IV. CUESTIONARIO PRELABORATORIO. Nota: Resulvalo ANTES de ingresar al laboratorio 1. Qu organismos realizan gluclisis? En organismos vivos, eucariotas y procariotas.

2. Cul es la utilidad de la fermentacin en condiciones anaerbicas? El proceso de fermentacin es anaerbico ya que se produce en ausencia de oxgeno; ello significa que el aceptor final de los electrones del NADH producido en la glucolisis no es el oxgeno, sino un compuesto orgnico que se reducir para poder reoxidar el NADH a NAD+. 3. Qu tipo de clulas son las levaduras? Las levaduras se han definido como hongos microscpicos, unicelulares, la mayora se multiplican por gemacin y algunas por escisin 4. Cul es la importancia de la fermentacin para las fibras musculares en caso de un ejercicio intenso? Ya que la fermentacin mejora el contenido nutritivo de los alimentos por la biosntesis de las vitaminas, los aminocidos esenciales y las protenas, al volver ms digeribles las protenas y las fibras, proporcionar ms micronutrientes y degradar los factores antinutritivos. Por lo tanto es una reaccin enzimtica que produce acido lctico anaerbico a partir de acido piruvico en las clulas musculares (Fermentacin Lctica). En los msculos en excesiva actividad y con una respiracin inadecuada, se produce fermentacin, el NADH se oxida y el cido pirvico se reduce. Las molculas de NAD+ producidas en esta reaccin se reciclan en la secuencia glucoltica. Sin este reciclado, la gluclisis no puede seguir adelante. Esta acumulacin de cido lctico da como resultado dolor y fatiga muscular. Por ejemplo, se produce en las clulas musculares de los vertebrados durante ejercicios intensos, como en el caso de una carrera. Cuando corremos rpido, aumentamos la frecuencia respiratoria, incrementando de este modo el suministro de oxgeno, pero incluso este incremento puede no ser suficiente para satisfacer los requerimientos inmediatos de las clulas musculares. Sin embargo, las clulas pueden continuar trabajando y acumular lo que se conoce como deuda de oxgeno. La gluclisis contina, utilizando la glucosa liberada por el glucgeno almacenado en el msculo, pero el cido pirvico resultante no entra en la va aerbica de la respiracin sino que se convierte en cido lctico que, a medida que se acumula, disminuye el pH del msculo y reduce la capacidad de las fibras musculares para contraerse, produciendo la sensacin de fatiga muscular. El cido lctico se difunde en la sangre y es llevado al hgado. Posteriormente, cuando el oxgeno es ms abundante (como resultado de la inspiracin y espiracin profunda que siguen al ejercicio intenso) y se reduce la demanda de ATP, el cido lctico se resintetiza en cido pirvico y nuevamente en glucosa o glucgeno. La funcin de la conversin de acido lctico a acido pirvico es que se usa el NADH y regenera el NAD+, sin el cual la gluclisis no podra continuar.

V. PROCEDIMIENTO. 1. Coloque un beacker con agua y caliente a 37C. 2. Numere 3 tubos de de hemlisis, y agregue 2.1. Tubo 1: 2 ml de agua destilada y de cucharadita de levadura 2.2. Tubo 2: 2 ml de glucosa y de cucharadita de levadura 2.3. Tubo 3: 2 ml de almidn y de cucharadita de levadura 3. Abra el grifo con la menor presin posible (un hilo de agua) y llene los 3 tubos de hemlisis hasta que se forme la convexidad creada por la tensin superficial del agua (menisco). Tenga mucho cuidado de no permitir que se formen corrientes fuertes que introduzcan oxgeno al sistema o rebalses que permitan la prdida del contenido del tubo de hemlisis. 4. Con el mismo grado de corriente de agua del grifo, llene los tubos de ensayo tomando en cuenta las recomendaciones del llenado con agua de los tubos de hemlisis. 5. Siempre con el agua del grifo corriendo escasamente y cayendo sobre el tubo de ensayo, introduzca rpidamente los tubos de hemlisis invertidos dentro de los tubos de ensayo para formar la Campana de Durham. 6. Observe inmediatamente si existe burbuja de aire en el tubo de hemlisis (el cual se encuentra invertido dentro del tubo de ensayo), si este es el caso, repita el procedimiento. Si no existe aire, contine con el siguiente paso. 7. Coloque los tubos dentro del beacker durante 30 minutos, teniendo cuidado de que la temperatura sea contante (a 37C). 8. Observe los cambios en los tubos a lo largo del proceso de incubacin, y anote cada 5 minutos la variacin observada, utilice un signo negativo (-) al no observar cambio y un signo positivo (+) cuando s hay. 9. Analice e intrprete los resultados obtenidos y concluya.

