Artigo originAl

eletroestimulao seletiva mantem estrutura e funo do tibial anterior desnervado de ratos

STRUCTURE AND FUNCTION OF DENERVATED TIBIALIS ANTERIORES ARE MAINTAINED BY ELECTRICAL STIMULATION IN RATS juLiana
dE

tiLLio PoLnio, niLton maZZEr, cLudio HEnriQuE barbiEri, ana cLaudia mattiELLo-SvErZut
ABSTRACT OObjective: Electrical stimulation for treatment of denervated muscles should be implemented by selective treatment. This study evaluated the effect of selective electrical stimulation on the structure and function of denervated muscle. Methods: Fifty Wistar mice were allocated to control, stimulated denervated and non-stimulated denervated groups. Following an electrodiagnostic evaluation, the animals underwent complete unilateral denervation of the proximal anterior tibialis muscle. Weekly re-assessment was carried out in order to adjust the parameters of the selective treatment, applied three times a week. The animals were sacrificed at 7, 14, 28 and 56 days after undergoing the surgical procedures. Histochemical procedures and morphologic and morphometric studies were carried out. Results: The denervated stimulated animals did not present contracture of the ankle joint and self-mutilation was not found on the feet. Significant alterations around the type IIB (denervated stimulated at 7 days), type IIA and hybrid (denervated stimulated at 28 and 56 days) fibers showed less atrophy. The transition of muscle fibers types was significant, indicating the preservation of the functional pattern of the anterior tibialis muscle at 7 and 14 days. Conclusion: We found that the selective electrical stimulation was able to temporarily maintain the structure and function of the denervated anterior tibialis muscle. Keywords: Electrical stimulation. Denervation. Muscle, skeletal. Atrophy. Electrodiagnosis. Rehabilitation.
Citation: Polnio JT, Masser M, Barbieri CH, Mattiello-Sverzut AC. Structure and function of denervated tibialis anteriores are maintained by electrical stimulation in rats. Acta Ortop Bras. [online]. 2010; 18(2):85-9. Available from URL: http://www.scielo.br/aob

RESUMO Objetivo: A eletroestimulao para tratamento de msculos desnervados deve ser aplicada atravs do tratamento seletivo. Este estudo avaliou o efeito da eletroestimulao seletiva do msculo desnervado sobre sua estrutura e funo. Mtodos: Foram utilizados cinqenta ratos Wistar distribudos em controle, desnervado estimulado e desnervado no-estimulado. Aps avaliao eletrodiagnstica de estmulo pr-desnervao, os animais sofreram desnervao proximal completa do msculo tibial anterior unilateral. Houve reavaliao semanal para adaptao dos parmetros de tratamento seletivo, aplicado trs vezes por semana. Os animais foram mortos aps 7, 14, 28 e 56 dias do ps-cirrgico. Foram realizados procedimentos histoqumicos e estudos morfolgicos e morfomtricos. Resultados: Os animais desnervados estimulados no apresentaram contratura da articulao do tornozelo e no houve automutilaes nas patas. Alteraes significativas nas reas das fibras musculares tipo IIB (desnervados estimulados aos 7 dias) e tipo IIA e hbridas (desnervados estimulados 28 e 56 dias) indicaram menor atrofia. Transio do tipos de fibras musculares foi significativa, indicando uma manuteno do padro funcional do msculo tibial anterior nos perodos de 7 e 14 dias. Concluso: Conclui-se que houve manuteno temporria da estrutura e funo do msculo tibial anterior desnervado atravs da eletroestimulao seletiva. Descritores: Estimulao eltrica. Denervao. Msculo esqueltico. Atrofia. Eletrodiagnstico. Reabilitao.
Citao: Polnio JT, Mazzer M, Barbieri CH, Mattiello-Sverzut AC. Eletroestimulao seletiva mantem estrutura e funo do tibial anterior desnervado de ratos. Acta Ortop Bras. [online]. 2010; 18(2):85-9. Disponvel em URL: http://www.scielo.br/aob

