Oilfield Microbiology

Caradan Chemicals International Inc.
Microbiologa en produccin de petrleo y gas.

Introduccin sobre microbiologa La microbiologa se dedica a las formas microscpicas de vida que se denominan micro-organismos .

Introduccin sobre microbiologa
Dentro de las 5 clases en que se dividen los micro-organismos tenemos :
Virus( ej de la polio), Bacterias, Hongos, Protozoarios(Entamoeba histolitica) y Algas(Anabaena).

Bacterias
Son micro-organismos de mayor inters en el contexto de la produccin de petrleo y gas. Las bacterias son organismos de 0.5 micrones y viven en colonias de millones de ellas. Existen miles de especies diferentes que se clasifican en gneros y familias.
Clasificacin de los tipos mas importantes de bacterias

COCUS (prural cocci), del griego kokkus, esfera. Son bacterias redondas o esfricas. Un grupo curvilneo de cocci forma los streptococus y un plano (aglomeracion)forman los staphilococus

VIBRIOS, son bacterias en forma de una coma alargada (espirales incompletas).

BACILLUS (prural bacilli), del latin bacilum bastoncito. Son bacterias en forma de bastones que se extienden unidos.
Clasificacion de los tipos mas importantes de bacterias

SPIRILUM(prural spirilla), del latn spirillum, espiral pequea. Son bacterias que tienen diferentes formas helicoidales

CLOSTRIDIUM (prural clostridia), del latin clostridium , busillo. Son bacterias en forma de pequeas agujas.
Tipos importantes de bacterias

Las principales bacterias en la produccion de petroleo y gas son las bacterias sulfato-reductoras, las ferrobacterias(galionella), las bacterias formadoras de mucilagos (biofilm)y sulfobacterias.
Ferrobacterias
Las ferrobacterias obtienen la energa necesaria para su sntesis a partir de la transformacin de las sales ferrosas en ferricas. Limo (slime): Estructura gelatinosa extracelular de baja densidad ptica utilizada como proteccin por otras bacterias.
Ferrobacterias
El mecanismo de reaccin de las ferrobacterias es :
4FeCO3 + O2 + 6H2O 4Fe(OH)3 +4CO2
Ferrobacterias
Este tipo de bacterias habitan en aguas que contengan iones o sales ferrosas. Las ferrobacterias pertenecen a diversas familias, especialmente a las Caubacteriaceae, Sidaracapsaceas y Crenonothriacae.
Electroqumica-Ferro bacterias
El hierro inico (Fe++) es el producto de la corrosin del acero. En el nodo se genera a partir de la reaccin: Fe (acero) - 2e- Fe++ (estado ferroso) (La otra media pila se forma en el ctodo por acumulacin de electrones y generacin del hidrogeno).
Electroquimica-Ferrobacterias
El hierro en estado reducido (valencia++) disuelto viaja en el agua y es vido de reaccionar con los gases disueltos (oxigeno, dixido de carbono o sulfuro de hidrogeno) siendo capturado en la reaccin con el oxigeno el hierro pasa a su estado oxidado (valencia +++) o frrico para formar compuestos insolubles: hidrxidos frricos.
Ferrobacterias
Ciertos tipos de bacterias pueden hacer el trabajo de oxidacin qumica, los gneros ms abundantes son: siderocapsa, gallionela y sphaerotillus (filamentosa). Las bacterias oxidantes del hierro son aerbicas pero pueden crecer en ambientes de hasta 0,5 ppm de oxigeno disuelto.
Ferrobacterias
Las masas de hidrxido frrico formado son capaces de taponar filtros y pozos inyectores. Tambin infectan torres deshidratadoras de glicol.
BACTERIAS EN CONCIERTO
Soldaduras, vlvulas, niples en lneas, filtros, tanques, unidades skimmer y dems partes de las facilidades donde se tendr como consecuencia alteraciones de flujo debido a acumulacin de material extracelular de origen bacteriano.
Control qumico de Ferrobacterias

Los biofilms, verdaderos nichos de infeccin bacteriana son difciles de atravesar con bactericidas, solamente una enrgica oxidacin puede tener penetracin de barrera con destruccin celular. Aunque no es usual en limpieza industrial de lneas, en estimulacin de pozos inyectores ha resultado efectivo el tratamiento cido clorhdrico + hipoclorito de sodio o dixido de cloro para remover sulfuros y material celular por oxidacin qumica del mismo.
Control de Ferrobacterias usando filtracion.
Control de ferrobacterias usando filtracion

