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1.0 INTRODUO Semioqumicos so as substncias qumicas envolvidas na comunicao entre os seres vivos. Semio vem do grego semeon = sinal. O termo semioqumicos significa, ento, "sinais qumicos". Vrias so as classes dos semioqumicos, com base no tipo de interao, se intraespecfica ou interespecfica, e com base nos custos e benefcios que cada organismo da interao ter. So portanto, divididos em duas diferentes classes:

Feromnios so os semioqumicos mais estudados em todo o mundo. Pherein, em grego, quer dizer carregar e horman, estimular. Eles podem ser definidos como substncias qumicas responsveis pelas interaes entre organismos da mesma espcie (ao intra-especfica). Como exemplos, podem ser citados os feromnios sexuais (provocam a atrao entre macho e fmea), os feromnios de alarme (produzem estado de alerta pela aproximao de algum predador natural) e os feromnios de trilha e oviposio (demarcam, respectivamente, o caminho at uma fonte de alimentos e o local onde os ovos foram depositados). J as substncias qumicas empregadas na comunicao entre espcies diferentes (interespecficas) so chamadas de aleloqumicos e so divididos em alomnios (favorecem a espcie emissora), cairomnios (favorecem a espcie receptora) e sinomnios (ambas so favorecidas). Os alomnios geralmente so compostos utilizados para a defesa da espcie, enquanto os cairomnios so as substncias produzidas por uma presa e que so percebidas pelo predador. O relatrio a seguir traz uma sntese das atividades realizadas no laboratrio de Produtos Naturais junto aos Semioqumicos da Universidade Federal de Alagoas, na parte referente criao de insetos como Aedes aegypti (mosquito causas dor da dengue), Dinoderus minutus (a broca do bambo), Zabrotes subfasciatus (caruncho pintado do feijo) em cativeiro em condies laboratoriais e especficas para cada espcie.

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2.0 OBJETIVOS 2.1 Geral Nesta linha de pesquisa, busca-se identificar os feromnios de insetos, criados em cativeiro, pelo grupo suscetveis de serem utilizados no controle e/ou monitoramento destes insetos. 2.2 Especficos

Coletar e preparar insetos para estudo; Estudar os comportamentos dos insetos envolvidos na comunicao qumica, como comportamento sexual; Estabelecer a existncia de feromnios suscetveis de serem utilizados no controle comportamental dos insetos; Identificar e isolar os possveis semioqumicos envolvidos na atratividade dos insetos; Compreender a aplicao dos mtodos para o controle das pragas.

3.0 JUSTIFICATIVA

O estudo do comportamento e ecologia qumica oferece uma excelente oportunidade para compreender como os seres vivos se adaptam e interagem com o ambiente e demais organismos, particularmente diante de estmulos qumicos (feromnios ). Nos insetos, especialmente, aqueles considerados pragas, o entendimento de seu comportamento qumico pode significar a chave para o seu manejo e pode ainda representar o sucesso do controle biolgico. Alm disso, o comportamento e ecologia qumica podem auxiliar ou otimizar outras estratgias de controle, ou em certos casos, servir como uma medida de controle propriamente dita. A utilizao da tecnologia com base no emprego criterioso de semioqumicos ser, certamente, um dos alicerces para um programa de manejo destas pregas.

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4.0 HISTORICO DA EMPRESA: UFAL A Universidade Federal de Alagoas (UFAL) uma instituio de ensino superior do governo federal brasileiro localizada no estado de Alagoas e dispe de 45 cursos de graduao nas diversas reas do conhecimento, em suas 21 unidades acadmicas, alm dos 16 cursos do Campus Arapiraca e seus Plos (Palmeira dos ndios, Penedo e Viosa). Outra atividade de relevada importncia para a sociedade o curso de graduao de Pedagogia a distncia, com abrangncia em seis plos que vm atendendo diretamente 26 municpios alagoanos, capacitando professores do ensino fundamental, conforme exigncia da Lei de Diretrizes e Bases (LDB). Foi a primeira instituio de ensino superior no Nordeste credenciada pelo Ministrio de Educao (MEC), para oferecer um curso dessa modalidade, concretizando-se assim, como uma perspectiva renovadora e comprometida com a transformao da realidade. Em 2006, a UFAL aderiu ao Programa de Universidade Aberta do Brasil oferecendo o curso de Administrao na modalidade distncia e em 2007 passaram a ser ofertados mais trs cursos: Sistema de Informao, licenciatura em Fsica e Pedagogia. Na ps-graduao a UFAL oferece 18 cursos de mestrado e trs de doutorado, alm das 28 especializaes. Outra ao em pleno funcionamento, destinada ao segmento estudantil, Programa Institucional de Bolsas de Iniciao Cientfica (Pibic/CNPq) e o Programa de Ensino e Treinamento (PET), que objetivam estimular o aluno para a pesquisa cientfica e para a carreira acadmica. Para consecuo dos objetivos gerais da instituio, as aes prioritrias relacionadas ao ensino de Graduao, so: aprimorar o processo de Ensino de Graduao na UFAL; expandir a oferta de vagas e dar condies de permanncia dos discentes, sem o comprometimento da qualidade de graduao; aperfeioar o sistema de ingresso e reteno de alunos, ampliando a integrao com a rede pblica de ensino mdio; implantar uma poltica de educao para os portadores de necessidades especiais; aprimorar e ampliar o processo de ensino de graduao distncia na UFAL e disseminar a prtica de multimdia, teleconferncia e interao didtica. Para o Ensino de Ps-Graduao: buscar mecanismos de apoio aos programas de ps-graduao stricto sensu, objetivando melhoria nos conceitos atribudos pela Capes; estimular a criao de novos cursos de ps-graduao stricto sensu e fomentar a criao e a ampliao de programas de ps-graduao lato sensu.

