20.04.

2012

EGE NVERSTES FEN FAKLTES BYOLOJ BLM TEMEL VE ENDSTRYEL MKROBYOLOJ

UYGULAMALI MKROBYOLOJ LABORATUVARI

KONU: Kozmetiklerin Mikrobiyolojik Test Metotlar TS 4765 Hazrlayanlar: 11082961 B.idem KURTOLU 11072654 Nermin ZDA Danman: Ara. Gr. Dr. Ali KOYT Ara. Gr.Caner Vural
ZMR-BORNOVA
1

erik
KOZMETK RNLERN TANIMI Kozmetik rnlerin Etkileri Kozmetik rnlerin Mikrobiyolojisi Formlasyon Kozmetik rnlerdeki Zararl Maddeler Kozmetik rnler Ve zellikleri Kozmetiklerin Snflandrlmas Kozmetik rnlerde Yaplan Testler Trkiyede Kozmetik Sektr Uygulama
2

KOZMETK RNLERN TANIMI

Kozmetik cosmeticus kelimesi dzenli anlamna gelmektedir.

ekil 1

Kozmetik ; dnya kuruluundan bu yana insan yaamnda nemli bir yer tutmutur.

Kozmetikler, insan vcudunun deiik ksmlarna salar, kllar, dudak, epidema, ekil 2 d genital organlar, az ve diler, trnaklar, mukozaya srlerek, ovularak veya ekil 3 pskrtlerek uygulanmak zere hazrlanmtr.

Kozmetikler bu ksmlarn;

temizlenmesi,
koku vermesi, korunmas, geici olarak grnnn ve vcut kllarnn deitirilmesi , dzeltilmesi, giderilmesi amac ile kullanlan preparatlardr.
ekil 4

ekil 5

Kozmetik rnlerin ve kozmetik rn hammaddelerinin;

KOZMETK RNLERN MKROBYOLOJS

mikrobiyolojik adan uygunluu,

tketicilerin sal rnlerin tketiciler tarafndan gvenli kullanm

preparatn stabilitesi
kalite uygunluu ynnden nem tar.

KOZMETKLERN SINIFLANDIRILMASI
Kremler, Banyo ve du rnleri Emlsiyonlar, Jeller Losyonlar Yalar Fondtenler Rimel Gz far ampuanlar
ekil 6
7

Yz pudralar , hijyenik pudralar Yz losyonlar, yz maskeleri Parfmler Kolonyalar ekil 7 Kl dkcler Az ve di bakm rnleri Sa boyalar ve aclar, ekil 8 Koku veren rnler, Sa bakm rnleri Trnak bakm ve ss iin kullanlan rnler vb.
ekil 9
8

Tm kozmetik rnler mikroorganizma kontaminasyonu riski altndadr. Kozmetik rnlerdeki tipik kontaminantlar ;

Enterobacter spp.

Klebsiella spp. Serratia spp.

Pseudomonas spp. ve dier nemli mikroorganizmalardr.

9

Kozmetik rnler ara sra preparat bozabilen mikroorganizmalarla kontamine olsa da, asl byk tehlike, sal tehdit eden patojenlerin bulunmasdr.

10

nsan sal asndan tehlike dourabilecei iin kozmetikler;

Staphylococcus aureus

Esherichia coli
Salmonella sp. Candida albicans

Clostridium sp.
Pseudomonas aureginosa gibi mikroorganizmalar iermemelidir.

11

http://www.cdc.gov/HAI/im ages/staph.jpg

http://lisando.com/images/ecoli .jpg

http://www.istanbul.edu.tr/iu ha/wpcontent/uploads/2011/08/Pse udomonas-aeruginosa.jpg

http://www.bioquell.com/in http://www.foodterface/assets/images/conte bacteria.net/foodbacterian/u nt/NAP1_027_Clostridium_d http://www.kotusozluk.com/img/ ploadfile/200912/16/2311199 ifficile_27143602_1.jpg 2011/02/salmonella_14146.jpg 481.jpg

Kozmetik rnlerde Bulunabilen Hastalk Yapc Mikroorganizmalar

MKROORGANZMALAR HASTALIK POTANSYELLER

Gram-pozitif bakteriler

Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes

ltihap, sepsis, toksik ok sendromu ltihap, sepsis

Clostridium tetani
Clostridium perfringens

Tetanoz
Gazl gangren

Gram-negatif bakteriler

Pseudomonas aeruginosa Klebsiella spp. Enterobacter spp.

ltihap,sepsis, otit, konjunktivit Konjunktivit ltihap,sistit,enterit

13

 rnlerin kullanclar iin salk zararna yol amas mikroorganizma remesinin miktarna ve tipine baldr.

