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Clula Estructura y Funciones

Constitucin de la clula
1 Comparacin entre los procariotas y los eucariotas: los organismos vivos actuales se pueden clasificar en dos grandes grupos: los procariotas y los eucariotas. Los representantes de los procariotas son las bacterias (eubacterias y arqueobacterias), que casi en su totalidad son organismos unicelulares con un tamao de pocos m. Entre los eucariotas figuran los hongos, las plantas y los animales; y entre ellos se encuentran tanto organismos unicelulares como pluricelulares. Los eucariotas pluricelulares estn constituidos por diferentes tipos de clulas con funciones especializadas tambin diferentes. Las clulas eucariticas son mucho ms grandes que las procariticas (relacin 2000:1). La caracterstica diferencial ms importante con respecto a las clulas procariticas consiste en que poseen un ncleo celular. Los eucariotas son ms especializados y complejos que los procariotas en sus estructuras y funciones. Las clulas eucariticas estn estructuradas en compartimientos. El metabolismo y la sntesis de macromolculas se distribuyen en estos espacios de reaccin y estn regulados en forma independiente. En los procariotas, estos procesos estn organizados de manera ms simple y se acoplan en espacios ms estrechos. Aunque el almacenamiento y la posterior transmisin de la informacin gentica se desarrollan segn los mismos principios en los procariotas y los eucariotas, hay diferencias importantes respecto de este tema. El DNA de los eucariotas est constituido por molculas lineales muy largas, con una totalidad de 107 o hasta ms de 1010 pares de bases (pb), de los cuales solo una pequea parte se utiliza para informaciones genticas. En los eucariotas, los genes (20.000 50.000 por genoma) estn interrumpidos por regiones no codificantes (intrones). El DNA de los eucariotas se localiza en el ncleo, sitio en el que junto con las histonas y otras protenas forma la cromatina. El DNA de los procariotas tiene forma anular, es mucho ms corto, y se localiza en el citoplasma. Se lo utiliza totalmente para el almacenamiento de informacin gentica y no contiene intrones.

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Criterio Organismos Forma de organizacin Organelos, citoesqueleto, aparato divisor DNA Procariota Eubacterias y Arqueobacterias Unicelular Ausentes Eucariota Animales, Plantas, Hongos Unicelular o pluricelular Presentes, complejos y especializados Grande, localizado en el ncleo, y con muchos intrones Sntesis complicada que tiene lugar en el citoplasma y en el RER Predominantemente aerobio, compartimentado Hay diferentes formas 10-100 m Tienen esterol Mitosis y citocinesis Mitocondrias (todas) Cloroplastos (vegetales) 80 S S (histonas y otras protenas)

Pequeo, circular, carece de intrones, plsmidos Proceso sencillo, que tiene lugar en el citoplasma

RNA: sntesis y maduracin

Metabolismo

Anaerobio o aerobio, muy adaptable No hay 1-10 m Sin esteroles Fisin binaria Mesosomas Lamelas 70 S No

Endocitosis y exocitosis Tamao Membranas Divisin celular Sistema respiratorio Aparato fotosinttico Ribosomas Asociacin con protenas de compresin Carioteca

No (se concentra en una regin denominada nucleoide) Composicin qumica compleja (peptidoglucanos)

S (envoltura nuclear)

Pared celular

Cuando hay, compuesta de materiales simples (celulosa, quitina) Evolucionaron a partir de las procariotas

Aparicin histrica

Surgieron primero

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2 Estructura y composicin de una clula animal: en el hombre existen por lo menos 200 especies celulares diferentes. La clula eucaritica dispone de un sistema de membranas. Hacia el exterior est delimitada por la membrana plasmtica y en su interior hay un espacio muy amplio con numerosas sustancias disueltas, o sea el citoplasma. Otras membranas separan este espacio interior en compartimientos (espacios reaccionales cerrados). Los compartimientos de este tipo bien definidos se conocen como organelos clula

Ncleo Celular
Es el organelo ms grande (visible al microscopio ptico). Contiene el material hereditario.

Retculo endoplasmtico (RE)

Sistema membranoso cerrado. Formado por cavidades y tubos aplanados (est unido a la membrana externa del ncleo)

Aparato de Golgi
Sistema membranoso que se ve como un paquete de capas apiladas. Se encarga de la formacin de vesculas (...)

Endosomas y Exosomas
Compartimientos saculares (formados por vesculas). Participan en el intercambio de compuestos de la clula con el exterior.

Mitocondria
Tiene el tamao aproximado de una bacteria. Son especialmente importantes para el metabolismo celular.

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Lisosomas y peroxisomas
Organelos pequeos con forma de esfera. Poseen funciones especiales y especficas

Todo el interior de la clula est atravesado por un armazn o sistema esqueltico de protenas que se llama citoesqueleto. Las clulas vegetales tambin poseen plstidos, por ejemplo los cloroplastos, en los que tiene lugar la fotosntesis. En su interior se encuentra una gran vacuola llena de lquido. Como las bacterias y los hongos, las clulas vegetales poseen una pared celular rgida de polisacridos y protenas.

Ncleo Celular
1 Ncleo celular propiamente dicho: el ncleo, el organelo celular ms grande de las eucariotas, tiene un dimetro aproximado de 10 m y puede reconocerse bien con el microscopio ptico. El ncleo de la clula es el sitio de almacenamiento, replicacin y expresin de la informacin gentica. A diferencia del citoplasma, el ncleo celular est delimitado por la envoltura nuclear (carioteca), formada por una membrana nuclear externa y otra interna. Las dos membranas nucleares tienen una doble capa y estn separadas entre s por la hendidura perinuclear. La membrana nuclear externa se contina con el retculo endoplasmtico rugoso y est ocupado por ribosomas. La membrana interna est cubierta en su cara interior por una capa de protenas (lmina nuclear) en la que se fijan las estructuras nucleares. El ncleo contiene casi todo el DNA de la clula (alrededor del 1% es DNA mitocondrial). Junto con las histonas y las protenas del citoesqueleto el DNA nuclear forma la cromatina, que solo durante la divisin celular se condensa en cromosomas que tambin son visibles con el microscopio ptico. En esta fase la envoltura nuclear desaparece en forma transitoria. En la fase que tiene lugar entre las divisiones celulares (interfase), el microscopio electrnico permite diferenciar la heterocromatina, compactada densamente, de la eucromatina, empacada en forma mucho ms laxa. En las regiones de eucromatina tiene lugar la transcripcin activa del DNA en el RNA mensajero (RNAm). En muchos ncleos llama la atencin una zona de particular densidad electrnica, el nuclolo (a veces tambin existen varios nuclolos). El DNA del nuclolo contiene los genes para los RNA ribosmicos (RNAr) en numerosas copias. Su transcripcin es permanente y por esa razn llevan a una alta concentracin local de RNA.

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2 Poros nucleares: el intercambio de materiales entre el ncleo y el citoplasma tiene lugar a travs de complejos de poros nucleares, estructuras complicadas que tensan la envoltura nuclear. Los poros nucleares estn compuestos por numerosas protenas, que forman muchos anillos de diferente dimetro unidos entre s. Las sustancias de pocas molculas y protenas pequeas alcanzan el ncleo sin dificultad. Por el contrario, las protenas grandes (PM > 40 kDa) solo atraviesan los poros nucleares cuando su cadena polipeptdica posee una secuencia de localizacin nuclear caracterstica que consiste en cuatro residuos de aminocidos consecutivos. Los RNAr y los RNAm formados en el ncleo celular llegan al citoplasma a travs de los poros como complejos de protenas.