IntroDuo O msculo esqueltico um tecido especializado constitudo por clulas alongadas, na maioria das vezes do comprimento do msculo, denominadas fibras musculares. Essas clulas, quando observadas em corte transversal, possuem forma polidrica ou hexagonal e ncleos mltiplos perifricos e achatados.1 Esse tecido capaz de se adaptar frente aos mais diversos estmulos. A interrupo do suprimento nervoso capaz de tornar fibras musculares lentas mais rpida e fibras musculares rpida

em mais lentas devido a alterao da concentrao das isoformas de MHC.2,3 As fibras musculares esquelticas, rpidas e lentas, sofrem atrofia aps a desnervao. Quando a desnervao do msculo acontece atravs da seco completa de seu ramo motor, todas as suas fibras se atrofiaro.4 O principal efeito direto da atrofia por desnervao a reduo da rea e do dimetro da fibra muscular e consequente reduo em sua fora. H tambm a converso de tipos de fibra, de lenta para rpida, em msculos desnervados.5,6

Todos os autores declaram no haver nenhum potencial conflito de interesses referente a este artigo.
Departamento de Biomecnica, Medicina e Reabilitao do Aparelho Locomotor da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto FMRP USP . Endereo para correspondncia: Nilton Mazzer. Departamento de Biomecnica, Medicina e Reabilitao do Aparelho Locomotor 13 andar Hospital das Clnicas Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto FMRP USP Av. Bandeirantes, 3900 Campus Universitrio Monte Alegre Ribeiro Preto SP Brasil. CEP 14098-900 E-mail: nmazer@fmrp.usp.br . Trabalho recebido em 23/05/09 aprovado em 09/02/09 Acta Ortop Bras. 2010; 18(2):85-9

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A Fisioterapia capaz de auxiliar os pacientes portadores de leses nervosas perifricas, tendo como principal objetivo o tratamento das consequncias dessa leso. Para esse tratamento, vrios recursos teraputicos podem ser usados, entre eles cinesioterapia passiva e ativa, reeducao neuromuscular, massoterapia e eletroterapia. A eletroestimulao de msculos desnervados tem como objetivo exercitar eletricamente esse msculo para que ele se mantenha o mais saudvel possvel enquanto os axnios lesados se regenerem e voltem a inerv-lo. Assim sendo, a recuperao funcional ficar facilitada aps a reinervao. Os efeitos da eletroestimulao do msculo desnervado podem ser feito sob vrios aspectos. J foram realizadas anlises dos efeitos da estimulao eltrica sobre o metabolismo das fibras musculares, influncias sobre a reinervao e sobre a manuteno das propriedades contrteis do msculo desnervado, converso entre os tipos de fibras, anlises eletrofisiolgicas, efeitos sobre a atrofia por desnervao.7-9 A eletroestimulao dos msculos desnervados, exige uma adaptao dos parmetros de estimulao s caractersticas de excitabilidade do tecido.10 Esse o papel do Eletrodiagnstico de Estmulo, teste que determina os exatos parmetros que um msculo desnervado necessita para ser estimulado num determinado momento, respeitando suas alteraes de excitabilidade. Ele compreende a construo das curvas de intensidadedurao usando-se pulsos quadrados e exponenciais alm do conhecimento dos pontos indicativos de eletrodiagnstico (reobase, cronaxia, acomodao).11 O objetivo deste estudo foi analisar o efeito da eletroestimulao transcutnea na manuteno do msculo esqueltico totalmente desnervado do rato, atravs da utilizao de um gerador universal de pulsos e parmetros de estimulao especficos adquiridos por meio da construo de uma curva intensidade-durao e de pontos indicativos de eletrodiagnstico. MAtErIAIS E MtoDoS O trabalho experimental foi desenvolvido no Laboratrio de Bioengenharia da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto e aprovado pelo Comit de tica em Experimentao Animal CETEA, da Faculdade de Medicina da USP de Ribeiro Preto. Foram utilizados 50 ratos machos adultos da linhagem Wistar, com peso corporal variando entre 250 - 300 gramas, agrupados e mantidos em gaiolas plsticas padro, em condies ambientais controladas (luminosidade: 12 horas de ciclo claro/escuro) com livre acesso gua e rao peletizada ad libitum. Tais animais foram alocados aleatoriamente em trs grupos: um grupo controle e dois grupos experimentais, grupo desnervado e grupo desnervado e estimulado. Antes do procedimento de desnervao, os animais dos grupos experimentais foram anestesiados com injeo intramuscular de Ketamina (70mg/kg de peso corporal) e Xylazina (10mg/kg de peso corporal) e submetidos ao eletrodiagnstico de estmulo inicial. Procedimento de desnervao proximal completa (Figura 1) Os animais dos grupos experimentais foram anestesiados com injeo intramuscular de Ketamina (70mg/kg de peso corporal) e Xylazina (10mg/kg de peso corporal) e posicionados em decbito ventral, com a face lateral do membro experimental devidamente tricotomizada e fixado em mesa operatria. A anti-sepsia foi realizada com soluo de alcool-iodado 20%. O nervo citico foi abordado atravs de uma inciso cutnea longitudinal retilnea, na face lateral da coxa, que se estendia da coluna vertebral at o joelho. O espao entre os msculos bceps femoral e glteo superficial foi desenvolvido por disseco romba e o nervo foi identificado desde sua emergncia da coluna at sua trifurcao no joelho. O nervo citico foi completamente seccionado proximal-