Kozmetik reticisi firmalar, nemli miktarda paralar harcayarak mikroorganizma kontaminasyonu riskini azaltarak rn kalitesini koruma abas iindedirler.
14

Kozmetik rnlerin mikroorganizma kontaminasyonu sonucu; rn kokusu, rengi,

ekil 10

viskozitesi ,
performansnda istenmeyen deiiklikler meydana gelebilir.
ekil 11
15

Bu deiikliklerin nedeni; Mikroorganizmalarn rn bileenleri zerinde yapt bozunma ve rndeki mikroorganizma kaynakl metabolitlerdir.

Eer mikroorganizmalarn remeleri iin uygun ortam mevcutsa, deiiklikler hzl olabilir.
16

MODERN KOZMETK RN FORMLASYONLARI

Uygun mineraller reme faktrleri Uygun Ortam asitlii Nem gibi faktrler mikroorganizma remesi iin uygun ortam salamaktadrlar.
17

Mikroorganizmalar iin besin tekil eden maddeler geleneksel kozmetik rnlerde fazlaca bulunurlar. Bunlarn iinde;
Karbonhidratlar eker alkolleri Ya asitleri

Proteinler

18

 Ya alkolleri

Steroidler
Vitaminler Aminoasitler Glikozidler Bitkisel hammaddeler bulunur.
19

KOZMETKLERDEK ZARARLI MADDELER ALKOL: Kozmetiklerde zc olarak

kullanlr. Az alkalama sularnda bulunur. Az, dil ve boaz kanserleriyle ilikisi saptanmtr.

BTAN: Yanc zellii ile narkotik etkisi

olabilir ya da oksijeni yok ederek nefes darlna yol aabilir. Deodorant ve spreylerde bulunur.

ekil 13

20

 FORMALDEHD: Kansere yol at kantlanmtr. ampuan ve trnak bakm rnlerinde bulunur.

ekil 14

ALFA HDROKS AST: Cildi tahri eden bir asittir. Kalc cilt problemlerine sebep olabilir. Cilt bakm maskelerinde bulunur.

ekil 15

21

 DOKSN: nsanolunun icat ettii, bilinen en gl ve etkili zehirli maddelerden biridir. ampuan, kpk, di macununda bulunur.
BENTONTE: Cildin gzeneklerini tkayarak przsz grnmesini salarken, cildin nefes almasn engeller, toksinleri iinde hapseder. Fondotnlerde bulunur.
ekil 17
22

ekil 16

 ZOPROPL ALKOL: Bu madde sayesinde kanserojen hcreler ve parazitler organlara girme imkan bulurlar. Parazitlerin yumurtlamasn byk oranda hzlandrr ve bu sayede kanserojen tmrler hzla byr. PARAFN: Kansere yol at bilinen bir maddedir. Ty dkc kremler ve gz kalemlerinde bulunurlar.
23

Bu bilgilerden yola karak kozmetik rnler iin u yorumlar yaplabilir; Gerekmedike kullanlmamaldr. Kullanma ihtiyac hekim veya uzman tavsiyesine dayandrlmaldr.
ekil 18

Kullanldnda en azndan belirli denetim standartlarna uygun olanlardan ve ok dk miktarlarda kullanlmaldr.

Bu tr rnler en ksa zamanda ykanarak vcuttan uzaklatrlmaldr. ekil 19

24

MKROORGANZMA REMESNE DUYARLI OLAN KOZMETK RNLER

KREM VE LOSYONLAR Bu maddeler, mikroorganizmalar iin yksek besin kayna olmalarnn yan sra koruyucu maddeleri inaktive ederek kontaminasyon kayna olarak davranrlar.

ekil 20

ekil 21

25

 Gliserin; Hem farmastik hem de kozmetik rnlerde sklkla kullanlan ve suda bulunan mikroorganizmalar tarafndan metabolize edilebilen bir maddedir.
rnein; Klebsiella trleri, gliserin ieren krem ve losyonlarda, iyi korunmam rnlerde sklkla gaz oluturur.
26

zellikle bebek losyonlarnda bulunan Klebsiella trlerinin bebeklerde bebeklerde gz kzarmasna neden olabildii ve el kremlerinde bulunan Klebsiella trlerinden kaynaklanan septisemi vakalar bildirilmitir.

27

ampuanlar ve Tra Kremleri

ampuanlarda, gzle grlr bir bozulma olmakszn ok eitli bakterilerin remesi sz konusu olabilirken, kaygan keltiler, ince zarlar, renk deiimi, koku oluumu ve kprme zelliklerinin kayb gibi durumlar da gzlenmitir.
ekil 22 ekil 23

zellikler ampuanlar, ierdikleri sudan dolay eitli gram-negatif bakterilerle kontaminasyona duyarldr.