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3 Relaciones entre el ncleo celular y el citoplasma: casi todo el RNA de la clula se sintetiza en el ncleo. Para este proceso (llamado transcripcin) se utiliza la informacin del DNA. El RNAr se sintetiza predominantemente en el nuclolo mientras que el RNAm y el RNA de transferencia (RNAt) se sintetizan en la regin de la eucromatina. La duplicacin enzimtica del DNA (replicacin) tambin tiene lugar en el ncleo de la clula. Los nucletidos necesarios para la transcripcin y la replicacin deben ser importados del citoplasma al ncleo. Su incorporacin al RNAm da lugar a diversos productos primarios que pueden ser modificados por la hidrlisis o por el corte de ciertos segmentos de la molcula as como por la adicin de algunos otros nucletidos (maduracin del RNA). Recin despus de la terminacin de estos procesos las molculas de RNA sintetizadas en el ncleo pueden ser exportadas al citoplasma para la sntesis de las protenas (traduccin). En el ncleo no pueden sintetizarse protenas pequeas, de modo que todas las protenas nucleares deben ser importadas, entre ellas, las histonas, con las que est asociado el DNA en la cromatina, y las protenas no histnicas (DNA-polimerasas y RNA-polimerasas, protenas auxiliares y de sostn, factores de transcripcin y protenas ribosmicas). En el nuclolo el RNAr se combina con protenas para formar las subunidades precursoras de los ribosomas. Una propiedad metablica especialmente importante del ncleo es la biosntesis de NAD+. El precursor inmediato de esta coenzima, el nicotinato mononucletido (NMN+), se origina en el citoplasma, pero es transportado al nuclolo, donde es convertido por enzimas en el dinucletido NAD+, el que finalmente regresa al citoplasma. Ncleo Celular Citoplasma

Replicacin DNA DNA Transcripcin

DNA

Maduracin del RNA Pre-RNAt Traduccin

45 S - RNA

RNAhn

RNAr

RNAm

RNAt Subunidades ribosmicas

Nuclolo Protenas (Ribosomales, histonas, etc.) H.A.F.W. & P.L.M.B. Pgina 6

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Mitocondria
Las mitocondrias son organelos del tamao de las bacterias que existen en gran cantidad en casi todas las clulas eucariticas. Tpicamente hay unas 2.000 mitocondrias por clula y juntas ocupan hasta el 25% del volumen celular. Las mitocondrias estn rodeadas por dos membranas, una externa lisa y una interna fuertemente plegada, invaginada o tubular que tiene una gran superficie y encierra la matriz mitocondrial. Las invaginaciones de la membrana interna se llaman crestas y las evaginaciones tubulares son los tbulos. El espacio que queda entre la membrana externa y la membrana interna se conoce como espacio intermembranal. El nmero y la forma de las mitocondrias as como el nmero de sus crestas varan mucho de un tipo celular a otro. Los tejidos con un metabolismo oxidativo muy intenso, como por ejemplo el msculo cardiaco, tienen mitocondrias con muchas crestas. La forma de las mitocondrias dentro de un tejido vara de acuerdo con su estado funcional, es decir, que son organelos plsticos y mviles. Las dos membranas mitocondriales son muy ricas en protenas. Las porinas presentes en la membrana externa posibilitan el intercambio de pequeas molculas (< 10 kDa) entre el citoplasma y el espacio intermembranal. Por el contrario, la membrana mitocondrial interna es impermeable a todas las molculas con excepcin del O2, el CO2 y el H2O. En la membrana interna numerosos transportadores son responsables de la importacin y la exportacin de importantes metabolitos. La membrana mitocondrial interna tambin posee los complejos de la cadena respiratoria, la ATP-sintasa y otras enzimas. Tambin la matriz es rica en enzimas.

1 - Productividad del metabolismo mitocondrial: las mitocondrias se consideran las fbricas de la clula, porque por medio de la fosforilacin oxidativa producen la mayor parte del ATP que sta requiere. En la matriz mitocondrial se localizan el piruvato deshidrogenasa (PDH), el ciclo del cido ctrico, la -oxidacin de los cidos grasos y una parte del ciclo de la urea. Con la membrana interna se asocian la cadena respiratoria, la ATP-sintasa y tambin enzimas de la biosntesis del hemo. H.A.F.W. & P.L.M.B. Pgina 7

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La membrana interna propiamente dicha desempea un importante papel en la fosforilacin oxidativa: como es impermeable a los protones, la cadena respiratoria, a travs de los complejos I, III y IV que bombean protones desde la matriz hacia el espacio intermembranal, forma un gradiente protnico que la atraviesa y por el que puede conservarse la energa qumica liberada por la oxidacin del NADH. Luego la ATP-sintasa utiliza la energa almacenada en ese gradiente para formar ATP a partir de ADP y fosfato inorgnico. Adems, algunos de los sistemas de transporte tambin dependen de este gradiente de protones. Las mitocondrias cumplen la funcin adicional de almacenar calcio intracelular junto con el retculo endoplasmtico y tambin desempean un papel importante en la muerte celular programada o apoptosis. Piruvato
Membrana Externa Espacio intermembranas

Acil-CoA

Lanzadera de la carnitina

Urea

Membrana Interna

NH3 Piruvato -oxidacin HCO3-

Ca2+ Ca
2+

Ciclo de la Urea

Acetil-CoA CO2 CO2 Ciclo del cido ctrico NADH + H+ ETF H2O ADP H+ ATP

Cadena respiratoria

H+ H+ H+ H+ ATP O2 ADP

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2 Sistema de transporte mitocondrial: las mitocondrias estn rodeadas por una membrana interna y otra externa. La membrana externa contiene porinas que permiten el paso de molculas pequeas (De hasta 10 kDa). Por el contrario, la membrana interna es impermeable hasta para las molculas pequeas (las excepciones son el agua y los gases O2, CO2 y NH3). Por esa razn, todos los sustratos restantes del metabolismo mitocondrial, as como sus productos, deben atravesar la membrana mitocondrial interna con la ayuda de transportadores especficos. Los sistemas de transporte de la membrana mitocondrial interna se basan en diferentes mecanismos. Los metabolitos y los iones pueden ser transportados aisladamente (uniporte), junto con una segunda sustancia (simporte) o mediante el intercambio por otra molcula (antiporte). El transporte activo, es decir, el transporte de sustancias acoplado con la hidrlisis del ATP, no desempea un papel esencial en las mitocondrias. La fuerza motriz a travs de la membrana interna generalmente es el gradiente de protones o el potencial de membrana. Piruvato: El piruvato formado en el citoplasma durante la gluclisis es importado a la matriz por antiporte con OH-. Los iones OH- reaccionan en el espacio intermembranas con los iones H+, que all estn presentes en abundancia, para formar H2O. De este modo se mantiene un gradiente de concentracin para el OH-. Fosfato: La importacin de fosfato (H2PO4-) tiene lugar de manera parecida al piruvato; a travs del antiporte con OH- y la posterior formacin de H2O. ATP y ADP: El intercambio del ATP formado en la mitocondria por ADP con ayuda de la enzima adeninanucletido-translocasa depende del gradiente protnico. Como el ATP, que tiene 4 cargas negativas, se intercambia por ADP, cuyas cargas negativas son 3, en el balance tambin hay transporte de una carga negativa hacia el espacio intermembranas rico en protones. Malato: La importacin de malato, fundamental para la lanzadera de malato, por medio del transportador de tricarboxilato, se acopla con la exportacin de citrato, de modo que se vuelve a producir el desplazamiento de una carga negativa neta hacia fuera. En direccin inversa el malato puede abandonar la matriz por antiporte con el fosfato. Calcio: En la importacin de Ca2+ el catin metlico sigue el potencial de membrana. En cambio, la exportacin tiene lugar por un antiporte electroneutro o con dos H+ o dos Na+.

