Base Agar Gelosa Sangre

Medio para propsitos generales, para el aislamiento y cultivo de numerosos microorganismos. Con la adicin de sangre, el medio es til tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observacin de reacciones de hemlisis. Tambin, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para preparar el medio agar chocolate. El agar sangre es una combinacin de un agar base (agar nutritivo) con el agregado de 5 % de sangre ovina, tambin puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa de Agar. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa tambin para ver la capacidad hemoltica de los microorganismos patgenos (que es un factor de virulencia). Observando los halos hemolticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemlisis que posee:

Hemolyses of Streptococcus spp. (left) -hemolysis (S. mitis); (middle) -hemolysis (S. pyogenes); (right) hemolysis (= non-hemolytic, S. salivarius

alfa: halos verdosos (hemolisis parcial) beta: halos incoloros (hemolisis total) gamma: inexistencia de halos (sin hemolisis)

Beta hemolisis en agar sangre (los tres crculos son colonias; lo de alrededor de los crculos es la beta hemolisis

Glbulos rojos (eritrocitos o hemates) de la sangre en una placa de Petri con agar de las utilizadas para el diagnstico de infecciones. La placa de la izquierda muestra una infeccin por estafilococos y la de la derecha, por estreptococos. Red blood cells on an agar plate are used to diagnose infection. The plate on the left shows a positive staphylococcus

infection. The plate on the right shows a positive streptococcus infection and with the halo effect shows specifically a beta-hemolytic group A. FUNDAMENTO La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, an de aquellos nutricionalmente exigentes. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agregado de sangre al medio de cultivo, en concentracin final de 5-10 %, aporta nutrientes para el crecimiento bacteriano, y permite detectar hemlisis.

Mac Conkey Agar

Mac Conkey Agar Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. FUNDAMENTO En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares. Sirve como indicador visual de pH, distinguiendo as las bacterias gram negativas que pueden fermentar la lactosa (Lac+) y las que no pueden (Lac-). LAC + Al utilizar la lactosa en el medio, bacterias Lac+ como Escherichia coli, Enterobacter y Klebsiella producen acidez, lo cual baja el PH bajo 6,8 lo que tiene como consecuencia la aparicin de colonias de color rojo oscuro. LAC Bacterias que no fermenten la lactosa como Salmonella, Proteus y Shigella utilizaran peptona en su lugar, formando ammonio, lo cual incrementa el PH del agar, formando colonias blancas o incoloras.

(LAC +) IZQ

Y (LAC ) DERECHA

Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras MICROORGANISMOS Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Salmonella typhimurium Shigella flexneri Proteus mirabilis Enterococcus faecalis COLONIAS Rojas con halo turbio Rosadas mucosas Incoloras, transparentes Incoloras, transparentes Incoloras transparentes Diminutas, incoloras, opacas

CARACTERISTICAS DEL MEDIO Medio Preparado: Rojo prpura

Sal y Manitol Agar

Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de estafilococos. Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de muestras clnicas, alimentos, productos cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria Tambin, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halfilas de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados (TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas especies pueden no desarrollar

FUNDAMENTO Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se repicarn en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol. Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color. Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o prpura. MICROORGANISMOS CRECIMIENTO CARACTERISTICAS DE LAS COLONIAS Amarilla Roja Inhibido Inhibido

Staphylococcus aureus ATCC Excelente 25923 Staphylococcus epidermidis Bueno ATCC 14990 Escherichia coli ATCC 25922 Inhibido Klebsiella pneumoniae ATCC Inhibido 700603 CARACTERSTICAS DEL MEDIO: ROJO

AGAR DEXTROSA SABOURAUD

El agar Sabouraud es un tipo de agar que contiene peptonas.1 Se usa para cultivar dermatofitos y otros tipos de hongos. Medio Sabouraud dextrosa (SAB): El gar Sabouraud dextrosa, modificado por Emmons, contiene un 2% de glucosa y es ligeramente cido (pH=6.9), se considera el medio estndar para recuperar y mantener una amplia variedad de hongos que pueden aislarse en el laboratorio de micologa clnica. Es el medio estndar para observar la morfologa tpica de los hongos, pero no es el medio ideal de crecimiento o para estudiar la esporulacin. Este medio permite el crecimiento de actinomicetos aerobios, pero el SAB original (4% de glucosa), dificulta la recuperacin de algunos hongos, sobre todo de Blastomyces dermatitidis. Se utiliza indistintamente en tubo o en placa. Fue inventado por, Raymond Sabouraud en 1892. Ms tarde Emmons mejor el medio, el nivel de pH se fue acercando al neutral para permitir el crecimiento de otros subcultivos de hongos