29

Tra kremlerinde ampuanlara gre daha yksek oranda mikroorganizma kontaminasyonuna maruz kalm rnek grlr. En sk grlen mikroorganizma kontaminasyon kayna Staphylococcus trleridir.

ekil 24

ekil25

30

 Pudralar Bilindii gibi pudra ieriini oluturan talk, tpk dier yksek adsorban zellii olan tozlar gibi evresel kontaminantlar ve mikroorganizmalar tutabilmektedir.

ekil 26

ekil 27

31

 Bu tip rnlerin sklkla bebekler zerine, bazen de iltihapl veya hasar grm cilt zerine uyguland gz nne alnrsa, mikrobiyolojik kalite kontrolne dikkat edilmesi gerektii aka ortaya kar.
Pudra formundaki rnlerin bozulmas en ok nemli koullarda oluan gzle grlr kf remesine baldr.
32

 Clostridium perfringens ve Clostridium tetani ile kontamine olmu talk pudras kullanmna balanan ciddi cilt infeksiyonlar rapor edilmitir. Kontaminasyon oran yksek rnler kullancda cilt infeksiyonu riskini arttrmaktadr.

33

 Dudak boyalar
Dudak boylar genellikle koruyucu iermelerine ramen, bazlarnda kf remesi grlmektedir. Kflerin dudak boyalarnn zerinde remesi genellikle kullanm srasnda solunum yoluyla nemlenmesinden sonra gereklemektedir.
34

 Gz Farlar ve Rimeller

Gz farlarnda ve rimellerde, gz infeksiyonlarna neden olduu bilinen Pseudomonas aeruginosa saptanmtr.

ekil 28

Ciddi gz infeksiyonlar, gz blgesinde kontamine olmu kozmetik rnlerin kullanmna balanmaktadr.

35

 P.aeruginosa'nn korneal lsere neden olduu rapor edilmitir.Kontamine olmu rimelin aplikatr ile kazara epitelin izilmesi infeksiyon ile sonlanmaktadr.
ekil 29

Kontamine olmu gz ve gz evresinde uygulanan kozmetik rnler kronik gz infeksiyonuna neden olabilmektedir.
ekil 30
36

 Di macunlar ve Az sular

Di macunlar ve az sular antimikrobiyal ajan iermelerine ramen, nemli miktarda bakteri ve mantar ierebilmektedirler.

37

 P.aeruginosa, S.aureus ve Candida trleri en sk rastlanan mikroorganizma kontaminantlardr.

Yaplan bir almada di macunlarnn az sularna gre daha sk kontamine olduu gzlenmitir.

ekil 31

ekil 32

38

 Di Fralar

Di fralar etkin mekanik temizliin esas unsurlardr. eitli almalarda, di fralarnn mikroorganizma kontaminasyonlar rapor edilmitir.

ekil 33

39

 Di fralarnn zellikle immnolojik olarak basklanm veya organ transplantasyonlu hastalarda, gingival lezyonlar yolu ile patojenik mikroorganizmalarn tanmasndaki nemine dikkat ekilmitir.

40

 Sabunlar Sabunlar byk miktarlarda mikroorganizma kontaminasyonu ierebilmektedirler.

En sk izole edilen mikroorganizma P.

aeruginosa'dr.

zellikle ellerden ve yzden devaml bir mikroorganizma geii olabilir.

41

 Sv sabunlarda da mikroorganizma kontaminasyonu riskine kar mikrobiyolojik yk tespiti yaplmaldr. Sv sabunlarla yaplan mevcut testlerde zellikle P. aeruginosa ve S. aureus'ta baklmaktadr.

ekil 34

ekil 35

42

 Gz Kalemleri ve Dudak Kalemleri

ekil 36

Kalemlerin i ksmlar gzde ve azda mukoz dolu ile temas etmektedir.

Bununla birlikte, yalnzca kalem ileri deil kalemin klf olan ahap ksm da kontamine olabilmektedir.

ekil 37

ekil 38

43

 Bu rnlerde kfler ve gram negatif bakteriler ile kontaminasyon sk grlmektedir. Eer rnde, korneada tehlike yaratacak bir mikroorganizma kontaminasyonu mevcutsa, gz, infeksiyonla zarar grebilir. Pseudomonas aeruginosa ile kontamine olmu birok kozmetik rn rnei vardr.
44

 Kozmetik rn ve ilemler iki ekilde snflandrlr: A) Uygulan yerlerine gre B) Temel etki alanlarna gre

45

1.Deriye Uygulanan Kozmetik Preparatlar

Yumuatc kremler Yumuatc losyonlar Temizleyici kremler

Temizleyici losyonlar
El krem ve losyonlar Temel kremler Gnlk kremler
46

Hormon kremleri Sterat kremleri Yz maskeleri Cildin rengini aan ve ciltteki lekeleri gideren preparatlar Gne nlarna kar koruyucu ve bronzlamay salayc preparatlar Terlemeye mani olan (antiperspiran) preparatlar Ter kokularn nleyen preparatlar Tra preparatlar
47

