DESNATURALIZACION DE LAS PROTEINAS 1.

La desnaturalizacin son los cambios en el ambiente que pueden alterar la conformacin nativa de una protena con la perdida concomitante de su actividad biolgica 2. La cantidad de energa necesaria para alterar tres o cuatro puentes de hidrogeno. Algunas protenas pueden desplegarse por completo 3. Las protenas se desnaturalizan por calentamiento causando el desdoblamiento y perdida de las estructuras secundarias y terciarias 4. Sucede dentro de limites estrechos de temperatura. Esto indica que se trata de un proceso cooperativo: la desestabilizacin de unas interacciones causa una perdida de la conformacin nativa 5. Las protenas presentan una temperatura caracterstica de fusin que corresponde a la temperatura en el punto medio de la transicin entre las formas nativa y desnaturalizada. Depende del pH y de la fuerza ionica de la solucin 6. Bajo condiciones fisiolgicas las protenas son estables hasta temperaturas de 50-60C 7. La desnaturalizacin de las protenas puede llevarse a cabo con 2 sustancias qumicas: agentes caotropicos (urea y sales de guanidino) y detergentes (dodecilsulfato de sodio) 8. La conformacin nativa de las protenas se estabiliza debido a puentes disulfuro. No se encuentran en las protenas intracelulares 9. Hay cuatro puentes disulfuro: - pueden unir hebras beta adyacantes -hebras beta con hlices alfa --- hebras ebta con asas -- La reduccin de los puentes de disulfuro se acompaa de la perdida del tiol reactivo 10. Christian B. Anfinsen estudiaron la ruta de la renaturalizacion de las protenas. Demostro que los puentes disulfuro correctos solo pueden formarse despus de que la protena se dobla en su conformacin nativa. 11. Cuando las protenas se doblan en el interior de una celula a veces adoptan una conformacin no nativa y forman puentes disulfuro no correctos 12. Anfinsen descubri una enzima, la isomerasa de disulfuro de protena (PDI) que cataliza la reduccin de los enlaces incorrectos. La enzima contiene dos residuos de cistena reducida colocados en el sitio activo 13. En la celula se sintetizan nuevos polipeptidos por un complejo de traduccin que incluye ribosomas, ARNm y varios factores. A medida que el polipeptido recin sintetizado emerge del ribosoma, se pliega en su forma tridimensional caracterstica 14. A medida que una protena se pliega, el primer par de interacciones inicia otras interacciones que contribuyen al alineamiento del grupo. Este proceso se llama cooperatividad de plegamiento 15. El plegado y la estabilizacin de las protenas dependen de fuerzas no covalentes como: el efecto hidrofobico, los puentes de hidrogeno, las interacciones de Van del Waals y las interacciones entre cargas

16. Las protenas son mas estables en agua cuando sus cadenas laterales hidrofobicas se agrupan en el interior de la protena y no quedan expuestas al medio acuoso en la superficie 17. Durante el plegado, la disminucin de entropa del polipeptido mas que se contrarresta por el aumento de la entropa del solvente. Cuando se liberan molculas de agua que estaban unidas a la protena. 18. Los puentes de hidrogeno contribuyen al plegamiento y la estabilizacin de la conformacin nativa de las protenas 19. Los primeros puentes de hidrogeno son los que forman las hlices, las laminas y los giros formando parte de la estructura secundaria 20. La mayor parte de los puentes de hidrogeno en las protenas es del tipo N-H-O: hidroxilo-hidroxilo; hidroxilo-carbonilo; amida-carbonili; amida-hidroxilo: amidanitrogeno de imidazol(amida?) 21. Los contactos de van der waals entre cadenas no polares contribuyen a la estabilidad de las proteinas 22. El estudio del plegamiento de protenas han conducido a dos observaciones generales acerca del doblamiento de cadenas de polipeptido para dar lugar a protenas con actividad biolgica 23. La primera consiste en que el doblamiento de protenas no implica una bsqueda aleatoria en el espacio tridimensional para llegar a la conformacin nativa 24. La segunda es que la pauta de doblado y la conformacin final de una protena dependen de su estructura primaria 25. La tasa de doblamiento correcto de una protena aumenta debido a un grupo de protenas especiales llamadas chaperones moleculares 26. Aumentan la velocidad de plegamiento correcto al unir polipeptidos recin sintetizados antes de que se doblen por completo 27. Hay chaperones diferentes, en su mayora son protenas de choque por calor, protenas que se sintetizan como respuesta a aumentos de temperatura 28. La principal protena de choque por calor es la HSP70. Otra asociada accesoria HSP70/DanK. Otra chaperona importante y ubiqua se llama chaperonina 29.