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UFAL
Universidade Federal de Alagoas

Lema Fundao Tipo de instituio Oramento anual Funcionrios Docentes Total de estudantes

Scientia ad Sapientiam 25 de janeiro de 1961 Pblica R$ 252.614.397,13 (2006) 1444 (2006) 1126 (2006) 15242 (2006)

Graduao Ps-graduao Reitor(a) Vice-reitor(a)

13992 (2006) 1250 (2006) Profa. MsC. Ana Dayse Rezende Dorea Prof. Dr. Eurico de Barros Lobo Filho

Localizao

Macei, Rio Largo e Arapiraca Alagoas

Afiliaes Pgina oficial Contato

CRUB, RENEX http://www.ufal.br (82) 3214-1100

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4.1 ORGANOGRAMA DA EMPRESA - UFAL

CONSELHOS

REITORIA VICE-REITORIA GABINETE DO REITOR

PR REITORIAS

UNIDADES ACADMICAS

INSTITUTO DE QUMICA E BIOTECNOLOGIA QUMICA ORGNICA

LABORATRIOS

CRISTALOGRAFIA

PRODUTOS NATURAIS

FITOQUMICOS

SEMIOQUMICOS

ELETROQUMICOS

BIOQUMICA E MICROBIOLOGIA

QUMICA AMBIENTAL

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SEMANA: 06/07/09 10/07/09 HORA/SEMANA: 20 horas 5.0 NORMAS E SEGURANA NO LABORATRIO No texto abaixo esto relacionados itens elementares para sua segurana no laboratrio qumico. Incorpore-os em seu procedimento habitual ao enfrentar um dia de trabalho. 1. Use sempre culos de segurana e avental, de preferncia de algodo, longo e de mangas longas. 2. No use saias, bermudas ou calados abertos. Pessoas que tenham cabelos longos devem mant-los presos enquanto estiverem no laboratrio. 3. No trabalhe sozinho, principalmente fora do horrio de expediente. 4. No fume, coma ou beba nos laboratrios. Lave bem as mos ao deixar o recinto 5. Ao ser designado para trabalhar em um determinado laboratrio, imprescindvel o conhecimento da localizao dos acessrios de segurana. 6. Antes de usar reagentes que no conhea, consulte a bibliografia adequada e informe-se sobre como manuse-los e descart-los. 7. No retorne reagentes aos frascos originais, mesmo que no tenham sido usados. Evite circular com eles pelo laboratrio. 8. No use nenhum equipamento em que no tenha sido treinado ou autorizado a utilizar. 9. Certifique-se da tenso de trabalho da aparelhagem antes de conect-la rede eltrica. Quando no estiverem em uso, os aparelhos devem permanecer desconectados. 10. Use sempre luvas de isolamento trmico ao manipular material quente. 11. Nunca pipete lquidos com a boca. Neste caso, use bulbos de borracha ou trompas de vcuo. 12. Consulte a bibliografia indicada para obter informaes sobre a estocagem de produtos qumicos, assegurando que reagentes incompatveis sejam estocados separadamente.

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MATERIAIS DE VIDRO E CONEXES 1. Ao usar material de vidro, verifique sua condio. Lembre-se que o vidro quente pode ter a mesma aparncia que a do vidro frio. Qualquer material de vidro trincado deve ser rejeitado. 2. Vidros quebrados devem ser descartados em recipiente apropriado. 3. Use sempre um pedao de pano protegendo a mo quando estiver cortando vidro ou introduzindo-o em orifcios. Antes de inserir tubos de vidro (termmetros, etc.) em tubos de borracha ou rolhas, lubrifique-os. 4. Nunca use mangueiras de ltex velhas. Faa as conexes necessrias utilizando mangueiras novas e braadeiras. 5. Tenha cuidado especial ao trabalhar com sistemas sob vcuo ou presso. Dessecadores sob vcuo devem ser protegidos com fita adesiva e colocados em grades de proteo prprias. 6. Antes de iniciar o experimento verifique se todas as conexes e ligaes esto seguras.

A REALIZAO DE EXPERIMENTOS 1. Nunca adicione gua sobre cidos e sim cidos sobre gua. 2. Ao testar o odor de produtos qumicos, nunca coloque o produto ou o frasco diretamente sob o nariz. 3. Quando estiver manipulando frascos ou tubos de ensaio, nunca dirija a sua abertura na sua direo ou na de outras pessoas. 4. Fique atento s operaes onde for necessrio realizar aquecimento. 5. Cuidado para no se queimar ao utilizar nitrognio ou CO2 lquidos. 6. A destilao de solventes, a manipulao de cidos e compostos txicos e as reaes que exalem gases txicos so operaes que devem ser realizadas em capelas, com boa exausto. 7. As vlvulas dos cilindros devem ser abertas lentamente com as mos ou usando chaves apropriadas. Nunca force as vlvulas, com martelos ou outras ferramentas, nem as deixe sobre presso quando o cilindro no estiver sendo usado. 8. Sempre que possvel, antes de realizar reaes onde no conhea totalmente os resultados, faa uma em pequena escala, na capela. 9. Ao trabalhar com reaes perigosas (perigo de exploso, gerao de material txico, etc.) ou cuja periculosidade voc desconhea, proceda da seguinte forma: a. Avise seus colegas de laboratrio;

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b. Trabalhe em capela com boa exausto, retirando todo tipo de material inflamvel. Trabalhe com a rea limpa. c. Use protetor acrlico; d. Tenha um extintor por perto, com o pino destravado. 10.Ao se ausentar de sua bancada ou deixar reaes em andamento noite ou durante o fim de semana, preencha a ficha de identificao adequada. Caso esta no esteja disponvel, improvise uma e coloque-a em local visvel e prximo ao experimento. Nela devem constar informaes sobre a reao em andamento, nome do responsvel e de seu superior imediato, com endereo e telefone para contato, alm de informaes de como proceder em caso de acidente ou de falta de gua e/ou eletricidade. 11.O ltimo usurio, ao sair do laboratrio, deve desligar tudo e desconectar os aparelhos da rede eltrica.