2)Tozlar ve Pigmentli Preparatlar

Yz pudralar Allk Dudak Boyalar Trnak Cilalar Gze uygulanan kozmetik preparatlar
48

3)Saa Uygulanan Kozmetik Preparatlar Saa ekil veren preparatlar Sa dzletiren preparatlar ampuanlar Sa boyalar Sa rengini aan preparatlar Salara parlaklk verici ve sa eklini koruyucu preparatlar Salar besleyici preparatlar
49

4)Dilere ve Az Boluuna Uygulanan Kozmetik Preparatlar

Di patlar ve dier preparat ekilleri

Takm dilerin temizlenmesi iin kullanlan preparatlar

Az sular
50

5)Dier Kozmetik Preparatlar Ayaa uygulanan kozmetik preparatlar Bebek preparatlar Banyo preparatlar

Vcut pudralar
Depilatuvarlar
51

B) Temel etki alanlarna gre kozmetik rnler: Tabaka oluturan maddeler

Keratinli maddeler Sebatrop maddeler Endirekt dermatrop maddeler

Direkt dermatrop maddeler

52

3.KOZMETK RN RETMNN AAMALARI

Personel Binalar Ekipman Prosedrler ve prosesler retim

53

KOZMETK RNLERDE YAPILAN TESTLER

Dayankllk testleri

Kullanl testleri
Fizyolojik testler

Kalite kontrol testleri

54

Dayankllk Testleri Hazrlanan rnn kullanlma ve depo edilme sresince, istenilen zelliini koruyup koruyamayacann kontroldr.

55

Kullanl testleri
rnn istenilen amaca eriip erimediini, ounluun isteklerine cevap verecek zellikte olup olmadn, ayn tr rnler arasndaki durumunu saptamak amac ile yaplr.

56

Fizyolojik testler
ki grup olarak incelenebilir. 1) Tbbi etkisi olan preparatlarn istenilen zelliklerinin klinik testler le saptanmas, 2) Preparatn herhangi bir biimde zararl olup olmad, fizyolojik bir etki yapp yapmadnn incelendii toksisite testleridir.
57

 Kalite kontrol testleri Preparatn istenilen standartlara uyup uymad, imalatn uygun artlarda yaplp yaplmadnn kontrol edildii ve imalat serileri arasndaki farklar ortaya koyan testlerdir.
58

TRKYEDE KOZMETK SEKTR

Trkiyede 1972 ylndaki koullarla kozmetik rn retmeye balayan ve parmakla saylabilecek dzeyde az firmayla yola kan baz kozmetik sanayi kurulular rnn kalitesi dahil teslimata kadar pek ok zorluklar yaamlardr. 1975 ylnda ayn sanayi cilt rnlerinin retimine baladklarnda ilemler eski problemlerden daha uzak ve daha deneyim kazanlm bir hzla ve ekiplerle devam etmitir. 1995lerde retimini son teknolojik koullara uygun olarak yapmaya ynelik almalarla yrten bu sanayi kurulular, artk Trkiyenin btn kozmetik ihtiyalarn karlayacak kapasitededirler.
59

 Bugn Trkiye kozmetikte kullanlan gl ya, hlamur iei, defne yapra, bergamut, nane, limon, portakal, mandalin, turun gibi narenciye esas yalarn ihra eden bir lkedir.
Dier dnya lkeleri gibi tketim asndan ilk sralarda yer alan Trkiye Kozmetik Sanayi, 2000lerde bir ok yerli ve yabanc kurulularca hammadde retiminden balayarak her eit kozmetik rn reten dnya lkeleri arasna girmitir
60

Kozmetiklerin Mikrobiyolojik Test Metodlar

1-Aerobik Mezofilik Bakteri ve Mantar Saym 2-Patojen Mikroorganizmalarn Aratrlmas 2.1-Pseudomonas Aratrlmas

2.2-Escherichia Coli Aratrlmas 2.3-Salmonella Aratrlmas 2.4-Staphylococcus Aratrlmas 2.5-Anaerobik Bakteri Aratrlmas 2.6-Candida Albicans Aratrlmas

61

1-Aerobik Mezofilik Bakteri ve Mantar Saym

Kozmetiklerin Mikrobiyolojik Test Metodlar Cihaz ve Malzemeler Otoklav Etv Buzdolab +4 0C'de soutma yapabilen Hassas terazi 1 mg hassasiyetle tartm yapabilen pH Metre Koloni Sayc,Quebeck veya dijital gstergeli Su banyosu Balon Petri kutusu, TS 3401' e uygun olmal Genel laboratuar malzemeleri( pipet,mezr v.b.)
62

Aerobik Mezofilik Bakteri ve Mantar Saym Besiyerleri

1) Trypticase Soy Aar Besi Yeri Trypticase pepton Phythone pepton Sodyum Klorr Aar Trifenli Tetrazollum Klorr Damtk su 15.0g 5.0 g 5.0g 15.0g 0.5 g 1000.0 ml
63

 Besiyerlerinin Hazrlan
Standartta belirtilen kimyasal madde miktarlar damtk su ierisine ilave edilir. Kaynar su banyosu iinde eritilir.
PH=7.3 e ayarlanr. 121 oC ' de 15-18 dakika otoklavda sterilize edilir.