TIEMPO (MINUTOS) SUSTRATO TUBO AGUA 1 DESTILADA TUBO 2 TUBO 3 GLUCOSA 0 5 + 10 15 + 20 + 25 + 30 CONCLUSION

ALMIDON

VII. CUESTIONARIO POST LABORATORIO. De acuerdo a los resultados obtenidos en el laboratorio, responda las siguientes preguntas: 1. Cul fue el papel de la levadura en el proceso de fermentacin? Llevar a cabo el proceso de fermentacin alcohlica en ausencia de oxigeno las levaduras procesan los hidratos de carbono que en este caso, son la glucosa y el almidn como sustrato. 2. En qu sitio celular ocurri el metabolismo de los carbohidratos? Citoplasma 3. Qu carbohidratos fueron los utilizados como sustrato? Glucosa y Almidn 4. Cmo afecta el metabolismo de los carbohidratos si se permite la entrada de aire en la campana de Durham durante la inversin de los tubos de hemlisis dentro de los tubos de ensayo? Las levaduras no usaran los azucares por la va fermentativa sino que por la va oxidativa para obtener mucha ms energa. 5. Haga un resumen de la secuencia enzimtica del proceso catablico: La gluclisis es la primera etapa de la fermentacin, al igual que la respiracin celular, y al igual que sta necesita de enzimas para su completo funcionamiento. A pesar de la complejidad de los procesos bioqumicos una forma esquemtica de la reaccin qumica de la fermentacin alcohlica puede describirse como una gliclisis de tal forma que puede verse como participa inicialmente una molcula de hexosa:[19] C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP 2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP + 25.5 kcal Se puede ver que la fermentacin alcohlica es desde el punto de vista energtico una exotrmica, se libera una cierta cantidad de energa. La fermentacin alcohlica produce gran cantidad de CO2. Este CO2. Un clculo realizado sobre la reaccin qumica muestra que el etanol resultante es casi un 51% del peso, los rendimientos obtenidos en la industria alcanzan el 7%.[20] Se puede ver igualmente que la presencia de fsforo (en forma de fosfatos es importante para la evolucin del proceso de fermentacin. La fermentacin alcohlica se produce por regla general antes que la fermentacin malolctica, aunque existen procesos de fermentacin especficos en los que ambas fermentaciones tienen lugar al mismo tiempo. La presencia de azcares asimilables superiores a una concentracin superior produce invariablemente la formacin de alcohol etlico en proceso de crecimiento de levadura incluso en presencia de exceso de oxgeno (aerbico), este es el denominado efecto Crabtree, este efecto es tenido en cuenta a la hora de estudiar y tratar de modificar la produccin de etanol durante la fermentacin.

En ms detalle durante la fermentacin etlica en el interior de las levaduras, la va de la gluclisis es idntica a la producida en el eritrocito (que suelen ser las con la excepcin de que el piruvato se convierte finalmente en etanol. En primer lugar el piruvato se descarboxila mediante la accin de la piruvato descarboxilasa para dar como producto final acetaldehdo liberando por ello dixido de carbono (CO2) a partir de iones del hidrgeno (H+) y electrones del NADH.[24] Tras esta operacin el NADH sintetizado en la reaccin bioqumica catalizada por el GADHP se vuelve a oxidar por el alcohol deshidrogenasa, regenerando NAD+ para la continuacin de la gluclisis y sintetizando al mismo tiempo etanol. Se debe considerar que el etanol va aumentando de concentracin durante el proceso de fermentacin y debido a que es un compuesto txico, cuando su concentracin alcanza aproximadamente un 12% de volumen las levaduras tienden a morir. Esta es una de las razones fundamentales por las que las bebidas alcohlicas (no destiladas) no alcanzan valores superiores a los 20% de concentracin de etanol. 6. Explique s existe alguna(s) diferencia(s) entre fermentacin y glucolisis, y por qu. Fermentacin Clulas anaerbicas El piruvato forma en el citosol, y le es transformado a etanol y CO2 o en lactato Producen menos ATP. El aceptor final de los electrones es una molcula orgnica.

Glucolisis Se produce en la mayora de las clulas vivas, (eucariotas y procariotas) Tiene lugar en el citoplasma celular. Consiste en una serie de 10 reacciones cada una, catalizada por una enzima determinada. Producen mas energa. Transforma una molcula de glucosa en dos molculas de 3 carbonos en acido piruvico. Aceptor final de electrones es el Oxigeno. 7. Por qu razn es necesario mantener la temperatura del beacker a 37C? Las levaduras son seres mes filos (tienen una temperatura optima de crecimiento 15 a 35) puesto que al mantener los 37C, su fermentacin es ms rpida. Se debe mantener el beacker a dicha temperatura porque la glucolisis que se realiza en la clula se encuentra en temperatura corporal la cual es de 37C.