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Antiporte M.M.E MalatoH2O Espacio intermembranas Piruvato 2-oxoglutarato/citrato H+ OHH2PO4ATP4ADP3HPO42H+ Ca2+ Simporte

M.M.I

Piruvato

OH-

H2PO4-

ATP4-

ADP3Ca2+

2-oxoglutarato/citrato MalatoHPO42-

3 Lanzadera del malato y del glicerofosfato: para la incorporacin de equivalentes reductores, que se obtienen en el citoplasma como NADH + H+ a travs de la gluclisis, existen dos sistemas de los denominados lanzaderas. Para el NADH + H+ propiamente dicho no existe ningn transportador en la membrana interna. Lanzadera del malato: En el sistema conocido como lanzadera del malato, que es activo por ejemplo en el corazn, el hgado y los riones, el oxalacetato es reducido a malato en el citoplasma por la enzima malato deshidrogenasa (MDH) con ayuda del NADH + H+. Esto sucede por antiporte con el 2-oxoglutarato en la matriz, en donde la isoenzima mitocondrial de la MDH regenera oxalacetato y NADH + H+. Este ltimo es reoxidado por el complejo I de la cadena respiratoria mientras que el oxalacetato, para el que no hay ningn transportador disponible en la membrana interna, es transaminado en primer lugar hasta aspartato por la enzima aspartato-transaminasa (GOT). El aspartato abandona otra vez la matriz y libera nuevamente en el citoplasma oxalacetato para la formacin de malato y glutamato para el transporte de regreso a la matriz. En el balance NADH + H+ ha sido desplazado desde el citoplasma hacia la matriz mitocondrial sin necesidad de utilizar ATP.

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Lanzadera del glicerofosfato: Se encuentra activa en la musculatura esqueltica y en el cerebro de los animales superiores. En este sistema se utiliza el NADH + H+ formado en el citoplasma para reducir la glicerona-3-fosfato, un producto intermedio de la gluclisis, a glicerol-3-fosfato. ste llega a travs de las porinas al espacio intermembranas y all en la cara exterior de la membrana interna, vuelve a ser oxidada a glicerona-3-fosfato por la flavn-enzima glicerol-3-fosfato deshidrogenasa. Los equivalentes reductores son transferidos posteriormente a la cadena respiratoria por medio de la ubiquinona (coenzima Q). Gliceraldehdo-3-fosfato deshidrogenasa Lanzadera de la carnitina: Se utiliza para el transporte de restos de acilo hacia la matriz mitocondrial. Aspartato transaminasa Glu Oxalacetato Malato deshidrogenasa NADH + H+ 1-3-bifosfoglicerato Glucosa-6fosfato Fructosa-1,6bifosfato Gliceraldehdo-3fosfato Glicerona-3fosfato

Asp

2-oxoglutarato

Malato

NAD

Glicerol-3-fosfato deshidrogenasa

Glicerol-3fosfato

Glicerol-3-fosfato-DH (FAD) Complejo I

Coenzima Q (Ubiquinona) Asp 2-oxoglutarato Malato NAD Complejo III Glu NADH + H+ Malato deshidrogenasa 2 H+; O Pgina 11 Complejo IV H2O

Oxalacetato

Aspartato transaminasa H.A.F.W. & P.L.M.B.

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4 Ciclo del cido ctrico: el ciclo del cido ctrico es una va metablica cclica que tiene lugar en la matriz mitocondrial. En ocho pasos se oxidan los residuos acetilo (CH3-CO-) hasta dixido de carbono (CO2). Los equivalentes reductores que se obtienen durante el ciclo son transferidos al NAD+ o a la ubiquinona y de stos a la cadena respiratoria. La acetil-CoA, que el ciclo almacena junto con residuos de acetilo, procede principalmente de la oxidacin de los cidos grasos y de la reaccin catalizada por la piruvato deshidrogenasa. Ambos procesos tienen lugar en la matriz mitocondrial. I En el primer paso del ciclo la citrato sintasa cataliza la transferencia de un resto de acetilo de la acetil-CoA a la molcula portadora de oxalacetato. El producto de esta reaccin exergnica es el cido tricarboxlico citrato, que da su nombre a este ciclo. Citrato-sintasa Oxalacetato H2O Acetil-CoA II En el siguiente paso, el citrato es isomerizado en isocitrato, para lo cual se produce el simple desplazamiento del grupo hidroxilo al interior de la molcula. La enzima correspondiente se llama aconitato-hidratasa (aconitasa) porque durante la reaccin se forma como producto intermedio unido a la el aconitato insaturado. Por sus propiedades, la aconitasa cataliza una isomerizacin absolutamente estereoespecfica: mientras que el citrato no es un compuesto quirlico, el isocitrato tiene dos centros quirales, de modo que podran formarse cuatro ismeros. Sin embargo, en el ciclo del cido ctrico solo se presenta uno de estos estereoismeros, el isocitrato (2R-3S). Aconitato-hidratasa [Fe4S4] Citrato

Coenzima A

Citrato

(2R-3S)-isocitrato

III Despus se produce el primer paso de la oxidacin: la enzima isocitrato deshidrogenasa oxida el grupo hidroxilo del isocitrato hasta la forma oxo (ceto). Simultneamente uno de los grupos carboxilo es liberado como CO2, con lo que se obtienen 2-oxoglutarato (-cetoglutarato) y NADH + H+. Isocitrato-DH (2R-3S)-isocitrato NAD H.A.F.W. & P.L.M.B. NADH + H+ 2-oxoglutarato CO2 Pgina 12

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IV El paso siguiente, en el que se obtiene succinil-CoA, comprende tambin una oxidacin y una descarboxilacin que son llevadas a cabo por un complejo multienzimtico, el de la 2oxoglutarato-deshidrogenasa, que es muy similar al complejo PDH (piruvato deshidrogenasa). En esta reaccin se vuelve a formar NADH + H+. Complejo 2-oxoglutarato-DH

2-oxoglutarato Coenzima A NAD CO2 NADH + H+

Succinil-CoA

V A continuacin se produce la hidrlisis del tioster succinil-CoA hasta succinato y CoA por medio de la succinato-CoA ligasa (una tiocinasa), una reaccin fuertemente exergnica que se utiliza para la sntesis de un enlace anhdrido del cido fosfrico (fosforilacin a nivel de sustrato). Sin embargo, en este caso no se obtiene ATP como en la mayor parte de las reacciones de este tipo sino guanosintrifosfato (GTP), el que puede ser convertido en ATP por una nuclesidodifosfato-cinasa. Succinato-CoA-ligasa

Succinil-CoA GDP GTP

Succinato

Coenzima A

VI A travs de las reacciones descritas el residuo de acetilo es oxidado totalmente hasta CO2, pero al mismo tiempo la molcula portadora oxalacetato es reducida hasta succinato. En tres reacciones adicionales del ciclo se regenera el oxalacetato a partir del succinato: en primer lugar la succinato deshidrogenasa oxida el succinato hasta fumarato. A diferencia de las otras enzimas del ciclo, la succinato-deshidrogenasa es una protena integral de la membrana mitocondrial interna, por lo que se considera que forma parte de la cadena respiratoria como complejo II. La succinato deshidrogenasa contiene FAD como grupo prosttico, pero el verdadero aceptor de electrones en la reaccin es la ubiquinona. Succinato deshidrogenasa Succinato Ubiquinona H.A.F.W. & P.L.M.B. Ubiquinol (QH2) Pgina 13 Fumarato

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VII La fumarato-hidratasa (fumarasa) adiciona una molcula de agua al enlace doble del fumarato y se obtiene el (2S)-malato, un compuesto quiral. Fumarato-hidratasa GOI kJ/mol

Fumarato

(2S)-malato

H2O VIII En el ltimo paso del ciclo, el malato es oxidado nuevamente hasta oxalacetato por la enzima malato deshidrogenasa de modo que en este paso se obtiene una vez ms NADH + H+. Con esto se cierra el ciclo, que luego puede reiniciarse. Como el equilibrio de la reaccin est situado del lado del malato, la formacin de oxalacetato depende de la fuertemente exergnica reaccin, que en seguida vuelve a alejar a la reaccin del equilibrio. Malato-DH

(2S)-malato NAD NADH + H+

Oxalacetato

En el balance del ciclo del cido ctrico se obtienen 2 molculas de CO2 y 2 molculas de H2O por cada resto de acetilo. Al mismo tiempo se forman 1 molcula de GTP, 3 de NADH + H+ y una ubiquinona reducida (QH2). Por la fosforilacin oxidativa la clula gana, a partir de estas coenzimas reducidas, 9 molculas de ATP, que junto con el GTP obtenido directamente dan en total 10 ATP por cada grupo acetilo.