64

Sabouraud Desktroz Agar Besiyeri

Mycologicalpepton 10.0 g Dekstroz 40.0g Agar 15.0g Damtk su 1000.0g

65

Besiyerlerinin Hazrlan
Standartta belirtilen kimyasal madde miktarlar damtk su ierisine ilave edilir. Kaynar su iinde eritilir. PH=5.2 'ye ayarlanr. 121 oC 'de 15 dakika otoklavda sterilize edilir. Steril petri kutularna 15-20 ml olacak ekilde datlr.

66

LEM Bakteriyostatik ajan ihtiva etmeyen %30 dan daha az etanol ihtiva eden sv veya su ile hazrlanm sspansiyonlar ve tamamen suda eriyebilir kat ve bakteriyostatik ajan ihtiva etmeyen numune deneyleri

67

Toplam Bakteri Saym

Numuneden 10 g tartlr. erisinde 40 ml %0.1 'lik peptonlu su ieren ieye aktarlr. Bylece 1 /5 orannda sulandrlm bir zelti hazrlanm olur.

ie iindeki numune iyice karncaya kadar kuvvetle alkalanr.

68

 Hi beklenmeden be adet steril petri kutusuna 1er ml datlr. Eritilmi Trypticase Soy Agar besiyerleri petri kutularna dklerek homojenizasyon salanacak ekilde kartrlr, petri kutular katlancaya kadar beklenir. Petri kutular ters evrilerek 30-35 oC' lik etvde 24-48 saat bekletilir.
69

Mantar Saym
Daha nceden hazrlanm olan 1/5 orannda sulandrlm zeltiden 1 er ml miktarlarnda 5 adet Sabouroud Dekstroz Agar yzeyine aktarlr.
Steril bir cam baget yardm ile besiyerleri yzeyine yaylr.

Petri kutular 20-24 0C 'lik etvde en az 5 gn bekletilir.

70

 Deerlendirme
Bekletme sreleri sonunda reyen mikroorganizmalar saylr.
Toplam mikroorganizma says, 1 g veya 1 ml numunedeki bakteri ve mantar saymlarnn toplamdr. nhibitr maddeler ve bakteriyostatik ajanlar veya % 30 'dan daha fazla etanol ihtiva eden sv veya tamamen eriyebilir kat numune deneyleri Numuneden, 10 g tartlarak iinde 40 ml Capitol-1 bulunan steril ieye ilave edilir. ie iyice alkalanarak iindekiler emlsiyon haline getirilir.Bu ekilde 1/5 orannda sulandrlm zelti elde edilir.
71

SU LE KARIABLEN KATI NUMUNE DENEYLER

Deneyler %0.1'lik peptonlu su yerine %0.1 'lik poli-sorbat 80 ( Tween 80) kullanarak uygulanr.

72

Su le Karmayan Sv Numune Deneyler Kremler, losyonlar, merhemler gibi emlsiyon yapmaya yarayan bir maddenin en az miktar ile ( rnein poli-sorbatlar) emlsiyon haline getirilir.Gerekiyorsa 40 derece'de yi amayacak ekilde stlr ve mekanik olarak paralanr. Deneyde sulandr olacak TLP solusyonu kullanlr.TLP solusyonu, %5 poli-sorbatlar 80 %0,1 Lesitin %0.1 peptone ihtiva ederler.
73

2.PATOJEN MKROORGANZMALARIN ARATIRILMASI Pseudomonas Aratrlmas Cetrimide Besiyeri Kanl Agar Besiyerleri kullanlr

74

 Cetrimide Besiyeri
Jelatin Casein hyrolysate Potasyum Slfat Magnezyum Klorr Cetrimide Naildik acid Gliserin Damtk su 10.0 g 10.0 g 10.0 g 1.4 g 0.2 g 15.0 g 10.0 g 1000.0 g
75

 Cetrimide Besiyeri Hazrlan

Standartta belirtilen kimyasal madde miktarlar damtk su ierisine ilave edilir.