OS RESDUOS 1. Os resduos de solventes de reaes e de evaporadores rotativos devem ser colocados em frascos apropriados para descarte, devidamente rotulados. Evite misturar os solventes. Sugere-se a seguinte separao: Solventes clorados, Hidrocarbonetos, Alcois e Cetonas, teres e steres, Acetatos e Aldedos. Sempre que possvel indique tambm os componentes percentuais aproximados, pois este tipo de resduo costuma ser incinerado por empresas especializadas que exigem uma descrio minuciosa do material que recebem. Verifique se vivel recuperar estes resduos no seu laboratrio. 2. Os resduos aquosos cidos ou bsicos devem ser neutralizados na pia antes do descarte, e s ento descartados. Para o descarte de metais pesados, metais alcalinos e de outros resduos, consulte antecipadamente a bibliografia adequada. 3. O uso de soluo sulfocrmica para limpeza vem sendo proibido na maioria dos laboratrios. Caso precise utiliz-la, nunca faa o descarte diretamente na pia. ACESSRIOS DE SEGURANA Quando estiver trabalhando em um laboratrio, voc deve:

1. Localizar os extintores de incndio e verificar a que tipo pertence e que tipos de fogo possam apaga.

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2. Localizar as sadas de emergncia. 3. Localizar a caixa de primeiros socorros e verificar os tipos de medicamentos existentes e sua utilizao. 4. Localizar a caixa de mscaras contra gases. Se precisar us-las, lembre-se de verificar a existncia e qualidade dos filtros adequados sua utilizao. 5. Localizar a chave geral de eletricidade do laboratrio e aprender a deslig-la. 6. Localizar o cobertor anti-fogo. 7. Localizar a caixa de areia. 8. Localizar o lava-olhos mais prximo e verificar se est funcionando adequadamente. 9. Localizar o chuveiro e verificar se este est funcionando adequadamente. 10. Informar-se quanto aos telefones a serem utilizados em caso de emergncia (hospitais, ambulncia, bombeiros, etc.). IMPORTANTE: Alm de localizar estes equipamentos, voc deve saber utiliz-los adequadamente. Assim, para referncia rpida, consulte a pessoa responsvel pela segurana do laboratrio ou os manuais especializados no assunto.

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SEMANA: 13/07/09 17/07/09 HORA/SEMANA: 20 horas 6.0 INSETOS 6.1 Aedes aegypti Aedes aegypti (ads do grego "odioso" e gypti do latim "do Egipto") a nomenclatura taxonmica para o mosquito que popularmente conhecido como mosquito da dengue, uma espcie de mosquito da famlia Culicidae proveniente de frica, atualmente distribudo por quase todo o mundo, com ocorrncia nas regies tropicais e subtropicais, sendo dependente da concentrao humana no local para se estabelecer. Segundo Ricardo Strohschoen, a distribuio do Aedes Aegypti limitada pela altitude, embora no seja encontrado acima dos mil metros, j foi referida a sua presena a 2,2 mil metros acima do nvel do mar. Por sua estreita associao com o homem, o Aedes aegypti , essencialmente, mosquito urbano, encontrado em maior abundncia em cidades, vilas e povoados, entretanto j foi encontrado em zonas rurais, provavelmente transportados de reas urbanas em vasos domsticos, onde se encontravam ovos e larvas. Os ovos so depositados pela fmea, nas paredes internas dos depsitos que servem como criadouros, prximos superfcie da gua, sendo no momento da postura brancos, mas rapidamente, adquirem a cor negra brilhante. A fecundao se d durante a postura e o desenvolvimento do embrio se completa em 48h, em condies favorveis de umidade e temperatura. Uma vez completado o desenvolvimento embrionrio, os ovos so capazes de resistir a longos perodos de dessecao, que pode prolongar-se por mais de um ano, sendo observada a ecloso de ovos com at 450 dias, quando colocados em contato com a gua. A capacidade de resistncia dos ovos do Aedes aegypti dessecao um srio obstculo para sua erradicao, pois esta condio permite que os ovos sejam transportados a grandes distncias, em recipientes secos, tornando-se assim o principal meio de disperso do inseto. As larvas possuem quatro estgios evolutivos, sendo a durao da fase larvria depende da temperatura, disponibilidade de alimento e densidade das larvas nos criadouros. Em condies timas, o perodo entre a ecloso e a pupao pode no exceder a cinco dias, contudo, em baixa temperatura e escassez de alimento, o quarto estgio larvrio pode prolongar-se por vrias semanas, antes da sua transformao em pupa. A fase larvria mais vulnervel do ciclo, por isso as aes de combate devem, preferencialmente, atuar na fase larvria. As pupas no se alimentam, sendo nesta fase que ocorre a metamorfose do estgio larval para o adulto. Quando inativas se mantm na