Balance neto del ciclo del cido ctrico:

Acetil-CoA 3 NAD+ Ubiquinona (Q) GDP Pi 2 H2O

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CoA-SH 3 (NADH + H+) Ubiquinol (QH2) GTP 2 CO2

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Molcula Citrato Cis-aconitato Isocitrato Oxalosuccinato -cetoglutarato Succinil-CoA Succinato Fumarato L-malato (2S-malato) Oxalacetato H.A.F.W. & P.L.M.B.

Enzima Aconitato hidratasa Aconitato hidratasa Isocitrato deshidrogenasa Isocitrato deshidrogenasa -cetoglutarato deshidrogenasa Tiocinasa (succinato-CoA ligasa) Succinato deshidrogenasa Fumarato hidratasa Malato deshidrogenasa Citrato sintasa

Tipo de reaccin Deshidratacin Hidratacin Oxidacin Descarboxilacin Descarboxilacin oxidativa Hidrlisis Oxidacin Adicin de agua Oxidacin Condensacin Pgina 15

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5 Funciones del ciclo del cido ctrico: el ciclo del cido ctrico suele describirse como la plataforma giratoria del metabolismo intermediario. En realidad, este ciclo tiene tantas funciones catablicas como anablicas de modo que se le considera anfiblico. Como va catablica introduce la endoxidacin de los sustratos energticos. Muchas vas catablicas del metabolismo producen compuestos intermedios del ciclo del cido ctrico o metabolitos, como el piruvato o la acetil-CoA, que pueden ser canalizados al ciclo. En ste, sus tomos de carbono son oxidados hasta CO2. Los equivalentes reductores obtenidos sirven luego para la fosforilacin oxidativa, es decir, para la formacin aerbica de ATP. El ciclo del cido ctrico tambin produce precursores de rutas anablicas. Los productos intermedios del ciclo son transformados en: Glucosa (gluconeognesis, precursores: oxalacetato y malato). Porfirinas (precursor: succinil-CoA). Aminocidos (precursores: 2-oxoglutarato, oxalacetato). cidos grasos e isoprenoides (precursor: citrato).

Los productos intermedios del ciclo del cido ctrico solo se encuentran en muy pequeas cantidades en las mitocondrias. Durante la oxidacin de la acetil-CoA a CO2, estos productos se regeneran continuamente de modo que en promedio sus concentraciones permanecen constantes en el tiempo. Las vas anablicas que utilizan productos intermedios del ciclo (por ejemplo: gluconeognesis) consumiran en muy poco tiempo la pequea cantidad presente en las mitocondrias si no se introdujeran nuevamente en el ciclo metabolitos producidos en otros sitios, o reemplazaran a los compuestos ya consumidos. Las transformaciones que abastecen al ciclo de esta manera se denominan reacciones anaplerticas (de relleno). La degradacin de la mayor parte de los aminocidos tiene carcter anaplertico porque se producen compuestos intermedios del ciclo del cido ctrico o piruvato (aminocidos glucognicos). En realidad, la gluconeognesis se mantiene predominantemente a partir de la degradacin de los aminocidos. Un paso anaplertico de importancia especial en los animales es el que conduce el piruvato a oxalacetato. Esta reaccin, catalizada por la piruvato carboxilasa, depende del ATP. Adems, por esta va los aminocidos que producen piruvato y el lactato son canalizados a la gluconeognesis. Por el contrario, en el metabolismo animal la acetil-CoA no tiene una accin anaplertica. La totalidad de su esqueleto carbonado es oxidado durante el ciclo a CO2 y por esa razn deja de estar disponible para la biosntesis. Como la degradacin de los cidos grasos finalmente libera acetil-CoA, los animales no estn en condiciones de transformar cidos grasos en glucosa. En consecuencia, en situaciones de hambre o carencia no se utilizan primero las reservas de grasa sino las de protenas. Los aminocidos liberados, a diferencia de los cidos grasos, pueden mantener en valores adecuados el nivel de glucosa sangunea. El ciclo del cido ctrico no solo incorpora la acetil-CoA de la degradacin de los cidos grasos sino que tambin libera el material necesario para la biosntesis de cidos grasos e isoprenoides. La acetil-CoA, que se obtiene en la matriz mitocondrial por la accin de la piruvato deshidrogenasa, no puede atravesar la membrana interna de las mitocondrias por lo que el residuo de acetilo se condensa con el oxalacetato y forma citrato por medio de la citratosintasa. El citrato sale de la H.A.F.W. & P.L.M.B. Pgina 16

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mitocondria en antiporte con el malato. En el citoplasma, por medio de una citrato liasa dependiente del ATP, se transforma nuevamente en acetil-CoA, lo que determina la liberacin del oxalacetato. ste, a su vez, es reducido por una malato deshidrogenasa citoplasmtica hasta malato, el que, por el mecanismo de antiporte regresa a la mitocondria. Una alternativa para el malato es que la enzima mlica lo oxide por descarboxilacin hasta piruvato. Como resultado de esta reaccin se forma NADPH + H+, que tambin puede servir para la biosntesis de los cidos grasos. PEP carboxicinasa Glucosa Malato deshidrogenasa GTP Grasa Oxalacetato PEP Fe, Tir, Trp

Acil-CoA

Malato

Ala, Leu, Val

Piruvato

Ala, Ser, Tr, Cis, Gli

Hidratos de carbono

Enzima mlica CO2 CO2 Lanzadera de carnitina Acil-CoA -oxidacin Malato Fumarato Asp Fe Tir Ile Val Met Trp His Pro Arg Gln Glu Oxalacetato Asp Asn Citrato ADP + Pi ATP Piruvato CO2 Malato Acetil-CoA Malato deshidrogenasa NADPH + H+ NADP Oxalacetato

ATP Citrato CoA

Succinato GTP

Isocitrato

CO2 2-oxoglutarato

Porfirina

Succinil-CoA O2 CO2

Citrato liasa Ruta catablica

NADH + H+ ADP + Pi

2 [H] Fosforilacin oxidativa

2 [H]

QH2 ATP H2O

Glu Gln Pro Arg

Acetil-CoA

Ruta anablica cidos grasos Ruta anaplertica Pgina 17

Grasa H.A.F.W. & P.L.M.B.

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Membranas biolgicas
1 Estructura de una membrana plasmtica: las membranas biolgicas, cuya estructura es uniforme en todos los casos, constan de una doble capa de lpidos anfipticos de naturaleza continua y alrededor de 6 nm de espesor en la que estn incorporadas las protenas. Algunas membranas contienen adems en la cara externa hidratos de carbono (monosacridos y Oligosacridos) unidos a los lpidos y a las protenas. La proporcin de lpidos, hidratos de carbono y protenas difiere mucho segn el tipo de clula y de membrana de que se trate. Los lpidos de la membrana con molculas fuertemente anfipticas con un grupo polar hidrfilo en su cabeza y una cola apolar hidrfoba. Los componentes de las membranas se mantienen unidos y pueden desplazarse de un lado a otro de su superficie en primer lugar por el efecto hidrfobo y fuerzas dbiles de van der Waals. Esto confiere a la membrana un carcter ms o menos lquido (fluido).

La fluidez de las membranas depende en primer trmino de la composicin de los lpidos y de la temperatura circundante. A una temperatura de transicin determinada las membranas pasan de una estructura semicristalina a un estado lquido. Los dobles enlaces de residuos de acilo insaturados en las cadenas alquilo causan una alteracin del estado semicristalino de la membrana. Por ende, la temperatura de transicin ser ms baja cuanto mayor sea la proporcin de lpidos insaturados. El contenido de colesterol tambin incide en la fluidez de la membrana. Mientras que el colesterol aumenta la fluidez de las membranas semicristalinas (estrechamente empaquetadas), las membranas fluidas se solidifican con un alto contenido de lpidos no saturados.