Pruebas han mostrado que el up-flow roughing filtration tiene un role importante en las lineas de tratamiento pues se ha obtenido una alta efficiencia en romocion de bacterias y simultaneamente en remocion de hierro y manganeso.
Bacterias sulfato-reductoras
Bacterias sulfato reductoras

Las bacterias sulfatos reductoras(BSR) pertenecen a la familia de las espiralaceas y su genero mas importante es el Desulfo-vibrio, que tiene el poder de reducir los iones sulfato a sulfuro, son anaerobias y pueden crecer en agua dulce o en agua salada, en aguas residuales, en suelos y en aguas de fluidos de perforacion o completamiento de pozos de petroleo y gas.

Mesophilic which takes place optimally around 30-38 C or at ambient temperatures between 20-45 C where mesophiles are the primary microorganism present . Thermophilic which takes place optimally around 49-57 C at elevated temperatures up to 70 C where thermophiles are the primary microorganisms present Psychrophiles or cryophiles (adj. cryophilic) are extremophilic organisms that are capable of growth and reproduction in cold temperatures, ranging from 15C to +10C.
An optimal temperature for the existence of hyperthermophiles is above 80C (176F).

La T optima de crecimiento de las BSR esta entre 25 y 37C y un PH entre 6 y 8. Las bacterias BSR transforman los sulfatos(SO4=) en acido sulfihidrico (H2S), el cual se combina con sales ferrosas para formar sulfuros de hierro (FeS) . La principal caracteristica de las BSR es que causan corrosion a PH neutro y en ausencia virtual de O2.

Las bacterias BSR puede ser sessile es decir que se adhieren a una superficie donde crecen, esto hace dificil el conteo de colonias/ml, pues la muestras de agua que se colectan solo permiten contar las BSR plantonicas osea las que estan flotando en el agua.

Las BSR ademas de catalizar la reduccion de iones sulfato (SO4)= y propocionar una facil trayectoria metabolica, tiene dos efectos mas, el primero es estimular la reduccion de iones H+ y el segundo es la precipitacion de capas negras de FeS, que tienden a causar una tasa de corrosion acelerda que son catodicas, pero se caen ocasionando pitting.

Los mecanismos de la reaccion de corrosion de las BSR son: Reaccion anodica : Fe Fe+2 + 2e Reaccion catodica: 2H+ + 2e- H2 Depolarizacion : (SO4)= + 4H2 S= + 4H20 Producto de corrosion: Fe+2 +S= FeS 3Fe+2 + 6OH3Fe(OH)2