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superfcie da gua, flutuando, o que facilita a emergncia do inseto adulto, sendo que o estado pupal dura, geralmente, de dois a trs dias. Logo aps emergir do estgio pupal, o inseto adulto procura pousar sobre as paredes do recipiente, assim permanecendo vrias horas para endurecimento do exoesqueleto e asas. Dentro de 24 horas aps, emergirem, pode acasalar, sendo o acasalamento geralmente durante o vo e uma nica inseminao suficiente para fecundar todos os ovos que a fmea venha a produzir durante a sua vida. As fmeas se alimentam de sangue, servindo como fonte de repasto a maior parte do vertebrado, mas mostram marcada predileo pelos humanos, ocorrendo sempre durante o dia, nas primeiras horas da manh e ao anoitecer. O macho alimenta-se de carboidratos extrados dos vegetais. Em geral a fmea faz uma postura aps cada repasto sanguneo, sendo o intervalo entre a alimentao sangunea e a postura , em regra, de trs dias, em condies de temperatura satisfatrias. A oviposio se d mais freqente no final da tarde, onde a fmea atrados por recipientes escuros e sombreados, com superfcie spera, nas quais deposita os ovos, prefere gua limpa e cristalina ao invs de gua suja ou poluda por matria orgnica. A fmea distribui cada postura em vrios recipientes. pequena a capacidade de disperso do Aedes aegypti pelo vo, sendo que a fmea passa toda sua vida nas proximidades do local onde eclodiu desde que haja hospedeira, poucas vezes a disperso pelo vo excede a cem metros, entretanto uma fmea grvida pode voar at trs quilmetros em busca de local adequado para oviposio, quando no h recipientes apropriados nas proximidades. A disperso do Aedes aegypti a grandes distncias se d geralmente com resultado do transporte se ovos e larvas em recipientes. O Aedes aegypti quando em repouso encontrado nas habitaes, nos quartos de dormir, nos banheiros e na cozinha e, s ocasionalmente no peridomiclio, sendo as superfcies preferidas para o repouso so as paredes, moblias, peas de roupa penduradas e mosqueteiros. Quando o Aedes aegypti est infectado pelo vrus do dengue, pode haver transmisso transovariana destes, de maneira que, em varivel percentual, as fmeas filhas de um espcime portador nascem j infectadas.

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SEMANA: 20/07/09 24/07/09 HORA/SEMANA: 20 horas 6.2 Dinoderus minutus 6.2.1 A ESPCIE Dinoderus minutus 6.2.1.1 Taxonomia Dinoderus minutus uma espcie de besouro do gnero Dinoderus sp, Sub-Famlia Dinoderinae, Famlia Bostrichidae e Ordem Coleoptera (BINDA e JOLY, 1991; MYERS et al., 2005). 2.6.2. Morfologia A larva de D. minutus branca com cabea hipognata parcialmente esclerotizada e profundamente retrada; corpo escarabeiforme em forma de C possui comprimento de 4 mm e largura do protrax de 1,0 mm. As antenas so 3-segmentadas (transversal alongado e curto); pernas protorcicas; abdmen com nove segmentos visveis com franja de cerdas laterais (COSTA et al., 1988). A declividade apical uma das regies que apresenta maior variabilidade nos Bostrichidae, podendo sua superfcie ser totalmente lisa, sem pontuao, ou fortemente pontuada como na espcie D. minutus (BINDA e JOLY, 1991). Existem caractersticas entre besouros de mesma famlia que os diferenciam entre si. Na espcie D. minutus, os pelos so curtos e raros na regio frontal ao passo que em Dinoderus ocellaris so longos e densos (HICKIN, 1975). A broca D. minutus diferencia-se dos demais insetos da famlia Bostrichidae, pelas duas suaves depresses arredondadas no dorso do pronoto, nas extremidades prximas aos litros (SILVA e FARONI, 1994 citados por SARLO, 2000). Spilman (1982) relata que D. minutus uma espcie de besouro cosmopolita, que se adapta com facilidade em diferentes regies do mundo, comum em estoques de bambu e tambm de alimentos secos. ( SILVA, A. A. L. e FARONI, L. R. DA. Prostephanus truncatus (Horn) (Coleoptera:Bostrichidae): Uma nova ameaa aos cereais armazenados. Revista Brasileira de Armazenamento, v. 1/2, n. 18/19, p.28-32, 1994. 15). A espcie D. minutus ocasionalmente tem 11 antenmeros e usualmente deveria ter 10, sendo relativamente difcil diferenci-la da espcie D. brevis que similar.

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6.2.2 OCORRNCIA E HOSPEDEIROS A espcie D. minutus encontrada na China e na maioria dos pases Sul Asiticos, onde existem ou ocorrem trs geraes na China e trs a quatro geraes nos pases Sul Asiticos por ano (HAOJIE et al., 1996). Tambm segundo Hickin (1975), as espcies minutus, brevis e ocellaris so de origem asitica e de grande importncia econmica. Porm, segundo SILVA e FARONI (1994) citados por Sarlo (2000), D. minutus endmico da frica. Outros autores citam que este inseto ocorre em outras partes do mundo, como algumas cidades dos Estados Unidos (SPILMAN, 1982) e na Venezuela (BINDA e JOLY, 1991). No Brasil, segundo SARLO (2000), existem diferentes espcies de bambu que podem ser atacados pela broca D. minutus sendo poucos os trabalhos a respeito da resistncia natural dessas espcies a estes agentes. MONTE (1943) encontrou este inseto em Santos-SP atacando bambus e cereais. OLIVEIRA et al. (2002), evidenciam a importncia desta broca no pas devido ao clima favorvel ao seu desenvolvimento. A infestao por D. minutus, se caracteriza pela presena de p fino resultante do material infestado. No bambu, o ataque se inicia 24 horas aps o corte dos colmos. Os insetos adultos perfuram estes colmos no sentido longitudinal a alguma fratura (PLANK, 1948 citado por SARLO, 2000). A broca D. minutus, abre galeria para ovoposio e logo aps a fecha com o prprio p da madeira. As larvas recm-eclodidas alimentam-se da madeira escavando galerias paralelas aos vasos causando danos irreparveis ao material. (SINGH e BHANDARI, 1988 citados por SARLO, 2000). De acordo com estes autores, D. minutus se reproduz durante todo o ano perfazendo quatro geraes anuais. Porm, para MONTE (1943), sua reproduo contnua, perfazendo geralmente sete geraes anuais. Os besouros Dinoderus spp, especialmente o D. minutus, so encontrados em bambus, artigos de vime e tambm em estruturas de subsolos, onde o elevadoteor de umidade permite seu desenvolvimento (RICHARDSON, 1978). Entretanto, PLANK(1948) citado por SARLO (2000), afirma que alm do bambu e outras culturas armazenadas, a espcie D. minutus, tambm chamada de broca do bambu, infesta vrias espcies de madeiras secas estocadas. HICKIN (1975) considera que D. minutus uma peste somente de bambu e embora as larvas sejam encontradas em madeiras de vrias espcies e algum tempo depois em outros materiais, elas podem ter se originado do bambu.