PH 7.1 ' e ayarlanr.

ekil 39

121 0 C'de 15 dakika otoklavda sterilize edilerek, steril petri kutularna datlr.
76

 Kanl agar besiyerleri Sr ekstresi Pepton Sodyum Klorr Aar Damtk su 6.0 g 10.0 g 5.0 g 20.0 g 1000.0 g
77

 Besiyerlerinin Hazrlan

Standartta belirtilen kimyasal madde miktarlar damtk su ierisine ilave edilir. pH 7 'e ayarlanr. 121 0 C'de 15 dakika otoklavda sterilize edilir. Besiyeri 45-48 0 C ye dtnde iine % 6 orannda steril artlarda alnan de fibrine koyun kan edilip kartrlr, steril petri kutularna 15-20 ml olacak ekilde datlr.
78

 Kanl agar besiyerleri Sr ekstresi Pepton Sodyum Klorr Aar Damtk su 6.0 g 10.0 g 5.0 g 20.0 g 1000.0 g

79

lem
Numuneden , 5 g alnarak %0.1 'lik peptonlu suda 1/5 orannda homojenize edilir.
Bu sspansiyondan 0.1 ml alnarak Cetrimide besiyerlerine ekim yaplr. 30-35 0 C'lik etvde 24 saat bekletilir.
80

Deerlendirme
Cetrimide besiyerlerinde reyen yuvarlak ve sincabi renkteki kolonilerin morfolojik zellikle tespit edilerek tehisi yaplr.

81

Escherichia coli Aratrlmas

Besiyerleri E.C Broth Eosin Methylene Blue (EMB) Agar

82

E.C Broth( buyyon) Besiyeri Triptoz 20.0 g Laktoz 5.0 g Bile Salts No.3 1.5 g Di-potasyum hidrojen fosfat 4.0 g Potasyum monohidrojen fosfat 1.5 g Sodyum Klorr 5.0 g Damtk su 1000.0 g
83

 E.C Broth Besiyeri Hazrlan

Standartta belirtilen kimyasal madde miktarlar damtk su ierine ilave edilir. PH 6.8' e ayarlanr. Tplere 10 ml olacak ekilde datlr. lerine Durham tpleri konur.

121 oC ' de 10 dakika otoklavda sterilize edilir.

84

Eosin Methylene Blue (EMB) Agar Besiyerleri Pepton 10.0 g Potasyum monohidrojen fosfat 2.0 g Sakkaroz 5.0 g Laktoz 10.0 g Aar 15.0 g Eosin yeili 0.4 g Metilen Mavisi 0.067 g Damtk su 1000.0 ml

85

 Eozin Metilen Blue Agar Hazrlan Standartta belirtilen kimyasal madde miktarlar damtk su ierisine ilave edilir. PH 7.4 ' e ayarlanr. 121 oC 15 dakika otovlavda sterilize edilir. Steril petri kutularna 15-20 ml olacak ekilde datlr.

86

lem Numuneden 1 g alnarak E.C Broth besiyerine ekim yaplr. Su banyosunda 44.5 oC ' de 24 saat bekletilir reyen mikroorganizmadan Eosin Methylene Blue (EMB) Agar besiyerine pasaj yaplr. 37 oC ' ye ayarlanm etvde 24 saat bekletilir.
87

Deerlendirme Eosin Methylene Blue (EMB) Agar' da madeni parlaklk vererek reyen kolonilerin morfolojik zellikleri tespit edilerek tehisi yaplr.

ekil 40

ekil41

88

Salmonella Aratrlmas

Deneyde Selenit-F ve SS (SalmonellaShigella) Agar besiyerleri kullanlr.

89

Selenit-F Besiyeri
Sodyum Selenit 4.0 g Pepton 5.0 g Laktoz 4.0 g Disodyum hidrojen fofat 12 H20 9.5 g Sodyum dihidrojen fosfat 2H2O 0.5 g Damtk su 1000.0 ml

90

Besiyerinin Hazrlan
Standartta belirtilen kimyasal madde miktar damtk su ierisine ilave edilir. PH 7.1 ' e ayarlanr. 100 0C 30 dakika kaynatlr. Steril tplere 15-20 ml olacak ekilde datlr.

91

SS( Salmonella-Shigenella) Agar Besiyeri Sr ekstresi 5.0 g Laktoz 10.0 g Pepton 5.0 g Bile salts No. 3 2.5 g Sodyum Sitrat 8.5 g Sodyum Bislfat 8.5 g Demir-3 Sitrat 1.0 g Aar 13.0 g Brillant yeili 0.33 mg Ntral krmzs 0.025 mg Damtk su 1000.0 ml
92

SS( Salmonella-Shigenella) Agar Hazrlan Standartta belirtilen kimyasal madde miktarlar damtk su ierisine ilave edilir. Su banyosu iinde kaynatlr.
pH 7.2+0.4 ayarlanr. Steril petri kutularna 15-20 ml olacak ekilde datlr
93

lem Numuneden 5 g Selenit-F besiyerine konur. 37 cC' ye ayarlanm etvde 8 saat bekletilir. Hazrlanan karmndan 0.1 ml alnarak SS agara pasaj yaplr. 37 oC' ye ayarlanm etvde 24 saat bekletilir.
94

Deerlendirme SS agar besiyerinde reyen, dzgn yzeyli ve ou kez kabark kolonilerin morfolojik zellikleri tespit edilerek, tehisi yaplr.