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Estructura de la membrana plasmtica

Como los lpidos, las protenas tambin se desplazan en la membrana. Si no estn fijas por mecanismos especficos, nadan en la capa lipdica como en una solucin bidimensional y por eso las membranas biolgicas se conocen tambin como mosaico fluido. Los lpidos y las protenas pueden desplazarse con facilidad en el interior de una hoja de la membrana, a lo largo de la superficie. Por el contrario, el intercambio entre las dos capas (flipflop) es imposible para las protenas y sumamente difcil para los lpidos (con excepcin del colesterol, que puede ser intercambiado fcilmente). Para pasar de un lado al otro los fosfolpidos requieren la ayuda de protenas especiales (traslocadoras, flipasas).

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2 Lpidos de la membrana: Fosfolpidos: son los principales componentes lipdicos de la membrana: o Fosfatidil colina (lecitina). o Fosfatidil-etanolamina. o Fosfatidil serina. o Fosfatidil inositol. o Esfingomielina. Colesterol (excepto membrana mitocondrial interna). Glucolpidos: se hallan presentes sobre todo en la cara externa de la membrana plasmtica y junto con las glucoprotenas forman la cubierta exterior de las clulas (glucocliz). 3 Protenas de la membrana: las protenas pueden unirse a las membranas de formas muy diversas. Por ejemplo, las que integran las membranas se extienden a travs de la totalidad de la doble capa lipdica (protenas integrales). Las regiones de las cadenas polipeptdicas, que se encuentran en el interior de la doble capa de lpidos, generalmente estn formados por 20 a 25 residuos de aminocidos predominantemente hidrfobos que forman una hlice que se dirige hacia la derecha. Hlice o Tipo I y II: contienen solo una de esas hlices transmembrana. o Tipo III: contienen varias hlices. o Tipo IV: protena de membrana ms polipptidos de tipo I y II. o Tipo V y VI: protenas que presentan ancladores lipdicos (cidos grasos, como el cido palmtico o el cido mirstico, isoprenoides, como el farnesol, o glucolpidos, como el glucosilo-fosfatidil-inositol (GPI), que estn unidos en forma covalente con la cadena polipeptdica). Barril : grupo de protenas integrantes de la membrana (como las porinas) que invaden la membrana con estructuras de plegado antiparalelas. Por su aspecto estas estructuras terciarias se han denominado barril (-barrel). Las protenas perifricas de la membrana se asocian con el grupo de la cabeza de los fosfolpidos o con otra protena integrante de la membrana.

Tipo IV

Tipo III

Barril Pgina 20

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4 Funciones de la membrana: las membranas y sus componentes tienen las siguientes funciones: I) Delimitacin y aislamiento: La delimitacin por medio de la membrana citoplasmtica permite que la clula disponga de proteccin mecnica y qumica contra el ambiente. La membrana plasmtica es un requisito para la diferencia de concentracin de muchos compuestos entre los compartimientos intracelulares y extracelulares. II) Transporte controlado de sustancias: Es indispensable para determinar el medio interno y la homeostasis, es decir, para mantener constantes la concentracin de compuestos y los parmetros fisiolgicos. Este transporte controlado y selectivo de compuestos a travs de poros, canales y transportadores es necesario para delimitar las clulas y los organelos por medio de sistemas de membrana. III) Captacin de seales extracelulares: Capa las seales extracelulares y se encarga de su posterior conduccin al interior de la clula, as como la liberacin de seales. IV) Catlisis enzimtica: En las membranas, en las regiones limitantes entre los lpidos y la fase acuosa, se localizan enzimas importantes. Ah tienen lugar las reacciones con sustratos no polares, como por ejemplo la biosntesis de lpidos, y el metabolismo de los xenobiticos no polares. Las reacciones ms importantes para la obtencin de energa, la fosforilacin oxidativa y la fotosntesis tambin tienen lugar en las membranas. V) Interaccin con otras clulas: Para la fusin y la formacin de tejidos, as como para la unin con la matriz extracelular. VI) Anclaje del citoesqueleto: Para mantener la forma de las clulas y de los organelos, y para posibilitar los procesos de movimiento. 5 Composicin de las membranas: las membranas biolgicas estn compuestas por lpidos, protenas e hidratos de carbono, que se encuentran presentes en proporciones muy distintas. En general, los componentes ms abundantes son las protenas, cuya proporcin se aproxima al 50%. En cambio, los hidratos de carbono, que se localizan casi exclusivamente en la parte externa de la membrana, representan solo un pequeo porcentaje. La mielina, que es el material aislante de las clulas nerviosas, presenta una composicin especial dado que las tres cuartas partes de ella estn compuestas por lpidos. Por otro lado, la membrana mitocondrial interna se caracteriza por contener una pequea proporcin de lpidos y un porcentaje especialmente elevado de protenas. Membranas Vaina de mielina Membrana de eritrocito Membrana de hepatocito Membrana mitocondrial H.A.F.W. & P.L.M.B. Composicin Lpido > Protena > Hidratos de carbono Protena > Lpido > Hidratos de carbono Lpido > Protena > Hidrato de carbono Protena > Lpido > Hidratos de carbono (casi nulo) Pgina 21

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6 Permeabilidad: las molculas pequeas que no tienen carga (como los gases, el H2O, el NH3, el glicerol y la urea) pueden atravesar las membranas biolgicas por difusin simple (libre difusin). A medida que aumenta el tamao, las molculas ya no pueden pasar de modo que las membranas son impermeables a la glucosa y otros azcares. La polaridad de las molculas tambin influye en la permeabilidad de la membrana. Las sustancias no polares como el benceno, el etanol, el ter dietlico y muchos narcticos pueden pasar fcilmente. En cambio, las sustancias polares, especialmente los compuestos con carga elctrica, no pueden pasar. Por eso, las membranas celulares disponen de mecanismos especializados como canales y transportadores para poder incorporar o liberar estos compuestos.

7 Transporte pasivo y activo: la difusin simple (libre) es la forma ms simple de transporte a travs de una membrana. Si el transporte por difusin es facilitado por las protenas que integran la membrana se habla de difusin facilitada. Estas protenas pueden ser: I) Canales proteicos: Son protenas con una abertura polar por la que pueden penetrar iones y otros compuestos hidrfilos. As, por ejemplo, existen canales por los que ciertos iones pueden pasar en forma selectiva (canales inicos) y otros canales que permiten el paso ms o menos inespecfico de molculas por debajo de cierto tamao (porinas). II) Transportadores: Son protenas que reconocen la molcula que deben transportar, se unen a ella y la ayudan con un cambio de conformacin para que pueda atravesar la membrana. Por lo tanto, estas protenas (protenas transportadoras o permeasas) pueden ser comparadas con las enzimas, desde luego, con la diferencia de que en lugar de una reaccin enzimtica, catalizan un transporte vectorial. Al igual que las enzimas, muestran una afinidad determinada (constante de disociacin, Kd, en mol/L) por cada molcula que van a transportar y una capacidad mxima de transporte (V).

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La difusin libre y los procesos de transporte inducidos por los canales inicos y por las protenas transportadoras siempre siguen un gradiente de concentracin, es decir, que el transporte se dirige desde el sitio de mayor concentracin al de concentracin menor. En el caso de los iones tambin tiene importancia el potencial de membrana, por lo que se habla de gradientes electroqumicos. Se trata entonces de un transporte pasivo que sigue la direccin cuesta abajo de un gradiente. En oposicin al transporte pasivo, puede haber un transporte activo cuesta arriba, es decir, en direccin contraria a la del gradiente de concentracin o de cargas elctricas. Esto exige una energa adicional que generalmente se obtiene por hidrlisis de ATP. El transportador une en primer trmino su cargamento a una cara de la membrana. Por medio de una fosforilacin dependiente del ATP se produce un cambio de conformacin, que libera dicho cargamento del otro lado de la membrana. Tambin es posible un proceso de transporte no espontneo mediante el acoplamiento con otro proceso libre de transporte (transporte activo secundario). Las clulas regulan su volumen, el pH interno y su composicin inica por medio de los sistemas de transporte a travs de las membranas. De este modo concentran los metabolitos importantes para el metabolismo energtico y para los procesos biosintticos y eliminan sustancias txicas. Los sistemas de transporte tambin sirven para la produccin de los gradientes inicos requeridos para la fosforilacin oxidativa y para la excitabilidad de los msculos y de las clulas nerviosas.