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A baixa durabilidade natural de algumas espcies de bambu, especialmente aquelas que so muito ricas em amido, facilitadora do ataque por D. minutus. O tratamento adequado deve ser administrado para evitar a perda do referido material em questo de um ano (HICKIN, 1975). Na Venezuela, a espcie D. minutus alm de atacar bambu (Bambusa vulgaris), tambm ataca farinha de trigo (Triticum aestivum), cacau (Theobroma cacao), gros de milho (Zea mays), arroz beneficiado (Oryza sativa) e gros armazenados causando danos considerveis (BINDA e JOLY, 1991). Na Indonsia, dois anos de observao de campo sobre este besouro nas cidades de Bogor, Sukabumi e proximidades, revelaram que o mesmo no encontrado somente no bambu, mas tambm na madeira. Alm do bambu e da madeira, este inseto tambm foi capaz de sobreviver na mandioca seca que contm carboidratos. O teste de criao deste besouro sobre vrios tipos de bambu, em laboratrio, revelou que o mesmo satisfatoriamente capaz de sobreviver e se reproduzir em ambiente de laboratrio (NOERDJITO, 2003). Na ndia, os insetos do gnero Dinoderus so considerados, segundo RICHARDS e DAVIES (1984), muito prejudiciais no somente ao bambu, mas tambm s madeiras. Entre varias espcies de insetos que atacam a madeira, D. minutus se destaca por atacar madeiras estocadas gerando grandes prejuzos, sobretudo em portos (ALBERT, 1992). 6.2.3 CICLO DE VIDA Os ovos de D. minutus so individualmente armazenados em galerias pelos adultos e eclodem em 5-8 dias. As larvas perfuram a madeira longitudinalmente e levam 40 dias (6 semanas) para desenvolverem-se. A pupao ocorre no casulo que a fase terminal do tnel larval. Assim, um novo besouro recm desenvolvido pode voar e explorar outras partes do mesmo bambu (HAOJIE et al., 2003). Segundo PLANK (1948) citado por SARLO (2000), o ciclo de vida do D. minutus pode ser resumido como a seguir: O perodo de ovoposio de cerca de 41 dias e o tempo mdio de vida de 110 dias podendo ocorrer variao entre fmeas (79 dias) e machos (128 dias). Os ovos possuem colorao branca, superfcie rugosa e formato alongado. A incubao tem um perodo mdio entre cinco e seis dias e a fmea produz, em mdia, cinco ovos por dia. O desenvolvimento larval desse inseto constitudo de quatro instares e ocorre no perodo aproximado de 42 dias (seis semanas), com alimentao pequena no incio, tornando-se mais voraz medida que as larvas atingem os ltimos instares. A pupao ocorre dentro da cmara preparada pela larva ao concluir SUPERVISOR: ORIENTADOR:

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sua minerao na madeira. O perodo pr-pupal inicia-se 24 horas antes da ltima ecdise (mudana peridica da pele da larva). A pupa possui cor amarelo-clara, cujo perodo de pupao , em mdia, de quatro dias. O perodo da fase de ovo a adulto de, aproximadamente, 52 dias (7 semanas e 3 dias). Os adultos possuem o corpo cilndrico endurecido e hbito crepuscular sendo observados mais ativos em condies de baixa luminosidade, sendo normalmente observados voando nos finais de tarde. Fatores como a luminosidade e a temperatura so crticos na questo da atividade de vo dos adultos, porm a temperatura exerce influncia em menor escala. 6.2.4 A INFLUCIA DO FOTOPERODO Considerando que D. minutus uma espcie de hbito crepuscular (PLANK, 1948 citado por SARLO, 2000), o movimento dos adultos pode estar relacionado com a intensidade luminosa das fases de luas cheia e nova, visto que as luminosidades da lua em noites de lua cheia e nova so, respectivamente, 0,5 Lux e 0,0 Lux (FONSECA, 1976 citado por SARLO, 2000). No entanto, WILLIANS e SINGH (1951) citados por SARLO (2000) encontraram uma diferena significativa de apenas 2% entre estas luminosidades. Segundo estes autores, a lua cheia age desorientando o inseto, pois ocorrem alteraes em sua fisiologia decorrentes da intensidade luminosa desse perodo, fazendo-os procurar abrigo. Talvez a luz artificial adotada para este trabalho tambm influencie de alguma maneira, mas no foram encontrados estudos a respeito. O sistema de Fotoperodo controlado foi determinado em funo do perodo de sol dirio de 12 horas e simulando a estocagem das lminas com incidncia de luz.