La ecuacion completa-balanceada : 4Fe++ + (SO4)= + 4H2O FeS +3Fe(OH)2 + 2OH-
EVALUACIN DE BIOCIDAS USADOS PARA CONTROL DE BSR PRESENTES EN PLANTAS DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES DEL PETRLEO
Tratamiento qumico (aplicacin de biocida) en una planta de tratamiento de aguas de formacin para la inyeccin en pozos. En el sistema donde circula esta agua, la cantidad de bacterias sulfato reductoras debe ser igual o menor a 100 BSR/mL para evitar el taponamiento de los yacimientos y prevenir la corrosin en lneas y equipos, y as asegurar la calidad del agua de inyeccin.
Se analiz fsica y qumicamente el agua que entra a la planta; adems se evaluaron 6 biocidas a base de glutaraldehdo y sales de amonio cuaternario en el laboratorio, cumpliendo todos con el criterio de calidad. En el estudio econmico, el producto GA-2, a la concentracin mnima inhibitoria de 300 ppm por 3 horas result ser el ms rentable para este tipo de agua de formacin. Probado en campo, el agua tratada cumpli con el criterio de calidad establecido para bacterias sulfato reductoras.
Generalmente se encuentran formando parte de un consorcio con bacterias productoras de slime o de exopolmeros, las cuales contribuyen a la generacin de la biopelicula. Una vez integrada, la biopelicula se convierte en un micronicho donde el metabolismo de los aerobios presentes ocasiona una disminucin importante del oxgeno, provocando un ambiente anxico, propicio para el desarrollo de las BSR .
La presencia de BSR en el sistema que originalmente era libre de H2S crea la posibilidad de agrietamiento por accin del sulfuro y aparicin de picaduras en el acero al carbono. La corrosin cida resulta en la formacin de sulfuro de hierro soluble que es un excelente material de taponamiento .
El glutaraldehdo es ampliamente usado para el control bacteriano en las aguas residuales de petrleo pero no es eficiente para penetrar la biopelcula donde se establecen las BSR y es frecuentemente mezclado con otros productos qumicos tales como sales de amonio cuaternario para aumentar su eficiencia en la penetracin.
Los biocidas no son universales en su poder de control de las BSR, por lo que cada biocida debe ser probado con la flora bacteriana presente en el sistema de estudio. Estos no controlan el crecimiento bacteriano instantneamente por lo que requieren un tiempo suficiente de contacto cuando se adicionan por carga.
El perodo de tratamiento puede estimarse a travs de pruebas de tiempo-dosis de control bacteriano. El consorcio bacteriano asociadas a las BSR le confiere a estas bacterias la capacidad para adaptarse a travs del desarrollo de pelculas resistentes a un biocida en particular despus de un prolongado perodo de tratamiento.
En muchos casos la mejor eleccin es la utilizacin de ms de un biocida para su uso durante la prueba. Un segundo biocida puede usarse cuando la primera eleccin disminuye su eficiencia frente al primer biocida.
El anlisis del agua que entra a la planta de tratamiento en estudio, evidenci la presencia de BSR en una cantidad mayor de 100 BSR/mL, lo cual, aunado al alto costo de tratamiento qumico con biocida, hace necesario la optimizacion de este tratamiento qumico en la planta.
Procedimiento Experimental Caracterizacin del agua Se procedi a efectuar la caracterizacin del agua que entra a la planta por un perodo de 10 das consecutivos, durante este periodo se evaluaron, siguiendo mtodos estndares los siguientes parmetros: pH, gravedad especfica, turbidez, conductividad , slidos disueltos totales, CaCO3,SO4=, Cl-, OH-, O2,Fe, y H2S.
Se calcul el ndice de estabilidad del carbonato de calcio a travs de las ecuaciones de Stiff y Davis para el agua de formacin en la entrada de la planta de tratamiento. Estas determinaciones se hicieron a las siguientes temperaturas: 34.4 (temperatura ambiente), 60, 80 y 100C, para simular las diferentes condiciones de temperatura de los pozos de inyeccin y se interpretaron los resultados.
Biocidas Se evaluaron 6 biocidas a base de glutaraldehdo y sales de amonio cuaternario. Para la determinacin de BSR en el laboratorio se sigui la Norma API RP-38 . En esta norma se especifica la preparacin del medio de cultivo para las BSR y la siembra de las mismas.
La siembra de BSR, se realiz siguiendo la tcnica de dilucin en serie. Esta consiste en tomar 1 mL de la muestra del agua a analizar con una microjeringa e inyectarla a una botella que contiene el medio de cultivo, invertir la botella varias veces para mezclar el inculo, se identifica la botella con el nmero 1. A partir de esta dilucin se prepararon diluciones seriadas hasta 10-7.
Una vez completadas todas las diluciones, se incubaron todas las botellas a 37 5C durante 4 semanas. Las botellas se examinaron a los 14 y 21 das, con el fin de detectar la presencia de BSR, las cuales se evidencian por el intenso color negro que toma el medio de cultivo. Cumplidos los 28 das, se estimaron los resultados segn la Tabla 2 y se expresaron en BSR/mL