Figura 1 Procedimento cirrgico. A) posicionamento do animal; B) inciso cutnea; C) exposio do nervo citico; D) seco do nervo citico; E) nervo citico seccionado; F) nervo citico suturado em musculatura contralateral e G) sutura final.

mente a uma distncia aproximada de 01 cm de sua emergncia na coluna e seus cotos proximal e distal foram suturados (Prolene 6/0, Ethicon) em musculatura adjacente, impedindo a reinervao do msculo tibial anterior. A musculatura e a pele dos animais foram posteriormente suturadas. O msculo tibial anterior foi escolhido para ser desnervado devido fcil localizao e fcil visualizao da contrao muscular durante a avaliao e do tratamento, alm da acessibilidade para colocao do eletrodo de superfcie tambm nesses momentos do experimento. Protocolo de tratamento atravs da eletroestimulao O tratamento do msculo tibial anterior desnervado foi realizado 03 dias por semana, alternadamente, tendo um tempo indeterminado para cada sesso, dependendo da fadiga muscular (aos primeiros sinais de fadiga, a sesso era encerrada). Como sinal de fadiga foi considerado uma queda no vigor da contrao muscular. Ao incio de cada semana de tratamento, os pontos indicativos de eletrodiagnstico (reobase, cronaxia e acomodao) foram quantificados para que sempre fossem adaptados parmetros de eletroestimulao a estado de excitabilidade atual do msculo. Todo o procedimento de eletroestimulao foi realizado com um aparelho gerador universal de pulsos Nemesys 941, da Quark
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(Figura 2). Para realizao dos protocolos pr e ps-desnervao e para o tratamento do msculo tibial anterior desnervado, a colocao dos eletrodos foi padronizada: um eletrodo dispersivo (positivo) de metal com anteparo de esponja embebida em gua e preso ao dorso do animal atravs de fita adesiva e eletrodo ativo (negativo) em forma de caneta, tambm com ponta embebida em gua, com tamanho suficiente para estimular apenas a regio do ponto motor do msculo eletroestimulado. Os animais de cada grupo foram mortos por meio de deslocamento cervical aps 07, 14, 28 e 52 dias do ps-cirrgico e tiveram seus msculos tibiais anteriores experimentais retirados. Esses msculos foram pesados isoladamente em balana de preciso e suas extremidades distal e proximal foram excludas.
A