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8 Transporte segn nmero y direccin: otra subdivisin de los procesos de transporte se basa en el nmero de partculas transportadas y en la direccin del transporte. Si pasan un solo ion o una sola molcula con la ayuda de un canal inico o de una protena transportadora de membrana se habla de uniporte. El transporte simultneo de dos compuestos diferentes puede ser llevado a cabo por simporte (misma direccin) o por antiporte (diferente direccin). Los iones suelen ser transportados en antiporte con otro ion de la misma carga. Ese proceso es elctricamente neutro y por ende ms apropiado desde el punto de vista energtico.

9 Acuaporina-1: las acuaporinas facilitan el pasaje del agua a travs de las membranas biolgicas. Estas protenas forman poros hidrfilos que dejan pasar molculas de H2O, pero no iones hidratados ni molculas de mayor tamao. Las acuaporinas son particularmente importantes en el rin, donde tienen a su cargo la reabsorcin del agua. La acuaporina-2 presente en los tubos colectores de los tbulos renales est bajo el control de la hormona antidiurtica (ADH), que mediante AMPc lleva al desplazamiento de los canales del RE hacia la membrana plasmtica. La acuaporina-1 se encuentra en los tbulos contorneados proximales y en el asa de Henle. Presenta seis hlices transmembrana de diferente longitud y orientacin, adems de dos lazos que se internan en la membrana, denominados hemiporos.

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10 Bomba sarcoplasmtica de Ca2+: las ATPasas transportadoras transportan cationes; son verdaderas bombas de iones. Las ATPasas de tipo F (por ejemplo: ATP-sintasa de las mitocondrias) aprovechan el transporte de H+ para la sntesis de ATP. Las enzimas de tipo V bombean protones con consumo de ATP en los lisosomas y en otros compartimientos celulares cidos. Las ATPasas transportadoras de tipo P son particularmente numerosas. Se trata de protenas transportadoras de cationes impulsadas por el ATP que son fosforiladas de modo covalente durante el ciclo de transporte. La ATPasa de Ca2+ pertenece al tipo P. En el msculo, al finalizar la contraccin, esta ATPasa tiene a su cargo la funcin de bombear de regreso hacia el retculo sarcoplasmtico (RS) los iones de Ca2+ liberados en el citoplasma. La molcula consta de una sola cadena peptdica que est plegada en diferentes dominios. En la parte transmembrana, que est formada por numerosas hlices , se encuentran sitios de unin para dos iones de Ca2+. El ATP se une al dominio citoplasmtico N. En el ciclo cataltico de la enzima pueden diferenciarse cuatro estadios. I) En primer trmino, la unin del ATP al dominio N lleva a la fijacin de dos iones de Ca2+ en la regin transmembrana. II) Fosforilacin de un residuo de aspartato en el dominio P y la disociacin del ADP. III) Cambio de conformacin (inducido por la disociacin del ADP) que libera los iones de Ca2+ en el RS. IV) Por ltimo, la desfosforilacin del residuo de aspartato conduce otra vez al estado inicial. Bomba sarcoplasmtica de Ca2+ Ciclo cataltico de la Bomba sarcoplasmtica de Ca2+ ATP 2 Ca2+

IV I Dominio N

ADP

III ADP Pgina 25 II

Dominio P

Dominio H.A.F.W. & P.L.M.B.

2 Ca2+

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11 Canales inicos: los canales inicos facilitan la difusin de los iones a travs de las membranas biolgicas. Algunos se abren y se cierran segn el potencial de membrana (canales regulados por potencial de membrana) o como respuesta a ligandos especficos (canales regulados por ligandos) y otros trabajan en forma pasiva. En estos ltimos el transporte depende exclusivamente de gradientes de concentracin. Canal de Na+ regulado por el potencial de membrana: los canales de Na+ regulados por la diferencia de potencial participan de manera decisiva en la conduccin de los impulsos elctricos en el sistema nervioso. Estos canales se abren cuando se invierte el potencial de membrana en sus alrededores. Debido al alto potencial de equilibrio para el Na+ esto se produce con el flujo de iones de Na+ en su interior y en consecuencia como la despolarizacin local de la membrana, lo que contina con la activacin de canales de Na+ vecinos tambin regulados por la diferencia de potencial. Una onda de despolarizacin de este tipo que se va expandiendo por sus alrededores se denomina potencial de accin. En la repolarizacin de la membrana participan canales de K+ dirigidos hacia el exterior. Tambin son regulados por un potencial de accin los canales de Ca2+ que desencadenan el proceso de exocitosis de las vesculas. Los canales de Na+ regulados por la diferencia de potencial de los animales superiores son grandes complejos compuestos por varias subunidades. La subunidad posibilita el transporte de Na+. El canal de Na+ est formada por una cadena polipeptdica muy larga (de alrededor de 2.000 residuos de aminocidos) que se halla plegada en cuatro dominios con seis hlices transmembrana cada uno. Las hlices S6 de todos los dominios forman en conjunto un poro hidrfilo ubicado en la regin central que segn el estado funcional del canal inico puede presentarte como estrecho o amplio. Las seis hlices S4 tienen la funcin de sensores del potencial de membrana. Las hlices S4 contienen muchos restos de carga positiva. Si la membrana est polarizada por el exceso de cargas negativas en la cara interna se mantiene la hlice sobre la membrana por atraccin electroesttica. Si esta atraccin desaparece por la despolarizacin local, las hlices S4 se alejan como un resorte hacia arriba, y de esta manera abren el poro central. Subunidad

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12 Receptores de membrana: para la captacin y transmisin posterior de seales las clulas disponen de protenas receptoras. Muchas de estas protenas integran la membrana plasmtica, desde donde captan las seales que llegan de los alrededores. Otras protenas receptoras estn ubicadas en membranas intracelulares. Los receptores de hormonas lipfilas son los nicos que actan en forma disuelta. Regulan la transcripcin de los genes en el ncleo celular. Fundamento de la accin de los receptores: Los receptores ubicados en las membranas pueden subdividirse en tres segmentos con diferentes funciones: Dominio receptor: reacciona especficamente ante una seal determinada. Esa seal puede ser de naturaleza puramente fsica (luz, estmulos mecnicos). Sin embargo, la mayor parte de los receptores no reaccionan ante estmulos fsicos sino ante molculas seal. Los receptores de dichas seales qumicas contienen en su porcin receptora sitios de unin que son complementarios de los respectivos ligandos. En este aspecto, son iguales a las enzimas. Dominio transmisor: se encarga de la transmisin de la seal desde el dominio receptor y el dominio efectos. Dominio efector: generalmente est separado del dominio receptor. La forma de actuar del efector difiere de un caso a otro. Muchos receptores activan mediante enlaces o conversin reversible protenas intermediarias especiales que luego desencadenan una cascada de seales (transduccin de la seal). Otros receptores tienen la funcin de canal inico.

