Preparacin de medios y reactivos utilizados en biologa molecular

Mtodos de la biologa molecular consiste en el uso de organismos vivos (generalmente bacterias) y una amplia variedad de reactivos, enzimas y molculas de ADN. Tha bacterias utilizadas en las tcnicas de ADN recombinante deben ser cultivadas en medios de comunicacin que les permite crecer de manera ptima. La mayora de los medios bacteriolgicos contienen una rica fuente de nutrientes tales como triptonas o peptonas (que son una rica fuente de aminocidos), extracto de levadura (que es una rica fuente de vitaminas y nutrientes), y diversas sales. Debido a que muchas de las cepas bacterianas utilizadas en biologa molecular plsmidos puerto que confieren resistencia a antibiticos o un moras se aaden comnmente a los medios de comunicacin. Aditivos manera parecida, otros se agregan a menudo a los medios de comunicacin para que los diversos cambios fenotpicos en los organismos pueden ser visualizados por las reacciones de color. Por ejemplo, cuando un gen se clona en un vector apropiaron (por ejemplo, pGEM), las bacterias que albergan un fragmento de ADN extrao se puede distinguir de los que no por la adicin de un sustrato cromognico (X-gal) a los medios de comunicacin. Esto se traduce en la formacin de colonias azules por las bacterias que carecen de ADN extrao, mientras que aquellos con ADN extrao forma colonias de color blanco.

Medios bacteriolgicos se preparan, ya sea en forma lquida (caldo) o en forma slida (agar) El Agar es producto de AMARINE alga que es un sustrato para las bacterias no crecimiento meses, no se funde hasta que alcanza los 100 C, y, una vez fundido, no se solidifica hasta unos 44 C. x Placas de Agar permitir que la informacin aisla colonias de bacterias, mientras que los medios lquidos permiten el crecimiento de grandes cantidades de clulas para procedimientos tales como aislamientos de ADN. El uso previo, todos los medios se esterilizan, por lo general mediante autoclave. Una autoclave es esencialmente una olla a presin de gran tamao que se calienta el material a una temperatura de 121 C mediante la inyeccin de vapor de agua a presin en la cmara del autoclave. La presin evita que los medios de ebullicin a la temperatura elevada. Un mtodo alternativo de los medios de esterilizacin y otros lquidos es filtrarla a travs de un filtro de membrana de 0,2 mm. Esto es tedioso, pero algunos de los ingredientes los medios (como los antibiticos) se descompone a temperaturas de autoclave y se aaden a los medios desde stocks esterilizados despus de autoclavear.