24x32 mm e, posteriormente, montadas em lminas. Os cortes foram processados para colorao de Hematoxilina-Eosina (HE) e reaes histoenzimolgicas para Adenosina Trifosfatase Miofibrilar (mATPases. E.C. 2.1.3.5.7.9.1) em valores de pH cido e bsico. Foi feita anlise qualitativa das lminas em microscpio ptico Leica DM 2500. Os aspectos gerais do tecido muscular esqueltico foram avaliados nas coloraes HE e os diferentes tipos de fibras musculares esquelticas foram determinados pela reao de mATPase. Atravs do software UTHSCSA ImageTool, a anlise morfomtrica foi realizada aps a captura das imagens a partir do microscpio ptico Leica DM 2500 pela cmera de vdeo digital Leica DFC 300FX, conectada a um microcomputador. Anlise da proporo Para o msculo tibial anterior foram utilizadas apenas as lminas pr-incubadas em pH 4.6, pois neste possvel identificar trs tipos de fibras que compe este msculo como as fibras tipo I (FT I), FT IIA, FT IIB e FT Hbridas. As mensuraes foram realizadas a partir da obteno de imagens colhidas em 3 campos aleatrios das lminas do msculo tibial anterior. Anlise da rea das fibras musculares Em cada corte histolgico foi mensurada a rea de 100 fibras musculares, escolhidas de modo aleatrio na regio central da seo histolgica. Os dados estatsticos foram devidamente tratados e analisados atravs do teste U de Mann-Whitney com 5% de significncia. rESuLtADoS

No dia da morte, o peso mdio dos animais foi de 248g em G1, 247g em GI, 307,5g em G2, 312g em GII, 402,5g em G3, 365g em GIII, 508g em G4 e 439g em GIV. Alteraes Macroscpicas Foi observado durante o perodo experimental, o comportamento de auto-mutilao dos dedos das patas traseiras que haviam sofrido desnervao. Os animais roeram dedos e patas devido ausncia da sensibilidade e do no reconhecimento daquela extremidade como parte integrante de seu prprio corpo. O mesmo no aconteceu com os animais submetidos ao tratamento com estimulao eltrica. Observamos ainda a contratura em flexo da articulao do tornozelo dos animais desnervados e no-estimulados nos grupos de 28 e 56 dias. Tal articulao estava rgida, no cedendo a manipulao. Os animais submetidos estimulao no sofreram esse tipo de comprometimento.

Figura 2 (A) equipamento de eletroestimulao, Nemesys 941, da Quark e eletrodos ativo, tipo caneta, e dispersivo, tipo esponja; (B) posicionamento do animal para avaliao eletrodiagnstica e tratamento eletroteraputico durante experimento

Estimulao Eltrica Os animais dos grupos desnervados e estimulados foram submetidos ao exame de eletrodiagnstico e, aps a determinao dos parmetros especficos para estimulao eltrica transcutnea dos msculos, foram submetidos aos respectivos tratamentos seletivos Na primeira semana aps a desnervao, todos os animais estimulados tiveram seus msculos faradizveis, ou seja, respondendo a uma corrente fardica. Aps a primeira semana, os parmetros de estimulao eltrica (T = tempo de estmulo-largura do pulso e cronaxia) foram gradativamente aumentando, evidenciando a necessidade do msculo desnervado em responder a estmulos de alta intensidade e durao. Essas alteraes mostram as mudanas na excitabilidade sofridas pelo msculo esqueltico aps sua desnervao. As freqncias de estimulao, diretamente relacionadas aos parmetros de largura e durao de pulso, tambm variaram no decorrer do experimento, inicialmente, aos 7 dias de experimento, os msculos desnervados responderam a uma freqncia de es-