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SEMANA: 27/07/09 31/07/09 HORA/SEMANA: 20 horas 6.3 Zabrotes subfasciatus 6.3.1 IDENTIFICAO outro caruncho do feijo que tambm no ataca outros gros armazenados. O inseto adulto mede 1,8 a 2,5 mm de comprimento e 1,2 a 1,8 mm de largura. Tem, portanto, um corpo oval, volumoso, convexo, de colorao escura, exceo feita base das antenas e pice dos tarsos. Suas antenas so compridas e sobrepassam a metade do comprimento do corpo. A fmea sempre maior que o macho, tambm de cor escura, com quatro manchas creme nos litros. O caruncho Zabrotes subfasciatus (Boheman) (Coleoptera:Bruchidae) considerado uma das principais pragas do feijo armazenado; distribui-se nas Amricas Central e do Sul, frica, na regio Mediterrnea e na ndia. Seus danos so decorrentes da penetrao e alimentao das larvas no interior dos gros, provocando perda de peso, reduo do valor nutritivo e do grau de higiene do produto, pela presena de excrementos, ovos e insetos. Alm disso, o poder germinativo das sementes pode ser reduzido ou totalmente perdido (TOLEDO & MARCOS FILHO, 1977; GALLO et al., 1988). O controle qumico tem sido eficaz no controle dos carunchos, porm, sua utilizao dificultada pelo custo dos produtos e por problemas de toxicidade decorrentes da utilizao dos inseticidas. Para substituir o tratamento qumico, pequenos produtores tm utilizado vrias prticas, como: mistura dos gros de feijo com areia, cal, cinza de madeira, resduos de trilha da colheita (munha), terra de formigueiro, pimenta-do-reino ou leos (GUTIERREZ & SCHOONHOVEN 1981; DON-PEDRO, 1989). 6.3.2 MULTIPLICAO Embora a sua biologia seja semelhante do Acanthoscelides obtectus, a fmea que ovoposita cerca de 36 ovos, faz aderi-los fortemente aos gros, atravs de uma secreo pegajosa que expele e que endurece rapidamente em contato com o ar. A fmea oviposita diretamente nas sementes aps a deiscncia das vagens ou pode infestar as sementes ainda dentro das mesmas, utilizando-se de perfuraes realizadas por outros insetos (CREDLAND & DENDY, 1992). Ao contrrio da maioria dos bruqudeos, as fmeas necessitam do contato com a semente para estimular a ovognese (PIMBERT & PIERRE, 1983; PIMBERT 1985a, c). Aps a ecloso, a larva perfura o tegumento da semente e completa o seu desenvolvimento consumindo, apenas, o contedo de uma semente (SOUTHGATE, 1979; CREDLAND & DENDY, 1992). Em armazenamento, os adultos podem produzir muitas geraes, sem se alimentarem (JOHNSON, 1989). SUPERVISOR: ORIENTADOR:

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Os prejuzos na ps-colheita traduzem-se em uma considervel reduo de peso, diminuio da qualidade nutricional, declnio do poder germinativo das sementes, depreciao comercial devido presena de insetos adultos ou imaturos, fragmentos e excrementos. A estes prejuzos somam-se os danos indiretos, pelo favorecimento da entrada de caros e microrganismos, principalmente fungos, que contribuem para o aquecimento dos gros (HOHMANN & CARVALHO, 1989).

6.3.3 UMIDADE RELATIVA DEFINE DURAO DO CICLO O ciclo biolgico dura cerca de 25 dias a 32,5 C e 70% de U.R.. J a 20 C o ciclo aumenta para 100 dias. Os adultos tambm so de vida curta, 10 a 12 dias em mdia. Nas zonas produtoras de feijo das regies tropicais e subtropicais da Amrica Latina, uma praga primria de grande importncia econmica.

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SEMANA: 03/08/09 07/08/09 HORA/SEMANA: 20 horas 7.0 EXPERIMENTO 01 7.0 Abertura de colnias de Dinoderus minutus 7.1.1Material Necessrio Pote de embalagem PET, capacidade 500 mL; Pina metlica, 20 x cm; Borracha (Liga) sinttica, 15 x cm; Tesoura com ponta curva, 22 x cm; Etiqueta 4 x 2 cm; EPI: luvas descartveis de procedimento no cirrgico; EPI: mscara cirrgica descartvel

7.1.2 Material de pesquisa Bambu contaminado (Bambusa vulgaris); Dinoderus minutus. 7.2 Procedimento experimental 1. Selecionar os bambus com evidncia de contaminao; 2. Cortar cada bambu onde se verificar frestas onde possivelmente existem D. minutus; 3. Fazer uma contagem de aproximadamente 10 insetos e colocar no recipiente; 4. Para formar as colnias, cortar os bambus com o auxlio da tesoura de tamanhos semelhantes, cerca de 8,50 cm, e presos com liga sinttica em forma de pequenas talhas, com o numero aproximado de 15 pedaos de bambu; 5. Uma vez formadass as talhas, colocar junto dos insetos recolhidos no recipiente; 6. Tampar os recipente e selar com a data e quantidade aproximada de insetos; 7. Perfurar as tampas das embalagens PET de 1mm de dimetro para facilitar a entrada de oxignio necessrio ao desenvolvimento da colnia;

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8. Colocar as colnias em Estufas de BOD (Demanda Biolgica de Oxignio) ajustada ao ciclo vital dos D. minutus com o fotoperodo invertido e a temperatura ambiente, para se ter um controle do andamento da cultura. Observaes Foram abertos um total de 50 colnias de D. minutus, as quais tiveram uma observao semanal do desenvolvimento. Foram notrias oscilaes de temperatura, que variaram de 24C a 27C nos perodos diurno (fotoperodo noturno) e que por sua vez refletiram uma resposta negativa para o crescimento de algumas colnias, bem como a morte de alguns insetos devido a queda de temperatura. Problemas eltricos advindos do fotoperodo podem ter resultado na queda do crescimento das colnias e na morte de alguns insetos j que o D. minutus se desenvolve melhor em locais de baixa umidade e de preferncia com pouca incidncia de luz. Para tanto, foi necessrio ter um controle do nmero de D. minutus vivos em cada colnia para saber se estava havendo reproduo na colnia. A contagem foi realizada semanalmente onde todos os insetos mortos eram retirados e colocados em placas de petri para realizar a biometria. O controle de mortalidade foi feito em um livro especfico. A partir da apurados os dados que podem ser conferidos na tabela 01.