95

Staphylococcus Aratrlmas Medium-10 Agar Besiyerinde Maya ekstresi Tripton Laktoz Mannitol Sodyum Klorr Dipotasyum hidrojen fosfat Jelatin Agar Damtk su

3.0 g 10.0 g 2.0 g 10.0 g 75.0 g 5.0 g 30.0 g 15.0 g 1000.0 ml

96

Besiyerinin Hazrlan Standartta belirtilen kimyasal mallde miktarlar damtk su ierisine ilave edilir. PH 7.1 ' ayarlanr. 121 oC ' da 15 dakika otoklavda strerilize edilir. Steril petri kutularna 15-20 ml olacak ekilde datlr.
97

lem Numuneden 5 g tartlr. 1/5 orannda sulandrma yaplarak Medium 10 agar ve Kanl Agar besiyerine ekim yaplr. 37 0C ' ye ayarlanm etvde 24 saat bekletilir.
98

Deerlendirme Medium-10 besiyerinde portakal renkli ve Kanl Agar besiyerinde dz ve yuvarlak koloniler eklinde reyen mikroorganizmalarn morfolojik biyoimik zellikleri tespit edilerek tehis yaplr.
99

ANAEROBK BAKTER
ARATIRILMASI

Kullanlan besiyeri Sulfit Polimixin Sulfadiazin (SPS) Agar dr.

100

SULFT POLMXN SULFADAZN (SPS) ER

Tripton Maya ekstresi Demir( III ) slfat Sodyum slfit Sodyum tiyoglikolat Poli sorbat 80 (Tween 80 ) Sodyum slfadiazin Polimiksin B slfat Agar Damtk Su

15,0 g 10,0 g 0,5 g 0,5 g 0,1 g 0,06 g 0,12 g 0,01 g 15,0 g 1 L

101

SPS Hazrlan Standartta belirtilen kimyasal maddelerin belirtilen miktarlar damtk suda kartrlr ve kaynar su banyosunda eritilir.pH= 7,2 ye ayarlanr.5-6 ml olacak ekilde steril tplere datlr.121 0 C de 15 dakika otoklavda sterilize edilir.
102

lem basama; Numuneden 5 g tartlr 10 ml %0,1lik peptonlu su iinde 1/5 orannda iyice homojenize edilir 80 0 C lik su banyosunda 15 dakika tutulur. Vejetatif bakterilerin inhibisyonu ve sporlarn almas salanr. Aniden 45- 50 0 C ye soutulduktan sonra karmdan 0,1 ml alnarak SPS Agar besiyerine ekilir . Besiyeri 37 0 Cye ayarlanm etvde 24 saat bekletilir. 103

DEERLENDRME SPS agar besiyerinde reyen mikroorganizmalarn mikroskobik muayenesinde gram pozitif, ubuk eklinde reyen kolonilerin morfolojik ve biyoimik zellikleri tespit edilerek tespiti yaplr.
104

CANDDA ALBCANS ARATIRILMASI Kullanlan besiyeri Sabouraud Dekstroz Agar Besiyeridir. lem Basama; Numuneden 10 g tartlr. 40 ml %0,1lik peptonlu su iinde 1/5 orannda sulandrma yaplr. 0,1 ml alnarak Sabouroud Dekstroz besiyerine ekim yaplr. 25 0Clik etvde 48 saat ile 5 gn bekletilir.
105

Deerlendirme Deneyde, Sabauroud Dekstoroz Agarda reyen mikroorganizmalarn mikroskobisinde gram pozitif ve byk zeytin ekirdeine benzer ekilde grlen kolonilerin morfolojik zellikleri tespit edilerek, Candida albicans'n tehisi yaplr.
106

ekil 42

DNLEDNZ N TEEKKRLER

Kaynaklar

http://www.bilim.gen.tr/kategori.aspx?ID=7 http://tr.wikipedia.org/wiki/Kozmetik
http://www.abgs.gov.tr/tarama/tarama_files/01/sorular%20ve%20cevaplar _files.pdf

http://www.tobb.org.tr/Documents/yayinlar/kozmetik.pdf

KAYNAKA ekil 1 http://t2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQ2tcGCiaQ269ZFna3vHfPrEWMaeH ekil 2

http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSp07tlovYbms0aZE2alWBq2Tc9Fmkgkz1ZS2sij0JxemSHzhGN
ekil 3

http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcRrffm85A96JE86nBRXvF5ceHI9MzxY_Rjcg3pUKuu4Ccdg23m5m w ekil 4 detailsbyenda.blogspot.com ekil 5http://t2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcS_lk7a2jOwlRaVL_I5QPqDUmYPpcBUZS4JNrfnDavdwdxqmgH ekil 6