Anlise histoqumica dos msculos O msculo tibial anterior foi exposto e retirado atravs de uma inciso distal no membro posterior direito, prxima a articulao do tornozelo. De cada msculo foi retirado um fragmento da poro mdia do ventre muscular. Tais fragmentos foram envoltos em talco e submetidos ao congelamento em nitrognio lquido. Aps o congelamento, os fragmentos foram estocados em um freezer a -80C at o processamento do material. De todos os msculos foram obtidos cortes transversais com espessura de 5 m atravs de Critomo Mcron HM 505 E a temperatura de -25C. Os cortes foram colocados em lamnulas de
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timulao de 50 Hz que foi gradativamente caindo e atingindo os valores mnimos de 10 Hz aos 14 dias, 3 Hz aos 28 dias e 1 Hz aos 56 dias de desnervao. Os valores de cronaxia, ao contrrio da frequncia de estimulao, aumentaram gradativamente, tendo seus valores iniciais em 0,1 ms, compatvel com valores de msculos normalmente inervados, e atingindo 5 ms ao final do experimento. O ponto-motor, regio de maior excitabilidade do msculo, encontrou-se descaracterizado nos grupos desnervados e estimulados no perodo de 7 dias e 14 dias. Nesses perodos, tais pontos encontravam-se mais distal ao ventre muscular, prximos ao tendo de insero do msculo tibial anterior. Nos grupos desnervados e estimulados no perodo de 28 dias e 56 dias houve um retorno do ponto motor regio do ventre muscular. Morfologia Os cortes transversais do msculo tibial anterior no grupo controle apresentaram fibras polidricas ou hexagonais, multinucleadas, com ncleos perifricos e achatados. A progresso da desnervao evidenciou fascculos musculares mais definidos, contornos das fibras musculares mais irregulares e com aspecto arredondado alm de ncleos arredondados e centralizados, e com alteraes discrmicas em seu interior. Tais alteraes puderam ser observadas a partir do grupo GII (14 dias apenas desnervado). Observamos ainda que os msculos desnervados e estimulados sofreram alteraes semelhantes aos apenas msculos desnervados, mas que demoraram mais tempo para se instalar. Estas foram notadas a partir do grupo G3 (28 dias desnervado e estimulado). Morfometria Nmero de fibras musculares A quantidade dos diferentes tipos de fibras musculares no msculo tibial anterior foi reduzida em todos os quatro grupos de estudo quando comparados os grupos apenas desnervados aos desnervados e estimulados. Tais modificaes podem ser observadas no grfico representada pela figura 3. Houve diferena significativa no perodo de 7 dias em FT IIB (p=0,01855) e FT hbridas (p=0,001528), no perodo de 14 dias em FT hbridas (p=0,01771), no perodo de 28 dias em FT IIA (p=0,01097) e FT hbridas (0,03808) e no perodo de 56 dias em FT IIB (p=0,001122). rea das fibras musculares As reas dos diferentes tipos de fibras sofreram modificaes diferenciadas nos perodos avaliados. Observou-se aumento da rea de FT I e FT hbridas enquanto FT IIA e FT IIB sofreram reduo nessa medi-

100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%

% tipos de fibras musculares

G1

GI

G2

GII

G3

GIII

G4

GIV

grupos experimentais I IIA IIB hbridas

Figura 3 Porcentagem dos diferentes tipos de fibra muscular (tipo I, IIA, IIB e hbridas) encontrados nos msculos tibial anterior nos diferentes grupos experimentais: C controle, G1 desnervado e estimulado 7 dias, GI desnervado 7 dias, G2 desnervado e estimulado 14 dias, GII desnervado 14 dias, G3 desnervado e estimulado 28 dias, GIII desnervado 28 dias, G4 desnervado e estimulado 56 dias, GIV desnervado 56 dias.