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SEMANA: 10/08/09 14/08/09 HORA/SEMANA: 20 horas 8.0 EXPERIMENTO 02 8.1 Abertura de colnia de Zabotes subfasciatus 8.1.1 Material Necessrio 8.1.1.1 Outros Pina metlica 20 x cm; Pote de embalagem PET; Peneira metlica para anlise com abertura de 4,76mm; Bacia de pltico comum 3 L; Etiqueta 2,5 x 1,0 cm; EPI:Luvas descartveis de procedimento no cirrgico; Mscara mscara cirrgica descartvel

8.1.1.2 Material de pesquisa Feijo comum; Caruncho do feijo ( Zabrotes subfasciatus) 8.2 Procedimento experimental 1. Separar os recipeintes e em cada recipente colocar uma poro de feijo equivalente a 3,00 cm da altura de cada recipiente; 2. Recolher com o auxlio da pina, para evitar contaminao,os carunchos j existentes em outras colnias e colocar cerca de 150 insetos em recipientes plticos com a poro de feijo; 3. Etiquetar cada recipiente com a data de abertura da clonia e armazenados em prateleira; 4. Aguardar um prazo de 40 a uma temperatura de 27Cdias aps a abertura para observar a ecloso dos ovos germinados durante esse perodo; 5. Aps a ecloso limpar essas colnias a fim de reabrir novas colnias para ecloso de novos ovos.

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8.3 Observaes Durante o perodo de oviposio dos Z. subfasciatus foram realizados alguns controles tais como: - Teperatura ambiente 26C a 27C; - Tempo de ecloso: 40 a 41 dias aps a abertura das colnias. Aps a germinao dos Z. subfasciatus esperou-se a ecloso dos ovos. Quando os ovos eclodiram as colnias foram limpadas com a finalidade de deixar apenas o feijo contaminado com os ovos para posterior ecloso e foram reabertas novas colnias realizando-se o mesmo procedimento experimental a fim de aumentar a produo dos insetos para posteriormente realizar a tcnica de macerao com uso de solventes para extarir dos insetos o objeto de pesquisa: os feromnios. Verificou-se durante a limpeza das colnias que grande parte dos insetos foram retirados mortos devido ao tempo de vida dos mesmos que na fase adulta varia de 10 a 12 dias. Essa perda relativa de insetos no causa grandes alteraes no andamento da pesquisa desde que a germinao dos ovos tenha ocorrido de forma significativa.

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SEMANA: 17/08/09 21/08/09 HORA/SEMANA: 20 horas 9.0 EXPERIMENTO 03 9.1 Teste larvicida com Aedes Aegypti 9.1.1 Bases Centficas e Tecnolgicas

9.1.2 Material Necessrio 9.1.2.1 Vidraria Balo Volumtrico de 50mL, com rolha de PTFE; Proveta graduada de 50mL ,diviso 1mL; Ponteira para pipetador automatico de 1mL; Balo Volumtrico de 250 mL; Bquer Forma Baixa de 250 mL.

9.1.2.2 Equipamentos Pipetador automtico (calibrao 1mL); Ponteira para pipetador automtico de 1mL; Aparelho de Banho ultrassnico . 9.1.2.3 Reagentes Extrato de Aracatium pinha (casca) 0,0250mg; Extrato de Ficole (semente) 0,0250mg; Extrato de Umbuzeirinho (caule) 0,0250mg; Extrato de Pinho branco (folha) 0,0250mg; Extrato de Pinho branco (semente) 0,0250mg; Extrato de Pinho manso (caule) 0,0250mg; Extrato de Umbuzeiro (raiz) 0,0250mg; Extrato de Capsaicina (10ppm) 0,0250mg.DMSO (dimetilsulfxido) (CH3)2SO P.A.

9.2 Procedimento experimental Preparo da soluo de capsaicina 10ppm

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Com o auxlio da pipeta graduada, medir 10 mL do extrato capsaicina e transferir para um becker; Adicionar gua destilada e transferir para um balo volumtrico de 100 mL (lavar o becker com gua destilada por trs vezes para que no haver perda do extrato pesado); Completar o volume do balo com gua destilada, tampar o balo e homogeneizar bem; Separar o volume do balo em quatro beckeres com alquotas equivalente 25 mL de soluo; A cada Bcker adicionar 20 pulpas de Aedes aegypti para teste; Armazenar durante um perodo de 48h para haver resultado do extrato sobre as larvas; Preparo de soluo com os extratos de plantas a base de DMSO Selecionar os extratos. equivalente a 0,0250 mg); Adicionar aos extratos 1mL de DMSO ; Submeter os extratos que apresentaream material em suspenso ao banho de ultrasom, por 20 a 30 minutos; Transferir os extratos bales volumtricos de 50mL; Completar o volume com gua destilada; Homogeneizar bem; Separar o volume de 50mL em beckeres com alquotas equivalentes a da soluo preparada com os extratos; Transferir para cada Bcker, 20 pulpas de Aedes aegypti para teste; Armazenar durante 48h e posteriormente fazer contagem para o controle da mortalidade.