8. PROBLEMA: Hace algunos aos un tren de carga volc y derram un cargamento de granos. Como el grano ya no serva, se enterr en el terrapln. Aunque no hay escasez de otros alimentos en el lugar, la poblacin local de osos se ha convertido en una molestia porque continuamente desentierra los granos. Las levaduras son comunes en el suelo. Qu crees que le ocurri a los granos que induce a los osos a desenterrarlos, y qu relacin tiene su comportamiento con la evolucin cultural humana? Al enterrar los granos se produjo una fermentacin, ya que en esa rea existan levaduras, y como el alcohol produce un olor particular puede ser la razn por la que a los osos les llama la atencin al igual que nuestros antepasados que se guiaban por el olor para encontrar su comida. DISCUSIN DE RESULTADOS En un Becker colocamos una cierta cantidad de agua y la calentamos a 37C, verificamos con un termmetro para no superar dicha cantidad ya que las levaduras son seres mes filos (tienen una temperatura optima de crecimiento 15 a 35) puesto que al mantener los 37C, su fermentacin es ms rpida. Se debe mantener el beacker a dicha temperatura porque la glucolisis que se realiza en la clula se encuentra en temperatura corporal la cual es de 37C. Luego Se enumero 3 tubos de ensayo lo cual se hizo una preparacin temporal de agua destilada, glucosa y almidn donde se le agrego un cuarto de cucharadita de levadura respectivamente. Se le agrego un hilo de agua y se lleno los 3 tubos de hemolisis hasta que se formo y teniendo cuidado que no se nos formara una burbuja de oxgenos. Luego se coloco dentro del beacker durante 30 minutos mientras la temperatura era constate a 37C. Se observo cada 5 minutos la variacin observada, donde el signo negativo se usaba al no observar ningn cambio y signo positivo cuando existe cambio. En el sustrato de
agua destilada se empez y no se observo ningn cambio, mientras que en el minuto 5,15,20,25 se observaron cambios. Luego en la glucosa al comienzo y a los 15 minutos no se observaron ningn cambio, mientras que en el transcurso de los dems tiempos si se observaron cambios. Y al finalizar en el almidn al comienzo nuevamente no se observaron cambios, ni a los 20, 25 y 30 minutos mientras que en los 5, 10,15 si se observaron cambios.

CONCLUSIONES
Funcin de la Glucolisis: Generar energa (ATP), Suministrar monmeros para las reacciones biocintica, por ejemplo: formacin de ac grasos de cadena larga , o Ser precursor de polmeros con capacidad de ser almacenados tanto en individuos vegetales, animales y procariontes En ausencia de oxgeno, el cido pirvico puede seguir vas anaerbicas (sin presencia de O2 como aceptor). El cido pirvico puede convertirse en etanol (alcohol etlico) o en uno de varios cidos orgnicos diferentes, de los cuales el cido lctico es el ms comn. El producto de reaccin depende del tipo de clula. El proceso a travs del cual la energa de la glucosa u otras molculas combustibles es capturada por la clula en la forma de ATP se conoce con el nombre de respiracin celular. Se pueden distinguir dos tipos de respiracin en la materia viviente: anaerbica y aerbica.

VIII. REFERENCIAS. Audesirk, T. , G. Audesirk, & B. Byers. (2008). Biologa la vida en la Tierra. 8. ed.: Pearson Educacin, Mxico. 1024 pp. Bruce, A. (1998). Biologa Molecular de la clula. Espaa: Felicia. Becker, W., L. Kleinsmith & J. Hardin. (2007). El Mundo de la Clula. 6. ed.:Pearson Educacin, Madrid. Cooper, G. (2004). La Clula. 2. ed.: Marbn S.L., Madrid. Karp, G. (2004). Biologa Celular y Molecular. Mc Graw-Hill Interamericana, Mxico. Lodish, H., A. Berk, L. Zipursky, P. Matsudarira, D. Baltimore & J. Darrell.

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS, CUM UNIDAD DIDCTICA BIOLOGIA MOLECULAR, PRIMER AO DRA. JUDITH RODAS

METABOLISMO ANAERBICO GLUCOLISIS Y FERMENTACIN.

NOMBRE: MANUEL DE JESS DEL VALLE RAMREZ NO. DE CARNE: 201119404 SALN: 207 GUATEMALA, 16 DE ABRIL DE 2012