http://t1.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQH25rCDooRlPsZpNtSadqiEVZW78ImL6vphU48J8aHu3jd6Cdv8A
ekil 7 http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSvJJKgeHVzotBqtK-U6s24ZyNDO1rK9Gd5niKfgqUcrXs2AcRoxw ekil 8

http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcRwfxsVug21DcRwdTQ2Ay-77HvXGRkLrMq8lxWBH0cQcBfmbOJJ
ekil 9 http://t1.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcTC-fN4uAuIN7mffCIZsL-sfP8r8TTqvsTnsQ_LILr0xRov5UKSMg

ekil 10 http://www.food-bacteria.net/foodbacterian/uploadfile/200912/16/2311199481.jpg ekil 11

http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQ2Zshp7w7elvwdifgesAUJWFyhdEIFLz55E1U9nlH3DjoyPt47ug
ekil 12 http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSJxxpU8cg2EeZRyfiosFMqUIOk6PAMSNmwmgIFSzzpDzjw2P24R Q ekil 13 http://t2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSXSbzTfpFI-8d-BBzX7sZ_9FJoA9VieFt4v5kkiZbnuS9J88rY ekil 14 http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSnq3w6PWCPYU7xNEyaipwgqz2Ue6fd6iy9VKRSjuLqr2EFIEbw ekil 15 http://t1.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQH25rCDooRlPsZpNtSadqiEVZW78ImL6vphU48J8aHu3jd6Cdv8 A ekil 16 http://t2.gstatic.com/images

ekil 17
http://t2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQDJHm_kfGQTC7TGI8Op2JSuEkNwpLq8nP_uyoQ7Mu2TnyBYyg D

ekil 18 http://t2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcTVlKwfynqcjQet2EQ_qjDCkvBPWIwxGJr5YNPpT6APs0ZA9jg6 ekil 19 http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcTEsVZbMDWjgVcZIMwwIbUWziE-9TdJcAnTJulE0V4FxrtZH9yq

ekil 20
http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcRIEfu3UBUOhdRr8wrzpSz2pACF1ArpgrcqxtnTv1C9Lsz1goAb ekil 21 http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcRevH4VlUqm-I2_WvhAAhKCxTGS2s2sZ7jd0KOmxUve71P-_-J_

ekil 22
http://t1.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSG5dwJfYJYxv0tU411EFQavM5vOC3_E0duaou90j7k5pViJcg8lg ekil 23 http://t1.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcRsccnED87fdBNyQoCPjnqAs1kXwzJ9UwevCercJzQWART98Hfhg ekil 24 http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcTUzlsHWQRxEFsjaEjDB0XsHum9S8pdtCC61ZIHNLx8hSnMWoC6 TQ ekil 25http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQ7MoH3u2rH11ryDypm5M5LUuScqlQOO42X4iMrfYBr8k EhrDhTHA ekil 26 http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQLkBOLdzqk0QwPSmRFOSHffIqyxlL6xfXJwPjIDyOu24GCO2oY3

ekil 27 http://www.sonsayfa.com/resimler/18000/18305.jpg ekil 28 http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcReJlCkEOIW192JUS-jutnZ4roDkFOJEiCKCZh5dA9RVXqja3NekQ

ekil 29
http://t2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcR86V4ipzdCHOuZQSgbVcfX4AmMkjYuSnnJiOAtAFgLx05gBtgA ekil 30 http://t3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSco8S-uTXBsagbAkDN5VhvFTV7bFqapJbEaST_Hqisa_sYdw53ug

ekil 31
http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSr7WnY7R7I8U6dIuex35L7BkzWZEpwYpcIc4Mt-pIxcsevSwC3Yg ekil 32 http://t2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQOcImWdexle7nlggxeNV2JBhYK39dTSKRkiXHTe6WhYDqXAdM 0Aw ekil 33 http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcTMf-3hdpYG9CdC4FVxk48FmaAPLPgmNWz3-6VxIs5ElW1hgZGV ekil 34 http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSboJQ3KvdTBvSmuRXbkPk-IMI_QFOBc-oByLtRRBdp5ZJNSV4R ekil 35 http://dissaglik.com/wp-content/uploads/2012/01/di%C5%9F-macunu-3.jpg ekil 36 http://www.haber34.com/hr/ellere-sabun-da-degmeli-20658.jpg

ekil 37

ekhttp://t1.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcREpnqA0HSCMBHt4UJaZpEigrcptr3YhkdCLz5oQy3lY9lbrvYtl gil 38
buyutec.net ekil 39 http://t0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcTncXmbGVDbG1Hr2eYQWw1ZmW6YpfaJkFpbyWJQR2UDcJ3s0Pa ekil 40 class.fst.ohio-state.edu ekil 41

faculty.lacitycollege.edu
ekil 42 food-bacteria.net