Observaes O teste larvicida com o Aedes aegypti realizado com extratos de plantas diferenciados para a posterior anlise de resultados que possibilitam a produo de um larvicida capaz de deter esse vetor. Os extratos escolhidos j foram utilizados em outros testes com a obteno de melhores resultados. J a capsaicina, substncia presente na pimenta que caracteriza seu sabor picante, foi um teste primrio nessa concentrao e os resultados obtidos no foram satisftorios. A contagem das larvas era realizada a hora 0 (incio do experimento), 24 e 48h. Atravs dos resultados pode-se verificar que as fraes de DMSO foram capazes de causar 17,9% de mortalidade, enquanto as fraes de capsaicina causaram 0% de mortalidade larval. As fraes de DMSO mais SUPERVISOR: ORIENTADOR:

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ativas apresentaram o seguinte percentual 70,0%, 10,0%, e 7,50%. As fraes que apresentaram, no mnimo, taxa de 50% de mortalidade foram consideradas bioativas e as fraes que apresentaram taxas inferiores a 50% de mortalidade foram consideradas inativas. Testes esto em andamento a fim de se determinar as concentraes letais dos extratos que obtiveram resultados satisfatrios. Existem milhares de plantas com atividades inseticidas, mas necessrio estudos mais detalhados a fim de comprovar o seu potencial como um meio simples e seguro de controle de Aedes aegypti por sua ao larvicida. Na tebela 02 esto relacionados os resultados obtidos com cada extrato utilizado no teste.

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SEMANA: 24/08/09 28/08/09 HORA/SEMANA: 20 horas 10. PRATICA 04 10.1 Diluio para teste de repelncia com Aedes aegypti SUBSTNCIA: Geranilacetato 10.1.1 Materiais Necessrios 10.1.2 Vidrarias Pipeta graduada de 10 mL ( 1 unidade); Tubos de ensaio com tampa rosqueada, 18x180 mm vidro neutro de 30 mL (5 unidades); Proveta graduada 10 mL, diviso de 1 mL( 2 unidades); Becker, forma baixa, de 250 mL (1 unidade). 10.1.3 Reagentes gua destilada; Geranilacetato P.A.. 10.1.4 Equipamentos Pipetador automtico, calibrao de 500 L (1 unidade); Ponteira para pipetador de 1mL (2 unidades); Estufa de secagem 1000 x 964 x 1050 mm ( aquecida a 100C). 10.2 Procedimento experimental 1. Inicialmente separar os tubos de ensaio, lavar com gua destilada e lcool e em seguida levar a estufa por 5 minutos; 2. Realizar a assepsia da pipeta graduada, provetas e do Becker com lcool; 3. Medir 1 mL de geranilacetato em uma proveta e transferiu-se para o 1 tubo de ensaio; 4. Adicionar 9 mL de etanol ao tubo de ensaio e homogeneizar; 5. Transferir 1 mL dessa soluo para o 2 tubo de ensaio; 6. Adicionar 1 mL de etanol ao 2 tubo de ensaio e homogeneizar; 7. Repetir o procedimento para os outros tubos de ensaio; SUPERVISOR: ORIENTADOR:

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8. Armazenar os tubos de ensaio devidamente tampados posteriores. Observaes

para testes

As solues apresentaram concentraes de 10%; 1%; 0,1%; 0,01% e 0,001%; O armazenamento foi feito sob refrigerao a 18C; Os testes de repelncia so realizados com o Aedes aegypti numa temperatura de 24C e umidade relativa de 66%.

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11.0 ANEXOS

ANEXO 01 TABELA 01

DINODERUS MINUTUS Balano global de D. Minutus mortos por colnia* POTE N DE MORTOS POTE N DE MORTOS 01 07 26 09 02 09 27 07 03 04 28 13 04 02 29 06 05 06 30 10 06 04 31 03 07 09 32 08 08 10 33 06 09 05 34 06 10 08 35 09 11 07 36 12 12 13 37 01 13 20 38 04 14 10 39 00 15 04 40 06 16 13 41 03 17 08 42 03 18 07 43 04 19 09 44 05 20 08 45 04 21 09 46 05 22 11 47 05 23 08 48 10 24 02 49 04 25 11 Balano realizado 60 dias aps a abertura das colnias

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ANEXO 02 TABELA 02 TESTES COM LARVAS DO Aedes aegypti [ ] Mortalidade Hora 100ppm
24h X 48 h 1- 5/10 7/10 2- 9/10 9/10 24h X 48 h 1-0/10 1/10 2-0/10 1/10 24h X 48 h 1-0/10 1/10 2-1/10 1/10

Amostra
Aracatium pinha (Casca) Ficole (semente)

Data
7-8/03/2009

15:30h

100ppm

15:30h

7-8/03/2009

Umbuzeirinho (caule)

15:30h
7-8/03/2009

100ppm

Pinho branco (folha)

100ppm

24h X 48 h 1-0/10 1/10 2-1/10 1/10

15:30h

7-8/03/2009

Pinho manso (Caule)

100ppm

24h X 48 h 1-0/10 0/10 2-0/10 1/10

7-8/03/2009

15:30h

Pinho branco (Raiz) Umbuzeiro (Raiz)

100ppm

24h X 48 h 1-0/10 0/10 2-0/10 0/10 24h X 48 h 1-1/10 2/10 2-0/10 1/10

15:30h
7-8/03/2009

100ppm

15:30h

7-8/03/2009

Capsaicina

10ppm

24h X 1-0/25 2-0/25 3-0/25 4-0/25

48 h 0/25 0/25 0/25 0/25

15:30h

7-8/03/2009

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