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Seales qumicas: Metabolitos Hormonas Neurotransmisores Mediadores Sustancias olorosas Sustancias gustativas Iones inorgnicos () Seales fsicas: Luz Impulsos elctricos Estmulos mecnicos

Seal

Receptor Transmisor Activador Proteincinasa Canal inico

Efector

Respuesta Celular Protena activada por iones

Mediador Protena G Sustrato del receptor

Respuesta Celular

Retculo Endoplasmtico
El retculo endoplasmtico (RE) es un sistema de membranas cerrado y extenso con estructuras tubulares o saculares. En la regin cercada al ncleo celular, el RE se comunica con la membrana nuclear externa. Morfolgicamente se puede diferenciar un RE rugoso (RER) y un RE liso (REL). En la membrana del RER se localiza un gran nmero de ribosomas que estn ausentes en el REL. Por otro lado, el REL es rico en enzimas unidas a las membranas que catalizan parte de las reacciones del metabolismo de los lpidos as como transformaciones biolgicas. 1 Retculo endoplasmtico liso (REL): las regiones del RE que no tienen ribosomas unidos se conocen con el nombre de retculo endoplasmtico liso. En la mayor parte de las clulas la proporcin de REL es muy pequea. Sin embargo, las clulas con un metabolismo lipdico muy activo (como los hepatocitos y las clulas de Leydig) tienen un REL muy abundante. Generalmente la estructura caracterstica del REL es un sistema de tbulos cerrados y ramificado. Las enzimas unidas a las membranas del REL catalizan la sntesis de los lpidos. En el REL se localiza por ejemplo la sntesis de los fosfolpidos y tambin algunos pasos de la biosntesis del colesterol. En las clulas endocrinas que sintetizan hormonas esteroides gran parte de los pasos de las reacciones que participan en dicha sntesis tambin tiene lugar en el REL. En los hepatocitos la proporcin de REL es particularmente grande. Esas clulas contienen enzimas que catalizan las denominadas biotransformaciones. Estas ltimas son reacciones en las que sustancias extraas no polares pero tambin sustancias del propio organismo (por ejemplo las hormonas esteroides) son modificadas qumicamente para ser inactivadas o preparadas para su conjugacin con sustancias polares. En estas transformaciones participan numerosos sistemas H.A.F.W. & P.L.M.B. Pgina 28

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enzimticos del citocromo P450, que por esa razn se pueden considerar molculas marcadoras del REL. El REL tambin funciona como un reservorio de calcio intracelular que, normalmente mantiene un nivel bajo de Ca2+ en el citoplasma. Esta funcin se manifiesta especialmente en el retculo sarcoplasmtico, que es una forma especializada del REL de los msculos. Para la liberacin y la nueva captacin de Ca2+ las membranas del REL contienen canales de Ca2+ controlados por seales y Ca2+-ATPasas que requieren de energa. En la luz del REL la alta concentracin de Ca2+ es amortiguada por protenas fijadoras de ese catin.

2 Retculo endoplasmtico rugoso (RER): el RER es un sitio en el que tiene lugar una activa sntesis de protenas. En este organelo se sintetizan protenas especiales para las membranas, los lisosomas y para la exportacin al exterior de la clula. Las protenas celulares restantes se sintetizan en el citoplasma, en los ribosomas que no estn unidos a las membranas del RE. Las protenas sintetizadas en el RER son plegadas y modificadas despus de la traduccin (maduracin de las protenas). Permanecen en el RER como protenas de membrana o llegan hasta el aparato de Golgi con la ayuda de vesculas transportadoras. Estas vesculas se originan en el sellado de las membranas y vuelven a ser eliminadas por medio de la fusin con ellas.

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Aparato de Golgi
Es un sistema de membranas complejo y cerrado con sculos membranosos aplanadas (cisternas) que se van apilando en capas uno encima del otro. All maduran las protenas, y tambin son seleccionadas y empaquetadas. En el aparato de Golgi se puede diferenciar las regiones: cis-, medial- y trans-Golgi, as tambin como el enrejado o retcula trans-Golgi (tGN). En estas regiones continan las modificaciones proteicas postraduccionales iniciadas en el RE.

Desde el aparato de Golgi, las protenas son transportadas en vesculas hasta diferentes objetivos dentro de la clula, por ejemplo a los lisosomas, a las membranas plasmticas y a las vesculas secretoras que vierten su contenido en los espacios extracelulares y se fusionan con la membrana plasmtica (exocitosis). Estos procesos de transporte tienen lugar en forma constante (constitutivos) o son regulados por medio de seales. La decisin acerca de qu camino debe seguir la protena en este transporte constitutivo o regulado depende de la secuencia de seales o estructuras de seales que lleva consigo como si fuera una marca. Adems de protenas, el aparato de Golgi transporta lpidos de membrana hasta su destino.

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RER y vesculas de transporte: Sntesis de protenas y transferencia a travs de la membrana. Hidrlisis de los pptido seal. Formacin de puentes disulfuro. Oligomerizacin. N-glucosilacin. Plegado

Aparato de Golgi: Cis: Fosforilacin. Medial: Liberacin de azcares. Adicin de GlcNAc (Nacetilglucosamina). Adicin Gal y NeuAc (galactosa y cido N-acetilneuramnico) Trans-Golgi-retcula: Seleccin

Protena de membrana: Receptor. Canal. Transportador (...)

Vescula secretora: Protelisis

Lisosoma: Hidrlisis de macromolculas

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Lisosomas
1 Estructura y contenido: los lisosomas animales son organelos de forma variada que miden de 0,2 a 2 m o estn rodeados por una membrana simple. En general se encuentran algunos centenares de lisosomas por clula. En la membrana lisosmica hay bombas protnicas activas de tipo V cuya energa proviene del ATP. Como en el lisosoma se acumulan H+, el contenido de ste, con un valor de pH de entre 4,5 y 5, es claramente ms cido que el citoplasma (pH de 7 a 7,3). Los lisosomas son el estmago de la clula y tienen a su cargo la degradacin de los componentes celulares. Para este fin poseen alrededor de 40 hidrolasas distintas que pueden degradar todo tipo de macromolculas. La enzima ms importante de los lisosomas es la fosfatasa cida. El pH ptimo de las enzimas lisosmicas se adapta al pH cido y siempre cae dentro del rango de pH 5. A un pH neutro como el del citoplasma las enzimas lisosmicas son poco activas, lo que representa un mecanismo protector contra la autodigestin indeseable de la clula, en caso de que las enzimas pudieran salir al citoplasma. 2 Funciones: los lisosomas sirven para la degradacin enzimtica de las macromolculas y de los organelos que le son suministrados de muy diferentes maneras. Degradacin por autofagia de un organelo envejecido: I) El lisosoma incorpora el organelo (mitocondria, retculo endoplasmtico, otra vescula). II) El lisosoma primario se convierte en el lisosoma secundario cuando inicia la degradacin hidroltica. III) Al final los cuerpos residuales contienen los restos no digeribles del proceso de degradacin lisosmica. Los lisosomas tambin son responsables de la degradacin de macromolculas y partculas incorporadas por endocitosis y fagocitosis, por ejemplo lipoprotenas, hormonas proteicas y bacterias (heterofagia). Para ello se fusionan con los endosomas, lo que llevan los materiales endocitados.

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Clula Eucarionte Animal
Organelos Membrana plasmtica Organelos de membrana doble Mitocondria Citoesqueleto Ncleo Centrolos Difusin facilitada T.A. primario (bombas) T.A. secundario Endocitosis Formacin de lisosomas, acrosoma, fragmoplasto () Maduracin de protenas (Glicosilacin, fosforilacin, adicin de sustancias y seales, etc.) Empaquetamiento y exportador de sustancias (lpidos, protenas) Exocitosis Lpidos Protenas Glcidos Regulacin y transporte de sustancias Transporte pasivo Transporte activo

Estructuras sin membrana Ribosomas

Organelos de membrana simple

Difusin simple

Retculo endoplasmtico rugoso (RER) Lugar de la sntesis de protenas Glucosilacin inicial de protenas

Retculo endoplasmtico liso (REL) Sntesis de lpidos (colesterol, fosfolpidos) Biotransformaciones y detoxificacin Reservorio de calcio (Ca2+)

Aparato de Golgi

Lisosoma Degradacin (lisis) de componentes celulares (digestin intracelular) Endocitosis y exocitosis H.A.F.W. & P.L.M.B.