El criterio tomado para la seleccin de la concentracin y tiempo mnimo inhibitorio fue el de cero (0) BSR planctnicas, ya que este tipo de bacterias son las que pueden evaluarse a nivel de laboratorio, por lo tanto, la capacidad de penetracin del biocida no se prueba hasta que el producto sea llevado a campo.
se calcul el costo del tratamiento qumico con cada biocida, con la finalidad de conocer cul era el ms econmico para aplicar en este tipo de agua. Una vez establecido el biocida ms econmico a su concentracin y tiempo mnimo inhibitorio, se prob el tratamiento en campo, el cual se monitore tres veces por semana durante 4 semanas, la determinacin de la cantidad de BSR ssiles y planctnicas en la entrada y salida general de la planta.
La determinacin de BSR ssiles se realiz siguiendo el procedimiento de Robbins y Costerton; el cual consiste en fijar una probeta de vidrio conteniendo de 6 a 8 cupones de acero estriles, a la entrada de la planta y otra a la salida de la planta. Se debe esterilizar los cupones con un bao de alcohol etlico e insertarlos dentro del contenedor de la probeta con pinzas estriles. Luego, se inserta la probeta en la lnea (la cual debe ser aislada por vlvulas y despresurizada) en el fondo inclinada, en la posicin 5 7 en punto, segn el reloj.
Equipo para la determinacin de BSR ssiles( 1 a 6 semanas de exposicion)
EVALUACIN DE BIOCIDAS USADOS PARA CONTROL DE BSR PRESENTES EN PLANTAS DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES DEL PETRLEO Despus del perodo de exposicin deseado (1-6 semanas), se remueve el cupn de la probeta rpida y cuidadosamente para no contaminar los cupones. Se coloca el cupn dentro de un medio de cultivo agar, igual al preparado para la determinacin de BSR planctnicas y se introduce en un ultrasonido por 10 min, para despegar las bacterias de las paredes del cupn. Una vez separadas las bacterias se contina el procedimiento por la tcnica de dilucin en serie descrita en la Norma API-RP 38 .
La seleccin del biocida ms adecuado se realiz a travs de pruebas en el laboratorio donde se evalu su efectividad a diferentes concentraciones y tiempo de contacto. Luego que se estableci cual era el biocida ms econmico a su concentracin y tiempo mnimo inhibitorio (cero) BSR fue probado directamente en campo en dicha planta de tratamiento.
EVALUACIN DE BIOCIDAS USADOS PARA CONTROL DE BSR PRESENTES EN PLANTAS DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES DEL PETRLEO RESULTADOS Y DISCUSIN
Biocidas En la Tabla 4 y 5, se muestra la concentracin y tiempo mnimo inhibitorio de los biocidas, para controlar las BSR en la planta de tratamiento. El criterio tomado para la seleccin de la dosis ptima del biocida a nivel de laboratorio fue cero (0) bacterias planctnicas (BSR/mL), por lo tanto, la capacidad de penetracin del biocida se prueba cuando el producto es llevado a campo.
EVALUACIN DE BIOCIDAS USADOS PARA CONTROL DE BSR PRESENTES EN PLANTAS DE TRATAMIENTO DE AGUAS DE RESIDUALES DEL PETRLEO
El tratamiento se aplic por carga durante 3 horas en campo, para evitar la adaptacin de las BSR al biocida. Todos los biocidas cumplieron con el criterio pre-establecido y por lo tanto, se seleccion el ms conveniente a travs del estudio econmico.
Costo del uso del biocida en la planta de tratamiento.
La medicin realizada evidenci la ausencia de BSR, despus de la aplicacin del biocida. A medida que transcurra el tiempo despus de la inyeccin, aumentaba el crecimiento de la poblacin bacteriana, pero ste no fue nunca mayor de 10-100 BSR/mL, despus de 7 das tanto para las BSR planctnicas como las ssiles, cumpliendo as la cantidad de BSR, para de calidad de agua para inyeccin menor a 1000 BSR/mL.
CONCLUSIONES
El agua que entra a la planta de tratamiento es incrustante con posibilidad de generar corrosin microbiolgica (MIC) por medio de las BSR. Todos los biocidas evaluados en el laboratorio cumplieron con el criterio de cero (0) bacterias planctnicas en el agua que entra a la planta de tratamiento pero a diferentes dosis de aplicacin
CONCLUSIONES
Del estudio econmico, el biocida GA-2 a base de glutaraldehdo, a la dosis de 300 ppm y con un tiempo de aplicacin de 3 horas, result ser el ms conveniente, por lo cual fue evaluado en la planta de tratamiento semanalmente. En cada evaluacin los valores obtenidos cumplieron en todo el perodo de muestreo en campo con el requerimiento de BSR en el agua de inyeccin.

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Clasificacin de los tipos mas importantes de bacterias

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Control qumico de Ferrobacterias

Control de Ferrobacterias usando filtracion.

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Bacterias sulfato reductoras

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An optimal temperature for the existence of hyperthermophiles is above 80C (176F).

Bacterias sulfato reductoras

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Costo del uso del biocida en la planta de tratamiento.

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