CANDIDA ALBICANS Lquido asctico Es el lquido contenido y formado en la cavidad peritoneal por trasudacin (ICC, cirrosis heptica, hipoproteinemia), exudacin (neoplasias, infecciones, traumatismos, pancreatitis) o por derrame quiloso (lesin u obstruccin del conducto torcico). Cuando esta cavidad se inflama debido a una infeccin o el lquido asctico contenido en ella se sobreinfecta deviene una peritonitis, cuyo resultado es el acmulo de gran cantidad de ste.

Clsicamente se han reconocido 2 tipos de peritonitis, la primaria y la secundaria. El progreso mdico ha contribuido a la aparicin de nuevas formas de infeccin peritoneal, como aquellas que ocurren en pacientes en dilisis peritoneal crnica, con derivaciones ventriculoperitoneales de LCR o con derivaciones peritoneovenosas del lquido asctico.

La peritonitis primaria, de prevalencia escasa, se produce espontneamente sin evidencia de patologa intraabdominal, es prcticamente una enfermedad no quirrgica (ligada a ciertos grupos de enfermos con cirrosis heptica, sndrome nefrtico y otras condiciones predisponentes) y su etiologa vara dependiendo de si los pacientes son peditricos o adultos.

Las causas de peritonitis secundarias son mltiples, destacando las inflamaciones de la pared intestinal o de vsceras contiguas con posterior perforacin intestinal (apendicitis, pancreatitis), traumatismos o como complicacin de la ciruga. Otras causas son mecnicas (obstrucciones intestinales), vasculares (colitis isqumica necrotizante) y neoplasias.

En aquellos casos en que el acmulo de lquido asctico sea debido a peritonitis infecciosa, nos podemos encontrar en la tincin de gram con: Peritonitis primaria: - Nios: * Streptococcus pneumoniae y Streptococcus pyogenes: dem a lo visto en LCR. * Haemophilus influenzae y otros estreptococos: con menor frecuencia. dem a lo visto en LCR. - Adultos: es esencialmente la peritonitis del cirrtico con ascitis. * Escherichia coli y otras enterobacterias: dem a lo visto en LCR. * Enterococcus spp.: menor frecuencia. Muy difciles de diferenciar del resto de estreptococos. Se asemejan mucho al neumococo, pero sin forma lanceolada. 18: Imagen gram: IMAGEN 18 Peritonitis secundaria: por lo general es una infeccin mixta que comprende predominantemente anaerobios obligados y facultativos (de 3 a 6 microorganismos de media). El lquido peritoneal presenta > 3 gr/dL de protenas totales y multitud de leucocitos (principalmente polimorfonucleares (PMN) ). Se debe realizar examen del contenido en amilasa. Es habitual la presencia de 17.000 a 25.000 leucocitos/mm3 con desplazamiento a la izquierda de la frmula, y valores elevados de hematocrito y uremia (el flujo neto de formacin de lquido peritoneal puede llegar a ser de 300-500 ml/hora; en estos casos el hemograma puede rendir solo 5.000 leucocitos/mm3, pero el recuento diferencial muestra un desplazamiento extremo hacia formas PMN inmaduras). En la tincin de Gram, si es positiva, nos encontraremos con ms de 2 tipos de bacterias que, ordenadas de mayor a menor prevalencia, son: - E.coli y otras enterobacterias: dem a lo visto en lquido pleural. - Bacteroides spp.: dem a lo visto en lquido pleural. - Cocos anaerobios: dem a lo visto en lquido pleural. - Clostridium spp.: grandes bacilos gram (+), con o sin esporas, como trozos de cinta. 19: Imagen gram de muestra; 20: Imagen gram de cultivo: IMAGEN 19 - Enterococcus spp.: dem a lo visto en lquido pleural. - Streptococcus spp. y Staphilococcus spp.: dem a lo visto en LCR. - Fusobacterium spp.: dem a lo visto en lquido pleural. Peritonitis asociada a dispositivos intraperitoneales: escapan al fundamento de esta revisin, ya que directamente se remiten al laboratorio de microbiologa. Pero cabe resaltar que, mayoritariamente se observan Staphilococcus spp. y en algunas ocasiones bacilos gram (-) y levaduras tipo Candida.