da. Os valores das reas de tais fibras musculares podem ser observados na Tabela 1. Houve diferena significativa nos valores das reas de FT IIB (p=0,0191) no perodo de 7 dias, de FT IIA (p=0,000001) e FT hbridas (p=0,0008) no perodo de 28 dias e de FT IIA (p=0,00001) e FT hbridas (p=0,0000001) no perodo de 56 dias. DISCuSSo Macroscopicamente, a ausncia de contratura da articulao do tornozelo nos animais cujos msculos tibiais anterior foram desnervados e estimulados exemplificou uma das aes benficas desse tratamento. A desnervao do msculo tibial anterior provocou um desequilbrio entre os msculos que envolvem a articulao do tornozelo e a manuteno dessa situao durante todo o perodo do experimento, provavelmente contribuiu para a instalao de um quadro de fibrose e encurtamento permanente da cpsula articular deixando a articulao rgida.12 A estimulao eltrica do msculo desnervado atravs de um regime de tratamento constante (trs vezes por semana) promoveu a contrao do msculo tibial anterior, mobilizando tal articulao, prevenindo a contratura. A influncia da estimulao eltrica tambm pde ser observada na ausncia de atitudes auto-mutiladoras nos animais desnervados e estimulados. A mudana da localizao do ponto motor, ponto de maior excita-

tabela 1 Valores numricos das reas (mdia e desvio-padro) dos diferentes tipos de fibras nos diferentes grupos experimentais: C controle, G1 desnervado e estimulado 7 dias, GI desnervado 7 dias, G2 desnervado e estimulado 14 dias, GII desnervado 14 dias, G3 desnervado e estimulado 28 dias, GIII desnervado 28 dias, G4 desnervado e estimulado 56 dias, GIV desnervado 56 dias. Os valores em negrito seguidos de asterisco so os com significncia estatstica (p< 0,05).
C G1 d + ee 7 dias I IIA IIB Hbridas mdia dp mdia dp mdia dp mdia dp 66,5205 28,23 71, 4178 42,9946 20,1683 30,023 7,64311 45,2475* 17,5955 44,1006 11,8472 41,97 12,2719 30,645 7,98806 42,7195* 14,6703 41,4598 15,5151 34,481 12,4606 29,4594 7,6566 31,3497 8,0781 28,4427 7,3053 GI d G2 d + ee 14 dias 31,387 13,6287 29,267 8,3142 31,9325 9,5325 28,7653 8,534 52,7924 37,1504 34,0108* 18,5174 33,5214 24,2925 25,9649* 16,9234 GII d G3 d + ee 28 dias 57,792 23,6115 24,5424* 9,8668 34,5381 17,1058 36,2871* 17,5918 66,4467 52,1862 51,4803* 24,3084 50,8485 33,7254 52,8664* 29,9089 GIII d G4 d + ee 56 dias 37,16 27,577 11,5069* 3,7089 45,7298 27,0552 10,5344* 3,3818 GIV d

