de las plantas del

8 primer grupo fueron ms robustas debido al mejor metabolismo de la planta tratada con el hongo nematicida. CUADRO N 01: Medidas de longitud de las plantas, en metros, a los 113 das de instalado el cultivo de Sacha inchi
Longitud (m) por planta Tto.

10

11

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13

14

15

16

17

18

1 2 3 4 5 6

4.3 4.2 4.1 4.8 4.7 4.1 4.3 4.5 4.3 4.4 4.5 4.3 4.7 4.3 4.6 4.4 4.5 3.9 3.6 3.4 3.6 3.2 3.1 3.8 3.8 3.7 3.6 3.8 3.6 3.8 3.6 3.5 3.5 3.7 3.7 3.1 3.5 3.3 3.4 3.4 3.4 3.2 3.3 3.4 3.4 3.2 3.3 3.5 3.1 3.3 3.1 3.3 3.2 2.8 3.1 1.7 1.9 3 2 3.2 3.2 2.8 2.8 2.8 3.1 2.6 2 2.6 2 2.7 2.6 1.5 1.9 2 3 3 2 3 3 2.4 2.7 2.5 1.8 2.3 2.6 2.5 2.8 2.8 2.3 2.3 2.7 2.2 2 2 2 3 3.3 2.4 3.1 2.7 2.7 1.9 1.3 2

2.3 1.8 1.5 2.6

P.clamydosporium var.carenulatum 120g/planta P.clamydosporium var.carenulatum 90g/planta Testigo P.clamydosporium var.carenulatum 60g/planta P.clamydosporium var.carenulatum 30g/planta

CUADRO N 02: Peso de semillas hmedas (g) por planta a los 7 meses de instalado el cultivo de Sacha inchi

Tto 1 2 3 4 5 6

1 405 366 355 257 0 110

2 313 396 351 299 354 191

3 241 422 260 308 439 183

4 313 382 286 275 360 101

5 369 299 329 299 346 119

6 386 346 264 271 297 200

Peso de Semillas (g) por Planta 7 8 9 10 11 12 313 429 439 347 419 319 299 362 392 429 356 413 321 316 264 312 260 260 313 182 285 317 299 285 325 382 269 226 298 283 240 102 210 120 124 240

13 303 413 260 313 226 253

14 247 424 282 280 255 266

15 352 475 355 275 269 235

16 236 398 269 275 298 250

17 309 405 234 252 226 166

18 270 381 273 252 283 213

Conclusiones 1-Pochonia chlamydosporium var. catenulatum mostr capacidad de reducir de manera significativa y paulatinamente las poblaciones de nemtodos en cultivares de sacha inchi . 2. La concentracin de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum de 120 g/hoyo favoreci el crecimiento de la planta, la cantidad de fruto cosechado, el peso de semillas y cantidad de races libres de nematodos y nmero de frutos cosechados. 3. El adecuado manejo de Pochonia chlamydosporium var. catenulatum en otros cultivares susceptibles al ataque de nemtodos evitar riesgos de contaminacin en suelo, agua y aire de los terrenos agrcolas y permitir gestionar la seguridad de los agricultores frente a la exposicin de insecticidas txicos como el Vidate L-24.

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