Peroxisomas Participa en reacciones redox Detoxificacin (alcohol, agua oxigenada) Pgina 33

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Mitocondria

Central abastecedora de energa (ATP) Organelo semiautnomo (contiene ADN y ribosomas)

Crestas

Matriz

Ncleo

Fosforilacin oxidativa

Ciclo de Krebs (ciclo del cido ctrico)

Envoltura nuclear (carioteca) Poros nucleares Lmina

DNA

Histonas

Respiracin celular

Cromatina Heterocromatina Transcripcin < Eucromatina > Transcripcin del RNA ribosomal Nuclolo (Zona NOR = regin organizadora nucleolar) Cromosoma Centro del ncleo Periferia del ncleo

Alta condensacin

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Citoesqueleto
En el citoplasma de las clulas de los eucariotas existen armazones tridimensionales de filamentos (protenas fibrosas largas) que en conjunto constituyen el citoesqueleto. De acuerdo con su dimetro, los filamentos se agrupan en tres categoras: Microfilamentos (6 8 nm). Filamentos intermedios (cerca de 10 nm). Microtbulos (cerca de 25 nm). Todos los filamentos son polmeros formados por protenas caractersticas. 1 Actina y microfilamentos: la actina, que es la protena ms comn de las clulas eucariticas y la que constituye los microfilamentos (filamentos de actina), se encuentra en forma monomolecular como actina G (actina globular) y en forma polimrica como actina F (actina filamentosa). La actina G es una molcula asimtrica (PM 42 kDa) que consta de dos dominios. Al aumentar la fuerza inica se agrega de manera reversible y forma actina F, un homopolmero helicoidal. La actina G contiene una molcula de ATP firmemente unida, que en la actina F se hidroliza con lentitud hasta ADP. De este modo la actina tambin posee propiedades enzimticas (actividad de ATPasa). Como las molculas individuales de actina G siempre estn dispuestas en la misma direccin, una al lado de la otra, la actina F presenta polaridad. Tiene dos extremos diferentes en los que la polimerizacin ocurre a distinta velocidad. Si los extremos no son estabilizados por protenas especficas (como en el msculo), ante una concentracin crtica de actina G el extremo (+) de la actina F, crece en forma continua mientras que el extremo (-) se degrada simultneamente. Este proceso puede ser inhibido experimentalmente utilizando venenos de hongos. La faloidina, un veneno del hongo amanita, inhibe la degradacin unindose al extremo (-). Por el contrario las citocalasinas, los venenos de accin citosttica de los mohos, bloquean la polimerizacin unindose al extremo (+).

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Protenas asociadas con la actina En el citoplasma existen ms de 50 clases de protenas que se unen especficamente a las actinas G y F. Su adicin a la actina cumple varias funciones: Controlar el pool de actina (ejemplo: profilina). Influir sobre la velocidad de polimerizacin de la actina G (ejemplo: villina). Estabilizar el extremo de la cadena de actina F (ejemplo: fragina, -actinina). Unir los filamentos entre s o con otros componentes celulares (ejemplo: vinilla, actinina, espectrina). Alterar la estructura de doble hlice de la actina F (gesolina). La actividad de estas protenas es controlada por el Ca2+ y por proteincinasas. 2 Protenas de los filamentos intermedios: las molculas bsicas de los filamentos intermedios (FI) son miembros de cinco familias de protenas relacionadas entre s. Las protenas de los FI presentan una gran especificidad de tipo celular y entre ellas se encuentran tpicamente la citoqueratina, la desmina, la vimentina, la gliaprotena fibrilar cida (GPFA) y los neurofilamentos. Todas las protenas tienen en la parte media una estructura bsica similar a un bastn que se llama superhlice (coiled-coil). Los dmeros se unen de manera antiparalela para formar tetrmeros y a travs de un apilamiento cabeza a cabeza se forman los protofilamentos. Ocho protofilamentos forman un filamento intermedio. Al contrario de los microfilamentos y de los microtbulos, los monmeros libres de los FI casi no se encuentran en el citoplasma y su polimerizacin produce polmeros estables que carecen de polaridad.

Protofilamento

3 Tubulina y microtbulos: los componentes bsicos de los microtbulos tuboliformes son las tubulinas y , dos protenas globulares (PM 53 y 55 kDa) que se pueden agregar en heterodmeros y -heterodmeros, los que a su vez lo hacen en protofilamentos. Trece protofilamentos forman un complejo circular que por polimerizacin adicional crece hasta formar un tubo largo.

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Al igual que los microfilamentos los microtbulos son estructuras polares dinmicas con un extremo (+) y otro (-). Este ltimo casi siempre es estabilizado por una unin con el centrosoma mientras que el extremo (+) muestra inestabilidad dinmica. Puede alargarse en forma lenta o volverse ms corto con rapidez. En eso desempea un papel importante el GTP, que es fijado por los microtbulos e hidrolizado paulatinamente hasta GDP. Tambin pueden asociarse con los microtbulos diferentes protenas.

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4 Estructura y funcin de los filamentos: el citoesqueleto cumple con tres tareas principales: Proporciona el armazn mecnico que confiere su forma tpica a la clula e intercomunica las membranas y los organelos. Tiene propiedades dinmicas y es sintetizado y degradado de manera continua para satisfacer las necesidades y las condiciones vitales cambiantes de la clula. Es el motor para el movimiento de los animales. No solo las clulas musculares sino tambin otras clulas no contrctiles contienen muchas protenas motoras con cuya ayuda pueden moverse en forma coordinada y en la direccin deseada. El transporte de los organelos, la movilidad celular, los cambios de forma durante el crecimiento, las corrientes citoplasmticas, la diferenciacin y la divisin celular pueden llevarse a cabo por medio de los componentes del citoesqueleto. Cumple la funcin de constituir canales para el transporte en el interior de la clula. Los organelos y otros grandes complejos pueden moverse a lo largo de los filamentos con la ayuda de las protenas motoras. Microfilamentos y filamentos intermedios Los microfilamentos de actina F atraviesan las microvellosidades en forma de manojos ordenados y se enrollan entre s por medio de protenas asociadas con la actina, especialmente por medio de la fimbrina y la vinilla. La calmodulina y una ATPasa similar a la miosina unen los microfilamentos temporalmente con la membrana plasmtica. La fodrina, otra protena asociada con los microfilamentos, une las fibras de actina entre s en las bases as como con la membrana citoplasmtica y una red de filamentos intermedios. En estos ejemplos los microfilamentos tienen una funcin predominantemente esttica. En otros casos la actina participa en procesos dinmicos como la contraccin muscular, el desplazamiento celular, la fagocitosis por medio de clulas del sistema inmunolgico y la formacin de microspikes y ramificaciones celulares (pseudpodos) y en el proceso acrosmico durante la fertilizacin (fusin del espermatozoide con el vulo).

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Microtbulos Los microtbulos, que presentan aspecto de tubo, se forman y se degradan de manera continua en su extremo (+), mientras que el extremo (-) est bloqueado por el centrolo por protenas asociadas. El extremo (+) tambin puede ser estabilizado por protenas asociadas, por ejemplo una vez que los microtbulos han llegado a la membrana citoplasmtica. Los microtbulos toman parte en la formacin de la estructura celular y sirven como corredores o rieles para el transporte de los organelos. Por accin conjunta con protenas asociadas (dinena y cinesina) los microtbulos pueden efectuar trabajo mecnico, por ejemplo durante el transporte de las mitocondrias y durante el movimiento de los cilios (prolongaciones capilares de los pulmones, el epitelio intestinal y el oviducto) y de los flagelos de los espermatozoides. Tambin desempean un papel especial durante la fase de mitosis de la divisin celular.

Microfilamentos

Contraccin muscular (actina + miosina + troponina) Movimiento Ameboide

Citoesqueleto

Red Tridimensional Proteica Filamentos Intermedios Microtbulos

Citodiresis

Forma celular Anclaje y movimiento cuerpos basales, flagelos y cilios Formacin huso mittico

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