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bilidade devido a maior sensibilidade acetilcolina, observada nos msculos desnervados foi compatvel com outros estudos.5,13 Um msculo esqueltico normal possui uma maior sensibilidade a acetilcolina na regio da sua placa motora que, na grande maioria das vezes esta localizada no ventre muscular. Secundria a essa regio de maior excitabilidade, uma poro prxima a regio miotendnea apresentou tambm uma maior sensibilidade a acetilcolina, consequentemente de maior excitabilidade, intermediria entre a placa motora e o restante da fibra muscular. Aps a desnervao, toda a regio da fibra muscular esqueltica torna-se sensvel a acetilcolina e consequentemente, mais excitvel, como estmulo a reinervao.5,13 A maior excitabilidade ps-desnervao na regio distal do msculo observada neste experimento durante as primeiras duas semanas confere com a segunda regio de maior excitabilidade do msculo, j que a primeira regio, a placa motora, estava descaracterizada devido desnervao. O retorno do ponto motor a regio central do ventre muscular aps esse perodo foi provavelmente devido a influncia da estimulao eltrica externa. Dessa forma, o tratamento atravs da estimulao eltrica serviu como estmulo para que as fibras musculares se adaptassem a reinervao, retomando suas caractersticas originais a espera desse acontecimento. As alteraes morfolgicas sofridas pelos msculos desnervados observadas neste estudo foram compatveis com outros achados na literatura. Guth13 caracterizou alteraes morfolgicas evidentes a partir de 14 dias de desnervao semelhantes s aqui observadas como a forma dos ncleos das fibras musculares que se tornaram mais arredondados e mais centralizados alm da presena de alterao da colorao central. Tais caractersticas foram sugestivas da proliferao nuclear, indicando assim uma adaptao do msculo desnervao.14 A principal alterao sofrida pelo msculo esqueltico desnervado foi a atrofia por desuso.15 Ela foi uma das principais justificativas para a utilizao da estimulao eltrica nesses casos, para a sua preveno.16-18 A reduo na rea das fibras musculares aps a desnervao foram observada neste estudo apenas nos grupos desnervados e foi compatvel com os achados na literatura. Vrios estudos relataram reduo significativa da rea de seco transversa das fibras musculares nas primeiras duas semanas aps a desnervao.15 Eles consideraram que ao final das trs semanas aps esse procedimento, houve uma reduo de 80% da rea das fibras musculares quando comparadas com fibras normais.19 O papel da estimulao eltrica no retardo e/ou na preveno da atrofia do msculo desnervado foi alvo de inmeras publicaes. REFERNCIAS
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No presente estudo, a freqncia da estimulao variou durante todo o perodo do experimento de acordo com a excitabilidade do msculo desnervado. Dessa forma, no houve um padro prprogramado de estimulao desses msculos. Esta estimulao eltrica mostrou-se eficiente na manuteno da rea das fibras musculares dos tipos IIB aos 7 dias de experimento. A freqncia manteve-se em 50 Hz, e nas fibras do tipo IIA aos 28 dias (f entre 50 Hz e 3 Hz) e aos 56 dias (f entre 50 Hz e 1 Hz). Alm dessas fibras de contrao rpida, caractersticas do msculo tibial anterior estudado, as fibras hbridas, que surgiram a partir da primeira semana de desnervao, tambm tiveram sua rea mantida significativamente atravs da estimulao eltrica fornecida aos 56 dias de experimento, com freqncia variando entre 50 Hz e 1 Hz. A transio dos tipos de fibra tambm pde ser observada no processo de desnervao do msculo tibial anterior e sofreu alteraes frente ao tratamento com estimulao eltrica. Os achados deste experimento esto de acordo com alguns resultados j apresentados em outros trabalhos.2,3 Os msculos desnervados e eletroestimulados, aos 7 dias, apresentaram uma manuteno do padro dos tipos de fibra correspondente ao tibial anterior com predomnio das fibras tipo IIB e aumento significativo das fibras hbridas nos msculos apenas desnervados nesse mesmo perodo. A partir desse perodo, a estimulao eltrica foi incapaz de manter o padro de tipos de fibra do msculo tibial anterior desnervado. Com 14 dias, os msculos desnervados e estimulados sofreram transio de fibras tipo IIB para fibras hbridas, que aumentaram significantemente. Aps esse perodo, nenhuma diferena significante nos msculos desnervados e estimulados foi observada. O papel da estimulao eltrica na manuteno das caractersticas do msculo desnervado restringiu-se aos perodos iniciais de estimulao. ConCLuSo A estimulao eltrica foi capaz de: 1 Manter a amplitude de movimento do tornozelo, sem sinais de auto-mutilao nos animais cujos msculos sofreram desnervao; 2 Prorrogaram as alteraes morfolgicas caractersticas da desnervao por um perodo de 28 dias; 3 Permitiu a manuteno da quantidade significante das fibras musculares do tipo IIB realizada nos primeiros 7 dias de desnervao mantendo as caractersticas de msculo de contrao rpida do tibial anterior.

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